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효정 구
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1 Journal of Life Science 2016 Vol. 26. No ~1081 Bioactive Compounds and Antioxidant Activity of Jeju Camellia Mistletoe (Korthalsella japonica Engl.) Da Hee Kang 1, Eun Mi Park 1, Ji Hye Kim 1, Jung Woo Yang 2, Jung Hyun Kim 3 and Min Young Kim 1 * 1 Toxicology Laboratory, Major in Biomaterials, College of Applied Life Science, SARI, Jeju National University, Jeju , Korea 2 Dong Baek Sa Rang (Love Camellia), Jeju , Korea 3 Department of Tourism & Food Service Cuisine, Cheju Tourism College, Jeju , Korea Received May 2, 2016 /Revised June 3, 2016 /Accepted July 2, 2016 Mistletoes are hemi-parasitic plant growing on different host tree and shrubs. They are traditionally used in folkloric medicine for the treatment of diarrhea, cough, diabetes, hypertension, cancer and skin infection. The purpose of this study was to determine the contents of phenolics and antioxidant activity of 70% ethanol, 100% methanol and hot water extracts of Jeju camellia mistletoe (Korthalsella japonica Engl.). Ethanol was most effective in extracting total phenols (7,427 mg gallic acid equivalent (GAE)/100 g) and flavonoid (1,777 mg rutin equivalent (RE)/100 g). The free radical scavenging activity, 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl (DPPH) (EC 50 = 7.8 mg/ml) and hydrogen peroxide (H 2O 2) (EC 50 = 1.4 mg/ml), and the capacity for chelating metal ions (EC 50 = 8.0 mg/ml) and reducing power (EC 50 = 14.9 mg/ml) of the samples also higher in ethanolic extracts. The strong correlation (r 2 = ~ ) between antioxidant capacities and the phenolic contents implied that phenolic compounds are a major contributor to the antioxidant activity of the ethanolic extracts of Jeju camellia mistletoe. As conclusions, Jeju camellia mistletoe contains bioactive substances with a potential for reducing the physiological as well as oxidative stress and this could explain the suggested cancer preventive effect of these plants as well as their protective role on other major diseases. Key words : Antioxidant activity, Jeju camellia mistletoe, phenolics, solvent extraction ISSN (Print) ISSN (Online) DOI : - Note - 서 최근의학의발달및생활환경과영양상태가개선되어건강 에대한욕구가증대됨에따라 well-being 이새로운트렌드로 떠오르고있다 [24, 26]. 이에따라건강을유지하기위해항산 화제에대한관심이증가하고있는데, 오랫동안이용되어온 합성항산화제인 benzoic acid, butylated hydroxyanisole (BHA), butylated hydroxytoluene (BHT) 등은우수한항산화 능을보이지만다량섭취시암유발등안전성에대한논란이 계속되어왔다 [1, 9]. 따라서이를대체하기위해천연물소재 를활용한항산화제에대한연구가활발히진행되고있는데, 특히항산화제의원료로주로사용되는식물체에함유된 2 차 대사산물이신진대사및생리활성을촉진하는물질로보고되 었다 [14]. 