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영기 곽
5 years ago
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1 Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society Vol. 12, No. 6 pp , 2011 DOI : /KAIS 김양미 1*, 김경아 2 1 충북대학교의과대학생리학교실, 2 충북대학교의과대학의공학교실 The effect of flavonoids on the TREK-1 channel Yangmi Kim 1* and Kyung-Ah Kim 2 1 Dept. of Physiology, College of Medicine, Chungbuk National University 2 Dept. of Biomedical Engineering, College of Medicine, Chungbuk National University 요약 TREK-1 채널은 two-pore 도메인포타슘 (K2P) 채널로서세포내 ph, 세포막의신전, 불포화지방산, 온도, 휘발성마취제, 신경세포방어물질에의해잘조절된다. TREK-1 채널은포타슘이동에의해신경세포의흥분성과안정막전압을조절한다. 최근 TREK-1은전립선암세포에서도과발현됨이확인되었다. 이러한중요성에도불구하고, TREK-1 채널에대한플라보노이드효과는거의알려지지않았다. 본연구의목적은전기생리학적방법중의하나인 excised inside-out patch기법을이용하여 TREK-1 채널을조절하는플라보노이드를탐색하는것이다. TREK-1 채널이발현된 CHO 세포에서단일채널팻취고정방법을이용하여커큐민 (curcumin), EGCG (epigallocatechin-3-gallate), 퀘르세틴 (quercetin) 에의한 TREK-1 채널의차단효과를증명하였다. 퀘르세틴과커큐민의차단효과는가역적으로회복되었으나 EGCG는거의회복되지않았다. 퀘르세틴, EGCG, 커큐민의상대적채널활성도 (relative channel activity) 는 73 ± 2.3% (n=5), 91 ± 3.2% (n=7), 94 ± 5.6% (n=4) 까지감소하였다. CHO 세포에발현된 TREK-1 채널에대한커큐민, 퀘르세틴, EGCG의 IC 50 는각각 1.04 ± 0.19 μm, 1.13 ± 0.26 μm, 13.5 ± 2.20 μm 이었다. 이러한결과는플라보노이드가 TREK-1 채널을억제하며, 이조절은신경계또는종양세포에서플라보노이드의약리학적작용중의하나임을제시한다. Abstract TREK-1 channel is a member of the two-pore domain potassium (K2P) channel family that is regulated by intracellular ph, membrane stretch, polyunsaturated fatty acids, temperature, and some neuroprotectant agents. TREK-1 channel can influence neuronal excitability by regulating leakage of potassium ions and resting membrane potential. TREK-1 channel has been shown to be overexpressed in prostate cancer cells. Although the importance of these properties, relatively little is known about flavonoid effects in the regulations of TREK-1 channel. The purpose of the study was to screening of flavonoids as the TREK-1 channel modulator using one of electrophysiological techniques such as excised inside-out patch configuration. We demonstrated blocking effect on TREK-1 channel by flavonoids such as epigallocatechin-3-gallate (EGCG), curcumin and quercetin in CHO cells transiently expressing TREK-1 channel. The inhibition of TREK-1 channel by quercetin and curcumin was reversible, whereas EGCG was little reversible. Quercetin, EGCG and curcumin decreased