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유신 송
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1 기린초 (Sedum kamtschaticum Fisch.) 추출분획물의피부미백효과연구 윤지혜 1,* 박지혜 2,* 김보라 3, 1 목원대학교화학 화장품학부, 학생 2 목원대학교대학원화학과, 대학원생 3 목원대학교화학 화장품학부, 교수 (2020 년 10 월 17 일접수 : 2020 년 10 월 29 일수정 : 2020 년 10 월 29 일채택 ) Skin Whitening Effect of Sedum kamtschaticum Fisch. Solvent Fractions Jihye Yoon 1,* Jihye Park 2,* Bora Kim 1,2, 1 Division of Chemistry and Cosmetics, Mokwon University, Daejeon, 35349, Korea 2 Department of Chemistry, The Graduate School of Mokwon University, Daejeon, 35349, Korea (Received October 17, 2020; Revised October 29, 2020; Accepted October 29, 2020) 요약 : 한국자생식물인기린초 (Sedum kamtschaticum Fisch.) 는열수추출형태로혈액순환개선과항산화및항염증효과를내는한약재로사용되어왔다. 선행연구를통해기린초여러부위에서우수한항산화효과를확인하여, 본연구에서는기린초의줄기 (Stem) 와뿌리 (Root) 부위를각각 70% ethanol (SKS, SKR) 로추출한후, n-hexane (SSH), ethyl acetate (SSE, SRE), chloroform (SSC, SRC) 및 water (SSW, SRW) 순서로용매극성별로분획하여화장품소재로서응용가능성을확인하였다. 각분획물마다총폴리페놀함량, 플라보노이드함량및 DPPH 라디칼소거능을확인한결과뿌리추출물 (SKR) 이줄기추출물 (SKS) 보다우수한함량과효과를나타냈고, 전체적으로 ethyl acetate 분획물 (SSE, SRE) 이가장효과가우수했다. 또한, tyrosinase 활성저해효과도 ethyl acetate 분획물이가장우수하였고, 모든분획물은세포독성이없는 10 µg/ml 농도에서 B16F10 멜라노마세포에처리했을때우수한멜라닌생성저해력을보였다. 70% ethanol 추출물 (SKS, SKR) 에대해 HPLC 분석시 gallic acid 와 quercetin 을포함한플라보노이드가검출되었다. 본연구에서는기린초의피부항산화효과와미백효과를나타내는기능성화장품천연소재로서응용가능성을제시한다. 주제어 : 기린초, 항산화, 멜라닌생성저해력, 미백화장품소재, 화장품 Abstract : Sedum kamtschaticum Fisch., a native plant of Korea, has been used in Korean traditional medicine in the form of water extract for its capacity to improve blood circulation and for its antioxidant and anti-inflammatory effects. Since previous research suggests that S. kamtschaticum Fisch. has excellent antioxidant and mushroom tyrosinase inhibition activities, in this Corresponding author ( bora0507@mokwon.ac.kr)

