Microsoft Word - 6-이영민.doc

Save this PDF as:

Size: px
Start display at page:

Download "Microsoft Word - 6-이영민.doc"

Transcription

1 Journal of Bacteriology and Virology Vol. 39, No. 1 p Expression and Antibody Production of Japanese Encephalitis Virus RNA Polymerase (NS5) Protein Jeong-Min Kim, Sang-Im Yun, Byung-Hak Song, Yu-Jeong Choi, Jun-Sun Park and Young-Min Lee * Department of Microbiology, College of Medicine and Medical Research Institute, Chungbuk National University, Cheongju, Korea Japanese encephalitis virus (JEV), a member of mosquito-borne flaviviruses, is the leading cause of viral encephalitis in a large geographic area of Southeast Asia and Australia. JEV contains a single-stranded positive-sense RNA genome, which encodes its own RNA-dependent RNA polymerase (NS5) that is required for genomic RNA replication. In this study, we have described a pair of mouse antisera specific to the N- or C-terminal region of the NS5. Initially, two hydrophilic regions corresponding to the N-terminus and C-terminus of the NS5 protein were individually amplified by reverse transcription-pcr from the genomic RNA of JEV K87P39 strain. The amplified DNA fragments were cloned into a prokaryotic expression vector, pgex-4t-1; the resulting constructs were used for the expression of GST fusion proteins, designated GST/NS5N and GST/NS5C, in E. coli BL-21 strain. Following immunization of three BALB/c mice with each of the purified GST/NS5N and GST/NS5C, we obtained two pools of the antisera, specifically recognizing the ~103-kDa NS5 and several smaller NS5-related proteins in BHK-21 and Vero cells infected with JEV K87P39 strain. Overall, we have successfully expressed the N- and C-terminal regions of JEV NS5 fused to the C-terminus of GST and generated the mouse antisera capable of recognizing the NS5 and its related proteins in JEV-infected cells. This would provide a valuable reagent for the study of JEV NS5 in the viral life cycle. Key Words: Japanese encephalitis virus; Flavivirus; RNA-dependent RNA polymerase; NS5 서론 일본뇌염바이러스 (Japanese encephalitis virus, JEV) 는작은빨간집모기 (Culex tritaeniorhynchus) 에의해전파되며인체감염시급성뇌염을일으킨다. 일본뇌염바이러스는한국, 중국, 일본, 인도, 베트남등을포함한동남아시아의대부분지역에서유행하고있다 (1, 2). 통계학적으로매년약 50,000명정도의발병환자가보고되고있 Received: March 6, 2009/ Revised: March 16, 2009 Accepted: March 17, 2009 * Corresponding author: Young-Min Lee. Department of Microbiology, College of Medicine & Medical Research Institute, Chungbuk National University, 12 Gaeshin-Dong, Heungduk-Ku, Cheongju, Korea. Phone: , Fax: ** This work was supported by a Korea Research Foundation grant (KRF C00405, which was transferred from R ) funded by the Korean Government (MOEHRD). 으며, 이중에서약 15,000명은사망한다 (3). 특히어린이와유아의경우치료후에도심각한신경성후유증을경험할가능성이높다 (4, 5). 최근지구의기온상승과생활환경의변화로인해서일본뇌염바이러스의감염지역이점차확대되고있다. 특히, 과거에는일본뇌염바이러스가발견되지않았던호주에서최근 2~3년동안지속적으로바이러스가분리되고있어, 전세계적으로주요병원성바이러스의하나로대두되고있다 (6~9). 일본뇌염바이러스는분류학적으로플라비비리데과 (Flaviviridae family) 의플라비바이러스속 (Flavivirus genus) 에속하며, 유전학적으로황열바이러스 (yellow fever virus), 웨스트나일바이러스 (West Nile virus, WNV) 및뎅기바이러스 (dengue virus, DENV) 와매우유사하다 (10, 11). 다른플라비바이러스와마찬가지로, 일본뇌염바이러스는약 11,000 개의염기로구성된단일가닥의양성-극성 RNA를게놈으로가지고있다. 게놈의 5'-말단에는 53

2 54 J-M Kim, et al. 캡-1 구조 (cap-1 structure) 를가지고있으나, 3'-말단에는폴리 A 꼬리 [poly(a) tail] 을가지고있지않다 (12, 13). 게놈은단한개의 open reading frame (ORF) 으로구성되어있으며, 이 ORF의양쪽끝부분에단백질을인코딩하지않는비번역부위 (nontranslated region, NTR) 가위치한다. 바이러스의 ORF는하나의다단백질 (polyprotein) 로합성된후, 최소 2개의단백질분해효소에의해서 3개의구조단백질 (structural protein) 과 7개의비구조단백질 (nonstructural protein, NS) 로분해된다. 3개의구조단백질은 capsid (C), premembrane (prm) 및 envelope (E) 이라고부르며, 7개의비구조단백질은 NS1, NS2A, NS2B, NS3, NS4A, NS4B 및 NS5라고명명한다 (13, 14). 일본뇌염바이러스를포함한모든플라비바이러스의 NS5 (~103 kda) 은서로다른분리주들간에염기서열의이질성 (heterogeneity) 이매우낮으며, methyltransferase와 RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) 의기능을겸비한다기능단백질로알려져있다. Methyltransferase의기능은바이러스의게놈 5'-말단에캡구조를첨가하는반응에관여하며 (15, 16), RdRp의기능은게놈 RNA의복제를수행하는역할을하는데기여하는것으로보고된바있다 (17~19). 비록이러한 NS5의생물학적특징은정제된단백질을사용하여입증된바는있으나, 이들이어떠한작용기전에의해서바이러스의 RNA 복제에관여하는지에대한자세한사항은거의규명된바없다. 또한알려진기능이외에 NS5 단백질은플라비바이러스의증식에중요한역할을하는것으로추정된다. 뎅기바이러스의경우, NS5가사이토카인 IL-8의전사와분비를증대시킴으로써바이러스의전파를촉진한다고보고된바있다 (20). 그리고진드기에의해서전파되는플라비바이러스 (tick-borne encephalitis virus) 의경우, NS5가인터페론수용체와결합함으로써 IFN-α/β와 IFN-γ의신호전이를방해하고, Jak1과 Tyk2의인산화를감소시켜 STAT1 의활성화를억제한다는사실이보고된바있다 (21). 앞으로 NS5 단백질이플라비바이러스의생활사에서어떠한기능을하는지에대한자세한연구가필요할것으로사료된다. 본연구에서는 E. coli 발현시스템을활용하여일본뇌염바이러스 NS5 단백질의두부위를 glutathione S- transferase (GST) fusion protein 형태로각각다량발현하고, 정제된재조합단백질을면역원으로사용하여마우스항혈청을생산하고자하였다. 이렇게얻어진단백질 과항혈청은앞으로일본뇌염바이러스의기초연구, 특히바이러스생활사에서 NS5의역할과작용기전을규명하는데중요한실험시약으로활용할수있을것으로기대한다. 재료및방법세포및바이러스본연구에서는 BHK-21과 Vero 세포주를바이러스감염실험에사용하였다. 이들세포주는모두 10% 우태아혈청 (fetal bovine serum), 2 mm L-글루타민, 비타민및페니실린 / 스트렙토마이신을첨가한 alpha minimum essential medium (α-mem) 에서배양하였으며, 37, 5% CO 2 조건에서약 3~4일마다분주하였다. 본실험에사용한일본뇌염바이러스는 1987년모기에서분리된한국분리주 K87P39를사용하였다 (22). 플라스미드일본뇌염바이러스 NS5 단백질의 N-말단부위로부터 275개의아미노산을발현하는 pgex/jevns5n과 C-말단부위에서 463개의아미노산을발현하는 pgex/jevns5c 플라스미드를각각제조하였다. 플라스미드클로닝과관련된모든사항은일반적인재조합 DNA 기술 (recombinant DNA technology) 를사용하였다 (23). 먼저일본뇌염바이러스의국내분리주인 K87P39 (GenBank accession no. AY585242) 의게놈 RNA을주형으로사용하여 RT- PCR를수행함으로써 JevNS5N과 JevNS5C에해당하는 cdna를각각합성하였다. RT-PCR 반응에사용한프라이머는 JevNS5N cdna의경우 B-ns5-F/B-Nns5-R를사용하였으며, JevNS5C cdna의경우 B-Cns5-F/B-ns5-R를사용하였다 (Table 1). 합성된 cdna 단편은 EcoR I과 Xho I 으로처리한후, 같은제한효소로처리된 pgex-4t-1 발현벡터 (GE Healthcare, Piscataway, NJ, USA) 에삽입하였다. 클로닝된 JevNS5N과 JevNS5C cdna는 GST 단백질의 C-말단부위에융합되어 GST fusion protein 형태로발현되도록고안하였다 (Fig. 1). Reverse transcription (RT)-PCR로증폭된부위는최종적으로염기서열분석을통해서삽입된염기서열이기존의 K87P39 분리주와일치함을확인하였다.