식물유래생리활성물질로널리알려진 phenolic compounds, flavonoids 등은신체내산화적스트레스및활 Authors contributed equally. *Corresponding author *Tel : , Fax : * jeffmkim@jejunu.ac.kr This is an Open-Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution Non-Commercial License ( which permits unrestricted non-commercial use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited. 론 성산소종 (Reactive oxygen species, ROS) 의생성을억제하여암, 심혈관계질환등만성질병을예방하고노화의지연및방지에도움이되어의약품, 화장품, 식품등의원료로활용되고있다 [12, 19]. 겨우살이는겨우살이과에속하는상록성관목으로여러종류의나무를숙주로하여수분과영양분등을취하며살아가며자체적으로광합성을하는능력을지니고있어반기생식물로분류된다 [13, 20, 25]. 겨우살이는아프리카, 유럽, 아시아등세계전역에분포해있으며우리나라에자생하는겨우살이는단향과의겨우살이, 붉은겨우살이, 동백나무겨우살이, 꼬리겨우살이와참나무겨우살이등 2과 4속 5분류군이분포하고있다 [2]. 유럽에서는 1920년대에이미항암활성이인정됨에따라종양치료제로사용되고있을뿐만아니라고혈압, 동맥경화등의의약품및기능성식품의원료로이용되고있다 [13, 31]. 우리나라에서는유럽에비해비교적늦게연구가시작되었지만, 이들의천연물소재로써의잠재성이인정됨에따라다양한연구가활발히진행되고있다. 한국산겨우살이는열매가백색인유럽산과달리황색을띄고식물의모양과성분의차이가많은것으로알려져있는데 [20], 유럽산겨우살이와는달리특유의 alkaloid를함유하고있어상대적으로높은항암활성을가지며 [11, 20], 겨우살이의주성분인 lectin은면역력증강, 항암활성, 세포독성등에효과적이라는보고가있다 [16]. 이외에도국내에자생하는겨우살이의효능을입증

2 Journal of Life Science 2016, Vol. 26. No 하기위해항암, 항균, 항산화, 유전독성및각종생리활성효과등에대한연구가이루어지고있다 [20, 23, 25]. 이처럼겨우살이에대한활발한연구가진행되고있음에도불구하고동백나무겨우살이에대한성분및생리학적활성에대한연구가이루어지지않고있다. 또한겨우살이는기주목, 생산지역및수확시기등다양한요인에따라성분및효능의차이가발생되나 [29] 이들에대한명확한연구가되어있지않을뿐더러효능에대해서도연구가미흡한실정이다. 특히타지역과달리독특한기후및토양을지닌제주도에서서식하는동백나무겨우살이의잠재적가능성에비해이에대한구체적인연구가전무한상황이므로이에대한과학적연구가절실하다고판단된다. 따라서본연구는제주산동백나무겨우살이의생리활성성분및항산화활성을측정하여천연물항산화제및기능성소재로써의소재화가능성을검토하고다양한기능성소재개발을위한기초적특성연구의기초자료로활용하고자한다. 재료및방법시료의제조본실험에사용된동백나무겨우살이는제주특별자치도서귀포시안덕면에위치한카멜리아힐에서식하고있는동백나무를숙주로하여기생하는겨우살이를 2015년 5월에채취하여사용하였다. 채취한시료는증류수로세척한뒤원재료를동결건조후분쇄기로파쇄한분말을이용하였다. 동백나무겨우살이추출물의제조는건물중량의 10배 (w/v) 부피에 100% 메탄올과 70% 에탄올을첨가하여 25, 150 rpm 조건하에 24시간동안 2회반복추출후여과하여사용하였다. 열수추출물은 95 에서 4시간동안 2회연속추출한다음여과하여사용하였다. 양성대조군으로사용된 L-ascorbic acid는 1 mg/ml의농도로제조하였다. 총폴리페놀함량총폴리페놀함량측정은 Kim 등 [10] 의방법에의해실행하였다. 96-well plate 에시료용액 30 μl를농도별로분주하고, 95% ethanol 30 μl, 증류수 150 μl, Folin-Ciocalteu reagent 15 μl를순서대로첨가하여잘혼합한뒤실온에 5분동안반응시킨다. 반응시킨후 5% Na 2CO 3 30 μl를첨가하여혼합하고 1시간동안차광하여반응시킨후 microplate reader (Spectra MR, Dynex, VA, USA) 를이용해 725 nm에서흡광도를측정하였다. 총폴리페놀함량은 gallic acid standard solution (0.125, 0.25, 0.5, 1 mg/ml) 을통해표준곡선을작성하고그결과를 mg gallic acid equivalent (GAE)/100 g dried weight 로나타내었다. 총플라보노이드함량총플라보노이드함량은 Kim 등 [10] 의방법에의해실행하였다. 먼저 96-well plate의각 well에시료용액 30 μl를넣고증류수 120 μl, NaNO 2 9 μl를순서대로첨가하여실온에 6분동안반응시키고, 10% AlCl 3 9 μl를첨가하여다시실온에 6분간반응시킨다. 그후 1 M NaOH 60 μl, 증류수 72 μl를첨가하여실온에 15분간반응시키고 420 nm에서흡광도를측정하였다. 표준물질로 rutin을이용하여총플라보노이드함량 (mg rutin equivalent (RE)/100 g) 을산출하였다. DPPH radical 소거활성 DPPH radical 소거활성은 Kim 등 [10] 의방법에의해실행하였다. 농도별시료용액 100 μl를 96-well plate에분주하고, 0.4 mm DPPH 용액 100 μl를첨가하여잘섞은후차광하여실온에 10분간반응시킨후 517 nm에서흡광도를측정하였다. 측정된흡광도는시료첨가군과무첨가군의차이를계산하여활성을비교분석하였고, DPPH radical을 50% 소거하는유효농도 (EC 50) 를계산하여나타내었다. 양성대조군으로 L-ascorbic acid를이용하여겨우살이추출물의 DPPH radical 소거능을비교분석하였다. Hydrogen peroxide 소거활성총 hydrogen peroxide 소거활성은 Kim 등 [18] 의방법에의해실행하였다. 