2 2 윤지혜 박지혜 김보라 Journal of the Korean Applied Science and Technology study, the root and stem parts of S. kamtschaticum Fisch. are extracted in 70% ethanol (SKS, SKR), fractionated with and in order of n-hexane (SSH), ethyl acetate (SSE, SRE), chloroform (SSC, SRC) and water (SSW, SRW) according to the polarity of each solvent, and tested for its applicability as a cosmetic material. According to the total polyphenol, flavonoid contents and DPPH radical scavenging activity of each fraction, the contents and scavenging activity of the root extractions (SKR) were higher than those of the stem extractions (SKS), ethyl acetate fractions (SSE, SRE) being the most effective. In addition, ethyl acetate fractions had the highest tyrosinase inhibition activity and melanin synthesis inhibition activity used on B16F10 melanoma cells, at the concentration of 10 µg/ml. HPLC analysis detected a variety of polyphenols including gallic acid and quercetin. This study suggests the potential role of S. kamtschaticum Fisch. as a natural cosmeceutical material. Keywords : Sedum kamtschaticum Fisch., Skin whitening effect, Antioxidant, cosmeceutical agent, Melanin synthesis inhibition, Cosmetics 1. 서론 피부는외부환경으로부터신체를구별하는장벽으로미생물에대한감염이나수분손실로부터신체를보호한다. 그러나태어난이후피부와신체의모든기관의노화과정이시작되며 [1], 피부노화의경우에는내인적 (intrinsic) 요소와외인적 (extrinsic) 요소에의하여유도된다. 나이에따른피부두께감소, 건조, 잔주름등이내인적요소에속하며, 외인적요소로는오염된공기에대한노출, 흡연, 자외선노출등을내세울수있다 [2]. 특히, 자외선에대한장기적노출은외인성노화의가장주요요인으로이를광노화 (photoaging) 라고한다 [3]. 지속적인자외선노출은피부구조의파괴를일으키고, 멜라닌과생성을일으켜기미나검버섯을만든다 [4]. 멜라닌은멜라닌세포의세포질내멜라노솜 (melanosome) 에서합성되며, 자외선이나성장인자 (growth factor) 및호르몬등에의해세포내다양한기전으로합성된다 [5]. 자외선에의해멜라닌형성세포 (melanocyte) 는멜라닌합성반응과정 (melanogenesis) 을통하여 [6], 주효소인 tyrosinase 가 L-tyrosine 이라는아미노산을기질로하여 L-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) 로수산화가일어나며, 최종적으로멜라닌합성이이루어진다 [7,8]. 그러나비정상적으로생성된멜라닌은피부흑색종및색소침착을일으킨다 [4]. Arbutin, kojic acid, azelaic acid 등다양한 tyrosinase 저해제를사용하여멜라닌의과도한생성을막고자하지만, tyrosinase 저 해제의심각한부작용사례들이보고되며 [9], 피부안전성문제로제한된사용량으로인해 [10] 인체에부작용이적고효과가뛰어난자연유래멜라닌생성억제미백소재에관한연구가활발히진행되고있다 [11,12]. 기린초 (S. kamtschaticum Fisch.) 는한국, 중국및일본에서자생하는식물로열수추출물의형태로혈액순환의개선과항산화및항염증효과를내는생약으로사용되어왔다 [13]. 기린초메탄올추출물의경우, macrophage 에서 prostaglandin E2 (PGE 2 ) 와 cyclooxyganase-2 (COX-2) 생성을억제한다고알려져있다 [14]. 그러나기린초의미백화장품소재로의연구는미비한편으로정확한미백기전이밝혀진바가없다. 미백화장품소재중천연소재에대한탐색은전세계적으로많이시도되었고, 많은연구성과들을가져왔다 [15]. 본저자는기린초의꽃, 잎, 줄기및뿌리부위를추출하여항산화효과를확인한결과줄기와뿌리추출물이가장효과가좋은것을확인하여본연구에서는기린초의줄기와뿌리부위별추출물및용매분획물의미백소재로서의활성을확인하여미백기능성화장품소재로서의가능성을확인하고자하였다. 2. 실험 2.1. 재료준비기린초는세척후건조하여줄기와뿌리로구

