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1 Korean Journal of Microbiology (2014) Vol. 50, No. 1, pp DOI Copyright c 2014, The Microbiological Society of Korea 보문 Aspergillus 속균주를이용한마품종별고체발효시 Monacolin K 생산과항산화활성 이준걸 안동과학대학교의약품질분석과 Antioxidant Activities and Monacolin K Production on Solid-State Fermentation of Diverse Yam by Aspergillus Species Strain Joon-Geol Lee Department of Medicine Quality Analysis, Andong Science College, Andong , Republic of Korea (Received January 16, 2014 / Accepted February 25, 2014) This study was conducted to investigate the characteristics between non-fermented chinese yam and rice (non-fcyr) and fermented chinese yam and rice (FCYR). 1.1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity, total polyphenol, flavonoid contents and reducing power were investigated to evaluate the anti-oxidation activities of FCYR. Also, productivity of monacolin K, major medicinal ingredient of FCYR, was investigated, using Aspergillus terreus KCCM In case of non-fcyr, DPPH radical scavenging activities for three kinds of yam (Dioscorea japonica, Dioscorea batatas, Dioscorea opposita) and rice were estimated about 51.8, 66.4, 42.2 and 7.5%, while in case of FCYR, those for three kinds of yam and rice were estimated to increased about 64.7, 74.7, 52.8, and 32.3%, respectively. Total polyphenol contents of non-fcyr were estimated to 196.9, 265.7, 160.1, and 91.6 mg/kg, while total polyphenol contents of FCYR were estimated to increase about 530.7, 708.3, 427.2, and mg/kg, respectively. Total flavonoid contents of FCYR increased to times higher than those of non-fcyr. Reducing power of non-fcyr was about 0.97, 1.28, 0.64, and 0.17 (OD at 700 nm), while, that of FCYR increased about 1.75, 2.38, 1.24, and Remakable increase in monacolin K productivity of FCYR was observed. Monacolin K productivity of FCYR was estimated to 467.1, 514.8, 339.2, and mg/kg, respectively. In this study, fermented chinese yam (Dioscorea batatas) was estimated to be effective biological activity material. Keywords: Aspergillus sp., antioxidant activities, monacolin K, solid-state fermentation 최근서구화에따른식습관의다양한변화와생체내에서발생하는활성산소종에의한산화적대사부산물은노화나성인병의원인으로알려져있고 (Seo et al., 2010), 이를예방또는치료하기위한자연식품과기능성식품에대한수요가증가함에따라, 기능성식품의생리활성과관련한연구가집중되고있다 (Lee et al., 2011). 경북북부지역에서약 70% 정도가생산되고있는마 (Dioscorea sp.) 는다년생넝쿨성초본으로전세계의열대및아열대지방에서널리분포하는식량작물로서 (Purseglove, 1972), 예로부터한방에서는자양, 강장, 강장, 폐결핵등에유효하고소염, 해독, 진해, 거담, 이뇨, 신경통, 류마티즘에효과가있는것으로알려져있다 (Jung, 2007). 