시료용액 80 μl와 10 mm hydrogen peroxide 20 μl, 0.1 M sodium phosphate buffer (ph 5.0) 100 μl를첨가하여잘혼합하고 37 에서 5분동안반응시킨후, 1.25 mm 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline)-6-sulfonic acid (ABTS) 30 μl, 1 U/ml peroxidase 30 μl를가하여 37 에서 10분간반응시키고 405 nm에서흡광도를측정하였다. 측정된흡광도는시료첨가군과무첨가군의차이를계산하여나타내고, hydrogen peroxide를 50% 소거하는유효농도 (EC 50) 를계산하여용매및농도에따른 H 2O 2 소거능을비교하였다. 양성대조군으로는 L-ascorbic acid를사용하여겨우살이추출물의 hydrogen peroxide 소거능을비교분석하였다. Ferrous ion chelating 활성 Chelating 활성은 Kim 등 [10] 의방법에의해실행하였다. 농도별로희석한시료용액을 96-well plate에 250 μl씩분주하고, 2 mm ferrous chloride (FeCl 2) 5 μl, 5 mm ferrozine[3- (2-Pyridyl)-5,6-diphenyl-1,2,4-triazine-p,p -disulfonic acid monosodium salt hydrate] solution 10 μl를순서대로첨가하여섞은후상온에서 10분동안반응시킨뒤 562 nm에서흡광도를측정하였다. 시료첨가군및무첨가군의흡광도차이를계산하였고, chelating 활성이 50% 에도달하는농도 (EC 50) 를구하였다. 양성대조군으로 L-ascorbic acid를이용하여 ferrous ion chelating 활성을측정함으로써겨우살이추출물의

3 1076 생명과학회지 2016, Vol. 26. No. 9 항산화능을비교분석하였다. 환원력측정환원력은 Kim 등 [10] 의방법에의해실행하였다. 농도별시료용액 200 μl, 0.2 M sodium phosphate buffer (ph 6.6) 200 μl와 1% potassium ferricyanide 200 μl를순서대로넣고혼합하여 50 에서 20분동안반응시켰다. 10% trichloroacetic acid 200 μl를첨가하여반응을정지시키고, 96-well plate에상층액 100 μl를분주한뒤 0.1% ferric chloride 20 μl와증류수 100 μl를넣고 700 nm에서흡광도를측정하였다. 시료의농도별흡광도는시료무첨가군과흡광도차이를통해흡광도를계산하였고, OD 값이 0.5에도달하는데필요한시료의농도 (EC 0.5) 를통해환원력을나타내었다. 양성대조군으로 L-ascorbic acid를활용하여겨우살이추출물의환원력을비교분석하였다. 통계방법모든실험결과는 3회반복측정후평균값과그의표준편차를나타내었다. 성분함량측정결과는 Duncan s multiple range tests를실시하였고, 항산화활성의결과는 Student s t-test를실시하여나타내었다. 결과및고찰총폴리페놀함량동백나무겨우살이추출물을이용하여총페놀성화합물함량을분석한결과는 Table 1과같다. 70% 에탄올추출물의경우 7,427 mg GAE/100 g dried weight로유의적으로가장높은폴리페놀함량을나타내었고 (p<0.05), 100% 메탄올과열수추출물은각각 6,578 mg GAE/100 g dried weight, 5,320 mg GAE/100 g dried weight의함량을보여 (Table 1), 추출물간의총폴리페놀함량의차이는추출시사용한용매의용해력에따른차이로인할것으로판단된다. 마이크로웨이브추출법에의한겨우살이의총폴리페놀함량측정결과 [16], 50 ml/g (20 mg/ml) 의물추출물이 mg% 로가장높은폴리페놀함량을나타내었고이를본실험결과의 70% 에탄올추출물 (100 mg/ml) 의함량을환산하여 (1,485.4 mg%) 비교했을때약 10배가량높은함량을나타내 었다 (Table 1). 이와같이추출농도에따른함량의차이를통해겨우살이의기능성성분을효과적으로추출해낼수있는적정농도가있음을확인하였고, 이에따라최적의농도및조건을찾아내기위한구체적인성분분석이필요하다고사료된다. 또한 Simona 등 [29] 의연구에서유럽산겨우살이의수확시기별총폴리페놀함량의차이를비교분석한결과 5월에수확한겨우살이의물추출물이 mg GAE/g으로가장높은함량을보인반면 12월에수확한겨우살이의에탄올추출물이 mg GAE/g으로가장낮은함량을나타내었는데, 본실험결과에서에탄올추출물이가장높은함량을보인것과상반된결과를보였다 (Table 1). 이와같은결과를통하여겨우살이가서식하는지역및수확시기에따라성분의차이가있을것으로예상되어이에대한추가적인연구가필요하다고생각된다. 총플라보노이드함량동백나무겨우살이에대한총플라보노이드함량은 Table 1에나타내었다. 70% 에탄올추출물에서 1,777 mg RE/100 g으로유의적으로가장높은총플라보노이드함량을보였고 (p<0.05), 100% 메탄올과열수추출물각각 1,623 mg RE/100 g과 830 mg RE/100 g으로측정되어앞선동백나무겨우살이의총폴리페놀함량측정결과와같은양상을띄고있음을알수있다 (Table 1). 유럽산겨우살이의총플라보노이드함량측정결과와비교하였을때약 0.97 mg/g dry plant로나타나 [22] 본연구에서사용한제주산동백나무겨우살이의총플라보노이드함량이약 17배가량높다는것을확인할수있었다. 