ipsc Disease Modeling Kit ipsc 연구를 위한 통합 핵심제품 및 서비스

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1 i Disease Modeling Kit i 연구를 위한 통합 핵심제품 및 서비스

2 , Thermo Fisher Scientific. Thermo Fisher Scientific 은다양한종류의줄기세포연구를지원하고있으며, 줄기세포의기초연구부터임상연구까지 workflow 에따른모든단계마 다다양한솔루션을제공드리기위한제품과서비스개발에도많은노력을기울이고있습니다. Disease modeling kit 자가재생 (Self renewal) 이가능하고다양한세포로분화능력을가지고있는인간의줄기세포는생물학과질병모델, 세포치료개발에있어무한한가능 성을가지고있기때문에많은관심과지원속에활발한연구가진행되고있습니다. 그중환자 - 특이적체세포로부터유도된인간만능줄기세포 (induced pluripotent stem cells, is) 의유용성은특정질환에대한기존동물모델의한계를극복하고약물스크리닝에서도새로운가능성을나타내며두각을 보이고있습니다. 이에 Thermo Fisher Scientific 은 i Disease Modeling 연구를쉽고경제적으로제작하실수있는 Full Kit 를제공하여효과적으로연구하실수있도록도 움드리고자합니다. 1 Reprogramming 2 Culture 3 Characterization 4 Differentiation 5 Cryopreservation 1. Reprogramming CytoTune - ips 2.0 Sendai Reprogramming Kit Invitrogen CytoTune -ips 2.0 Sendai Reprogramming Kit 은 3 개의 Vector 를포함하고있으며많 은 incubation 시간이필요한 mrna reprogramming 과비교하여하루의 incubation 으로충분합니다. 이 Kit 는최대 1.2% 의높은 reprogramming efficiency polycistronic vector 가지고있습니다 (Figure 1). 이 polycistronic vector 는 polymerase- related gene 이 temperature-sensitive 하게 mutation 된 backbone 을가지고있으며, 이것은 reprogramming 후 virus 를제거할때유리하며더적은 cytotoxicity 를나타내도록도와줍니다. : Fibroblast 와 blood reprogramming 에서의높은성공률 Hands on time 을최소화한확장성있는 cell line generation CytoTune kits cell type Human RNA vector 의빠른제거 Adult and neonatal dermal fibroblasts Amniotic fluid MSCs Cardiac fibroblasts CD34+ blood cells Mammary epithelial cells Nasal epithelial cells Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) Skeletal myoblasts T cells Umbilical vein epithelial cells Urine epithelial cells research 에서 clinical application 으로의쉬운전환 Mouse Mouse embryonic fibroblasts reprogramming? Reprogramming culture 7 culture media Gibco Revita Cell Supplement CytoTune ips Sendai Reprogramming Kits DNA Episomal vectors Epi5 vectors Culture media Essential 8 Essential 8 Flex StemFlex KnockOut Serum Replacement Multi- Species Supplements RevitaCell Supplement Matrices Vitronectin Geltrex matrix TaqMan h Scorecard Panel Immunocytoche mistry and live staining kits characterization service Karyotyping Service (KaryoStat, Arraybased) Pluripotency Assay Service (PluriTest, Arraybased) 3 germ-layer Differentiation Potential Assay Service (Scorecard, qpcr-based) Ectoderm Neural Induction Dopaminergic Neuron Differentiation Kit CultureOne Supplement B-27 Supplement Mesoderm Cardiomyocyte Differentiation Definitive Induction Kit Freeze medium Cryopreservation Kit A B Epi5 Episomal i Reprogramming Vectors Figure 1. Day 7 transfer 에서의 RevitaCell Supplement 사용시 Feeder-free reprogramming efficiency의개선. human dermal neonatal fibroblasts (HDFn) (Cat.No. C-004-5C) 의 feeder-free reprogramming을 