GCMS_QualFamiliarization.book

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1 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 정성분석 GC/MS 기초설명서

2 공지사항 Agilent Technologies, Inc 미국및국제저작권법에의거하여 Agilent Technologies, Inc. 의사전서면동의없이는어떠한형식또는수단 ( 전자저장및검색또는다른언어로번역함 ) 으로도이설명서의전부또는일부를복제할수없습니다. 설명서부품번호 G 판 개정 A, 2012 년 11 월미국에서인쇄 Agilent Technologies, Inc Stevens Creek Blvd. Santa Clara, CA USA Microsoft, Windows 7 및 Excel 은미국및 / 또는기타국가에서 Microsoft Corporation 의미국등록상표입니다. 소프트웨어버전 이설명서는대체될때까지 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - 정성분석프로그램의 B 이상의버전에유효합니다. 보증이문서에포함된자료는 " 있는그대로 " 제공되며추후개정판에서사전공지없이변경될수있습니다. 또한 Agilent 는관련법률이허용하는범위에묵시적인상품성보증및특정목적에대한적합성을포함하되이에제한되지않고이설명서와여기에포함된모든정보에관한명시적또는묵적인모든보증을부인합니다. Agilent 는이설명서또는이설명서에포함된정보의제공, 사용또는적용과관련된오류나부수적이고결과적인손해에대해책임지지않습니다. 만약이문서내의약관과충돌하는내용이포함된보증조건에대해 Agilent 와사용자가별도의서면동의서를가지고있다면별도의동의서에있는보증조건이적용됩니다. 기술라이센스 이문서에설명된하드웨어및 / 또는소프트웨어는라이센스하에제공되며, 해당라이센스의이용약관에따라사용또는복사할수있습니다. 제한된권리범례 미국정부제한된권리. 연방정부에게승인된소프트웨어및기술데이터권리에는최종사용자고객에게관례적으로제공된권리들만포함됩니. Agilent 는소프트웨어및기술데이터안의이관례적인상업용라이센스를 FAR ( 기술데이터 ) 및 ( 컴퓨터소프트웨어 ) 에의거하여, 그리고국방부, DFARS ( 기술데이터 - 상업용항목 ) 및 DFARS ( 상업용컴퓨터소프트웨어또는컴퓨터소프트웨어문서안의권리들 ) 에대하여공합니다. 안전고지 주의 주의표시는위험을나타냅니다. 이는올바로이행하거나지키지않을경우제품이손상되거나중요데이터가손실될수있는작동절차나사용방식등에대한주의를환기시키는표시입니다. 주의내용을완전히이해하지못하거나조건이만족되지않을경우작업을진행하지마십시오. 경고 경고표시는위험을나타냅니다. 이는올바로이행하거나지키지않을경우신체상해나사망에이를수있는작동절차나사용방식등에대한주를환기시키는표시입니다. 경고내용을완전히이해하지못하거나조건이만족되지않을경우작업을진행하지마십시오. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - GC/MS 정성분석기초설명서

3 이설명서에서는 이안내서에는 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 데이터로정성분석을사용하는방법에대한정보를포함하고있습니다. 연습을시작하기전에 이들연습을시작하기전에... (5 페이지 ) 에있는지침을읽으십시오. 연습 1 연습 2 연습 3 정성분석의기본배우기 이연습에서는 Qualitative Analysis( 정성분석 ) 프로그램의많은강력한기능중일부를탐구해봅니다. 이들작업은사용중인데이터유형에상관없이중요합니다. 찾고식별하기 작업의첫 2 세트에서복잡한매트릭스내낮은농도의설파제를찾고식별합니다. 그리고 TOF 및 Q-TOF 데이터에대한공식을생성합니다. 또한 TOF 및 Q-TOF 데이터로단백질소화에서분자특징추출을할수있습니다. 이작업은 Triple Quad 데이터에서수행할수도있습니다. 워크플로사용, 내보내기및인쇄 이들작업에서는정성분석분석법을설정및실행하는방법을배웁니다. 또한분석및 / 또는화합물식별을자동화하기위해분석법을편집하는방법을배웁니다. 그런다음데이터파일을열때자동화된분석법내에서작업을실행합니다. 그리고작업목록으로자동화된작업을수행하는분석법을생성하는방법도배울수있습니다. 이들작업은각각다른워크플로를사용하여실행됩니다. 참조 이장에서는 Qualitative Analysis( 정성분석 ) 프로그램의기본사항에관하여배웁니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - GC/MS 정성분석기초설명서 3

4 B 의 새로운기능 Compound Details View( 화합물세부사항보기 ) 에서화합물들을검토할수있습니다. Compound Details View( 화합물세부사항보기 ) 에는추가창이 4 개있습니다. Compound Details View( 화합물세부사항보기 ) 에서는, 여러유형의크로마토그램및스펙트럼에대해여러라인정의를지정할수있습니다. Find Compounds by Integration( 적분으로화합물찾기 ) 알고리즘을사용가능합니다. 여러라이브러리에서단위질량라이브러리검색알고리즘을검색할수있습니다. Generate Formulas( 일반공식 ) 알고리즘에서공식이있는토막스펙트럼피크에주석을기록할것인지여부를선택할수있습니다. 토막주석은화합물이닝알고리즘을기반으로주석을기록할스펙트럼을선택합니다. Generate Formulas( 일반공식 ) 알고리즘은 Find by Chromatogram Deconvolution algorithm( 크로마토그램디콘볼루션으로찾기 ) 알고리즘으로찾아낸화합물에대해실행할수있습니다. Generate Formula( 일반공식 ) 알고리즘이각전하운반체에대한최대히트수를입력할수있도록수정되었습니다. Generate Formula( 일반공식 ) 알고리즘에서히트를동일한공식으로, 그러나다른전하운반체로그룹화할수있습니다. 화합물은모든사용자스펙트럼에서생성할수있습니다. 이들화합물에대한화합물마이닝알고리즘은 Spectrum Extraction( 스펙트럼추출 ) 입니다. 결과를데이터파일로저장할때, 데이터파일하나와함께모든화합물결과를저장할것인지, 아니면각화합물에대해적은결과세트를저장할인지선택할수있습니다. 모든사용자크로마토그램및사용자스펙트럼은항상저장됩니다. CEF 파일의형식이추가정보를포함할수있도록수정되었습니다. m/z 및이온계열정보는 Spectrum Identification Results( 스펙트럼식별결과 ) 표의첫번째레벨에있습니다. Spectrum Identification( 스펙트럼식별 ) 표가수정되었습니다. 열에필터를추가하고행을삭제할수있습니다. 이제 Formula & Ion Species( 공식 & 이온계열 ) 로피크에레이블을달수있습니다. 4 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - GC/MS 정성분석기초설명서

5 이제항목이많을때 Spectrum Identification Results( 스펙트럼식별결과 ) 창에서 Best( 최고 ) 레이블이있는스펙트럼을변경하는작업이현저하게빨라졌습다. Compound Report( 화합물보고서 ) 에서화합물크로마토그램을오버레이하도록지정할수있습니다. 기본 Formula Confirmation( 공식확인 ) 보고서템플릿이수정되어이제 Flags (Tgt) 컬러열과 Fragment Table with the colored Flags( 컬러플래그가있는토막표 )(FIs) 이포함됩니다. 이들연습을시작하기전에... 소프트웨어를설치합니다. 지침은 Installation Guide( 설치설명서 ) 를참조합니다. 설치디스크에있는 Data 폴더를비압축형식으로하드디스크의아무위치에나복사합니다. 이폴더에는이들연습에필요한모든데이터파일이들어있습니다. 먼저.zip 형식에서데이터파일을추출해야할수있습니다. 참고 이미시스템에있는예제데이터파일이디스크에있는원본으로부터복사한것인지확실치않으며자신이이들파일의유일한사용자가아니라면, 이들파일을다시사용하지마십시오. 이미시스템에있는예제데이터파일이디스크에있는원본과정확하게일치하지않는다면이들연습으로성된결과가설명서에있는결과와일치하지않게됩니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - GC/MS 정성분석기초설명서 5

6 6 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - GC/MS 정성분석기초설명서

7 목차 연습 1 정성분석의기본배우기 9 작업 1. 정성분석프로그램열기 10 작업 2. GC/MS 데이터용으로사용자인터페이스구성 12 작업 3. 크로마토그램확대및축소 15 작업 4. 크로마토그램고정 16 작업 5. 창레이아웃변경 17 작업 6. 크로마토그램추출 19 작업 7. GC/MS 크로마토그램대화식으로적분 21 작업 8. 시스템적합성값계산 26 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 30 작업 10. 주석추가 41 작업 11. 질량캘리퍼추가 45 연습 2 찾고식별하기 47 작업 12. 크로마토그램디콘볼루션으로화합물찾기 48 작업 13. Search Library( 라이브러리검색 ) 알고리즘을사용하여화합물식별 52 작업 14. MRM 으로화합물찾기 (MRM 만 ) 58 작업 15. 적분으로화합물찾기 62 작업 16. 피크스펙트럼에대한공식생성및라이브러리검색 65 작업 17. 결과저장 71 연습 3 워크플로사용, 내보내기및인쇄 75 작업 18. 일반워크플로를사용하여정성분석분석법설정및실행 76 작업 19. GC/Q-TOF 성분스크리닝워크플로를사용한분석법설정및 실행 81 작업 20. CEF 파일내보내기 85 작업 21. 분석보고서인쇄 87 작업 22. 화합물보고서인쇄 92 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 7

8 목차 참조 95 창으로작업 96 Data Navigator( 데이터탐색기 ) 에서결과데이터로작업 98 크로마토그램에서작동실행 99 MS 또는 MS/MS 스펙트럼에서작업수행 100 크로마토그램시각데이터로작업 101 스펙트럼시각데이터로작업 102 워크플로 103 보고서템플릿사용자지정 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

9 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어정성분석기초설명서 1 정성분석의기본배우기 작업 1. 정성분석프로그램열기 10 작업 2. GC/MS 데이터용으로사용자인터페이스구성 12 작업 3. 크로마토그램확대및축소 15 작업 4. 크로마토그램고정 16 작업 5. 창레이아웃변경 17 작업 6. 크로마토그램추출 19 작업 7. GC/MS 크로마토그램대화식으로적분 21 작업 8. 시스템적합성값계산 26 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 30 작업 10. 주석추가 41 작업 11. 질량캘리퍼추가 45 이연습과정에서는 GC/Q-TOF 및 GC/QQQ 데이터로작업하기위해정성분석프로그램의많은강력한기능중일부를탐구해봅니다. 각연습과정은 3 개의열이있는표로표시됩니다. 단계 이들일반지침을사용하여스스로프로그램을탐구해보십시오. 자세한지침 도움이필요하거나단계별학습과정을원한다면이용하십시오. 주석 연습과정의각단계에대한추가정보및팁을제공합니다. 9

10 1 정성분석의기본배우기작업 1. 정성분석프로그램열기 작업 1. 정성분석프로그램열기 이작업에서는현재분석법을사용하여여러데이터파일을엽니다. 작업 1. 여러데이터파일과함께정성분석프로그램열기 1 정성분석프로그램을엽니다. 데이터파일인 Pest Scan.d, Pest - STD 200 MRM.d, Pest Strawb-01 SPIKED 1 ppb - 1 ul inj.d 및 MSD_mix_4stds_DG_spl200_0 3.d (\\MassHunter\Data 폴더나복사한폴더안에서 ) 를엽니다. a b Agilent MassHunter Qualitative Analysis B 아이콘을더블클릭합니다. 그러면시스템에서 Open Data Files ( 데이터파일열기 ) 대화상자를표시합니다. \\MassHunter\Data\GC 또는예제파일이있는폴더로이동합니다. Pest Scan.d 파일에는 MS 데이터가있고, Pest - STD 200 MRM.d 및 Pest Strawb-01 SPIKED 1 ppb - 1 ul inj.d 파일에는 MS 와 MS/MS 데이터가모두들어있습니다 ( 모든 GC/QQQ). MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d 에는 GC/Q-TOF 데이터가들어있습니다. 창이활성중일때 F1 키를누르면대부분의창, 대화상자및탭에대한도움말을볼수있습니다. Use current method( 현재분석법사용 ) 단추가클릭되어있는지확인합니다. Load result data( 결과데이터로드 ) 확인란이선택해제되어있어야합니다. Load result data( 결과데이터로드 ) 확인란이없다면데이터파일에저장된결과가없는것입니다. 작업 17. 결과저장 (71 페이지 ) 에서결과를저장하는방법을배울수있습니다. Run File Open actions from selected method( 선택한분석법에서 ' 파일열기 ' 작업실행 ) 확인란이선택해제되어있어야합니다. 그림 1 소프트웨어를열때데이터파일열기 10 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

11 정성분석의기본배우기 1 작업 1. 정성분석프로그램열기 작업 1. 여러데이터파일과함께정성분석프로그램열기 ( 계속 ) c Shift 키를누른상태로 Pest Scan.d, Pest - STD 200 MRM.d, Pest Strawb-01 SPIKED 1 ppb - 1 ul inj.d 및 MSD_mix_4stds_DB_spl200_03.d 를클릭합니다. d Open( 열기 ) 을누릅니다. 4 개의모든데이터파일이 Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에표시되며, 1 에서 3 개의크로마토그램이 Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창에표시됩다. e Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 도구모음에서 List Mode ( 목록모드 ) 아이콘을클릭합니다. Ctrl 키를누르면목록안에서바로옆에있지않은파일들을선택할수있습니다. 이시점에서기본창에표시되는항목은이들파일을열기전에사용한분석법, 레이아웃, 표시및플롯설정에따라다릅니다. List Mode( 목록모드 ) 아이콘을클릭하면아이콘의배경이주황색으로변경됩니다. 최대목록패널수아이콘 표시옵션아이콘 X 단추를클릭하면이창이닫힙니다. 그림 2 GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) 워크플로가로드된 Qualitative Analysis( 정성분석 ) 기본창 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 11

12 1 정성분석의기본배우기작업 2. GC/MS 데이터용으로사용자인터페이스구성 작업 2. GC/MS 데이터용으로사용자인터페이스구성 작업 2. GC 용사용자인터페이스구성 이작업에서는 General( 일반 ) 워크플로 (GC/QQQ 고객용 ) 또는 GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) 워크플로 (GC/Q-TOF 고객용 ) 로전환해봅니다. 이들 2 개의워크플로는 GC/MS 데이터분석을지원하는유일한워크플로입니다. 그런다음, User Interface Configuration( 사용자인터페이스구성 ) 대화상자를열고 GC/QQQ 시스템또는 GC/Q-TOF 시스템에대해적절한확인란을선택합니다. 1 필요하다면정성분석프로그램을엽니다. 2 General( 일반 ) 워크플로또는 GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) 워크플로로전환합니다. a Agilent MassHunter Qualitative Analysis 아이콘을더블클릭합니다. 그러면시스템에서 Open Data Files ( 데이터파일열기 ) 대화상자를표시합니다. b Open Data Files( 데이터파일열기 ) 대화상자에서 Cancel( 취소 ) 을클릭합니다. a GC/QQQ 기기가있다면 Configuration( 구성 ) > Configure for Workflow( 워크플로구성 ) > General( 일반 ) 명령을클릭합니다. GC/Q-TOF 기기가있다면 Configuration( 구성 ) > Configure for Workflow( 워크플로구성 ) > GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) 명령을클릭합니다. b Load workflow s default method( 워크플로의기본분석법로드 ) 단추와 Load workflow s default layout ( 워크플로의기본레이아웃로드 ) 단추를클릭합니다. c OK( 확인 ) 를클릭합니다. d Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 도구모음에서 List Mode ( 목록모드 ) 아이콘을클릭합니다. 창이활성중일때 F1 키를누르면모든창, 대화상자및탭에대한도움말을볼수있습니다. 동일한컴퓨터에 GC/QQQ 또는 GC/Q-TOF 용 Data Acquisition( 데이터수집 ) 프로그램이설치되어있다면소프트웨어에서사용자인터페이스를자동으로구성합니다. Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에 GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) 부분이이미존재할수있습니다. 기본적으로크로마토그램은겹쳐져있습니다. 이들예제를위해크로마토그램이 List Mode( 목록모드 ) 에표시됩니다. 12 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

13 정성분석의기본배우기 1 작업 2. GC/MS 데이터용으로사용자인터페이스구성 작업 2. GC 용사용자인터페이스구성 3 GC/QQQ 를가지고있다면 GC/QQQ 기능만표시하도록사용자인터페이스를구성하십시오. a b c d e Configuration( 구성 ) > User Interface Configuration( 사용자인터페이스구성 ) 을클릭합니다. Separation types( 분리유형 ) 아래에서 GC 확인란만선택합니다. GC/QQQ 기기가있다면 Ionization type( 이온화유형 ) 아래에서 EI or other hard ionization technique(ei 또는기타 " 강한 " 이온화기술 ) 확인란을선택하고 CI, APCI, ESI, MADLDI or other soft ionization technique(ci, APCI, ESI, MADLDI 또는기타 " 부드러운 " 이온화기술 ) 확인란을선택해제합니다. Mass accuracy( 질량정확도 ) 아래에서 Accurate mass( 정확한질량 ) (TOF, Q-TOF) 확인란을선택해제합니다. Unit mass( 단위질량 ) (Q, QQQ) 확인란을선택합니다. Optional software( 선택사항소프트웨어 ) 기능아래에서 Peptide Sequence Editor( 펩티드시퀀스편집기 ) 확인란과 BioConfirm Software(BioConfirm 소프트웨어 ) 확인란을선택해제합니다. f Non-MS detectors( 비 MS 감지기 ) 아래에서 UV 및 ADC 확인란을선택해제합니다. g Show advanced parameters( 고급파라미터보기 ) 확인란을선택합니다. h OK( 확인 ) 를클릭합니다. User Interface Configuration( 사용자인터페이스구성 ) 대화상자에서사용가능한명령을변경할수있습니다. 어떤기능이보이지않는다면 User Interface Configuration( 사용자인터페이스구성 ) 대화상자에서확인란을지웠을때숨겨진것일수있습니다. 그림 3 GC/QQQ 데이터와사용하도록사용자인터페이스구성 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 13

