대한임상병리학회지 : 제 20 권제 3 호 2000 Korean J Clin Pathol 2000; 20: 3306 진단면역학 후천성면역결핍증바이러스항원및항체동시선별검사의진단적유용성 박광일 김현숙 김현옥 송경순 김준명 * 연세대학교의과대학임상병리과학교실, 내과학교실 * Evaluation of a Screening Test Kit of Simultaneous p24 Antigen and AntiHIV1/2 Detection in Diagnostic Aspect Kwangil Park, M.D., HyonSuk Kim, M.D., Hyun Ok Kim, M.D., Kyung Soon Song, M.D., and Jun Myung Kim, M.D.* Departments of Clinical Pathology and Internal Medicine,* College of Medicine, Yonsei University, Seoul, Korea Background : Human immunodeficiency virus (HIV) is the causative agent of acquired immunodeficiency syndrome (AIDS). Current diagnosis of HIV infection relies on the detection of antihiv antibodies by ELISA. Recently, simultaneous detection kit of p24 antigenemia and antihiv1/anti HIV2 antibodies was developed. The aim of this study was to evaluate the diagnostic kit of simultaneous detection with p24 antigen and antihiv1/2 in diagnostic aspect. Methods : Eight hundred and four sera which were obtained between July 1999 and August 1999 and 110 sera from 54 patients diagnosed with HIV infection were included. One lot of panels composed of consecutive sera obtained from known HIVinfected patients was included. The detection of antihiv1/2 antibodies was done by Genedia HIV1/2 ELISA 3.0 kit (Greencross, Seoul, Korea) and Enzygnost antihiv1/2 Plus (Behringwerke, Marburg, Germany). The simultaneous detection of p24 antigenemia and antihiv1/2 antibodies was done with VIDAS DUO kit (biomerieux, Lyon, France). The Vironostika HIV1 antigen kit was used for detection of p24 antigen. The HIV RNA PCR and antihiv western blot assay were also performed to confirm the test results in discrepant cases. Results : The simultaneous detection kit showed 100% sensitivity and 99.6% specificity. The possibility of obtaining an earlier diagnosis than from the conventional antihiv1/2 EIA was also suggested by the results obtained with a group of consecutive panel sera infected with HIV. Conclusion : The simultaneous p24 antigen and antihiv1/2 detection kit can be applied as a clinical screening test as a substitution for conventional antihiv1/2 EIA, with a probable gain, especially, in early diagnosis. (Korean J Clin Pathol 2000; 20: 