대한임상병리사회지 : 제 24 권 1 호 1992 EDTA 항응고제에의한위혈소판감소증 2 예 을지병원임상병리과 김정애 박은경 변대훈 Key words : Pseudothrombocytopenia, EDT A anticoagulant, Automatic cell coun

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영완 장
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1 대한임상병리사회지 : 제 24 권 1 호 1992 EDTA 항응고제에의한위혈소판감소증 2 예 을지병원임상병리과 김정애 박은경 변대훈 Key words : Pseudothrombocytopenia, EDT A anticoagulant, Automatic cell counter 1. 서론 혈액학적검사에서사용되고있는수종의항응 고제중 EDTA 2k 항응고제는혈구의크기나형 태에영향을주지않으므로 CBC 검사에가장흔 하게사용되고있다. 병 의원을막론하고요즈음은자동혈구계산기 (automatic cell counter) 의보급이늘어나보편적 으로사용되게됨으로써혈소판검사는 CBC routione 항목에들어가게되었다. 실제로는혈소 판수가정상인환자의검체가때로는 EDTA 항 응고제에의해혈소판응괴 (platelet aggregation), 호중구주위에혈소판의부착 (platelet satellism) 현상이생겨서현저하게감소된수치를보이는경 우가있는데이를위혈소판감소증 (pseudothrom - bocytopenia) 이라고한다 1-9). 위별소판감소증환자를확인과정없이임상에 보고하였을경우원인을파악하기위해각종혈소 판기능검사와골수검사내지는혈소판농축액의 수혈까지도할수있는오진을제공하는것이므로 문제가될수있다 9) 연자들은다항목혈구측정기를사용하던중혈소판감소를보인환자 2 예에서위혈소판감소증 이확인되어간단한문헌고찰과함께보고하는바 이다. n. 재료및방법 EDTA bottle 은녹십자의공 ( 주 ) 생산품을사용 하였고 3.8 % sodium citrate 와 heparin 을자가조제 사용하였다. 각 parameter 마다재검기준 (criteria) 을정헤놓고확인검사하는과정에서발견하였다. 분석기기로는 Sysmex NE-8000 cell counter(23 parameter) 와 back up 용으로 Sysmex K-1000(8 parameter) 를사용하였다. < 증례 1> 환자 : 여자 35 세, 산부인과외래 검사소견 : CBC routine check 에서혈소판감소증 ( 평균 54.2 X 10 3 μ ~ ) 으로나타나서도말표본현미 경검사에서혈소판응집현상을확인한후병실에서 finger stick smear를만들어확인결과응집현상 이관찰되지않았다. 3.8 % sodium citrate 를사용 하여재검사결과평균 155 x 10 3 /μe 의혈소판을 가진정상환자였다. < 증례 2> 환자 : 여자 9 세, 정형외과외래 검사소견 : 혈소판 46 x 10 3 /μe 환자로서재검기 준 (criteria) 에해당되는혈소판감소증을나타낸 바증례 1 에서와같은방법으로재검결과혈소판 (PLT) 212 x 10 3 /μe 의정상혈소판을가지고있었 다. 건강인 EDTA 혈액을사용해서 37 0 C 와실온 (RT) 에서의 WBC, 혈소판수치의변화를보기위 하여 분까지일정한간격을두고측정하였다. 또한증례 2 의혈액을 EDT A, 3.8 % sodium citrate, heparin 을함유한시험관에 2 개씩채혈하여 실온과 37 0 C 에서각각백혈구및혈소판치의변화 를보기위해측정하였다. ill. 결과 증례 1 의경우표 1 에서보는바와같이 5 일간 매일혈소판을측정해본결과평균 54.2 x 10 3 /μe 였다. 혈액도말표본의관찰에서 2-3/ oil immersion PL T clump 가관찰되었다