14 1 정성분석의기본배우기작업 2. GC/MS 데이터용으로사용자인터페이스구성 작업 2. GC 용사용자인터페이스구성 4 GC/Q-TOF 기기를가지고있다면 GC/Q-TOF 기능만표시하도록사용자인터페이스를구성하십시오. a b c d e f Configuration( 구성 ) > User Interface Configuration( 사용자인터페이스구성 ) 을클릭합니다. Separation types( 분리유형 ) 아래에서 GC 확인란만선택합니다. Ionization type( 이온화유형 ) 아래에서확인란 2 개를모두선택합니다. MS levels(ms 레벨 ) 아래에서확인란 2 개를모두선택합니다. Mass accuracy( 질량정확도 ) 아래에서 Accurate mass( 정확한질량 ) (TOF, Q-TOF) 확인란을선택합니다. Unit mass( 단위질량 ) (Q, QQQ) 확인란을선택해제합니다. Optional software( 선택사항소프트웨어 ) 기능아래에서 Peptide Sequence Editor( 펩티드시퀀스편집기 ) 확인란과 BioConfirm Software(BioConfirm 소프트웨어 ) 확인란을선택해제합니다. g Non-MS detectors( 비 MS 감지기 ) 아래에서 UV 및 ADC 확인란을선택해제합니다. h Show advanced parameters( 고급파라미터보기 ) 확인란을선택합니다. i OK( 확인 ) 를클릭합니다. User Interface Configuration( 사용자인터페이스구성 ) 대화상자에서사용가능한명령을변경할수있습니다. 어떤기능이보이지않는다면 User Interface Configuration( 사용자인터페이스구성 ) 대화상자에서확인란을지웠을때숨겨진것일수있습니다. 그림 4 GC/Q-TOF 용사용자인터페이스구성 14 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

15 정성분석의기본배우기 1 작업 3. 크로마토그램확대및축소 작업 3. 크로마토그램확대및축소 이작업에서는정성분석프로그램의확대및축소기능을배우게됩니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 15

16 1 정성분석의기본배우기작업 4. 크로마토그램고정 작업 4. 크로마토그램고정 작업 4. 크로마토그램고정 이작업에서는크로마토그램을고정합니다. 크로마토그램을고정하면다른크로마토그램을스크롤하여표시하려고해도고정된크로마토그램이스플레이에영구적으로남게됩니다. 크로마토그램을고정합니다. 모든크로마토그램을표시합니다. 크로마토그램보기목록이 1 로설정되어있어야합니다. Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창에서두번째 TIC 를선택합니다. 이 TIC 를고정합니다. 다른크로마토그램을스크롤합니다. 고정을풉니다. a b c d e Data Navigator( 데이터탐색기 ) 에서이전작업에서숨긴크로마토그램의확인란을선택합니다. Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창에서최대패널수가 1 로설정되어있어야합니다. Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창에서두번째 TIC 를선택합니다. 크로마토그램내부를마우스오른쪽단추로클릭하고 Set Anchor( 고 정설정 ) 를클릭합니다. Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창에서스크롤막대를사용하여크로마토그램목록을스크롤합니다. 두번째 TIC 가첫번째크로마토그램으로상보이는상태가됩니다. f Chromatograms( 크로마토그램 ) > Clear Anchor( 고정지우기 ) 를클릭합니다. 크로마토그램에고정을설정하면 Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서고정된크로마토그램이름옆에고정아이콘이나타납니다. 1 개의크로마토그램을고정한후에는보기목록에서 1 로표시되어도 Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창에 2 개의크로마토그램이나타납니다. 이것은고정된크로마토그램이외에 1 개의크로마토그램이표시됨을의미합니다. 또는해당크로마토그램을마우스오른쪽단추로클릭하고바로가기메뉴에서 Clear Anchor( 고정지우기 ) 를클릭해도됩니다. 그림 5 Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창에고정된 TIC 16 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

17 정성분석의기본배우기 1 작업 5. 창레이아웃변경 작업 5. 창레이아웃변경 작업 5. 창레이아웃변경 이작업에서는기본보기내에서창들을움직이고다양한창레이아웃을만들어봅니다. 1 창레이아웃변경 : 창크기를변경합니다. 창레이아웃을저장합니다. 레이아웃을잠금해제합니다. Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창을유동으로변경합니다. Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창을움직입니다. 창의위치를변경하기위한도구를표시합니다. 창의크기를변경하려면창사이에서경계를마우스로드래그합니다. 창레이아웃을저장하려면 Configuration( 구성 ) > Window Layouts( 창레이아웃 ) > Save Layout( 레이아웃저장 ) 을클릭합니다. 레이아웃을잠금해제하려면 Configuration( 구성 ) > Window Layouts( 창레이아웃 ) > Lock Layout( 레이아웃잠금 ) 을클릭합니다. 창을유동으로만드려면해당창의제목표시줄을마우스오른쪽단추로클릭하고바로가기메뉴에서 Floating( 유동 ) 을클릭합니다. 창을움직이려면해당창의제목표시줄을클릭하고창을원하는위치로드래그합니다. 위치변경도구를표시하려면해당창을다른창위로드래그합니다. 창이다른창과겹친다면프로그램에서몇가지레이아웃도구를표시합니다 ( 그림 6 참조 ). 레이아웃이잠금해제되면시스템에서 Lock Layout( 레이아웃잠금 ) 메뉴옆에확인표시가나타나지않습니다. 레이아웃이잠금해제되어있을때는위치변경도구만사용할수있습니다. 또한, 창의제목표시줄을더블클릭하여창을유동으로만들수있습니다. 소프트웨어에는많은다양한레이아웃이생성되어있습니다. 여러레이아웃의로드를시도해볼수도있습니다. 소프트웨어에는몇가지다른워크플로가있습니다. 각워크플로는각기다른레이아웃을로드합니다. 다른워크플로로전환하면레이아웃도변경니다. 그림 6 창위치변경도구 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 17

18 1 정성분석의기본배우기작업 5. 창레이아웃변경 작업 5. 창레이아웃변경 ( 계속 ) 2 Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창의위치를변경합니다. 창을다른창의위, 왼쪽, 오른쪽, 아래로움직입니다. 창 2 개를함께움직여서서로의위에오도록하고아래의탭을통해서만보이도록합니다. 기본레이아웃을복원합니다. 커서를작은아이콘하나위로그래그하면, 드래그하고있는창이다른모든창의위, 오른쪽, 아래쪽또는왼쪽에위치하게됩니다. 커서를더큰아이콘위로드래그합니다. 커서를큰아이콘의가장자리위로드래그해서창을다른창의위, 오른쪽, 아래또는왼쪽에배치할수도있습니다. 창 2 개를함께탭하려면커서를큰아이콘의중앙으로드래그하십시오. 그러면 2 개의창이함께탭된그림자버전이나타납니다. 마우스의드래그를중단합니다. 이제창 2 개가함께탭됩니다. Configuration( 구성 ) > Window Layouts( 창레이아웃 ) > Restore Default Layout( 기본레이아웃복원 ) 을클릭합니다. 위치를변경하려면커서가상자안에있는화살표하나위에있어야합니다. Restore Default Layout( 기본레이아웃복원 ) 명령을클릭하면 General( 일반 ) 워크플로와 GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) 워크플로가함께사용되는레이아웃이복원됩니다. 다른워크플로를사용한다면해당워크플로와함께사용되는레이아웃을로드해야합니다. 18 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

19 정성분석의기본배우기 1 작업 6. 크로마토그램추출 작업 6. 크로마토그램추출 이작업에서는원본 TIC 에서크로마토그램을추출하고병합합니다. 작업 6. 크로마토그램추출 1 Pest Scan.d 데이터파일내 2 개의질량에서추출된이온크로마토그램 (EIC) 을추출및병합합니다. m/z 값은 및 입니다. 개별질량으로부터의피크를하나의크로마토그램으로병합하지마십시오. a b c d e f Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서 Pest Scan.d 를제외하고데이터파일에대한확인란을선택해제합니다. 아래의옵션이나오른쪽에있는옵션하나를사용하여 Extract Chromatograms( 크로마토그램추출 ) 대화상자를엽니다. Chromatograms( 크로마토그램 ) > Extract Chromatograms( 크로마토그램추출 ) 를클릭합니다. List of opened data files( 열린데이터파일목록 ) 에서 Pest Scan.d 를클릭합니다. Type( 유형 ) 목록상자에서 EIC 를선택합니다. m/z value(s)(m/z 값 ) 필드에 129.0, 를입력합니다. 필요하다면 Merge multiple masses into one chromatogram( 여러질량을하나의크로마토그램으로병합 ) 확인란을선택해제하여 EIC 를병합합니다. g OK( 확인 ) 를클릭합니다. h Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 도구모음에서 Maximum number of list panes( 최대목록패널수 ) 를 3 으로설정합니다. 또한, 다음방법중하나로크로마토그램을추출할수도있습니다. 크로마토그램내부를마우스오른쪽단추로클릭하고 Extract Chromatograms( 크로마토그램추출 ) 를클릭합니다. Data Navigator( 데이터탐색기 ) 에서 sulfas_posms.d 용 TIC Scan(TIC 스캔 ) 을강조표시하고 TIC Scan(TIC 스캔 ) 을마우스오른쪽단추로클릭한다음, Extract Chromatograms( 크로마토그램추출 ) 를클릭합니다. All( 모두 ) 또는 MS 의 MS level(ms 레벨 ) 을사용할수있습니다. 추출후에추출한크로마토그램이자동으로적분되도록선택할수도있습니다. 또한, 질량스펙트럼에서크로마토그램을추출할수도있습니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 19

20 1 정성분석의기본배우기작업 6. 크로마토그램추출 작업 6. 크로마토그램추출 ( 계속 ) 그림 7 Extract Chromatograms( 크로마토그램추출 ) 대화상자 그림 8 원본 TIC 와비교한병합및추출된이온크로마토그램 (EIC) 20 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

21 정성분석의기본배우기 1 작업 7. GC/MS 크로마토그램대화식으로적분 작업 7. GC/MS 크로마토그램대화식으로적분 이작업에서는 MS/MS 데이터용적분피크에대해시그널대노이즈를계산하고크로마토그램을적분하며, 결과를수정하도록적분파라미터를변경는여러방법을배웁니다. 작업 7. 크로마토그램대화식으로적분 (GC/MS) 단계 자세한지침 주석 1 오른쪽에나열된옵션중하나를사용하여 Pest Scan.d 데이터파일에대한 TIC Scan 크 a Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서 Pest Scan.D 데이터파일을선택합니다. 로마토그램을적분합니다. b 2 한번에 2 개의크로마토그램만표시합니다. TIC Scan 크로마토그램을강조표시하고다음명령중하나를사용합니다. 메뉴모음에서 Chromatograms ( 크로마토그램 ) > Integrate Chromatogram( 크로마토그램적분 ) 을클릭합니다. 크로마토그램창안의아무곳이나마우스오른쪽단추로클릭하고 Integrate Chromatograms( 크로마토그램적분 ) 를클릭합니다. Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서 Pest Scan.D > User Chromatograms( 사용자크로마토그램 ) > TIC Scan(TIC 스캔 ) 을선택하고 TIC Scan(TIC 스캔 ) 을마우스오른쪽단추로클릭한다음, Integrate Chromatogram( 크로마토그램적분 ) 을클릭합니다. Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 도구모음에서 Maximum number of list panes( 최대목록패널수 ) 를 2 로설정합니다. 프로그램은사실상크로마토그램안의모든피크를적분함을유의하십시오. Method Editor( 분석법편집기 ) 창에서 MS 데이터, MS/MS 데이터및 GC 데이터에사용할적분기를선택합니다. 이크로마토그램은 MS 크로마토그램이므로, 이크로마토그램을적분할때는 Method Editor( 분석법편집기 ) 의 Integrate( 적분 )(MS) 부분에설정된값들이사됩니다. 많은작은피크들이적분됩니다. 그림 9 많은작은피크들이적분된 TIC 스캔크로마토그램 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 21

22 1 정성분석의기본배우기작업 7. GC/MS 크로마토그램대화식으로적분 작업 7. 크로마토그램대화식으로적분 (GC/MS) ( 계속 ) 단계 자세한지침 주석 3 적은피크들을적분하도록임계 a Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창 현재분석법에저장된값의설정 값을변경합니다. 가장큰피크 3 개만보유하도록임계값을변경합니다. 에서 Chromatogram( 크로마토그램 ) > Integrate( 적분 )(MS) 를클릭하여 Integrate( 적분 )(MS) 탭을표시합니다. 을변경하면파란색삼각형이나타납니다. 분석법을저장하면이삼각형이사라집니다. b Agile 적분기를선택합니다. c Peak Filters( 피크필터 ) 탭을클릭 합니다. d Maximum number of peaks( 최대피크 수 ) 아래에서 Limit (by height) to the largest( 큰피크로제한 ( 높이 )) 를 선택하고 3 을입력합니다. 그림 10 Limit (by height) to the largest( 큰피크로제한 ( 높이 )) 가선택된 Peak Filters( 피크필터 ) 탭 4 크로마토그램다시적분 e Method Editor( 분석법편집기 ) 도구 이제가장큰 3 개의피크만적분모음에서단추를클릭하여새됩니다. 로운설정을사용하여적분합니다 에서의피크가 분에서의피크보다높으므로세번째피크로선택됩니다. 그림 11 피크수제한시적분된 TIC 스캔크로마토그램 22 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

23 정성분석의기본배우기 1 작업 7. GC/MS 크로마토그램대화식으로적분 작업 7. 크로마토그램대화식으로적분 (GC/MS) ( 계속 ) 5 Pest - STD 200 MRM.D 데이터파일에대해 TIC MRM 크로마토그램을적분합니다. a b Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서 Pest - STD 200 MRM.d 데이터파일에대해 TIC MRM 을선택합니다. 다음명령중하나를사용하여크로마토그램을적분합니다. 메뉴모음에서 Chromatograms ( 크로마토그램 ) > Integrate Chromatogram( 크로마토그램적분 ) 을클릭합니다. 크로마토그램창안의아무곳이나마우스오른쪽단추로클릭하고 Integrate Chromatograms( 크로마토그램적분 ) 를클릭합니다. Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서강조표시된크로마토그램을마우스오른쪽단추로클릭하고 Integrate Chromatogram( 크로마토그램적분 ) 을클릭합니다. c 5.8 에서 8.5 분까지확대합니다. d Maximum number of list panes( 최대목록패널수 ) 를 2 로설정합니다. Ctrl 키를누르면 Data Navigator ( 데이터탐색기 ) 창에서하나이상의크로마토그램을강조표시할수있습니다. 프로그램은사실상크로마토그램안의모든피크를적분함을유의하십시오. 이들크로마토그램은 MS/MS 크로마토그램이므로, 이크로마토그램을적분할때는 Method Editor( 분석법편집기 ) 창의 Integrate( 적분 )(MS/MS) 부분에설정된들이사용됩니다. MS 크로마토그램의적분에하나의적분기를, MS/MS 크로마토그램의적분에다른적분기를사용하도록선택할수있습니다. 그림 12 적분된 MRM 크로마토그램 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 23

24 1 정성분석의기본배우기작업 7. GC/MS 크로마토그램대화식으로적분 작업 7. 크로마토그램대화식으로적분 (GC/MS) ( 계속 ) 단계 자세한지침 주석 6 MS/MS (GC) 적분기를선택합 a Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창 현재분석법에저장된값의설정 니다. 절대높이가 20,000 이상인피크만수용하도록필터를변경합니다. 에서 Chromatogram( 크로마토그램 ) > Integrate( 적분 )(MS/MS) 를선택합니다. 을변경하면파란색삼각형이나타납니다. 분석법을저장하면이삼각형이사라집니다. b MS/MS (GC) 를 Integrator( 적분기 ) 로선택합니다. c Peak Filters( 피크필터 ) 탭을클릭 합니다. d Filter on( 필터켜기 ) 아래에서 Peak height( 피크높이 ) 을클릭합 니다. e Height( 높이 ) 필터아래에서 Absolute height( 절대높이 ) 확인란을선택합니다. f 을 Absolute height( 절대높이 ) 로입력합니다. 그림 13 7 크로마토그램다시적분 g Method Editor( 분석법편집기 ) 도구모음에서단추를클릭합니다. Absolute height( 절대높이 ) 가선택된 Peak Filters( 피크필터 ) 탭 이제가장큰피크들만적분됩니다. 이피크에대한절대높이가 보다낮으므로 5.8 분에서더낮은피크는더이상적분결과에포함되지않습니다. 그림 14 높은임계값설정으로적분된 TIC 및 EIC MS/MS 크로마토그램 24 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

25 정성분석의기본배우기 1 작업 7. GC/MS 크로마토그램대화식으로적분 작업 7. 크로마토그램대화식으로적분 (GC/MS) ( 계속 ) 단계 자세한지침 주석 8 현재분석법에대해저장된설 a Method Explorer( 분석법탐색기 ) 에 변경을취소하고로드된분석법 정을복원하고 Method Editor( 분석법편집기 ) 를닫습니다. 서 Chromatogram( 크로마토그램 ) > Integrate( 적분 )(MS/MS) 부분을선택합니다. 에서값을복원하려면, Method Editor( 분석법편집기 ) 도구모음에있는 Restore to last saved b Method Editor( 분석법편집기 ) 에 values from file( 파일에서마지막 서 아이콘을클릭합니다. 저장한값복원 ) 아이콘 을 c Method Explorer( 분석법탐색기 ) 에서 Chromatogram( 크로마토그램 ) > Integrate( 적분 )(MS) 부분을선택합니다. 클릭합니다. d Method Editor( 분석법편집기 ) 에 서 아이콘을클릭합니다. e Method Editor( 분석법편집기 ) 창 을닫습니다. 9 원래의크로마토그램을제외한모든크로마토그램을삭제합니다. 원래의크로마토그램에서적분결과를삭제합니다. a b c Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창의 User Chromatograms( 사용자크로마토그램 ) 창아래에서원래의크로마토그램을제외한모든크로마토그램을강조표시합니다. 강조표시한크로마토그램을마우스오른쪽단추로클릭하고 Delete ( 삭제 ) 를클릭합니다. 모든 TIC 크로마토그램을선택합니다. d Chromatograms( 크로마토그램 ) > Clear Results( 결과지우기 ) 를클릭합니다. Clear Results( 결과지우기 ) 명령을사용할때는크로마토그램은삭제되지않으며, 해당크로마토그램에연결된결과가제거됩니다. 이경우적분값이지워집니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 25

26 1 정성분석의기본배우기작업 8. 시스템적합성값계산 작업 8. 시스템적합성값계산 이작업에서는크로마토그램을대화식으로적분하고결과를수정하도록적분파라미터를변경하며, 각피크에대한시그널대노이즈를계산하는러방법을배웁니다. 또한, 시스템적합성계산을활성화하는방법을배웁니다. 작업 8. 크로마토그램대화식으로적분 (MS) 1 오른쪽에나열된옵션하나를사용하여 MSD_mix_4stds_DB_spl200_03.d 및 Pest Scan.d 크로마토그램을적분합니다. a b Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서 MSD_mix_4stds_DB_spl200_03.d 데이터파일옆에있는확인란을선택합니다. Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서 Pest Scan.d 데이터파일옆에있는확인란을선택합니다. c 2 개의 TIC 를모두강조표시합니다. d 다음옵션하나를사용하여이들 2 개의파일에대한 TIC Scan(TIC 스캔 ) 을적분합니다. 기본메뉴에서 Chromatograms ( 크로마토그램 ) > Integrate Chromatogram( 크로마토그램적분 ) 을클릭합니다. 해당크로마토그램을강조표시합니다. 그런다음, 해당크로마토그램을마우스오른쪽단추로클릭하고 Integrate Chromatogram( 크로마토그램적분 ) 을클릭합니다. Data Navigator( 데이터탐색기 ) 에서 2 개의데이터파일모두에대한 TIC Scan(TIC 스캔 ) 을강조표시합니다. 그런다음, 양크로마토그램을마우스오른쪽단추로클릭하고 Integrate Chromatogram( 크로마토그램적분 ) 을클릭합니다. General( 일반 ) 워크플로의경우, 분석법적분시 method default.m 에서선택한적분기인 General ( 일반 ) 적분기를사용합니다. GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) 워크플로의경우에는적분에 Agile 적분기를사용합니다. Chromatogram( 크로마토그램 ) > Integrate( 적분 )(MS) > Integrator ( 적분기 ) 탭에서이값을변경할수있습니다. 기본파라미터를사용한적분은매우작은피크를감지함에유의하십시오. 26 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