the relative channel activity to 73%, 91% and 94%, respectively. The half-inhibitory concentration (IC50) of curcumin, quercetin and EGCG was 1.04 ± 0.19 μm, 1.13 ± 0.26 μm and 13.5 ± 2.20 μm in CHO cells expressing TREK-1 channel, respectively. These results indicate that flavonoids might regulate TREK-1 and this regulation might be one of the pharmacological actions of flavonoid in nervous systems and cancer cells. Key Words : TREK-1, Epigallocatechin-3-gallate (EGCG), Curcumin, Quercetin, Flavonoid, Single Channel 본논문은 2009 년도충북대학교학술연구지원사업의연구비에의하여수행되었음. * 교신저자 : 김양미 (yangmik@chungbuk.ac.kr) 접수일 11 년 04 월 27 일수정일 (1 차 11 년 05 월 10 일, 2 차 11 년 05 월 19 일 ) 게재확정일 11 년 06 월 09 일 2660

2 1. 서론 TREK-1 채널은 two-pore 도메인포타슘채널 (two-pore domain potassium channel, K2P) 중허혈시나타날수있는세포내외의변화즉세포막신전, 불포화지방산의증가, 세포내 ph의산성화, 온도의증가에반응하여안정막전압 (resting membrane potential) 을결정할뿐만아니라글루타메이트같은신경전달물질에의한신경활동도를조절하는것으로알려져있다 [1]. TREK-1 채널을유전적으로없앤쥐는마취제에대한저항성, 통증에대한민감성, 항우울제에대한저항성을가지며, 허혈시더욱쉽게신경손상이일어남도확인되었다 [2-4]. 최근들어 TREK-1 채널이신경세포뿐만아니라전립선암세포에서도발현되고있음이보고되면서암세포에서도 TREK-1 채널의생리학적역할의중요성이제시되었다 [5]. 그래서많은연구자들이이채널을조절하는약제에대한검색을시도하였다 [4, 6, 7]. 그결과로휘발성마취제뿐만아니라 chloral hydrate, trichloroethanol 같은비휘발성마취제에의해서도활성화됨이보고되었고 [8], 근위축성측삭경화증 (amyotrophic lateral sclerosis) 의치료제로사용되면서신경세포손상보호제로알려진 riluzole에의해활성화됨을확인하였다 [9]. 또한신경세포손상보호약물로알려진 sipatragine과 lamotrigine, 그리고항울제인 fluoxetin에의해억제됨이보고되었다 [7]. 이처럼 TREK-1 채널의생리학적역할이강조되면서다양한물질에서이채널을표적으로하는활성제또는억제제를찾는연구가시도되어지고있다 [10,11]. 그러한시도중하나로본연구에서는 TREK-1 채널의표적으로하는플라보노이드를탐색하여 TREK-1 채널의활성또는억제제로서의가능성조사하였다. 플라보노이드는사람에게이로운효과때문에임상에응용하려는시도가오래전부터있었다 [12-16]. 또한플라보노이드는천연추출물이고오랫동안사람들이즐겨먹어왔던음식이나차에포함되어있기때문에채널조절제로서실패할가능성이적고채널이라는특이적인표적에작용하기때문에반응농도가낮다면 TREK-1 채널조절제로서이용할수있을것이다. 플라보노이드의채널에대한조절효과는 cystic fibrosis Cl - 채널 (CFTR, cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) [17], inositol 1,4,5-triphosphate receptor Ca 2+ 채널 [18], Ca 2+ -activated K + 채널 [19], K V1.5 채널 [20], herg (human Ether-à-go-go Related Gene) 채널 [21], Kv 1.4 채널 [22], Ca 2+ 채널 [23] 등다양한종류의채널을표적으로하여연구되었다. 이렇게플라보노이드가분자수준에서연관성이없는다양한이온채널활성을조절하고있음은분자적으로연관성이없는 TREK-1채널도조절할수있을것으로생각되어본연구를시작하였다. 본연구에사용한플라보노이드는커큐민, EGCG, 퀘르세틴이다. 커큐민 (curcumin, diferuloylmethane) 은심황 (Curcuma longa) 의뿌리에서분리된화합물로서카레의성분이며 [13, 14], EGCG (epigallocatechin-3-gallate) 는녹차에주로들어있는폴리페놀이고 [24], 퀘르세틴 (quercetin, 3,5,7,3,4-pentahydroxyflavone) 은양파, 사과, 차그리고붉은포도주에많이있는폴리페놀이다 [25]. 