3 기린초 (Sedum kamtschaticum Fisch.) 추출분획물의피부미백효과연구 3 분하여각각 70% Ethanol 1 L 로 55, 24 hrs 조건에서 2 회반복환류추출하였다. 추출후여과지 (Whatman) 를이용하여여과후, 50 에서감압농축하였다. 이후추출물을정제수 200 ml 에현탁해 n-hexane, ethyl acetate, chloroform 순으로유기용매를이용하여분획하였다. 분획의경우용매별로 300 ml 씩 3 번반복하여분획했으며, 이후분획물도감압농축기를이용하여농축하였다 (Fig. 1). 각각의시료는 DMSO 를이용하여최대농도로 stock 을제조하였으며, -20 조건에서보관하여실험에사용하였다 DPPH radical 소거능측정기린초추출물및분획물의항산화능력을측정하기위하여 DPPH (1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl) 를이용하여 DPPH 라디칼소거능을측정했다. 각시료를농도별로 96 well plate 에분주한후 0.2 mm DPPH 용액을첨가했으며, 25, 30 min 조건에서반응시켰다. 양성대조군으로는 ascorbic acid 를사용하였다. 반응후, microplate reader (Epoch, BioTek Instruments, Inc. USA) 를이용하여 517 nm 에서흡광도를측정하였으며, SC 50 (Scavenging Concentration of 50%) 을구하여 DPPH 라디칼소거능을비교하였다 총폴리페놀함량측정기린초추출물및분획물내의폴리페놀성분을정량하기위하여 10% Folin-Ciocalteu (F-C) reagent (Sigma-Aldrich, USA) 를이용하여폴리페놀의함량을정량했다. 10% F-C reagent 와 700 mm Na 2 CO 3 용액을분주한후 25, 30 min 조건에서반응시켰다. 이후용액을 96 well plate 를이용하여 765 nm 에서흡광도를측정하였다. Gallic acid 를사용하여 standard curve 를그렸으며, 이후기린초추출물및분획물의실험결과를곡선에대입하여폴리페놀함량을정량하였다 총플라보노이드함량측정기린초추출물및분획물내의총플라보노이드함량을정량하기위하여 Diethyl glycol, 1 N NaOH 및 D.W 를첨가하여반응된색의흡광도를측정하였다. 시료를농도별로분주한후빛을차단한조건에서 37, 1 hrs 반응하였다. Microplate reader 를이용하여 420 nm 에서흡광 도를측정하였다. Naringin (Sigma-Aldrich, USA) 을사용하여 standard curve 를그린후, 시료의결과값을대입하여총플라보노이드함량을정량하였다 HPLC analysis 분석에사용된 chromatography 기기는 Waters Alliance e2695 HPLC system (Waters, Milford, MA) 를사용하였다. Column 은 Kromasil 100-5C18 ( mm) 를 30 로유지하여분석하였다. 이동상으로 3 차정제수는 Mili-Q system (Millipore, Bedford, MA, USA) 으로증류한 18 MΩ 이상인탈이온수와 acetonitrile 를사용하였으며, 0.05% trifluoroacetic acid (TFA) water 와 100% acetonitrile 을용매를 1 ml/min 의 flow rate 로 gradient elution condition 으로분석하였다. Detector 의경우 Waters 2998 photodiode array 로 UV 210 nm 에서측정하였다 Tyrosinase 활성저해능측정기린초추출물및분획물의 mushroom tyrosinase 활성저해능력을측정하기위하여 0.1 M Potassium phosphate buffer (PPB, ph 6.8) 를사용하였다. 시료를 DMSO 에희석하여농도별로 96 well plate 에첨가하고, 3 mm L- tyrosine (Sigma-Aldrich, USA) 과 2000 U/mL mushroom tyrosinase (Sigma-Aldrich, USA) 를분주한후 37, 10 min 조건에서반응시켰다. Microplate reader 를이용하여 492 nm 에서흡광도를측정했다. 