27 정성분석의기본배우기 1 작업 8. 시스템적합성값계산 작업 8. 크로마토그램대화식으로적분 (MS) ( 계속 ) 그림 15 Data Navigator( 데이터탐색기 ) 의바로가기메뉴한개및적분된크로마토그램 2 MS 크로마토그램에대한시스템적합성계산을활성화합니다. a Method Explorer( 분석법탐색기 ) 에서 Chromatogram( 크로마토그램 ) > Integrate( 적분 )(MS) 를클릭하여 Integrater( 적분기 ) 탭을표시합니다. b Suitability( 적합성 ) 탭을클릭합니다. c Enable system suitability calculations( 시스템적합성계산활성화 ) 를선택합니다. d United States Pharmacopoeia(USP) ( 미국약전 ) 를선택합니다. e Column void time( 컬럼공극시간 ) f 상자에 1 을입력합니다. Column length( 컬럼길이 ) 상자에 3000 을입력합니다. 현재분석법에저장된값의설정을변경하면파란색삼각형이나타납니다. 분석법을저장하면이삼각형이사라집니다. Integration Peak List( 적분피크목록 ) 에몇개의컬럼을설정하는데사용되는알고리즘이선택한약전에따라변경됩니다. 추가정보는온라인도움말참조하십시오. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 27

28 1 정성분석의기본배우기작업 8. 시스템적합성값계산 작업 8. 크로마토그램대화식으로적분 (MS) ( 계속 ) 이들데이터파일에대한실제컬럼공극시간및컬럼길이는이들값과다릅니다. 이들은이예제에서만사용됩니다. 그림 16 Chromatogram( 크로마토그램 ) > Integrate( 적분 )(MS) Suitability( 적합성 ) 탭 3 크로마토그램을다시적분합니다. Method Editor( 분석법편집기 ) 도구모음에서 Integrate Chromatogram ( 크로마토그램적분 ) 아이콘을클릭하여새로운설정을사용하여적분합니다. 4 시스템적합성계산을봅니다. Integration Peak List( 적분피크목록 ) 창을엽니다. 노이즈영역에대한값을검토하고적분된피크에대한시그널대노이즈비율을계산합니다. a b c d View( 보기 ) > Integration Peak List( 적분피크목록 ) 를클릭합니다. Peaks( 피크 ) 창의헤더를마우스오른쪽단추로클릭하고 Floating ( 유동 ) 을클릭합니다. 표시하지않으려는열의헤더를마우스오른쪽단추로클릭하고 Remove Column( 열제거 ) 을클릭합니다. 아무열헤더나마우스오른쪽단추로클릭하고 Add/Remove Columns ( 열추가 / 제거 ) 를클릭하여표시되는열을변경합니다. 시스템적합성계산은 Integration Peak List( 적분피크목록 ) 표에포함되어있습니다. 이들값에는 k, Tailing factor, Plates, Plates/M 및 Symmetry 가포함됩니다. 또한 MS, MS/MS 및 GC 크로마토그램에대한시스템적합성계산을활성화할수도있습니다. 그림 17 시스템적합성값이있는적분피크표 28 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

29 정성분석의기본배우기 1 작업 8. 시스템적합성값계산 작업 8. 크로마토그램대화식으로적분 (MS) ( 계속 ) 5 기본분석법에대한설정을복원하고 Method Editor( 분석법편집기 ) 창과 Integration Peak List( 적분피크목록 ) 창을닫습니다. a b c d 변경을취소하고기본분석법에서값을복원하려면, Method Editor( 분석법편집기 ) 도구모음에있는 Restore to last saved values from file ( 파일에서마지막저장한값복원 ) 아이콘을클릭합니다. Method Editor( 분석법편집기 ) 창을닫습니다. Peaks List( 피크목록 ) 창의제목을마우스오른쪽단추로클릭하고 Floating( 유동 ) 을클릭합니다. View( 보기 ) > Integration Peak List ( 적분피크목록 ) 를클릭합니다. 바로가기메뉴에있는 Floating ( 유동 ) 명령을한번더클릭하면 Integration Peak List( 적분피크목록 ) 창이원래있던곳에고정됩니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 29

30 1 정성분석의기본배우기작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 이작업에서는크로마토그램에서지정한바로그곳에서스펙트럼을추출합니다. 정성분석프로그램이특정데이터지점에서스펙트럼을추출하나, 여러데이터지점또는범위의평균에서평균스펙트럼을추출합니다. 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 1 크로마토그램을 Walk 하여 Pest - STD 200 MRM.d 의마지막몇개의피크에대한전구이온과생성이온을볼수있습니다. 13 분과 16 분사이의영역을확대합니다. Walk Chromatogram(Walk 크로마토그램 ) 아이콘을사용합니다. 13 분경에서시작되는스펙트럼을검토하고화살표를오른쪽으로움직입니다. a b c d e f g h i j Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서 Pest MRM.D 라인을선택합니다. Method Editor( 분석법편집기 ) 창을닫습니다. MS Spectrum Results( 스펙트럼결과 ) 창을닫습니다. Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서 TIC MRM 크로마토그램을클릭합니다. Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 도구모음에서 Autoscale Y-axis during Zoom( 확대 / 축소시 Y 축크기자동조정 ) 아이콘을클릭합니다. Maximum number of list pane( 최대목록패널수 ) 에서는 1 을선택합니다. 몇몇피크를확대하려면 13 분에있는피크위에서마우스오른쪽단추를클릭하고 16 분으로드래그한다음마우스단추를놓습니다. Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 도구모음에서 Walk Chromatogram(Walk 크로마토그램 ) 아이콘을클릭합니다. Walk Chromatogram(Walk 크로마토그램 ) 커서를 13 분경에서 X 축위로가져가서클릭합니다. 스펙트럼사이를탐색하려면키보드에있는오른쪽및왼쪽화살표를사용합니다. Walk Chromatogram(Walk 크로마토그램 ) 도구는특히 MS/MS 데이터에대해서전구이온과생성이온을식별하는데유용합니다. Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창에서클릭하는각지점에대한스펙트럼이자동으로열리는 Spectrum Preview( 스펙트럼미리보기 ) 창에서자동으표시됩니다. 때때로스펙트럼미리보기창에스펙트럼 2 개가표시되기도합니다. 예를들어, 분의피크가까이에서클릭하는각지점에대한스펙트럼미리보기창에 2 개의스펙트럼이표시됩니다. 30 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

31 정성분석의기본배우기 1 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 그림 18 크로마토그램을 Walk 하여 분의피크에대한 MRM 스펙트럼 2 개보기 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 31

32 1 정성분석의기본배우기작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 2 Pest - STD 200 MRM.d 데이터파일의 5.2 분에서의피크와 14.3 분에서의피크에대한특정데이터지점에서스펙트럼을추출합니다. Comments( 주석 ) 아래에설명된옵션중하나를사용하여 5.2 분에서또는그가까이에서, 그다음에는골짜기점중하나에서스펙트럼을추출합니다 분또는그가까이에서스펙트럼을추출합니다. ( 골짜기점은아직제외 ) 최소 3 개의스펙트럼을표시하도록디스플레이를변경합니다. a b c d e f g h i j Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 도구모음에서 Range Select( 범위선택 ) 아이콘을클릭합니다. Spectrum Preview( 스펙트럼미리보기 ) 창을닫습니다. Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 도구모음에서 Zoom Out ( 축소 ) 아이콘을클릭합니다. 5.2 분에서의피크를확대하려면 4.0 분피크위에서마우스오른쪽단추를클릭하고 6.0 분으로드래그한후놓습니다. 5.2 분근처의피크에서 Comments ( 주석 ) 열에나열된방법중하나로스펙트럼을추출합니다. 5.1 분근처의골짜기점에서스펙트럼을추출합니다. Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 도구모음에서 Zoom Out( 축소 ) 아이콘을클릭합니다. 14 분과 15 분사이의영역을확대합니다 분근처의피크에서 Comments ( 주석 ) 열에나열된방법중하나로스펙트럼을추출합니다. ( 골짜기점스펙트럼은아직추출하지않음 ) 필요하다면 MS Spectrum Results ( 스펙트럼결과 ) 도구모음에있는 Maximum number of list panes( 최대목록패널수 ) 아이콘에서 4 를선택합니다. 확대 / 축소할때는 AutoScale Y-axis during Zoom( 확대 / 축소시 Y 축크기자동조정 ) 아이콘이 켜져있는지 확인합니다. 켜져있으면아이콘의배경이주황색입니다. 다음방법중하나로스펙트럼을추출할수도있습니다. 크로마토그램에서데이터지점을더블클릭합니다. 크로마토그램에서해당데이터지점을클릭한다음, 크로마토그램안의아무곳이나마우스오른쪽단추로클릭합니다. Extract MS Spectrum(MS 스펙트럼추출 ) 을클릭합니다. 그러면 Extract Spectrum ( 스펙트럼추출 ) 대화상자가표시됩니다. Pest - STD 200 MRM.d 파일이선택되어있는지확인하고 Extract Spectrum ( 스펙트럼추출 ) 대화상자에서 Extract( 추출 ) 을클릭합니다. 처음으로스펙트럼을추출할때는해당스펙트럼이포함된 MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 창이나타나고, User Spectra ( 사용자스펙트럼 ) 아래에스트럼의유형과머무름시간이나타납니다. 그후추출된모든스펙트럼이두곳모두에도나타납니다 분근처의피크에서 MS 스펙트럼을추출하면해당피크에서 2 개의변화가발생하기때문에 2 개의스펙트럼이추출됩니다. 32 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

33 정성분석의기본배우기 1 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 그림 분피크로부터의 MRM 스펙트럼 2 개와 14.3 분피크에서 MRM 스펙트럼 2 개가있는기본창 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 33

34 1 정성분석의기본배우기작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 3 Pest - STD 200 MRM.d 데이터파일의 분에서의골짜기점에대한 MS 스펙트럼을추출합니다. Spectrum Preview( 스펙트럼미리보기 ) 를표시합니다. RT 14.3 분의골짜기점에서스펙트럼을추출합니다. 이스펙트럼을 User Spectra ( 사용자스펙트럼 ) 폴더에복사합니다. 6 개의스펙트럼을표시하도록디스플레이를변경합니다. 스펙트럼미리보기를끕니다. a b c d e Spectrum Preview( 스펙트럼미리보기 ) 아이콘을클릭합니다 분근처의골짜기점에서스펙트럼을추출합니다. Spectrum Preview( 스펙트럼미리보기 ) 창에서해당스펙트럼을마우스오른쪽단추로클릭하고 Copy to User Spectra( 사용자스펙트럼에복사 ) 를클릭합니다. 그러면해당스펙트럼이 Data Navigator( 데이터탐색기 ) 에있는 User Spectra( 사용자스펙트럼 ) 부분에복사되어 MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 창에나타납니다. 스펙트럼패널목록에있는아래방향화살표를클릭하고 6 을선택합니다. Spectrum Preview( 스펙트럼미리보기 ) 창을닫습니다. Spectrum Preview( 스펙트럼미리보기 ) 가활성화되어있으면시스템에서 Spectrum Preview( 스펙트럼미리보기 ) 창에수동으로선택한모든스펙트럼을표시니다. 하지만 Data Navigator( 데이터탐색기 ) 의 User Spectra( 사용자스펙트럼 ) 부분에는표시되지않습니다. Spectrum Preview( 스펙트럼미리보기 ) 가켜져있으면새로운스펙트럼추출시 Qualitative Analysis( 정성분석 ) 에서이전스펙트럼을덮어씁니다. Spectrum Preview( 스펙트럼미리보기 ) 모드는크로마토그램내에서스펙트럼을빠르게검토하고몇몇스펙트럼만저장하고자할때유용합니다. 34 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

35 정성분석의기본배우기 1 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 그림 20 Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 및 MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 창 4 Pest - STD 200 MRM.d 데이터파일에대해, 14.3 분위치에있는피크에대한지정된범위내모든지점들의평균이되는스펙트럼을추출합니다. 축소합니다. 크로마토그램도구모음에있는 Range Select( 범위선택 ) 아이콘을사용합니다. 전체피크에걸쳐범위를선택합니다. 나열된옵션하나를사용하여스펙트럼을추출합니다. a b c d 크로마토그램도구모음에서 Range Select( 범위선택 ) 아이콘을클릭합니다 분에위치한피크의왼쪽기준을클릭하여오른쪽기준으로드래그합니다. 오른쪽에있는옵션하나를사용하여평균스펙트럼을추출합니다. MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 창에있는 Maximum number of list panes( 최대목록패널수 ) 에서 2 를선택합니다. 크로마토그램안에서선택한범위를더블클릭하여평균스펙트럼을추출할수있습니다. 또는크로마토그램안의아무곳이나마우스오른쪽단추로클릭하고바로가기메뉴에서 Extract MS Spectrum(MS 스펙트럼추출 ) 을클릭합니다. 평균치인 MRM 스펙트럼 2 개가나타납니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 35

36 1 정성분석의기본배우기작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 그림 21 2 개의평균스펙트럼이표시된 Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 및 MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 5 Pest - STD 200 MRM.d 데이터파일에대하여 5.2 분과 14.3 분피크범위의평균치인스펙트럼을추출합니다. 힌트 : Range Select( 범위선택 ) 아이콘및 Ctrl 키를사용하여절반지점으로부터계산한피크 1 범위를선택합니다. 오른쪽에있는옵션하나를사용하여스펙트럼을추출합니다. a Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 도구모음에서 Zoom Out ( 축소 ) 아이콘을클릭합니다. b Ctrl 키를누릅니다. c 5.2 분피크의왼쪽을클릭하여해당피크의오른쪽으로드래그해서놓습니다. d Ctrl 키에서손가락을뗍니다. e 이옵션이나오른쪽에있는옵션을사용하여평균치스펙트럼을추출합니다. 양쪽피크안에서선택한범위안을더블클릭합니다. 두번째피크는 4 단계에서선택한범위를이미가지고있음을기억하십시오. 스펙트럼을추출하려면크로마토그램안의아무곳이나마우스오른쪽단추로클릭하고 Extract MS Spectrum(MS 스펙트럼추출 ) 을클릭합니다. 그러면 Extract Spectrum( 스펙트럼추출 ) 대화상자가표시됩니다. Extract( 추출 ) 를클릭합니다. 36 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

37 정성분석의기본배우기 1 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 첫번째스펙트럼은 2 개의시간범위모두로부터변화를가지고있습니다. 두번째스펙트럼은 > ** 변화가 5.2 분피크에없기때문에 1 개의시범위만가지고있습니다. 그림 22 크로마토그램안의범위 2 개로부터의평균스펙트럼 2 개 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 37

38 1 정성분석의기본배우기작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 6 Pest - STD 200 MRM.d 에서피크스펙트럼을추출할때마다배경스펙트럼을뺍니다. Data Navigator( 데이터탐색기 ) 안의 User Spectra( 사용자스펙트럼 ) 아래에있는모든스캔을삭제합니다. 피크시작에서의스펙트럼과피크끝스펙트럼의평균인배경스펙트럼을추출합니다. 적분된피크로부터피크스펙트럼하나를추출합니다. a Data Navigator( 데이터탐색기 ) 에서 User Spectra( 사용자스펙트럼 ) 를클릭합니다. User Spectra( 사용자스펙트럼 ) 라인을마우스오른쪽단추로클릭하고 Delete( 삭제 ) 를클릭합니다. b Yes( 예 ) 를클릭합니다. c Method Explorer( 분석법탐색기 ) 에서 Spectrum( 스펙트럼 ) > Extract ( 추출 )(MS/MS) 을선택합니다. d 보이지않는다면 Peak Spectrum Extraction( 피크스펙트럼추출 ) (MS/MS) 탭을클릭합니다. e Peak spectrum background( 피크스펙트럼배경 ) MS/MS 상자에서 Average of spectra at peak start and end( 피크시작및끝스펙트럼의평균 ) 를선택합니다. f Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 도구모음에서 Peak Select( 피크선택 ) 아이콘을클릭합니다. g Chromatograms( 크로마토그램 ) > Integrate( 적분 ) 명령을클릭합니다. h 분의피크를선택합니다. i 마우스오른쪽단추를클릭하고바로가기메뉴에서 Extract Peak Spectrum( 피크스펙트럼추출 ) 을클릭합니다. 이과정의끝에서는추출된모든피크스펙트럼에서지정된배경스펙트럼이자동으로제외됨을주의하십시오. 38 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

39 정성분석의기본배우기 1 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 그림 23 배경피크스펙트럼이제외된피크스펙트럼 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 39

40 1 정성분석의기본배우기작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 작업 9. 크로마토그램에서스펙트럼추출 7 Pest - STD 200 MRM.d 데이터파일에서피크스펙트럼을적분및추출합니다. a Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서 TIC MRM 크로마토그램을클릭합니다. b Chromatograms( 크로마토그램 ) > Integrate and Extract Peak Spectra ( 피크스펙트럼적분및추출 ) 를클릭합니다. 기본적으로 Chromatograms( 크로마토그램 ) > Integrate( 적분 ) (MS/MS) > Results( 결과 ) 탭에서 Clear previous peak spectra( 이전피크스펙트럼지우기 ) 확인란이선택되어있으므로, 이전단계에서수동으로추출된피크스펙트럼이자동으로삭제됩니다. 그림 24 피크스펙트럼적분및추출 8 적분결과및피크스펙트럼을제거합니다. a Pest - Std 200 MRM.d 데이터파일을선택합니다. b Chromatograms( 크로마토그램 ) > Clear Results( 결과지우기 ) > Include Peak Spectra( 피크스펙트럼포함 ) 를클릭합니다. 해당피크스펙트럼을삭제하고싶지않다면대신에 Chromatograms( 크로마토그램 ) > Clear Results( 결과지우기 ) > Only Chromatograms( 크로마토그램만 ) 를클릭합니다. 40 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

