DMD 보인자진단을위한다형분석 237 위한계치보다높게나타난다. 그러나 CPK치는채혈하는시간에따라다양한결과를보이며, 정상인과보인자의 CPK 수치가중복될수있다. 따라서 CPK 수치는보인자여부에대한상대적가능성만을제공한다 [2, 3]. DNA 분석법에의한보인자진단은 cdna

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1 대한임상병리학회지 : 제 20 권제 2 호 2000 Korean J Clin Pathol 2000; 20: 분자유전학 듀센형근이영양증보인자진단을위한유전자다형분석 최종락 송경순 박숙자 * 연세대학교의과대학임상병리과학교실, 부산일신기독병원 * Genetic Polymorphism Analysis for the Detection of Duchenne Muscular Dystrohpy Carriers Jong Rak Choi, M.D., Kyung Soon Song, M.D., and Sook Ja Park, M.D.* Department of Clinical Pathology, College of Medicine, Yonsei University, Seoul, Department of Clinical Pathology, Ilsin Christian Hospital, Pusan, Korea* Background : Detection of Duchenne muscular dystrophy carriers can be made by serum creatine phosphokinase and molecular biologic methods such as restriction fragment length polymorphisms (RFLPs) and gene dosage analysis for deleted exons. We applied rapid and simple PCR- RFLP method to find informative markers for carrier diagnosis. Methods : 100 unrelated normal females (200 X-chromosomes) are included in this study. DNA isolated from their white blood cells was used to perform PCR-RFLP. Polymorphisms for pert series (87-8, 87-15, 84) and nearby exon 48 are detected by TaqI, BamHI, Xmnl, MaeIII, and MseI restriction sites, respectively. Allelic frequencies and heterozygosity rates were calculated to assess the diagnostic usefulness. Results : The allelic (+/-) frequencies of pert 87-8/TaqI, pert 87-15/BamHI, pert 87-15/XmnI, pert 84/MaeIII, and exon 48/MseI restriction sites were 0.36/0.64, 0.61/0.39, 0.43/0.57, 0.59/0.41, 0.84/0.16, respectively. The calculated/observed heterozygosity rates of those polymorphic sites were 46/39, 48/52, 49/55, 48/49, and 27/28, respectively. Conclusions : Heterozygosity rates of pert series and pert 84 were higher than those of pert 87-8 and exon 48 in Korean population. Three PCR-RFLPs (pert 87-15/XmnI, pert 87-15/BamHI, pert 84) were considered to be clinically useful for the diagnosis of carrier and the secondary use of pert 87-8 and exon 48 would improve the diagnosis of carrier. (Korean J Clin Pathol 2000; 20: ) Key words : Duchenne muscular dystrophy, Carrier diagnosis, PCR, RFLP 서 론 듀센형근이영양증 (Duchenne Muscu1ar Dystrophy: DMD) 접수 : 2000 년 2 월 15 일접수번호 : KJCP1379 수정본접수 : 2000 년 3 월 7 일교신저자 : 송경순우 서울시서대문구신촌동 134 연세대학교의과대학임상병리과전화 : , Fax: * 본논문은 1999 년도보건의료기술연구개발사업연구비 (HMP-97-NM ) 의지원으로이루어졌음. 은 X 성염색체열성으로유전되는가장흔한신경근육계유전질환으로약 3,500 명의출생남아중 1명의빈도로발병된다 [1]. 그러나약 30% 에서는가족력이없는가계에서발생될수있다 [2]. 따라서근육병의보인자진단을통한산전진단은특별한치료방법이없는근육병환자개인의육체적고통은물론주변가족들의정신적, 경제적부담을줄이고사전예방으로환자의발생을줄일수있다. 그러나, 듀센형근이영양증의보인자진단은아직도여러문제점이있다. 전통적으로흔히사용되는보인자진단검사는보인자로의심되는여자의혈청내 creatine phosphokinase (CPK) 수치를측정하는것이다. 보인자의약 70-75% 에서정상인의상 236

