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2 보안과제 ( ), 일반과제 ( ) 과제번호 :

3 제출문 농림축산식품부장관귀하 이보고서를 발효미생물을이용한기능성식품산업화연구사업단 과제의보고서로제 출합니다 년 02 월 06 일 주관연구기관명 : 명지대학교산학협력단주관연구책임자 : 서주원핵심연구기관명 : 명지대학교산학협력단핵심연구책임자 : 서주원세부연구책임자 : 서주원세부연구기관명 : 경기과학기술진흥원세부연구책임자 : 안은경핵심연구기관명 : ( 주 ) 비엔씨바이오팜핵심연구책임자 : 김종우세부연구책임자 : 김종우세부연구기관명 : 연세대학교산학협력단세부연구책임자 : 김택중핵심연구기관명 : 인제대학교산학협력단핵심연구책임자 : 강재헌 - 1 -

4 요약문 - 2 -

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13 α Δ α β

14 β α β α β α α

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17 (billion $) 세계건강식품시장규모 각국의건강식품시장의국가별비중 '97년 '98년 '99년 '00년 '01년 '02년 '07년 ( 추정 ) 자료원 : Nutrition Business Journal(2003)

18 - 16 -

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24 μ μ

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28 NC HC BIJI MA B3MG Body weight (g) Feeding days

29 μ ε

30 ε ε

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32 - 30 -

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40 홍국발효검정콩 MJLH MJLH MJLH 식약처규격 ( 홍국기준 ) 성상 적갈색의분말, 특이취 적갈색의분말, 특이취 적갈색의분말, 특이취 연갈색 ~ 적갈색 분말, 특이취 총모나콜린 K (mg/g) 시트리닌 (mg/kg 이하 수분 (%) % 이하 활성형모나콜린 K 확인됨 확인됨 확인됨 확인됨 대두이소플라본 ( 비배당체, mg/g) 확인됨 대장균군 음성 - - 음성 잔류농약 불검출 - - 불검출 납 (mg/kg) 총비소 (mg/kg) 카드뮴 (mg/kg) 총수은 (mg/kg)

41 - 39 -

42 - 40 -

43 성분명회사순도 (%) 주성분표준품 monacolin K lactone form (lovastatin/mevinolin MK) monacolin K acid form (mevinolinic acid, MKA) Chromadex 98% 97%

44 μ

45 - 43 -

46 - 44 -

47 μ μ μ μ μ

48 - 46 -

49 - 47 -

50 - 48 -

51 δ α δ

52 δ δ

53 그림 13. H-NMR 1 4 spectrum of compound 그림 15. 그림 14. C-NMR 13 4의 Compound 구조 (4) Identification of compound 5 (mevinolinic acid methyl ester) - White powder; ESI-MS m/ z 437 [M + H]+; H-NMR (CDCl /CD OD, 1 J = 9 8 Hz (1H, dd,., 9.8 Hz, H-5), Hz H-4), 5.41 (1H, dd, H-2 OCH3), ' m, ), 3.72 (3H, s, H-7), 2.8, 7.7 m, 2.35 (1H, m, Hz, H-2), H-9), ' 2.8, (2H, d, H-2"), H-10), H-8), J= 6.3 J= J= ' (1H, m, H-4 H-3"), Hz, H-8a), H-3), 2.37 (1H, J= ' H-3 ), 1.53 (2H, 1.07 (3H, d, (C-1"), (C-6 ), (C-6), (C-4a), (C-4), (C-5), 72.3 (C-2 ), 69.1 ' (C-4 ), 67.9 (C-1), 51.8 (C-OCH3), ' (C-3 ), 41.5 ' 175 MHz) J= δ 3) C-NMR (CDCl3/CD3OD, J= ), 3.80 (1H, m, 1.96 (2H, dd, 1.56 (2H, m, Hz, OCH3), δ 5.99 (1H, d, ' ), 2.45 (1H, m, 2.8, , MHz) Hz, H-6), , Hz, H (2H, m, 1.11 (3H, dd, OCH ; (6H, m, 2 3 Hz H-1), (1H, dd, 1.67 (1H, m, 1.18 (2H, m, Hz, OCH3), 0.89 J= J= (1H, dd, 4 spectrum of compound (C-5 ), 41.5 ' (C-2"), 37.5 (C-8a), 36.3 (C-8), 34.8 (C-10), 32.8 (C-2), 30.6 (C-7), 27.5 (C-3), 26.8 (C-3"), 24.2 (C-9), 22.9 (C-12), 16.2 (C-13), 13.9 (C-11), 11.7 (C-4"). The 1H and 13 C-NMR spectral data were