41 정성분석의기본배우기 1 작업 10. 주석추가 작업 10. 주석추가 이미지주석이나텍스트주석을다음그래픽창에추가할수있습니다. Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창 MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 창 데이터파일에대한결과를저장하면주석도저장됩니다. 작업 10. 주석추가단계 자세한지침 주석 1 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d 데이터파일을선택합니다. 다른크로마토그램을숨깁니다. a b Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.D 옆에있는확인란을선택합니다. Edit( 편집 ) > Show( 보기 ) > Only Highlighted( 강조표시된항목만 ) 를클릭합니다. 다른데이터파일의크로마토그램은자동으로숨겨집니다. 2 크로마토그램안에서해당위치를선택하여텍스트주석을추가합니다. a b c Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창에서도구모음에있는 Annotation( 주석 ) 도구 ( ) 를클릭합니다. 커서를크로마토그램패널안에서주석을추가하려는위치로움직입니다. 마우스오른쪽단추를클릭하고 Add Text Annotation( 텍스트주석추가 ) 을클릭합니다. 그러면커서가십자모양으로바뀝니다. 이커서를사용하면주석을추가하기위한정확한위치를선택할수있습니다. 주석도구모음은 Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창에있습니다. 또한, MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 창에도주석을추가할수있습니다. 3 Add/Edit Text Annotation( 텍스트주석추가 / 편집 ) 대화상자에서텍스트주석에대한정보를추가합니다. a 주석에대한 Text( 텍스트 ) 를입력합니다. b Text color( 텍스트색상 ) 를선택합니다. c Orientation( 방향 ) 을선택합니다. d Font style( 글꼴스타일 ) 과 Font size( 글꼴크기 ) 를선택합니다. e Anchored( 고정 ) 또는 Floating( 유동 ) 을클릭합니다. Anchored( 고정 ) 를클릭했다면텍스트주석에대한포인터옵션을선택합니다. Floating( 유동 ) 을클릭했다면상대적인위치를변경할수있습니다. 그래픽창에서대화식으로위치를변경하는것이더쉽습니다. f OK( 확인 ) 를클릭합니다. 크로마토그램또는스펙트럼에여러주석을추가할수있습니다. Annotate( 주석 ) 도구모음에있는아이콘들을사용하여모든주석을선택하고주석을삭제하거나편집할수있습니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 41

42 1 정성분석의기본배우기작업 10. 주석추가 작업 10. 주석추가 ( 계속 ) 주석도구모음은주석도구가선택되어있을때만사용가능합니다. 그림 25 Add/Edit Text Annotation( 텍스트주석추가 / 편집 ) 대화상자및 Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창 4 크로마토그램안에서해당위치를선택하여이미지주석을추가합니다. a b 커서를크로마토그램패널안에서주석을추가하려는위치로움직입니다. 마우스오른쪽단추를클릭하고 Add Image Annotation( 이미지주석추가 ) 을클릭합니다. JPG 또는 MOL 이미지파일을추가할수있습니다. 42 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

43 정성분석의기본배우기 1 작업 10. 주석추가 작업 10. 주석추가 ( 계속 ) 5 Add/Edit Text Annotation( 텍스트주석추가 / 편집 ) 대화상자에서텍스트주석에대한정보를추가합니다. a 주석에대한 Text( 텍스트 ) 를입력합니다. b Scale width( 크기조정너비 ) 에 50 을입력합니다. c Lock aspect ratio( 종횡비잠금 ) 확인란을선택합니다. d Floating( 유동 ) 을클릭합니다. 상대적인위치를변경할수있습니다. 그래픽창에서대화식으로위치를변경하는것이더쉽습니다. e OK( 확인 ) 를클릭합니다. f 이미지를크로마토그램의상단오른쪽모서리로이동합니다. Agilent_Logo.tif 파일은 \\MassHunter\Report Templates\ Qual\B.05.00\en-US\Letter 폴더에들어있습니다. 이것은 JPG 파일로변환해야합니다. 크로마토그램또는스펙트럼에여러주석을추가할수있습니다. 그림 26 Add/Edit Image Annotation( 이미지주석추가 / 편집 ) 대화상지및 Chromatogram Results ( 크로마토그램결과 ) 창 6 첫번째피크를확대합니다. 5.5 분의첫번째피크주변영역을확대합니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 43

44 1 정성분석의기본배우기작업 10. 주석추가 작업 10. 주석추가 ( 계속 ) 주석이고정되어있다면고정된위치에그대로유지됩니다. 다른피크를확대하면고정된주석이보이지않을수있습니다. 주석이유동이라면, 주이항상창의상단왼쪽모서리에대해동일한위치에표시됩니다. 그림 27 Add/Edit Image Annotation( 이미지주석추가 / 편집 ) 대화상지및 Chromatogram Results ( 크로마토그램결과 ) 창 7 Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창에서 Range Select ( 범위선택 ) 도구로다시전환합니다. 먼저주석을삭제합니다. a 아이콘을클릭하여모든주석을제거합니다. b Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 도구모음에서 ( 범위선택 ) 아이콘을클릭합니다. 데이터파일결과가있는주석을저장하려면 작업 17. 결과저장 (71 페이지 ) 을참조하십시오. 크로마토그램결과도구모음에서 5 개의도구사이를전환할수있습니다. 추가정보는온라인도움말을참조하십시오. 5 개도구는다음과같습니다. Range Select( 범위선택 ) Peak Select( 피크선택 ) Manual Integration( 수동적분 ) Walk Chromatogram(Walk 크로마토그램 ) Annotation Mouse( 주석마우스 ) 44 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

45 정성분석의기본배우기 1 작업 11. 질량캘리퍼추가 작업 11. 질량캘리퍼추가 작업 11. 질량캘리퍼추가 캘리퍼는한스펙트럼내에서두지점사이의차이를보여줍니다. 또한, MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 창에도캘리퍼를추가할수있습니다. 데이터파일에대한결과를저장하면캘리퍼도저장됩니다. 1 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d 에서피크스펙트럼을적분하고추출합니다. 2 이전작업에서생성한피크스펙트럼에캘리퍼를추가합니다. a b Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.D 옆에있는확인란을선택합니다. Edit( 편집 ) > Show( 보기 ) > Only Highlighted( 강조표시된항목만 ) 를클릭합니다. c Chromatograms( 크로마토그램 ) > Integrate and Extract Peak Spectra ( 피크스펙트럼적분및추출 ) 를클릭합니다. d Method Editor( 분석법편집기 ) 창을닫습니다. a MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 창에서도구모음에있는 Delta Mass Caliper( 델타질량캘리퍼 ) 도구 ( ) 를클릭합니다. b ( 선택사항 ) 캘리퍼도구모음에있는캘리퍼유형에대한 Profile Point to Point( 프로파일포인트투포인트 ) 를선택합니다. c 66 에서 132m/z 로확대합니다. d 커서를스펙트럼패널안에서캘리퍼를추가하려는위치로움직입니다. e 커서를스펙트럼안에있는캘리퍼의끝지점으로드래그합니다. 커서를드래그하면델타질량값이변경됩니다. 마우스단추에서손을떼면해당리퍼가추가됩니다. 커서가화살표로바뀝니다. 이커서를사용하여캘리퍼의시작및끝지점을선택할수있습니다. Profile Point to Point( 프로파일포인트투포인트 ) 는중심데이터에영향이없으므로스펙트럼이중심에있을때는캘리퍼유형을선택할수없습니다. 삼각형 커서는선택한피크의상단으로설정됩니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 45

46 1 정성분석의기본배우기작업 11. 질량캘리퍼추가 작업 11. 질량캘리퍼추가 ( 계속 ) 3 다른색상을사용하도록캘리퍼를수정합니다. a 이전단계에서생성한캘리퍼를클릭합니다. b MS Spectrum Results Caliper(MS 스펙트럼결과캘리퍼 ) 도구모음에서 Caliper Properties( 캘리퍼등록정보 ) 단추 ( ) 를클릭합니다. c ( 선택사항 ) Start X 및 Start Y 값을입력합니다. d Text color( 텍스트색상 ) 를선택합니다. e Font style( 글꼴스타일 ) 과 Font size( 글꼴크기 ) 를선택합니다. f OK( 확인 ) 를클릭합니다. 한스펙트럼에여러캘리퍼를추가할수있습니다. Caliper( 캘리퍼 ) 도구모음에있는아이콘들을사용하여모든캘리퍼를선택하고캘리퍼를삭제하거나편집할수있습니다. 그림 28 Mass Caliper Settings( 질량캘리퍼설정 ) 대화상자및 MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 창 4 적분결과및스펙트럼을삭제합니다. a Chromatograms( 크로마토그램 ) > Clear Results( 결과지우기 ) > Include Peak Spectra( 피크스펙트럼포함 ) 를클릭합니다. b Range Select( 범위선택 ) 도구를클릭합니다. 데이터파일결과가있는캘리퍼를저장하려면 작업 17. 결과저장 (71 페이지 ) 을참조하십시오. 46 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

47 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어정성분석기초설명서 2 찾고식별하기 작업 12. 크로마토그램디콘볼루션으로화합물찾기 48 작업 13. Search Library( 라이브러리검색 ) 알고리즘을사용하여화합물식별 52 작업 14. MRM 으로화합물찾기 (MRM 만 ) 57 작업 15. 적분으로화합물찾기 61 작업 16. 피크스펙트럼에대한공식생성및라이브러리검색 64 작업 17. 결과저장 70 이들작업에서는 GC/MS 데이터파일에서화합물을찾고식별합니다. 각연습과정은 3 개의열이있는표로표시됩니다. 단계 이들일반지침을사용하여스스로프로그램을탐구해보십시오. 자세한지침 도움이필요하거나단계별학습과정을원한다면이용하십시오. 주석 연습과정의각단계에대한추가정보및팁을제공합니다. 47

48 2 찾고식별하기작업 12. 크로마토그램디콘볼루션으로화합물찾기 작업 12. 크로마토그램디콘볼루션으로화합물찾기 FindCompounds( 화합물찾기 ) 알고리즘은 GC/MS 데이터에서화합물을식별하고각화합물에대해깨끗한 MS 스펙트럼을생성합니다. 이기능은복잡한데이터로부터손쉽게정보를 캐낼수있는 방법입니다. Scan( 스캔 ), Product Ion( 생성이온 ) 스캔또는 Neutral Loss( 중성손실 ) 스캔모드에서얻은 GC/MS 시료데이터에서크로마토그램디콘볼루션알고리즘에의해서만 Find Compounds( 화합물찾기 ) 를사용할수있습니다. 이작업은정확한질량데이터를가지고크로마토그램디콘볼루션을통해화합물을찾는방법을보여줍니다. 또한, 먼저추출창을변경한후에단질량데이터를가지고크로마토그램디콘볼루션을통해화합물을찾을수도있습니다. 작업 12. 크로마토그램디콘볼루션을사용하여화합물찾기 (GC/MS) 1 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d 데이터파일에대한 TIC 을엽니다. a b 프로그램이열리지않는다면 MassHunter Qualitative Analysis( 정성분석 ) 아이콘을더블클릭합니다. 그렇지않다면 File( 파일 ) > Open Data File( 데이터파일열기 ) 을클릭합니다. GC 예제데이터파일폴더안에있는 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d 데이터파일을클릭합니다. c Load result data( 결과데이터로드 ) 확인란을지우고 Open( 열기 ) 을클릭합니다. 크로마토그램디콘볼루션알고리즘에의한화합물찾기는 GC/QQQ 및 GC/Q-TOF 데이터파일과모두작동합니다. 그림 29 Pest Scan.d 로부터의 TIC 크로마토그램 2 GC 데이터와작동되도록사용자인터페이스를구성합니다. 작업 2. GC/MS 데이터용으로사용자인터페이스구성 (12 페이지 ) 의지침을따릅니다. 이들예제의경우, GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) 워크플로를로드합니다. 48 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

49 찾고식별하기 2 작업 12. 크로마토그램디콘볼루션으로화합물찾기 작업 12. 크로마토그램디콘볼루션을사용하여화합물찾기 (GC/MS) 3 크로마토그램디콘볼루션알고리즘을사용하여화합물을찾습니다. Agile 적분기를선택합니다. SNR 임계값 20 을입력합니다. Left m/z delta( 왼쪽 m/z 델타 ) 및 Right m/z delta( 오른쪽 m/z 델타 ) 값에 100ppm 을입력합니다. a b c d Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 Find( 찾기 ) Compounds( 화합물 )> Find by Chromatogram Deconvolution( 크로마토그램디콘볼루션으로찾기 ) 을선택합니다. Peak( 피크 ) 필터아래의 Settings( 설정 ) 탭에서 SNR threshold(snr 임계값 ) 에 20 을입력합니다. m/z delta units(m/z 델타단위 ) 에대해서는 PPM 을선택합니다. Left m/z delta( 왼쪽 m/z 델타 ) 에 100을, Right m/z delta( 오른쪽 m/z 델타 ) 에 100 을입력합니다. Find by Chromatogram Deconvolution( 크로마토그램디콘볼루션으로찾기 ) 부분은 GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) 부분에도있습니다. 단위질량데이터가있다면 Left m/z delta( 왼쪽 m/z 델타 ) 값은 0.3 AMU 를, Right m/z delta( 오른쪽 m/z 델타 ) 값은 0.7 AMU 를입력합니다. 화합물을찾은후에화합물이강조표시되어있을때 Compounds ( 화합물 ) > Extract Complete Result Set( 전체결과세트추출 ) 메뉴항목을사용하여이에대한전체결과세트를추출할수있습니다. 그림 30 Find by Chromatogram Deconvolution( 크로마토그램디콘볼루션으로찾기 ) 부분의 Settings( 설정 ) 탭 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 49

50 2 찾고식별하기작업 12. 크로마토그램디콘볼루션으로화합물찾기 작업 12. 크로마토그램디콘볼루션을사용하여화합물찾기 (GC/MS) 선택하여 EIC, MS 스펙트럼및 MS/MS 스펙트럼을추출합니다. e Results( 결과 ) 탭을클릭합니다. f Extract EIC(EIC 추출 ), Extract ECC(ECC 추출 ), Extract cleaned spectrum( 깨끗한스펙트럼추출 ) 및 Extract raw spectrum( 원시스펙트럼추출 ) 확인란을선택합니다. g 을클릭하여데이터파일에대해 Find Compounds by Chromatogram Deconvolution( 크로마토그램디콘볼루션으로화합물찾기 ) 알고리즘을실행합니다. h 필요하다면 View( 보기 ) > Compound List( 화합물목록 ) 명령을클릭합니다. 정성분석프로그램이이들조건에서 4 개의화합물을찾습니다. 데이터파일이인덱스화되지않았다면이알고리즘을실행하면시간이오래걸릴수있습니다. 4 화합물을검사합니다. 그림 31(51 페이지 ) 을참조하십시오. a b c d MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 도구모음에서 Maximum number of list panes( 최대목록패널수 ) 를 2 로선택합니다. Compound List( 화합물목록 ) 창에서 Hide Empty Columns( 빈열숨기기 ) 아이콘을클릭합니다. Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서첫번째화합물을클릭합니다. Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창이선택되어있을때화살표키를사용하여화합물을전환하십시오. 스펙트럼 2 개를모두표시하면하나의화합물에대한모든정보를편리하게볼수있습니다. 깨끗한스펙트럼과원시스펙트럼이모두표시됩니다. 50 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

51 찾고식별하기 2 작업 12. 크로마토그램디콘볼루션으로화합물찾기 작업 12. 크로마토그램디콘볼루션을사용하여화합물찾기 (GC/MS) 그림 31 크로마토그램디콘볼루션결과로화합물찾기 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 51

52 2 찾고식별하기작업 13. Search Library( 라이브러리검색 ) 알고리즘을사용하여화합물식별 작업 13. Search Library( 라이브러리검색 ) 알고리즘을사용하여화합물식별 이작업에서는 작업 12. 크로마토그램디콘볼루션으로화합물찾기 (48 페이지 ) 에서발견되는화합물에대한공식을식별및생성합니다. NIST08.l 라이브러리를구입했거나 demo.l 라이브러리를사용한다면이작업을실행할수있습니다. 라이브러리가 2 개있다면 2 개모두선택할수도있습니다. 52 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

53 찾고식별하기 2 작업 13. Search Library( 라이브러리검색 ) 알고리즘을사용하여화합물식별 작업 13. Search Library( 라이브러리검색 ) 알고리즘을사용하여화합물식별 1 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d 데이터파일에서모든화합물에대해라이브러리검색을실행합니다. a b c d e f Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.D 데이터파일에있는화합물을강조표시합니다. Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 Identify Compounds( 화합물식별 ) > Search Unit Mass Library( 단위질량라이브러리검색 ) 를클릭 합니다. Settings( 설정 ) 탭에서 Add Library ( 라이브러리추가 ) 단추를클릭합니다. demo.l 라이브러리를선택하고 OK( 확인 ) 단추를클릭합니다. Settings( 설정 ) 탭에서 Add Library ( 라이브러리추가 ) 단추를클릭합니다. NIST08.l 라이브러리를선택하고 OK( 확인 ) 단추를클릭합니다. Search Results( 검색결과 ) 탭을클릭합니다. ( 선택사항 ) Multi-Library search type ( 다중라이브러리검색유형 ) 에서 Stop When Found( 찾으면중단 ) 를선택합니다. g 기본메뉴에서 Identify( 식별 ) > Search Library for Compounds( 화합물에대해라이브러리검색 ) 를클릭합니다. 또는 Search Library for Compounds( 화합물에대해라이브 러리검색 ) 아이콘을클릭하여알고리즘을실행할수도있습니다. h 이제 View( 보기 ) > Difference Results ( 차이점결과 ) 를클릭합니다. i View( 보기 ) > Structure Viewer( 구조뷰어 ) 를클릭합니다. j 필요하다면 View( 보기 ) > Compound Identification Results( 화합물식별결과 ) 를클릭하여이창을표시합니다. k 필요하다면 Compound Identification Results( 화합물식별결과 ) 창에대한탭을클릭합니다. 이창은 Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창과탭으로결합되어있습니다. 또한, Method Explorer( 분석법탐색기 ) 에서 GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) > Identify by Library Search( 라이브러리검색으로식별 ) 를클릭해도됩다. Method Editor( 분석법편집기 ) 창에서같은부분이표시됩니다. Demo.l 및 Nist08 이 \MassHunter\ Library 폴더에설치되어있어야합니다. NIST08.l 라이브러리를검색한후에는많은화합물이식별됩니다. NIST08.l 라이브러리가없다면해당되는경우두번째라이브러리를선택합니다. 2 개이상의라이브러리를선택했고 Stop When Found( 찾으면중단 ) 를선택하면, 라이브러리검색알고리즘이목록에서첫번째라이브러리를검색합니다. 화합물이식별되면중단됩니다. 화합물이식별되지않았다면화합물이식별되거나마지막라이브러리가검색될때까지다음라이브러리를검색합니다. Library Editor( 라이브러리편집기 ) 프로그램을사용하여 Search Unit Mass Library( 단위질량라이브러리검색 ) 알고리즘을사용할라이브러리를수정합니다. 이프로그램은 Agilent MassHunter Quantitative Analysis( 정량분석 ) 프로그램과함께설치되어있습 니다. 아이콘을클릭하면이프로그램이시작됩니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 53