3 JEV NS5 Antibody 55 RT-PCR 역전사반응 (reverse transcription reaction) 은 100 U의 Superscript II 역전사효소 (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) 를사용하여 20 μl 반응액에서수행하였다. 일반적인반응액의조성은 Superscript II 역전사효소와함께 10 μl의추출된바이러스게놈 RNA, 5 pmol reverse 프라이머, 40 U RNaseOUT (Invitrogen), 0.1 mm dithiothreitol (DTT) 및 10 mm deoxynucleoside triphosphate mix를포함하였다. 역전사반응은 37 에서 1시간동안지속되었으며, 70 에서 15분동안가열함으로써효소를불활화시켰다. 그리고 PCR 반응은 5 U의 Pyrobest DNA polymerase (Takara, Shiga, Japan) 를사용하여 100 μl 반응액에서수행하였다. PCR 반응액은 Pyrobest DNA polymerase를포함하여 10 mm Tris (ph 8.3), 1.5 mm MgCl 2, 50 mm KCl, 200 μm dntps 및 0.4 μm forward와 reverse 프라이머로구성하였다. PCR 증폭사이클은 denaturation (94, 30초 ), annealing (60, 30 초 ) 및 polymerization (72, 1분 ) 으로구성하였으며, 총 30 사이클을실시하였다. 단백질발현및정제 pgex/jevns5n과 pgex/jevns5c를각각 E. coli BL-21 competent cell에형질전환 (transformation) 한후, 암피실린이첨가된 LB 플레이트에 37 에서 12시간배양하였다. 각각하나의독립된콜로니를암피실린이첨가된 LB 배양액에서 12시간배양한후, 총 250 ml의배양액에 1:50 으로희석한다음 A 600 흡광도가 0.6~1.0의범위에올때까지 1시간 30분간다시배양하였다. 이후 0.2 mm의 isopropyl-β-thiogalactoside (IPTG) 를첨가하여 4시간동안 GST fusion protein의발현을유도하였다. 재조합단백질을정제하기위해서배양된 E. coli를원심분리하여침전물 (pellet) 을수확한후, 23.5 ml의인산완충용액 (phosphate-buffered saline, PBS) 에재부유시켰다. 부유액에 1% Triton X-100를첨가한후 30분간실온에서방치한다음, 12,000 rpm의속도로 4 에서 20분간원심분리하여상층액을수확하였다. 얻어진상층액으로부터 GST fusion protein은 glutathione sepharose 4-fast flow beads (GE Healthcare) 을사용하여제조사가제공하는지침서에따라서단백질을정제하였다. 정제된단백질은 A 280 흡광도를측정한후 Bradford 단백질정량법으로정량하였다. 정제된단백질은 12% SDS-polyacrylamide gel electro- phoresis (SDS-PAGE) 를통해서분리한다음, coommasie staining 방법으로염색하여원하는단백질의수확량을분석하였다 (23). 항혈청생산 pgex/jevns5n과 pgex/jevns5c 벡터로부터정제된단백질 (GST/JevNS5N과 GST/JevNS5C) 을면역원으로사용하여, SPF BALB/c (4주령) 마우스의복강에총 6차례접종하였다. 1차접종은 500 μl의정제된단백질 (100 μg/ ml) 에 500 μl의 complete Freund adjuvant를섞어서주사하였으며, 2~6차접종은 500 μl의정제된단백질 (100 μg/ ml) 에 500 μl의 incomplete Freund adjuvant를섞어서주사하였다. 1~2차접종은 2주간격으로실시하였으며, 2~6 차접종은 1주간격으로실시하였다. 접종스케줄이끝난후, 그룹별로 3 마리의마우스에서얻어진혈청을혼합하였다. 웨스턴블롯 pgex/jevns5n과 pgex/jevns5c 벡터로부터정제된단백질 (GST/JevNS5N과 GST/JevNS5C) 에존재하는 GST fusion protein을동정하기위해서, 또한본연구에서얻어진 NS5 단백질에대한항혈청을테스트하기위해서웨스턴블롯을실시하였다. GST fusion protein을동정하기위해서는정제된단백질을직접샘플로사용하였으며, 항혈청을분석하기위해서는일본뇌염바이러스에감염된세포 ( 실험군 ) 와감염되지않은세포 ( 대조군 ) 를 sample loading buffer (80mM Tris-HCl [ph 6.8], 2.0% SDS, 10% glycerol, 0.1M DTT, 0.2% bromophenol blue) 로직접용해시켰다. 이렇게얻어진 cell lysate에존재하는단백질은 12% SDS-PAGE로분리한후, 메탄올로전처리된 PVDF membrane (Millipore, Billerica, MA, USA) 에전기영동을통해서이동시켰다. Membrane은 1차항체로써 GST에특이적으로반응하는단클론항체 (AbFrontier, Seoul, Korea) 또는본연구에서얻어진마우스항혈청으로염색한다음, 2차항체로 alkaline phosphatase (AP)-conjugated goat antimouse IgG 항체 (Jackson ImmunoResearch Labs, West Grove, PA, USA) 로염색하였다. 1차및 2차항체로염색된 membrane은 AP의기질인 BCIP (5-bromo-4-chloro-3- indolylphosphate)/nbt (nitroblue tetrazolium) 혼합용액으로염색하였다.

4 56 J-M Kim, et al. Table 1. Primers used for PCR amplification in this study Primer Sequence a Polarity Size (mer) B-ns5-F 5'-GATGGATCCGGAAGGCCTGGGGGCAGG-3' Sense 27 B-Nns5-R 5'-ATCCTCGAGCTAGTGGTATGTCCAAGTGCG-3' Antisense 30 B-Cns5-F 5'-GATGGATCCGAGTGTCACACATGTATC-3' Sense 27 B-ns5-R 5'-ATCCTCGAGTTACTAGATGACCCTGTC-3' Antisense 27 a JEV-specific sequences are indicated in boldface types. Restriction recognition sites used for cloning are underlined A bp DNA DNA marker JevNS5N JevNS5C B pgex-4t-1 pgex/jevns5n GST GST JevNS5N Molecular Weights (kda) ~28 ~ pgex/jevns5c GST EcoR I JevNS5C Xho I Figure 1. PCR amplicons of JevNS5N and JevNS5C (A) and schematic presentation of pgex/ JevNS5N and pgex/jevns5c constructs (B). The JEV NS5N and NS5C regions were PCRamplified with an appropriate pair of primers as indicated in the text. The amplicons were separated by 1% agarose gel electrophoresis and stained with ethidium bromide (A). pgex/ JevNS5N and pgex/jevns5c constructs were designed to express the N-terminal region (275 amino acids) and C-terminal region (461 amino acids) of JEV NS5 protein, respectively (B). ~79 결과일본뇌염바이러스 NS5 단백질의 N-말단부위와 C-말단부위를각각발현하는벡터의합성먼저일본뇌염바이러스의 RNA 복제에필수적인 RdRp 인 full-length NS5 단백질을원핵세포발현벡터를사용하여 E. coli에서 GST fusion protein 형태로발현하고자시도하였다. 그러나여러차례의실험결과온전한 NS5 단백질은 E. coli에서발현이거의되지않음을경험하였다 ( 자료미제시 ). 따라서, NS5 단백질을 N-말단부위와 C-말단부위로나누어발현을유도하고자하였다. E. coli 에서재조합단백질을 soluble form으로발현시키고자, DNA strider 프로그램을사용하여 full-length NS5 단백질의 hydropathy 분포도를분석하였다. 이분석결과를토대로 NS5 단백질의 N-말단과 C-말단부위가친수성이높을것으로추정되었으며, 이부위를본실험에사용하였다. 일본뇌염바이러스의한국분리주 K87P39로부터분리된 genomic RNA를주형으로사용하고, Table 1에열거된프라이머를이용하여 NS5 단백질의 N-말단부위에해당하는 JevNS5N ( 프라이머 : B-ns5-F/B-Nns5-R) 과 C-말단부위에해당하는 JevNS5C ( 프라이머 : B-Cns5-F/B-ns5-R) cdna 단편을각각증폭하였다. 총 905개의아미노산으로구성된 NS5 단백질로부터 JevNS5N cdna는 N-말단의 275개아미노산에해당하는부위이며, JevNS5C cdna는 C-말단의 461개아미노산에해당하는부위이다. RT-PCR 증폭결과합성된 cdna 단편의크기를알아보기위해서 1% agarose gel을사용하여전기영동을실시하였으며, ethidium bromide로염색하였다. JevNS5N의경우 ~825 base pair (bp) 의 cdna가증폭되었고, JevNS5C의경우 ~1,383 bp 의 cdna가증폭되었다 (Fig. 1A). 이들의크기는예상한것과일치하였다. 이와같이증폭된 cdna 단편은클로닝을원활하게수행하기위해서인위적으로프라이머의 5' 과 3' 말단에각각삽입한 EcoR I과 Xho I 제한효소를사용하여 E. coli 발현벡터인 pgex-4t-1 에삽입하였다. Fig. 1B에나타낸

5 JEV NS5 Antibody 57 것과같이삽입된 JevNS5N과 JevNS5C는모두 pgex- 4T-1이인코딩하고있는 GST 단백질의 C-말단부위에융합되도록하였으며, 그결과 pgex/jevns5n과 pgex/ JevNS5C이라고명명된플라스미드를합성하였다. 삽입한 cdna의염기서열은 RT-PCR 을위해주형으로사용한일본뇌염바이러스 K87P39의염기서열과일치함을확인하였다. GST/JevNS5N 과 GST/JevNS5C 단백질의발현및정제 pgex/jevns5n과 pgex/jevns5c 발현벡터를사용하여 E. coli BL-21 세포에서 GST fusion protein (GST/JevNS5N 과 GST/JevNS5C) 을다량으로발현및정제하고자하였다. 이를위해서각각의발현벡터로형질전환된 BL-21 세포에 IPTG를첨가하여 4시간동안원하는 GST fusion protein의발현을유도하였다. 발현된재조합단백질은 GST column을사용하여정제하였으며, 원하는단백질의 발현여부와수확량을알아보기위해서정제된샘플을 12% SDS-PAGE로분리한후 coommasie staining을수행하였다. pgex/jevns5n 발현벡터로형질전환된 BL-21 세포에서는예상했던것과유사한크기의 GST/JevNS5N (~61 kda) 단백질과함께, 이보다작은크기 ( 예 : ~28-kDa와 ~30-kDa) 의단백질들이다수발현되는것을알수있었다 (Fig. 2, pgex/jevns5n). 단백질의크기를기준으로하면, ~28-kDa 단백질밴드는 GST에해당하며, ~30-kDa 단백질은 GST/JevNS5N의 truncated form이거나또는단백질발현시 internal initiation에의해서발현된것으로추정된다. 또한, pgex/jevns5c 발현벡터로형질전환된 BL-21 세포에서도 pgex/jevns5n의경우와유사한실험결과를얻었다. 즉, GST/JevNS5C (~79-kDa) 의단백질과함께이보다작은크기의여러단백질들이함께발현 Figure 2. Expression of GST/JevNS5N and GST/JevNS5C proteins (coommasie staining). The E. coli. BL-21 cells were transformed with the parental pgex-4t-1 or one of two recombinant plasmids designated pgex/jevns5n and pgex/jevns5c. The expression of the recombinant proteins (GST/JevNS5N and GST/ JevNS5C) was analyzed by 12% SDS-PAGE and coommasie staining. The molecular weight markers in kda were indicated on the left and the sizes of GST, GST/JevNS5N, and GST/JevNS5C were shown on the right. Figure 3. Identification of GST/JevNS5N and GST/JevNS5C proteins (immunoblotting). The parental pgex-4t-1 or one of two recombinants (pgex/jevns5n and pgex/jevns5c) was transformed into E. coli BL-21 cells. Each culture was incubated in the presence of IPTG to induce the GST fusion proteins designated GST/JevNS5N and GST/JevNS5C. Following purification of the recombinant proteins with a glutathione sepharose column, the GST fusion proteins were separated by 12% SDS-PAGE and immunostaining with a GST-specific mouse monoclonal antibody.