3306) Key words : AIDS, HIV, HIV screening test, AntiHIV1/2 antibody, p24 antigen 서 론 후천성면역결핍증 (acquired immunodeficiency syndrome, 접수 : 2000 년 3 월 20 일접수번호 : KJCP1395 수정본접수 : 2000 년 4 월 14 일교신저자 : 김현숙우 135720 서울시강남구도곡동 14692 영동세브란스병원임상병리과전화 : 0234973531, Fax: 0234629493 Email: kimhs54@yumc.yonsei.ac.kr AIDS) 은 1981년에동성연애자, 마약중독자와수혈을받은사람및혈우병환자들에서발병한 Pneumocystis carinii 폐렴및카포시육종을보고하면서알려지게되었다 [13]. 성접촉및혈액제제를통하여전염되는감염성질환으로밝혀졌으며, 1983년 HIV (human immunodeficiency virus) 가림프절질환을가진환자에서처음으로동정되었고 [4], 1984년 AIDS의원인균이라는사실이밝혀지게되었다 [5]. 이후혈청학적인역학조사를거쳐서 HIV 감염이전세계적으로퍼져있다는사실을알게되었고, 무증상군부터급성진행성환자군까지넓은범위의질환군으 330
후천성면역결핍증바이러스항원및항체동시선별검사의진단적유용성 331 Levels of p24 antigen (pg/ml) 700 600 500 400 300 200 100 Antip24 antibody p24 antigen AntiEnv antibody 1:25,600 1:12,000 1:6,400 1:3,200 1:1,600 1:800 1:400 3 6 912 2 4 6 8 10 12 14 16 Weeks Years Fig. 1. Hypothetical time course of appearance of p24 antigen in serum and HIV1 antibodies during the course of HIV1 infection, cited from Fauci & Lane, 1998. Levels of AntiHIV antibody 이개발되어 [20], 높은유병률을보이는지역에서신속하고경제적인선별검사로서유용할것으로생각되고있으며, 수혈전검사등에서도효율적일것으로기대되고있다. HIV는아직까지완전한치료법이확정되지않은위험한병원체로서많은변종과지역적특이성이문제가되고있다. 따라서새로개발되어시판되는시약은임상적진료목적으로도입하기전에그유용성이정확히평가되어야만할필요성이특히크다. 본연구에서는 HIV 항원및항체동시선별검사 ( 이하 HIV 항원 / 항체동시검사로약함 ) 목적으로개발된시약을가지고우리나라에서의효용성을알아보고자하였다. 재료및방법 로인식되었다 [6, 7]. 국립보건원자료에따르면우리나라에서는 1985년첫 HIV 감염자가발생된이후 1999년처음으로 1,000명이넘었다 [8]. HIV 감염후항체가생성되기까지약 48주가걸리는데 [9, 10], 대부분의환자에서 HIV 항체가체내에서만들어지기전에일반적으로 p24 항원이 100 pg/ml 이상의높은농도로존재하는것이알려져있으며 (Fig. 1), 이시기에임상증상이나타나기시작하고바이러스혈증 (viremia) 이높은농도로나타나며, 전염력도높다고한다 [1114]. 현재 AIDS의발현정도는주로임상증상에의존하고있으나여러혈청학적및분자유전학적검사법이개발되었고, CD4 T 림프구정량검사및 HIV RNA 정량검사는환자의면역상태및질병의진행정도를알고치료방침을결정하는데중요하며환자의치료에좋은지표로이용되고있다 [15]. 그러나, 현재까지도 HIV 감염의초기진단용선별검사는대부분의검사실에서 ELISA (enzymelinked immunosorbent assay) 법을이용한 HIV 항체를검출하는혈청학적인방법이주로사용되고있으며, 최근들어 p24 항원검사법이수혈전검사로 HIV 항체검사와함께이용되고있다. ELISA법에의한 HIV 항체검사법은비교적간단하고경제적이며신속하게결과를보고할수있는장점이있으나, HIV에유전적변종들이많고 [17], env 유전자의일치율이낮아서 [18], 상대적으로민감도와특이도가낮으며, 바이러스혈증이높아전염력이높은시기에 HIV 감염여부를확인할수없는등의문제점이있었다 [19]. 또한 p24 항원혈증 (antigenemia) 을확인하기위한기존의검사법들은검사실에서일상적으로이용하기에는비경제적인측면이많고항체가가증가하면서바이러스혈증이검사의민감도이하로감소한이후에는 HIV 감염여부를확인할수없는등의문제점이있다 [R]. 최근에는 HIV 감염의진단을위해 p24 항원과 HIV1 및 HIV2 항체를동시에선별검사할수있는혈청학적인 ELISA법 1. 