이 발명을 지원한 국가연구개발사업 과제고유번호 KGM 부처명 교육과학기술부 연구관리전문기관 연구사업명 전북분원운영사업 연구과제명 저탄소 녹생성장을 위한 바이오매스/에너지 개발 주관기관 한국생명공학연구원 연구기간 2009년 01월 01일 ~ 2009년 12월

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영아 안
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1 (19) 대한민국특허청(KR) (12) 등록특허공보(B1) (45) 공고일자 2015년04월10일 (11) 등록번호 (24) 등록일자 2015년04월01일 (51) 국제특허분류(Int. Cl.) A61K 36/45 ( ) A23L 1/30 ( ) A61P 3/04 ( ) (21) 출원번호 (22) 출원일자 2009년11월10일 심사청구일자 2013년12월17일 (65) 공개번호 (43) 공개일자 2011년05월18일 (56) 선행기술조사문헌 KR A JP A (73) 특허권자 한국생명공학연구원 대전광역시 유성구 과학로 125 (어은동) (72) 발명자 전효곤 전라북도 정읍시 진산2길 8 (진산동) 권선화 경상남도 창원시 마산회원구 봉암북2길 18 (봉암 동) 정동민 전북 정읍시 하신경9길 14-21, 105동 1101호 (상 동, 현대1차아파트) (74) 대리인 특허법인이룸 전체 청구항 수 : 총 10 항 심사관 : 민경난 (54) 발명의 명칭 블루베리 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물 (57) 요 약 본 발명은 블루베리 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 블루베리 발효 추출물은 고지방 식이로 사육된 마우스의 체중을 감소시키며, 부고환주변지방 조직 및 신장주변지방 조직의 무게를 유의하게 감소시킴으로써, 비만의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다. 대 표 도 - 도1-1 -

125 (어은동) (72) 발명자 전효곤 전라북도 정읍시 진산2길 8 (진산동) 권선화 경상남도 창원시 마산회원구 봉암북2길 18 (봉암 동) 정동민 전북 정읍시 하신경9길 14-21, 105동 1101호 (상 동, 현대1차아파트) (74) 대리인 특허법인이룸 전체 청구항 수 : 총 10 항 심사관 : 민경난 (54) 발명의 명칭 블루베리 발효 추출물을

2 이 발명을 지원한 국가연구개발사업 과제고유번호 KGM 부처명 교육과학기술부 연구관리전문기관 연구사업명 전북분원운영사업 연구과제명 저탄소 녹생성장을 위한 바이오매스/에너지 개발 주관기관 한국생명공학연구원 연구기간 2009년 01월 01일 ~ 2009년 12월 31일 - 2 -

3 명 세 서 청구범위 청구항 1 블루베리 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물로, 상기 블루베리 발효 추출물은 블루베리에 사카로마이세스 속 균주를 배양시켜 얻은 발효 블루베리의 추출물인 것을 특징으로 하는, 조성물. 청구항 2 제 1항에 있어서, 상기 블루베리 발효 추출물은 사카로마이세스 속 균주를 이용하여 블루베리를 발효시킨 후 건 조시켜 블루베리 발효 건조물을 얻은 다음, 상기 블루베리 발효 건조물을 물, C 1 ~C 4 의 알콜 또는 물과 C 1 ~C 4 의 알콜의 혼합용매에 침지하여 추출하여 얻은 것임을 특징으로 하는, 조성물. 청구항 3 삭제 청구항 4 제 2항에 있어서, 상기 발효는 10~30 에서 3~15일 동안 수행하는 것을 특징으로 하는, 조성물. 청구항 5 제 2항에 있어서, 발효시 설탕 또는 포도당을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는, 조성물. 청구항 6 제 2항에 있어서, 상기 C 1 ~C 4 의 알콜은 메탄올 또는 에탄올 중에서 선택된 것을 특징으로 하는, 조성물. 청구항 7 블루베리 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만 억제용 식품 조성물로, 상기 블루베리 발효 추출물은 블루베리에 사카로마이세스 속 균주를 배양시켜 얻은 발효 블루베리의 추출물인 것을 특징으로 하는, 조성물. 청구항 8 제 7항에 있어서, 상기 블루베리 발효 추출물은 사카로마이세스 속 균주를 이용하여 블루베리를 발효시킨 후 건 조시켜 블루베리 발효 건조물을 얻은 다음, 상기 블루베리 발효 건조물을 물, C 1 ~C 4 의 알콜 또는 물과 C 1 ~C 4 의 알콜의 혼합용매에 침지하여 추출하여 얻은 것임을 특징으로 하는, 조성물. 청구항 9 삭제 청구항 10 제 8항에 있어서, 상기 발효는 10~30 에서 3~15일 동안 수행하는 것을 특징으로 하는, 조성물. 청구항 11 제 8항에 있어서, 발효시 설탕 또는 포도당을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는, 조성물. 청구항 12 제 8항에 있어서, 상기 C 1 ~C 4 의 알콜은 메탄올 또는 에탄올 중에서 선택된 것을 특징으로 하는, 조성물