이플라보노이들은분자수준에서는전사인자, 성장인자, 효소, 싸이토카인의발현이나활성을조절하는세포내신호경로를이용하여항염, 항산화, 항암, 항알러지등의효과를나타낸다 [26-30]. 본연구에서는 CHO 세포에발현된 TREK-1 채널에서플라보노이드에의한억제효과를단일채널수준에서조사하였다. 2. 재료및방법 2.1 TREK-1 의발현 트랜스팩션을위해 CHO (Chinese Hamster Ovary) 세포는 35 mm 배양접시에세포가 50-80% 정도까지자랄때까지 10% fetal calf serum (Life technology, Calsbad, CA, USA) 을넣은 α-mem을사용하여배양하였다. pcdna3.1 vector (Life technology, Carlsbad, CA, USA) 에클로닝된 TREK-1 (Genbank accession No: AF385402) 을 Lipofectamine (Life technology, Calsbad, CA, USA) 을이용하여트랜스팩션하였다. 그과정을요약하면 Lipofectamine, green fluorescence protein (GFP) 플라즈미드 DNA, TREK-1 플라즈미드 DNA 를 Opti-MEM (Life technology, Calsbad, CA, USA) 을함께넣어 6시간동안 5% CO 2 배양기에서배양하였다. 6시간후 20% fetal calf serum이들어있는 α-mem 배양액 1 ml을넣어주고하룻밤동안배양하였다. 전기생리학적인기록을하기위해서세포는 0.25% 트립신 (trypsin) 으로처리하여 Poly-D-lysine (Sigma, St Louis,MO, USA) 이처리된 12 mm 유리글래스로옮겨실험에사용하였다. 트립신처리후세포가글라스에붙으면 1 시간후부터 2 ~ 3 일동안실험에사용하였다. 트립신처리전후의단일채널역학 (single channel kinetics) 은변하지않았다. 본실험에사용된커큐민, 퀘르세틴, EGCG는 Sigma (St.Louis, MO, USA) 에서구입하여 dimetyl sulfoxide (DMSO) 에녹여사용하였고, 모든용액은실험직전만들어사용하였다. 용매로사용된 DMSO의최종농도는 0.1% 를넘지않았고, DMSO는단일채널역학에영향을주지않았다. 2.2 전기생리학적인방법실험에사용할용액중유리전극 (pipette) 과세포내 2661

3 한국산학기술학회논문지제 12 권제 6 호, 2011 (bath) 용액은 150 mm KCl, 1 mm MgCl 2, 10 mm HEPES, 5 mm EGTA 로구성하였고, ph는 7.2로적정하여사용하였다. 단일채널전류 (single channel current) 는막전압고정법 (voltage clamp technique) 중의하나인팻취고정기법 (patch clamp technique) 을이용하여기록하였다 [31]. 단일채널전류를기록할때에는유리전극은 2-3 MΩ 저항의전극을사용하였고, 전류기록시에는팻취고정증폭기 (patch clamp amplifier, Axopatch 200B, Axon Instruments, Union City, CA, USA) 로 GΩ seal 이상의팻취이상의것만기록하였다. 전류는 10 khz의샘플링비율로 digidata interface (Digidata 1322A, Axon instrument, Union City, CA, USA) 를이용하여컴퓨터에저장하였다. 전류는형광현미경 (TE 2000, Nikon, Japan) 을이용하여녹색형광이확인된세포에서기록하였고 ( 그림 1), 기록되는신호는 8-pole Bessel filter (-3dB, Frequency Device) 를사용하여 2 khz에서필터하였다. 모든데이터는 pclamp 프로그램 (version 9.02, Axon instrument, Union City, CA, USA) 을이용하여분석하였다. 모든데이터는전류의크기 (amplitude, pa), 채널의평균열린시간 (dwell time 또는 mean open time, ms), 이온채널활성도 (NP o N은이온통로의수, P o 는활성을가진채널의열릴확률 ) 을분석하였다. 모든실험은실온에서시행하였다 (23-25 o C). [ 그림 1] 전기생리학적기록시 TREK-1 이과발현된 CHO 세포의모양 [Fig. 1] Morphology of TREK-1 overexpressing CHO cells during electrophysiological recordings 2.3 데이터분석 TREK-1 전류에대한플라보노이드의농도-반응그래프를그리기위해 Origin software (OriginLab, Corp, Northampton, MA, USA) 에서 Hill equation, y = 1/(1+(IC 50/[FL]) n ) 식을사용하였다. y는상대적채널활성도를나타내며, IC 50 는플라보노이드에의해 TREK-1 채널이 50% 억제되는값이며 n은 Hill 상관계수,FL은플라보노이드농도이다. 