마 (Dioscorea batatas Dence) 의성분은전분이생체중의 8 24%, 점질물이 % 를차지하며, 약용성 *For correspondence. adljg@asc.ac.kr; Tel.: ; Fax: 분으로는 amylose, cholin, saponin 등이포함되어있다 (Kim et al., 1991). 한편마의주요약용성분으로알려진 steroidal saponin은다양한생리활성에관여하는것으로알려져있는데, 세포의 DNA 돌연변이를방지하는항돌연변이성작용, 항암및항염증작용 (Baek et al., 1994) 등이알려져있다. 예로부터마는한약재로사용되고있을뿐아니라최근에는중요한기능성식품소재로인식되어건강식품또는기능성식품제조에첨가되면서그사용량이증가하고있다. 마의기능성에관한연구로마점질물이중금속제거능과 Angiotensin Converting Enzyme (ACE) 저해효과를나타낸다는보고 (Ha et al., 1998) 와, 콜레스테롤저하효과, 지질분해효소저해활성및항돌연변이활성등이보고되어있다 (Kwon et al., 1999, 2003; Lee et al., 2006). 그러나마를이용한발효식품에관한연구는미미한실정으로, Lee 등 (1999) 이보고한마첨가에의한유산균의생육에미치는효과에대한연구와 Lee 등 (2011) 이보고한마추출물첨가가요구르트의저장에미치는효과에대한연구등이있다. 이처럼이들의

2 54 Joon-Geol Lee 연구에서는단일종의마를이용한유산균발효특성에대한연구로서본연구에서의마품종별발효에따른그대사산물의생리학적특성을비교한것과는차이가있다. 본연구에사용한 Aspergillus terreus 균주는전통누룩미생물로서한국고유의식품과발효공업등에중요한역할을하며, amylase와 protease 등의효소활성이강하여예로부터주류, 발효등의양조, 효소제및의약품의생산에이용되고있다 (Kim et al., 2008). 특히대표적인 statin 제제인 monacolin K (lovastatin), 즉 3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA inhibitor는 macrolide 계열의이차대사산물로 A. terreus 균주가주된생산균주 (Slater et al., 1988) 이고, 이러한 monacolin K는현재까지보편적인 cholesterol 합성저해물질로사용되고있으며, 부작용도적어서고콜레스테롤환자나고지혈증환자의치료제로선호되고있다 (Slater et al., 1988; Hubert, 2001; Michael, 2002). 본연구에서는 HMG-CoA inhibitor 로서대표적인 statin 제제인 monacolin K의생산균주인 A. terreus 를이용하여다양한약리적인효과가인정되고있는마를기질로하여발효를유도함으로써마자체로의기능성뿐만아니라발효를통한기능성마발효물의에탄올추출물이 in vitro에서우수한 DPPH radical 소거활성, 총 polyphenol, flavonoid 함량, 환원력 (reducing power) 의항산화활성및 monacolin K 생산등의생리활성효과를조사하였기에보고하는바이다. 재료및방법사용균주및배양본실험에사용한균주는한국미생물보존센터에서분양받은표준균주로서 A. terreus KCCM 균주를발효마제조를위한실험균주로선발하여본실험에사용하였다. 그리고발효마의제조를위해종균배양배지로는 PDB (Potato dextrose broth, Difco, USA) 배지를사용하였으며, 초기 ph 6.0, 배양온도 30 에서 130 rpm으로 5일간진탕배양하여, 발효마의제조를위한종균으로사용하였다. 발효마의제조본실험에사용한마시료는 2013년경북안동에서재배한장마, 병마, 둥근마를구입하여사용하였으며, 구입직후 4 에냉장보관하면서실험에사용하였다. 이때마의대조구로는 koji의제조에널리이용되는쌀을사용하였다. 발효마를제조하기위하여마는흐르는물에세척하여뿌리표면에부착된이물질을없애고말단부분과껍질을제거한후, 약 3 mm 정도로절단하고 60 에서항량건조하여냉동보관하면서사용하였다. 발효마의제조는건조된마를물에침지한후불림을행하였으며, 침지후물빼기를실시한다음 100 g씩배양통에분취하였다. 이후 121 에서 15분간가압멸균하고실온으로냉각시킨다음 A. terreus KCCM 배양액을 5% (v/w) 로접종한후 30 에서 7일간발효를하였으며, 배양체의덩어리형성을방지하고자하루에 3회규칙적으로흔들어주었다. 발효가완료된후에는 60 에서수분함량 10% 이하로건조한후분쇄하여냉동보관 하면서실험에필요한시료로사용하였다. DPPH radical 소거활성 DPPH는화학적으로안정화된 free radical을가지고있는수용성물질로서 515 nm 525 nm 부근에서최대흡광도를가지는보라색의화합물로 ascorbic acid, Butylated Hydroxy Anisole (BHA) 토코페롤, 방향족아민류등에의해환원되어짙은보라색이탈색됨으로서항산화물질의전자공여능을측정할때사용되는데, 발효마에탄올추출물의 DPPH (1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl) radical 소거활성은 Blois 등 (1958) 의방법을일부변형하여측정하였다. 