Park et al. 쌀뜨물은가정뿐만아니라, 쌀가공공장의세정과정에서대량의부산물로파생되고있다. 그부산물에는쌀이나쌀겨의부스러기를많이함유하고있다. 쌀뜨물은탄수화물, 지질, 단백질및비타민등을함유하고있다 (Kim et al., 1990). 탄수화물의대부분은전분이며, 지질의지방산

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민서 형
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1 pissn eissn J. Milk Sci. Biotechnol. 2017;35(1): ARTICLE 계분유래미생물에대한 Lactobacillus sakei 의항균활성 박민기 1 정종성 2 김완섭 3* 1 한경대학교대학원동물 낙농생명과학전공, 2 라이스텍, 3 한경대학교동물생명환경과학과 Antibacterial Activity of Lactobacillus sakei on Microorganisms isolated from Chicken Manure Min-Ki Park 1, Jong-Seong Jeong 2, and Woan-Sub Kim 3* 1 Major in Animal Dairy Life Science, Graduate School of Future Convergence Technology, Hankyong National University, Anseong, Korea 2 RiceTeck Inc., Anseong, Korea 3 Dept. of Animal Life and Enviromental Science, Hankyong National University, Anseong, Korea Abstract This study was conducted to find means to reduce the foul smell emitted from chicken manure. Rice water was inoculated with Lactobacillus sakei and then examined to determine the bacterial survival rates during storage, and whether fermentation had occurred. Rice water was an excellent medium for the growth of L sakei, given that a viable cell count was maintained for 15 days during storage at 4 and decreased slightly thereafter. Furthermore, microorganisms in chicken manure were separated and 14 species were identified. The antibacterial activity of an L. sakei supernatant against the identified microorganisms was measured using the agar diffusion method. The growth of 11 out of 14 species was inhibited, and only Corynebacterium variabile, Enterococcus faecium, and Raoultella ornithinolytica survived. Rice water was fermented by inoculation with L. sakei and mixed with chicken manure, and the quantities of ammonia, ethyl mercaptan, and hydrogen sulfide were measured after 48 hours. Emissions of ammonia and ethyl mercaptan were reduced significantly. Keywords lactic acid bacteria, probiotics, antibacterial activity 서론 Received: February 14, 2017 Revised: March 22, 2017 Accepted: March 22, 2017 *Corresponding author : Woan-Sub Kim, Dept. of Animal Life and Enviromental Science, Hankyong National University, Anseong, Korea. Tel : , kimws@hknu.ac.kr 물은인체의약 70% 이상을차지하며, 수분의섭취는생명과도직결되어있다. 이러한물의소중함에도불구하고, 최근물의오염은심각하다고할수있다. 물을더럽히는가장큰오염원은생활하수 (24,028 천m 3 / 일 ), 산업폐수 (2,511 천m 3 / 일 ), 그리고축산폐수 (197천 m 3 / 일 ) 등으로나타나고있다 (Park et al., 2002). 그중, 생활하수의주요오염원은세제, 음식물및쌀뜨물등이원인으로있다 (Cho et al., 2004). 우리나라국민들의주식인밥을지을때발생하는쌀뜨물이, 하천수질오염에상당부분의부하량과물소비를가지고있다. Park 등 (2002) 에의하면국내의쌀소비량을기준으로쌀을씻는데년간 8,500 만톤정도의물을소비하는것으로추정되며, 이를처리하기위한비용으로약 200억원이소비된다고추정하였다. This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution Non-Commercial License ( licenses/by-nc/3.0) which permits unrestricted non-commercial use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited. Copyright Korean Society of Milk Science and Biotechnology. All rights reserved. 25