54 δ

55 δ

56 δ

57 δ

58 - 56 -

59 δ

60 δ

61 δ δ

62 δ δ δ

63 δ δ δ

64 α λ ε δ

65 α α λ λ ε δ δ δ

66 - 64 -

67 α λ ε δ α λ λ ε

68 δ

69 - 67 -

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71 α ν δ δ

72 δ

73 O HO O HO 1 linoleic acid 2 -linolenic acid O O HO H O H O O O HO COOCH 3 OH H 4 monacolin K 5 mevinolinic acid methyl ester H OH RO O RO O HOOC HO HO H O O H OR HO R = Gal Glc R = Gal Rha R = Ara deoxy-man O 8 daidzein, R=H 10 daidzin, R=Glucose OH OH O OH 9 genistein, R=H 11 genistin, R=Glucose OH COOH 15 4-hydroxybenzeneacetic acid NH 2 COOH 17 phenylalanine NH 2 N N N N HOH 2 C O OH OH 18 adenosine H 2 N COOH N H 19 tryptophan O O O O HO HO OH O O HO O O O O O HO HO OH O O O 22 6"-acetyldaidzin OH HO OH OH O 23 OH OH O 24 6"-acetylgenistin OH O O O HO HO OH O O OH O 25 OH OH OH OH 26 O OH CH 3 H 3 C COOH H 3 C C C OH OH CH 2 COOH

74 - 72 -

75 α γ α γ Target Primer sequences Accession No. GAPDH 5 -GTATGACTCCACTCACGGCAAA-3 (sense) BC GGTCTCGCTCCTGGAAGATG-3 (antisense) PPARγ 5 -CGCTGATGCACTGCCTATGA-3 (sense) NM_ AGAGGTCCACAGAGCTGATTCC-3 (antisense) C/EBPα 5 -AGGTGCTGGAGTTGACCAGT-3 (sense) BC CAGCCTAGAGATCCAGCGAC-3 (antisense) Adiponectin 5 -AGCCTGGAGAAGCCGCTTAT-3 (sense) NM_ TTGCAGTAGAACTTGCCAGTGC-3 (antisense) ap2 5 -CATGGCCAAGCCCAACAT-3 (sense) NM_ CGCCCAGTTTGAAGGAAATC-3 (antisense) Resistin 5 -TCAACTCCCTGTTTCCAAATGC-3 (sense) NM_ TCTTCACGAATGTCCCACGA-3 (antisense) Fas 5 -CTGAGATCCCAGCACTTCTTGA-3 (sense) NM_ GCCTCCGAAGCCAAATGAG-3 (antisense)

76 γ α γ α β Name 에탄올추출 % Name 에탄올추출 % Name 에탄올추출 % M2 M3 M % 에탄올추출물 % 에탄올추출물 % 에탄올추출물 % 에탄올추출물 % 에탄올추출물 % 에탄올추출물 % 에탄올추출물 % 에탄올추출물 % 에탄올추출물 % 에탄올추출물 % 에탄올추출물 % 에탄올추출물

77 - 75 -

78 - 76 -

79 - 77 -

80 γ α γ α γ α γ α

81 γ α

82 γ α α α

83 - 81 -

84 - 82 -

85 - 83 -

86 Relative fat accumulation (% of control) Differentiated control 100 Compounds 50 μm 100 μm 200 μm 22 (6''-O-crotonylgenistin) 69.3 ± 9.0 a 22.8 ± ± (genistein-7-o-α-d-ribofuranoside) 91.7 ± ± ± (6''-O-acetyldaidzin) 81.3 ± ± ± (6''-O-acetylgenistin) 89.1 ± ± ± 6.3 γ α γ α γ

87 γ α

88 γ α γ α

89 - 87 -

90 - 88 -

91 - 89 -

92 - 90 -

93 - 91 -

94 - 92 -

95 - 93 -

96 - 94 -

97 - 95 -

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99 - 97 -

100 - 98 -

101 - 99 -

102 μ

103 μ μ μ μ μ μ

104 μ μ μ μ μ

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110 μ μ μ

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112 μ μ μ μ μ μ μ μ μ μ μ μ μ μ