2 Table 1. 위혈소판감소증환자의 PLT 수비교 Finger stick 혈액도말표본의현미경관찰에서는단위 ( x 10 3 /μ R) PLT clump가전연관찰되지않았다. 위혈소판감 앓 3ttr EDTA % Sod. citrate 평균 소증을의심히-여 3.8 % sodium citrate를사용하여재겸한결과평균 155 x 10 3 /μe 의정상혈소판수를가지고있음이확인되어임상에보고되었다. 증례 2 의경우는 CBC 검사에서 check( 표 2 참조 ) 되어증례 1 에서와같은방법으로 3.8% sodium citrate를사용하여재겸한결과 WBC 가 5.7 x 10 3, PLT 가 212 x 10 3 /μ e 였다. Table 2. 증례 2 환자의 CBC 검사결과 검사일자 Hb HT RBCx 10 *WBCx % % *PLT X 10 3 Diff. count PLT clump Seg 35 Eosino 3 89 Lympho Baso 1 Mono 6 Stab 1 Mono 2 46 N. seg 44 Eosino Lympho 48 표 2 에서 WBG 가증가되어있는것은 PLT clump 가백혈구로산정된결과로서위백혈구증가 증도동반하고있었다. 정상인으로부터 EDTA blood 를채혈하여온도변 화 ( 실온과 37 0 C) 에따른 WBC와혈소판의수치를 0-120분까지일정한간격으로검사한결과 ( 표 3, 그림 1) 양쪽모두큰차이를나타내지않았다. WBC I PLT X10 3 /μ lì I x10 3 /μ g o MIN PLT, RT WBC, RT WBC, 37.C Fig.1. 온도차이에의한 WBC, PLT 치의변화 ( 건강인 ) Table 3. 온도차이에의한 WBC, PLT 치의비교 ( 건강인 ) csou \ nt 온도 ~ 시구 ~ 간분 0 분 30 분 50 분 ----;----- RT :37 0 C RT :37 0 C RT :37 0 C WBCxl : : : 5.8 PLT X : : : 270 cs u \nt 온도 시 구간분 70분 90분 120분 ----ì----- RT :37 0 C RT :37 0 C RT :37 0 C WBCx : : : 5.7 PLTx : : : 266 그러나증례 2 의표 2 혈소판 89 x 10 3 /μe 검사 결과를보인환자 sample 을 EDT A, 3.8 % sod. citrate, heparin 시험관에담아실온과 37 0 C 에서 분까지계속측정한결과 WBC 는시간이경과 함에 따라조금씩증가하였고혈소판은상대적으 로조금씩감소됨을보여주었다. 이것은시간이 지나면서응집이촉진되고이 PLT clump 는 WBC 로 count 되기때문으로생각된다

3 Table 4. 증례 2 환자혈액의항응고제별백혈구혈소판치의경시적변화 단위 x 10 3 /μe EDTA 30 분 50 분 70 분 90 분 120 분 RT 37 0 C RT 37 0 C RT 3TC RT 37 0 C RT 3TC WBC PLT % Sod. WBC cltrate PLT Heparin WBC PLT % sodium citrated blood 의결과는실온및 0 C 에서의 WBC 와 PLT 치차이는관찰되지않았 다. 그러나 heparinized blood 는실온방치 90 분부 터는백혈구의증가와혈소판의감소가인지되기 시작하였다. 위혈소판감소증확인을위하여사용 한항응고제는 3.8 % sodium citrate 가 2 시간까지 안전성이있었고 heparin 은 70 분까지안정성이있 었다. 300, 숭 200 F 녁 _:, 150 g 감 x; 며 8 딴 sod. citrated blood heparinized blood χ---.-_.,_ EDTA blooci WBC I PLT I X10 3 /μ 이 x10 3 /μ e 8.0, 내 케 내 케 100 a. r --- WBC, Heparin 4.0, 50 셔 *-, * Ir l/ 때떼ω%여뼈꾀i 깅--Lu -- % R V.떼C 짜빼ψ- 찌m 때앤, 뼈3 % 빼J MIN Fig.2. 세종류항응고제에서의시간별 혈소판의변화 (3 7"C) o MIN Fig.3. 두가지항응고제에서의시간별 PLT, WBC 의변화 ( 실온 ) w. 고찰 본병원에서 1991 년 6 월 년 3 월까지 10,796 건의혈소판검사중 2 건의위혈소판감소중환자 가발견되어 0.018% 의빈도를보였다. 외국의보고를살펴보면 1980 년 Onder 둥은혈 소판검사 1, 300 건중에서 3 예 (0.23%)2), 1984 년 Savage 풍은 135, 807 건중에서 154 예 (0.11 % )3), Payne 퉁은 1, 080 건중에서 21 예 (1. 9%)4) 의위혈 소판감소증을보고하고있다. 자동혈구계산기를이용한혈소판검사에서 thrombocytopenia 가보였을경우 finger stick 도말표 본이나검사 sample 을도말표본으로현미경관찰 을한다면쉽게 pseudothrombocytopenia 여부를 구분할수가있다. 혈액검사실자체의재검기준 (criteria) 을정해 놓고실시한다면더높은비율로나타나리라고사 료된다. 위혈소판감소증의원인으로는 EDTA 영향에 의한혈소판응집군과혈소판위성현상 (platelet satellism) 7-8), 거대혈소판 (giant platelet) 퉁의원인 으로생길수있으며이것들이 WBC 로 count 되기 때문에위백혈구증가증 (pseudoleukocytosis) 을동 반하묘로이문제도더불어해결해야할것이다