6 58 J-M Kim, et al. A Figure 4. Immunoblotting with two mouse antisera raised against GST/JevNS5N and GST/JevNS5C. BHK-21 or Vero cells were mock-infected or infected with JEV K87P39 strain at an MOI of 1. At 20 h post-infection, cells were directly lysed with 1 sample loading buffer and the cell lysates were separated by 12% SDS-PAGE. The NS5 and NS5-related proteins (asterisks) were recognized by two mouse antisera (α-ns5n and α-ns5c) raised against GST/JevNS5N and GST/JevNS5C, respectively. Molecular weight markers (in kda) were shown on the left and the sizes of NS5 and its related proteins were presented on the right. 및정제되는것을알수있었다 (Fig. 2, pgex/jevns5c). 본실험의대조군으로사용한 pgex-4t-1 벡터로형질전환된 BL-21 세포의경우, 대부분 ~28-kDa의 GST 단백질임을알수있었다 (Fig. 2, pgex-4t-1). 다음으로, 이렇게정제된여러개의단백질들이정말로 GST fusion protein인지를알아보기위해서, GST에특이적으로반응하는단클론항체 (anti-gst Mab) 를사용하여웨스턴블롯을수행하였다. Coommasie staining의실험결과와일치하게, pgex/jevns5n과 pgex/jevns5c 발현벡터로형질전환된 BL-21 세포에서각각 ~61 kda의 GST/JevNS5N과 ~79-kDa의 GST/JevNS5C 단백질들이각각탐지되었으며, 두경우모두이보다작은여러개의단백질들이 anti-gst Mab에특이적으로반응하는것을알수있었다 (Fig. 3). 일본뇌염바이러스의 NS5 단백질에특이적으로반응하는항혈청생산 최종적으로, E. coli에서발현된 GST/JevNS5N과 GST/ JevNS5C을면역원으로사용하여, BALB/c 마우스에서항혈청을생산하고자하였다. 먼저정제된단백질의량을 B Bradford 정량법에의해서측정한후, 재료및방법에기술한것과같이한단백질당 3마리의마우스에접종하였다. 6차례의접종스케줄이끝난다음, 마우스의혈액을채취하여각그룹의혈청을풀링함으로써 anti-ns5n antiserum (α-ns5n) 과 anti-ns5c antiserum (α-ns5c) 을확보하였다. 본실험에서얻어진항혈청이일본뇌염바이러스의 NS5 단백질을특이적으로인지하는지를알아보기위해서, 일본뇌염바이러스 K87P39로감염된 BHK-21세포의 cell lysate을사용하여웨스턴블롯을수행하였다. 1 MOI (multiplicity of infection) 의일본뇌염바이러스에감염된 BHK-21 ( 실험군 ) 과감염되지않은 BHK-21 세포 ( 대조군 ) 를바이러스감염후 20시간이경과한다음 sample loading buffer로직접용해함으로써 total cell lysate을확보하였다. 이렇게얻어진샘플을본연구에서확보한 2개의항혈청 (α-ns5n과 α-ns5c) 을사용하여웨스턴블롯을수행하였다. 두항혈청모두일본뇌염바이러스에감염된 BHK-21 세포에서 ~103-kDa 크기의 NS5 단백질이인지되었으며, 이단백질밴드는바이러스가감염되지않은세포에서는탐지되지않았다 (Fig. 4A). 또한, 예상하지않았던여러개의단백질들 (Fig. 4A, 별표 ) 이일본뇌염바이러스가감염된세포에서특이적으로인지되는것을알수있었다. 다음으로, ~103-kDa 크기의 NS5 단백질보다작은크기의여러단백질들이 BHK-21 세포에서만비정상적으로나타나는것인지, 아니면다른감염된세포주에서도관찰되는지를알아보고자일본뇌염바이러스에감수성을나타내는또다른세포주인 Vero 세포를사용하여웨스턴블롯을수행하였다. Fig. 4B에나타낸것과같이, Vero 세포에서도 BHK-21 세포에서관찰된것과같은여러개의단백질들이 α-ns5n과 α-ns5c 항혈청에의해서인지되는것을알수있었다. 그러나, 이들이 BHK-21 세포에서인지된것과동일한단백질인지는알수없다. 그러므로, 본실험을통해서일본뇌염바이러스의 NS5 단백질에특이적으로반응하는마우스항혈청을확보하였으며, 또한일본뇌염바이러스에감염된 2 세포주에서 ~103-kDa 의 NS5 단백질이외에 NS5 단백질과연관된크기가작은다수의바이러스단백질이존재하는것을발견하였다. 앞으로이들에대한추가연구를통해서 NS5 단백질뿐만아니라, 이와연관된단백질들이바이러스의증식에어떠한역할을규명할필요가있다.

7 JEV NS5 Antibody 59 고찰본연구에서일본뇌염바이러스 NS5 단백질의 N-말단부위 (275개아미노산 ) 와 C-말단부위 (461개아미노산 ) 을 GST의 C-말단에결합하여 GST fusion protein 형태로 E. coli에서발현및정제를하였으며, 이들에대한마우스항혈청을각각생산하였다. 이렇게얻어진항혈청은일본뇌염바이러스가감염된세포 (BHK-21과 Vero) 에서 ~103-kDa 크기의 NS5 단백질뿐아니라, 기존에알려지지않았던여러개의 NS5와연관된바이러스단백질들을인지하는것을알수있었다. 본연구결과합성된재조합단백질과항혈청은앞으로일본뇌염바이러스의 NS5 단백질이게놈 RNA 복제뿐아니라, 세포와어떠한상호작용을하는지에대한연구에기여할것으로생각된다. 지금까지보고된연구결과에의하면일본뇌염바이러스를포함한플라비바이러스의 NS5 단백질은 methyltransferase와 RdRp 기능을함께가진다기능단백질이다 (13). 최근에밝혀진 methyltransferase 기능의경우, NS5의 N- 말단부위에위치하고있으며게놈 RNA의 5'-말단에캡구조를첨가하는반응에작용하는것으로알려져있다 (15, 24). Methylation 반응에작용하는주요아미노산을다른잔기로치환시키면바이러스의증식이억제된다는사실이보고된바있으며, 이것은 methyltransferase의기능이바이러스의복제사이클에매우중요한역할을한다는것을의미한다 (24, 25). 특히흥미로운사실은 WNV NS5 단백질에의한 guanine cap의 N-7 methylation 은 WNV의염기서열에특이적으로일어난다는사실이다 (24, 26). 이것은 WNV NS5가바이러스의 5'-말단또는다른부위에있는특정염기서열이나 2차구조를인식하여, 바이러스에특이적으로 methylation 반응에작용한다는것을의미한다. 앞으로일본뇌염바이러스 NS5의 methyltransferase 기능에대한특성을분석 비교함으로써, 이바이러스에대한치료제개발에중요한기초자료를제공할수있을것으로기대한다. NS5 단백질의또다른주요기능은 RdRp이며, 이효소의활성은새롭게합성되는게놈 RNA의중합 (polymerization) 에직접작용한다. 최근 in vitro assay를통해서 DENV NS5의 RdRp가게놈 RNA의어떠한부위를처음으로인지하는지, 어떠한작용기전에의해서 RNA 합성이시작되는지에대한연구결과가보고된바있다 (27~ 29). 이연구결과에따르면, NS5 단백질은게놈 RNA의 5'-말단에있는특정 stem-loop structure를최초로인식하여이부위에결합하는것으로알려져있다. 이후 NS5 단백질은게놈 RNA의 3'-말단에있는또다른 stem-loop structure (3'SL) 로이동한후 RNA 합성을시작하는것으로추정된다. 다른플라비바이러스와는달리, 일본뇌염바이러스의경우지금까지적절한항체와다른실험재료들의결핍으로인해서 NS5 단백질에대한연구가활발하게이루어지지못했다. 본연구에서얻어진일본뇌염바이러스 NS5 단백질에대한항혈청은앞으로바이러스복제시이단백질의역할, 특히 proteolytic processing과관련된기능에대한특성분석에활용될수있을것으로기대한다. 또한앞으로 NS5 단백질의특정부위에대한단클론항체를생산함으로써일본뇌염바이러스와유사한다른플라비바이러스의감별진단등에활용될수있을것으로생각한다. 참고문헌 1) Burke DS, Leake CJ Japanese encephalitis, In Monath TP (ed.), The Arboviruses: Epidemiology and Ecology, vol III, pp.63-92, CRC Press, Florida. 2) Vaughn DW, Hoke CH Jr. The epidemiology of Japanese encephalitis: prospects for prevention. Epidemiol Rev 1992; 14: ) Tsai TF. New initiatives for the control of Japanese encephalitis by vaccination: Minutes of a WHO/CVI meeting, Bangkok, Thailand, October Vaccine 2000;18: ) Hashimoto H, Nomoto A, Watanabe K, Mori T, Takezawa T, Arizawa C, Takegami T, Hiramatsu K. Molecular cloning and complete nucleotide sequence of the genome of Japanese encephalitis virus Beijing-1 strain. Virus Genes 1988;1: ) World Health Organization Japanese encephalitis vaccines. Wkly Epidemiol Rec 1998;73: ) Hanna JN, Ritchie SA, Phillips DA, Lee JM, Hills SL, van den Hurk AF, Pyke AT, Johansen CA, Mackenzie JS. Japanese encephalitis in north Queensland, Australia Med J Aust 1999;170: ) Mackenzie JS, Poidinger M, Phillips DA, Johansen CA, Hall RA, Hanna JN, Ritchie SA, Shield J, Graham R Emergence of Japanese encephalitis virus in the Australian region, In Saluzzo J, Dodet B (eds.), Factors in the Emergence