54 2 찾고식별하기작업 13. Search Library( 라이브러리검색 ) 알고리즘을사용하여화합물식별 작업 13. Search Library( 라이브러리검색 ) 알고리즘을사용하여화합물식별 2 Compound List( 화합물목록 ) 창및 Compound Identification Results( 화합물식별결과 ) 창에 Spectral Library Results( 스펙트럼라이브러리결과 ) 열을표시합니다. a b Compound List( 화합물목록 ) 도구모음과 Compound Identification Results( 화합물식별결과 ) 도구모음에서 Show Library Search Columns( 라이브러리검색열보기 ) 단추 ( ) 를클릭합니다. Compound List( 화합물목록 ) 도구모음과 Compound Identification Results( 화합물식별결과 ) 창에서 Hide Empty Columns( 빈열숨기기 ) 단추 ( ) 를클릭합니다. 그림 32 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.D 데이터파일과라이브러리검색결과내의화합물 54 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

55 찾고식별하기 2 작업 13. Search Library( 라이브러리검색 ) 알고리즘을사용하여화합물식별 작업 13. Search Library( 라이브러리검색 ) 알고리즘을사용하여화합물식별 3 Compound Details View( 화합물세부사항보기 ) 로전환하여화합물을검토합니다. a b 기본도구모음에서를클릭합니다. Compound Fragment Spectrum Results( 화합물토막스펙트럼결과 ) 창을닫습니다. 4 Compound Details View( 화합물세부사항보기 ) 에서결과를검토합니다. a b Compound Chromatogram Results( 화합물크로마토그램결과 ) 창에서 Overlaid( 오버레이드 ) 아이콘을클릭합니다. Compound Identification Results( 화합물식별결과 ) 창에서결과를확장합니다. 온라인도움말에서 Compound Details View( 화합물세부사항보기 ) 에대한추가정보를볼수있습니다. Compound Details View ( 화합물세부사항보기 ) 는 All Ions( 모든이온 ) 모드에서입수한데이터파일을통한 Find by Formula( 공식으로찾기 ) 알고리즘의결과를볼때매우유용합니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 55

56 2 찾고식별하기작업 13. Search Library( 라이브러리검색 ) 알고리즘을사용하여화합물식별 작업 13. Search Library( 라이브러리검색 ) 알고리즘을사용하여화합물식별 그림 33 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.D 데이터파일내의화합물을보여주는화합물세부사항보기 5 Navigator View( 탐색기보기 ) 로전환합니다. 기본도구모음에서단추를클릭합니다. 6 데이터파일을닫습니다. a File( 파일 ) > Close Data File( 데이 터파일닫기 ) 을클릭합니다. b No( 아니요 ) 를클릭합니다. 이들결과를저장하려면 작업 17. 결과저장 (70 페이지 ) 을참조하십시오. 56 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

57 찾고식별하기 2 작업 14. MRM 으로화합물찾기 (MRM 만 ) 작업 14. MRM 으로화합물찾기 (MRM 만 ) Find Compounds by MRM(MRM 으로화합물찾기 ) 알고리즘은 Triple Quadrupole( 삼중사중극자 ) 의 MRM 데이터에서화합물을식별합니다. 이알고리즘은 MRM 변화를사하여화합물을검색합니다. 수집분석법내의모든화합물이추출되어 Compound List( 화합물목록 ) 에표시됩니다. 화합물은크로마토그램적분결과를바탕으로제거되지않습니다. MRM 변화를사용하여입수한데이터에대해서만 MRM 으로화합물찾기알고리즘을사용할수있습니다. 데이터파일이 MRM 데이터파일이라면 MRM 알고리즘이데이터파일에서발견된정보를사용합니다. 작업 14. MRM 으로화합물찾기 (MRM 만해당 ) 1 Pest - STD 200 MRM.d 데이터파일에대해 TIC 를엽니다. a b 프로그램이열리지않는다면 MassHunter Qualitative Analysis( 정성분석 ) 아이콘을더블클릭합니다. 그렇지않다면 File( 파일 ) > Open Data File( 데이터파일열기 ) 을클릭합니다. GC 예제데이터파일폴더안에있는 Pest - STD 200 MRM.d 데이터파일을클릭합니다. c Load result data( 결과데이터로드 ) 확인란을지우고 Open( 열기 ) 을클릭합니다. GC/QQQ 데이터로작업할때는 General( 일반 ) 워크플로를사용하십시오. GC/Q-TOF 데이터로작업할때는 General( 일반 ) 워크플로나 GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) 워크플로를사용할수있습니다. 그림 34 Pest - STD 200 MRM.d 의 TIC 크로마토그램 2 GC 데이터와작동되도록사용자인터페이스를구성합니다. 작업 2. GC/MS 데이터용으로사용자인터페이스구성 (12 페이지 ) 의지침을따릅니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 57

58 2 찾고식별하기작업 14. MRM 으로화합물찾기 (MRM 만 ) 작업 14. MRM 으로화합물찾기 (MRM 만해당 ) 3 MRM 알고리즘을사용하여화합물을찾습니다. a b Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 Find( 찾기 ) Compounds( 화합물 )> Find by MRM(MRM 으로찾기 ) 을선택합니다. Group transitions by compound name( 화합물이름으로변화그룹화 ) 단추를클릭합니다. c Integrator( 적분기 ) 탭을클릭합니다. d Agile 적분기를선택합니다. 화합물을찾고자하는크로마토그램의영역을선택할수있습니다. 화합물을찾은후에화합물이강조표시되어있을때 Compounds ( 화합물 ) > Extract Complete Result Set( 전체결과세트추출 ) 메뉴항목을사용하여이에대한전체결과세트를추출할수있습니다. 그림 35 Method Editor( 분석법편집기 ) 의 Find by MRM(MRM 으로찾기 ) 부분에있는 Integrator( 적분기 ) 탭 e 을클릭하여데이터파일에대해 Find Compounds by MRM(MRM 으로화합물찾기 ) 알고리즘을실행합니다. f 필요하다면 View( 보기 ) > Compound List( 화합물목록 ) 명령을클릭합니다. g 필요하다면 View( 보기 ) > Compound Identification Results( 화합물식별결과 ) 를클릭합니다. 정성분석프로그램이이들조건에서 28 개의화합물을찾습니다. 58 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

59 찾고식별하기 2 작업 14. MRM 으로화합물찾기 (MRM 만 ) 작업 14. MRM 으로화합물찾기 (MRM 만해당 ) 4 화합물을검사합니다. 그림 36(60 페이지 ) 을참조하십시오. a b c d MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 도구모음에서 Maximum number of list panes( 최대목록패널수 ) 를 2 로선택합니다. Compound List( 화합물목록 ) 도구모음과 Compound Identification Results( 화합물식별결과 ) 도구모음에서 Automatically Show Columns( 자동으로열보기 ) 아이콘을클릭합니다. Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서첫번째화합물을클릭합니다. Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창이선택되어있을때화살표키를사용하여화합물을전환하십시오. Compound Identification Results ( 화합물식별결과 ) 창에서전구이온은 Precursor (Acq Method) ( 전구 ( 수집분석법 )) 열에표시되며, 생성이온은 Product (Acq Method)( 생 ( 수집분석법 )) 열에표시됩니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 59

60 2 찾고식별하기작업 14. MRM 으로화합물찾기 (MRM 만 ) 작업 14. MRM 으로화합물찾기 (MRM 만해당 ) 그림 36 MRM 으로찾기결과 5 데이터파일을닫습니다. a File( 파일 ) > Close Data File( 데이 터파일닫기 ) 을클릭합니다. b Close( 닫기 ) 를클릭합니다. 이들결과를저장하려면 작업 17. 결과저장 (70 페이지 ) 을참조하십시오. 60 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

61 찾고식별하기 2 작업 15. 적분으로화합물찾기 작업 15. 적분으로화합물찾기 작업 15. 적분으로화합물찾기 Find Compounds by Integration( 적분으로화합물찾기 ) 알고리즘은적분결과에따라화합물을식별합니다. 적분기에서식별한각피크에대해화합물이생됩니다. 1 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.D 데이터파일에대한 TIC 를엽니다. a b 프로그램이열리지않는다면 MassHunter Qualitative Analysis( 정성분석 ) 아이콘을더블클릭합니다. 그렇지않다면 File( 파일 ) > Open Data File( 데이터파일열기 ) 을클릭합니다. GC 예제데이터파일폴더안에있는 Pest - STD 200 MRM.d 데이터파일을클릭합니다. c Load result data( 결과데이터로드 ) 확인란을지우고 Open( 열기 ) 을클릭합니다. GC/QQQ 데이터로작업할때는 General( 일반 ) 워크플로를사용하십시오. GC/Q-TOF 데이터로작업할때는 General( 일반 ) 워크플로나 GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) 워크플로를사용할수있습니다. 그림 37 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d 의 TIC 크로마토그램 2 GC 데이터와작동되도록사용자인터페이스를구성합니다. 3 적분알고리즘을사용하여화합물을찾습니다. 작업 2. GC/MS 데이터용으로사용자인터페이스구성 (12 페이지 ) 의지침을따릅니다. a Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 Find( 찾기 ) Compounds( 화합물 )> Find by Integration( 적분으로찾기 ) 을선택합니다. b MS/MS (GC) 적분기를선택합니다. 화합물을찾고자하는크로마토그램의영역을선택할수있습니다. 화합물을찾은후에화합물이강조표시되어있을때 Compounds ( 화합물 ) > Extract Complete Result Set( 전체결과세트추출 ) 메뉴항목을사용하여이에대한전체결과세트를추출할수있습니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 61

62 2 찾고식별하기작업 15. 적분으로화합물찾기 작업 15. 적분으로화합물찾기 그림 38 Method Editor( 분석법편집기 ) 의 Find by Integration( 적분으로찾기 ) 부분에있는 Integrator( 적분기 ) 탭 c 을클릭하여데이터파일에대해 Find Compounds by Integration ( 적분으로화합물찾기 ) 알고리즘을실행합니다. d 필요하다면 View( 보기 ) > Compound List( 화합물목록 ) 명령을클릭합니다. 정성분석프로그램이이들조건에서 6 개의화합물을찾습니다. 4 화합물을검사합니다. 그림 36(60 페이지 ) 을참조하십시오. a b c d MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 도구모음에서 Maximum number of list panes( 최대목록패널수 ) 를 2 로선택합니다. Compound List( 화합물목록 ) 창에서 Automatically Show Columns( 자동으로열보기 ) 아이콘을클릭합니다. Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서첫번째화합물을클릭합니다. Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창이선택되어있을때화살표키를사용하여화합물을전환하십시오. 62 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

63 찾고식별하기 2 작업 15. 적분으로화합물찾기 작업 15. 적분으로화합물찾기 그림 39 적분으로찾기결과 5 데이터파일을닫습니다. a File( 파일 ) > Close Data File( 데이 터파일닫기 ) 을클릭합니다. b Close( 닫기 ) 를클릭합니다. 이들결과를저장하려면 작업 17. 결과저장 (70 페이지 ) 을참조하십시오. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 63

64 2 찾고식별하기작업 16. 피크스펙트럼에대한공식생성및라이브러리검색 작업 16. 피크스펙트럼에대한공식생성및라이브러리검색 이작업에서는먼저 GC/Q-TOF 데이터파일에서피크스펙트럼을적분하고추출합니다. 그런다음, 각피크스펙트럼에대해가능한공식을생성합니다. 작업 16. 피크스펙트럼에대한공식생성및라이브러리검색 1 MSD_mix_4stds_DB_spl200_03.d 데이터파일에대한 TIC 을엽니다. 2 피크스펙트럼을적분및추출합니다. a b 프로그램이열리지않는다면 MassHunter Qualitative Analysis( 정성분석 ) 아이콘을더블클릭합니다. 그렇지않다면 File( 파일 ) > Open Data File( 데이터파일열기 ) 을클릭합니다. GC 예제데이터파일폴더안에있는 MSD_mix_4stds_DB_spl200_03.d 데이터파일을클릭합니다. c Load result data( 결과데이터로드 ) 확인란을지우고 Open( 열기 ) 을클릭합니다. a b c d e Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 Chromatogram( 크로마토그램 ) > Integrate( 적분 )(MS) 부분을클릭합니다. Peak Filters( 피크필터 ) 탭을클릭합니다. Peak height( 피크높이 ) 단추를클릭합니다. Relative height( 상대높이 ) 확인란 을선택합니다. Limit (by height) to the largest( 최대치높이로제한 ) 확인란을선택하고 4 를입력합니다. f Chromatograms( 크로마토그램 ) > Integrate and Extract Peak Spectra ( 피크스펙트럼적분및추출 ) 를클릭합니다. Load result data( 결과데이터로드 ) 확인란이없다면데이터파일에저장된결과가없는것입니다. 결과저장방법에대한지침은 작업 17. 결과저장 (70 페이지 ) 에서참조하십시오. 64 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

65 찾고식별하기 2 작업 16. 피크스펙트럼에대한공식생성및라이브러리검색 작업 16. 피크스펙트럼에대한공식생성및라이브러리검색 3 각피크스펙트럼에대한공식을생성합니다. Spectrum Identification Results List( 스펙트럼식별결과목록 ) 를봅니다. MS Spectrum Results( 스펙트럼결과 ) 창을닫습니다. 힌트 : 그림 41 에서와동일한결과를얻으려면 Common organic molecules( 공통유기분자 ) 를 Isotope( 동위원소 ) 모델로선택했는지확인합니다. a b c d e f g Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 Identify Compounds( 화합물식별 ) > Generate Formulas( 공식생성 ) 를클릭합니다. Method Editor( 분석법편집기 ) 창에서 Charge State( 전하상태 ) 탭을클릭하고 Common organic molecules( 공통유기분자 ) 를 Isotope( 동위원소 ) 모델로선택합 니다. Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서 User Spectra( 사용자스펙트럼 ) 부분에있는모든스펙트럼을강조표시합니다. Identify( 식별 ) > Generate Formulas from Spectrum Peaks( 스펙트럼피크에서공식생성 ) 명령이나 Generate Formulas from Spectrum Peaks( 스펙트럼피크에서공식생 성 ) 단추를클릭하여알고리즘을실행합니다. 필요하다면스펙트럼식별결과아이콘을클릭하거나, View( 보기 ) > Spectrum Identification Results( 스펙트럼식별결과 ) 명령을클릭합니다. Spectrum Identification Results( 스펙트럼식별결과 ) 창에서 Automatically Show Columns( 자동으로열보기 ) 단추를클릭합니다. Spectrum Identification Results( 스펙트럼식별결과 ) 창에있는 Hide Empty Columns( 빈열숨기기 ) 아이콘인를클릭합니다. h C6 H13 을 Best( 최상 ) 결과로선택합니다. i 해당행에대하여표를확장합니다. j Method Editor( 분석법편집기 ) 창을닫습니다. k MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 창에서많은피크위에표시된공식과이온계열을검토합니다. 모든공식과이온계열은스펙트럼과동일한색상니다. 적절한 m/z 로확대하면스펙트럼플롯에서예측되는동위원소존재비를볼수있습니다. 추가정보는온라인도움말에서참조하십시오. Method Editor( 분석법편집기 ) 도구모음의실행아이콘은때때로일련의가능한작업중에서하나를선택할수있게해줍니다. 예를들어, 이부분에서 Run( 실행 ) 아이콘을클릭하면 2 가지작업이가능합니다. 화살표를클릭하면가능한작업목록이나타나며, 어떤작업을실행할지선택할수있습니다. 목록에서다른작업을선택하면기본작업이변경됩니다. Run( 실행 ) 단추를클릭하기만하면기본작업이실행됩니다. 근접한열을분리하는선을드래그해서열의너비를변경할수있습니다. 열의헤더를드래그해서열을이동할수도있습니다. 표안에서바로가기메뉴에있는 Remove column( 열제거 ) 을클릭하면열을삭제할수있습니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 65

66 2 찾고식별하기작업 16. 피크스펙트럼에대한공식생성및라이브러리검색 작업 16. 피크스펙트럼에대한공식생성및라이브러리검색 그림 40 피크 1 에서 4 에대한공식생성결과 4 피크스펙트럼 1 에서 4 에대하여라이브러리검색을실행하십시오. a b c Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창에서 User Spectra( 사용자스펙트럼 ) 를클릭합니다. Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 Identify Compounds( 화합물식별 ) > Search Unit Mass Library( 단위질량라이브러리검색 ) 를클릭 합니다. 유효한라이브러리가선택되어있는지확인합니다. d 기본메뉴에서 Identify( 식별 ) > Search Library for Spectra( 라이브러리에서스펙트럼검색 ) 를클릭합니다. e Method Editor( 분석법편집기 ) 창을닫습니다. Method Explorer( 분석법탐색기 ) 에서부분하나를클릭하면 Method Editor( 분석법편집기 ) 가자동으로열립니다. 66 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

67 찾고식별하기 2 작업 16. 피크스펙트럼에대한공식생성및라이브러리검색 작업 16. 피크스펙트럼에대한공식생성및라이브러리검색 5 보이는열을수정합니다. a Spectrum Identification Results( 스펙트럼식별결과 ) 창을마우스오른쪽단추로클릭하고 Add/Remove Columns( 열추가 / 제거 ) 를클릭합니다. (Enhanced)( 향상된 ) Add/Remove Columns( 열추가 / 제거 ) 대화상자에서표시하려는열을선택합니다. OK( 확인 ) 를클릭합니다. b Method Editor( 분석법편집기 ) 창을닫습니다. c Spectrum Identification Results( 스펙트럼식별결과 ) 창에있는 Hide Empty Columns( 빈열숨기기 ) 아이 콘인 를클릭합니다. d MS Spectrum Results(MS 스펙트럼 결과 ) 창에서각피크위에표시된 공식과이온계열을검토합니다. Remove Column( 열제거 ) 명령을사용하여데이터가포함된열을제거하면, Automatically Show Columns( 자동으로열보기 ) 기능이켜져있는경우소프트웨어에서이열을다시표합니다. 해당분석법의 Combine Identification Results( 식별결과결합 ) 부분에서 LibSearch( 라이브러리검색 ) 알고리즘이심하게편중됩니다. 수동으로최상의 MFG 결과를선택하거나식별결과의결합방법을변경할수있습니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 67

68 2 찾고식별하기작업 16. 피크스펙트럼에대한공식생성및라이브러리검색 작업 16. 피크스펙트럼에대한공식생성및라이브러리검색 그림 41 첫번째피크스펙트럼의라이브러리검색및공식생성결과 68 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