2 Park et al. 쌀뜨물은가정뿐만아니라, 쌀가공공장의세정과정에서대량의부산물로파생되고있다. 그부산물에는쌀이나쌀겨의부스러기를많이함유하고있다. 쌀뜨물은탄수화물, 지질, 단백질및비타민등을함유하고있다 (Kim et al., 1990). 탄수화물의대부분은전분이며, 지질의지방산조성은올레인산이가장많고, 리놀산, 팔미틴산순으로함유되어있다 (Lee and Lee, 2011). Kim 등 (2011) 은쌀뜨물의발효전과후, 일반성분변화를조사한결과를보면, 섬유질과탄수화물함량은발효전 93.8% 에서발효후 44.8% 로크게감소하였으며, 발효후조회분, 조단백질, 그리고조지방함량은각각 36.6%, 16.4%, 그리고 18.8% 으로증가하였다고보고하였다. 쌀뜨물은유기물이많이함유되어있기때문에그대로하천으로유입시킬경우, 하천의산소를고갈시키는원인이되고, 부영양화의원인이될수있다. 유산균은인간이예로부터식품발효에이용하여온미생물로있다. 유산균은인간의장내에서식하면서정균작용을하고, 당류를발효해서유산을생성해유해미생물의생장을억제한다 (Schrezenmeir and de Vrese, 2001). 유산균은당을이용한유산생성을통하여식품의 ph를낮춤으로써, 식품이저장성을가지게하는데중요한역할을한다 (Lim, 2012). 더욱이, 건강지향적인기능성식품을선호하는세계적인추세와함께프로바이오틱스 (probiotics) 로서유산균의역할이새롭게대두되고있다. 이러한유산균의프로바이오틱활성으로서는장내에서의해로운미생물을견제할수있는정장작용, 설사방지, 항암작용, 콜레스테롤제거능력, 면역활성능력등과같은효과를예로들수있다 (Yoshitaka et al., 2006). 쌀뜨물은영양분을어느정도함유하고있기때문에자원재활용과환경오염방지등의이용가능성이매우높고유용하게이용될것으로사료된다. 따라서본연구는닭의분뇨로부터악취저감방안으로, 쌀뜨물에 Lactobacillus sakei 의배양조건과저장중안정성을검토하였다. 그리고닭분뇨로부터미생물을분리 동정하고, 이들미생물에대한 L. sakei 의항균능력을검토하였다. 또한 L. sakei 함유쌀뜨물발효액이닭분뇨의악취를저감시키는지에대하여연구를수행하였다. 재료및방법 1. 배지및생균수측정 Lactobacillus (L.) sakei 의활성용배양배지는 De Man, Rogosa and Sharpe (MRS) broth(difco, USA) 를사용하였다. 닭의분변으로부터분리된 14종의균은각각 SPC agar(difco, USA) 와 LB agar (Difco, USA) 에배양하여실험에이용하였다. 멸균희석액은 peptone(difco, USA) 을이용하였다. 쌀뜨물은 라이스텍 (Anseong, Korea) 으로부터공급받아시험에이용하였다. ph 측정은 ph meter(mettler toleda, Switzerland) 를이용하여측정하였다. 쌀뜨물에 L. sakei 를접종하고, 배양및저장중생균수의측정은채취된시료를멸균희석액 (0.1% peptone) 으로 10진희석법에따라희석한후, MRS agar에서 37 항온기에서호기배양하였다. 2. 닭의분변으로부터미생물의분리, 배양및동정닭의분뇨로부터미생물의분리는인근양계장으로부터신선한닭의분뇨를 peptone 수에 10진희석법에따라희석후, SPC agar 와 LB agar에접종하여 37 와 25 온도에서각각호기와혐기상태로배양하였다. 각배지에서생장한집락들중색깔과모양이차이가나는다양한집락을선발한다음, 동일배지를이용하여순수분리하였다. 순수분리한균주들은각각 SPC agar와 LB agar 에접종하여 37 와 25 온도에서배양하였다. 미생물의동정은수탁업체 (Solgent) 에의뢰하여수행하였다. Database 에등록된표준균주 (type strain) 와가장높은상동성을나타내는분류군을해당염기서열에해당하는박테리아로결정하였다. 3. L. sakei 의배양액회수 L. sakei 는쌀뜨물에접종후, 37 항온기에서 24시간호기배양하였다. 배양이끝난배양액은얼음위에서 20분간정치후, 원심분리기 (Hanil, Korea) 에서 4,000 rpm/20 min/4 로원심분리하여상징액을회수하였다. 상징액은 0.2 μm와 0.4 μm Syringe filter(advantec, Japan) 를이용하여여과하였다. 그리고여과된상징액은 -20 에보관하면서, 닭의분뇨로부터분리된미생물의생육억제실험에이용하였다. 4. 항균활성측정닭의분뇨로부터얻어진미생물에대한 L. sakei 상징액의생육억제능력은 agar diffusion 법과 96-well plate 법을이용하여확인하였다. Agar diffusion 법은각각의 20 ml LB agar(0.7%) 를 120 에서 20분멸균하였고, 배지온도를 50 까지냉각한후, 분리된분변미생물을각각 1% 접종하여 petridish(spl LifeSci. Co. Ltd., Korea) 에부어굳혔다. 각각의균이접종된배지표면에 L. sakei 로부터얻어진상징액을 100%, 50%, 25%, 그리고 12.5% 의농도로멸균된 paper disc에흡착시켜, 37 항온기에배양하면서항균환을측정하였다. 5. 유산균배양쌀뜨물의악취저감효과닭의분뇨에대한 L. sakei 에의해발효된쌀뜨물의악취저감실험은인근양계장으로부터닭의분뇨를수거하여실험실에서실시하 26 J. Milk Sci. Biotechnol. Vol. 35, No. 1

Lactobacillus sakei 의항균활성 였다. 닭의분뇨는각각 100 g씩준비하고, 쌀뜨물에배양된 L. sakei 함유배양액을분뇨와혼합한후, 3 L의용기에넣어뚜껑은알루미늄호일로외부로부터곰팡이가침입하지않게덮은후, 호기상태에서 24시간배양하였다. 시험구는 L. sakei 함유배양액이혼합하지않은대조군과닭분뇨에대하여 L.