청구항 3 삭제 청구항 4 제 2항에 있어서, 상기 발효는 10~30 에서 3~15일 동안 수행하는 것을 특징으로 하는, 조성물. 청구항 5 제 2항에 있어서, 발효시 설탕 또는 포도당을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는, 조성물.

4 발명의 설명 발명의 상세한 설명 [0001] 기 술 분 야 본 발명은 블루베리 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. [0002] [0003] [0004] [0005] [0006] [0007] [0008] [0009] [0010] [0011] [0012] [0013] [0014] 배 경 기 술 최근 경제성장과 생활방식의 변화에 따라 식습관에도 많은 변화가 있다. 특히, 바쁜 현대인들은 패스트푸드 등 의 고열량 식이와 적은 운동량으로 인하여 체중 과다 및 비만이 증가하고 있다. 체중 과다는 체질량 지수(BMI, 체중을 키의 제곱으로 나눈 비만 척도)가 25 이상 30 미만을 의미하며, 비만은 체질량 지수가 30 이상일 때 해당된다. 미국 성인의 3분의 2는 체중 과다이거나 비만이며, 체중 과다는 혈압과 콜레스테롤 수치를 높여 심장 질환 등의 각종 성인병의 발병률을 증가시키고, 비만은 심장병과 당뇨병, 관절염 및 일부 암 위험성을 증가시키고 있다. 체중 과다 및 비만은 성인뿐만 아니라 어린이나 청소년들에서도 동맥경화, 고혈압, 고지혈증 또는 심장질환 등 의 각종 성인병의 발병률을 증가시키는 한 요인이 되고 있다. 이와 같이 비만은 모든 연령층에 걸쳐 영향을 주고 있으나, 특히 장년층의 발생빈도가 높다. 동양에서는 채식 위주의 생활습관으로 인해 비만증이 그리 많지 않았던 것으로 알려져 있으나, 현대에 들어서 서양문물의 영향으 로 식생활 습관이 바뀌고 주거환경이 바뀌면서 동양인에게서도 점차 비만증이 증가하기 시작하였다. 또한 현대인은 과로, 과음, 스트레스 등으로 인하여 체력이 저하되며, 약 30~40%가 비만증을 가지고 있고, 그 중 약 10% 정도는 심각하거나 병적인 비만증을 나타낸다고 보고된 바 있다. 비만은 체내에 지방이 과도하게 축적되어 있는 상태로 체중에서 지방이 차지하는 비율이 높은 상태를 나타내며, 단순성 비만과 2차성 비만(증후성 비만)으로 분류된다. 단순성 비만의 원인으로는 과식, 운동부족, 및 기초대사의 저하 등을 들 수 있다. 임상적으로 비만으로 판정되 는 경우의 대부분은 단순성 비만이다. 단순성 비만이 발현하여 그 상태가 지속되면, 각종 건강 장해를 일으키는 원인이 된다. 2차성 비만은 임의의 기초질환이 원인이 되어 발생하는 비만으로, 내분비성 비만, 시상하부성 비만, 유전성 비 만 또는 약제에 기인한 비만 등을 들 수 있다. 