또한 Choi 등 [4] 의연구에서지역및숙주식물별 14종의겨우살이의플라보노이드함량측정결과전북, 제주, 지리산등에서식하는신갈나무및굴참나무등의겨우살이가다른시료에비해많은플라보노이드함량이검출되었고, Kim 등 [12] 의연구에서참나무겨우살이의총플라보노이드함량은 mg/g extract 로본연구에서의가장높은함량을보인 70% 에탄올추출물 (17.77 mg/g) 보다비교적높은함량을나타내는것으로보았을때이는지역에따른자연환경의차이뿐만아니라기주에따른플라보이드함량의차이가발생할수있기에향후이에대한비교연구가수행되어야할것으로판단된다. 상기총폴리페놀및플라보노이드함량측정을통해유의 Table 1. Total phenolic and flavonoid contents of the 100% methanol, 70% ethanol and hot water extracts from Jeju camellia mistletoe Solvent Total phenolic contents (GAE 1) mg/100 g) Total flavonoid contents (RE 2) mg/100 g) 100% methanol 70% ethanol Hot water 6,578.4±79.35 a 7,426.7± b 5,320.2±61.58 c 1,623.1±98.40 a 1,776.9±32.40 b 829.9±10.86 c 1) GAE (gallic acid equivalent); 2) RE (rutin equivalent). All values are mean ± S.D. from three separated experiments. a-c Mean values not sharing the same letter are significantly different at p<0.05 by one-way analyses of variance followed by Duncan s multiple range tests.

4 Journal of Life Science 2016, Vol. 26. No 적으로높은함량을나타낸 100% 메탄올과 70% 에탄올추출물을이용하여항산화활성을평가하였다. DPPH radical 소거활성 DPPH는진한자색을띄는 free radical 형태로존재하여항산화활성을띄는물질을만나면 radical이환원되어소거되면서노란색으로탈색되는데이변화정도를흡광도를측정함으로써항산화능을계산한다 [16]. 동백나무겨우살이의 DPPH radical 소거활성에대한결과는 Fig. 1과같다. 시료의농도가증가함에따라 DPPH 소거활성이증가하는것을알수있으며, 양성대조군으로사용한 1 mg/ml L-ascorbic acid의활성이 85.6% 인것과비교하였을때다소낮게나타났으나메탄올, 70% 에탄올두추출물간의 DPPH radical 소거활성을비교하였을때모든농도에서 70% 에탄올추출물에서높은활성을보였다 (Fig. 1). DPPH radical을 50% 소거하는유효농도 (EC 50) 를환산하였을때메탄올추출물은 10.9 mg/ml, 70% 에탄올추출물은 7.8 mg/ml의값을나타내어통계적유의차를보였다 (p<0.05)(fig. 1). 또한농도가 5 mg/ml일때겨우살이추출물의 DPPH radical 소거활성은약 30% 로나타났는데이와같은결과는 Simona 등 [28] 의연구에서 5 mg/ml의농도에서겨우살이추출물의 DPPH radical 소거활성이 26% 를나타낸것과유사한수치를보였다. Ju 등 [8] 의연구에서용매별겨우살이추출물의기능성성분및 DPPH radical 소거활성비교결과, 50% 에탄올추출물이증류수및 100% 에탄올추출물에비해높은폴리페놀함량을나타내었고 DPPH radical 소거활성에서도비슷한양상을 띄고있음을확인할수있었는데, 본연구에서도마찬가지로가장높은총폴리페놀함량을보인 70% 에탄올추출물에서여타추출물에비해유의적으로높은 DPPH radical 소거활성을보이는것과유사한경향을나타내는것으로미루어보아총폴리페놀함량과 DPPH radical 소거활성간의깊은상관관계가있다고판단되어본연구에서수행한기능성성분과 DPPH radical 소거능간의상관관계에대하여조사할필요가있다고판단된다. Hydrogen peroxide 소거활성 Hydrogen peroxide는생체내에서 superoxide dismutase (SOD) 가 superoxide와반응하여생성되는데산화적스트레스에의해과도하게생성된 hydrogen peroxide는 DNA, 단백질등을손상시킬뿐만아니라과산화지질의생성을촉진하는것으로알려져있으며, apoptosis 와 necrosis 같은세포상해를일으킨다 [5, 15]. 동백나무겨우살이추출물의 H 2O 2 소거활성은 Fig. 2에서보이는것과같이두시료모두농도의존적으로증가하는것을볼수있었다. 추출물의농도가 1 mg/ml부터 70% 에탄올추출물의 H 2O 2 소거능이약 65.5% 로급격히증가하였으며동일농도의양성대조군인 L-ascorbic acid의활성 (100.2%) 과비교하였을때약 1.5배의활성의차이를확인할수있었다. 또한가장높은농도인 4 mg/ml 에서 100% 메탄올과 70% 에탄올추출물각 72%, 85% 로 70% 에탄올추출물의활성이약 113% 높은것을확인할수있었다 (Fig. 2). Papuc 등 [22] 의연구에서유럽산겨우살이를이용한 60% 에탄올추출물의소거능이약 0.37% 에못미치는것과비교하 Fig. 1. DPPH radical scavenging activity of methanol and 70% ethanol extracts of Jeju camellia mistletoe (Korthalsella japonica). EC 50 means the effective concentration at which the antioxidant was 50%. Each value is expressed as mean on at which the * statistically differences from methanol extract (p<0.05). L-ascorbic