2 DMD 보인자진단을위한다형분석 237 위한계치보다높게나타난다. 그러나 CPK치는채혈하는시간에따라다양한결과를보이며, 정상인과보인자의 CPK 수치가중복될수있다. 따라서 CPK 수치는보인자여부에대한상대적가능성만을제공한다 [2, 3]. DNA 분석법에의한보인자진단은 cdna 소식자를이용하는 Southern blot법이있다 [4-6]. 이방법은결손된 exon과결손되지않은 exon의표지강도를비교하여측정하는것인데주관적이고시간이많이소요되며재료비가많이드는단점이있다. 또한유전자결손에의한경우가아닌다른유전자결손인경우에서는진단하기어렵다. 유전자결손이아닌가계에서보인자진단은제한효소단편장다형 (restriction fragment lengh polymorphism, RFLP) 분석을통해근육병유전자형을추정할수있다. 따라서여러연구자들에의해유용한 RFLP 검색을위한 DNA 소식자 (probe) 의개발이계속되어왔고 [7-9] 그중에서도 DMD 유전자부위내에존재하여약 4-6% 의 recombination 빈도를나타내는 pert 87 시리즈 (DXS 164: 87-1, 87-8, 87-15) 의유용성에관한보고가가장많다 [10-14]. 그리고국내에서도송등에의해정상한국인에서의이형접합 (heterozygosity) 양상및대립유전자비율을조사한바있다. 그러나이검사방법도 Southern blot을시행하기때문에시간이많이소요되며재료비가많이드는단점이있다. 이에저자들은 Southern blot의단점을줄인중합효소연쇄반응 (polymerase chain reaction, PCR) 법을이용하여정상한국여성에서 pert 87 시리즈외에 pert 84와 exon 48 부위의이형접합양상및대립유전자비율을조사하여보인자진단과산전진단의토대를마련하고자하였다. 대상및방법 1. 연구대상서로혈연관계가없는정상한국인여자 ( 총 X 염색체수 : 200) 를대상으로 DMD 유전자내표지자인 pert 시리즈 (DXS164: 87-8, 87-15의 2종, 84) 및 exon 48 부위에서각제한효소 (TaqI, BamHI, XmnI, MaeIII, MseI) 를사용하여 PCR-RFLP 법 ( 중합연쇄반응제한효소단편장다형 ) 분석을실시하였으며이를통해각유전자형의대립인자빈도와이형접합률을조사하였다. L의용해액을첨가하여 vortex를사용하여잘섞은후65 수조에서 10분간가온한다. 20 L의침전용액과 70 L의 chloroform을넣은후잘섞고원심분리 (12,000 g, 10분 ) 후상층액을다른미세원심분리관에옮긴다. 옮겨진상층액에 445 L의 TE 완충액, 5 L의 glycogen과 100% ethanol 1 ml을넣고얼음에 30분간침전시킨후상층액을버리고말린후 10 L의 TE 완충액을첨가하여 pellet을용해시켜사용하였다. 2) 시발체 (primers) pert 시리즈 (DXS164: 87-8, 87-15의 2종, 84) 및 exon 48 부위에서대한중합효소연쇄반응에사용한시발체는 Table 1에있는것과같다 [15-17]. 이시발체는국내의바이오니아사로부터제조하여사용하였다. 3) 유전자증폭및제한효소반응중합효소연쇄반응혼합액은 PCR 완충액 (50 mm KCl, 2.5 mm MgCl 2, 10 mm Tris-HCl ph 8.3) 에 dntp 각 0.25 mm 씩넣고 genomic DNA 2 L, Taq DNA polymerase 1 unit (Perkin-Elmer, Foster City, CA., USA) 를넣어총용량이 20 L가되도록하였다. 이호합액을 GeneAmp PCR System 9600 (Perkin-Elmer, Foster City, CA., USA) 을이용하여 94 에서 2분간처리한후다음반응 (94 에서 10초, 62 에서 10 초, 72 에서 15초 ) 을 40회반복하고 72 에서 5분간연장처리하였다. 각유전자의증폭산물에제한효소 TaqI, BamHI, XmnI, MseI (New England Biolab Inc., Beverly, MA., USA) 과 MaeIII (Boehringer Mannheim, Manheim, Germany) 를사용하여반응시켰으며, 방법은제조사에서제공하는지침서에따라시행하였다. 4) 결과의확인제한효소로처리한 12 L의반응산물에 loading dye 2 L 를섞어 1.5% agarose gels에서전기영동하였으며 ethidium bromide로염색하여 UV transilluminator에서반응산물을확인하였다. Size marker는 100 bp ladder (Gibco, Grand Island, NY., USA) 를사용하여크기를비교하였다. 예상되는반응산물의크기는 Table 1과같다. 2. 연구방법 1) DNA 추출 EDTA 항응고제를사용한말초혈액으로부터 Easy-DNA kit (Invitrogen, Carlsbad, CA., USA) 를사용하여 DNA를추출하였다. 추출방법은대체로제조사에서제공하는지침서에따라시행하였는데요약하면다음과같다. 냉동보관된혈액을녹여원심분리후원침된혈액 100 L를미세원심분리관에넣고 50 5) 결과의판정 Table 1에서처럼제한효소에절단된크기의반응산물이보이면 +allele으로, 절단된크기의반응산물이없으면 -allele으로판정하여이형접합양상및대립유전자비율을조사하였다.