비만의 주요 원인은 지방세포의 과성장에 있으며, 이는 뇌에서 명령하여 분비되는 렙틴(leptin)이라는 호르몬의 결핍으로 일어난다. 이러한 렙틴 호르몬의 결핍은 유전적으로 결핍이 일어난 경우를 제외하고는 과식, 노화로 인한 생체 내 물질대사의 약화, 체내에 과량 축적된 동물성 콜레스테롤에 의해 분비가 줄어든다. 비만은 그 자체가 고지혈증, 고혈압, 심혈관 질환, 가성 뇌종양(pseudotumor cerebri), 수면 무호흡증(sleep apnea), 암, 폐 고혈압(pulmonary hypertension), 담낭염(cholecystitis) 및 골관절염(osteoarthritis) 등의 각종 질환의 원인이 되거나, 또는 활동성의 저하 등의 문제를 야기한다. 또한, 비만은 여러 가지 질환이 원인이 되어 합병증으로 나타나는 경우도 있다. 비만에 대한 연구로는, 2002년 인디아에서 가르시니아 캄보지아(garcinia cambogia)로부터 HCA(hydroxycitric acid)의 분리 정제 관련 연구 결과가 발표되었으며(Bhabani et al, 2002), 2005년 미국에서는 MCH-R1(melanin concentrating hormone receptor1)을 포함하는 바이아릴 우레아(biaryl ureas)의 비만증 치료에 관한 섭취량 변화에 따른 BW(bodyweight) 연구결과를 발표하였다(Palani et al, 2005). 2005년 일본에서는 콩단백질의 섭취 에 따른 랫트의 체중증가 억제와 섭취량 감소, 중성지방 감소, 콜레스테롤 감소 등의 연구결과를 발표 (Tachibana et al, 2005)하는 등 세계 각국에서 항비만 치료 및 예방에 관한 연구들이 꾸준히 진행되고 있다. 현재 사용되고 있는 비만증을 치료하기 위한 약물요법으로는 식욕억제제, 지방흡수억제제 또는 지방연소제 등이 있다. 식욕억제제로는 덱스플렌플루라민 (dexflenfluramine), 페닐알라닌, 타이로신 및 메티오닌 등이 있으며, 지방흡수억제제로는 올리스타트(orlistat), 키토산 등이 있고, 지방연소제로는 시부트라민, 에페드린, 카페인, 지실, 가르시니아 캄보지아, L-카르니친, 글루코만난, 갈락토만난, 피콜린산 크롬(chromium picolinate) 등이 - 4 -

특히, 바쁜 현대인들은 패스트푸드 등 의 고열량 식이와 적은 운동량으로 인하여 체중 과다 및 비만이 증가하고 있다. 체중 과다는 체질량 지수(BMI, 체중을 키의 제곱으로 나눈 비만 척도)가 25 이상 30 미만을 의미하며, 비만은 체질량 지수가 30 이상일 때 해당된다.