연구대상 1999년 7월부터 8월까지연세대학교의과대학세브란스병원에내원한환자중 HIV 감염으로진단받은환자 54명으로부터채혈한 110검체를대상으로민감도를분석하였고, HIV 감염이없는것으로확인된건강증진센터및외래환자중에서임의로선택한 804명의검체를대상으로특이도를분석하였다. HIV 감염이없는음성군은 HIV1/2 항체검사를두가지시약으로실시하였고, 두가지결과가모두음성인환자들만을선택하였다. 환자군검체외에민감도및특이도분석을위해서상품화된 seroconverter panel (SEROHIV panel, NABI, Miami, FL, USA) 을사용하였다. 검체수집시혈청학적검사를위한혈청검체용으로 plain tube 에 5 ml 정도의정맥혈을채취하였고중합효소연쇄반응용혈장을얻기위하여 EDTA tube에 5 ml의정맥혈을동시에채취하여 2시간이내에 3,500 rpm으로 15분이상원심분리하여검체를준비하고각각 3 tube 로분주하였다. 한분주검체는즉시검사하고나머지분주검체는추가검사를위하여 70 C 의냉동고에보관하였다. 2. 연구방법수집된검체를대상으로각각 HIV1/2 항체검사외에 p24 항원검사및 HIV 항원 / 항체동시검사를실시하였다. 서로다른결과를보인검체로중합효소연쇄반응을이용한 HIV RNA 검사및 HIV1 및 HIV2 항체 Western blot을실시하여각 ELISA법의결과와비교하였다. 1) HIV1/2 항체검사 (1) Genedia HIV1/2 ELISA 3.0 ( 녹십자, 서울, 한국 ) 검사법 Strip을마이크로플레이트의프레임에고정시키고, 플레이트의각 well에검체희석액을 100 L씩넣고, 음성대조물질 3
332 박광일 김현숙 김현옥외 2 인 wells, 양성대조물질 2 wells, 나머지 wells에대상검체를각각 50 L씩차례대로넣은다음, 정해진방법에따라검사를실시한후음성및양성대조물질과대상검체의흡광도 (optical density, O.D.) 를 Behring ELISA Processor II Plus (Behringwerke, Marburg, Germany) 를이용하여 450 nm에서측정하였다. (2) Enzygnost AntiHIV1/2 Plus (Behringwerke, Marburg, Germany) 검사법 Strip을마이크로플레이트의프레임에고정시키고, 플레이트의각 well에검체희석액을 25 L씩넣고, 음성대조물질 4 wells, 양성대조물질 2 wells, 나머지 wells에대상검체를각각 100 L 씩차례대로넣은다음, 정해진방법에따라검사를실시한후음성및양성대조물질과대상검체의흡광도를 Behring ELISA Processor III (Behringwerke, Marburg, Germany) 를이용하여 450 nm에서측정하였다. 2) p24 항원검사 Vironostika HIV1 Antigen Microelisa System (Organon Teknika, Boseind, Netherlands) 을이용하여정해진방법에따라검사를진행하였고, 음성및양성대조검체와대상검체의흡광도를 Behring ELISA Processor II Plus (Behringwerke, Marburg, Germany) 를이용하여 450 nm에서측정하였다. 3) HIV 항원 / 항체동시검사 VIDAS HIV DUO (biomerieux, Lyon, France) 키트를사용하였다. 검사에필요한양만큼의 HIV4 strip과 HIV4 SPR (Solid Phase Receptacle) 을검체수, 정도관리물질등을고려하여꺼낸후 VIDAS 검사트레이에놓았다. 적절한검사및환자정보를입력하여작업대장을작성하고, 검사할건수를입력하였다. 이때양성대조물질은 C1', 음성대조물질은 C2' 로입력하고반복측정하였다. 각검체및정도관리물질을각 well에 200 L 씩분주하였다. VIDAS SPR과 strip을화면에서지정된위치에삽입하였다. 이후 VIDAS 자동분석기 (biomerieux, Lyon, France) 로검사하였다. 4) 중합효소연쇄반응을이용한 HIV RNA 검사 AMPLICOR HIV1 MONITOR Test (Roche Diagnostic Systems, Inc., Branchburg, NJ, USA) 키트를사용하였으며, 정해진방법에따라검사를실시한후암실에서 10분간반응시키고무색에서푸른색으로변하면양성으로판정하였다. 5) HIV1 및 HIV2 항체 Western blot 검사 NEW LAV BLOT 1 (Sanofi Diagnostics Pasteur, Redmond, WA, USA) 및 NEW LAV BLOT 2 (Sanofi Diagnostics Pasteur, Redmond, WA, USA) 키트를이용하였으며, 정해진방법에따라검사를실시하였다. 