즉, 농도별시료 200 μl에 DPPH 용액을 800 μl를가하여혼합한다음실온에서 10분간반응시킨후 525 nm에서흡광도를측정하였다. 이때 DPPH radical 소거활성은시료첨가구와무첨가구의흡광도차이를비교하여나타내었으며, 양성대조군으로 ascorbic acid를사용하였다. 총 polyphenol 및 flavonoid 함량식물계에널리분포되어있는총페놀성화합물은다양한구조와분자량을가진이차대사산물로 free radical을제거함으로써산화를억제하여활성산소의소거및산화적스트레스를막아항암, 항균, 노화방지및심장질환을예방하는등의생리활성물질로려져있으며식품, 의약품, 화장품등많은분야에활용되고있다 (Hertog et al., 1992; Ferreres et al., 2009). 발효마에탄올추출물의총 polyphenol 함량측정은 Folin-Denis법 (Swain et al., 1959) 을일부변형하여측정하였으며, 원심분리한각각의시료 50 μl에 2% Na 2CO 3 용액 1 ml을가하고, Folin & Ciocalteu's phenol reagents 50 μl를혼합한다음실온에서 30분간반응시킨후 760 nm에서흡광도를측정하였다. 표준물질로는 tannic acid (Sigma Co., USA) 를사용하여시료와동일한방법으로분석하여작성한검량선으로부터총 polyphenol 함량을계산하였다. 총 flavonoid 함량측정은 Jia 법 (1999) 을일부변형하여측정하였으며, 원심분리한각각의시료 150 μl에증류수 600 μl, 5% NaNO 2 45 μl를가한후 6분간방치하고, 10% AlCl 3 6H 2O 150 μl 를가하였다. 11분간방치후 1 M NaOH를 500 μl를가하고 510 nm에서흡광도를측정하였다. 표준물질로는 rutin (Sigma Co., USA) 를사용하여시료와동일한방법으로분석하여작성한검량선으로부터총 flavonoid 함량을계산하였다. 환원력 (Reducing power) 환원력은 Fe 3+ 이온을 Fe 2+ 이온으로환원시키는능력을측정하는것으로환원력이클수록강력한항산화제가되는데이러한환원력의정도는항산화활성과관련이있는것으로알려져있으며높은환원력을가지는물질은흡광도수치가높게나타나게된다 (Gordon, 1990). 발효마에탄올추출물의환원력측정은 Ferreira 등 (2009) 의방법을응용하여측정하였으며, 원심분리한각각의시료 1 ml에 200 mm 인산완충용액 (ph 6.6) 및 1% potassium ferricyanide 1 ml를차례로가한다음 50 에서 30분간반응하였다. 여기에 10% Trichloroacetic acid (TCA) 용액 1 ml을가하여반응을정지시킨다음 5,000 g에서 5분간원심분

3 Aspergillus 속균주를이용한마의고체발효 55 리한후얻은상등액 1 ml에증류수및 ferric chloride 용액을각 1 ml씩혼합한후 700 nm에서흡광도를측정하였으며, 시료의환원력을흡광도값으로나타내었다. Monacolin K의정량 Monacolin K (lovastatin, mevinolin) 는고지혈증치료제로사용되고있는것으로 1979년일본의 Endo 교수가처음발견한물질로서 cholesterol 생합성경로에서 HMG-CoA reductase를특이적으로억제함으로써강력한 cholesterol 생합성저해작용을하는것으로보고되었다 (Endo, 1979; Bilheimer et al., 1983). 발효마로부터 monacolin K의정량은 75% 에탄올로각각추출한후추출액을 6,000 g 에서 10분간원심분리하여얻은상등액을사용하였다. 즉, monacolin K의추출은발효마 1 g에 75% 에탄올 20 ml을첨가하여 30, 150 rpm으로 3시간동안교반하고정치시킨후 6,000 g 에서 10분간원심분리하여얻은상등액을 membrane filter (0.45 μm, Millipore, USA) 로여과하여시료로사용하였으며, 이때사용한 HPLC 분석조건은다음과같다. Monacolin K의정량은 Luna 5 μ Phenyl-Hexyl column ( mm, Phenomenex Inc., USA) 이장착된 High Performance Liquid Chromatography (HPLC) (Sykam, Germany) 를이용하여 flow rate : 1.0 ml/min, UV 237 nm에서검출하면서 injection volume 20 μl로하여 acetonitile : 0.1% Phosphoric acid = 55 : 45의비율로용출시킨후표준 monacolin K (Sigma Co.), USA 를이용하여 peak의면적비로써비교정량분석하였다. 결과및고찰발효마추출물의 DPPH radical 소거활성본실험에서는마품종에따른 DPPH radical 소거활성을측정 하기위하여마시료로는장마, 병마, 둥근마를사용하였으며이때마의대조구로는 koji의제조에널리이용되는쌀을사용하였다. Figure 1에나타낸바와같이발효전 후의결과를비교하였을때, 발효하지않은장마, 병마, 둥근마의경우 DPPH radical 소거활성이각각 51.8, 66.4 및 42.2% 로나타났으며쌀의경우에는 7.5% 의 DPPH radical 소거활성을나타내었고, 발효후에는장마, 병마, 둥근마의경우 DPPH radical 소거활성이각각 64.7, 74.7 및 52.8% 로나타났으며쌀의경우에는 32.3% 의 DPPH radical 소거활성을나타내었다. 