5 있다. 그러나, 이들 비만 치료제들은 일시적인 체중감소 효과를 나타낼 수 있으나, 약물 의존성 등의 부작용을 일으킬 위험성이 있다. 또한, 투여한 환자에게 단기간에 내성이 생겨버리는 경우도 있기 때문에, 장기간 연속하 여 사용할 수 없다는 문제점도 있다. [0015] [0016] 따라서, 많은 연구자들은 장기간 사용하여도 인체에 대해 안전하고 부작용이 적은 비만 억제제를 개발하기 위하 여 생약재를 이용한 연구를 수행하고 있다. 한편, 블루베리는 진달래과 산앵도나무속의 관목성 식물로서, 전 세계적으로 400여종이 있으며, 아프리카, 칠레, 호주, 일본, 미국, 캐나다, 핀란드, 스웨덴 등 추운 지역까지 분포되어 있다. 현재, 주로 사용되고 있는 종은 북아메리카 원산으로 20 여종이 알려져 있으며, 하이부시 블루베리(highbush blueberry, V. Corymbosum), 래비트아이 블루베리(rabbiteye blueberry, V. Ashei) 및 로부시 블루베리(lowbusy blueberry, V. Angustrafolium) 등 3품종이 주종을 이루고 있다. 우리나라에는 정금나무, 산앵도나무 등이 있다. 블루베리 과 실은 보랏빛이 나는 작은 구슬만한 크기의 소과종으로, 당도는 품종에 따라 11~14 Brx 이며, 특유의 신미와 방 향이 있고, 당과 유기산이 풍부하며, 특히 기능성 물질인 안토시아닌이 다량 함유되어 있다. 블루베리는 시력개 선 효과, 망막의 변성과 백내장 방지 효과, 혈중콜레스테롤 및 혈당 감소 효과, 골밀도 감소를 저해하는 효과를 가진다고 알려져 있다. 또한, 블루베리는 항암효과(Seeram NP, Adams LS, Zhang Y, Lee R, Sand D, Scheuller HS, Heber D. 2006, Blackberry, black raspberry, blueberry, cranberry, red raspberry, and strawberry extracts inhibit growth and stimulate apoptosis of human cancer cells in vitro. J Agric Food Chem., Dec 13;54(25): )가 있다고 알려져 있다. 반면, 블루베리 생과일 고지방식이에서 비만 유발 효과(Prior RL, Wu X, Gu L, Hager TJ, Hager A, Howard LR., 2008, Whole berries versus berry anthocyanins: interactions with dietary fat levels in the C57BL/6J mouse model of obesity. J Agric Food Chem., Feb 13;56(3): Epub 2008 Jan 23)가 있다는 연구결과가 발표되었다. 고지방식이에서 블루베리 섭취에 의한 비만 유발 효과의 실험결과는 표 1에 나타내었다. [0017] 표 1 고지방식이에서 블루베리 섭취에 의한 비만 유발 효과 식이 처리 체중(g) 지방조직(%) 저지방 대조군 27.0± ±1.5 블루베리 26.9± ±1.3 고지방 대조군 32.6± ±1.4 블루베리 37.2± ±1.0 [0018] 따라서, 고지방식이를 하는 현대인에게 블루베리 생과일의 섭취는 비만을 심화시킬 우려가 있다. [0019] 발명의 내용 [0020] 해결 하고자하는 과제 본 발명자들은 인체에 무해하며 비만의 예방 또는 치료 효과를 갖는 약제를 개발하기 위하여 생약재 중에서 탐 색하던 중, 블루베리 발효 추출물이 고지방 식이로 사육된 마우스의 체중을 감소시키며, 부고환주변지방 조직 및 신장주변지방 조직의 무게를 유의하게 감소시킴을 확인하고, 본 발명을 완성하였다. [0021] 과제 해결수단 본 발명은 블루베리 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물을 제공하고자 한다. [0022] [0023] [0024] 발명의 실시를 위한 구체적인 내용 본 발명은 블루베리 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다. 상기 조성물은 약학 조성물 및 식품 조성물을 포함한다. 이하, 본 발명에 대해 상세히 설명한다

한편, 블루베리는 진달래과 산앵도나무속의 관목성 식물로서, 전 세계적으로 400여종이 있으며, 아프리카, 칠레, 호주, 일본, 미국, 캐나다, 핀란드, 스웨덴 등 추운 지역까지 분포되어 있다. 현재, 주로 사용되고 있는 종은 북아메리카 원산으로 20 여종이 알려져 있으며, 하이부시 블루베리(highbush blueberry, V.