4 HH, Japan), 그리고에틸메갑탄검지관 (Gastec No. 72, Japan) 으로발생량을측정하였다. 결과및고찰 1. 쌀뜨물에있어서 L. sakei 의생장과저온저장중생존능력열처리된쌀뜨물의 ph는 6.98 로측정되었으며, L. sakei 가생장하기에적합한 ph 조건을나타내었다. 살균된쌀뜨물에 L.

3 Lactobacillus sakei 의항균활성 였다. 닭의분뇨는각각 100 g씩준비하고, 쌀뜨물에배양된 L. sakei 함유배양액을분뇨와혼합한후, 3 L의용기에넣어뚜껑은알루미늄호일로외부로부터곰팡이가침입하지않게덮은후, 호기상태에서 24시간배양하였다. 시험구는 L. sakei 함유배양액이혼합하지않은대조군과닭분뇨에대하여 L. sakei 함유배양액을 1:1(w/w), 또는 1:0.5(w/w) 의비율로혼합한시험구로부터암모니아, 황화수소및에틸메캅탄가스발생량을측정하였다. 24시간후, 용기내포집된가스들은가스검지기 (GV-100S; Gastec, Co., Korea) 를이용하여암모니아검지관 (Gastec No. 3 L, Japan), 황화수소검지관 (Gastec No. 4 HH, Japan), 그리고에틸메갑탄검지관 (Gastec No. 72, Japan) 으로발생량을측정하였다. 결과및고찰 1. 쌀뜨물에있어서 L. sakei 의생장과저온저장중생존능력열처리된쌀뜨물의 ph는 6.98 로측정되었으며, L. sakei 가생장하기에적합한 ph 조건을나타내었다. 살균된쌀뜨물에 L. sakei 를접종후, 배양 12시간과 24시간에생균수를측정한결과는 Fig. 1과같다. 배양 12시간에 L. sakei 의생균수는약 10.6 log CFU/mL 에도달하였으며, 배양 24시간에는약 11.3 log CFU/mL 에도달하였다. 따라서쌀뜨물은 L. sakei 의생장에있어서좋은배지로확인되었다. 쌀뜨물에 L. sakei 를접종하고배양 24시간에배양을중지한후, 4 냉장보관하면서생균수를측정한결과는 Fig. 2와같다. 배양종료후 L. sakei 의생균수는약 log CFU/mL 이었으며, 저 Fig. 2. Changes of viable cell counts of Lactobacillus sakei in rice water during the storage for 4. 장 3 일후생균수는 11.3 log CFU/mL 이었으며, 저장 6 일후는 11.2 log CFU/mL, 저장 9 일후는 log CFU/mL, 저장 12 일은 log CFU/mL 로저장초기의생균수를유지하였다. 그 러나저장 15 일부터생균수는 log CFU/mL, 저장 20 일후 에는 9.68 log CFU/mL 를나타내어저장 15 일부터생균수가감 소하는것이확인되었다. 2. 닭의분뇨로부터미생물분리 닭의분뇨로부터미생물의분리는신선한닭의분뇨를 peptone 수 에희석후, SPC agar 와 LB agar 에접종하여 37 와 25 온도에 서각각호기와혐기상태로배양하였다. 미생물의분리는먼저배 양된각각의 plate 상콜로니의형태에따라선발한후, Gram stain 을통하여균의형태에따라각각 14 여개의콜로니를선택하였다. 14 종의계분미생물의분리 동정결과는 Table 1 과같다. 즉, 닭 의분뇨에함유된미생물은 Klebsiella oxytoca, Salmonella bongori, Escherichia coli, Enterococcus faecium, Corynebacterium variabile, Arthrobacter protophormiae, Raoultella ornithinolytica, Enterobacter ludwigii, Arthrobacter mysorens, Leclercia adecarboxylata, Escherichia hermannii, Brevibacterium epidermidis, Enterobacter sp. 그리고 Microbacterium profundi 로동정되 었다. Fig. 1. Changes of viable cell counts during the growth of Lactobacillus sakei in rice water. 3. 닭의분뇨유래미생물에대한 L. sakei 배양액의항균효과닭의분뇨로부터얻어진 14종의미생물에대한 L. sakei 의상징액 100%, 50%, 25%, 그리고 12.5% 의농도로멸균된 paper disc에흡착시켜 37 incubator 에배양하면서생육억제능력을 agar J. Milk Sci. Biotechnol. Vol. 35, No. 1 27