이로써 DPPH radical 소거활성은병마를사용할때가장높은것으로조사되었다. 이때실험에서의대조군으로사용된 Vitamin C 0.01% 의경우 DPPH radical 소거활성은 84.2% 으로조사되었다. 이러한결과는 Yen 등 (2003) 은 A. candidus를이용한 rice koji의발효시 ethyl acetate 추출물의 DPPH radical 소거활성을측정한결과 800 µg/ml의농도에서 78.0% 의소거활성을나타낸다고보고와유사한결과를나타내었다. 발효마추출물의총 polyphenol 및 flavonoid 함량 Figure 2에나타낸바와같이발효전 후의결과를비교하였을때, 발효하지않은장마, 병마, 둥근마의경우총 polyphenol 함량이각각 196.9, 및 mg/kg으로나타났으며, 쌀의경우에는 91.6 mg/kg의총 polyphenol 함량을나타내었고, 발효후에는장마, 병마, 둥근마의경우총 polyphenol 함량이각각 530.7, 및 mg/kg으로나타났으며, 쌀의경우에는 mg/kg의총 polyphenol 함량을나타내었다. 이로써총 polyphenol 함량은병마를사용할때가장높은것으로조사되었다. 총 flavonoid 함량을측정한결과는, Figure 3과같으며발효전 후의결과를비교하였을때, 발효하지않은장마, 병마, 둥근 Fig. 1. DPPH radical scavenging activity of chinese yam and rice extracts fermented with A. terreus KCCM (A, Dioscorea japonica; B, Dioscorea batatas; C, Dioscorea opposita; D, Rice; Data are expressed as mean±se)

4 56 Joon-Geol Lee Fig. 2. Total polyphenol contents of chinese yam and rice extracts fermented with A. terreus KCCM (A, Dioscorea japonica; B, Dioscorea batatas; C, Dioscorea opposita; D, Rice; Data are expressed as mean±se) 마의경우총 flavonoid 함량이각각 73.3, 및 42.6 mg/kg 으로조사되었으며, 쌀의경우에는 22.6 mg/kg의총 flavonoid 함량을나타내었고, 발효후에는장마, 병마, 둥근마의경우총 flavonoid 함량이각각 242.0, 및 mg/kg으로조사되었으며, 쌀의경우에는 63.3 mg/kg의총 flavonoid 함량을나타내었다. 이로써총 flavonoid 함량은병마를사용할때가장높은것으로조사되었다. 그러나총 polyphenol 함량과비교하였을때그함량은현저히낮은것으로조사되었으며발효마에서항산화활성에관여하는물질은 polyphenol 계열의물질이주로 영향을미친다고생각된다. 한편 Kim 등 (2010) 의보고에서는더덕 70% 에탄올추출물은총 phenol 함량이 3.1 mg/g이었으며, ethyl acetate 분획물의경우 22.7 mg/g으로높은총 phenol 함량이조사되었고, 물분획물은 2.1 mg/g으로낮은총 phenol 함량이조사되었다고보고하였다. 이는본실험결과와비교하였을때높은총 phenol 함량을나타내었으며, 본실험에서의발효마또한용매별로분획을실시한다면특정용매분획물에서의총 polyphenol 및 flavonoid 함량은높아지리라생각된다. Fig. 3. Total flavonoid contents of chinese yam and rice extracts fermented with A. terreus KCCM (A, Dioscorea japonica; B, Dioscorea batatas; C, Dioscorea opposita; D, Rice; Data are expressed as mean±se)

5 Aspergillus 속균주를이용한마의고체발효 57 발효마추출물의환원력 (Reducing power) Figure 4에나타낸바와같이발효전 후의결과를비교하였을때, 발효하지않은장마, 병마, 둥근마의경우환원력을측정한결과흡광도값이각각 0.97, 1.28 및 0.64로조사되었으며쌀의경우에는 0.17의낮은흡광도값을나타내었고, 발효후에는장마, 병마, 둥근마의경우환원력을측정한결과흡광도값이각각 1.75, 2.38 및 1.24로조사되었으며쌀의경우에는 0.46의낮은흡광도값을나타내었다. 이때실험에서의대조군으로사용된 Vitamin C 0.01% 의경우환원력은흡광도값이 1.08로나타났다. 이로써환원력은병마를사용할때가장높은것으로조사되었다. 한편 Kim 등 (2010) 의보고에서더덕 70% 에탄올추출물및분획물들의농도가증가할수록환원력이증가한다고보고하였으며이는본실험에서병마를이용한환원력측정시발효하지않은추출물과비슷한결과를보였다. 