모든수치는평균 ± S.E.M으로나타내었다. 플라보노이드처리전의평균값과플라보노이드처리후평균값의차이는 unpaired (independent) Student s t-test를 사용하였고, P 는 0.05 이하로통계학적으로유의하였다. 3. 결과 3.1 TREK-1 단일채널 (single channel) 의일반적인성상 TREK-1의단일채널전류 (single channel current) 를기록하기위해 excised inside-out patch 모드를사용하였고, 세포내 (bath) 용액과세포밖 (pipette) 용액은동일하게 150 mm KCl 용액을사용하여기록하였다. Inside-out patch 모드에서음전압 (negative voltage) 으로막전압을고정하면내향전류 (inward current) 즉아래방향으로열리는전류가기록되며, 양전압 (positive voltage) 으로막전압을고정하면외향전류 (outward current) 즉위쪽으로보이는전류가기록된다. 그림 2에서 "close" 는채널이닫힘을의미하여 "open" 은채널이열림을의미한다. 그림 2는 TREK-1 채널의단일채널양상을나타낸것이다. 막전압에따른단일채널의양상 ( 그림 2A) 과전류의크기히스토그램 (amplitude histogram) ( 그림 2A-1) 채널의평균열린시간 (mean-open time) ( 그림 2A-2), 전류-전압곡선 ( 그림 2A-3), 그리고막전압에따른채널활성도 (NP o)( 그림 2A-4) 를나타내었다 ( 그림 2). 전류의크기히스토그램과평균열린시간은 -60 mv에서분석하였다 ( 그림 2 A-1 과 A-2). 약 80 ps (picosimen) 의전도도와 0.7 ms 내외의 dwell time을가진단일채널이기록되었다. 막전압에따른전류-전압곡선은선형모양 (linear shape) 을보였고 ( 그림 2A-3), TREK-1은막전압이증가함에따라채널활성도가증가되었다 ( 그림 2A-4). TREK-1은세포내산성 ph에민감하게반응하고, 세포막의신전에의해활성화되는성질을가지고있다 [32]. 그러므로그효과를확인하기위해세포내 ph를 7.2 에서 6.0 으로산성화시키면 TREK-1 채널의활성도가 12.4배증가하였고, 세포내 ph를 7.2 로바꾸어주면활성이억제되어처음수준으로회복되었다 ( 그림 2B). 또한세포막을유리전극을통해음압을가하여세포막을인위적으로 -5 mmhg, -10 mmhg, -20 mmhg 로점진적으로신전시켜주면음압이가해지지않았을때보다각각 2.0 배, 8.7 배 25.4배까지증가하였다 ( 그림 1C). 이러한결과는 CHO 세포에 TREK-1 이잘발현되고있음을시사하고그효과는이전보고들과유사하였다 [33, 34]. TREK-1 발현되지않은, 즉녹색형광을띄지않는세포에서는어떠한전류도기록되지않았다 (n=10). 2662

4 채널의상대적활성도 (relative channel activity) 는 94.0 ± 5.6% (n=4) 까지감소하였다 ( 그림 3A와 3D). 이러한활성감소는열린채널수 (number of open channel) 의감소및채널크기의감소에기인한다 ( 그림 4A-1과 4A-2). [ 표 1] 플라보노이드에의한 TREK-1 의단일통로전류의크기변화및평균열린시간변화 [Table 1] Change in mean open time and single channel current amplitude of TREK-1 by flavonoids 단일통로크기 pa ± S.E. n 평균열린시간 ms±s.e. n Control ± ± Curcumin ± ± Wash ± ± Control ± ± Quercetin ± ± Wash ± ± Control ± ± EGCG ± ± Wash ± ± [ 그림 2] 단일채널기록법에의한 TREK-1 의일반적인전기 생리학적특성 [Fig. 2] General electrophysiological characteristics of TREK-1 using single channel recording techniques 3.2 TREK-1 에대한플라보노이드의효과 TREK-1을조절하는플라보노이들을검색하기위해먼저커큐민의효과를관찰하였다. 커큐민에대한 TREK-1의억제효과는 2008 년 Enyeart 등이부신피질세포에서 whole cell configuration 방법으로보고한바있다 [11]. 본실험에서단일채널 (single channel) 수준에서커큐민의 TREK-1에대한효과를조사하였다. 커큐민 20 μm을세포내에처리하면채널전도도가 86 ps에서 60 ps으로감소되었고, 감소된전류는커큐민을제거해준후에도처음처럼완전히회복되지는않았다 ( 표 1, n=3). 커큐민처리후평균열린시간의변화도 0.57 ± 0.04ms에서 0.1 ms 정도감소하였고커큐민을제거해준후에도커큐민처리전으로회복하지못하였다 ( 표 1). 이러한결과는커큐민이채널의일부분을직접적으로차단하여작용할수있음을시사한다. 커큐민처리후 [ 그림 3] TREK-1 에대한플라보노이드의효과 [Fig. 3] The effect of flavonoids on TREK