8 60 J-M Kim, et al. of Arboviruses Diseases, pp , Elsevier, Paris. 8) Shield J, Hanna JN, Phillips DA. Reappearance of the Japanese encephalitis virus in the Torres Strait. Comm Dis Intel 1996; 20:191. 9) Spicer PE, Phillips D, Pike A, Johansen C, Melrose W, Hall RA. Antibodies to Japanese encephalitis virus in human sera collected from Irian Jaya: Follow-up of a previously reported case of Japanese encephalitis in that region. Trans R Soc Trop Med Hyg 1999;93: ) Rice CM Flaviviridae: The viruses and their replication, In Fields BN, Knipe DM, Howley PM (eds.), Fields Virology, 3 rd ed, pp , Lippincott-Raven Publishers, Philadelphia. 11) Thiel HJ, Plagemann PGW, Moennig V Pestiviruses, In Fields BN, Knipe DM, Howley PM (eds.), Fields Virology, 3 rd ed, pp , Lippincott-Raven Publishers, Philadelphia. 12) Burke DS, Monath TP Flaviviruses, In Knipe DM, Howley PM, Griffin DE, Lamb RA, Martin MA, Roizman B, Straus SE (eds.), Fields Virology, 4 th ed, pp , Lippincortt Williams & Wilkins, Philadelphia. 13) Lindenbach BD, Rice CM Flaviviridae: The viruses and their replication, In Knipe DM, Howley PM, Griffin DE, Lamb RA, Martin MA, Roizman B, Straus SE (eds.), Fields Virology, 4 th ed, pp , Lippincortt Williams & Wilkins, Philadelphia. 14) Chambers TJ, Hahn CS, Galler R, Rice CM. Flavivirus genome organization, expression, and replication. Annu Rev Microbiol 1990;44: ) Egloff MP, Benarroch D, Selisko B, Romette JL, Canard B. An RNA cap (nucleoside-2'-o-)-methyltransferase in the flavivirus RNA polymerase NS5: crystal structure and functional characterization. EMBO J 2002;21: ) Koonin EV. Computer-assisted identification of a putative methyltransferase domain in NS5 protein of flaviviruses and lambda 2 protein of reovirus. J Gen Virol 1993;74: ) Ackermann M, Padmanabhan R. De novo synthesis of RNA by the dengue virus RNA-dependent RNA polymerase exhibits temperature dependence at the initiation but not elongation phase. J Biol Chem 2001;276: ) Guyatt KJ, Westaway EG, Khromykh AA. Expression and purification of enzymatically active recombinant RNAdependent RNA polymerase (NS5) of the flavivirus Kunjin. J Virol Methods 2001;92: ) Tan BH, Fu J, Sugrue RJ, Yap EH, Chan YC, Tan YH. Recombinant dengue type 1 virus NS5 protein expressed in Escherichia coli exhibits RNA-dependent RNA polymerase activity. Virology 1996;216: ) Medin CL, Fitzgerald KA, Rothman AL. Dengue virus nonstructural protein NS5 induces interleukin-8 transcription and secretion. J Virol 2005;79: ) Best SM, Morris KL, Shannon JG, Robertson SJ, Mitzel DN, Park GS, Boer E, Wolfinbarger JB, Bloom ME. Inhibition of interferon-stimulated JAK-STAT signaling by a tick-borne flavivirus and identification of NS5 as an interferon antagonist. J Virol 2005;79: ) Yun SI, Kim SY, Choi WY, Nam JH, Ju YR, Park KY, Cho HW, Lee YM. Molecular characterization of the full-length genome of the Japanese encephalitis viral strain K87P39. Virus Res 2003;96: ) Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T Molecular cloning: a laboratory manual, second ed., Cold Spring Harbor Laboratory, New York. 24) Ray D, Shah A, Tilgner M, Guo Y, Zhao Y, Dong H, Deas TS, Zhou Y, Li H, Shi PY. West Nile virus 5'-cap structure is formed by sequential guanine N-7 and ribose 2'-O methylations by nonstructural protein 5. J Virol 2006;80: ) Zhou Y, Ray D, Zhao Y, Dong H, Ren S, Li Z, Guo Y, Bernard KA, Shi PY, Li H. Structure and function of flavivirus NS5 methyltransferase. J Virol 2007;81: ) Dong H, Ray D, Ren S, Zhang B, Puig-Basagoiti F, Takagi Y, Ho CK, Li H, Shi PY. Distinct RNA elements confer specificity to flavivirus RNA cap methylation events. J Virol 2007;81: ) Alvarez DE, De Lella Ezcurra AL, Fucito S, Gamarnik AV. Role of RNA structures present at the 3'UTR of dengue virus on translation, RNA synthesis, and viral replication. Virology 2005;339: ) Filomatori CV, Lodeiro MF, Alvarez DE, Samsa MM, Pietrasanta L, Gamarnik AV. A 5' RNA element promotes dengue virus RNA synthesis on a circular genome. Genes Dev 2006;20: ) Lodeiro MF, Filomatori CV, Gamarnik AV. Structural and functional studies of the promoter element for dengue virus RNA replication. J Virol 2009;83:

Cloning

Cloning Takara 와함께하는 Cloning 2014-11-13 다카라코리아바이오메디칼 목차 Cloning 이란? Cloning Flow Chart Cloning DNA / RNA 추출 High Fidelity PCR 제한효소 /ligation/e.coli 형질전환 Clone 확인 이것만은꼭!!! 2 Cloning 이란? Clone 세포나개체의증식에의해서생긴유전적으로동일한세포군

More information

Chapter 26

Chapter 26 11 주 RNA 합성 11.1 DNA-dependent synthesis of RNA: Bacteria에서의 transcription l RNA polymerase (5 subunits로구성 : 2α, β, β, σ) l 효소에의한 RNA 합성의특징 - Complementary sequence to template DNA - RNA chain의합성방향 : 5

More information

항체 포털 서비스 Preparation Peptide 총 4주 소요 / 473,000 ~ 511,000 Free of charge 2~3 days 243,000 ~ 281,000 의뢰서 작성 Peptide epitope prediction 유전자 정보

항체 포털 서비스 Preparation Peptide 총 4주 소요 / 473,000 ~ 511,000 Free of charge 2~3 days 243,000 ~ 281,000 의뢰서 작성 Peptide epitope prediction 유전자 정보 Preparation Service AbFrontier Custom service 장점 실험 담당자와의 원활한 1:1 커뮤니케이션 (신속한 feedback을 통한 맞춤형 제작 서비스) 고객연구센터 - 개별 서비스의 진행 상황 및 결과 즉시 확인 http://center.abfrontier.com (e-mail & SMS 전송) 회원제 -연구자의 프로젝트 보안

More information

untitled

untitled 3. 농업환경연구과 과제구분 기본연구 수행시기 전반기 연구과제 및 세부과제 수행 기간 소 속 책임자 농가에 적합한 부식성곤충 대량 사육기술 개발 12~ 13 농업환경연구과 곤충팀 이영혜 1) 부식성 곤충 먹이 제조 기술 개발 12~ 13 농업환경연구과 곤충팀 이영혜 색인용어 부식성곤충, 장수풍뎅이, 계통, 먹이제조 ABSTRACT In first check,

More information

Lumbar spine

Lumbar spine Lumbar spine CT 32 111 DOI : 10.3831/KPI.2010.13.2.111 Lumbar Spine CT 32 Received : 10. 05. 23 Revised : 10. 06. 04 Accepted : 10. 06. 11 Key Words: Disc herniation, CT scan, Clinical analysis The Clinical

More information

DBPIA-NURIMEDIA

DBPIA-NURIMEDIA Mass-production of Four Specific Proteins Originated from Deformed Wing Virus, Honeybee-viral Pathogen Joo-seong Lee, Giang Thi Huong Luong and Byoung-Su Yoon* Department of Life Science, College of Natural

More information

cdna의신장반응이저해된다. 이와같이 AMV 유래 RTase 와 MoMLV 유래 RTase 는모두일장일단을가지나필자는 MoMLV 유래 RTase 를선호한다. 또두효소는최적 ph, 최적염농도등에서도차이가있으므로주의해야한다. 최근 Myers 등은 RTase 활성과 PCR

cdna의신장반응이저해된다. 이와같이 AMV 유래 RTase 와 MoMLV 유래 RTase 는모두일장일단을가지나필자는 MoMLV 유래 RTase 를선호한다. 또두효소는최적 ph, 최적염농도등에서도차이가있으므로주의해야한다. 최근 Myers 등은 RTase 활성과 PCR RT-PCR 법 II. 역전사효소반응 ( 주 ) 다인바이오연구소 현재분자생물학분야에서 RNA 수준의 gene expression ( 유전자발현 ) 과 cdna (complementary DNA) cloning에널리이용되고있는 RT-PCR (Reverse transcription ploymerase chain reaction) 은생명정보가 DNA에서 RNA로전달된다는분자생물학분야의

More information

mau A B C Qsepharose051229manual001:1_UV@01,SHFT Qsepharose051229manual001:1_Conc Qsepharose051229manual001:1_Fractions Qsepharose051229manual001:1_Inject Manual run 3:1_UV@01,SHFT Manual run 3:1_Fractions

More information

°Ç°�°úÁúº´5-44È£ÃÖÁ¾

°Ç°�°úÁúº´5-44È£ÃÖÁ¾ K O R E A C E N T E R S F O R D I S E A S E C O N T R O L & P R E V E N T I O N PHWR Vol. 5 No. 44 www.cdc.go.kr/phwr 2012 11 2 5 44 ISSN:2005-811X Vector surveillance after elimination of lymphatic filariasis

More information

K O R E A C E N T E R S F O R D I S E A S E C O N T R O L & P R E V E N T I O N PHWR Vol. 5 No. 41 www.cdc.go.kr/phwr 2012 10 12 5 41 ISSN:2005-811X Comparison of drug-susceptibility test to the anti-tuberculosis

More information

01 Buffers & Gel Stain Buffers 3 Gel Stain SilverStar Staining Kit 6

01 Buffers & Gel Stain Buffers 3 Gel Stain SilverStar Staining Kit 6 Buffers & Gel Stain Chemicals Buffers & Chemicals Phone: 1588-9788 (ext.4->2) Email: reagents-support@bioneer.co.kr 01 Buffers & Gel Stain Buffers 3 Gel Stain SilverStar Staining Kit 6 Buffers Overview

More information

l l l l l l l l l Lee, Geon Kook None This project was designed to establish the Tumor Bank of National Cancer Center in 2000. From the first tumor sample in 2000, the total of tumor and tumor-related

More information

139~144 ¿À°ø¾àħ

139~144 ¿À°ø¾àħ 2 139 DOI : 10.3831/KPI.2010.13.2.139 2 Received : 10. 04. 08 Revised : 10. 04. 26 Two Case Report on Wrist Ganglion Treated with Scolopendrid Pharmacopuncture Accepted : 10. 05. 04 Key Words: Wrist Ganglion,

More information

EZ-Cloning kit

EZ-Cloning kit EZ TM 5 /3 RACE PCR Kit Instruction Manual Korean Ver. Kit for 10 reactions Cat.# EZ025 EZ TM 5 /3 RACE PCR Kit Table of Contents I. 제품설명... 3 II. 원리... 4 III. 제품구성... 7 IV. 염기서열정보... 8 V. 주의사항... 8 VI.