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114 μ μ μ

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130 μ

131 μ μ μ

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161 시험군 투여용량 (g/kg) 투여액량 (ml/kg) 투여물질 대조군 (Control) 0 20 증류수 실험군 I 홍국발효검정콩분말 실험군 II 1 20 홍국발효검정콩분말 실험군 III 2 20 홍국발효검정콩분말

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172 l l γ l

173 l l γ l l

174 l l

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179 대조군 (n = 6) 시험군 Ⅰ (n = 7 ) 시험군 Ⅱ (n = 2) p-value 연령 ( 세 ) ± ± ± 신장 (cm) ± ± ±

180 l l l l l

181 항목 대조군 (n = 6) 시험군 Ⅰ (n = 7) 시험군 Ⅱ (n = 3) p-value 1) 0 wk ± ± ± 체중 (kg) 6 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± BMI (kg/ m2 ) 6 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± Total Fat(%) /DEXA 12 wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± Total Fat(g) /DEXA 12 wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± Total Lean(g) /DEXA 12 wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2)

182 l < 그림 1> DEXA Arms, Legs, Trunk 부위 Qing He, Xiaojing Zhang, Suyuan He, Luxia Gong, Yungao Sun, Stanley Heshka, Richard J. Deckelbaumand Dympna Gallagher. Higher Insulin, Triglycerides, and Blood Pressure With Greater Trunk Fat in Tanner 1 Chinese. Obesity (2007) 15, < 그림 2> DEXA 의 Android, Gynoid 부위 Rachel Novotny, Scott Going, Dorothy Teegarden, Marta Van Loan, George McCabe, Linda McCabe, Yihe G. Daida and Carol J. Boushey and the ACT Research Team. Hispanic and Asian Pubertal Girls Have Higher Android/Gynoid Fat Ratio Than Whites. Obesity (2007) 15,

183 l l

184 항목 Arms Legs Trunk Android Gynoid Fat (%) Fat (g) Fat (%) Fat (g) Fat (%) Fat (g) Fat (%) Fat (g) Fat (%) Fat (g) 대조군 (n = 6) 시험군 Ⅰ (n = 7) 시험군 Ⅱ (n = 3) p-value 1) 0 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2)

185 l l l l

186 항목 대조군 (n = 6) 시험군 Ⅰ (n = 7) 시험군 Ⅱ (n = 3) p-value 1) 0 wk ± ± ± 총 콜레스테롤 (mg/dl) 6 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± Triglyceride (mg/dl) 12 wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± Cholesterol (mg/dl) 6 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± HDL- LDL- Cholesterol (mg/dl) 6 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2)

187 l l 항목 대조군 (n = 6) 시험군 Ⅰ (n = 7) 시험군 Ⅱ (n = 3) p-value 1) 0 wk ± ± ± wk ± ± ± 허리둘레 (cm) 12 wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± 엉덩이 둘레 (cm) 6 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2)

188 l l l l l

189 항목 대조군 (n = 5) 시험군 Ⅰ (n = 7) 시험군 Ⅱ (n = 3) p-value 1) 0 wk ± ± ± 체중 (kg) 6 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± BMI (kg/ m2 ) 6 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± Total Fat(%) /DEXA 12 wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± Total Fat(g) /DEXA 12 wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) Total Lean(g) /DEXA 0 wk ± wk ± ± ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2)

190 l l

191 항목 Arms Legs Trunk Android Gynoid Fat (%) Fat (g) Fat (%) Fat (g) Fat (%) Fat (g) Fat (%) Fat( g) Fat (%) Fa t(g) 대조군 (n = 5) 시험군 Ⅰ (n = 7) 시험군 Ⅱ (n = 3) p-value 1) 0 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2)

192 l l l l

193 항목 대조군 (n = 5) 시험군 Ⅰ (n = 7) 시험군 Ⅱ (n = 3) p-value 1) 0 wk ± ± ± 총 콜레스테롤 (mg/dl) 6 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± Triglyceride (mg/dl) 6 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk 1.20 ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± Cholesterol (mg/dl) 6 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± HDL- LDL- Cholesterol (mg/dl) 6 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2)