acid was used for the positive control (data not shown). Fig. 2. Hydrogen peroxide scavenging of methanol and 70% ethanol extracts of Jeju camellia mistletoe (Korthalsella japonica). EC 50 means the effective concentration at which the antioxidant was 50%. Each value is expressed as mean on at which the * statistically differences from methanol extract (p<0.05). L-ascorbic acid was used for the positive control (data not shown).

5 1078 생명과학회지 2016, Vol. 26. No. 9 였을때본연구에서의 H 2O 2 소거활성이우수함을확인할수있었고, 이와같이유럽산겨우살이와제주동백나무겨우살이의 H 2O 2 소거활성이다르게나타난것은겨우살이가기생하는숙주의종및서식하는환경의차이등에의한것으로기인된다. H 2O 2 소거능에대한 EC 50 값을환산하였을때 70% 에탄올추출물이 1.5 mg/ml, 100% 메탄올추출물이 2.4 mg/ ml로 70% 에탄올추출물이 100% 메탄올추출물에비해유의적인소거능을나타내었고 (p<0.05)(fig. 2), 본연구의다른항산화활성실험결과와비교했을때가장우수한활성을보였다 (Fig. 2). Ferrous ion chelating 활성 Free radical에의한체내세포에서의지질및단백질의산화를촉진하는금속이온인자 (Fe 2+, Cu 2+ 등 ) 는지방산화반응에촉매작용을하여금속이온복합체를형성함으로써항산화효과를나타낸다 [6]. Fe 2+ 는여러금속이온중가장강력한산화촉진제로 ferrozine과정량적으로반응하여붉은색을띠는데이때킬레이트 (chelate) 효과를가진물질이존재하면 Fe 2+ - ferrozine complex 형성이억제되어발색이저해되는원리 [3] 를이용하여항산화활성을측정하였다. 용매별동백나무겨우살이추출물의 ferrous ion chelating 활성을측정한결과는 Fig. 3에나타난것과같이농도가증가함에따라 chelating 활성이증가하는양상을보였고, 용매차이에따른 chelating 활성을비교하였을때 70% 에탄올추출물이 100% 메탄올추출물과비교하였을때비교적높은활성을나타내었다 (Fig. 3). 높은 chelating 활성을보인 70% 에탄올 추출물 (12.1%) 과양성대조군인 L-ascorbic acid의활성 (40.9%) 을동일농도에서비교하였을때약 3.4배의차이를확인할수있었으며, EC 50 값을통해용매간의활성을비교분석한결과 100% 메탄올추출물은 15.9 mg/ml, 70% 에탄올추출물은 9.4 mg/ml로 70% 에탄올을용매로사용한추출물에서우수한 chelating 활성을나타내었다 (p<0.05)(fig. 3). 유럽산겨우살이의 chelating 활성측정결과에탄올추출물이약 54% 활성을나타낸것 [22] 과비교하였을때본연구에서의활성이비교적높은것으로보아유럽산겨우살이에비해국내산겨우살이가높은활성을가진다는보고 [8, 16] 에부합되는결과를보이고있다. 또한숙주식물에따른겨우살이의항산화효능에대한연구에서 [21] cocoa tree, cashew tree 겨우살이의메탄올추출물의 chelating 활성은각 55% 와 65% 로본연구에서의활성보다비교적높은것으로보았을때이는겨우살이의기생숙주의종의차이와서식지의환경에따른차이에따른것으로기인된다. 환원력측정환원력은항산화작용의여러기작중에서활성산소종및유리기에전자를공여하는능력을말하며, ferric-ferricyanide (Fe 3+ ) 혼합물이수소를공여하여 free radical을안정화시켜 ferrous ion (Fe 2+ ) 로전환하는환원력을흡광도값으로나타낸것으로서 [17], 높은항산화활성을가지는물질은높은흡광도값을나타낸다 [7]. 동백나무겨우살이의환원력을측정한결과, Fig. 4에나타난것과같이농도의존적인경향을보였으나각농도별용매에따른환원력의차이가크게나타나지않았 Fig. 3. Ferrous ion chelating of methanol and 70% ethanol extracts of Jeju camellia mistletoe (Korthalsella japonica). EC 50 means the effective concentration at which the antioxidant was 50%. Each value is expressed as mean on at which the * statistically differences from methanol extract (p<0.05). L-ascorbic acid was used for the positive control (data not shown). Fig. 4. Reducing power of methanol and ethanol extracts of Jeju camellia mistletoe (Korthalsella japonica). EC 0.5 means the effective concentration at which the absorbance was 0.5. Each value is expressed as mean on at which the * statistically differences from methanol extract (p<0.05). L-ascorbic acid was used for the positive control (data not shown).