발효마로부터 Monacolin K 함량측정 Figure 5에나타낸바와같이장마, 병마, 둥근마의경우 monacolin K 함량을측정한결과각각 467.1, 및 mg/kg으로나타났으며, 쌀의경우에는 mg/kg의 monacolin K 함량을나타내는것으로조사되었다. 한편다양한 A. terreus 로부터 type strain인 A. terreus ATCC 20542와비교하여 monacolin K의생산능이더우수한균주를선발하고 lactose와 rapeseed meal이첨가된배지를이용하였을때 400 mg/l의수율로 monacolin K를생산하였다는 Szakacs 등 (1998) 의보고보다는 monacolin K 생산능이높은것으로나타났으며, Kumar 등 (2000) 은 A. terreus DRCC122로부터 fed-batch process에의해 monacolin K가 2,000 mg/l가생산된다고보고한결과보다는 monacolin K 함량이낮은것으로나타났다. 이러한결과는발효방법과사용한기질, 사용균주등의차이에따른결과로생각된다. 이상의결과를종합하였을때 A. terreus KCCM 균주를이용하여장마, 병마, 둥근마및쌀을각각발효시병마를사용하였을때 DPPH radical 소거활성, 총 polyphenol, flavonoid 함량, 환원력 (reducing power) 및 monacolin K 생산등의가장높은생리활성효과를나타내는것을알수있었다. 이는서로다른마품종간의구성성분들의차이에따른결과로사료되며추후관련연구가필요하다고생각된다. 따라서 A. terreus KCCM 균주를이용한마의발효는다양한생리활성물질의생산성증대에효과적임을나타내었으며, 발효조건의최적화방안등이이루어지면향후기능성소재로의개발가능성이매우높을것으로사료된다. 적요본연구에서는 Aspergillus terreus KCCM 균주를이용하여발효한마와쌀 ( 칠보미 ) 의발효물질특성을조사하였다. 발효한마와쌀의항산화활성을확인하기위하여 DPPH radical 소거활성, 총 polyphenol, flavonoid 함량및환원력을조사하였다. 또한동일균주를사용하여마및쌀의발효시에주요한약용성분인 monacolin K의생산량을조사하였다. DPPH radical 소거활성은장마, 병마, 둥근마및쌀의경우발효전에는 51.8%, 66.4%, 42.2% 및 7.5% 이었으나, 발효후에는 64.7%, 74.7%, 52.8% 및 32.3% 로각각증가하는것으로나타났다. 총 polyphenol 함량은발효전의경우 196.9, 265.7, 및 91.6 mg/kg이었으나, 발효후에는 530.7, 708.3, 및 mg/kg으로각각증가하는것으로나타났다. 총 flavonoid 함량은발효전의경우 73.3, 107.9, 42.6 및 22.6 mg/kg이었으나, 발효후에는 242.0, 347.7, 및 63.3 mg/kg으로각각증가하는것으로나타났다. 환원력은발효전의경우 0.97, 1.28, 0.64 및 0.17 (700 nm에 Fig. 4. Reducing power of chinese yam and rice extracts fermented with A. terreus KCCM (A, Dioscorea japonica; B, Dioscorea batatas; C, Dioscorea opposita; D, Rice; Data are expressed as mean±se)

6 58 Joon-Geol Lee Fig. 5. Monacolin K productivity of chinese yam and rice extracts fermented with A. terreus KCCM (A, Dioscorea japonica; B, Dioscorea batatas; C, Dioscorea opposita; D, Rice; Data are expressed as mean±se) 서의 OD값 ) 이었으나, 발효후에는 1.75, 2.38, 1.24 및 0.46으로각각증가하는것으로나타났다. Monacolin K 생산량은 467.1, 514.8, 및 mg/kg으로각각나타났다. 결과로서, 병마를이용한발효시가장높은생리활성효과를보이는것으로나타났으며, 이러한발효마는항산화및항고지혈증관련기능성식품및의약품소재로이용될수있음을제시한다. 감사의말 본연구는 2013년안동과학대학교교육역량강화사업의교원 R&D 지원에의한연구결과의일부이며, 이에감사드립니다. 참고문헌 Baek, S.H., Kim, S.H., Son, K.H., Chung, K.C., and Chang, H.W Inactivation of human pleural fluid phospholipse A2 by dioscin. Arch. Pharm. Res. 17, Bilheimer, D.W., Grundy, S.M., Brown, M.S., and Goldstein, J.L Mevinolin and colestipol stimulate receptor mediated clearance of low density lipoprotein from plasma in familial hypercholesterolemia