최종보고서_경기과학기술진흥원 김진규_ hwp

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1 곰취를이용한혈행개선용건강기능식품개발

2 - 1 -

3 - 2 -

4 - 3 -

5 μ μ μ μ - 4 -

6 SUMMARY μ - 5 -

7 μ μ γ α - 6 -

8 μ μ μ μ μ μ - 7 -

9 CONTENTS - 8 -

10 - 9 -

11 제 1 장 연구개발과제의개요

12 - 11 -

13 - 12 -

14 - 13 -

15 제 2 장 국내외기술개발현황

16 - 15 -

17 - 16 -

18 - 17 -

19 μ μ

20 - 19 -

21 - 20 -

22 제 3 장 연구개발수행내용및결과

23 - 22 -

24 - 23 -

25 - 24 -

26 Ligularia fischeri 50% EtOH extract G49-C Hexane ext. G49-C-H Aqua layer CH 2 Cl 2 ext. G49-C-M Aqua layer G49-C-E-1... EtOAc ext. G49-C-E prep-hplc ACN/H 2 O(0.1% TFA) G49-C-E-4 caffeic acid G49-C-E-5 hyperoside... G49-C-E-11 2"-acetyl hyperoside G49-C-E-12 ethyl caffeate Aqua layer BuOH ext. G49-C-B Sephadex LH-20 MeOH:H 2 O(2:1) Aqua layer G49-C-W Ligularia fischeri 50% EtOH extract G49-C Diaion HP-20 MeOH/H 2 O G49-C-1 G49-C-2... G49-C-6 G49-C-7 Prep-HPLC ACN/H 2 O(0.1% TFA) G49-C-2-1 G49-C G49-C chlorogenic acid G49-C-2-6 caffeic acid G49-C-2-7 G49-C-1... G49-C-7 hyperoside G49-C-8 3,5-DCQA... G49-C-12 CHCl 3 =Chloroform CH 2 Cl 2 =Methylene chloride EtOAc=Ethyl acetate BuOH=Butanol MeOH=Methanol H 2 O=Water ACN=Acetonitrile

27 Hexane ext. G49-C-H CH 2 Cl 2 ext. G49-C-M Ligularia fischeri 50% EtOH extract G49-C Aqua layer Aqua layer CHCl 3 =Chloroform CH 2 Cl 2 =Methylene chloride EtOAc=Ethyl acetate BuOH=Butanol MeOH=Methanol H 2 O=Water ACN=Acetonitrile G49-C-E-1... G49-C-E-4... prep-hplc ACN/H 2 O(0.1% TFA) EtOAc ext. G49-C-E prep-hplc ACN/H 2 O(0.1% TFA) G49-C-E-6... G49-C-E-8... G49-C-E-13 Aqua layer BuOH ext. G49-C-B Sephadex LH-20 MeOH:H 2 O(2:1) Aqua layer G49-C-W G49-C-E G49-C-E-4-4 G49-C-E-4-5 Methyl caffeate prep-hplc ACN/H 2 O(0.1% TFA) G49-B-1 G49-B-2... G49-B-7 prep-hplc ACN/H 2 O(0.1% TFA) G49-C-E G49-C-E-8-8 G49-C-E-8-9 G49-C-E-8-10 Mehtyl 3,5-dicaffeoyl quinate Quercetin G49-B-1-1 G49-B-1-2 Fukinolic acid

28 δ δ μ δ δ δ HO O OH O OH 5' 6' 1' 2 2' 3 O O 1" HO 4' 3' OH HO 2" 5" 3" 6" OH OH 4" 그림 6. 1 H-NMR spectrμm 그림 C-NMR spectrμm G C #111 RT: 2.89 AV: 1 NL: 1.81E5 F: - c ESI Q1MS [ ] m/z 그림 8. HMBC NMR spectrμm 그림 9. Mass spectrμm

29 δ δ OH HO O OH O 5' 6' 1' 2 2' 3 O O 1" RO R = acetyl 4' 3' OH HO 2" 5" 3" 6" OH OH 4" μ μ