반응액을제거하고말린후 ASTPHLD (Association of State and Territorial Public Health Laboratory Directors) 및 CDC (Centers for Disease Control and Prevention) 의기준에따라결과를해석하였다 [21]. 6) HIV 항원 / 항체동시검사의정밀도분석 VIDAS HIV DUO 키트내에포함되어있는양성및음성대조물질의흡광도치측정결과를이용하여정밀도분석을시행하였다. 매검사마다각검체를총 16회반복측정하여검사간 (betweenrun, withinbatch) 의변이계수 (coefficient of variance, 이하 CV) 를구하였고, 각물질을반복 15회측정하여검사내 (withinrun, withinbatch) 변이계수를구하였다. 7) HIV 항원 / 항체동시검사의민감도및특이도분석민감도분석을위하여 HIV 감염으로진단받은환자 54명으로부터채혈한 110검체를대상으로민감도를분석하였다. 또, 특이도분석을위해선별검사목적으로 HIV1/2 항체검사를실시한건강증진센터및외래환자 804명의검체를이용하였으며, 기존의 HIV1/2 항체검사를두가지방법으로실시하여결과가음성인검체를대상으로다른검사결과와비교하였다. 8) Seroconverter panel을이용한검사상품화된 seroconverter panel (SEROHIV quality assurance reagent of HIV1 seroconverter panel, NABI, Miami, FL, USA) 을이용하여기존의 HIV1/2 항체검사및 p24 항원검사와 HIV 항원 / 항체동시검사의결과를비교하였다. 이 panel 은 HIV 감염환자로부터일정기간동안간헐적으로채취한 10개의검체로서 p24 항원검사와 HIV1/2 항체검사및 HIV1 항체 Western blot 검사결과가포함되어있었다. 결 과 1. HIV 항원 / 항체동시검사의정밀도 양성및음성대조물질에대한검사간정밀도 (betweenrun, withinbatch CV) 는각각 5.1%, 17.8% 이었으며, 검사내정밀도 (withinrun, withinbatch CV) 는각각 7.6%, 17.1% 이었다 (Table 1). Table 1. Precision of HIV DUO test Assay Sample Run Betweenrun Withinrun *optical density. Mean±SD Precision (O.D.*) (CV, %) Positive control 16 3.47±0.17 5.1 Negative control 16 0.05±0.008 17.8 Positive control 15 3.37±0.26 7.6 Negative control 15 0.04±0.008 17.1
후천성면역결핍증바이러스항원및항체동시선별검사의진단적유용성 333 2. HIV 항원 / 항체동시검사의민감도 HIV 감염자 54명의 110검체를대상으로 HIV1/2 항체검사및 HIV 항원 / 항체동시검사를실시한결과는모두 100% 에서양성이었다. 따라서, HIV 항원 / 항체동시검사의민감도는 100% 로계산되었다. 그러나 p24 항원검사결과는 17.6% 에서만양성이었다. 3. HIV 항원 / 항체동시검사의특이도 HIV1/2 항체검사결과가음성인 804명의검체로시행한 p24 항원검사는모두음성이었고, HIV 항원 / 항체동시검사결과는세검체 (0.4%) 에서양성이었다 (Table 2). 이세검체에대해, 중합효소연쇄반응검사및 Western blot 검사를실시한결과모두음성이었다 (Table 3). 이상의결과는반복검사에서도모두동일하게나타났다. 이중검체 1 및검체 2는건강증진센터를내원한사람들의혈청으로서다른질환은없는것으로생각되었다. 특히검체 2는여자 72세로서노령이었으나별다른특이소견은없는검체였다. 검체 3은정형외과외래환자의혈청으로서위양성으로판명되었다. 따라서, 이들세검체의 HIV 항원 / 항체동시검사의결과는위양성으로판정하였으며, 특이도는 99.6% 로계산되었다. 