heterozygotes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80, Blois, M.S Antioxidant determinations by the use of a stable free radical. Nature 181, Endo, A Monacolin K, a new hypocholesterolemic agent produced by a Monascus species. J. Antibiotics 32, Ferreres, F., Gomes, D., Valentão, P., Gonçalves, R., Pio, R., Chagas, E.A., Seabra, R.M., and Andrade, P.B Improved loquat (Eriobotrya japonica Lindl.) cultivars: Variation of phenolics and antioxidative potential. Food Chem. 114, Gordon, M.H The mechanism of antioxidant action in vitro. Food antioxidants, pp In Hudson, B.J.F. (ed.). Elsevier Applied science, London, UK. Ha, Y.D., Lee, S.P., and Kwak, Y.G Removal of heavy metal and ACE inhibition of yam mucilage. Kor. J. Soc. Food Sci. Nutr. 27, Hertog, M.G.L., Hollman, P.C.H., and Katan, M.B Content of potentially anticarcinogenic flavonoids of 28 vegetables and 9 fruits commonly consumed in the Netherlands. J. Agric. Food Chem. 40, Hubert, S Effect of atorvastatin, simvastatin and lovastatin on the metabolism of cholesterol and triacylglycerides in HepG2 cells. Biochem. Pharma. 62, Jia, Z., Tang, M., and Wu, J The determination of flavonoid contents in mulberry and they scavenging effects on superoxide radicals. Food Chem. 64, Jung, D.H Encyclopedia of health and functional foods, pp Shinil Books Publishing Co., Seoul. Kim, S.H., Chung, M.J., Jang, H.D., and Ham, S.S Antioxidative activities of the Codonopsis lanceolata extract in in vitro and in vivo. Kor. J. Soc. Food Sci. Nutr. 39, Kim, S.J., Ko, H.S., and Kim, H.S Development of seed culture using soybean for mass production of lovastatin with Aspergillus terreus ATCC mutant. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 37, Kim, C.M., Son, K.H., Kim, S.H., and Kim, H.P Steroidal sapogenin contents in some domestic plants. Arch. Pharm. 14, Kumar, M.S., Jana, S.K., Senthil, V., Shashanka, V., Kumar, S.V., and Sadhukhan, A.K Repeated fed-batch process for improving lovastatin production. Process Biochem. 36, Kwon, C.S., Shon, H.Y., Kim, S.H., Kim, J.H., Son, G.H., Lee, J.S., Lim, J.K., and Kim, J.S Anti-obesity effect of Dioscorea nipponica Makino with lipase-inhibitory activity in rodents. Biosci. Biotechnol. Biochem. 67, Kwon, C.S., Son, I.S., Shim, H.Y., Kwon, I.S., and Chung, K.M Effects of yam on lowering cholesterol level and its mechanism. Kor. J. Food Nutr. 32, Lee, S.Y., Ahn, J.J., and Kwak, H.S Effects of the extract yam

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