4 :f. %}L.}E.} -?:I <( E- ~~~ %~~I) <(I t ll 1973 \:! Schreiner.2} BellE.}.s!..:TI.oJl E-1 %}~.g..s:_.2}.lf-i:! <5"} /11 EDT A ~An <5}oJl "'1 lfr ~% <5}-E % ~ ~ ojl t:jl <5}0:] ~le~ <5}~-Et:Jl IgG. ~<(l: l~.:rr, o1 %~ ~ojl E.}~ ~~~ ~~<tl~~ ~~~~ ~~-6' }.R ~ %.2.. ~ ~ ~ cpl, E:E ~ 1979\:! Vanderschans % o 1.s!..R ~ % ~ ~ -E EDT A -e An %}ojl "'1 lfr %~ ~.!i!. 0 1.R 37 c.!i!. t:}-e {l.g.ojl "'1 t:-j ~ Jtl-%<5}-E %~ ~. "'1 IgM ll1 ~. ~<(1: 1 ~ t:} 6 l. * 1980\:! Oguz-E.!f. ~fi-e.} %~~7} ~%% ~ <(1<5}~-Et ll "O".}- -.R~lE-1 ~ff-.2}.lf-i:!-%}/11 calcium.5:. 50,uM 0 l %} ~ trll c(! ~l 1..} ~ ~ ~~ % ~ <5}-E IgM % ~ ~.2} :f. <5} 1..}-E- calcium -1f.5:..2}.1f- {!-%} J!l EDT A ~ -o-j:.2.. % ~ <5}-E IgG % ~ ~ ~ t:}. o}~ 77}7.] ~ <(} oj ~{I -8"] llfii:l 7.]7.] ~~7-llfr Jf C-1 ~ C-1 "'} qj ~ojl "'1 1 l:lj-~ ojl i:l-11% 7}7-].R ~ 01 o'j: %}3Y-.2.o:'! q-o-j--& automatic cell counter-e ~ ~i:l;,}e.} AJ.AJ-(normal):i!} l:l]aj-'ol-(abnormal)~ -T ~<5}-E i:l~(screening) 7]7]. "'1 ~%~o1 l:l}'if~ C. Cl Jf- o:'! 13.AJ- data -E ~;,1.!i!..R ~ <5}.:1!. l:l]13.ajdata-e ~7]1:@ (manual method) ~ 7] E} le~~!{! l:lj-1:@.2_. ~~<(} i:ja}~ ~15»-B]ot ~ ~.2 A~Zf!{! t:}. v.~ e \:! 6-%1-1992\:! 3-%177~7.] 10,796 i:l~~1ojl t:jl~ ~~~ i:ja} -6'- 2oJ1E.} ~' I~~ :G-~-6' oj ~7.1: %E.l ~.5:.-~ 5!.0:] -T~t:J-. 2..A}%~T lj1{l-71 A}- -;,j AJ15] ~_g. 7]~-:~j Oj %}E.} '!~~ :G-~-6'-~.!i!_o]~ S:.WlE~i:l;,}. platelet aggregation, satellism %% ~<(} ~ + 3.8% sodium citrate, heparin "0".}- -.JI~l~ A}- - A] i:j <5}0:] ~ ' I~~ ~~-6'--& ~0}~ ~ ~~t:}. 3. Automatic cell counterojl ;,1 ~ '! ~ ~ :G- ~ -6' ~ trll %~!{! ~~~o] WBC. count: 101 ~ ~~T -6'-7}-6'-~ 5!.0:] -?~t:}. 0 ]ojl t:h~.ii?. 13 ~..e..%}~t:}. 4. AJ.AJ<?.}E.} ~ ~ ~ {l.g_.i!} 37 c ojj Al 0-120~ 7J~7.] ~AJ~ 7}~.2.. ~~T ~~~% ~AJ ~ ~.I!}-E ~}oj ~ L.}E}~ 7.] ~~t:}..::l Cl 1..} ~ ~ ~ ~ ~~ -6'-oJl "'1 -e Al n 75.I!}oJl n:}-21- wbc-e 1i1i -6'-7}<5"}~.:rr '!~~.g. 1i~} ~ ~: 1 ~ t:}. Two Case of Pseudothrombocytopenia Due to EDT A Anticoagulants Kim, J. A., Park, E.K., Byun, D. H. Dept. of Clinical Pathology, Eul Ji General Hospital ABSTRACT EDT A 2K, one of the some kinds of anti-coagulants used for hematology tests, is most frequently used for CBC tests since it does not affect the size and blood cell morphology. Nowadays automatic cell counters are widely supplied to many hospitals, big or small, and are commonly used. As a result, platelet test has become a routine CBC,test. In fact, patient blood sample with a normal platelet sometimes show a much decreased number of platelet due to platelet aggregation and platelet satellism affected by EDT A anti-coagulant which is so called pseudothrombocytopenia. If any further confirmation tests are not done for such patient, then it can lead misdiagnosis and unnecessary medical care such as bone marrow aspiration, various platelet function test and transfusion for platelet concentrated and it can raise a problem later on. We found that pseudothrombocytopenia from two patient blood samples showing decrease of platelet and report hereunder with brief literatures