4. Seroconverter panel 검사결과 상품화된 seroconverter panel의특성은 Table 4와같이표시되어있었으며, 이 panel을이용하여 HIV1/2 항체검사, p24 항 Table 2. Comparison of the results to HIV DUO' test with anti HIV1/2 test antihiv1/2 test HIV DUO test Positive Negative Total Positive 110 0 110 Negative 3 801 804 Total 113 801 914 원검사, HIV 항원 / 항체동시검사를실제시행한결과는 Table 5와같았다. HIV 항원 / 항체동시검사는 p24 항원검사와마찬가지로조기에양성결과를얻을수있었으며, 이는 HIV1/2 항체검사에비하여 7일빠른것이었다. Table 4. One lot of panels composed of consecutive sera obtained from known HIVinfected patients (SEROHIV quality assurance reagent of HIV1 seroconverter panel, SVO02311) No. Day a b c d e f g h i j 1 3 8 10 15 21 25 28 35 39 antihiv1/2 test Western blot Geneticsystems* Abbott* Abbott* Ortho/Cambridge 0.094 0.178 3.100 4.809 5.505 4.819 6.628 9.670 12.094 12.990 0.125 0.133 0.251 0.464 1.004 1.698 1.839 2.204 1.884 2.826 4.169 3.289 1.098 0.751 0.364 0.324 0.342 0.271 0.284 0.262 No Bands No Bands p24 /, gp160 / p24, gp160 p24, gp160 p24, p51 /, p55 /, p66 /, gp160 p24, p51, p55 /, p66, gp160 p17 /, p24, gp41 /, p51, p55 /, p66, gp120 /, gp160 p17 /, p24, gp31 /, gp41, p51, p55 /, p66, gp120 /, gp160 p17 /, p24, gp 41 /, p51, p55 /, p66, gp120 /, gp160 *(test O.D./cutoff O.D.), if each value is larger than one, the result means positive. Table 5. Comparison of the results done by each test using sera from seroconverter panel No. Day HIV1 antigen test antihiv1/2 test p24 antigen test HIV DUO test O.D.* Result O.D.* Result O.D.* Result Table 3. Results of antihiv1/2 test and p24 antigen test among 3 samples showing falsely positive result in HIV DUO test Sample 1 Sample 2 Sample 3 Cutoff antihiv1/2 test p24 antigen test HIV DUO test O.D.* Result O.D.* Result O.D.* Result 0.059 0.036 0.042 0.342 0.038 0.026 0.031 0.102 0.36 3.54 0.40 0.35 a b c d e f g h i j 1 3 8 10 15 21 25 28 35 39 0.801 0.853 1.601 2.974 6.436 10.885 11.788 14.128 12.077 18.115 9.637 8.284 2.471 2.353 0.559 0.373 0.255 0.265 0.304 0.637 2.029 1.514 1.523 4.400 28.343 30.114 31.057 33.086 35.286 35.314 *each O.D. (optical density) value was the mean of duplicated test results. *(test O.D./cutoff O.D.), if each value is larger than one, the result means positive.