More information

α α α α α

α α α α α α α α α α α α α 太陰調胃湯加減方 dbdb 마우스 肝에 대한 아디포사이토카인 및 발현에 미치는 영향 SREBPs 와 섞어서 하고 마커 또한 하여 전기 영동을 하였다 전기영동을 한 후에 에 를 쪼여서 각 를 확인하였다 이 를 프로그램을 이용해 수치화하 여 분석하였다 肝 조직 동결 절편 분리한 조직은 로 시간 동안 고정 시킨 후 에 세척한 후 물기를

More information

°Ç°�°úÁúº´6-2È£

°Ç°�°úÁúº´6-2È£ K O R E A C E N T E R S F O R D I S E A S E C O N T R O L & P R E V E N T I O N PHWR Vol. 6 No. 2 www.cdc.go.kr 2013 1 11 6 2 ISSN:2005-811X Flavivirus surveillance in mosquitoes collected from the quarantine

More information

Chapter 6. Nucleotides and Nucleic Acids 세포대사에서뉴클레오타이드 (nucleotide) 의기능은무엇인가? Objective 유전체학 (genomics) 과단백체학 (proteomics) 기본개념이해 재조합 DNA 기술 (recombin

Chapter 6. Nucleotides and Nucleic Acids 세포대사에서뉴클레오타이드 (nucleotide) 의기능은무엇인가? Objective 유전체학 (genomics) 과단백체학 (proteomics) 기본개념이해 재조합 DNA 기술 (recombin Chapter 6. Nucleotides and Nucleic Acids 세포대사에서뉴클레오타이드 (nucleotide) 의기능은무엇인가? Objective 유전체학 (genomics) 과단백체학 (proteomics) 기본개념이해 재조합 DNA 기술 (recombinant DNA technology) 란? - 효소의보조인자, 대사중간산물구성성분, 유전정보함유등

More information

01-15(3)-12(최장경).fm

01-15(3)-12(최장경).fm Res. Plant Dis. 15(3) : 165-169 (2009) Research in Plant Disease The Korean Society of Plant Pathology GM s ü š w Cucumber mosaic virus v y 1 Á y Á»x 1 Á * w w, 1 w y w Comparative Analysis of Coat Protein

More information

PowerPoint Presentation

PowerPoint Presentation Interchapeter B : 핵산생물공학기술 (part A) Recombinant DNA techniques - 전기영동 - 제한효소 - 클로닝 - 대장균을이용한단백질대량생산 Agarose mesh DNA 분리기술 : Agarose Gel Electrophoresis ( 수평형 ) _ + DNA is negatively charged from the phosphate

More information

°ø±â¾Ð±â±â

°ø±â¾Ð±â±â 20, 30, 40 20, 30, 40 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 3.1 6.3 9.4 12.6 15.7 18.8 22.0 25.1 28.3 31.4 2.4 4.7 7.1 9.4 11.8 14.1 16.5 18.8 21.2 23.6 7.1 14.1 21.2 28.3 35.3 42.4 49.5 56.5 63.6 70.7 5.9 11.9 17.8 23.7

More information

SMARTer 시리즈

SMARTer 시리즈 SMARTer 시리즈 SMARTer Solutions 2014.12.17 다카라코리아바이오메디칼 SMART 하게실험하고 SMARTer 한결과를얻는방법 Clontech SMARTer 시리즈 Contents 1. Introduction 1. 역전사반응이란? 2. 기존역전사반응의한계 2. SMARTer 시리즈 1. SMARTer 란? 2. SMARTer 시리즈와적용

More information

<30322EC6AFC1FD30342DC1A4B9AEC7F62E687770>

<30322EC6AFC1FD30342DC1A4B9AEC7F62E687770> 대한내과학회지: 제 77 권 제 2 호 2009 특 집(Special Review) - 신종 감염병의 최신 지견 뎅기열 인하대학교 의학전문대학원 내과학교실 감염내과 정 문 현 Dengue fever Moon-Hyun Chung, M.D. Division of Infectious Diseases, Department of Internal Medicine, College

More information

Chapter 14 유전정보 (Genetic Information) A + G = C + T 일정 ( 샤가프룰 ] - Watson & Crick(1953년 ) : double helix model of DNA( 이중나선구조 ) 제시 1. 유전정보의전달경로 DNA 상의정

Chapter 14 유전정보 (Genetic Information) A + G = C + T 일정 ( 샤가프룰 ] - Watson & Crick(1953년 ) : double helix model of DNA( 이중나선구조 ) 제시 1. 유전정보의전달경로 DNA 상의정 Chapter 14 유전정보 (Genetic Information) A + G = C + T 일정 ( 샤가프룰 ] - Watson & Crick(1953년 ) : double helix model of DNA( 이중나선구조 ) 제시 1. 유전정보의전달경로 DNA 상의정보를 RNA로옮겨주는과정 ex) retrovirus 2. DNA Replication ( 유전자복제

More information

미생물분류는형태적특징, 생리 생화학적성질과상태, 화학분류학적성질과상태등을이용하여구분하는것이일반적이지만, 이와같은방법을이용하면많은시간을필요로한다. 또한분류가힘든경우나, 정확하지못한결과를얻는경우도있다. 최근미생물분류에도분자생물학적인방법을이용하여, 미생물이가지고있는 DNA를

미생물분류는형태적특징, 생리 생화학적성질과상태, 화학분류학적성질과상태등을이용하여구분하는것이일반적이지만, 이와같은방법을이용하면많은시간을필요로한다. 또한분류가힘든경우나, 정확하지못한결과를얻는경우도있다. 최근미생물분류에도분자생물학적인방법을이용하여, 미생물이가지고있는 DNA를 Code RR180A - 연구용 - Bacterial 16S rdna PCR Kit 사용설명서 v201011da 미생물분류는형태적특징, 생리 생화학적성질과상태, 화학분류학적성질과상태등을이용하여구분하는것이일반적이지만, 이와같은방법을이용하면많은시간을필요로한다. 또한분류가힘든경우나, 정확하지못한결과를얻는경우도있다. 최근미생물분류에도분자생물학적인방법을이용하여, 미생물이가지고있는

More information

3월 온라인 교육

3월 온라인 교육 2013 년 2 분기대리점집체교육 - Protein - Takara Korea Biomedical Protein Workflow Chapter 1: 샘플준비 Chapter 2: Electrophoresis -Precast gel (Lonza/NuSep) -ProSieve EX running buffer -Protein marker Chapter 3: Staining

More information

김도희_HT protein expression 표준 보고서_v1.5

김도희_HT protein expression 표준 보고서_v1.5 Production of Recombinant Proteins For Further Information, Please Contact Neurogenex Co., Ltd. Biotechnology Incubating Center "Golden Helix" Seoul Natl' Univ. Seoul 151-744, Korea TEL 82-2-875-8998 FAX

More information

Journal of Educational Innovation Research 2018, Vol. 28, No. 1, pp DOI: * A Analysis of

Journal of Educational Innovation Research 2018, Vol. 28, No. 1, pp DOI: * A Analysis of Journal of Educational Innovation Research 2018, Vol. 28, No. 1, pp.99-117 DOI: http://dx.doi.org/10.21024/pnuedi.28.1.201803.99 2015 * A Analysis of the Characters and Issues about the 2015 Revised Social

More information

..........5-45..

..........5-45.. K O R E A C E N T E R S F O R D I S E A S E C O N T R O L & P R E V E N T I O N PHWR Vol. 5 No. 45 www.cdc.go.kr 2012 11 9 5 45 ISSN:2005-811X Monitoring of antimicrobial resistance on non-tertiary hospitals

More information

A Study on Married Female Immigrants Life Style and Marriage Satisfaction in Terms of Preparing Their Old Age in Chungcheongnam-do Department of Gerontology, Hoseo University Doctoral Student : Hi Ran

More information

°Ç°�°úÁúº´6-13È£ÀÛ¾÷

°Ç°�°úÁúº´6-13È£ÀÛ¾÷ K O R E A C E N T E R S F O R D I S E A S E C O N T R O L & P R E V E N T I O N PHWR Vol. 6 No. 13 www.cdc.go.kr 2013 3 29 6 13 ISSN: 2005-811X 10-years of Hepatitis B Perinatal Transmission Prevention

More information

Chapter 11

Chapter 11 Chapter 15 RNA Polymerase II: Basal Transcription 1 Eukaryotic and bacterial RNA polymerases differ in some aspects 1. eukaryotes have three RNA polymerases, with one each specifically dedicated to rrna,

More information

A

A 2009 4 A270412 < 차례> 1 요약 1 2 심사경위 2 3 심사경과 2 4 심사방법 3 5 심사신청자료검토 3 51 심사신청된식품의개요 3 52 식품으로의적합성검토 3 53 유전자재조합체의안전성 3 가 유전자재조합체의개발목적및이용방법에관한자료 3 나 숙주에관한자료 4 (1) 분류학적특성( 일반명 학명 계통분류등) 4 (2) 재배및품종개량의역사 4

More information

135 Jeong Ji-yeon 심향사 극락전 협저 아미타불의 제작기법에 관한 연구 머리말 협저불상( 夾 紵 佛 像 )이라는 것은 불상을 제작하는 기법의 하나로써 삼베( 麻 ), 모시( 苧 ), 갈포( 葛 ) 등의 인피섬유( 靭 皮 纖 維 )와 칠( 漆 )을 주된 재료

135 Jeong Ji-yeon 심향사 극락전 협저 아미타불의 제작기법에 관한 연구 머리말 협저불상( 夾 紵 佛 像 )이라는 것은 불상을 제작하는 기법의 하나로써 삼베( 麻 ), 모시( 苧 ), 갈포( 葛 ) 등의 인피섬유( 靭 皮 纖 維 )와 칠( 漆 )을 주된 재료 MUNHWAJAE Korean Journal of Cultural Heritage Studies Vol. 47. No. 1, March 2014, pp.134~151. Copyright 2014, National Research Institute of Cultural Heritage 심향사 극락전 협저 아미타불의 제작기법에 관한 연구 정지연 a 明 珍 素 也

More information

386-390.hwp

386-390.hwp 386 HANYANG MEDICAL REVIEWS Vol. 29 No. 4, 2009 우리나라 미숙아의 통계와 의료비용 Statistics and Medical Cost of Preterm in Korea 윤혜선 을지대학교 노원을지병원 소아청소년과학교실 Hye Sun Yoon, M.D., Ph.D., Department of Pediatrics, Nowon