194 l l 항목 대조군 (n = 5) 시험군 Ⅰ (n = 7) 시험군 Ⅱ (n = 3) p-value 1) 0 wk ± ± ± wk ± ± ± 허리둘레 (cm) 12 wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± 엉덩이 둘레 (cm) 6 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2)

195 항목 RBC (10^6/ μl ) WBC (10^3/ μl ) Hematocrit (%) Hemoglobin (g/dl) Platelet (10^3/ μl ) 대조군 (n = 6) 시험군 Ⅰ (n = 7) 시험군 Ⅱ (n = 3) p-value 1) 0 wk 4.78 ± ± ± wk 4.67 ± ± ± wk 4.79 ± ± ± wk-0wk 0.01 ± ± ± p-value 2) wk 6.82 ± ± ± wk 6.48 ± ± ± wk 6.85 ± ± ± wk-0wk 0.03 ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk 0.07 ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2)

196 항목 K (mmol/l) 대조군 (n = 6) 시험군 Ⅰ (n = 7) 시험군 Ⅱ (n = 3) p-value 1) 0 wk 4.30 ± ± ± wk 4.28 ± ± ± wk 4.17 ± ± ± wk-0wk ± ± ± Cl (mmol/l) p-value 2) wk ± ± ± wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) Creatinine (mg/dl) 0 wk 0.82 ± ± ± wk 0.79 ± ± ± wk 0.84 ± ± ± wk-0wk 0.02 ± ± ± p-value 2) BUN (mg/dl) 0 wk ± ± ± wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2)

197 항목 Uric acid (mg/dl) 대조군 (n = 6) 시험군 Ⅰ (n = 7) 시험군 Ⅱ (n = 3) p-value 1) 0 wk 6.00 ± ± ± wk 6.13 ± ± ± wk 5.95 ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk 9.87 ± ± ± Ca (mg/dl) 6 wk 9.70 ± ± ± wk 9.67 ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) Glucose (mg/dl) 0 wk ± ± ± wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) Protein (g/dl) 0 wk 7.65 ± ± ± wk 7.40 ± ± ± wk 7.62 ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) Albumin (g/dl) 0 wk 4.82 ± ± ± wk 4.68 ± ± ± wk 4.78 ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) ALP (IU/L) 0 wk ± ± ± wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk 0.33 ± ± ± p-value 2)

198 항목 CK (IU/L) 대조군 (n = 6) 시험군 Ⅰ (n = 7) 시험군 Ⅱ (n = 3) p-value 1) 0 wk ± ± ± wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) Na (mmol/l) 0 wk ± ± ± wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2)

199 γ 항목 AST (GOT, IU/L) 대조군 (n = 6) 시험군 Ⅰ (n = 7) 시험군 Ⅱ (n = 3) p-value 1) 0 wk ± ± ± wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk 6.83 ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± ALT (GPT, IU/L) 6 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk 0.33 ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± γ-gtp (mg/dl) 6 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2)

200 항목 최고혈압 (mmhg) 대조군 (n = 6) 시험군 Ⅰ (n = 7) 시험군 Ⅱ (n = 3) p-value 1) 0 wk ± ± ± wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± 최저혈압 (mmhg) 6 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk ± ± ± p-value 2) wk ± ± ± 맥박 ( 회 ) 6 wk ± ± ± wk ± ± ± wk-0wk 4.17 ± ± ± p-value 2)

201 대조군 시험군Ⅰ 시험군Ⅱ 감기 1 2 두드러기 1 복통 1 1 비염 1 설사 1 1 우울감 1 입안건조 1 장염 1 팔저림 1 총건수

202 l l l

203 l l l

204 μ μ

205 Total polyphenol (mg/g-dry basis) a b c DTL RTL PFTL Total flavonoid (mg/g-dry basis) a b b DTL RTL PFTL EDA (%) a 92.4 ab 85.2 b DTL RTL PFTL EDA %/ mg polyphenol a b 12.2 c DTL RTL PFTL Tea leaves mg/ml

206 SOD like activity (munits) DTL RTL PFTL 980 a 820 b 637 c SOD like activity (munits)/mg polyphenol 10,000 8,000 6,000 4,000 2, , a 4, b 3, c DTL RTL PFTL Tea leaves mg/ml μ μ μ

207 XO inhibitory activity (%) DTL RTL PFTL 24.4 a 8.1 b 5.7 b Tea leaves mg/ml XO inhibitory %/mg polyphenol a b b DTL RTL PFTL