334 박광일 김현숙 김현옥외 2 인 고찰현재 HIV 감염은전세계적으로발생하고있어이에따른 HIV 감염의조기진단및치료의필요성이증가하고있으며, 현재까지는 HIV 항체를검출하는혈청학적인검사법들이 HIV 감염의진단시검사실에서가장보편적으로사용되는방법이다 [9]. 대부분의검사실에서 HIV 감염진단에는 HIV 항체 ELISA를선별검사로이용하고있고, 확진검사로 Western blot을이용하고있다. ELISA 법이선별검사로이용되고있는이유는민감도가높기때문이고, Western blot이확진검사로이용되는이유는높은특이도때문이다 [21]. 1985년처음개발된 ELISA 법을이용한 1세대 HIV 감염진단키트는사람의 T 림프구계열에서분리된바이러스에서추출된바이러스용해질항원을이용하여검사하는방법이었는데, 위양성이많고 HIV1의구조및발현단백의상대적인양에따라서각키트마다다른결과를보여주는등문제점이있었다. 1980년대후반, DNA재조합기술이발달하고합성항원이개발되면서재조합바이러스항원을생산할수있게되어민감도및특이도를획기적으로개선하고, 항인 IgM (antihuman IgM) 항체를추가하여혈청전환기에조기진단이가능한 HIV1 및 HIV2 특이항체모두를검출하는 2세대검사법이개발되었다. 그러나, 재조합단백을이용하기때문에유럽과아프리카의 HIV1 subtype O 의진단이어려우며, 여전히낮은민감도및특이도등의문제가있었다. 지속적인연구개발의결과로현재사용하는 3세대검사법이개발되었는데, 폴리스티렌 bead에재조합 HIV1 env (envelop) 과 gag (core 단백 ) 및 HIV2 env 단백을부착하여 bead항원 항체복합체를검출하였고 IgG 및 IgM 항체를동시에검출하도록하였으며, 특이도및민감도가각각 96.9100% 및 89.9100% 에이르게되었다 [21]. 그러나, 기존의 HIV1 및 HIV2 항체검사로는감염후항체가생성될때까지의약 48주정도사이의기간에는대체로항체가검출되지않으며 [9], 바이러스혈증은높은농도로나타나고전염력도높지만이시기에 HIV 감염여부를확인할수없다는문제점이있다 [11]. 또한, 기존의 HIV 감염선별검사는자가항체 ( 항핵항체, 항미토콘드리아항체등 ), 불활화된혈청, 검체의빈번한냉동및해동, 심한간질환, 면역글로불린치료후, 최근의예방접종경력, 신장이식, StevensJohnson 증후군, 알코올성간염, 다중임신, EBV (EpsteinBarr virus) 감염, 일부악성종양등으로인한위양성도문제가되고있다 [10]. 그러나, HIV 감염은아직까지완전한치료법이개발되지못한무서운질병으로서조기선별검사목적으로개발된시약들마다자체민감도를높이기위한많은노력이이루어져왔으며, 현재도이루어지고있다. 즉, 지금까지발표된논문상에서는 HIV1 및 HIV2 항체가대개는감염 48주후에검출된다고알려져있으나, 현재민감도가개선된시약들은 23주후면양성반응을보이도록고안된것도있다 [22]. 한편 HIV 감염의조기진단목적으로개발된 p24 항원검사법은 HIV 감염초기의바이러스혈증이명백한시기에는높은양성률을보이나, 항체가가증가하면서바이러스혈증이검사의민감도이하로감소한이후에는 HIV 감염여부를확인할수없다 [23]. 따라서, 기존의 HIV1/2 항체검사를완전히대체할수있는검사법이라기보다는보완적으로이용할수있는검사라고할수있겠다. 따라서, 이러한기존검사법의문제점을보완하기위하여최근 HIV 항원및항체를동시에선별검사할수있는방법이개발되고있다. 그중면역복합체전이효소면역법으로 HIV1 항체및 p24 항원에대한 IgG를이용하는방법은재조합 HIV1 항원 p17, p24와역전사효소 (reverse transcriptase, RT) 에대한 IgG 를이용하는것으로 p17과 RT가포함되어기존의 western blot 에비해더민감하고특이적이라고하였다. 즉, p24 항원의최소검출한계도 0.24 pg/ml로기존방법의 1050 pg/ml에비해우수하다고하였다 [20]. 본연구에서 HIV 항원 / 항체동시검사는본대상군에서 HIV1/2 항체검사법과같은 100% 의민감도를보였으나, 우리나라의 HIV 감염유병률이매우낮아대상군이다양하지못하여정확히민감도를판단하기어렵다는점을고려하여 seroconverter panel을이용한검사를추가로실시하였다. 실험결과 p24 항원검사와마찬가지로 HIV 감염을조기에진단할수있었다. 따라서, 전세계적으로 HIV 감염이문제가되고있는현재에있어조기진단이가능하고민감도도우수한 HIV 항원 / 항체동시검사가앞으로선별검사로확대이용되는것은 HIV 감염의진단및치료에새로운진전이며중요한발전으로생각된다. 그러나, 실제환자에서조기진단율에얼마나기여할수있는지를밝히는것이중요하며, 판정보류의 indeterminate 결과를줄이고신생아에서의감염진단등비용절감문제측면까지고려해야할것이다. 특이도에있어서는기존의 ELISA 법에의한 HIV1/2 항체검사법이 98.9% 정도의특이도를보인다고알려져있는데 [10], 본연구에서 HIV 항원 / 항체동시검사의특이도는 99.6% 로서더우수하였다. 그러나, 0.4% 의위양성을보여향후보다많은환자를대상으로연구하여확인해야할것으로생각되었다. 또한, 본연구에포함되지는않았지만, 현지미국등에서수혈전검사로시행되는 HIV1 및 HIV2 항체검사와 p24 항원검사를대체하여본 HIV 항원 / 항체동시검사를이용할수있을것인데, 이경우에는두검사를별도로각각실시하는것에비해경제적이며검사실의업무량을줄이고검사효율의향상도기대할수있을것으로생각된다. HIV 항원 / 항체동시검사법은기존의항원및항체검사를복합적으로한번에동시시행함으로써 window period를줄여조기에진단할수있는시기의범위를넓히고, HIV 감염이의심스러운환자들의조기진단외에미국등에서현재수혈전검사로시행되고있는 HIV1 및 HIV2 항체검사와 p24 항원검사를대체하여보다경제적으로 HIV 감염을선별할수있을것으로생각된