4 Park et al. Table 1. The microorganism isolated from the feces of chicken NO. Strain 1 Arthrobacter mysorens 2 Arthrobacter protophormiae 3 Brevibacterium epidermidis 4 Corynebacterium variabile 5 Enterobacter ludwigii 6 Enterobacter sp. 7 Enterococcus faecium 8 Escherichia coli 9 Escherichia hermannii 10 Klebsiella oxytoca 11 Leclercia adecarboxylata 12 Microbacterium profundi 13 Raoultella ornithinolytica 14 Salmonella bongori diffusion 법으로확인한결과는 Fig. 3과같다. L. sakei 의상징액은 100% 와 50% 농도에서현저한항균활성을나타낸균주는 Arthrobacter mysorens, Arthrobacter protophormiae, Brevibacterium epidermidis, Enterobacter ludwigii, Enterobacter sp., Escherichia coli, Escherichia hermannii, Klebsiella oxytoca, Leclercia adecarboxylata, Microbacterium profundi, 그리고 Salmonella bongori 로확인되었다. 그러나 Corynebacterium variabile, Enterococcus faecium 및 Raoultella ornithinolytica 는 L. sakei 상징액의어떠한농도에대해서도생육억제활성은나타나지않았다. 이러한결과는 96 well plate 법에서도같은결과는나타내었다 (data not shown). 4. 배양쌀뜨물의악취저감효과 L. sakei 함유쌀뜨물발효액을닭의분뇨와각각 1:1(w/w), 1:0.5 (w/w) 의비율로혼합하여암모니아, 황화수소및에틸메캅탄가스발생억제효과를측정한결과는 Fig. 4와같다. Fig. 4-A는암모니아발생량을측정한값으로, 닭의분뇨만처리된대조구에서는 14 ppm/100 ml의함량이발생하였으며, L. sakei 함유쌀뜨물발효액을첨가한두시험구에서는암모니아가스가발생하지않았다. 그리고 Fig. 4-B는에틸메캅탄가스발생량을측정한값을나타내었다. 닭의분뇨만처리된대조구에서는 120 ppm Fig. 3. Antibacterial activity against microorganism in feces of chicken using the supernatant cultured for 24 hours of Lactobacillus sakei. 1, Athrobacter mysorens; 2, Arthrobacter protophormiae; 3, Brevibacterium epidermidis; 4, Corynebacterium variabile; 5, Enterobacter ludwigii; 6, Enterobacter sp.; 7, Enterococcus faecium; 8, Escherichia coli; 9, Escherichia hermannii; 10, Klesiella oxytoca; 11, Leclercia adecarboxylata; 12, Microbacterium profundi; 13, Raoultella ornithinolytica; 14, Salmonella bongori. A, 100% supernatant; B, 50% supernatant; C, 25% supernatant; D, 12.5% supernatant of L. sakei. 28 J. Milk Sci. Biotechnol. Vol. 35, No. 1

Lactobacillus sakei 의항균활성 Fig. 4. Total emission of ammonia (A), ethylmercaptan (B), hydrogen sulfide (C) in chicken feces by Lactobacillus sakei treatments.