69 찾고식별하기 2 작업 16. 피크스펙트럼에대한공식생성및라이브러리검색 작업 16. 피크스펙트럼에대한공식생성및라이브러리검색 6 MS Peaks One(MS 피크 1) 창에서각스펙트럼에대한결과를검토합니다. a b c d e View( 보기 ) >MS Spectrum Peak List 1(MS 스펙트럼피크목록 1) 을클릭합니다. 마우스오른쪽단추를클릭하고 Add/Remove Columns( 열추가 / 제거 ) 를클릭합니다. 그림 42에보이는열이 Show these columns( 이들열보기 ) 목록에있는지확인합니다. Ion Type( 이온유형 ) 열로정렬합니다. 이온유형이 Fragment Ion( 토막이온 ) 이라면 Formula & Ion Species ( 공식 & 이온계열 ) 가 MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 창안의각피크에서녹색으로표시니다. 토막이온은 MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 창에녹색으로표시됩니다. Ion Type( 이온유형 ) 은 Molecular Ion( 분자이온 ), Fragment Ion( 토막이온 ) 또는비워둘수있습니다. Fragment Ion ( 토막이온 ) 이라면 Loss Formula( 손실방정식 ) 및 Loss Mass( 손실질량 ) 에서분자이온으로부터해당이온에이르게하는공식과질량을표시합니다. Formula & Ion Species( 공식 & 이온계열 ) 에서는해당이온에대한공식과온계열을표시합니다. 그림 42 Ion Type( 이온유형 ), Loss Formula( 손실방정식 ), Loss Mass( 손실질량 ) 및 Formula & Ion Species( 공식 & 이온계열 ) 열이있는 MS Peaks One(MS 피크 1) 표 7 ( 선택사항 ) 데이터파일을닫습니다. 다음작업으로진행하여결과저장방법을배울수있습니다. a File( 파일 ) > Close Data File( 데이터파일닫기 ) 을클릭합니다. b Close( 닫기 ) 를클릭합니다. 이들결과를저장하려면 작업 17. 결과저장 (70 페이지 ) 을참조하십시오. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 69

70 2 찾고식별하기작업 17. 결과저장 작업 17. 결과저장 이작업에서는현재데이터파일에대한결과를저장할수있습니다. 작업 17. 결과저장단계 자세한지침 주석 1 현재데이터파일에대한결과를저장하고데이터파일을닫을수있습니다. a b File( 파일 ) > Save Results( 결과저장 ) 를클릭합니다. File( 파일 ) > Close Data File( 데이터파일닫기 ) 을클릭합니다. 하나의데이터파일로는하나의결과세트만저장할수있습니다. 이미현재데이터파일로결과를저장한경우에는 File( 파일 ) > Save Results( 결과저장 ) 를클릭하면이들결과가덮어쓰기됩니다. 2 데이터파일을열고결과를로드합니다. a b File( 파일 ) > Open Data File( 데이터파일열기 ) 을클릭합니다. 그러면 Open Data File( 데이터파일열기 ) 대화상자가열립니다. 데이터파일을선택합니다. 이예제의경우에는 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d 데이터파일을선택합니다. c Load result data( 결과데이터로드 ) 확인란을선택합니다. d Open( 열기 ) 단추를클릭합니다. 70 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

71 찾고식별하기 2 작업 17. 결과저장 작업 17. 결과저장 그림 43 Data File( 데이터파일 ) 대화상자를엽니다. Load result data( 결과데이터로드 ) 확인란이선택되어있습니다. 3 결과를검사합니다. a Spectrum Identification Results( 스펙 트럼식별결과 ) 창을클릭합니다. b 결과를검토합니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 71

72 2 찾고식별하기작업 17. 결과저장 작업 17. 결과저장 그림 44 첫번째피크스펙트럼의라이브러리검색및공식생성결과 4 데이터파일을닫습니다. a File( 파일 ) > Close Data File( 데이 터파일닫기 ) 을클릭합니다. b Close( 닫기 ) 를클릭합니다. 72 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

73 찾고식별하기 2 작업 17. 결과저장 작업 17. 결과저장 5 데이터파일을다시열고결과를로드하지않습니다. a b File( 파일 ) > Open( 열기 ) 을클릭합니다. 그러면 Open Data File( 데이터파일열기 ) 대화상자가열립니다. 데이터파일을선택합니다. 이예제의경우에는 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d 데이터파일을선택합니다. c Load result data( 결과데이터로드 ) 확인란을선택해제합니다. d Open( 열기 ) 단추를클릭합니다. 결과를로드하지않는경우, 데이터파일하나를열면기본적으로 TIC 가열립니다. 선택한분석법확인란에서 'File Open( 파일열기 )' Run( 실행 ) 을선택하면그대신 File Open( 파일열기 ) 작업이실행됩니다. 추가정보는온라인도움말을참조하십시오. 그림 45 첫번째피크스펙트럼의라이브러리검색및공식생성결과 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 73

74 2 찾고식별하기작업 17. 결과저장 작업 17. 결과저장 6 데이터파일을닫습니다. a File( 파일 ) > Close Data File( 데이 터파일닫기 ) 을클릭합니다. b Close( 닫기 ) 를클릭합니다. 74 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

75 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어정성분석기초설명서 3 워크플로사용, 내보내기및인쇄 작업 18. 일반워크플로를사용하여정성분석분석법설정및 실행 76 작업 19. GC/Q-TOF 성분스크리닝워크플로를사용한분석법설정 및실행 81 작업 20. CEF 파일내보내기 85 작업 21. 분석보고서인쇄 87 작업 22. 화합물보고서인쇄 92 이들작업에서는정성분석분석법을설정및실행하는방법을배웁니다. 그런다음데이터파일을열때자동화된분석법내에서작업을실행합니. 이들예제에는 2 가지워크플로가사용됩니다. 추가정보는 워크플로 (103 페이지 ) 에서확인하십시오. General( 일반 ) 워크플로는 GC/QQQ, GC/Q-TOF 및 LC/MS 데이터를지원합니다. GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) 워크플로는 GCQ-TOF 데이터를지원합니다. 각연습과정은 3 개의열이있는표로표시됩니다. 단계 이들일반지침을사용하여스스로프로그램을탐구해보십시오. 자세한지침 도움이필요하거나단계별학습과정을원한다면이용하십시오. 주석 연습과정의각단계에대한추가정보및팁을제공합니다. 75

76 3 워크플로사용, 내보내기및인쇄작업 18. 일반워크플로를사용하여정성분석분석법설정및실행 작업 18. 일반워크플로를사용하여정성분석분석법설정및실행 처음으로정성분석프로그램을사용하면 method default.m 이로드됩니다. 열린분석법을변경하고저장하거나, 새로운분석법을열고변경한다음저장할수있습니다. method default.m 은덮어쓸수없습니다. 또한, 데이터파일을열때분석법에서특정작업을실행하도록설정할수있습니다. 데이터파일을열때해당데이터파일과함께저장된결과를성하는데사용한분석법을로드할수도있습니다. 이분석법은해당데이터파일과함께결과를저장할때마다자동저장됩니다. General( 일반 ) 워플로는 GC/MS 또는 LC/MS 데이터파일과함께사용할수있습니다. 작업 18. 일반워크플로를사용하여정성분석분석법설정및실행 1 Pest - STD 200 MRM.d 데이터파일에대해 TIC 를엽니다. 2 GC 데이터와작동되도록사용자인터페이스를구성합니다. 3 TIC 크로마토그램을추출하도록분석법을설정합니다. MS 데이터에대한 TIC 크로마토그램을지정합니다. a b 프로그램이열리지않는다면 MassHunter Qualitative Analysis( 정성분석 ) 아이콘을더블클릭합니다. 그렇지않다면 File( 파일 ) > Open Data File( 데이터파일열기 ) 을클릭합니다. GC 예제데이터파일폴더안에있는 Pest - STD 200 MRM.d 데이터파일을클릭합니다. c Load result data( 결과데이터로드 ) 확인란을지우고 Open( 열기 ) 을클릭합니다. 작업 2. GC/MS 데이터용으로사용자인터페이스구성 (12 페이지 ) 의지침을따릅니다. a Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 Chromatogram( 크로마토그램 ) > Define Chromatograms( 크로마토그램정의 ) 를선택합니다. b BPC 크로마토그램을삭제합니다. c TIC 를 Type( 유형 ) 으로선택합니다. d MS Level(MS 레벨 ) 이 MS/MS 인지확인합니다. e Add( 추가 ) 를클릭합니다. GC/MS 데이터로작업할때는 General( 일반 ) 워크플로나 GC/Q-TOF Compound Screening (GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) 워크플로를사용할수있습니다. 이예제의경우에는 General ( 일반 ) 워크플로를선택합니다. 76 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

77 워크플로사용, 내보내기및인쇄 3 작업 18. 일반워크플로를사용하여정성분석분석법설정및실행 작업 18. 일반워크플로를사용하여정성분석분석법설정및실행 단계 자세한지침 주석 4 데이터를적분하도록분석법을편집합니다. 적분을최고피크 4 개로제한합니다. a Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 Chromatogram( 크로마토그램 ) > Integrate( 적분 )(MS/MS) 를클릭합니다. b Peak Filters( 피크필터 ) 탭을클릭합니다. c Maximum number of peaks( 최대피크수 ) 부분에서 Limit (by height) to the largest( 최대치높이로제한 ) 확인란을선택합니다. d 4 를입력합니다. Chromatogram( 크로마토그램 ) > Integrate( 적분 )(MS) 부분에있는 Peak Filters( 피크필터 ) 탭에서값을업데이트하면 Method Explorer( 분석법탐색기 ) 의다른부분의도업데이트됩니다. 파란색삼각형이나타나서이들다른부분을표시합니다. Save Method( 분석법저장 ) 아이콘을클릭하여현재분석법을저장합니다. 그림 46 Chromatogram( 크로마토그램 ) > Integrate( 적분 )(MS/MS) > Peak Filters( 피크필터 ) 탭 5 적분을테스트하여적분된 4 개의피크만나타나는지확인합니다. 6 분석법을 iii_gcexercise1 에저장합니다. 여기서 iii 는사용자의이니셜입니다. 7 피크스펙트럼배경을변경하여피크의시작에서스펙트럼을사용합니다. Integrate Chromatogram( 크로마토그램적분 ) 아이콘을클릭하여데이터파일을적분합니다. a 상단메뉴에서 Method( 분석법 ) > Save As( 다른이름으로저장 ) 를클릭합니다. b iii_gcexercise1 을입력합니다. c Save( 저장 ) 단추를클릭합니다. a Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 Spectrum( 스펙트럼 ) > Extract( 추출 )(MS/MS) 을클릭합니다. b Peak Spectrum Extraction( 피크스펙트럼추출 )(MS/MS) 을클릭합니다. c 피크스펙트럼배경에대해서는 Spectrum at peak start( 피크시작에서스펙트럼 ) 를선택합니다. 분석법을저장하면열린분석법에서변경된값을표시하는모든파란색삼각형이사라집니다. 분석법을저장한후추가변경을하면파란색삼각형이추가됩니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 77

78 3 워크플로사용, 내보내기및인쇄작업 18. 일반워크플로를사용하여정성분석분석법설정및실행 작업 18. 일반워크플로를사용하여정성분석분석법설정및실행 Save Method( 분석법저장 ) 아이콘을클릭하여현재분석법을저장합니다. 그림 47 Spectrum( 스펙트럼 ) > Extract( 추출 )(MS/MS) > Peak Spectrum Extraction( 피크스펙트럼추출 )(MS/MS) 탭 8 MS 스펙트럼추출을테스트하여배경스펙트럼이제외되었는지확인합니다. Extract Peak Spectrum( 피크스펙트럼추출 ) 아이콘을클릭하여데이터파일에서선택한피크에대해작업을실행합니다. 9 분석법을저장합니다. 분석법을다음 3 가지방법중하나로저장합니다. Method Editor( 분석법편집기 ) 에서 Save Method ( 분석법저장 ) 아이콘을클릭합니다. 분석법편집기를마우스오른쪽단추로클릭하고 Save Method ( 분석법저장 ) 를클릭합니다. 상단메뉴에서 Method( 분석법 ) > Save As( 다른이름으로저장 ) 를클릭합니다. 10 데이터파일을열때방금변경한파라미터가있는작업을자동화하도록분석법을설정합니다. 이데이터파일이나다른데이터파일을열었을때실행할작업을나열합니다. 힌트 : Method Explorer( 분석법편집기 ) 에서 General( 일반 ) 아래를봅니다. a Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 General( 일반 ) > File Open Actions( 파일열기작업 ) 를선택합니다. b Available actions( 사용가능한작업 ) 목록에서 Integrate and Extract Peak Spectra( 피크스펙트럼적분및추출 ) 를선택합니다. c Add( 추가 ) 단추, 를클릭하여선택한작업을 Actions to be run( 실행할작업 ) 목록으로이동합니다. 또한선택한작업을더블클릭하면다른목록으로이동됩니다. Save Method( 분석법저장 ) 아이콘이그림 47(78 페이지 ) 에표시되어있습니다. 78 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

79 워크플로사용, 내보내기및인쇄 3 작업 18. 일반워크플로를사용하여정성분석분석법설정및실행 작업 18. 일반워크플로를사용하여정성분석분석법설정및실행 11 File Open Actions( 파일열기작업 ) 를테스트합니다. Run File Open Actions Now( 지금파일열기작업실행 ) 아이콘을클릭하여데이터파일에대해작업을실행합니다. 크로마토그램및스펙트럼은덮어쓰기되지않습니다. 새로운크로마토그램및스펙트럼이추가됩니다. 서로다른작업 2 개가실행목록이될작업들의일부입니다. 첫번째작업은지정된크로마토그램을추출하는것입니다. 그런다음, 해당크로마토램이적분되고피크가추출됩니다. 그림 48 Method Editor( 분석법편집기 ) 의 General( 일반 ) > File Open Actions( 파일열기작업 ) 부분 12 분석법을저장합니다. Method Editor( 분석법편집기 ) 에서 Save Method( 분석법저장 ) 아이콘을클릭합니다. 13 작업목록중에해당분석법이실행중일때작업을자동화할분석법을설정합니다. 이데이터파일이나다른데이터파일을열었을때실행할작업을나열합니다. 힌트 : Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 Worklist Automation( 작업목록자동화 ) 아래보기 14 Worklist Actions( 작업목록작업 ) 를테스트합니다. a b Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 Worklist Automation( 작업목록자동화 ) > Worklist Actions ( 작업목록작업 ) 를선택합니다. Actions to be run( 실행할작업 ) 목록에서 Generate Analysis Report ( 일반분석보고 ) 를제거합니다. Run Worklist Actions Now( 지금작업목록작업실행 ) 아이콘을클릭하여데이터파일에대한작업을실행합니다. 크로마토그램및스펙트럼은덮어쓰기되지않습니다. 새로운크로마토그램및스펙트럼이추가됩니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 79

80 3 워크플로사용, 내보내기및인쇄작업 18. 일반워크플로를사용하여정성분석분석법설정및실행 작업 18. 일반워크플로를사용하여정성분석분석법설정및실행 2 개의작업목록이한분석법에포함되어있습니다. 첫번째작업목록 ( 파일열기작업 ) 은데이터파일이열려있을때실행할수있습니다. 두번째작업목록 ( 작업목록작업 ) 은해당분석법이실행중일때실행됩니다. 그림 49 Method Editor( 분석법편집기 ) 내의 Worklist Automation( 작업목록자동화 ) > Worklist Actions( 작업목록작업 ) 부분 15 분석법을저장하고결과를저장하지않고데이터파일을닫습니다. a b Method Editor( 분석법편집기 ) 에서 Save Method( 분석법저장 ) 아이콘을클릭합니다. File( 파일 ) > Close Data File( 데이터파일닫기 ) 을클릭하고결과저장이요청되면 No( 아니요 ) 를클릭합니다. 80 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

81 워크플로사용, 내보내기및인쇄 3 작업 19. GC/Q-TOF 성분스크리닝워크플로를사용한분석법설정및실행 작업 19. GC/Q-TOF 성분스크리닝워크플로를사용한분석법설정및실행 이작업에서는특정순서로실행할분석작업목록이들어있는정성분석분석법을설정합니다. 여기에는크로마토그램의추출및적분, 스펙트럼추출, 라이브러리에서피크스렉트럼검색, 스펙트럼용공식생성및분석보고서인쇄가포함됩니다. 작업 19. GC/Q-TOF 성분스크리닝워크플로를사용한분석법설정및실행 1 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d 데이터파일에대한 TIC 을엽니다. 2 GC 데이터와작동되도록사용자인터페이스를구성합니다. 3 TIC 가추출되었는지확인합니다. a b 프로그램이열리지않는다면 MassHunter Qualitative Analysis( 정성분석 ) 아이콘을더블클릭합니다. 그렇지않다면 File( 파일 ) > Open Data File( 데이터파일열기 ) 을클릭합니다. GC 예제데이터파일폴더안에있는 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d 데이터파일을클릭합니다. c Load result data( 결과데이터로드 ) 확인란을지우고 Open( 열기 ) 을클릭합니다. 작업 2. GC/MS 데이터용으로사용자인터페이스구성 (12 페이지 ) 의지침을따릅니다. a b c Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 Chromatogram( 크로마토그램 ) 을선택합니다. Define Chromatograms( 크로마토그램정의 ) 부분을클릭합니다. Method Editor( 분석법편집기 ) 창에서, Defined chromatograms( 정의된크로마토그램 ) 부분안의크로마토그램이 TIC 인지확인합니다. 그렇지않다면 TIC 를 Type( 유형 ) 으로선택합니다. Change( 변경 ) 단추를클릭합니다. 이예제의경우, GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) 워크플로를선택합니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 81

82 3 워크플로사용, 내보내기및인쇄작업 19. GC/Q-TOF 성분스크리닝워크플로를사용한분석법설정및실행 작업 19. GC/Q-TOF 성분스크리닝워크플로를사용한분석법설정및실행 4 Find by Chromatogram Deconvolution( 크로마토그램디콘볼루션으로찾기 ) 알고리즘에대한파라미터를검토합니다. 5 Identify by Library Search( 라이브러리검색으로식별 ) 알고리즘에대한파라미터를검토합니다. 6 분석법을 iii_gcexercise2 에저장합니다. 여기서 iii 는사용자의이니셜입니다. a Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) > Find by Chromatogram Deconvolution( 크로마토그램디콘볼루션으로찾기 ) 부분을클릭합니다. b Mass Filter( 질량필터 ) 탭을클릭합니다. c Absolute height( 절대높이 ) 값을 으로설정합니다. d Results( 결과 ) 탭을클릭합니다. e Highlight all compounds( 모든화합물강조표시 ) 단추를클릭합니다. f 각탭에서결과를검토합니다. a Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) > Identify by Library Search( 라이브러리검색으로식별 ) 부분을클릭합니다. b Add Library( 라이브러리추가 ) 단추를클릭합니다. 라이브러리하나를선택하고 Open( 열기 ) 을누릅니다. c ( 선택사항 ) 라이브러리를사용하고싶지않다면 Remove Library( 라이브러리제거 ) 단추를클릭하여제거하십시오. d 각탭에서파라미터를검토합니다. a 상단메뉴에서 Method( 분석법 ) > Save As( 다른이름으로저장 ) 를클릭합니다. b iii_gcexercise2 를입력합니다. c Save( 저장 ) 단추를클릭합니다. GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) 워크플로에대한부분을봅니다. 이워크플로에는 6 개의부분이있습니다. 이들부분은모두, 이미분석법탐색기의일부인부분을복제한것입니다. 분석법탐색기의다른부분들에파란색삼각형이나타납니다. 이들은동일한파라미터값들이다른곳에서도변경되었음을나타냅니다. demo.l 라이브러리나 NIST08.l( 또는기타버전의 NIST 라이브러리 ) 는 \MassHunter\Library 폴더에설치되어있습니다. 82 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