6 Journal of Life Science 2016, Vol. 26. No 다 (Fig. 4). 양성대조군으로사용한 L-ascorbic acid의흡광도값 (0.68) 과동일농도 (1 mg/ml) 에서추출물의환원력 ( 약 0.1) 과비교하였을때활성이다소낮게나타났다. 흡광도값이 0.5에도달하기위해유효한농도인 EC 0.5 로나타내었을때메탄올추출물은 15.6 mg/ml, 70% 에탄올추출물은 14.9 mg/ ml로유의적차이를보여 70% 에탄올추출물이비교적높은환원력을나타내었다 (p<0.05)(fig. 4). 환원력을측정하는 ferric reducing antioxidant power (FRAP) 방법에의한겨우살이의항산화능측정결과 [30] 메탄올분획물이아세톤분획물에비해약 10배에서 70배이상의높은폴리페놀함량을보였으며, FRAP 활성을측정한결과에서도같은양상을나타냄에따라이들의상관관계를분석한결과, 메탄올분획물의총폴리페놀함량과환원력간의상관계수가 0.939로측정되어유의한상관관계를보임을확인하였다. 이에따라본연구에서사용된겨우살이추출물의기능성성분과환원력을포함한항산화활성간의상관관계에대한분석이필요할것으로판단된다. 기능성성분과항산화능상관관계겨우살이의총폴리페놀및플라보노이드함량이증가할수록항산화활성또한증가하는것을통해동백나무겨우살이에포함된기능성성분과항산화활성간의깊은상관관계가있을것으로판단되었고, 여타연구결과들을통해겨우살이의기능성성분과항산화활성간의높은상관관계를보이는것을확인할수있었다 [8, 30]. 이에따라 pearson correlation 방법을이용한총폴리페놀및플라보노이드함량과항산화활성 (EC 50, EC 0.5) 에관한상관관계를분석하였다 (Table 2). 총폴리페놀및플라보노이드함량이증가함에따라항산화활성을나타내는EC 50 및 EC 0.5 값이감소하는경향을보이고있기때문에모두음의상관관계를나타내고있고, 각상관계수에대한절대값이 1에가까워질수록높은상관관계를나타냄을알수있다 (Table 2). 총폴리페놀함량과항산화활성간의상관계수의절대값은모두 0.01 수준에서유의함을보여총폴리페놀함량과항산화활성간의깊은상관관계가있음을확인하였고 (p<0.01), 총폴리페놀함량과환원력간의상관관계에서 r 2 = 으로가장높은상관관계를보였다 (Table 2). 총플라보노이드함량과라 Table 2. Correlation coefficients between antioxidant compounds and antioxidant activities of Jeju camellia mistletoe DPPH 3) HP 4) FIC 5) RP 6) TPC 1) TFC 2) ** ** ** ** ** * ** * 1) TPC (total phenolic contents); 2) TFC (total flavonoid contents); 3) DPPH (DPPH radical scavenging activity); 4) HP (hydrogen peroxide scavenging activity); 5) FIC (ferrous ion chelating activity); 6) RP (reducing power). 디칼소거능 (DPPH, H 2O 2) 간의상관관계또한 0.01 수준에서유의함을보였으며, chelating 활성및환원력에대한상관관계는 0.05 수준에서유의함을나타내었다. 겨우살이의총폴리페놀함량과환원력간의상관관계가가장높았던반면에총플라보노이드함량과환원력간의상관계수는 로가장낮은수준을보이는것을확인할수있었는데, 이는겨우살이의다양한항산화기작중에지질산화억제효능보다는라디칼소거활성에상대적으로효과적이라는결과 [27] 와일치하는경향을확인할수있다. 감사의글 본논문은중소기업청에서지원하는 2015년도산학연협력기술개발사업 (No. C ) 의연구수행으로인한결과물임을밝힙니다. References 1. Chae, J. W., Kong, H. J., Lee, M. J., Park, J. Y., Kim, J. H., Kim, Y. H., Lee, C. E. and Kim, K. H The Anti-oxidant effect of extracts from the Vaccinium oldhami. J. Life Sci. 20, Chang, C. S. and Hwang, S. Y Effect of lipid metabolism in Viscum album lectin on rats. Kor. J. Clinical Lab. Sci. 36, Chang, M. S., Park, M. J., Jeong, M. C., Kim, D. M. and Kim, G. H Antioxidative activities and antibrowning effects of green tea extracts and propolis. Kor. J. Food Cook. Sci. 28, Choi, K. and Hwang, K. H Comparative study of main ingredients of Korean mistletoes depending on host plants. Kor. J. Forest Soc. 2008, Hyon, J. S., Kang, S. M., Mahinda, S., Koh, W. J., Yang, T. S., Oh, M. C., Oh, C. K., Jeon, Y. J. and Kim, S. H Antioxidative activities of extracts from dried Citrus sunki and C. unshiu peels. Kor. J. Soc. Food Sci. Nutr. 39, Jeon, S. M., Kim, S. Y., Kim, I. H., Go, J. S., Kim, H. R., Jeong, J. Y., Lee, H. Y. and Park, D. S Antioxidant activities of processed Deoduck (Codonopsis lanceolata) extracts. Kor. J. Soc. Food Sci. Nutr. 42, Jeong, C. H., Kang, S. T., Joo, O. S., Lee, S. C., Shin, Y. H., Shim, K. H., Cho, S. H., Choi, S. G. and Heo, H. J Phenolic content, antioxidant effect and acetylcholinesterase inhibitory activity of Korean commercial green, puer, oolong, and black teas. Kor. J. Food Preserv. 