5 한국산학기술학회논문지제 12 권제 6 호, 2011 다음은사람들이차 (tea) 로거의매일마시고있는녹차의성분인 EGCG에대한 TREK-1에대한효과를조사하였다. TREK-1 채널의전도도는 EGCG 50 μm 적용전 84 ps에서 EGCG 처리후 61 ps까지감소시켰으며 EGCG를제거하여도 68 ps 까지밖에회복되지않았다 (n=7, 그림 3C). 이러한효과는 TREK-1에대한 EGCG의친화도가커큐민보다높고가역적이지않음을시사한다. 평균열린시간또한 EGCG 처리후점점감소하였다 ( 표 1). 이러한결과또한 EGCG와커큐민이 TREK-1 채널에더욱강하게결합되어채널을조절하고있음을시사한다. 이러한효과로인해 EGCG 처리후의채널의상대적활성도는 91.0 ± 3.2% ( 그림 3C와 3D) 까지감소하였다. 퀘르세틴은주로 Ca 2+ -activated K 채널 (K Ca) 를활성화시키는것으로알려져있다 [35]. TREK-1에서퀘르세틴 100 μm 은 81 ps 크기의전류를 75 ps으로약간감소시켰으나퀘세틴을제거해주면거의정상수준으로회복하였다. 이러한결과는퀘르세틴은채널에가역적으로작용하는것임을시사한다. 채널의평균열린시간도 0.88 ± 0.20 ms에서 0.76 ± 0.11 ms로감소하였다가오히려 1.02 ± 0.17ms 더증가함이확인되었다 (n=5, 표 1). 이상의결과는퀘르세틴은 EGCG나커큐민과달리 TREK-1 채널에가역적으로작용하여 TREK-1 채널에쉽게결합하고쉽게채널에서해리될수있음을시사한다. 퀘르세틴에의한상대적활성도는 73.0 ± 2.3% (n=5) 로서 EGCG나커큐민보다는 TREK-1 억제효과가적었다 ( 그림 3B와 D). EGCG 실험에서는퀘르세틴이나커큐민과유사하게활성채널의수가줄어듦과동시에저농도의 EGCG 적용시에는활성채널수는줄지않고전류의크기만작아지는현상을볼수있었다. 고농도의 EGCG에서는활성채널수가줄어들어채널활성이줄어듦을알수있었다 ( 그림 4E-1, E-2, E-3). EGCG의IC 50 값은 13.5 ±2.20 μm 로관찰되었다. 3.3 TREK-1 에대한플라보노이드의농도의존성세종류의플라보노이드에의해 TREK-1이억제되는것을확인하였으므로 TREK-1 채널활성에대한플라보노이드의농도에따른채널활성도의변화를조사하였다 ( 그림 4). 그림 4는플라보노이드농도에따른 TREK-1의채널활성도변화를단일채널 trace로나타내었다. 그림 4A의그림을시간을확장하여그린그림 4A-1과그림 4A-2에서보여지듯이커큐민의농도가증가함에 3개이상활성을보이던채널이하나만활성을나타내고있다. 커큐민의처리후, 활성된채널의수가줄어듦을확인하였다 ( 그림 4A-1 과 A-2). 커큐민의 IC 50 값은 1.04 ± 0.19μM 이었다 ( 그림 4B). 또한퀘르세틴실험에서도퀘르세틴이투여되지않았을경우활성을나타내던여러개의채널이퀘르세틴투여에의해그수가줄어들어채널의활성이떨어짐을알수있었다. 즉퀘르세틴농도가높아질수록활성화된채널수가줄어들어상대적채널활성도가줄어듦을알수있었다. 퀘르세틴의 IC 50 값은 1.13 ± 0.26 μm 이었다 ( 그림 4C와 D). [ 그림 4] TREK-1 에대한플라보노이드의농도의존성 [Fig. 4] Dose dependency of flavonoids on TREK

6 4. 고찰및결론 플라보노이는많은약리학적관심을받아왔고다른질병을예방또는치료를위한흥미로운일차적으로화합물로생각되어지고있다. 본연구에서는클론된 TREK-1 채널을 CHO 세포에과발현한세포에서단일채널기록법으로 TREK-1 채널에대한커큐민, EGCG, 퀘르세틴과같은플라보노이드의억제효과를 μm 수준에서나타냄을확인하였다. 플라보노이드의종류와채널종류에따라상반된효과를나타내는것으로알려져있다. 플라보노이드에대한채널조절효과는채널종류에따라작용이다르게나타나며, 임상적으로적용할경우장기나조직의채널의분포에따라여러가지조건을고려해야할것으로생각된다. 퀘르세틴의효과의예를보면 Ca 2+ -activated K 채널 (K Ca) 이나 CFTR Cl - 채널, Ca 2+ 채널, 그리고 K V1.5 채널에서는퀘르세틴이채널을활성화시키지만 [20, 23, 35, 36], 신경세포의글라이신유발전류 (glycine-induced current, I Gly) [37], 5-HT-유발내향전류 (I 5HT) [38], acetylcholine 감수체매개이온전류 (acetylcholine receptor mediated ion current, I Ach) [39] 과같이신경전달물질에의해매개되는전류는퀘르세틴에의해억제된다. 