6 [0025] [0026] 본 발명의 조성물의 유효성분인 블루베리 발효 추출물은, 블루베리를 통상적인 방법으로 발효시켜 블루베리 발 효 건조물을 얻은 후, 블루베리 발효 건조물을 통상적인 방법으로 추출시켜 얻을 수 있다. 통상적인 추출 방법 은 초음파 추출법, 여과법 및 환류 추출법 등을 포함할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 본 발명에서는 블루베리 발효 추출물을 하기와 같은 방법으로 발효, 추출 및 분리하여 얻을 수 있다. 먼저, 블 루베리를 세척하고 건조한 후 분쇄한다. 분쇄된 블루베리를 통상의 방법으로 발효한다. 발효시 사용된 효모는 사카로마이세스 세레비시아(Saccharomyces cerevisiae)가 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 발효온도는 10~30, 발효기간은 3~15일, 바람직하게는 1주일이다. 발효를 촉진하기 위하여, 설탕, 포도당 등을 5-30% 정도 첨가 할 수도 있다. 발효가 완료된 후 발효액을 열풍건조나 동결건조로 건조시켜 블루베리 발효 건조물을 얻는다. 상 기에서 얻은 블루베리 발효 건조물을 물, C 1 ~C 4 의 알콜 또는 물과 C 1 ~C 4 의 알콜의 혼합용매에 침지하여 100~350rpm의 속도로 교반하면서 추출한다. 이때, 용매의 부피는 분쇄한 시료 중량의 5~15배, 추출시간은 1~5일, 바람직하게는 3일이다. 상기 C 1 ~C 4 의 알콜은 메탄올 또는 에탄올 중에서 선택될 수 있으며, 바람직하게는 에탄올이다. 이후, 추출액을 여과하고 얻어진 상등액의 용매를 감압 하에 농축시켜 블루베리 발효 추출물을 얻 는다. [0027] [0028] [0029] [0030] [0031] [0032] [0033] [0034] 본 발명에 따른 블루베리 발효 추출물은 고지방 식이로 사육된 마우스의 체중을 감소시키며, 부고환주변지방 조 직 및 신장주변지방 조직의 무게를 유의하게 감소시킨다. 따라서, 본 발명에 따른 블루베리 발효 추출물은 비만 의 예방 또는 치료에 유용한 의약품 및 건강식품으로 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물은 블루베리 발효 추출물과 함께 비만의 예방 또는 치료 효과를 갖는 공지의 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 본 발명의 조성물은, 투여를 위해서 상기 기재한 유효성분 이외에 추가로 약학적으로 허용가능한 담체를 1종 이 상 포함하여 제조할 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 담체는 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로 오스 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활 성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 당분야의 적정한 방법으로 또는 Remington's Pharmaceutical Science(최근판), Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다. 본 발명의 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 투여하거나 비경구 투여(예를 들어, 정맥 내, 피하, 복강 내 또 는 국소에 적용)할 수 있으며, 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설 율 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하다. 상기 블루베리 발효 추출물의 일일 투여량은 약 0.1~ /kg, 바람직하게는 약 30~80mg/kg, 더욱 바람직하게는 약 50~60mg/kg이며, 하루 일회 내지 수회에 나누어 투여 하는 것이 바람직하다. 본 발명의 조성물은 비만의 예방 또는 치료를 위하여 단독으로, 또는 수술, 호르몬 치료, 약물 치료 및 생물학 적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다. 본 발명의 조성물은 비만 억제를 목적으로 건강식품에 첨가될 수 있다. 본 발명의 블루베리 발효 추출물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 블루베리 발효 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용 할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에는 본 발명의 블루베리 발효 추출물은 원료에 대하여 15 중량% 이하, 바람직하게는 10 중량% 이하의 양으로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하 일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있 다. 상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코 렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료 수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다. 본 발명의 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토오스, 수크로오스와 같은 - 6 -

발효온도는 10~30, 발효기간은 3~15일, 바람직하게는 1주일이다. 발효를 촉진하기 위하여, 설탕, 포도당 등을 5-30% 정도 첨가 할 수도 있다. 발효가 완료된 후 발효액을 열풍건조나 동결건조로 건조시켜 블루베리 발효 건조물을 얻는다.