5 Lactobacillus sakei 의항균활성 Fig. 4. Total emission of ammonia (A), ethylmercaptan (B), hydrogen sulfide (C) in chicken feces by Lactobacillus sakei treatments. 1, chicken feces; 2, chicken feces + 1/2 Lactobacillus sakei; 3, chicken feces + Lactobacillus sakei. 이상 /50 ml 의가스함량이발생하였다. 또한 L. sakei 함유쌀뜨물 발효액과닭의분뇨를 1:0.5(w/w) 혼합한처리구는 60 ppm/50 ml 로에틸메캅탄가스발생량이감소하였으며, 동량혼합한처리 구는 29 ppm/50 ml 로대조구에비해현저히에틸메캅탄가스발 생량이감소된것을확인하였다. 한편, Fig. 4-C 는황화수소발생 량을측정한값을나타내었다. 대조구를포함한모든시험구에서 황화수소의발생량은 0.1% 이하로발생량이모두적었다. 최근들어진행되어온가축사육의밀집화와밀폐화경향은대기오 염문제특히, 농가주변에서빈번하게제기되는악취민원을야기 하고있다. 우리나라는 2005 년부터시행된악취방지법에서악취관 리대상을특정시설에서지역으로확대하고, 악취배출기준및관리 를강화함에따라, 축산농가에서는양계업의지속성과생산성을유 지하면서수익성면에서저렴하고간편한악취절감노력과친환경적 인가축분뇨처리기술의개발이시급히요구되고있다 (Ministry of Environment, 2005). 황화수소, 암모니아, 메르캅탄, 저급지방산등과같은악취유발물 질은다양한산업분야에서배출되어주변환경에많은영향을미치고있다. 특히이러한물질은분뇨처리장, 하 폐수처리장, 하수중계펌프장, 매립지, 퇴비화시설등환경기초시설에서도다량으로배출된다 (Cho et al., 1992; Park et al., 1992; Park et al., 1993; Park, 2003). 분뇨에서발생하는 NH 3 가스는축산농가뿐만아니라, 주변마을에까지많은피해를주고있다. 계사내에서방출된 NH 3 가스는지구온난화의원인물질일뿐만아니라, 비를통해육지에도달하면토양의산성화및하천의부영양화를초래하는물질이기도하다 (Van breeman, et al., 1982; Buijsman and Erisman, 1988). 황화수소 (H 2S) 는유독성가스이며, 공기보다무거운것이특징이고, 낮은수준에서도달걀썩는냄새가발생하여두통, 어지러움, 메스꺼움등을유발하는주요원인이다. 축산환경을개선하기위한다양한악취저감제를이용한연구가시도되었다. 양돈업에있어서분뇨의주요악취물질인 NH 3 가스와 H 2S 가스를제거하기위한방법으로미생물제제첨가가가장효과적이라고하였다 (Jang et al., 2004; Kang et al., 2006). Kim 등 (2001) 은미생물제제발효사료급여가육성돈및비육돈의생산성과분변내악취감소에관한연구에서미생물제제를이용한발효사료를 0.5 1% 첨가할경우일당증체량이향상되었고, 축사내 NH 3 가스와 H 2S 가스가감소되었다고보고하였다. 쌀뜨물의발효액은친환경소재로서소비자들에게커다란호응을받고있다. 이들미생물들은여러환경에서다양한기능을수행하며, 서로공존, 공생하면서상승효과를일으켜부패미생물의증식억제및부패악취를방지하고, 오수처리에서도정화효과를보이는것으로보고되어있다 (Cho et al., 2004; Kim et al., 2011). 그리고 Hong 등 (2009) 은트리메틸아민에의한이취를최소화할목적으로쌀뜨물의이용을연구하였는데, 쌀뜨물의농도가높을수록이취가현저히감소하였다고보고하였다. 또한, Ha 등 (2007) 은오염된행주에대한일반적인세척및소독제들과의살균력을비교실험한결과, 쌀뜨물발효액은 Escherichia coli와 Salmonella typhimurium 에대해서항균효과를나타내었다고보고하였다. 따라서쌀뜨물에배양능력이높고생존능력이높은 L. sakei 는축산분야악취저감에매우효과적이라고할수있다. 요약 본연구는닭의분뇨로부터악취저감방안으로, 쌀뜨물에 L. sakei 의배양조건과저장중안정성을검토하였다. 그리고닭분뇨로부터미생물을분리 동정하고, 이들미생물에대한 L. sakei의항균능력을검토하였다. 또한 L. sakei 함유쌀뜨물발효액이닭분뇨의악취를저감시키는지에대하여연구를수행하였다. 연구결과, 쌀뜨 J. Milk Sci. Biotechnol. Vol. 35, No. 1 29

6 Park et al. 물은 L. sakeiv 의생장에좋은영양소로확인되었으며, 저장기간중생존력도강한것으로증명되었다. 또한 L. sakei 는닭의분뇨로부터분리된악취유발미생물의생장또한억제하는것으로나타났다. 이러한항균작용또는정균작용으로사회적으로문제가되는축산분뇨에대하여, L. sakei 를이용해배양된쌀뜨물은악취유발을저감할수있는것으로사료된다. 더욱이쌀뜨물은가치가인정되지않아그대로하수도로버리게되어환경오염을유발원으로인식되었는데, 유산균발효에의한악취제거, 기능성사료의이용등산업적으로많은응용이적용될것으로기대된다. 감사의글 본연구는 2015년도산업통상자원부생태산업단지구축사업 ( 한국산업단지공단 2단계 5차년도 EIP세부사업 ) 지원으로수행되었으며, 지원에감사드립니다. References 1. Buijsman, E. and Erisman, J. W Wet deposition of ammonium in Europe. J. Atmos. Chem. 6: Cho, J. I., Jung, H. J., Ha, S. D. and Kim, K. S Growth patterns of lactic acid bacteria during fermentation of radish with rice water and rice bran. Korean J. Food Sci. Technol. 