이러한보고는 TREK-1채널에서도억제또는활성이라는두가지효과를고려해야함을시사한다. 하지만퀘르세틴에의한채널활성효과는퀘르세틴이세포내 Ca 2+ 을증가시키는것으로알려져있어세포내 Ca 2+ 에의해조절되는채널이라면퀘르세틴에의해활성화될수있다 [40]. 하지만 TREK-1은세포내 Ca 2+ 에는조절되지않는채널이기때문에채널활성효과는배제할수있었고억제효과만관찰할수있었다. TREK-1에대한 EGCG의억제효과는심장에서긴 QT 증후군 (LQT syndrome) 과연관성이있는 herg 채널에서의효과와유사하였다 [21]. 하지만 TREK-1 채널을 50% 억제하는농도 (IC 50) 인 13.5 ±2.20 μm은 herg 전류의 IC μm [21] 보다 2 배정도높았다. 하지만여전히 EGCG는 TREK-1 채널에대해 μm 수준으로억제하기때문에채널억제제로서는유효할것으로생각된다. 이러한추측은다른종류의채널즉뇌에서클로닝된 K v1.5 의 IC μm에비하면 10 배이상낮은농도이므로더욱신뢰할만하다 [41]. 이처럼채널종류에따라플라보노이드가채널에작용하는농도가다르기때문에플라보노이드를임상적으로적용시킬경우장기의종류나조직에따라채널의분포를고려하여그효과가다르게나타날수있음을시사한다. 커큐민의채널에대한효과또한다양하다. CFTR Cl - 채널 [42] 을제외한대부분의채널, 즉 K v1.4[22], Ca 2+ -release-activated Ca 2+ 채널 (CRAC) [18] 그리고부신 피질세포에서기록된 TREK-1 [11] 에서는억제효과를나타낸다. 부신피질세포에서기록된 TREK-1에대한커큐민의 IC μm은본연구에서얻은 TREK-1의 IC μ M와유사한농도였다 [11]. 이러한결과는 whole cell patch configuration 방법이나 single channel patch configuration 방법으로유사한결과를얻을수있음을뒷받침한다. 플라보노이드의채널에대한 IC 50 는플라보노이드의종류에약간의차이는있으나본연구에서시도된세가지종류의플라보노이드에대한 TREK-1의 IC 50 는모두 μm 수준이었다. 커큐민, EGCG, 퀘르세틴은 μm 수준에서 TREK-1 을억제할수있어 TREK-1을표적으로하는플라보노이드로서신경세포나심장세포, 종양세포등질병예방및치료에응용될수있을것으로생각된다. 본연구에서얻은결과는플라보노이드를직접세포내에적용하는방법으로얻은결과이다. TREK-1의경우채널단백질의 C-말단과 N-말단이세포내에있고 C-말단에세포막의신전및 ph 를조절하는부분이있어본실험에서관찰된플라보노이드또한이부분에작용할가능성이크다 [32]. 즉플라보노이드의세포내로적용으로나타나는채널활성억제효과는플라보노이드가채널단백질과직접적으로상호작용할수있음을시사한다. 또한플라보노이드에의한 TREK-1 채널의억제효과가채널의 dwell time 에는많은영향을주지않고단일채널전류의크기의변화, 즉전도도의변화에의해달라진다는결과 ( 표 1 과그림 4) 는플라보노이드가 TREK-1 채널의 pore 부분을점령함으로서채널의열리고닫힘을조절할수있음을시사한다. 플라보노이드가 TREK-1 채널을억제한다는결과는 TREK-1 뿐만아니라다른종류의 K2P 채널단백질을표적으로하는신약개발의가능성을주고있다. References [1] E. Honore, "The neuronal background K2P channels: focus on TREK1", Nat Rev Neurosci, 8(4), pp , April, [2] C. Heurteaux, et al., "Deletion of the background potassium channel TREK-1 results in a depression-resistant phenotype", Nat Neurosci, 9(9), pp , September, [3] C. Heurteaux, et al., "TREK-1, a K + channel involved in neuroprotection and general anesthesia", Embo J, 23(13), pp , July, [4] Y. Maruyama, et al., "TREK-1: a potential target for novel antidepressants", Nihon Shinkei Seishin Yakurigaku 2665

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07.... 01V28. National Election Commission 9 September S M T W T F S 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23/30 24 25 26 27 28 29 11 November S M T W T F S 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16