7 디사카라이드, 및 덱스트린, 시클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당 알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감 미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100ml당 일반적으로 약 0.01~0.04g, 바람직하게는 약 0.02~0.03g 이다. [0035] [0036] [0037] [0038] [0039] [0040] [0041] 상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, ph 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사 용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음 료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨 가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.01~0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것 이 일반적이다. 이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽 게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다. 실시예 1 : 블루베리 발효 수 추출물의 제조 1. 블루베리 발효 건조물의 제조 블루베리를 물로 깨끗이 세척하고 건조한 후 분쇄하였다. 분쇄된 블루베리를 통상의 방법으로 발효하였다. 발효 시 사용된 효모는 사카로마이세스 세레비시아 (Saccharomyces cerevisiae)이었으며, 발효온도는 10~30, 발효 기간은 1주일로 하였다. 발효를 촉진하기 위하여, 설탕, 포도당 등을 5-30% 정도 첨가할 수도 있다. 발효가 완 료된 후 발효액을 열풍건조나 동결건조로 건조시켜 블루베리 발효 건조물을 얻었다. 2. 블루베리 발효 수 추출물의 제조 상기 1에서 제조한 블루베리 발효 건조물 0.1kg을 추출 용기에 넣고, 여기에 블루베리 발효 건조물 중량에 대해 10배의 물을 가하고 3일 동안 침지하여 추출하였다. 추출액을 여과하고, 얻어진 상등액의 용매를 감압 하에 농 축시켜 블루베리 발효 수 추출물 54.3g(수율 54.3%(w/w))을 얻었다. [0042] [0043] 실시예 2 : 블루베리 발효 에탄올 추출물의 제조 상기 실시예 1의 1에서 제조한 블루베리 발효 건조물 0.1kg을 추출 용기에 넣고, 여기에 블루베리 발효 건조물 중량에 대해 10배의 100% 에탄올(HPLC 등급)을 가하고 상온에서 3일 동안 침지하여 교반기(180rpm)를 사용하여 추출하였다(3회 반복). 추출액을 여과하고, 얻어진 상등액의 용매를 감압 하에 농축시켜 블루베리 발효 에탄올 추출물 23.5g(수율 23.5%(w/w))을 얻었다. [0044] [0045] 실시예 3 : 블루베리 발효 메탄올 추출물의 제조 상기 실시예 1의 1에서 제조한 블루베리 발효 건조물 0.1kg을 추출 용기에 넣고, 여기에 블루베리 발효 건조물 중량에 대해 10배의 100% 메탄올(HPLC 등급)을 가하고 상온에서 3일 동안 침지하여 교반기(180rpm)를 사용하여 추출하였다(3회 반복). 추출액을 여과하고, 얻어진 상등액의 용매를 감압 하에 농축시켜 블루베리 발효 에탄올 추출물 31.6g(수율 31.6%(w/w))을 얻었다. [0046] [0047] [0048] [0049] 실험예 1 : 체중변화 및 지방조직의 무게 측정 본 발명에 따른 블루베리 발효 추출물이 체중변화 및 지방조직의 무게에 미치는 영향을 확인하기 위하여, 하기 와 같은 실험을 수행하였다. 1. 체중변화 측정 생후 4주 정도의 수컷 ICR 마우스(오리엔트 바이오, 한국)를 3개군[정상식이군(대조군), 고지방식이군, 블루베 리 발효 추출물 포함 고지방식이군]으로 나누고, 1군에 5마리씩 할당하였다. 상기 실험동물에 AIN-93 diet 정상 식이, 고지방식이(칼로리 45% 증가) 및 음용수를 자유 섭취시키고 30일 정도 충분하게 적응시켜 사육하였다. 블 루베리 발효 추출물 포함 고지방식이군에서는 상기 실시예 2에서 제조한 블루베리 발효 에탄올 추출물을 1% 정 - 7 -

[0035] [0036] [0037] [0038] [0039] [0040] [0041] 상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, ph 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사 용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.