30 δ δ HO HO O 8 9 OH 그림 H-NMR spectrμm 그림 C-NMR spectrμm δ δ

31 HO HO O 8 9 O HO HO O O 그림 H-NMR spectrμm 그림 C-NMR spectrμm caffeic-acid-ethylester #279 RT: 5.17 AV: 1 NL: 1.80E5 F: - c ESI Q1MS [ ] m/z 그림 19. HMBC NMR spectrμm 그림 20. Mass spectrμm

32 7 HOOC 6 1 OH OR OH OH HO 9' 4' 8' 3' 5' 7' 6' OH 2' O 1' R = caffeoyl Caffeoyl 그림 H-NMR spectrμm 그림 C-NMR spectrμm 그림 24. Mass spectrμm

33 7 HOOC 6 1 OH OH OR OH HO 9' 4' 8' 3' 5' 7' 6' OH 2' O 1' R = caffeoyl Caffeoyl

34 7 HOOC 6 1 OH OR OR OH HO 9' 4' 8' 3' 5' 7' 6' OH 2' O 1' R = caffeoyl Caffeoyl

35 μ μ 3-5-DCQA #183 RT: 3.39 AV: 1 NL: 3.07E5 F: - c ESI Q1MS [ ] m/z μ 7 HOOC 6 1 OH OR OH OR HO 9' 4' 8' 3' 5' 7' 6' OH 2' O 1' R = caffeoyl Caffeoyl

36 δ δ HO OH O 4 10 O 2' OH OH 3' 4' 2 5' 1' 6' 3 OH

37 μ μ δ δ OH HO 6' 7' 5' 8' 4' 9' 3' 2' 1' O O 5 6 O OH O OH O 1" O 2" 5" 3" 4" OH 6" 9" OH 7" 8"

38 μ μ μ μ

39 δ δ O HO 1 O HO μ μ

40 δ δ HO HO 3' 1' HOOC HO O COOH O " 7" 1" 3" OH OH μ μ

41 - 40 -

42 - 41 -

43 μ μ μ μ

44 - 43 -

45 μm μl

46 - 45 -

47 - 46 -

48 - 47 -

49 - 48 -

50 - 49 -

51 1,500 1,200 곰취추출물의직선성시험 1 y = x R² = 피900 크면 600 적 검체량 (mg)

52 1,500 1,200 곰취추출물의직선성시험 2 y = x R² = 피크면적 검체량 (mg)

53 1,500 1,200 곰취추출물의직선성시험 3 y = x R² = 피크면적 검체량 (mg)

54 곰취추출물의직선성시험 1 y = x R² = 피크면적 검체량 (mg)

55 400 곰취추출물의직선성시험 2 y = x R² = 피크면적 검체량 (mg)

56 400 곰취추출물의직선성시험 3 y = x R² = 피크면적 검체량 (mg)

57 - 56 -

58 2,000 곰취추출물의직선성시험 1 y = x R² = ,500 피크 1,000 면적 검체량 (mg)

59 2,000 곰취추출물의직선성시험 2 y = x R² = ,500 피크 1,000 면적 검체량 (mg)

60 2,000 곰취추출물의직선성시험 3 y = x R² = ,500 피크 1,000 면적 검체량 (mg)

61 1,200 곰취추출물의직선성시험 1 y = x R² = 피크면적 검체량 (mg)

62 1,200 곰취추출물의직선성시험 2 y = x R² = 피크면적 검체량 (mg)

63 1,200 곰취추출물의직선성시험 3 y = x R² = 피크면적 검체량 (mg)

64 - 63 -

65 - 64 -

66 - 65 -

67 - 66 -

68 - 67 -

69 - 68 -

70 - 69 -

71 - 70 -

72 - 71 -

73 - 72 -

74 - 73 -

75 - 74 -

76 시험성적서 (Initial) 순서시험항목시험기준시험결과시험일자 1 확인시험 1) 함량시험법에따라시험할때검액은표준액과같은유지시간에서피크를나타낸다. 검액은표준액과같은유지시간에서피크를나타낸다 Chlorogenic acid (C 16H 18O 9 : ) 으로서 2.0% 이상 2.612% 2 함량시험 3,4-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 0.5% 이상 3,5-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 2.7% 이상 0.649% 3.359% ,5-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 1.5% 이상 1.888%