양성대조군으로 kojic acid (Sigma-Aldrich, USA) 를사용하였으며, IC 50 (Inhibition concentration of 50%) 을구하여 tyrosinase 활성저해능력을비교하였다 세포배양 B16F10 멜라노마세포 (B16F10 melanoma cell) 는 ATCC (American Type Culture Collection) 에서분양받아실험에사용하였다. 배지는 Dulbecco s modified eagles medium (DMEM) 에 1% penicillin/streptomycin 과 10% fetal bovine serum (FBS) 를첨가하여 37, 5% CO 2 조건으로배양하였다 세포생존율측정기린초추출물및분획물이세포생존율에미

4 4 윤지혜 박지혜 김보라 Journal of the Korean Applied Science and Technology 치는영향을확인하기위하여 WST-1 assay (water soluble tetrazolium salt-1 (WST-1) reagent) 로실험하였다. B16F10 멜라노마세포를 96 well plate 에 cell/well 로분주하여 24 hrs 배양한후, 각시료를농도별로처리하고 48 hrs 배양하였다. WST-1 시약을첨가하여 4 hrs 동안반응시킨후 microplate reader 로 450 nm 에서흡광도를측정하여세포생존율을확인하였다 B16F10 멜라노마세포멜라닌합성저해능측정 B16F10 멜라노마세포 (B16F10 melanoma cells, ATCC) 를 60 π dish 에 cells 의농도로분주하고 24 hrs 배양하였다. 시료들은각각 10 µg/ml 로처리했으며, 세포의멜라닌생성을유도하기위해 3-Isobutyl-1-methylxanthine (IBMX, Sigma-Aldrich, USA) 를세포생존율에영향을끼치지않는농도로시료와함께처리하여 72 hrs 배양하였다. 세포를떼어내어 centrifuge 에서 11,000 rpm, 10 min 조건으로원심분리하였다. 1 N NaOH 를 pellet 에첨가하여 60, 1 hr 조건에서용해시킨용해물을 microplate reader 를이용하여 405 nm 에서멜라닌양을측정하였다. Bradford assay 를실시하여단백질정량을통해멜라닌생성량을보정하였다. 멜라닌생성억제량은 200 µm IBMX 로처리한대조군과비교하여저해율 (%) 로표시하였으며, 양성대조군은 kojic acid 를 100 µg/ml 농도로사용하였다 통계처리모든실험은 3 회반복실험하였으며, 평균 ± 표준편차 (Standard deviation, SD) 로표기하였다. GraphPad Prism 을이용한 One-way analysis of variance (ANOVA) test 를실시하였으며, Bonferroni 방법을사용하여사후검증을시행하였다. p<0.05 일때통계적으로유의하다고분석하였다. 3. 결과및고찰 3.1. 기린초추출분획물의 DPPH radical 소거능측정 Fig. 1 에는각추출단계와분획물의이름을표 시하였다. SKS의 SC 50 (27.7 µg/ml) 은 SKR의 SC 50 (13.8 µg/ml) 의약 2배정도뿌리추출물 (SKR) 가줄기추출물 (SKS) 보다항산화효과가더뛰어남을확인할수있었다. 줄기분획물중 SSE 는 DPPH assay에서양성대조군으로사용되는 ascorbic acid의 SC 50 과비슷한 (4.10 µg/ml) 효과를나타내었다. SSH도추출물에비해낮은 SC 50 (22.2 µg/ml) 을보이며매우우수한항산화효과를나타내었다. 뿌리분획물중에서도 SRE 의 SC 50 (7.54 µg/ml) 이가장낮았다. 각각의분획물은 n-hexane, water 및 chloroform의순서로좋은라디칼소거능정도를나타냈다 (Table 1). 즉, 줄기와뿌리모두 ethyl acetate 분획물 (SSE, SRE) 이가장항산화력이우수하였다. Fig. 1. After extracting the stem (SKS) and root (SKR) part of the S. kamtschaticum Fisch. with 70% ethanol, they were fractionated into the polarity of organic solvents in order of n-hexane (SSH), ethyl acetate (SSE, SRE), chloroform (SSC, SRC), water (SSW, SRW). The yield of n-hexane fraction for root part was insignificant small amount 기린초추출분획물의총폴리페놀및플라보노이드함량측정총폴리페놀함량측정결과, SKR 에서 SKS 보