208 Nitrite scavenging activity (%) a a a DTL RTL PFTL b b c Hydrogen peroxide (um) a b c 0 ph 1.2 ph 3.0 ph 6.0 DTL RTL PFTL

209

210 Total polyphenol (mg/g, dry basis) w ater extracts 286A 70% ethanol extracts 126a 117a 125B 94b 70c 62C 47d 39d 47D 15E 13E 13e 7F FT TM15 TM30 PU FM MM15 MM30 Total flavonoid (mg/g, dry basis) w ater extracts 70% ethanol extracts 121A 101a 78b 78B 71b 77b 65C 68c 47D 46D 33d 32d 24E 15F FT TM15 TM30 PU FM MM15 MM30 Theaflavin (%, dry basis) w ater extract 70% ethanol extract 13.5A 10.8B 3.6C 2.9D 2.5E 1.6b 1.8a 1.0d 0.7e 0.8de 1.2cd 0.4F 0.3 f 0.1G FT TM15 TM30 PU FM MM15 MM30 Thearubigin (%, dry basis). 10 w ater extracts 8 70% ethanol extracts 7.4A 6 4.5B 4.4B 4.0C 4 3.4a 3.4a 2.8b 2.8D 2 1.8E 0.6F 0.6c 0.1e 0.2d 0.1e 0 FT TM15 TM30 PU FM MM15 MM

211 Electon donating ability (%) w ater extracts 70% ethanol extracts 63A 56BC 58B 52a 53C 40b 41b 40b 40D 36c 15d 7E 7e 2F FT TM15 TM30 PU FM MM15 MM30 Reducing power (OD at 700 nm) w ater extract 0.41a 70% ethanol extract 0.22b 0.23b 0.16c 0.15A 0.12d 0.11B 0.12B 0.10C 0.08D 0.05E 0.05E 0.04e 0.03e FT TM15 TM30 PU FM MM15 MM SOD-like activity (units) a 1.22A 0.77B w ater extract 70% ethanol extract 0.38C 0.3C6 0.32C 0.36C XO inhibitory activity (%) b w ater extract 70% ethanol extract 67a 30c 30c 78A b 0.13c 0.05d 0.08D 0.01e 0.01e 0.01e FT TM15 TM30 PU FM MM15 MM D 6.6C 11.7B 0.7D 11d 0.5e 0.5D 0.6e 0.5D FT TM15 TM30 PU FM MM15 MM w ater extract 85a w ater extract Iron chelating activity (%) % ethanol extract 48b 45bc 40c 37C 38C 32D 42B 38d 46AB 39BC 35e 48A 43c Hydrogen peroxide (um) % ethanol extract 36.5a 24.9b 18.7c 16.5A 15.7A 8.4d 8.6B 6.1e 6.7de 4.9C 2.6D 2.2D 8.8d 4.9C 0 0 FT TM15 TM30 PU FM MM15 MM30 FT TM15 TM30 PU FM MM15 MM

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214 μ ε

215 ε ε

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217 μ

218 7주간 고지방 식이에서 Fig. 17. 홍국 발효 후-발효차와 녹차식이 섭취에 에 의한 흰쥐 의 간 조직사진 3. M onascus속 미생물을 이용한 홍국 후 후 발효차 시제품 생산 발효차의 비만개선효과를 확인하고, 신속한 제품화와 남 하였다. 녹차(Aspalathus linearis)는 경상 다. 차의 발효는 유념을 5회 채취한 반복하여 37.5%가되게 조정한 1 에서 비한 90분간 음차(CHA)를 조제하였다. 이 후 첫 에서 2 L들이 균하였다. polypropylene 살 씩 혼 40 균한 ml 차는 을 덖 합하여 30 )을 의 음 넣어 착 고 air filter를 부 실 덖 음과 한 후 12 이 되도록 식히고 미리 준 배양하여 에서 최종 수분함량이 2% 내외가 되도록 에서 씩넣 옮겨 온 g 의 incubator에서 15일간 에 사용하였다. 하여 사용하였 음차에 증류수를 가하여 수분함량이 bag에 500 후는 무균상으로 가능한 시제품을 생산 엽 채취 50 덖 솥 물(1지2 녹차 잎을 하루 동안 위조시킨 다음 2 덖 살 액 50 끝난 홍국 배양 하였다. 발효가 가압 군 도 하동 판매가 충분히 발효차를 제조 건조시켜 실험