CytoTune-iPS 2.0 Sendai Reprogramming Kit 를 MOI of 5:5:3 조건에서사용하여완료하였습니다. transduction 후 7일에, reprogrammed fibroblasts 는 rhvtn-n matrix로 transfer 되었습니다. (A)RevitaCell Supplement없이 growth (B)Transfer 후 RevitaCell Supplement 24hours 안에첨가, daily feeding은 Gibco Essential 8 만으로진행되었습니다. Epi5 Episomal i Reprogramming Kit는야마나카실험실의 Okita박사가제작한 episomal vector로써 Oct4, Sox2, Klf4, L-myc, Lin28, p53dd를이용해 transgene-free, virus-free조건으로 i reprogramming 효율이 0.004~0.3% 로기존 episomal system 보다높게나타납니다. Epi5 Episomal i Reprogramming Kit를 somatic cell 에 transduction 하기위해 electroporator를이용하지않고 Lipofectamine 3000 Transfection Reagent 을이용하여쉽게 i를제작하실수있습니다. CytoTune -ips 2.0 Sendai Reprogramming Kit 1pack A Work Flow, 10%. 3 Work Flow, 20%. Reprogramming Tool (i) CytoTune -ips 2.0 Sendai Reprogramming Kit 3pack A16518 Epi5 Episomal i Reprogramming Kit A15960 CytoTune EmGFP Sendai Fluorescence Reporter 1pack A16519 Episomal i Reprogramming Vectors 1 tube A14703 RevitaCell Supplement (100X) 5mL A

3 3. Characterization 2. Pluripotent Stem Cell Culture Essential 8 & Essential 8 Flex 배양에 필수적으로 필요한 8개의 components만 포함한 배지 Serum free & feeder free & Xeno free formulation으로 배양 시 필수적인 8가지 성분으로 구성되어 있어 lot 간의 편차가 적으 며 LiCl 및 동물 유래성분이 전혀 함유되어 있지 않습니다. Pluripotent Stem Cell의 stem-ness 및 분화능력의 결과를 visual 하게 확인하고 질 높은 data를 얻으실 수 있는 antibody labeling & detection kit가 있 습니다. hs의 다양한 lineages의 image-based의 분석을 위해, 한개의 box에서 분석이 가능합니다. Kit는 antibodies, stains, buffers, media로 구 성 되어 있으며, Stem cell의 high-quality의 아름다운 이미지를 만들어 냅니다 Chemically defined & cgmp quality 생산 제품 입니다. Feeder-cell대신에 Vitronectin(VTN-N) 코팅조건으로 feeder cell-free하게 배양할 수 있어 편리하게 실험 하실 수 있습니다. Essential 8 Flex 는 Essential 8 과 동일 조성을 바탕으로 Heat-sensitive activity 기술을 접목시켜 매일 배지를 교 체할 필요가 없는 시스템 입니다. 왜 Essential 8 Media일까요? In-vitro에서 Stem-ness 유지에 Media formulation을 아는 것이 중요하 기 때문입니다. Maximize application performance 를 위한 Modular options BSA 나 HAS 불포함 Clinical 혹은 translational research application에 적합하기 때문입니다. KnockOut Serum Replacement ESC와 i 배양을 위한 골든 스탠다드 조성 KnockOut Serum Replacement는 serum-free formulation으로써 미분화된 ES 세포들을 배양하고 유지시킬 수 있도록 최적화 되어 있어서, FBS supplemented media에서 배양된 세포 들보다 대체로 덜 분화됩니다. Characterization KnockOut SR은 human과 mouse의 ESC와 i 배양에 있어서 일관성 있는 성장 조건을 제공하는 것과 관련하여 300개가 넘는 다수의 논문에서 언급된 제품입니다. KnockOut DMEM 또는 KnockOut DMEM/F-12와 사용될 때 더욱 더 효율적입니다. StemFlex Gene Editing에 최적화된 Feeder-free 기반의 human 배양 배지 Alkaline Phosphatase Live Stain 50 μl A14353 CD44 Alexa Fluor 488 Conjugate Kit for Live Cell Imaging A25528 TRA-1-60 Alexa Fluor 488 Conjugate Kit for Live Cell Imaging A25618 TRA-1-60 Alexa Fluor 555 Conjugate Kit for Live Cell Imaging A24879 TRA-1-60 Alexa Fluor 594 Conjugate Kit for Live Cell Imaging A24882 Pluripotent