5 기린초 (Sedum kamtschaticum Fisch.) 추출분획물의피부미백효과연구 5 다많은폴리페놀함량이측정되었다. SKR 에서검출된총폴리페놀함량은 SKS 에비해약 1.3 배정도였다. 줄기분획물은추출물보다적은양의폴리페놀이검출되었다. SSW 에서의폴리페놀양이가장많이함유하고있으며, SSE, SSC 및 SSH 순으로폴리페놀의양이많음을확인할수있었다. 그에비해뿌리분획물은 SRE 에서추출물보다많은양의폴리페놀이검출되었다. 나머지분획물은추출물보다적은양의폴리페놀이확인되었다 (Table 1). 총플라보노이드함량측정결과분획물에비해줄기및뿌리추출물이함량이많은것을확인하였다. SKR 내의플라보노이드함량이 SKS 보다약 2 배많았으며, 두부위에서공통적으로추출물, ethyl acetate, n-hexane, water 및 chloroform 분획물순서로플라보노이드함량이높은경향성을보였다 기린초추출분획물의 tyrosinase 활성저해능측정 SKS 의 IC 50 (637.3 µg/ml) 과 SKR 의 IC 50 (658.1 µg/ml) 을통해 SKS 이 SKR 에비해 tyrosinase 활성저해능이우수함을확인하였다. 줄기분획물의경우 SSE 의 IC 50 가 µg/ml 로줄기추출물보다더좋은효과를나타냈으며, SSW, SSC, SSH 순으로 IC 50 이낮게나타났다. 뿌리분획물또한 SRE 의 IC 50 이 µg/ml 로뿌리분획물중가장낮았으며, SRW, SRC 순으로 IC 50 값이낮았다. 두결과를통해분획물의 tyrosinase 활성저해능이 ethyl acetate, water 및 chloroform 순으로좋음을확인할수있었다 (Table 1) 기린초추출분획물의세포생존율측정기린초줄기분획물중 SSW 에서세포생존율이가장높게나타났으며, 그에비해 SSE, SSH 및 SSC 는 20 µg/ml 에서독성을보였다 (Fig. 2(a)). 기린초뿌리분획물또한 SRW 에서가장높은생존율을확인하였으며, 다른분획물은 20 µg/ml 에서다소독성이있음을확인했다 (Fig. 2(b)). 줄기와뿌리를통틀어모든분획물은 10 µg/ml 에서 80% 이상의생존율을보였으며, 이를토대로 B16F10 멜라노마세포에서의 10 µg/ml 이하로멜라닌생성저해력시험을수행하였다 B16F10 멜라노마세포멜라닌생성저해능측정세포독성이나타나지않는 10 µg/ml 농도에서실험을진행하였으며, positive control 인 kojic Table 1. The table shows the result of DPPH radical scavenging activity in vitro test, total polyphenol, flavonoid contents and tyrosinase inhibition activity (a) the stem part fractions (fr.), (b) the root part fractions (fr.). (a) Stem fr. (b) Polyphenol content (mg/g) Flavonoid content (mg/g) DPPH scavenging (SC 50 ) Tyrosinase inhibition (IC 50 ) SKS ± ± µg/ml µg/ml SSH 62.6 ± ± µg/ml µg/ml SSE ± ± µg/ml µg/ml SSC 88.9 ± ± µg/ml µg/ml SSW ± ± µg/ml µg/ml Root fr. Polyphenol content (mg/g) Flavonoid content (mg/g) DPPH scavenging (SC 50 ) Tyrosinase inhibition (IC 50 ) SKR ± ± µg/ml µg/ml SRE ± ± µg/ml µg/ml SRC 96.1 ± ± µg/ml µg/ml SRW ± ± µg/ml µg/ml

The inhibition of melanin production of S. kamtschaticum Fisch. (a) stem part. (b) root part.