16, Ju, M. J., Do, J. R., Kwon, J. H. and Kim, H. K Physiological activities of mistletoe extracts from Viscum album L. Kor. J. Soc. Food Sci. Nutr. 38, Kang C. S., Lee, M. J, Park, C. B. and Bang, I. S Study on the antioxidative and physiological activities of Saururus chinensis Extract. J. Life Sci. 22, Kang, D. H. and Kim, M. Y Comparative phenolic composition and antioxidant properties of honey and hon-

7 1080 생명과학회지 2016, Vol. 26. No. 9 eycomb extracts. J. Life Sci. 25, Khwaja, T. A., Varven, J. C., Pentecost, S. and Pande, H Isolation of biologically active alkaloids from Korean mistletoe Viscum album coloratum. Cell Mol. Life Sci. 36, Kim, E. J., Choi, J. Y., Yu, M. R., Kim, M. Y., Lee, S. H. and Lee, B. H Total polyphenols, total flavonoid contents, and antioxidant activity of Korean natural and medicinal plants. Kor. J. Food Sci. Technol. 44, Kim, I. B., Jeong, J. S., Yoon, T. J. and Kim, J. B Safety evaluation of Korean mistletoe extract. Kor. J. Food Nutr. 26, Kim, J. H., Lee, S. Y., Kwon, O. J., Park, J. H. and Lee, J. Y Anti-aging and anti-diabetes effects of Aconitum pesudo-laeve var. erectum extracts. J. Life Sci. 23, Kim, Y., S. Mahinda, Koh, K., Jeon, Y. and Kim, S Reactive oxygen species scavenging activity of Jeju native citrus peel during maturation. Kor. J. Soc. Food Sci Nutr. 38, Lee, H. J., Do, J. R., Kwon, J. H. and Kim, H. K Antioxidant effects of Viscum album L. extracts by extraction conditions. Kor. J. Soc. Food Sci. Nutr. 39, Lee, J. B., Park, H. K., Lee, J. S. and Kim, M. H Studies on antioxidant activity, total flavonoids and polyphenols, and reducing power in Yakju with different ratios of dandelion root. J. East Asian Soc. Dietary Life 21, Lee, J. E., Kim, J. H. and Kim, M. Y Changes in phenolic composition, antioxidant and antidiabetic properties of Jeju Citrus sudachi as influenced by maturity. J. Life Sci. 25, Lee, J. Y., Ko, S. H., Moon, S. J., Yu, J. H. and Kim, S. W Investigation of forest therapeutic function according to the antioxidant activity and total phenolics in magnoliaceae flower. Kor. Institute Forest Reaction Welfare. 17, Lee, S. J., Lee, M. K., Choi, G. P., Kim, N. Y., Roh, S. K., Heo, M. Y., Kim, J. D., Lee, H. Y. and Lee, J. H Inhibitory effect of Korean mistletoes on the oxidative DNA damage. Kor. J. Med. Crop Sci. 11, Oluwaseun, A. A. and Ganiyu, O Antioxidant properties of methanolic extracts of mistletoes (Viscum album) from cocoa and cashew trees in Nigeria. African J. Biotech. 7, Papuc, C., Crivineanu, M., Goran, G., Nicorescu, V. and Durdun, N Free radicals scavenging and antioxidant activity of European mistletoe (Viscum album) and European birthwort (Aristolochia clematitis). Rev. Chem. 61, Park, J. H., Ji, S. T., Hyun, C. K., Chin, K. B. and Shin, H. K Investigation of in vitro antigenotoxic effect of Korean mistletoe (Viscum album coloratum) using Comet assay. Kor. J. Food Sci. Technol. 