Stecm Cell Immunocytochemistry Kit (OCT4, SSEA4) 40 tests A25526 Human Neural Stem Cell Immunocytochemistry Kit 20 tests A24354 Human Cardiomyocyte Immunocytochemistry Kit A Germ Layer Immunocytochemistry Kit 20 tests A25538 Live Cell Imaging Solution A14291DJ FluoroBrite DMEM A ProLong Live Antifade Reagent, for live cell imaging P36975 세포에 손상을 많이 줄 수 있는 까다로운 실험에 최적화 되어 gene editing, transfection, single cell passaging application 이후에도 cell recovery 효율이 높습니다. Essential 8 media 보다 더 많은 성분 포함된 제품입니다. TaqMan h Scorecard Panel and Analysis Software Weekend-free 배양 프로토콜이 가능해서 실험 시간과 비용이 감소되는 장점이 있습니다. Matrix 및 passaging reagent 선택이 자유로워 더 쉽고 편리하게 실험이 가능합니다. Culture Coating Reagent 4 Essential 8 A Essential 8 Flex Kit 1 Kit A CTS Essential 8 A StemFlex 500ml A KnockOut Serum Replacement KnockOut Serum Replacement - Multi-Species 100 ml A KnockOut Serum Replacement - Multi-Species A KnockOut DMEM KnockOut DMEM/F CTS KnockOut SR XenoFree Kit 100 ml A CTS KnockOut SR XenoFree Kit A CTS KnockOut SR XenoFree CTS KnockOut SR XenoFree KnockOut DMEM CTS A CTS KnockOut DMEM/F-12 A StemPro hesc SFM A StemPro EZPassage Disposable Stem Cell Passaging Tool 10units Vitronectin (VTN-N) Recombinant Human Protein, Truncated A14700 Fibronectin Human, Plasma 5mg Fibronectin Bovine Protein, Plasma 1mg CELLstart CTS 2mL A Geltrex LDEV-Free, hesc-qualified, Reduced Growth Factor Basement Membrane Matrix A Geltrex LDEV-Free, hesc-qualified, Reduced Growth Factor Basement Membrane Matrix 5mL A Geltrex hesc-qualified, Ready-To-Use, Reduced Growth Factor Basement Membrane Matrix 50mL A ug A mg A29249 유전체를 연구하고 정량하는데 높은 특이성과 재현성을 보여주는 분석방법으로 매우 잘알려진 TaqMan Assay 기술을 이용하여 Stem-ness 및 trilineage 분화특성을 쉽고 정확하게 확인할 수있는 TaqMan h Scorecard Panel과 analysis software제품이 있습니 다. 이 기술은 Teratoma in vivo assay 대체하는 신속하고 정량적인 분석법으로도 연구되고 있습니다. H9-EB-Day7 H9-ESC Day0 Selfrenewal TaqMan h Scorecard Panel and Analysis Software Ectoderm Mesoderm Selfrenewal Ectoderm Mesoderm TaqMan h Scorecard Kit, Fast 96-well 2 x 96 well plates A15871 TaqMan h Scorecard Panel, Fast 96-well 2 x 96 well plates A15876 TaqMan h Scorecard Kit, 384-well 1 x 384 well plates A15872 TaqMan h Scorecard Panel, 384-well 1 x 384 well plates A

4 4. Differentiation 5. cryopreservation 기초연구, drug discovery, 혹은 future therapeutic application에서, stem cell 은 재현성이 있고, 신뢰도 높은 결과를 위해 표준화된 배양 방법을 요구합니다. Gibco의 media, supplements, 그리고 substrates는 쉽게 사용 가능하며, 연구자가 target하는 cell lineage로의 에 맞출 수 있는 tool을 가지고 있습니다. Gibco의 portfolio는 연구 workflow를 줄여주고, 더 빠르고 효율적인 시스템을 제 공합니다. 냉동보존은 매우 중요하며 가끔 어려운 과정이기도 합니다. 