후천성면역결핍증바이러스항원및항체동시선별검사의진단적유용성 335 다. 또한, 특이도를높여불필요한재검을줄일수있는방향으로의개선도필요할것으로생각되었다. 요약배경 : 후천성면역결핍증 (acquired immune deficiency syndrome, AIDS) 의원인인 HIV (human immunodeficiency virus) 감염의진단을위한선별검사로는흔히 HIV1/2 항체검사가사용되고있다. 최근 p24 항원과 HIV1 및 HIV2 항체를동시에선별검사할수있는혈청학적인 ELISA 법이개발되어본연구에서는진단적측면에서의이검사의효용성에대해서알아보고자하였다. 방법 : 1999년 7월부터 8월사이에 804명의검체를대상으로특이도를분석하였고, HIV 감염으로진단받은환자 54명의혈청 110검체를대상으로민감도를분석하였다. 또한, 감염후혈청변환기의조기진단여부를확인하기위해 seroconverter panel (SEROHIV panel, NABI, Miami, FL, USA) 을이용하였다. Genedia HIV1/2 ELISA 3.0 ( 녹십자, 서울, 한국 ) 및 Enzygnost AntiHIV1/2 Plus (Behringwerke, Marburg, Germany) 로 HIV1/2 항체검사를실시하였고, Vironostika HIV1 antigen Microelisa system (Organon Teknika, Boseind, Netherlands) 을이용하여 p24 항원을검사하였으며, HIV 항원 / 항체동시검사는 VIDAS HIV DUO (biomerieux, Lyon, France) 로실시하였다. 각검사결과가일치하지않는경우에는중합효소연쇄반응을이용한 HIV RNA 검사와 HIV 항체 Western blot 검사를실시하여확인하였다. 결과 : HIV 항원및항체동시선별검사는 100% 의민감도와 99.6% 의특이도를보였으며, 패널을이용한검사결과는기존의항 HIV1/2 효소면역법에비해조기진단할수있다는가능성을보여주었다. 결론 : HIV 항원및항체동시선별검사는조기진단이가능하며기존의 HIV1/2 항체검사와 p24 항원검사를대체할수있는유용한검사로생각되었다. 참고문헌 1. Centers for Disease Control and Prevention: Pneumocystis pneumonialos Angeles. Morbid Mortal Wkly Rep 1981; 30: 2502. 2. Centers for Disease Control and Prevention: Kaposi's sarcoma and Pneumocystis pneumonia among homosexual mennew York city and California. Morbidity and Mortality Weekly Report 1981; 30: 3058. 3. Masur H, Michelis MA, Greene JB, Onorato I, Stouwe RA, Holzman RS, et al. An outbreak of communityacquired Pneumocystis carinii pneumonia: initial manifestation of cellular immune dysfunction. N Engl J Med 1981; 305: 14318. 4. BarreSinoussi F, Chermann JC, Rey F, Nugeyre MT, Chamaret S, Gruest J, et al. Isolation of a Tlymphotropic retrovirus from a patient at risk for acquired immune deficiency syndrome (AIDS). Science 1983; 220: 86871. 5. Popovic M, Sarngadharan MG, Read E, Gallo RC. Detection, isolation and continuous production of cytopathic retroviruses (HTLVIII) from patients with AIDS and preaids. Science 1984; 224: 497500. 