More information

Can032.hwp

Can032.hwp Chromosomal Alterations in Hepatocellular Carcinoma Cell Lines Detected by Comparative Genomic Hybridization Sang Jin Park 1, Mahn Joon Ha, Ph.D. 1, Hugh Chul Kim, M.D. 2 and Hyon Ju Kim, M.D. 1 1 Laboratory

More information

MHC T cell Receptor Antigen Antigen-presenting cell Antigen-reactive T cell CD28 B7 Activation (proliferation Cytokine production Cytotoxicity) Antigen-presenting cell Antigen-reactive T cell Dormant State

More information

012임수진

012임수진 Received : 2012. 11. 27 Reviewed : 2012. 12. 10 Accepted : 2012. 12. 12 A Clinical Study on Effect of Electro-acupuncture Treatment for Low Back Pain and Radicular Pain in Patients Diagnosed with Lumbar

More information

01 Automated Protein Expression and Purification Using ExiProgen Selection Guide 267 ExiProgen EC Protein Synthesis Kit 268 ExiProgen EC-Maxi Protein

01 Automated Protein Expression and Purification Using ExiProgen Selection Guide 267 ExiProgen EC Protein Synthesis Kit 268 ExiProgen EC-Maxi Protein Automated Protein Expression and Purification Using ExiProgenTM Manual Protein Expression and Purification Preparation of Template DNA for Protein Expression Protein Service Protein Expression and Purification

More information

뉴스지14호-칼라

뉴스지14호-칼라 2 3 4 5 6 TaKaRa Taq TM / TaKaRa Ex Taq TM / TaKaRa LA Taq TM / Pyrobest TM DNA Polymerase/ TaKaRa Z -Taq TM TaKaRa Taq TM TaKaRa Ex Taq TM TaKaRa LA Taq TM TaKaRa Z-Taq TM Pyrobest TM DNA Polymerase 7

More information

,......

,...... The Impact of Personal Traits, Family Characteristics, and Job Satisfaction on the Psychological Well-Being of Middle Aged Men from the Baby Boomer Generation Working in Large Corporations Department of

More information

Chapter 4. Bacteria (the first microbes)

Chapter 4. Bacteria (the first microbes) - DNA 정제후클로닝을위한효소적절단과연결필요 -> restriction enzyme, ligase 가중요 1. DNA 조작효소범위 - 촉매반응에따라 5 분류 1. Nuclease : 핵산분자의절단, 단편화 2. Ligase : 핵산분자의연결 3. Polymerase : DNA 사슬합성 4. Modifying enzyme : 화학기능기의첨가, 제거 5. Topoisomerase

More information

03이경미(237~248)ok

03이경미(237~248)ok The recent (2001-2010) changes on temperature and precipitation related to normals (1971-2000) in Korea* Kyoungmi Lee** Hee-Jeong Baek*** ChunHo Cho**** Won-Tae Kwon*****. 61 (1971~2000) 10 (2001~2010).

More information

DBPIA-NURIMEDIA

DBPIA-NURIMEDIA Original Article Journal of Apiculture 31(2) : 121~131 (2016) The Most Rapid Detection Method against Korean Sacbrood Virus using Ultra-Rapid Reverse-Transcription Real-Time PCR (URRTRT-PCR) Sang-Hyun

More information

03-ÀÌÁ¦Çö

03-ÀÌÁ¦Çö 25 3 (2004 9 ) J Korean Oriental Med 2004;25(3):20-31 1), 2), 3) 1) 2) 3) Grope for a Summary Program about Intellectual Property Protection of Traditional Knowledge (TK)etc. Discussed in WIPO Hwan-Soo

More information

γ

γ 경락경혈학회지 Vol.27, No.1, pp.87 106, 2010 Journal of Meridian & Acupoint Dept. of 1 Meridian & Acupoint, 3 Acupuncture & Moxibustion, College of Oriental Medicine, Daejeon University 2 Division of Clinical

More information

Pharmacotherapeutics Application of New Pathogenesis on the Drug Treatment of Diabetes Young Seol Kim, M.D. Department of Endocrinology Kyung Hee Univ

Pharmacotherapeutics Application of New Pathogenesis on the Drug Treatment of Diabetes Young Seol Kim, M.D. Department of Endocrinology Kyung Hee Univ Application of New Pathogenesis on the Drug Treatment of Diabetes Young Seol Kim, M.D. Department of Endocrinology Kyung Hee University College of Medicine & Hospital E mail : ycell2@yahoo.co.kr Abstract

More information

THE JOURNAL OF KOREAN INSTITUTE OF ELECTROMAGNETIC ENGINEERING AND SCIENCE Nov.; 26(11),

THE JOURNAL OF KOREAN INSTITUTE OF ELECTROMAGNETIC ENGINEERING AND SCIENCE Nov.; 26(11), THE JOURNAL OF KOREAN INSTITUTE OF ELECTROMAGNETIC ENGINEERING AND SCIENCE. 2015 Nov.; 26(11), 985991. http://dx.doi.org/10.5515/kjkiees.2015.26.11.985 ISSN 1226-3133 (Print)ISSN 2288-226X (Online) Analysis

More information

A Study on the Relationships between Self-Differentiation and Adaptability Factors for Senior Dementia Patients Care Givers Department of Social Welfare, Seoul Welfare Graduate University Full-time Lecturer

More information

1607 - 1 - - 2 - - 3 - 그림 1-4 - - 5 - 그림 3 농도에따른댓잎추출액의항세균효과 - 6 - 그림 4 한천확산법 그림 5 배지에균뿌리는과정 그림 6 배지에균스프레딩하는과정 표 1 실험에사용한미생물의종류와배양에사용한배지 Bacterial Strain Gram (+) bacteria Rothia dentocariosa G1201 Streptococcus

More information

9(3)-4(p ).fm

9(3)-4(p ).fm w wz J. Kor. Soc. Cloth. Ind. 9«3y, 2007 Vol. 9, No. 3, pp.319-326(2007) w xk x p w q w Analysis of Foot Characteristics According to the Classification of Foot Types of Junior High School Girls Ji-Young

More information

Journal of Educational Innovation Research 2018, Vol. 28, No. 3, pp DOI: * Strenghening the Cap

Journal of Educational Innovation Research 2018, Vol. 28, No. 3, pp DOI:   * Strenghening the Cap Journal of Educational Innovation Research 2018, Vol. 28, No. 3, pp.27-43 DOI: http://dx.doi.org/10.21024/pnuedi.28.3.201809.27 * Strenghening the Capacity of Cultural Arts Required in Special Education

More information

목차 1. 서론 줄기세포의간세포분화능평가시고려사항 간세포분화능평가시험법 분

목차 1. 서론 줄기세포의간세포분화능평가시고려사항 간세포분화능평가시험법 분 세포치료제시험정보집 7 줄기세포치료제의 간세포분화능평가시험 2015. 4. 30. 식품의약품안전평가원 차세대줄기세포기반제제평가연구사업단 목차 1. 서론 --------------------------------------------- 1 2. 줄기세포의간세포분화능평가시고려사항 --------------- 2 3. 간세포분화능평가시험법 -----------------------------

More information

PowerPoint 프레젠테이션

PowerPoint 프레젠테이션 Glutathione Excellose handbook - Purification of GST fusion proteins - Looking for more detail Purification protocol? - Glutathione Excellose Spin Kit - Glutathione MiniExcellose - Glutathione Excellose

More information

Kor. J. Aesthet. Cosmetol., 및 자아존중감과 스트레스와도 밀접한 관계가 있고, 만족 정도 에 따라 전반적인 생활에도 영향을 미치므로 신체는 갈수록 개 인적, 사회적 차원에서 중요해지고 있다(안희진, 2010). 따라서 외모만족도는 개인의 신체는 타

Kor. J. Aesthet. Cosmetol., 및 자아존중감과 스트레스와도 밀접한 관계가 있고, 만족 정도 에 따라 전반적인 생활에도 영향을 미치므로 신체는 갈수록 개 인적, 사회적 차원에서 중요해지고 있다(안희진, 2010). 따라서 외모만족도는 개인의 신체는 타 RESEARCH ARTICLE Kor. J. Aesthet. Cosmetol., 20-40대 여성의 외모만족도가 미용관리태도에 미치는 영향 홍수남 1, 김효숙 2 * 1 건국대학교 뷰티사이언스디자인학과, 2 건국대학교 의상디자인과 Effects of Extrinsic Body Satisfaction on Beauty Management Behavior of

More information

DBPIA-NURIMEDIA

DBPIA-NURIMEDIA The e-business Studies Volume 17, Number 6, December, 30, 2016:3~20 Received: 2016/12/04, Accepted: 2016/12/27 Revised: 2016/12/27, Published: 2016/12/30 [ABSTRACT] This study aims to comprehensively analyze

More information

16(1)-3(국문)(p.40-45).fm

16(1)-3(국문)(p.40-45).fm w wz 16«1y Kor. J. Clin. Pharm., Vol. 16, No. 1. 2006 x w$btf3fqpsu'psn û w m w Department of Statistics, Chonnam National University Eunsik Park College of Natural Sciences, Chonnam National University

More information

<B8F1C2F72E687770>

<B8F1C2F72E687770> 제1장 제17장 성홍열 및 사슬알균 감염증 사슬알균 (Streptococci)은 증식 중의 특징적으로 쌍 또는 사슬모양의 그람양성 알균 으로 catalase 음성, 통성혐기성균이며, 보통 한천배지에서는 발육이 어렵고 혈액이나 혈청 등을 첨가한 배지에서 잘 발육한다. 포도당이나 다른 탄수화물을 분해하나 포도당 을 분해하여 가스를 생성하지 않는다. 이들은 최소

More information

12이문규

12이문규 Review on Conservative Treatment of Spinal Scoliosis Moon-kyu Lee, O.M.D., Gil-jae Lee, O.M.D., Yun-kyung Song, O.M.D., Hyung-ho Lim, O.M.D. Dept. of Oriental Rehabilitation Medicine College of Oriental

More information

Abstract Musculoskeletal Symptoms and Related Factors for Nurses and Radiological Technologists Wearing a Lead Apron for Radiation Pro t e c t i o n Jung-Im Yoo, Jung-Wan Koo 1 ) Angio Unit, Team of Radiology,