그래서 저희는 Gibco cryopreservation technologies를 추천 해 드립니다. s의 더 효율적인 recovery와 해동 후 Cell viability를 위해, RevitaCell Supplement 를 사용 해 보세요. Gibco에는 를 3 Germ layers (Neurall, Definitive endoderm, Cardiomyocyte) 로 쉽고 빠르 게 분화 연구를 할 수 있는 Differentiation Kit 들이 있습니다. Media systems and reagents for. Ectoderm Application NSC Neuron Media system Neural Induction CultureOne Supplement with B-27 Supplement and Neurobasal Substrate Geltrex LDEV-Free, hesc-qualified, Reduced Laminin Mouse Protein, Growth Factor Basement Natural Membrane Matrix Mesoderm Dopaminergic neuron Cardiomyocyte Definitive endoderm Dopaminergic Neuron Differentiation Kit Cardiomyocyte Differentiation Kit Definitive Induction Kit Vitronectin (VTN-N) Recombinant Human Protein, Truncated Laminin Mouse Protein, Natural Geltrex LDEV-Free, Vitronectin (VTN-N) hesc- qualified, Reduced Recombinant Human Growth Factor Basement Protein, Truncated Membrane Matrix Cryopreservation Kit Synth-a-Freeze Cryopreservation Recovery Cell Culture Freezing Application Cryopreservation medium and recovery supplement for s For freezing and storing a variety of cell types Complete freezing medium for cryopreservation of a wide variety of mammalian cells Tested cell types is, ESCs, PBMCs, i-derived cardiomyocytes Human keratinocytes, MSCs, NSCs, other CHO-S, CHO-K1, HEK 293, Jurkat, NIH primary cell types 3T3 Chemical composition Xeno-free cryomedium; animal origin free, Animal origin free chemically defined recovery supplement Ready to use Recovery component included No No cryopreservation Protocol duration Cell type generated Media format 7 days days 35 days Neural stem cells General or subtype neurons Midbrain dopaminergic neurons 50X supplement/ basal, serum-free Serum-free Serum-free 14 days Cardiomyocytes 2 days Definitive endoderm Dissociation Reagent Ready-to-use, xeno-free Ready-to-use, xeno-free Human Dopaminergic HuC/HuD Monoclonal Recommended Human NSC Neuron Human Cardiomyocyte Antibodies for quantitative N/A characterization tool Immunocytochemistry Kit Immunocytochemistry Kit Immunocytochemistry Kit image analysis Differentiation 6 Neural Induction A Cardiomyocyte Differentiation Kit A Definitive Induction Kit A Dopaminergic Neuron Differentiation Kit A Contains FBS CTS Synth-a-Freeze 50 ml A Cryopreservation Kit 50mL A Dispase 5g StemPro Accutase Cell Dissociation Reagent A UltraPure 0.5M EDTA, ph 8.0 4x TrypLE Select (1X), no Phenol Red TrypLE Select CTS A Versene Solution StemPro EZPassage Disposable Stem Cell Passaging Tool 10units

5 더 자세한 내용은 상기 QR code를 통하여 홈페이지에서 확인 해 주세요. Thermo Fisher Scientific 써모피셔 사이언티픽 솔루션스 유한회사 서울시 강남구 광평로 281 수서오피스빌딩 10층, 대표번호 : For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved. All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific and its subsidiaries unless otherwise specified.

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