8 도로 고지방식이에 혼합하여 30일 동안 식이량 4g/1마리, 1일 1회 섭취시켰다. AIN-93 diet 정상식이 조성(%) 및 고지방식이 조성(%)은 표 2에 나타내었다. 고지방 식이로 사육된 마우스의 체중변화는 실험개시일로부터 1주 일마다 측정하였다. 체중변화는 도 1에 나타내었다. [0050] 표 2 AIN-93 diet 정상식이 및 고지방식이 조성(%) 성분 정상식이 (%) 고지방식이(%) 카제인 L-시스테인 옥수수 전분 호화 옥수수 전분 설탕 섬유소 대두유 AIN093 종합 미네랄 AIN093 종합 비타민 주석산 수소콜린 t-부틸히드로퀴논 라드 [0051] 도 1에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 블루베리 발효 추출물을 포함하는 고지방식이군은 고지방식이군에 비 해 현저한 체중감소 효과를 나타내었다. [0052] [0053] [0054] 2. 지방조직의 무게 측정 고지방 식이로 사육된 마우스의 지방조직의 무게는 부고환주변지방 (epididymal fat) 조직과 신장주변지방 (perirenal fat) 조직을 절개한 후 측정하였다. 부고환주변지방 조직과 신장주변지방 조직의 무게는 각각 도 2 및 도 3에 나타내었다. 도 2 및 도 3에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 블루베리 발효 추출물을 포함하는 고지방식이군은 고지방식 이군에 비해 부고환주변지방 조직 및 신장주변지방 조직의 무게가 유의적으로 감소하였다. [0055] [0056] [0057] 하기에 본 발명의 조성물을 위한 제제예를 예시한다. 제제예 1 : 약학적 제제의 제조 1. 산제의 제조 [0058] [0059] [0060] [0061] [0062] [0063] [0064] [0065] 블루베리 발효 추출물 유당 상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다. 2. 정제의 제조 블루베리 발효 추출물 옥수수전분 유 당 스테아린산 마그네슘 2g 1g 2mg [0066] 상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다

5 AIN093 종합 비타민 1.0 1.0 주석산 수소콜린 0.25 0.25 t-부틸히드로퀴논 0.8 0.8 라드 0.0 10.0 [0051] 도 1에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 블루베리 발효 추출물을 포함하는 고지방식이군은 고지방식이군에 비 해 현저한 체중감소 효과를 나타내었다. [0052] [0053] [0054] 2.

9 [0067] [0068] [0069] [0070] [0071] 3. 캡슐제의 제조 블루베리 발효 추출물 옥수수전분 유 당 스테아린산 마그네슘 2mg [0072] 상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다. [0073] [0074] [0075] [0076] [0077] [0078] [0079] [0080] [0081] [0082] [0083] [0084] [0085] [0086] 제제예 2 : 식품의 제조 본 발명의 블루베리 발효 추출물을 포함하는 식품들을 다음과 같이 제조하였다. 1. 조리용 양념의 제조 블루베리 발효 추출물 20~95 중량%로 건강 증진용 조리용 양념을 제조하였다. 2. 토마토 케찹 및 소스의 제조 블루베리 발효 추출물 0.2~1.0 중량%를 토마토 케찹 또는 소스에 첨가하여 건강 증진용 토마토 케찹 또는 소스 를 제조하였다. 3. 밀가루 식품의 제조 블루베리 발효 추출물 0.5~5.0 중량%를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다. 4. 스프 및 육즙(gravies)의 제조 블루베리 발효 추출물 0.1~5.0 중량%를 스프 및 육즙에 첨가하여 건강 증진용 육가공 제품, 면류의 수프 및 육 즙을 제조하였다. 5. 그라운드 비프(ground beef)의 제조 블루베리 발효 추출물 10 중량%를 그라운드 비프에 첨가하여 건강 증진용 그라운드 비프를 제조하였다. 6. 유제품(dairy products)의 제조 블루베리 발효 추출물 5~10 중량%를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다. [0087] [0088] [0089] [0090] [0091] [0092] [0093] [0094] [0095] 제제예 3 : 음료의 제조 1. 탄산음료의 제조 설탕 5~10%, 구연산 0.05~0.3%, 카라멜 0.005~0.02%, 비타민 C 0.1~1%의 첨가물을 혼합하고, 여기에 79~94%의 정제수를 섞어서 시럽을 만들고, 상기 시럽을 85~98 에서 20~180초간 살균하여 냉각수와 1:4의 비율로 혼합한 다음 탄산가스를 0.5~0.82%를 주입하여 본 발명의 블루베리 발효 추출물을 함유하는 탄산음료를 제조하였다. 2. 건강음료의 제조 액상과당(0.5%), 올리고당(2%), 설탕(2%), 식염(0.5%), 물(75%)과 같은 부재료와 블루베리 발효 추출물을 균질 하게 배합하여 순간 살균을 한 후 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 건강음료를 제조하였다. 3. 야채쥬스의 제조 블루베리 발효 추출물 5g을 토마토 또는 당근 쥬스 1,000ml에 가하여 건강 증진용 야채쥬스를 제조하였다. 4. 과일쥬스의 제조 블루베리 발효 추출물 1g을 사과 또는 포도 쥬스 1,000ml에 가하여 건강 증진용 과일쥬스를 제조하였다