36: Cho, K. S., Hirai, M. and Shoda, M Enhanced removal efficiency of malodorous gases in a pilot-scale peat biofilter inoculated with Thiobacillus thioparus DW44. J. Ferment. Bioeng. 73: Ha, J. H., Lee, Y. S., Lee, S. J., Hwang, S. S. and Ha, S. D Antibacterial effect of fermented rice water against food-borne bacteria in kitchen towel. J. Food Hygiene and Safety. 22: Hong, E. J., Son, H. J., Kang, J. H. and Noh, B. S Analysis of binding trimethylamine with ricewashed solution using electronic nose based on mass spectrometer. Korean J. Food Sci. Technol. 41: Jang, Y. K., Song, K. P., Kim, H. J. and Yoo, Y. H An investigation on the odor characterisitics of livestock facilities. EIA. 13: Kang, K. H., Kim, S. K., Hu, C. G. and Lee, M. G The effect of reduction of contaminants and odor according to the additives in the anaerobic maturation process of piggery slurry. J. Environ. Sci. 15: Kim, Y. B., Kim, D. M. and Kim, C. S Milling characteristics and qualities of Korean rice. J. Food Sci. Technol. 22: , Kim, J. H., Kim, C. H. and Ko, Y. D Effect of dietary supplementation of fermented feed (Bio-) on performance of finishing pigs and fecal ammonia gas emission. Kor. J. Anim. Sci. Technol. 43: Kim, M. J., Park, S. S., Kim, D. H. and Kim, K. S Proximate compositions changed before and after fermentation of rice spent water. J. Food Hygiene and Safety. 26: Lee, S. J. and Lee, G. G Nutrition of rice and cooked rice. Food Industry and Nutrition. 16: Lim, S. M Synbiotic potential of yoghurt manufactured with probiotic lactic acid bacteria isolated from mustard leaf kimchi and prebiotic fructooligosaccharide. Kor. J. Microbiol. Biotechnol. 40: Ministry of Environment Offensive Odor Control Law. 14. Park, S. J A study on odor concentration of malodorous gases emitted from sewage treatment plants using air dilution sensory test. Kor. J. odor Res. Eng. 2: Park, S. J., Oh, H. J. and Seishi, O The characteristic of odor emitted from sewage and nightsoil treatment plants in Korea. J. Odor Res. Eng. 24: Park, S. J., Cho, K. S., Hirai, M. and Shoda, M Removability of malodorous gases from a night soil treatment plant by a pilot-scale peat biofilter inoculated with Thiobacillus thioparus DW44. J. ferment. Bioeng. 76: Park, Y. S., Shin, Y. S., Hong, J. M. and Kim, M. S Environmental assessment and influence of rice water on the water quality. Korea Institute for Environmental & Social Policies. Seoul. Korea. pp SAS. SAS User`s Guide Statistical Analysis System Institute. Cary, NC, USA. 19. Schrezenmeir, J. and de Vrese, M Probiotic, prebiotics, and synbiotics. Am. J. Clin. Nutr. 73(Suppl): 30 J. Milk Sci. Biotechnol. Vol. 35, No. 1

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1. 2010 6 1, 2 4 Ⅰ,Ⅱ 2013,, -,. - Human Cell.. -,., Biosand Filter(BSF) - BSF Main Filtering (Biofilm) BSF, BSF ( ),. -, BSF BSF. - BSF BSF ( ),,. BSF -,,,. - BSF,. -. -. -. - 2. BSF -, rrna, BSF. 2. -