3 238 최종락 송경순 박숙자 Table 1. Charateristics of primers used in this study Marker Primers* (5-3 ) Restriction enzyme Product size(bp) Allele polymorphisms pert87-8 GTCAGTTGGTCAGTAAAAGCC CAGATCAGTCGACCAATTAAAACCACAGCAG TaqI 155 pert87-15 CTGATCAGGATCCAGTAACGGAAAGTGC CTGATGAAATAATTCTGAATAGTCACAAAAAG BamHI 226 pert87-15 GACTGGAGCAAGGGTCGCC CTGATGAACAATTTCCCTTTCATTCCAG XmnI 740 pert84 CAGGGATGCAAAGGAACTGGG CAGTTTGTTTAACAGTCACTC MaeIII 225 exon48 AAGCTTGAAGACCTTGAAGAGC CCTGAATAAAGTCTTCCTTACCACAC MseI *reference 15, 16, 17. 결 과 1. pert 87-8/TaqI RFLP 분석결과 서로혈연관계가없는정상한국인여자 X 염색체 200개를대상으로하여 pert 87-8/TaqI RFLP 분석을한결과공통절편 (constant band) 인 10 bp 절편 ( 전기영동결과에나타나지않음 ) 과함께 74/71 bp(p) 와 145 bp(q) 절편들이함께관찰되었으며, 각각 0.36와 0.64의대립유전자빈도를나타내었다. 실제대상에포함된정상한국인여자 100명중 39명 (39%) 에서두대립인자를모두보유한이형접합상태임이관찰되었으며이론적 (p 2 +2pq+q 2 =1) 계산에의한 46% 보다낮은결과를보였다 (Table 2). 2. pert 87-15/BamHI RFLP 분석결과 서로혈연관계가없는정상한국인여자 X 염색체 200개를대상으로하여 pert 87-15/BamHI RFLP 분석을한결과, 공통절편인 10 bp 절편과함께 166/50 bp(p) 와 216 bp(q) 절편들 Table 2. Polymorphisms of the DMD in Korean population Marker Allelic frequency Heterozygosity (%) + allele - allele Calculated (n*) Observed (n ) pert87-8/taqi (200) 39 (39/100) pert87-15/bamhi (200) 52 (52/100) pert87-15/xmni (200) 55 (55/100) pert84/maeiii (200) 49 (49/100) exon48/msei (200) 28 (28/100) *No. of X chromosomes calculated; No. of heterozygotes/no. of females observed. 이각각 0.61, 0.39의대립유전자빈도로관찰되었다. 실제대상에포함된정상한국인여자 100명중 52명 (52%) 에서두대립인자를모두보유한이형접합상태임이관찰되었으며이론적계산에의한 48% 와유사한결과를보였다 (Table 2). 3. pert 87-15/XmnI RFLP 분석결과서로혈연관계가없는정상한국인여자 X 염색체 200개를대상으로하여 pert 87-15/XmnI RFLP분석을한결과, 520/210 bp(p) 와 730 bp(q) 와절편들이각각 0.43, 0.57의대립유전자빈도로관찰되었다. 실제대상에포함된정상한국인여자 100명중 55명 (55%) 에서두대립인자를모두보유한이형접합상태임이관찰되었으며이론적계산에의한 49% 에비해다소높은결과를보였다 (Table 2). 4. pert 84/MaeIII RFLP 분석결과서로혈연관계가없는정상한국인여자 X 염색체 200개를대상으로하여 pert 84/MaeIII RFLP 분석을한결과, 128/108 bp(p) 와 236 bp(q) 와절편들이각각 0.59, 0.41의대립유전자빈도로관찰되었다. 실제대상에포함된정상한국인여자 100명중 49명 (49%) 에서두대립인자를모두보유한이형접합상태임이관찰되었으며이론적계산에의한 48% 와유사한결과를보였다 (Table 2). 5. exon 48/MseI RFLP 분석결과서로혈연관계가없는정상한국인여자 X 염색체 200개를대상으로하여 exon 48/MseI RFLP 분석을한결과, 85/23 bp(p) 와 108 bp(q) 와절편들이각각 0.84, 0.16의대립유전자빈