More information

DBPIA-NURIMEDIA

DBPIA-NURIMEDIA 한국소음진동공학회 2015추계학술대회논문집년 Study of Noise Pattern and Psycho-acoustics Characteristic of Household Refrigerator * * ** ** Kyung-Soo Kong, Dae-Sik Shin, Weui-Bong Jeong, Tae-Hoon Kim and Se-Jin Ahn Key Words

More information

Journal of Educational Innovation Research 2017, Vol. 27, No. 3, pp DOI: (NCS) Method of Con

Journal of Educational Innovation Research 2017, Vol. 27, No. 3, pp DOI:   (NCS) Method of Con Journal of Educational Innovation Research 2017, Vol. 27, No. 3, pp.181-212 DOI: http://dx.doi.org/10.21024/pnuedi.27.3.201709.181 (NCS) Method of Constructing and Using the Differentiated National Competency

More information

System Biology Core

System Biology Core System Biology Core 연세의생명연구원연구지원부 _ 연세유전체센터 The RNAi Consortium (TRC) shrna 안내 Ⅰ. MISSION shrna 의설계 MIT 와 Harvard 의 Broad Institute 의 The RNAi Consortium (TRC) 에서설계하고개발한 MISSION shrna clones 는 21 base

More information

- i - - ii - - iii - - iv - - v - - 1 - - 2 - - 3 - - 4 - - 5 - - 6 - - 7 - - 8 - - 9 - - 10 - - 11 - - 12 - - 13 - - 14 - - 15 - - 16 - - 17 - - 18 - - 19 - α α - 20 - α α α α α α - 21 - - 22 - - 23 -

More information

<31372DB9DABAB4C8A32E687770>

<31372DB9DABAB4C8A32E687770> 김경환 박병호 충북대학교 도시공학과 (2010. 5. 27. 접수 / 2011. 11. 23. 채택) Developing the Traffic Severity by Type Kyung-Hwan Kim Byung Ho Park Department of Urban Engineering, Chungbuk National University (Received May

More information

-, BSF BSF. - BSF BSF ( ),,. BSF -,,,. - BSF, BSF -, rrna, BSF.

-, BSF BSF. - BSF BSF ( ),,. BSF -,,,. - BSF, BSF -, rrna, BSF. 1. 2010 6 1, 2 4 Ⅰ,Ⅱ 2013,, -,. - Human Cell.. -,., Biosand Filter(BSF) - BSF Main Filtering (Biofilm) BSF, BSF ( ),. -, BSF BSF. - BSF BSF ( ),,. BSF -,,,. - BSF,. -. -. -. - 2. BSF -, rrna, BSF. 2. -

More information

433대지05박창용

433대지05박창용 Recent Changes in Summer Precipitation Characteristics over South Korea Changyong Park* JaYeon Moon** Eun-Jeong Cha*** Won-Tae Yun**** Youngeun Choi***** 1958 2007 6 9 6 9 10 10 10 10 10 Abstract This

More information

01 Automated Protein Expression and Purification: ExiProgen Selection Guide 3 Protein Synthesis Kit ExiProgen EC Protein Synthesis Kit 4 ExiProgen EC-

01 Automated Protein Expression and Purification: ExiProgen Selection Guide 3 Protein Synthesis Kit ExiProgen EC Protein Synthesis Kit 4 ExiProgen EC- Automated Protein Expression and Purification: ExiProgen TM Manual Protein Expression and Purification: AccuRapid TM & MagListo TM Preparation of Template DNA for Protein Expression Protein Service Protein

More information

14.531~539(08-037).fm

14.531~539(08-037).fm G Journal of the Korea Concrete Institute Vol. 20, No. 4, pp. 531~539, August, 2008 š x y w m š gj p { sƒ z 1) * 1) w w Evaluation of Flexural Strength for Normal and High Strength Concrete with Hooked

More information

(JBE Vol. 21, No. 1, January 2016) (Regular Paper) 21 1, (JBE Vol. 21, No. 1, January 2016) ISSN 228

(JBE Vol. 21, No. 1, January 2016) (Regular Paper) 21 1, (JBE Vol. 21, No. 1, January 2016)   ISSN 228 (JBE Vol. 1, No. 1, January 016) (Regular Paper) 1 1, 016 1 (JBE Vol. 1, No. 1, January 016) http://dx.doi.org/10.5909/jbe.016.1.1.60 ISSN 87-9137 (Online) ISSN 16-7953 (Print) a), a) An Efficient Method

More information

THE JOURNAL OF KOREAN INSTITUTE OF ELECTROMAGNETIC ENGINEERING AND SCIENCE Jul.; 27(7),

THE JOURNAL OF KOREAN INSTITUTE OF ELECTROMAGNETIC ENGINEERING AND SCIENCE Jul.; 27(7), THE JOURNAL OF KOREAN INSTITUTE OF ELECTROMAGNETIC ENGINEERING AND SCIENCE. 16 Jul.; 27(7), 64662. http://dx.doi.org/./kjkiees.16.27.7.646 ISSN 1226-3133 (Print)ISSN 2288-226 (Online) 2D Microwave Image

More information

04_이근원_21~27.hwp

04_이근원_21~27.hwp 1) KIGAS Vol. 16, No. 5, pp 21~27, 2012 (Journal of the Korean Institute of Gas) http://dx.doi.org/10.7842/kigas.2012.16.5.21 실험실의 사례 분석에 관한 연구 이근원 이정석 한국산업안전보건공단 산업안전보건연구원 (2012년 9월 5일 투고, 2012년 10월 19일

More information

- 3 - 1 10. 10. 12 1. 12 2. 12. 13 2 14 2.1 14 2.2 17 2.3 18 2.4 19 2.5 21 (1) 21 (2) DNA 23 (3) 24 (4) 16S rrna 25 (5) (Polymerase chain reaction, PCR) 26 (6) PCR Primer 27 2.6 28. / 28-4 - (1) Bioaerosol

More information

05052유식안101.hwp

05052유식안101.hwp 제 출 문 식품의약품안전청장 귀 하 이 보고서를 유전자재조합식품 모니터링(부산광역시보건환경연구원/정구영) 과제의 연구 결과보고서로 제출합니다. 2005. 11. 30 주관연구기관명 : 부산광역시보건환경연구원 주관연구책임자 : 정구영 목 차 Ⅰ. 연구개발결과 요약문----------------------------------- 1 (한글)------------------------------------------

More information

자기공명영상장치(MRI) 자장세기에 따른 MRI 품질관리 영상검사의 개별항목점수 실태조사 A B Fig. 1. High-contrast spatial resolution in phantom test. A. Slice 1 with three sets of hole arr

자기공명영상장치(MRI) 자장세기에 따른 MRI 품질관리 영상검사의 개별항목점수 실태조사 A B Fig. 1. High-contrast spatial resolution in phantom test. A. Slice 1 with three sets of hole arr Original Article pissn 1738-2637 J Korean Soc Radiol 2012;67(2):129-134 The Survey of Magnetic Resonance Imaging Quality according to in Korea 1 자기공명영상장치(MRI) 자장세기에 따른 MRI 품질관리 영상검사의 개별항목점수 실태조사 1 Hyun-Hae

More information

Crt114( ).hwp

Crt114( ).hwp cdna Microarray Experiment: Design Issues in Early Stage and the Need of Normalization Byung Soo Kim, Ph.D. 1, Sunho Lee, Ph.D. 2, Sun Young Rha, M.D., Ph.D. 3,4 and Hyun Cheol Chung, M.D., Ph.D. 3,4 1

More information

Microsoft Word - pv_0602.doc

Microsoft Word - pv_0602.doc 1 씨감자 생산 체계와 바이러스병 검사 (화란체계를 중심으로) 함 영 일 대관령원예농협 기술자문위원 To whom correspondence should be addressed. E-mail :yih0512430@yahoo.co.kr 목 차 1. 서언 2. 화란 씨감자 생산단계와 검사 2.1. 보증된 씨감자의 중요성 2.1.1. 최소한의 질적 요구조건 2.1.2.

More information

슬라이드 1

슬라이드 1 EVENT 퀴아젠인기상품연말특별가전 200203 Top Taq DNA Polymerase (250U) 90,000 72,000 200205 Top Taq DNA Polymerase (1000U) 331,000 281,350 200403 Top Taq Master Mix Kit(250U) 104,000 83,200 201203 Taq DNA Polymerase

More information

Glutathione Excellose handbook - Purification of GST fusion proteins - Looking for more detail Purification protocol? - Glutathione Excellose Spin Kit

Glutathione Excellose handbook - Purification of GST fusion proteins - Looking for more detail Purification protocol? - Glutathione Excellose Spin Kit Glutathione Excellose handbook - Purification of GST fusion proteins - Looking for more detail Purification protocol? - Glutathione Excellose Spin Kit - Glutathione MiniExcellose - Glutathione Excellose

More information

슬라이드 제목 없음

슬라이드 제목 없음 물리화학 1 문제풀이 130403 김대형교수님 Chapter 1 Exercise (#1) A sample of 255 mg of neon occupies 3.00 dm 3 at 122K. Use the perfect gas law to calculate the pressure of the gas. Solution 1) The perfect gas law p

More information

한국전지학회 춘계학술대회 Contents 기조강연 LI GU 06 초강연 김동욱 09 안재평 10 정창훈 11 이규태 12 문준영 13 한병찬 14 최원창 15 박철호 16 안동준 17 최남순 18 김일태 19 포스터 강준섭 23 윤영준 24 도수정 25 강준희 26

한국전지학회 춘계학술대회 Contents 기조강연 LI GU 06 초강연 김동욱 09 안재평 10 정창훈 11 이규태 12 문준영 13 한병찬 14 최원창 15 박철호 16 안동준 17 최남순 18 김일태 19 포스터 강준섭 23 윤영준 24 도수정 25 강준희 26 2015 한국전지학회 춘계학술대회 2일차 한국전지학회 춘계 학술대회(신소재 및 시장동향 관련 주제 발표) 시간 제목 비고 세션 1 차세대 이차전지용 in-situ 분석기술 좌장 : 윤성훈 09:00~09:30 Real-time & Quantitative Analysis of Li-air Battery Materials by In-situ DEMS 김동욱(한국화학연구원)

More information

44-4대지.07이영희532~

44-4대지.07이영희532~ A Spatial Location Analysis of the First Shops of Foodservice Franchise in Seoul Metropolitan City Younghee Lee* 1 1 (R) 0 16 1 15 64 1 Abstract The foodservice franchise is preferred by the founders who