6 6 윤지혜 박지혜 김보라 Journal of the Korean Applied Science and Technology (a) (b) Fig. 2. The cell viability of S. kamtschaticum Fisch. (a) stem part, (b) root part, Each bar shows mean ± S.D. from three independent experiments. The experiment was conducted by the WST-1 assay. (a) (b) (c) Fig. 3. The inhibition of melanin production of S. kamtschaticum Fisch. (a) stem part. (b) root part. The samples containing 200 µm of IBMX were treated at the concentration of 10 µg/ml. kojic acid was treated at the concentration of 100 µg/ml. (c) the picture of the cell pellets. Each bar shows mean ± S.D. from three independent experiments. * p <0.05, *** p <0.001 compared to the untreated control group

7 기린초 (Sedum kamtschaticum Fisch.) 추출분획물의피부미백효과연구 7 Fig. 4. Analysis of HPLC in SKS and SKR. Each extract was detected as gallic acid, quercetin, apigenin, kaempferol and isorhamnetin as standard samples. acid 는 100 µg/ml 에서멜라닌생성저해능을확인하였다. 줄기분획물에서 SSE 가약 49.3% 의멜라닌생성저해율을보이며, 10 배높은농도인 kojic acid 와비슷한정도의 (69.9%) 높은활성을보였다. SSW, SKS, SSC 및 SSH 순서로높은멜라닌합성저해능을나타냈다 (Fig. 3(a)). 뿌리분획물에서는 SRW 가약 52.5% 의멜라닌합성저해율을보이며, positive control 인 kojic acid 와비슷한정도의 (69.9%) 높은활성을보였다. SRC, SRE 및 SKR 순서로높은멜라닌합성저해율을보였다 (Fig. 3.(b)). 분획물중 SRW 이가장높은저해율을보였으며, SRC, SSE, SSW, SRE, SKS, SSC, SKR 및 SSH 순으로멜라닌생성저해능이좋음을확인하였다 기린초추출물의 HPLC 분석결과줄기추출물에서는 gallic acid 와 quercetin, apigenin, kaempferol, isorhamnetin 의플라보노이드가소량검출되었고, 뿌리추출물에서는 quercetin, isorhamnetin 이소량검출되었다. Gallic acid 는 Wnt/β-catenin pathway 저해함 으로써 tyrosinase 발현전사인자를억제하여미백효과를보인다고보고되었다 [16]. 이와같이다양한 2 차대사산물들은복합적으로 tyrosinase 활성저해이외에도다양한흑화기전을조절함으로써매우우수한멜라닌생성저해력을나타낸것으로보인다. 4. 결론 본연구에서는기린초추출물및분획물의항산화효과및미백활성정도를확인하기위해 in vitro 실험으로 DPPH radical 소거능실험, 폴리페놀및플라보노이드정량, tyrosinase 활성저해시험, 세포생존능력시험및 B16F10 멜라노마세포멜라닌합성저해능시험을진행하였다. DPPH radical 소거능결과에서는 SSE 가 4.10 µg/ml 의 SC 50 값을, SRE 가 7.54 µg/ml 의 SC 50 값을나타냈다. 총폴리페놀함량측정결과에서는 SSW, SRW 에서높은폴리페놀함량을보였으며, SRE 는매우높은폴리페놀함량을보

8 8 윤지혜 박지혜 김보라 Journal of the Korean Applied Science and Technology 였다. 총플라보노이드함량측정의경우추출물에서분획물보다높은함량의플라보노이드함량을확인할수있었으며, SKR 에서가장많은플라보노이드가나타났다. 뿌리, 줄기에는 HPLC 분석을통해 gallic acid, quercetin, apigenin, kaempferol, isorhamnetin 가검출되었고이는다양한생리활성을나타낼것으로사료된다. 대부분의실험결과를통해 ethyl acetate 분획물 (SSE, SRE) 이좋은효과를가지는경향성을보였으나, B16F10 멜라노마세포멜라닌합성저해능시험에서는다른분획물에서도좋은효과를가졌음을확인할수있었다. 또한, tyrosinase 활성저해시험에서다소높지않은활성을보였던대부분의시료가 B16F10 멜라노마세포멜라닌합성저해능시험에서 kojic acid 와비슷하게좋은활성을보이는것을통해기린초추출물및분획물이멜라닌합성저해기전에서 tyrosinase 생성이전의단계의인자를저해함으로써미백효과를발현하는것으로유추할수있다. 이는추후분자생물학적실험을통해자세한피부미백기전을알수있을것으로생각한다. 