77 시험기록서 검체명 G49(001) 시험지시번호 - 페이지수 - 시험일자 ~ 시험규격별첨작성일자 Ⅰ. 시험방법및시험결과 가. 확인시험 ⑴ 아래의함량시험법에따라시험할때검액은표준액과같은유지시간에서피크를나타낸다. 시험결과 : 검액은표준액과같은유지시간에서피크를나타낸다. 나. 함량시험 : Chlorogenic acid(c 16H 18O 9 : ) 으로서 2.0% 이상 3,4-dicaffeoylquinic acid(c 25 H 24 O 12 : ) 으로서 0.5% 이상 3,5-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 으로서 2.7% 이상 4,5-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 으로서 1.5% 이상 1 표준액조제 : Chlorogenic acid 표준품 7.4mg, 3,4-dicaffeoylquinic acid 표준품 2.7mg, 3,5-dicaffeoylquinic acid 표준품 9.8mg, 4,5-dicaffeoylquinic acid 표준품 5.9mg을정밀히달아 50% EtOH로녹여정확히 50mL로한다. 이액 10mL 을 50% EtOH로 50mL로한다. 2 검액 (SA) 조제 : 곰취추출물 60mg 을취하여 50% EtOH 로정확히 50mL 로한다. 3 분석조건 ᄀ검출기 : 330nm ᄂ칼럼 : C18 (4.6 x 250mm, 5μM) ᄃ이동상 A : 0.1% TFA in H 2O ᄅ이동상 B : 아세토니트릴 시간 ( 분 ) 이동상 A(%) 이동상 B(%) ᄆ유속 : 1.0mL/min ᄇ주입량 : 10uL 4 함량계산 표준품취한량의평균 (mg)/50 x 10/50 x SA 면적 검체취한량 (mg)/50 x 표준액의피크면적의평균 표준품순도 (%)

78 시험기록서 검체명 G49(001) 시험지시번호 - 페이지수 - 시험일자 ~ 시험규격별첨작성일자 함량결과 * Chlorogenic acid(c 16H 18O 9 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 2.612% * 3,4-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 0.649% * 3,5-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 3.359%

79 * 4,5-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 1.888% 시험성적서 ( 가속 2 개월 ) 검체명 G49 제조번호 001 시험규격별규검체량 10g 시험기간 ~ 발행일자 순서시험항목시험기준시험결과시험일자 1 확인시험 1) 함량시험법에따라시험할때검액은표준액과같은유지시간에서피크를나타낸다. 검액은표준액과같은유지시간에서피크를나타낸다 Chlorogenic acid (C 16H 18O 9 : ) 으로서 2.0% 이상 2.630% 2 함량시험 3,4-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 0.5% 이상 3,5-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 2.7% 이상 0.640% 3.369% ,5-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 1.5% 이상 1.920%

80 시험기록서 검체명 G49(001) 시험지시번호 - 페이지수 - 시험일자 ~ 시험규격별첨작성일자 함량결과 * Chlorogenic acid(c 16H 18O 9 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 2.630% * 3,4-dicaffeoylquinic acid(c 25 H 24 O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 0.640% * 3,5-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 3.369%

81 * 4,5-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 1.920% 시험성적서 ( 가속 4 개월 ) 검체명 G49 제조번호 001 시험규격 별규 검체량 10g 시험기간 ~ 발행일자 순서시험항목시험기준시험결과시험일자 1 확인시험 1) 함량시험법에따라시험할때검액은표준액과같은유지시간에서피크를나타낸다. 검액은표준액과같은유지시간에서피크를나타낸다 Chlorogenic acid (C 16H 18O 9 : ) 으로서 2.0% 이상 2.579% 2 함량시험 3,4-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 0.5% 이상 3,5-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 2.7% 이상 0.613% 3.304% ,5-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 1.5% 이상 1.896%

