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1 대한수혈학회지 제 권제 호,, 1 연세대학교의과대학진단검사의학과학교실, BK 21 의과학연구사업단 1 : 김현옥 서울시서대문구신촌동 번지연세대학교의과대학진단검사의학교실

2 국산초저온냉동보관혈액백의평가 혈액보관을위한플라스틱백의도입은성분제제제조에획기적인발전을가져왔다 또한혈액제제를쉽게냉동하였다가이를해동하여사용할수있게됨에따라일부혈액제제를장기간보관할수있는길을제공하게되었다 신선동결혈장은 에서보관하고냉동적혈구는 에보관하고있으며 냉동혈액제제에대한이동시드라이아이스의온도는 까지떨어질수있다 최근연구에의하면제대혈뿐아니라골수이식을위한조혈모세포를보관하는온도는 이하의초저온으로서 초저온내구성이요구되는특수한플라스틱백이필요하다 보관백에대한파손의빈도는정확히보고된바는없으나약 까지발생하고있다는것이일반적인견해이며 의초저온에서는보관된조혈모세포에대한백파손의경험을최대 까지보고한기관도있다 특히장기간보관시에는백파손율이더높게보고되고있다 따라서이런초저온냉동보관혈액백인경우에는 또는 를가소제로사용한제 세대폴리염화비닐 백이아닌가소제를사용하지않은 백이나 또는 등을재질로사용하여 등에서최저온냉동보관백을제조판매하고있다 국내에서는처음으로메디루션 용인 한국 이 재질을사용하여제대혈보관용초저온냉동백을생산하였다 본연구는국내에서제조된백의초저온내구성을평가함으로서제대혈장기보관의가능성여부를판단하고자하였다 메디루션사의 백 개로실험을진행하였으며실험에사용한백의재질은 에타사제품과비교하여요약하였다 냉동보관방법에따라 군으로나누고백에말초혈액단핵구세포 를 Table 1.

3 대한수혈학회지 제 권제 호 Table 2. 넣어 냉동한후이를 년간질소탱크에보관한후백의파손여부와회수된세포수및생존율을비교하였다 실험방법은다음과같이시행하였다 군은초저온에서의백의내구성을외제백과비교하는실험으로국내에서제대혈보관용초저온냉동백으로시판되고있는 사에서생산한초저온냉동보관백 개와메디루션에서생산한백 개로구성하였다 보관세포는헌혈받은혈액에서 를분리한후이를 로단핵구세포를분리하였다 자가혈장 배지를 의비율로만든냉동보존액에동량의세포부유액을천천히혼합한후 사백과메디루션백에각각 씩나누어분주한후 냉동고에서 일간보관하고다음날 냉동질소탱크 에 년간보관하였다군은사용한냉동보존액에자가혈장과우태아혈청 을비교하기위한실험으로메디루션사백 개에는자가혈장 배지로만든냉동보존액을 또다른메디루션백 개에는우태아혈청과 배지를냉동보존액으로사용하여 군과같은방법으로냉동보존하였다군은세포의초기냉동방법에따른비교로서단핵세포를분리한후여기에동량의자가혈장 배지를첨가하고이를다시반으로나누어 개의백은 군과같은방법으로 에서하룻밤은보관한후 로옮기고 다른 개의백은 를이용하여단계적으로냉동한후이를 에보관하였다 군군군방법으로냉동된백은모두 액체질소탱크내의 에서보관하였으며 년뒤해동하여백의파손여부와회수된세포수및해동된세포의생존율 을측정하였다 해동후세포수는자동혈구측정기 를이용하여측정하였으며세포생존율은 염색후일정구간에염색된세포를 를이용하여세포수를세어서희석배수를곱하고계수한구간의 의용량으로나누어계산하였다 통계분석은 를시행하였으며값이 미만인경우통계학적으로유의한것으로해석하였다