5 REFERENCES 1. Watkins sp Jr, shulman NR :platelet cold agglutinins, Blood 36 : , Onder 0, Weinstein A. Hoyer LW: Pseudothrombocytopenia caused by platelet agglutinins that are reactive in blood anticoagulated with chelating agents. Blood 56 : , Savage RA : Pseudoleukocytosis due to EDT A induced platelet clumping. Am J Clin Pathol 81 : , Payne BA, Pierre, RV : Pseudothrombocytopenia : A laboratory artifact with potentially serious consequences. Mayo clin proc 59 : , Shreiner OP. Bell WR : Pseudothrombocytopenia : Manifestation of a new type of platelet agglutinin. Blood 42: , Vander schans GS, Veenhoeven WA, Huiges W, et al : Pseudothrombocytopenia due to agglutinins. Am J Clin Pathol72: , Bolton FG, Boyd J :Platelet adherence to polymorphs, Br Med J 2 : 747, Kjeldsberg CR, Swanson J : Platelet satellitism, Blood 43: , %~: :, ~it{j, ~~~, ~71*-: EDTAOll ~~ ~~~~ ~~* 3011, ~-"J~t!-1.2} 7cj:S:.~t!.l 8 (1) : 91-99,

γ

경락경혈학회지 Vol.27, No.1, pp.87 106, 2010 Journal of Meridian & Acupoint Dept. of 1 Meridian & Acupoint, 3 Acupuncture & Moxibustion, College of Oriental Medicine, Daejeon University 2 Division of Clinical