82 시험기록서 검체명 G49(001) 시험지시번호 - 페이지수 - 시험일자 ~ 시험규격별첨작성일자 함량결과 * Chlorogenic acid(c 16 H 18 O 9 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 2.579% * 3,4-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 0.613% * 3,5-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 3.304%

83 * 4,5-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 1.896% 시험성적서 ( 가속 6 개월 ) 검체명 G49 제조번호 001 시험규격별규검체량 10g 시험기간 ~ 발행일자 순서시험항목시험기준시험결과시험일자 1 확인시험 1) 함량시험법에따라시험할때검액은표준액과같은유지시간에서피크를나타낸다. 검액은표준액과같은유지시간에서피크를나타낸다 Chlorogenic acid (C 16H 18O 9 : ) 으로서 2.0% 이상 2.509% 2 함량시험 3,4-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 0.5% 이상 3,5-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 2.7% 이상 0.611% 3.117% ,5-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 1.5% 이상 1.983%

84 시험기록서 검체명 G49(001) 시험지시번호 - 페이지수 - 시험일자 ~ 시험규격별첨작성일자 지표성분의함량결과 * Chlorogenic acid(c 16H 18O 9 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 2.509% * 3,4-dicaffeoylquinic acid(c 25 H 24 O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 0.611% * 3,5-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 3.117%

85 * 4,5-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 1.983% 시험성적서 ( 장기 2 개월 ) 검체명 G49 제조번호 001 시험규격별규검체량 10g 시험기간 ~ 발행일자 순서시험항목시험기준시험결과시험일자 1 확인시험 1) 함량시험법에따라시험할때검액은표준액과같은유지시간에서피크를나타낸다. 검액은표준액과같은유지시간에서피크를나타낸다 Chlorogenic acid (C 16H 18O 9 : ) 으로서 2.0% 이상 2.642% 2 함량시험 3,4-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 0.5% 이상 3,5-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 2.7% 이상 0.639% 3.411% ,5-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 1.5% 이상 1.892%

86 시험기록서 검체명 G49(001) 시험지시번호 - 페이지수 2 / 6 시험일자 ~ 시험규격별첨작성일자 지표성분의함량결과 * Chlorogenic acid(c 16H 18O 9 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 2.642% * 3,4-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA ,07619 SA SA 평균함량 0.639% * 3,5-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 3.411%

87 * 4,5-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 1.892% 시험성적서 ( 장기 4 개월 ) 검체명 G49 제조번호 001 시험규격 별규 검체량 10g 시험기간 ~ 발행일자 순서시험항목시험기준시험결과시험일자 1 확인시험 1) 함량시험법에따라시험할때검액은표준액과같은유지시간에서피크를나타낸다. 검액은표준액과같은유지시간에서피크를나타낸다 Chlorogenic acid (C 16H 18O 9 : ) 으로서 2.0% 이상 2.606% 2 함량시험 3,4-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 0.5% 이상 3,5-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 2.7% 이상 0.604% 3.359% ,5-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 1.5% 이상 1.854%

88 시험기록서 검체명 G49(001) 시험지시번호 - 페이지수 3 / 6 시험일자 ~ 시험규격별첨작성일자 지표성분의함량결과 * Chlorogenic acid(c 16H 18O 9 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA ,94586 SA 평균함량 2.606% * 3,4-dicaffeoylquinic acid(c 25 H 24 O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 0.604% * 3,5-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 3.359%

89 * 4,5-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 표준액에대한결과 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 1.854% 시험성적서 ( 장기 6 개월 ) 검체명 G49 제조번호 001 시험규격별규검체량 10g 시험기간 ~ 발행일자 순서시험항목시험기준시험결과시험일자 1 확인시험 1) 함량시험법에따라시험할때검액은표준액과같은유지시간에서피크를나타낸다. 검액은표준액과같은유지시간에서피크를나타낸다 Chlorogenic acid (C 16H 18O 9 : ) 으로서 2.0% 이상 2.532% 2 함량시험 3,4-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 0.5% 이상 3,5-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 2.7% 이상 0.596% 3.276% ,5-dicaffeoylquinic acid (C 25H 24O 12 : ) 으로서 1.5% 이상 1.854%