83 워크플로사용, 내보내기및인쇄 3 작업 19. GC/Q-TOF 성분스크리닝워크플로를사용한분석법설정및실행 작업 19. GC/Q-TOF 성분스크리닝워크플로를사용한분석법설정및실행 7 데이터파일이열렸을때작업을자동화할분석법을설정합니다. 이데이터파일이나다른데이터파일을열었을때실행할작업을나열합니다. 힌트 : Method Explorer( 분석법편집기 ) 창에서 General( 일반 ) 아래를봅니다. a b c d e f g Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 General( 일반 ) > File Open Actions( 파일열기작업 ) 를선택합니다. Actions to be run( 실행할작업 ) 목록에서 Generate Analysis Report( 일반분석보고 ) 를제거합니다. Integrate and Extract Peak Spectra ( 피크스펙트럼적분및추출 ) 를제거합니다. 목록에서다른모든작업을제거합니다. Extract Defined Chromatograms( 정의된크로마토그램추출 ) 를추가합니다. Find Compounds by Chromatographic Deconvolution( 크로마토그램디콘볼루션으로화합물찾기 ) 을추가합니다. Search Spectral Library for Compound( 화합물에대해스펙트럼라이브러리에서검색 ) 를추가합니다. 8 File Open Actions( 파일열기작업 ) 를테스트합니다. Run 'File Open' Actions Now( 지금 ' 파일열기 ' 작업실행 ) 아이콘을클릭하여데이터파일에대해작업을실행합니다. 크로마토그램및스펙트럼은덮어쓰기되지않습니다. 새로운크로마토그램및스펙트럼이추가됩니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 83

84 3 워크플로사용, 내보내기및인쇄작업 19. GC/Q-TOF 성분스크리닝워크플로를사용한분석법설정및실행 작업 19. GC/Q-TOF 성분스크리닝워크플로를사용한분석법설정및실행 그림 50 GC/Q-TOF 데이터에서작업목록작업실행결과 9 분석법을 iii_gcexercise2 에저장합니다. 여기서 iii 는사용자의이니셜입니다. 10 결과를저장하지않고데이터파일을닫습니다. a 메뉴에서 Method( 분석법 ) > Save As( 다른이름으로저장 ) 를클릭합니다. b iii_gcexercise2 를입력합니다. c Save( 저장 ) 를클릭합니다. a File( 파일 ) > Close Data File( 데이터파일닫기 ) 을클릭합니다. b 결과저장이요청되면 No( 아니요 ) 를클릭합니다. 이분석법이 Data Acquisition( 데이터입수 ) 작업목록중에실행된다면이탭의 Worklist Actions ( 작업목록작업 ) 이지정된순서로실행됩니다. 84 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

85 워크플로사용, 내보내기및인쇄 3 작업 20. CEF 파일내보내기 작업 20. CEF 파일내보내기 화합물정보가포함된 CEF 파일을내보낼수있습니다. 이 CEF 파일을 MassHunter Quantitative Analysis( 정량분석 ) 및 Mass Profiler Professional 과같은다른프로그으로가져올수있습니다. 또한 CEF 파일로내보낸화합물을가져올수도있습니다. 작업 20. CEF 파일내보내기 1 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d 데이터파일을열고 작업 19. GC/Q-TOF 성분스크리닝워크플로를사용한분석법설정및실행 (81 페이지 ) 에서생성한 iii_gcexercise2.m 분석법에대해 File Open( 파일열기 ) 작업을실행합니다. a 프로그램이열리지않는다면 MassHunter Qualitative Analysis( 정성분석 ) 아이콘을더블클릭합니다. 그렇지않다면 File( 파일 ) > Open Data File( 데이터파일열기 ) 을클릭합니다. b GC 예제데이터파일폴더안에있는 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d 데이터파일을클릭합니다. c Load result data( 결과데이터로드 ) 확인란을선택해제합니다. d Run File Open actions from selected method( 선택한분석법에서 ' 파일열기 ' 작업실행 ) 확인란을선택합니다. e Use current method( 현재분석법사용 ) 단추를클릭하고 Open( 열기 ) 을클릭합니다. 작업 19. GC/Q-TOF 성분스크리닝워크플로를사용한분석법설정및실행 (81 페이지 ) 을완료하면, 현재분석법은 iii_gcexercise2.m 입니다. 이분석법은 Find Compounds by Chromatogram Deconvolution( 크로마토그램디콘볼루션으로화합물찾기 ) 알고리즘을실행한다음, 각화합물에대해 Search Library( 라이브러리검색 ) 알고리즘을실행하도록설정되어있습니다. 2 CEF 파일을내보냅니다. a 파일을대화식으로내보내려면 File( 파일 ) > Export( 내보내기 ) > as CEF(CEF 로 ) 를클릭합니다. b All results( 모든결과 ) 단추를클릭합니다. c 내보내기할파일의위치를선택합니다. d OK( 확인 ) 를클릭합니다. 화합물을내보내는데 CEF 파일이사용됩니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 85

86 3 워크플로사용, 내보내기및인쇄작업 20. CEF 파일내보내기 작업 20. CEF 파일내보내기 ( 계속 ) 그림 51 Export CEF Options(CEF 옵션내보내기 ) 대화상자 86 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

87 워크플로사용, 내보내기및인쇄 3 작업 21. 분석보고서인쇄 작업 21. 분석보고서인쇄 작업 21. 분석보고서인쇄 이연습이나다음연습에서아무작업이나실행한후에분석보고서를인쇄하고싶다면다음지침을따르십시오. 분석보고서에는크로마토그램추출및적분, 스펙트럼추출, 화합물찾기, 데이터베이스에서피크스펙트럼검색또는피크스펙트럼에서공식생을실행한결과가포함될수있습니다. 1 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d 데이터파일이로드되지않는다면, 이데이터파일을열고 작업 19. GC/Q-TOF 성분스크리닝워크플로를사용한분석법설정및실행 (81 페이지 ) 에서생성한 iii_gcexercise2.m 분석법에대해 File Open( 파일열기 ) 작업을실행합니다. a 프로그램이열리지않는다면 MassHunter Qualitative Analysis( 정성분석 ) 아이콘을더블클릭합니다. 그렇지않다면 File( 파일 ) > Open Data File( 데이터파일열기 ) 을클릭합니다. b GC 예제데이터파일폴더안에있는 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d 데이터파일을클릭합니다. c Load result data( 결과데이터로드 ) 확인란을선택해제합니다. d Run File Open actions from selected method( 선택한분석법에서 ' 파일열기 ' 작업실행 ) 확인란을선택합니다. e Use current method( 현재분석법사용 ) 단추를클릭하고 Open( 열기 ) 을클릭합니다. 작업 19. GC/Q-TOF 성분스크리닝워크플로를사용한분석법설정및실행 (81 페이지 ) 을완료하면, 현재분석법은 iii_gcexercise2.m 입니다. 이분석법은 Find Compounds by Chromatogram Deconvolution( 크로마토그램디콘볼루션으로화합물찾기 ) 알고리즘을실행한다음, 각화합물에대해 Search Library( 라이브러리검색 ) 알고리즘을실행하도록설정되어있습니다. 2 분석법에서분석보고서선택변경 : 인쇄하려는크로마토그램, 스펙트럼또는표의확인란을선택합니다. 인쇄하지않으려는크로마토그램, 스펙트럼또는표의확인란을지웁니다. a b c Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 Reports( 보고서 ) > Analysis Report( 분석보고서 ) 를선택합니다. 인쇄하려는추가선택사항에대한확인란을선택합니다. 인쇄하지않으려는모든크로마토그램및스펙트럼선택사항을지웁니다. 분석보고서에는이부분에서선택한정보만포함됩니다. 일부결과가없다면, 이부분에서그러한결과를선택했어도결과가포함되지않은것입니다. 예를들어, 크로마토그램을적분하지않았다면피크가포함되지않습니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 87

88 3 워크플로사용, 내보내기및인쇄작업 21. 분석보고서인쇄 작업 21. 분석보고서인쇄 ( 계속 ) 기본적으로 Method Editor( 분석법편집기 ) 창은유동입니다. 이창은 Qualitative Analysis( 정성분석 ) 프로그램의나머지와는다른별도의창으로나타납니다. 창을고정하려면창의제목을마우스오른쪽단추로클릭하고 Floating( 유동 ) 을클릭합니다. 또는제목표시줄을더블클릭하여창을고정할수도있습니다. 그림 52 Method Explorer( 분석법탐색기 ) 와 Method Editor( 분석법편집기 ) 창의 Analysis Report( 분석보고서 ) 부분 88 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

89 워크플로사용, 내보내기및인쇄 3 작업 21. 분석보고서인쇄 작업 21. 분석보고서인쇄 ( 계속 ) 3 보고서를인쇄합니다. a 보고서를여러방식으로대화식으로인쇄할수있습니다. 기본메뉴에서 File( 파일 ) > Print( 인쇄 ) > Analysis Report( 분석보고서 ) 를클릭합니다. 기본도구모음에서 Printer( 프린터 ) 아이콘을클릭합니다. Analysis Report( 분석보고서 ) 부분이선택되어있을때 Method Editor( 분석법편집기 ) 도구모음에서 Print Analysis Report( 분석 보고서인쇄 ) 아이콘 을클 릭합니다. Method Editor( 분석법편집기 ) 에 서 Analysis Report( 분석보고서 ) 부분을마우스오른쪽단추로클 릭하고 Print Analysis Report( 분 석보고서인쇄 ) 를클릭합니다. Data Navigator( 데이터탐색기 ) 에있는데이터파일바로가기 메뉴에서 Analysis Report( 분석 보고서 ) 를클릭합니다. b Report contents( 보고서내용 ) 를 클릭합니다. c Print report( 보고서인쇄 ) 확인란을 선택하고프린터를선택합니다. d Print preview( 인쇄미리보기 ) 확 인란을선택합니다. e OK( 확인 ) 단추를클릭합니다. Method Editor( 분석법편집기 ) 도구모음의실행아이콘은때때로일련의가능한작업중에서하나를선택할수있게해줍니다. 예를들어, Method Editor( 분석법편집기 ) 창의 Reports( 보고서 ) > Common Reporting Options( 일반보고옵션 ) 부분으로전환하면 Run( 실행 ) 아이콘을클릭할때 4 가지다른작업이가능합니다. 화살표를클릭하면가능한작업목록이나타나, 어떤작업을실행할지선택할수있습니다. 목록에서다른작업을선택하면기본작업이변경됩니다. Run( 실행 ) 단추를클릭하기만하면현재기본작업이실행됩니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 89

90 3 워크플로사용, 내보내기및인쇄작업 21. 분석보고서인쇄 작업 21. 분석보고서인쇄 ( 계속 ) 그림 53 Print Analysis Report( 분석보고서인쇄 ) 대화상자 90 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

91 워크플로사용, 내보내기및인쇄 3 작업 21. 분석보고서인쇄 작업 21. 분석보고서인쇄 ( 계속 ) f 보고서를검토합니다. g 도구모음에서 Close Print Preview ( 인쇄미리보기닫기 ) 아이콘을클릭합니다. 그림 54 Analysis Report( 분석보고서 ) 가있는 Print Preview( 인쇄미리보기 ) 창 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 91

92 3 워크플로사용, 내보내기및인쇄작업 22. 화합물보고서인쇄 작업 22. 화합물보고서인쇄 화합물보고서를인쇄하고싶을때는다음지침을따르십시오. 작업 22. 화합물보고서인쇄 1 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d 데이터파일이로드되지않는다면, 이데이터파일을열고 작업 19. GC/Q-TOF 성분스크리닝워크플로를사용한분석법설정및실행 (81 페이지 ) 에서생성한 iii_gcexercise2.m 분석법에대해 File Open( 파일열기 ) 작업을실행합니다. a 프로그램이열리지않는다면 MassHunter Qualitative Analysis( 정성분석 ) 아이콘을더블클릭합니다. 그렇지않다면 File( 파일 ) > Open Data File( 데이터파일열기 ) 을클릭합니다. b GC 예제데이터파일폴더안에있는 MSD_mix_4stds_DG_spl200_03.d 데이터파일을클릭합니다. c Load result data( 결과데이터로드 ) 확인란을선택해제합니다. d Run File Open actions from selected method( 선택한분석법에서 ' 파일열기 ' 작업실행 ) 확인란을선택합니다. e Use current method( 현재분석법사용 ) 단추를클릭하고 Open( 열기 ) 을클릭합니다. 작업 19. GC/Q-TOF 성분스크리닝워크플로를사용한분석법설정및실행 (81 페이지 ) 을완료하면, 현재분석법은 iii_gcexercise2.m 입니다. 이분석법은 Find Compounds by Chromatogram Deconvolution( 크로마토그램디콘볼루션으로화합물찾기 ) 알고리즘을실행한다음, 각화합물에대해 Search Library( 라이브러리검색 ) 알고리즘을실행하도록설정되어있습니다. 2 화합물보고서에대한분석법에서일부선택변경 : 특별피크에서확대된 MS 스펙트럼보기를끕니다. 보고서에서 MS/MS 옵션을끕니다. a b c d Method Explorer( 분석법탐색기 ) 에서 Reports( 보고서 ) > Compound Report( 화합물보고서 ) 를클릭합니다. Show MS spectrum(ms 스펙트럼보기 ) 확인란을선택해제합니다. Show MS/MS spectrum(ms/ms 스펙트럼보기 ) 확인란을선택해제합니다. Show MS/MS peak table(ms/ms 피크표보기 ) 확인란을선택해제합니다. 이들확인란을통해가능한경우보고서에포함할정보를지정할수있습니다. 정보가없다면해당부분이자동으로건너뛰기됩니다. 예를들어, 이터파일에 MS 데이터만있다면 MS/MS 결과는포함되지않습니다. 92 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

93 워크플로사용, 내보내기및인쇄 3 작업 22. 화합물보고서인쇄 작업 22. 화합물보고서인쇄 GC/Q-TOF 데이터에대해 Overlay( 오버레이 ) 화합물크로마토그램확인란이선택해제되어있어야합니다. 그림 55 Method Editor( 분석법편집기 ) 의 Compound Report( 화합물보고서 ) 부분 3 ( 선택사항 ) 다른화합물보고서템플릿을선택합니다. a b Method Explorer( 분석법탐색기 ) 창에서 Reports( 보고서 ) > Common Reporting Options( 일반보고옵션 ) 를클릭합니다. CompoundReport WithIdentificationHits.xlsx 를화합물보고서템플릿으로선택합니다. 몇가지다양한보고서템플릿들이소프트웨어에포함되어있습니다. Excel 과 Report Designer add-in 을사용하여보고서템플릿을사용자지정할수있습니다. Excel 및 Report Designer add-in 을사용하여확장자가 XLTX 인모든템플릿을사용자지정할수있습니다. 수집분석법보고서는사용자지정할수없습니다. 그림 56 Method Editor( 분석법편집기 ) 의 Common Reporting Options( 일반보고옵션 ) 부분 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 93

94 3 워크플로사용, 내보내기및인쇄작업 22. 화합물보고서인쇄 작업 22. 화합물보고서인쇄 4 보고서를인쇄합니다. a File( 파일 ) > Print( 인쇄 ) > Compound Report( 화합물보고서 ) 를클릭하거나 Print Analysis Report( 분석보고서인쇄 ) 아이콘에있는화살표를클릭하고 Print Compound Report( 화합물보고서인쇄 ) 를클릭하여화합물보고서를인쇄합니다. b Print preview( 인쇄미리보기 ) 확인란을선택합니다. c OK( 확인 ) 를클릭합니다. 보고서를검토합니다. d Close Print Preview( 인쇄미리보기닫기 ) 아이콘을클릭합니다. Print Compound Report( 화합물보고서인쇄 ) 대화상자에서다른프린터를선택하거나, PDF 또는 Excel 파일로보고서를저장하도록선택하거나, 모든결과는강조표시된결과만인쇄하도록선택하거나, 여러데이터파일을한보고서로결합할것인지를선택할수있습니다. 추가정보는온라인도움말이나 Report Designer Training DVD( 보고서디자이너교육 DVD) 를참조하십시오. 그림 57 Compound Report( 화합물보고서 ) 가있는 Print Preview( 인쇄미리보기 ) 창 5 결과를저장하지않고데이터파일을닫습니다. a b File( 파일 ) > Close Data File( 데이터파일닫기 ) 을클릭합니다. 결과를저장할것인지묻는메시지가나타나면 No( 아니요 ) 를클릭합니다. 94 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

95 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어정성분석기초설명서 참조 창으로작업 96 Data Navigator( 데이터탐색기 ) 에서결과데이터로작업 98 크로마토그램에서작동실행 99 MS 또는 MS/MS 스펙트럼에서작업수행 100 크로마토그램시각데이터로작업 101 스펙트럼시각데이터로작업 102 워크플로 103 보고서템플릿사용자지정

96 4 창으로작업 창으로작업 처음으로정성분석프로그램을열면기본레이아웃에다음 4 개창이보입니다. Data Navigator( 데이터탐색기 ), Method Explorer( 분석법탐색기 ), Chromatogram Results( 크로마토그램과 ) 및 MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ). Navigator View( 탐색기보기 ) 와 Compound Details View( 화합물세부사항보기 ) 사이를전환할수있습니다. View( 보기 ) 메뉴를사용하여 Navigator View( 탐색기보기 ) 에서 17 개의다른창을표시할수있습니다. Method Editor( 분석법편집기 ) - 여러탭으로분리된분석법파라미터를편집가능 Spectrum Preview( 스펙트럼미리보기 ) - 데이터파일에서빠르게스펙트럼스캔가능 MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) - MS 및 MS/MS 스펙트럼표시 Difference Results( 차이결과 ) - 라이브러리검색후여러결과표시 Deconvolution Results( 디콘볼루션결과 ) - 디콘볼루션처리된스펙트럼표시 Deconvolution Mirror Plot( 디콘볼루션미러플롯 ) - 미러이미지에디콘볼루션처리된스펙트럼 2 개표시 UV Spectrum Results(UV 스펙트럼결과 ) - UV 스펙트럼표시 - LC/MS 데이터만해당 Integration Peak List( 적분피크목록 ) - 표에적분결과표시 MS Spectrum Peak List 1(MS 스펙트럼피크목록 1) - 선택한첫번째스펙트럼에대한피크표표시 MS Spectrum Peak List 2(MS 스펙트럼피크목록 2) - 선택한두번째스펙트럼에대한피크표표시 MS Actuals(MS 실제 ) - 강조표시된스펙트럼에대한수집정보표시 Compound List( 화합물목록 ) - Find Compounds( 화합물찾기 ) 알고리즘중하나를사용하여찾은화합물표시 Compound Identification Results( 화합물식별결과 ) - 선택한화합물에대한식별정보표시 Spectrum Identification Results( 스펙트럼식별결과 ) - 선택한스펙트럼에대한식별정보표시 MS/MS Formula Details(MS/MS 공식세부사항 ) - MS/MS 스펙트럼에나타나는토막들에대해계산된가능한공식이포함된표표시 96 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