조리용 양념의 제조 블루베리 발효 추출물 20~95 중량%로 건강 증진용 조리용 양념을 제조하였다. 2. 토마토 케찹 및 소스의 제조 블루베리 발효 추출물 0.2~1.0 중량%를 토마토 케찹 또는 소스에 첨가하여 건강 증진용 토마토 케찹 또는 소스 를 제조하였다. 3. 밀가루 식품의 제조 블루베리 발효 추출물 0.5~5.

10 [0096] 산업이용 가능성 본 발명에 따른 블루베리 발효 추출물은 고지방 식이로 사육된 마우스의 체중을 감소시키며, 부고환주변지방 조 직 및 신장주변지방 조직의 무게를 유의하게 감소시킴으로써, 비만의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있 다. [0097] [0098] [0099] 도면의 간단한 설명 도 1은 본 발명에 따른 블루베리 발효 추출물의 체중 감소 효과를 나타낸 도이다. 도 2는 본 발명에 따른 블루베리 발효 추출물의 부고환주변지방 조직의 무게 감소 효과를 나타낸 도이다. 도 3은 본 발명에 따른 블루베리 발효 추출물의 신장주변지방 조직의 무게 감소 효과를 나타낸 도이다. 도면 도면1-10 -

[0097] [0098] [0099] 도면의 간단한 설명 도 1은 본 발명에 따른 블루베리 발효 추출물의 체중 감소 효과를 나타낸 도이다.

11 도면2 도면3-11 -

특허청구의 범위 청구항 1 어류를 13~23mm 범위 내의 크기로 파쇄한 어류 분말과 물을 중량 대비로 20~40%와 5~10%로 혼합하고, 단백질가 수분해효소를 상기 어류 분말과 물의 중량 대비로 0.1~5.0%로 첨가해서 원료를 준비하는 단계; 상기 준비한 원료를

특허청구의 범위 청구항 1 어류를 13~23mm 범위 내의 크기로 파쇄한 어류 분말과 물을 중량 대비로 20~40%와 5~10%로 혼합하고, 단백질가 수분해효소를 상기 어류 분말과 물의 중량 대비로 0.1~5.0%로 첨가해서 원료를 준비하는 단계; 상기 준비한 원료를 (19) 대한민국특허청(KR) (12) 등록특허공보(B1) (51) 국제특허분류(Int. Cl.) C12J 1/04 (2006.01) A23L 1/39 (2006.01) C12R 1/865 (2006.01) C12R 1/02 (2006.01) (21) 출원번호 10-2011-0053618 (22) 출원일자 2011년06월03일 심사청구일자 2011년06월03일