More information

untitled

untitled [ ] œwz, 21«6y(2008) J. of the Korean Society for Heat Treatment, Vol. 21, No. 6, (2008) pp. 300~306 š y w p x*, **Á **Áy y* * ** w œ w œw, w» gœ Solid State Diffusion Brazing of the Aluminum Alloy Castings

More information

TOYOBO Reagent 만의독보적인기술 ReverTra Ace M-MLV RTase 의 RNase H domain 에 mutation 시키므로 RNase H activity 를낮추고,mRNA 의 degradation 을막아 cdna 합성효율을높임 KOD Polyme

TOYOBO Reagent 만의독보적인기술 ReverTra Ace M-MLV RTase 의 RNase H domain 에 mutation 시키므로 RNase H activity 를낮추고,mRNA 의 degradation 을막아 cdna 합성효율을높임 KOD Polyme PCR Enzyme 부터 qpcr 까지! PCR 실험은 TOYOBO 로해결하세요! 행사기간 : 7 월 15 일 ~ 9 월 13 일까지 TOYOBO Reagent PCR Enzyme High Quality PCR Enzyme cdna Synthesis Kit qpcr One-step RT Kit Immunoreaction Enhancer Solution 추가

More information

DBPIA-NURIMEDIA

DBPIA-NURIMEDIA Original Article Journal of Apiculture 31(1) : 41~50 (2016) Rapid Detection of Black Queen Cell Virus from Honeybee using Reverse Transcription Real-Time Recombinase Polymerase Amplification (RT/RT RPA)

More information

Microsoft PowerPoint - d ppt [호환 모드]

Microsoft PowerPoint - d ppt [호환 모드] 전기영동 ( SDS-PAGE ) 개 요 전기영동과그목적 실험전준비 실험과정 실험결과및분석 전기영동과그목적 전기영동 단백질의순도나성질의분석및분리등에사용하는방법 -> 단백질의정성적인분석 SDS-PAGE ( Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamide Gel Electrophoresis ) : SDS 와 Polyacrylamide 를사용한전기영동전기영동의목적

More information

- 서울지역 소아의 일본뇌염항체 보유상황에 관한 연구- 한국 주둔 미군환자의 부검 뇌조직에서 처음으로 일 본뇌염 바이러스가 분리되었다 2). 1949년 우리나라에 처음으로 대유행이 있어 5,616 명의 환자중 2,779명이 사망한 이후 매년 여름마다 이 질병이 유행되어

- 서울지역 소아의 일본뇌염항체 보유상황에 관한 연구- 한국 주둔 미군환자의 부검 뇌조직에서 처음으로 일 본뇌염 바이러스가 분리되었다 2). 1949년 우리나라에 처음으로 대유행이 있어 5,616 명의 환자중 2,779명이 사망한 이후 매년 여름마다 이 질병이 유행되어 소아과 :제 39권 제 2호 1996 1) 서울지역 소아의 일본뇌염항체 보유상황에 관한 연구 울산의대 서울중앙병원 소아과 김진아 고태성 박영서 문형남 홍창의 국립보건원 신경성 바이러스과 조 해 월 목 적 :일본뇌염은 최근에는 발생율이 현저히 감소하였으나,저연령군에서는 발현율도 높으 며 치명적인 질환이다.이에 저자들은 서울지역 소아에서의 일본뇌염

More information

PowerPoint 프레젠테이션

PowerPoint 프레젠테이션 mrna (messenger RNA) : 양이가장적다 ( 전체 RNA 중 5-10% 이하 ) : mrna의염기서열은단백질의아미노산순서를지정 : 성장하는세포는수많은다른단백질을필요로함으로 mrna가만들어져단백질이합성되게한후 nucleotide가재생될수있도록분해된다 (trna, rrna도재생 ) : 5 말단의끝이 7-methyl guanosine triphosphate

More information

7 1 ( 12 ) 1998. 1913 ( 1912 ) 4. 3) 1916 3 1918 4 1919. ( ) 1 3 1, 3 1. 1.. 1919 1920. 4) ( ), ( ),. 5) 1924 4 ( ) 1. 1925 1. 2). ( ). 6). ( ). ( ).

7 1 ( 12 ) 1998. 1913 ( 1912 ) 4. 3) 1916 3 1918 4 1919. ( ) 1 3 1, 3 1. 1.. 1919 1920. 4) ( ), ( ),. 5) 1924 4 ( ) 1. 1925 1. 2). ( ). 6). ( ). ( ). 7 1 ( 12 ) : 1-11, 1998 K orean J M ed H ist 7 : 1-11, 1998 ISSN 1225-505X * **.,.., 1960.... 1) ( ) 1896 3 2 ( ) ( ) ( ) ( ) 2. 1), 14 1909 1,. 14 17 1913. 2)..,. ( ) ( ),. * 1998 (1998. 5. 7). ** 1).

More information

DBPIA-NURIMEDIA

DBPIA-NURIMEDIA The e-business Studies Volume 17, Number 6, December, 30, 2016:237~251 Received: 2016/11/20, Accepted: 2016/12/24 Revised: 2016/12/21, Published: 2016/12/30 [ABSTRACT] Recently, there is an increasing

More information

09권오설_ok.hwp

09권오설_ok.hwp (JBE Vol. 19, No. 5, September 2014) (Regular Paper) 19 5, 2014 9 (JBE Vol. 19, No. 5, September 2014) http://dx.doi.org/10.5909/jbe.2014.19.5.656 ISSN 2287-9137 (Online) ISSN 1226-7953 (Print) a) Reduction

More information

Cloning=Clontech In-Fusion Cloning

Cloning=Clontech  In-Fusion Cloning Cloning 을위한모든것 2014-06-18 다카라코리아바이오메디칼 Contents Cloning Restriction Enzyme General Restriction Enzyme QuickCut Restriction Enzyme Cloning Restriction Enzyme/Ligation TA Cloning In-Fusion Cloning TaKaRa

More information

Automated high multiplex qPCR platform for simultaneous detection and quantification of multiple nucleic acid targets

Automated high multiplex qPCR platform for simultaneous detection and quantification of multiple nucleic acid targets PCR FlashGel System 2013. 04. 24 PCR 2013. 04. 24 순서 1. PCR 이란 2. PCR 실험의기본조건 3. PCR 효소선택가이드 4. Hot Start PCR의원리 5. PCR 실험시 Troubleshooting 6. PCR 장비 _TP350 소개 PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR 이란? -

More information

DBPIA-NURIMEDIA

DBPIA-NURIMEDIA Short ommunication Journal of piculture 33(3) : 221~226 (218) DOI: 1.17519/apiculture.218.9.33.3.221 Detection of Sugar ane (Saccharum officinarum)-specific Gene from Sugar and Sugar-honey younghee Kim,

More information

09구자용(489~500)

09구자용(489~500) The Study on the Grid Size Regarding Spatial Interpolation for Local Climate Maps* Cha Yong Ku** Young Ho Shin*** Jae-Won Lee**** Hee-Soo Kim*****.,...,,,, Abstract : Recent global warming and abnormal

More information

<30382EC0C7C7D0B0ADC1C22E687770>

<30382EC0C7C7D0B0ADC1C22E687770> 대한내과학회지: 제 76 권 제 2 호 2009 의학강좌-개원의를 위한 모범처방(Current Clinical Practice) 간기능검사의 이해와 적용 인제대학교 의과대학 일산백병원 내과학교실 김 경 아 Understanding and application of liver function tests Kyung-Ah Kim, M.D. Department of

More information

09È«¼®¿µ 5~152s

09È«¼®¿µ5~152s Korean Journal of Remote Sensing, Vol.23, No.2, 2007, pp.45~52 Measurement of Backscattering Coefficients of Rice Canopy Using a Ground Polarimetric Scatterometer System Suk-Young Hong*, Jin-Young Hong**,

More information

- 1 -

- 1 - - 1 - - 2 - - 3 - - 4 - - 5 - SUMMARY ( 영문요약문 ) - 6 - - 7 - - 8 - - 9 - cavenging - 10 - - 11 - - 12 - - 13 - - 14 - - 15 - - 16 - - 17 - - 18 - - 19 - - 20 - - 21 - - 22 - - 23 - - 24 - - 25 - - 26 -

More information

A 617

A 617 Special Issue Diabetic Retinopathy Won Ki Lee, M.D. Department of Ophthalmology The Catholic University of Korea College of Medicine Kangnam St. Mary s Hospital E mail : wklee@catholic.ac.kr Abstract R

More information

달생산이 초산모 분만시간에 미치는 영향 Ⅰ. 서 론 Ⅱ. 연구대상 및 방법 達 은 23) 의 丹 溪 에 최초로 기 재된 처방으로, 에 복용하면 한 다하여 난산의 예방과 및, 등에 널리 활용되어 왔다. 達 은 이 毒 하고 는 甘 苦 하여 氣, 氣 寬,, 結 의 효능이 있

달생산이 초산모 분만시간에 미치는 영향 Ⅰ. 서 론 Ⅱ. 연구대상 및 방법 達 은 23) 의 丹 溪 에 최초로 기 재된 처방으로, 에 복용하면 한 다하여 난산의 예방과 및, 등에 널리 활용되어 왔다. 達 은 이 毒 하고 는 甘 苦 하여 氣, 氣 寬,, 結 의 효능이 있 대한한방부인과학회지 THE JOURNAL OF ORIENTAL OBSTETRICS & GYNECOLOGY VOL.17, NO.2 : 115-122 (2004) 달생산이 초산모 분만시간에 미치는 영향 * 북경한의원, ** 윤산부인과의원, *** 최은림산부인과의원, 상지대학교 한의과대학 부인과학교실 ****, 경희대학교 동서의학대학원 김성준 *****, 윤왕준

More information

THE JOURNAL OF KOREAN INSTITUTE OF ELECTROMAGNETIC ENGINEERING AND SCIENCE. vol. 29, no. 10, Oct ,,. 0.5 %.., cm mm FR4 (ε r =4.4)

THE JOURNAL OF KOREAN INSTITUTE OF ELECTROMAGNETIC ENGINEERING AND SCIENCE. vol. 29, no. 10, Oct ,,. 0.5 %.., cm mm FR4 (ε r =4.4) THE JOURNAL OF KOREAN INSTITUTE OF ELECTROMAGNETIC ENGINEERING AND SCIENCE. 2018 Oct.; 29(10), 799 804. http://dx.doi.org/10.5515/kjkiees.2018.29.10.799 ISSN 1226-3133 (Print) ISSN 2288-226X (Online) Method

More information