앞서진행한실험들의결과를통해기린초추출물및분획물은피부항산화및미백기능성화장품원료로서활용가능성을제시한다. References 1. S. Zhang, E. Duan, "Fighting against skin aging: the way from bench to bedside", Cell Transplantation, Vol.27, No.5, pp , (2018). 2. J. Krutmann, A. Bouloc, G. Sore, B. A. Bernard, T. Passeron, "The skin aging exposome", Journal of Dermatological, Vol.85, No.3, pp , (2017). 3. A. C. Mora Huertas, C. Schmelzer, W. Hoehenwarter, F. Heyroth, A. Heinz, "Molecular-level insights into aging processes of skin elastin", Biochimie, Vol , pp , (2016). 4. Y. R. Jung, D. H. Kim, S. R. Kim, H. J. An, E. K. Lee, T. Tanaka, N. D. Kim, T. Yokozawa, J. N. Park, H. Y. Chung, Anti-wrinkle effect of magnesium lithospermate B from Salvia miltiorrhiza BUNGE: inhibition of MMPs via NF-kB signaling, PLoS One, Vol.9, No.8, e102689, (2014). 5. S. Jeon, W. Hwang, Y. Hong, M. Kim, E. Ahn, S. Park, "Inhibitory effects of Hericium erinaceus extracts on melanin synthesis and oxidative stress", Asian Journal of Beauty and Cosmetology, Vol.14, No.4, pp , (2016). 6. Y. M. Yoon, S. H. Bae, S. K. An, Y. B. Choe, K. J. Ahn, I. S. An, Effects of ultraviolet radiation on the skin and skin cell signaling pathways, Asian Journal of Beauty and Cosmetology, Vol.11, No.4, pp , (2013). 7. T. I. Oh, J. M. Yun, E. J. Park, Y. S. Kim, Y. M. Lee, J. H. Lim, "Plumbagin suppresses α-msh-induced melanogenesis in B16F10 mouse melanoma cells by inhibiting tyrosinase activity", International Journal of Molecular Sciences, Vol.18, No.2, pp. 320, (2017). 8. Y. S. Baek, Y. B. Ryu, M. J. Curtis-Long, T. J. Ha, R. Rengasamy, M. S. Yang, K. H. Park, "Tyrosinase inhibitory effects of 1,3-diphenylpropanes from Broussonetia kazinoki", Bioorgainc & Medicinal Chemistry, Vol.17, No.1, pp , (2009). 9. D. H. Han, K. S. Park, "Analysis on the purchasing condition and satisfaction of whitening cosmetics", Journal of the Korean Society of Fashion & Beauty, Vol.4, No.4, pp , (2006). 10. E. J. Seo, E. S. Hong, M. H. Choi, K. S. Kim, S. J. Lee. "Antioxidant and skin whitening effects of Rhamnus yoshinoi extracts", Korean Journal of Food Science and Technology, Vol.42, No.6, pp , (2010). 11. J. S. Han, D. H. Yi, "Effects of pine needles fermentation extracts on antioxidant activity and inhibition of melanin synthesis", Asian Journal of Beauty and Cosmetology, Vol.10, No.10, pp , (2012)

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Journal of Life Science 2011, Vol. 21. No μ μ

Journal of Life Science 2011 Vol. 21. No. 8. 1120~1126 ISSN : 1225-9918 DOI : http://dx.doi.org/10.5352/jls.2011.21.8.1120 μ μ μ α β Journal of Life Science 2011, Vol. 21. No. 8 1121 μ μ 1122 생명과학회지 2011,