4 DMD 보인자진단을위한다형분석 239 도로관찰되었다. 실제대상에포함된정상한국인여자 100명중 28명 (28%) 에서두대립인자를모두보유한이형접합상태임이관찰되었으며이론적계산에의한 27% 와유사한결과를보였다 (Table 2). 고 DMD의보인자진단방법은전통적인방법인혈청내 CPK 수치를측정하는방법에서부터최근에는분자생물학적검사인제한효소단편장다형검사와결손된 exon의 DNA 정량검사등여러방법들이개발되어보인자진단을통한이질환의발생을예방하고있다. 그러나혈청내 CPK 수치를측정하는방법은보인자의약 70-75% 에서만정상인의상위한계치보다높게나타나고, 채혈하는시간에따라다양한결과를보이며, 정상인과보인자의 CPK 수치가중복되어나타나상대적가능성만을제공한다 [2, 3]. 최근에는분자생물학검사의발달로여러보인자진단법이도입되고있는데그중의하나는결손된 exon의 DNA를직접정량검사하는방법이다 [4-6]. 그러나이검사법은 exon 결손외의유전자결함인점돌연변이경우에서는적용하기어려우며, 측정하는부위와다른 exon의결손일경우도진단에어려움이따르는문제점이있다. 다른한검사방법은제한효소를사용하여근육병환자가있는가계에서간접적으로보인자여부를측정하는방법이다. 이방법은 exon 결손이나중복이아닌유전자변이를보이는약 40% 의환자에서유용할수있다. 전통적으로는 Southern blot을이용하는 intragenic RFLP가많이사용되며그중에서도 X 성염색체 (Xp2l.2) 의 dystrophin 유전자위치에위치하는 int-ragenic probe인 pert 87-1, 87-8, 87-15와 4종류의제한효소 (BstN I, BstX I, Taq I, Xmn I) 를이용한 RFLP 분석 Table 3. Comparison of allele frequencies of DMD gene by RFLP between Koreans and Caucasians Marker pert87-8/taqi pert87-15/bamhi pert87-15/xmni pert84/maeiii exon48/msei 찰 Koreans This study *reference 20; reference 24; reference 14. Allelic frequency Song* Chinese Allele polymorphisms Cauasians 이가장보편화된방법이다 [14]. 그러나한종류의 RFLP 소식자를이용하게되면종종보인자진단에정보를줄수없는경우가생기므로대개는몇가지의소식자를병행사용하여야한다. 또한 dystrophin 유전자의크기 (11-12 cm) 는상당히크기때문에유전자결손부위와 intragenic RFLP 사이의약 5-10% 정도재조합이일어날가능성이있는것으로보고되고있다 [2, 18, 19]. 국내에서도송등에의해이러한방법을통해정상한국인에서의대립유전자의빈도와이형접합빈도를조사한바가있다 [20]. 본연구에서는 Southern blot 방법대신중합효소연쇄반응법을이용하여정상한국여성에서 pert 87 시리즈외에 pert 84와 exon 48 부위의이형접합양상및대립유전자비율을조사하여빠르고간편하게임상에적용할수있도록하였다. 그결과, 정상한국인에서발견된대립유전자의다형성은 Caucasian의경우와비교하여유사한다형성을나타내었으나대립유전자빈도에있어서는다소차이를보였다 (Table 3). 대립유전자빈도에있어비교가가능한 pert 87-8/TaqI의경우, Caucasian에서는절단부위의비보유자에비해보유자가많은반면한국인의경우는이와반대로절단부위보유자보다는비보유자의수가많음을알수있었다 [14]. 이결과는이전에송 [20] 등이보고한빈도와유사하였다. 그리고새로이이연구에포함한 pert 84/MaeIII의경우, Caucasian에서는절단부위의보유자에비해비보유자가많은반면한국인의경우는이와반대로절단부위비보유자보다는보유자의수가많음을알수있었다 [16]. 그러나 pert 87-17/XmnI의경우에는대립인자비율이거의반반으로유사하였다 [14]. 또한 exon 48/MseI의경우, Caucasian과한국인모두보유자의수가많음을보였다 [17]. pert 시리즈 (DXS164: 87-8, 87-15의 2종, 84) 및 exon 48 부위에서각제한효소 (TaqI, BamHI, XmnI, MaeIII, MseI) 를사용하여 PCR-RFLP 분석에의한결과에따르면, pert 87-15/BamHI, pert 87-15/XmnI과 pert 84/MaeIII의이형접합빈도가 50% 정도로보인자진단을위하여우선적용하면검색에용이할것으로사료된다. pert 87-8/TaqI, exon 48/MseI는먼저시행한 pert 시리즈가동형접합 (homozygosity) 로서정보가유용하지않은경우 2차적으로적용함이바람직하겠다. 따라서 DMD 환자의약 1/3은가족력이없이환자에서만산발적으로발생하는새로운돌연변이에의한것으로보고된 [21] 바있어이런경우는산전진단을통한예방이어려우나가족력이있는 2/3에서는간단한 PCR로 DMD 환자의약 60%[4, 22] 에달하는결손이있는환자의가계에서의보인자검색에적용할수있는 PCR 산물의정량분석 [23] 과더불어위연구에서처럼 PCR-RFLP를이용하면빠르고간편하게보인자여부를진단하여산전진단에도움을줄것으로사료된다.