90 시험기록서 검체명 G49(001) 시험지시번호 - 페이지수 3 / 6 시험일자 ~ 시험규격별첨작성일자 지표성분의함량결과 * Chlorogenic acid(c 16H 18O 9 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 2.532% * 3,4-dicaffeoylquinic acid(c 25 H 24 O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 0.596% * 3,5-dicaffeoylquinic acid(c 25H 24O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 3.276%

91 * 4,5-dicaffeoylquinic acid(c 25 H 24 O 12 : ) 순도 (%) 취한량 (mg) 피크면적 표준액 표준액 평 균 SA SA SA 평균함량 1.854%

92 (1) 제조공정 (2) 공정, 식품, 식품첨가물 (3) 수율 (kg)

93 - 92 -

94 - 93 -

95 - 94 -

96 - 95 -

97 - 96 -

98 - 97 -

99 - 98 -

100 3. IRB 승인

101

102 μ μ μ μ μ

103 μ α γ μ μ μ γ α β μ

104 μ μ μ μ α μ

105

106 μ μ μ μ μ μ

107 μ

108

109 μ μ μ μ

110 μ μ μ μ

111 μ μ μ μ

112 μ μ

113 μ

114 μ μ μ μ μ μ

115 μ μ μ μ μ γ α μ γ α

116 γ α

117 γ α μ μ μ μ μ μ

118

119

120

121 Control Plasmin 0.25 unit/ml Plasmin 0.5 unit/ml Plasmin 1 unit/ml Control 1 mg/ml 2 mg/ml

122 Control 500 μm 1 mm Control 500 μm 1 mm Control 500 μm 1 mm Control 500 μm 1 mm

123 Control 500 μm 1 mm Control 500 μm 1 mm Control 500 μm 1 mm Control 500 μm 1 mm

124 μ

125 μ α α Control TNF-α 1μg/ml DHA 10 μm

126 곰취추출물 50 μg/ml Chlorogenic acid A 50 μm Chlorogenic acid B 50 μm Chlorogenic acid C 50 μm 곰취추출물 100 μg/ml Chlorogenic acid A 100 μm Chlorogenic acid B 100 μm Chlorogenic acid C 100 μm Control TNF-α 1μg/ml DHA 10 μm 곰취추출물 50μg/ml Chlorogenic acid A 50μM Chlorogenic acid B 50μM Chlorogenic acid C 50μM 곰취추출물 100μg/ml Chlorogenic acid A 100μM Chlorogenic acid B 100μM Chlorogenic acid C 100μM μ

127 μ

128

129

130 μ

131

132 μ

133

134

135

136

137

138

139 μ μ μ μ μ μ μ μ μ μ

140 μ μ μ μ μ μ μ μ

141 μ μ μ μ μ β μ μ μ μ μ

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150 제 4 장 목표달성도및관련분야에의기여도

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153 제 5 장연구개발성과및성과활용계획 μ β

154 μ μ

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157 μ μ μ α β

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159 제 6 장연구개발과정에서수집한해외과학기술정보 제약사제품명비고 릴리에피언트국내시판승인, 2011 년출시 아스트라제네카브릴린타임상 3 상완료 노바티스헤리노그렐임상 2 상완료

160 제 7 장연구시설 장비현황

161 제 8 장연구실안전관리이행실적 < 법이행사

162 - ( ) ( ; 10446, ),,.. -, ( : )., ( : (); : ). -.., - :,, /. - :,.,,,.,.. - :,...., - :,,

163 - :,,,. - :. - :. - :. - :,.. -, ( ) (, 1;, 3;,, 1; 1), (, ). - :

164 제 9 장참고문헌 μ μ

165 μ μ

166 [ 별첨 1] 특허, 논문, 제품 ( 시장 ) 분석보고서 나. 특허분석에따른본연구과제와의관련성

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