6. Tindall B and Cooper DA. Primary HIV infection. Host responses and intervention strategies. AIDS 1991; 5: 114. 7. Levy JA. Pathogenesis of human immunodeficiency virus infection. Microbiol Rev 1993; 57: 183289. 8., 1999; 4846: 16. 9. Fauci AS and Lane HC. Human immunodeficiency virus (HIV) disease: AIDS and related disorders. In Fauci AS, Braunwald E, et al. eds. Harrison's principles of internal medicine. 14th ed. New York: McGrawHill Companies, Inc., 1998: 1791856. 10. Kelen GD, Shahan JB, Quinn TC. Emergency departmentbased HIV screening and counseling: experience with rapid and standard serologic testing. Ann Emerg Med 1999; 33: 14755. 11. Allain JP, Laurian Y, Paul DA, Verroust F, Leuther M, Gazengel C, et al. Longterm evaluation of HIV antigen and antibodies to p24 and gp41 in patients with haemophilia. N Engl J Med 1987; 317: 111421. 12. Allain JP, Paul DA, Laurian Y, Senn D. Serological markers in early stages of human immunodeficiency virus infection in haemophiliacs. Lancet 1986; 2: 12336. 13. Smith RS, Naso RB, Rosen J, Whalley A, Hom YL, Hoey K, et al. Antibody to a synthetic oligopeptide in subjects at risk for human immunodeficiency virus infection. J Clin Microbiol 1987; 25: 1498504. 14. Von Sydow M, Gaines H, Sonnerborg A, Forsgren M, Pehrson PO, Strannegard O. Antigen detection in primary HIV infection. Br J Med 1988; 296: 23840. 15. Pantaleo G, Graziosi C, Fauci AS. Mechanisms of disease: the immunopathogenesis of human immunodeficiency virus infection. N Engl J Med 1993; 328: 32735. 16. Wei X, Ghosh SK, Taylor EM, Johnson VA, Emini EA, Deutsch P, et al. Viral dynamics in human immunodeficiency virus type 1 infection. Nature 1995; 373: 11722. 17. Clavel F, Guyader M, Guetard D, Salle M, Montagnier L, Alizon M. Molecular cloning and polymorphism of the human immune deficiency virus type 2. Nature 1986; 324: 6915. 18. Leys DR, Vanderborght B, Haesevelde MV, Heyndrickx L, van Geel A, Wauters C, et al. Isolation and partial characterization of an unusual human immunodeficiency retrovirus from two persons of westcentral African origin. J Virol 1999; 64: 120716. 19. Lane HC. Human immunodeficiency virus. In Rose NR, de Macarlo EC,
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