5 240 최종락 송경순 박숙자 요약배경 : 듀센형근이영양증 (Duchenne muscular dystrophy: DMD) 의보인자진단방법은혈청내 creatine phosphokinase (CPK) 수치를측정하는방법에서부터최근에는분자생물학적검사인제한효소단편장다형검사와결손된 exon의 DNA 정량검사등여러방법들이개발되어보인자진단을통한이질환의발생을예방하고있다. 보인자진단에유용한표지자를찾기위해 Southern blot 방법보다빠르고간편한 PCR-RFLP 방법을적용하였다. 방법 : 서로혈연관계가없는정상한국인여자 ( 총 X 염색체수 : 200) 를대상으로 DMD 유전자내표지자인 pert 시리즈 (87-8, 87-15의 2종, 84) 및 exon 48 부위에서각제한효소 (TaqI, BamHI, XmnI, MaeIII, MseI) 를사용하여 PCR-RFLP 법 ( 중합연쇄반응제한효소단편장다형 ) 분석을실시하였으며, 각유전자형의대립인자빈도와이형접합률을조사하였다. 결과 : 유전자형 pert 87-8/TaqI, pert 87-15/BamHI, pert 87-15/XmnI, pert 84/MaeIII, exon 48/MseI에대한 +/- 대립인자빈도는각각 0.36/0.64, 0.61/0.39, 0.43/0.57, 0.59/0.41, 0.84/0.16 이었다. 또한각유전자형에대한이형접합률 (%) 은이론적예측치와실제관찰치가각각 46/39, 48/52, 49/55, 48/49, 27/28로서서로유사한결과를보였다. 결론 : 검사한표지자중 pert 87-15와 pert 84는한국인에서이형접합빈도가다른표지자 (pert 87-8/TaqI, pert exon 48/MseI) 에비해가장높아다형성에따른 family linkage analysis에우선적으로사용될수있으며이는 DMD 가계에서보인자검색에실질적인도움을줄수있을것으로사료된다. pert 87-15와 pert 84 검사결과동형접합인경우에는 2차적으로 pert 87-8/TaqI과 exon 48/MseI 등을적용함이바람직하겠다. 또한 PCR-RFLP법은종전의 Southern blot법에비해술식이간편하여보인자검색및산전진단에보다실용적인것으로사료된다. 참고문헌 1. Hoffman EP, Brown RH, Kunkel LM. Dystrophin : the protein product of the Duchenne muscular dystrophy locus. Cell 1987; 51: Schwartz LS, Tarleton J, Popovich B, Seltzer WK, Hoffman EP. Fluorescent multiplex linkage analysis and carrier detection for Duchenne/Becker muscular dystrophy. Am J Hum Genet 1992; 51: Gruemer HD, Miller WG, Chinchilli VM, Leshner RT, Blasco PA, Hassler CR, et al. Prediction of carrier status in Duchenne dystrophy by creatine kinase measurement. Am J Clin Pathol 1985; 84: Koenig M, Hoffman EP, Bertelson CJ, Monaco AP, Feener C, Kunkel LM. Complete cloning of the Duchenne muscular dystrophy (DMD) cdna and preliminary genomic organization of the DMD gene in normal and affected individuals. Cell 1987; 50: Hodgson SV and Bobrow M. Carrier detection and prenatal diagnosis in Duchenne and Becker muscular dystrophy. Br Med Bull 1989; 45: Hu XY, Ray PN, Murphy EG, Thompson MW, Worton RG. Duplicational mutation at the Duchenne muscular dystrophy locus: its frequency, distribution, origin, and phenotypegenotype correlation. Am J Hum Genet 1990; 46: Hofker MH, Wapenaar MC, Goor N, Bakker E, van Ommen GJ, Pearson PL. Isolation of probes detecting restriction fragment length polymorphisms from X chromosome-specific libraries: potential use for diagnosis of Duchenne muscular dystrophy. Hum Genet 1985; 70: Francke U, Ochs HD, de Martinville B, Giacalone J, Lindgren V, Disteche C, et al. Minor Xp2l chromosome deletion in a male associated with expression of Duchenne muscular dystrophy, chronic granulomatous disease, retinitis pigmentosa, and McLeod syndrome. Am J Hum Genet 1985; 37: Hejtmancik JF, Harris SG, Tsao CC, Ward PA, Caskey CT. Carrier diagnosis of Duchenne muscular dystrophy using restriction fragment length polymorphisms. Neurology 