32, Park J. H., Kang, B. W., Kim, J. E., Seo, M. J., Lee, Y. C., Lee, J. H., Joo, W. H., Choi, Y. H., Lim, H. S., Jeong, Y. K. and Lee, B. K Effect of ethanol extract from peel of Citrus junos and Concirus trifoliata on antioxidant and immune activity. J. Life Sci. 18, Seo, J. H., Choi, Y. H., Kim, J. S., Kim, S. K., Choi, S. H., Kim, Y. S., Kim, Y. K., Kim, S. H. and Ryu, S. Y Active principles of the methanol extract of korean mistletoe responsible for the inhibitory effect on the proliferation of human tumor cell lines. Kor. J. Phar. 35, Shin, J. H., Lee, S. J., Seo, J. K., Cheon, E. W. and Sung, N. J Antioxidant activity of hot-water extract from yuza (Citrus junos SIEB ex TANAKA) peel. J. Life Sci. 18, Song, H. S., Park, Y. H., Kim, S. K., Moon, W. K., Kim, D. W. and Moon, K. Y Downregulatory effect of extracts from mistletoe (Viscum album) and pueraria root (Pueraria radix) on cellular NF-κB activation and heir antioxidant activity. Kor. J. Soc. Food Sci. Nutr. 33, Vicass, S., Rugina, D., Sconta, Z., Pintea, A. and Socaciu, C The in vitro antioxidant and anti-proliferative effect and induction of phase II enzymes by a mistletoe (Viscum Album) extract. Bulletin UASVM. Agri Vicaş, S. I., Rugină, D. and Socaciu, C Comparative study about antioxidant activities of Viscum album from different host trees, harvested in different seasons. J. Med. Plants Res. 5, Vicas, S., Prokisch, J., Rugina, D. and Socaciu, C Hydrophilic and lipophilic antioxidant activities of mistletoe (Viscum album) as determined by FRAP method. Notulae Botanicae Horti. Agrobotanici Cluj-Napoca. 37, Yoon, T. J., Yang, W. S., Park, S. M., Jung, H. Y., Lee, A. N., Jung, J. H., Kang, T. B., Yoo, Y. C. and Kim, J. B In vivo toxicity and immunoadjuvant activity of Korean mistletoe (Viscum album coloratum) extract fermented with lactobacillus. Kor. J. Soc. Food Sci. Nutr. 41,

8 Journal of Life Science 2016, Vol. 26. No 초록 : 제주동백나무겨우살이의용매별기능성성분및항산화작용강다희 1 박은미 1 김지혜 1 양정우 2 김정현 3 김민영 1 * ( 1 제주대학교생명자원과학대학바이오소재전공독성학실험실, 2 동백사랑영농조합법인, 3 제주관광대학교 ) 본연구에서는제주에서자생하는동백나무겨우살이의용매별기능성성분및항산화활성에대한평가를시행하였다. 총폴리페놀및플라보노이드함량을분석한결과모두 70% 에탄올추출물에서높은함량을보였다. DPPH, hydrogen peroxide 소거능, ferrous ion chelating, 환원력을통해항산화활성을측정하고이를 EC 50 및 EC 0.5 로나타낸결과모든실험에서 70% 에탄올을용매로사용한겨우살이추출물에서높은활성을나타내었다. 상기의결과를통하여총폴리페놀및플라보노이드함량과항산화활성간의깊은관련성을예상해볼수있었고이를상관관계를통해분석해본결과, 총폴리페놀및플라보노이드함량과항산화활성이 0.01 및 0.05 수준에서유의한상관관계를보임을확인할수있었다. 이러한결과들을통해잠재적항산화제로서의제주산동백겨우살이의가능성이있다고판단되어향후구체적인연구가필요하다고사료된다.

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Journal of Life Science 2011 Vol. 21. No. 8. 1120~1126 ISSN : 1225-9918 DOI : http://dx.doi.org/10.5352/jls.2011.21.8.1120 μ μ μ α β Journal of Life Science 2011, Vol. 21. No. 8 1121 μ μ 1122 생명과학회지 2011,