97 창으로작업 4 Structure Viewer( 구조뷰어 ) - 현재화합물또는스펙트럼과연관된구조표시 Sample Information( 시료정보 ) - 강조표시된데이터파일에대한정보표시 Sequence Editor( 시퀀스편집기 ) - 분석법시퀀스편집가능 또한관련도구의사용을시작할때표시되는 3 개의도구창을표시할수도있습니다. Formula Calculator( 공식계산기 ) Mass Calculator( 질량계산기 ) Recalibrate( 재검량 ) Main Toolbar( 기본도구모음 ) 의창아이콘 기본도구모음에있는이들아이콘으로창을열고닫습니다. MassHunter BioConfirm 소프트웨어가설치되어있다면추가아이콘들도볼수있습니다. View( 보기 ) 메뉴안의명령들을사용하여이들창을열수도있습니다. 데이터탐색기 분석법탐색기 분석법편집기 크로마토그램결과 UV 스펙트럼결과 스펙트럼미리보기 MS 스펙트럼결과 차이결과 디콘볼루션결과 디콘볼루션미러플롯 적분피크목록 MS 실제 화합물목록 MS 스펙트럼피크목록 1 MS 스펙트럼피크목록 2 시퀀스편집기 화합물식별결과 스펙트럼식별결과 MS/MS 공식세부사항 구조뷰어 시료정보 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 97

98 4 Data Navigator( 데이터탐색기 ) 에서결과데이터로작업 Data Navigator( 데이터탐색기 ) 에서결과데이터로작업 Data Navigator( 데이터탐색기 ) 창및도구 Data Navigator( 데이터탐색기 ) 는데이터파일이나데이터유형에따라스펙트럼선택사항과모든추출결과를정리합니다. 연결된탐색아이콘 활성상태일때 ( 기본 ) Data Navigator( 데이터탐색기 ) 에서크로마토그램하나를강조표시하면해당되는스펙트럼이강조표시됩니다. 해당되는크로마그램과스펙트럼그래픽결과도강조표시됩니다. Linked Navigation ( 연결된탐색 ) 은 Chromatograms Menu( 크로마토그램메뉴 ) 에서 Integrate and Extract Peak Spectra( 크스펙트럼적분및추출 ) 메뉴항목을사용했거나화합물알고리즘을하나라도실행한적이있을때만동작합니다. 선택표시도구 단일선택표시 강조표시된모든데이터의확인란을선택합니다. 이중선택표시, 회색 1 개 강조표시된데이터의확인란을선택하고다른확인란은선택해제합니다. 이중선택표시 모든확인란을표시합니다. 각각의확인란이선택되어있을때해당크로마토그램및스펙트럼이표시됩니다. 98 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

99 크로마토그램에서작동실행 4 크로마토그램에서작동실행 메뉴항목들을사용하여전체크로마토그램이나크로마토그램의선택한영역에서다음작동을실행할수있습니다. 동작크로마토그램에서피크레이블변경크로마토그램추출정의된크로마토그램추출크로마토그램적분피크스펙트럼적분및추출피크스펙트럼적분및디콘볼루션크로마토그램매끄럽게하기크로마토그램제외하기시그널대노이즈계산자동 MS/MS 데이터에서화합물찾기대상 MS/MS 데이터에서화합물찾기 MS(1) 데이터용화합물찾기 GC/MS 데이터용화합물찾기 MRM 데이터용화합물찾기 메뉴항목 Configuration( 구성 ) > Chromatogram Display Options( 크로마토그램표시옵션 ) Chromatograms( 크로마토그램 ) > Extract Chromatograms( 크로마토그램추출 ) Chromatograms( 크로마토그램 ) > Extract Defined Chromatograms( 정의된크로마토그램추출 ) Chromatograms( 크로마토그램 ) > Integrate Chromatogram( 크로마토그램적분 ) Chromatograms( 크로마토그램 ) > Integrate and Extract Peak Spectra( 피크스펙트럼적분및추출 ) Chromatograms( 크로마토그램 ) > Integrate and Deconvolute Peak Spectra( 피크스펙트럼적분및디콘볼루션 ) Chromatograms( 크로마토그램 ) > Smooth Chromatogram( 크로마토그램매끄럽게하기 ) Chromatograms( 크로마토그램 ) > Subtract Any Chromatogram( 크로마토그램제외 ) Chromatograms( 크로마토그램 ) > Calculate Signal-to-Noise( 시그널대노이즈계산 ) Find( 찾기 ) > Find Compounds by Auto MS/MS( 자동 MS/MS 로화합물찾기 ) Find( 찾기 ) > Find Compounds by Targeted MS/MS( 대상 MS/MS 로화합물찾기 ) Find( 찾기 ) > Find Compounds by Molecular Feature( 분자특징으로화합물찾기 ) Find( 찾기 ) > Find Compounds by Chromatogram Deconvolution( 크로마토그램디콘볼루션으로화합물찾기 ) Find( 찾기 )> Find Compounds by MRM(MRM 으로화합물찾기 ) Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 99

100 4 MS 또는 MS/MS 스펙트럼에서작업수행 동작 적분결과로화합물찾기 특정공식과일치하는화합물찾기 메뉴항목 Find( 찾기 )> Find Compounds by Integration( 적분으로화합물찾기 ) Find( 찾기 )> Find Compounds by Formula( 공식으로화합물찾기 ) 바로가기메뉴에서범위작업선택 크로마토그램범위를선택했다면위에서언급한작업및언급하지않은작업이외에도스펙트럼을추출하거나배경에스펙트럼을추출할수있습다. 1 이들작업에액세스하려면 Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 도구모음에있는범위선택도구 ( ) 를클릭합니다. 2 범위를시작하려는지점을클릭하고커서를해당위에걸쳐드래그한후놓습니다. 3 크로마토그램안의아무곳이나마우스오른쪽단추로클릭하고바로가기메뉴에서해당작업을클릭합니다. 결과를데이터파일에저장 Save( 저장 ) 아이콘 ( ) 을클릭하거나 File( 파일 )> Save Results( 결과저장 ) 를클릭합니다 프로그램을종료하면해당기능을꺼두지않은경우 ( 이기능을 Message Box Options( 메시지상자옵션 ) 대화상자에서끌수있음 ) 결과를데이터파일에장할것인지묻습니다. MS 또는 MS/MS 스펙트럼에서작업수행 메뉴항목들을사용하여 MS 또는 MS/MS 스펙트럼이나 MS 또는 MS/MS 스펙트럼의선택한영역에서다음작업을실행할수있습니다. 동작 m/z, 존재비, 전하상태및스펙트럼내피크에대한기타정보보기 스펙트럼피크레이블변경 배경스펙트럼제외 메뉴항목 View( 보기 ) > MS Spectrum Peak List 1( 스펙트럼피크목록 1) Configuration( 구성 ) > MS and MS/MS Spectra Display Options(MS 및 MS/MS 스펙트럼표시옵션 ) Spectra( 스펙트럼 ) > Subtract Background Spectrum( 배경스펙트럼제외 ) 100 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

101 크로마토그램시각데이터로작업 4 동작 스펙트럼제외 스펙트럼 2 개함께추가 스펙트럼안에서특정질량과일치하는항목을데이터베이스에서검색 스펙트럼안의선택한범위에서질량에대한공식생성 분리된동위원소알고리즘을사용하여디콘볼루션 라이브러리검색 메뉴항목 Spectra( 스펙트럼 ) > Subtract Any Spectrum( 스펙트럼제외 )( 그리고다른스펙트럼클릭 ) Spectra( 스펙트럼 ) > Add Any Spectrum( 모든스펙트럼추가 )( 그리고다른스펙트럼클릭 ) Spectra( 스펙트럼 ) > Search Database for Spectrum Peaks( 스펙트럼피크에대해데이터베이스검색 ) Spectra( 스펙트럼 ) > Generate Formulas from Spectrum Peaks( 스펙트럼피크에서공식생성 ) (MS 스펙트럼에서범위가선택되어있을때 ) Spectra( 스펙트럼 ) > Deconvolute( 디콘볼루션 )( 분리된동위원소 ) Identify( 식별 ) > Search Library for Spectra( 스펙트럼에대해라이브러리검색 ) 또는 Spectra( 스펙트럼 ) > Search Library for Spectra( 스펙트럼에대해라이브러리검색 ) 크로마토그램시각데이터로작업 Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 창 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 101

102 4 스펙트럼시각데이터로작업 Chromatogram Results( 크로마토그램결과 ) 도구 확대 / 축소도구 ( 순서대로 ) 선택도구 ( 순서대로 ) 이들도구중하나는항상선택되어있어야합니다. X 축및 Y 축자동눈금조절 X 축자동눈금조절 Y 축자동눈금조절 확대 / 축소취소 확대 / 축소중에 Y 축자동눈금조절 연결된 Y 축모드 범위선택 - 켜져있으면작업을실행하려는크로마토그램에대한범위를그릴수있습니다. 피크선택 켜져있으면정점에서적분된피크의스펙트럼을선택할수있습니다. 수동적분 켜져있으면대화식으로적분할수있습니다. Walk 크로마토그램 켜져있으면각지점을클릭하거나키보드의왼쪽및오른쪽화살표를클릭할때개별스펙트럼을볼수있습니다. 주석 켜져있으면크로마토그램에이미지와텍스트주석을추가할수있습니다. 스펙트럼시각데이터로작업 MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 창 102 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

103 워크플로 4 MS Spectrum Results(MS 스펙트럼결과 ) 도구 확대 / 축소도구 ( 순서대로 ) 선택도구 ( 순서대로 ) 도구선택을선택해제하려면다른도구나아이콘을클릭합니다. X 축및 Y 축자동눈금조절 X 축자동눈금조절 Y 축자동눈금조절 확대 / 축소취소 확대 / 축소중에 Y 축자동눈금조절 연결된 Y 축모드 범위선택 켜져있으면작업을실행하려는크로마토그램에대한범위를그릴수있습니다. 주석 켜져있으면크로마토그램에이미지와텍스트주석을추가할수있습니다. 캘리퍼 켜져있으면선택한스펙트럼에델타질량캘리퍼를추가할수있습니다. Deconvolution Results ( 디콘볼루션결과 ) 창에서 Amino Acid( 아미노산 ) 캘리퍼나 Modifications( 수정 ) 캘리퍼를추가할수있습니다. 추가정보는온라인도움말을참조하십시오. 워크플로 워크플로를통해적용상황에맞게사용자인터페이스를사용자지정할수있습니다. 각워크플로는해당워크플로에대해적절한파라미터가있는각기다른분석법을로드합니다. 또한각워크플로는각기다른레이아웃을로드하며, 이들레이아웃에는각표에표시된열들의사용자지정이포함됩니다. 마지막으로 4 개의레이아웃은또한분석법편집기안에해당워크플로에중요한부분들의사본이포함된특별한분석법편집기부분을가합니다. 특정워크플로에사용되는기능들을하나로그룹화하면분석법을쉽게사용자지정할수있습니다. 정성분석프로그램에는몇가지다양한워크플로를이용할수있습니다. 이들은다음과같습니다. 일반 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 103

104 4 워크플로 BioConfirm - 이들워크플로는 BioConfirm 소프트웨어가설치되어있고 User Interface Configuration( 사용자인터페이스구성 ) 대화상자에선택되어있을때만사용가능합니다. BioConfirm 에는실행하고자하는분석유형에따라몇가지가능한워크플로가있습니다. BioConfirm 은 LC/MS 데이터파일과함께사용됩니. 크로마토그램피크조사 공식확인및시료순도 MS 대상성분스크리닝 GC/Q-TOF 성분스크리닝 GC/MS 데이터로작업할때는 General( 일반 ) 워크플로나 GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) 워크플로를선택할수있습니다. LC/MS 데이터로작업때는 GC/Q-TOF Compound Screening(GC/Q-TOF 성분스크리닝 ) 을제외한모든워크플로를선택할수있습니다. 특정분석법 각워크플로는해당워크플로에대한적절한설정이있는특정기본분석법을로드합니다. 예를들어 BioConfirm 워크플로중하나로전환하면, Find Compounds by Molecular Feature( 분자특징으로화합물찾기 ) 알고리즘에대한 Target data type( 대상데이터유형 ) 이 Large molecules( 큰분자 )( 단백질, 올리고 ) 로설정됩니다. 이설정은 BioConfirm 워크플로에대해서는적합하지만기본적으로다른워크플로에대해서는적합하지않습니다. 104 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

105 워크플로 4 특정레이아웃 또한각워크플로는특정레이아웃을로드합니다. 레이아웃은다음으로구성되어있습니다. 각창의위치및크기 어떤창이탭되었는지 어떤창이유동인지 어떤탭창이위에있는지 어떤창이기본적으로보이는지 상태표시줄이보이는지 각플롯창 ( 크로마토그램결과창, 스펙트럼미리보기창, MS 스펙트럼결과창, 디콘볼루션창및 UV 결과창 ) 에대해다음이저장됩니다. 그래픽이오버레이되었는지여부 확대 / 축소모드시 Y 축자동눈금조절이켜져있는지여부 연결된 Y 축모드가켜져있는지여부 각표창에대해다음이저장됩니다. 어떤열이보이는지 열의순서 각열의너비 표에추가된필터 ( 화합물목록표, 화합물식별결과표및스펙트럼식별결과창에만사용가능 ) 분석법탐색기및분석법편집기내의특정부분 Method Editor( 분석법편집기 ) 와 General( 일반 ) 워크플로를사용하여 Method( 분석법 ) 안에서거의모든파라미터를변경할수있습니다. 다른 4 개의워크플로는각각 Method Explorer( 분석법탐색기 ) 에서사용가능한부분들을변경합니다. 각각의새로운부분에는해당워크플로에서유용한 Method Editor( 분석법편집기 ) 탭및부분만포함되어있습니다. 워크플로부분내에서파라미터를변경하면일반 Method Editor( 분석법편집기 ) 부분에서당부분에있는파라미터도변경됩니다. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 105

106 4 워크플로 2 개의탭은일반 Method Editor( 분석법편집기 ) 부분에서반복되지않습니다. Chromatogram Peak Survey Workflow( 크로마토그램피크조사워크플로 ) > Spectrum Peak Identification( 스펙트럼피크식별 ) 부분및 Chromatogram Peak Survey Workflow( 크로마토그램피크조사워크플로 ) > Chromatogram Extraction( 크로마토그램추출 ) > Chromatograms( 크로마토그램 ) 탭은 Chromatogram Peak Survey( 크로마토그램피크조사 ) 워크플로안에만포함되어있습니다. 이들부분은 Chromatogram Peak Survey( 크로마토그램피크조사 ) 알리즘에만영향이있습니다. 이알고리즘은이워크플로, Chromatogram Peak Survey without Report( 보고서없이크로마토그램피크조사 ) 작업및 Chromatogram Peak Survey with Analysis Report( 분석보고서와함께크로마토그램피크조사 ) 작업에서만사용됩니다. 워크플로분석법및레이아웃 각워크플로에대해추가기본분석법및레이아웃이제공됩니다. 워크플로분석법레이아웃분석법편집기선택 일반 default.m Default.xml 없음 BioConfirm 원형 BioConfirm 워크플로 단백질 BioConfirm 고질량원형단백질 BioConfirm 소형올리고핵산염 BioConfirm 대형올리고핵산염 BioConfirm 단백질소화 BioConfirm 합성펩티드크로마토그램피크조사공식확인및시료순도 MS 대상성분스크리닝 GC Q-TOF 성분스크리닝 BioConfirm IntactProtein- Default.m BioConfirm IntactProtein HighMass Default.m BioConfirmOligo nucleotidesmall.m BioConfirmOligo nucleotidelarge- Default.m BioConfirmProtein Digest-Default.m BioConfirmSynthetic Peptide-Default.m ChromPeakSurvey- Default.m SamplePurity- Default.m BioConfirm- IntactProtein- MaximumEntropy- Default.xml BioConfirm IntactProtein LMFE.xml BioConfirmOligonucleotide.xml BioConfirmOligonucleotide.xml BioConfirm ProteinDigest.xml BioConfirm SyntheticPeptide.xml Default.xml SamplePurity- Default.xml BioConfirm 워크플로 BioConfirm 워크플로 BioConfirm 워크플로 BioConfirm 워크플로 BioConfirm 워크플로 크로마토그램피크조사워크플로공식확인및시료순도워크플로 Screening-Default.m Screening-Default.xml MS 대상성분스크리닝 워크플로 GC_Q-TOF.m QTOFData.xml GC/Q-TOF 성분스크리닝 106 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서

107 보고서템플릿사용자지정 4 보고서템플릿사용자지정 보고서템플릿을수정하는방법에대한자세한정보는 MassHunter Report Designer Add-in 온라인도움말, Report Designer Familiarization Guide( 보고서디자이너기초설명서 ) 또는 Reporting Training( 보고학습 ) DVD 에서참조하십시오. 다음단계들을통해템플릿사용자지정에대해간단히살펴볼수있습니다. 1 해당보고서템플릿이들어있는폴더로이동합니다. 기본적으로이폴더는 \MassHunter\Report Templates\Qual\B.05.00\en-US\Letter 입니다. General( 일반 ) > Common Reporting Options( 일반보고옵션 ) > Templates( 템플릿 ) 탭에서다른폴더를선택할수있습니다. 2 수정하고자하는템플릿의사본을만드십시오. 해당사본을마우스오른쪽단추로클릭하고 Properties( 등록정보 ) 를클릭합니다. 필요하다면 Read-only( 읽기전용 ) 확인란을선택해제합니다. 그런다음해당사본을마우스오른쪽단추로클릭하고바로가기메뉴에서 Open( 열기 ) 을클릭합니다. 이방식으로템플릿을열면 Excel 에서이파일이템플릿파일인지파악할수있습니다. 템플릿이열려있을때머리글및바닥글을수정하고파라미열을추가, 제거또는이동할수있습니다. 추가정보는온라인도움말을참조하십시오. 모든 Qualitative Analysis( 정성분석 ) 템플릿은 Read-only( 읽기전 ) 로표시되어있습니다. 템플릿을편집하기전에이등록정보를변경할수있습니다. 많은템플릿이 Qualitative Analysis( 정성분석 ) 프로그램과함께설치되어있습니다. 각보고서템플릿의내용에대한추가정보는 Qualitative Analysis ( 정성석 ) 온라인도움말을참조하십시오. Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서 107

108 4 보고서템플릿사용자지정 3 원하는대로변경합니다. 템플릿수정방법에관한추가정보는 MassHunter Report Designer add-in 의온라인도움말이나 Agilent MassHunter Reporting - Training DVD 에서참조하십시오. 4 새로운템플릿을저장하려면 Microsoft Office 단추에서 Save( 저장 ) 를클릭하거나 Save As( 다른이름으로저장 ) > Other Formats( 기타형식 ) 를클릭합니다. 5 이름을입력하고 Save( 저장 ) 를클릭합니다. 108 Agilent MassHunter 워크스테이션소프트웨어 - LC/MS 정성분석기초설명서