1986; 36: Monaco AP, Bertelson CJ, Middlesworth W, Colletti CA, Aldridge J, Fischbeck KH, et al. Detection of deletions spanning the Duchenne muscular dystrophy locus using a tightly linked DNA segment. Nature 1985; 316: Monaco AP, Neve RL, Colletti-Feener C, Bertelson CJ, Kurnit DM, Kunkel LM. Isolation of candidate cdnas for portions of the Duchenne muscular dystrophy gene. Nature 1986; 323: Fischbeck KH, Ritter AW, Tirschwell DL, Bertelson CJ, Kunkel LM, Monaco AP, et al. Recombination with pert87 (DXS164) in families with X-linked muscu1ar dystrophy. Lancet 1986; 2: Lanman JT, Pericak-Vance MA, Bartlett RJ, Chen JC, Yamaoka L, Koh J, et al. Familial inheritance of a DXS164 deletion mutation from a heterozygous female. Am J Hum Genet 1987; 41: Katayama S, Montano M, Slotnick RN, Lebo RV, Golbus MS. Prenatal diagnosis and carrier detection of Duchenne muscular dystrophy by restriction fragment length polymorphism analysis with pert 87 deoxyribonucleic acid probes. Am J Obstet Gynecol 1988; 158: Roberts RG, Cole CG, Hart KA, Bobrow M, Bentley DR. Rapid carrier and prenatal diagnosis of Duchenne and Becker muscular dystrophy. Nucleic Acids Res 1989; 17: Roberts RG, Bobrow M, Bentley DR. A MaeIII polymorphism near the dystrophin gene promoter by restriction of amplified DNA. Nucleic Acids Res 1990; 18: Yau SC, Roberts RG, Bentley DR, Mathew CG, Bobrow M. A MseI

6 DMD 보인자진단을위한다형분석 241 polymorphism in exon 48 of the dystrophin gene. Nucleic Acids Res 1991; 19, Bartlett RJ, Pericak-Vance MA, Koh J, Yamaoka LH, Chen JC, Hung WY, et al. Duchenne muscular dystrophy: high frequency of deletions. Neurology 1988; 38: Abbs S, Yau SC, Clark S, Mathew CG, Bobrow M. A convenient multiplex PCR system for the detection of dystrophin gene deletions: a comparative analysis with cdna hybridisation shows mistypings by both methods. J Med Genet 1991; 28: 송경순, 최종락, 이창훈, 박영숙, 강성웅, 문재호. 한국인듀센형근디스트로피가계에서의보인자진단을위한 DNA 제한효소단편장다형에관한연구. 대한임상병리학회지 1996; 16: Boelter WD, Burt BA, Spector EB, Hinton DR, Pavlova Z, Fujimoto A. Dystrophin protein and RFLP analysis for fetal diagnosis and carrier confirmation of Duchenne muscular dystrophy. Prenat Diagn 1990; 10: Baumbach LL, Chamberlain JS, Ward PA, Farwell NJ, Caskey CT. Molecular and clinical correlations of deletions leading to Duchenne and Becker muscular dystrophies. Neurology 1989; 39: Prior TW, Papp AC, Snyder PJ, Highsmith Jr. WE, Friedman KJ, Perry TR, et al. Determination of carrier status in Duchenne and Becker muscular dystrophies by quantitative polymerase chain reaction and allele-specific oligonucleotides. Clin Chem 1990; 36: Soong BW, Tsai TF, Su CH, Kao KP, Hsiao KJ, Su TS. DNA polymorphisms and deletion analysis of the Duchenne-Becker muscular dystrophy gene in the Chinese. Am J Med Genet 1991; 38:

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