4 국산초저온냉동보관혈액백의평가 사의백 개와메디루션사백 개를 년후에해동하여육안으로관찰하였을때백이파손되거나내용물이누출된것은없었다 외제백의성상과비교한 군에서는두제조회사의백간에회수된세포수와세포생존율의평균값에서통계적으로의의있는차이는관찰되지않았다 군의시험결과회수된세포수와세포생존율은 자가혈장을사용한경우가평균값이더높았으나통계적으로유의한차이는없었다 군결과도회수된세포수와세포생존율모두 를이용한경우에서평균값이조금높았으나이역시통계적으로의의있는차이는보이지않았다 메디루션사의 는국내에서생산된백으로 제대혈로부터분리한줄기세포를 의질소탱크에서장기간보관할수있도록 의재질로제조되었다 본냉동보관용백의특징은 에열접착및고주파접착이가능하고 가소제가들어가있지않으며 백의내부에세포가균일하게냉동되어질수있도록 차원적구조의백으로제조되었고 는외부로부터의오염을차단할수있는구조로되어있다 일반적으로혈액보관백에대한제품이출시되는경우중금속 및 등에대한검사를통해플라스틱재질의 를통과해야하는데 본제품은이런 규격을통과한제품이다 따라서본연구는실제사용자측면에서세포를이백에보관하여 년간 이하의초저온질소탱크에보관한후 에서해동시백의손상및내용물의 여부를관찰하는내구성평가실험으로진행되었다 대조군으로외제백 개와본연구에사용된국산백 개에대해동일한조건의단핵구세포를보관하였으며 보관한후 년이지난시점에서해동한결과 한건에서도백의파손이나내용물이누출된것은없었다 이미 는초저온에서다른재질보다도그내구성이뛰어나고파손율뿐만아니라외부의충격에서가장강한내구성을보이는것으로알려져있기때문에 본연구결과는예상했던결과와일치하였다 그러나본연구는 년간의보관후해동한결과로서조혈모세포및제대혈등의보관유효기간이 년이상연장되고있는시점에서 년이란보관기간이짧은면이있으며 년이상초저온이란환경에노출될경우플라스틱제제의내구성을완전히보장할수는없다 특히냉동보존백의생산기술이점점발달하고는있으나초저온보관시파손율이 까지보고되고있기때문에 조혈모세포및제대혈등의보관시백의파손가능성은항상고려되어야할것으로생각된다 본연구를진행하면서단순히백의초저온환경에서의내구성을관찰하는것외에동일한조건으로냉동보존액에대해자가혈장과우태아혈청을사용하는것을비교하였는데 통계적인차이는없었지만자가혈장이우태아혈청을

5 대한수혈학회지 제 권제 호 사용하는것보다는세포생존율의평균치가높게관찰되었다 우리가일반적으로실험실에서세포를보관할때는편리성때문에우태아혈청을사용하고있으나 환자에게사용하는경우동물에서유래한이종물질에대한부담과치료용으로사용할수있는 의제품을구하기가어려운단점이있다 따라서본연구결과제대혈이나조혈모세포등을보관하는경우무혈청배지를사용하기보다는자가혈장을첨가하여쓰는것이좀더안전하다는측면과세포생존율을높일수있는방법으로생각된다 최근국내에서세포치료에대한연구가활발히진행되고있으며 조혈모세포이식뿐아니라제대혈이식등이활성화되면서초저온냉동보관백의수요도증가하고있다 따라서장기간보관해야하는보관백의국산화는고가의초저온냉동백의사용을대체하여가격을절감시키는경제적인측면에서도바람직한일로생각된다 제대혈뿐아니라골수이식을위한조혈모세포를보관하는온도는 이하의초저온으로서 초저온내구성이요구되는특수한플라스틱백이필요하다 최근국내에서처음으로제대혈보관용초저온냉동백 메디루션 용인 한국 이생산되었기에초저온환경에서의내구성을평가하였다 사용한혈액은헌혈받은말초혈액에서단핵구세포를분리해실험하였다 제 군은메디루션사의백 개와 사의초저온냉동보관백 개에세포를분주한후 에서하루보관후질소탱크에 년간보관하였다군은메디루션사백 개에는냉동보존액에자가혈장을 다른메디루션사백 개에는우태 아혈청을첨가해 군과같은방법으로냉동보존하였다군은초기냉동방법을비교하는것으로서 개의메디루션백은 군과같은방법으로 다른 개의메디루션백은 를이용해단계적으로냉동한후질소탱크에보관하였다 위 군을 년간질소탱크에보관한후백의파손여부와회복된세포수및생존율을비교하였다 사의백 개와메디루션사백 개를 년후에해동하여육안으로관찰하였을때백이파손되거나내용물이누출된것은없었다 또한백의종류 냉동보존액조성및초기냉동방법에관계없이회수된세포수와세포생존율에서통계적으로의미있는차이는관찰되지않았다 메디루션사에서생산한냉동보관백은혈액보관시초저온환경에서최소 년간적합한내구성을지닌것으로판단되었다

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엠피씨리포트(060403) - 기업탐방보고서 - n 작성일 : 2010.09.29 발간일 : 2010.09.30 메디포스트 (078160) 실적턴어라운드, 줄기세포치료제상용화기대 N/R 주가 (9/29) 33,850 원 Analyst 노경철 ( 바이오 / 제약 / 화학 ) 02)3779-3138 nkc777@goldenbridgefg.com 현재가 ( 원 ) (9/29) 33,850

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¹é¹üȸº¸ 24È£ Ãâ·Â 2009.가을 24호 2_ . 02 03 04 08 10 14 16 20 24 28 32 38 44 46 47 48 49 50 51 _3 4_ _5 6_ _7 8_ _9 10_ _11 12_ _13 14_ _15 16_ _17 18_ 한국광복군 성립전례식에서 개식사를 하는 김구(1940.9.17) 將士書) 를 낭독하였는데, 한국광복군이 중국군과 함께 전장에

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