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228 NC UMI FMI UM FM HC Fig. 24. 비발효 뽕잎과 발효 뽕잎차의 1% 물 추출물, 2% 분말 8주간 식이에 의한 간조직 사진 후 발효뽕잎차 시제품 생산 b 북 것 크 른 후 40 켰 총 0 00 씩 넣 착 홍 배 액 50 L 0 외 후 5 쳐 려 홍 티백 태 나. M onascus속 미생물을 이용한 시제품 생산용 뽕잎(M. al a leaves)은 경 는 생 뽕잎을 1 leaves: U 2 cm bag에 3 g 균시킨 뽕잎에 미리 준비한 40 을 사용하였다. 뽕잎의 발효 에서 2일간 건조시 으며(unfermented mulberry F), 발효는 건조시킨 뽕잎에 물을 가하여 들이 polypropylene 살 기로 자 경산에서 생산한 에서 수분함량이 2% 내 였다. 사용자의 편이를 고 국 수분 함량이 3 %가 되게 조절한 고 air filter를 부 양 m 를 접종하여 3 가 되도록 건조시킨 하여 하여 121 국발효뽕잎차는 Fig. 25. M onascus속 미생물을 이용한 mm 체로 형 후 에서 90분간 에서 15일간 살 후 2 L 균하였다. 배양한 다음, 서 발효뽕잎차를 제조하 로 제작하여 상품화하였다. 발효뽕잎차 시제품

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241 α α

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244 β β

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247 O HO H HO O H O O OH OH OH O HOH 2C CH 2OH OH OH O O O O O OH O CH 3 HO O OH OH OH OH OH

248 γ

249 γ

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252 γ

253 γ γ

254 γ

255 γ γ

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257 γ

258 γ

259 γ γ

260 γ

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263 성별 시험군 대조군 N=50 N=50 남, n(%) 45 (90.00) 44 (88.00) 여, n(%) 5 (10.00) 6 (12.00) p-value $ Mean±SD 49.48± ±10.30 연령 ( 세 ) Min, Max 26.00, , *

264 시험군 대조군 N=35 N=36 p-value* Mean±SD Mean±SD Baseline( 방문 1) 40.14± ± 주 ( 방문3) 36.54± ±14.78 AST Change from baseline -3.60± ± (GOT) p-value** (IU/L) 12주 ( 방문4) 36.65± ±13.40 Change from baseline -3.49± ± p-value** Baseline( 방문 1) 54.63± ± 주 ( 방문3) 46.91± ±25.11 ALT Change from baseline -7.71± ± (GPT) p-value** (IU/L) 12주 ( 방문4) 45.71± ±24.76 Change from baseline -8.91± ± p-value** Baseline( 방문 1) 90.34± ± 주 ( 방문3) 82.17± ±51.12 Change from baseline -8.17± ± r-gtp p-value** (IU/L) 12주 ( 방문4) 74.69± ±58.51 Change from baseline ± ± p-value**

265

266 시험군 대조군 N=50 N=50 p-value* Mean±SD Mean±SD Baseline( 방문 1) 38.82± ± 주 ( 방문 3) 36.66± ±13.10 AST (GOT) (IU/L) Change from baseline -2.16± ± p-value** 주 ( 방문 4) 36.18± ±13.64 Change from baseline -2.64± ± p-value** Baseline( 방문 1) 51.34± ± 주 ( 방문3) 46.12± ±24.88 ALT (GPT) (IU/L) Change from baseline -5.22± ± p-value** 주 ( 방문 4) 45.24± ±24.58 Change from baseline -6.10± ± p-value** Baseline( 방문 1) 92.84± ± 주 ( 방문3) 91.76± ±47.97 r-gtp (IU/L) Change from baseline -1.08± ± p-value** 주 ( 방문 4) 87.08± ±54.17 Change from baseline -5.76± ± p-value**

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268 시험군 대조군 평가변수 N=35 N=36 p-value* Mean±SD Mean±SD Baseline( 방문 2) 81.03± ± 주 ( 방문 3) 79.26± ±19.32 Change from baseline -1.77± ± TOTAL p-value** 주 ( 방문4) 81.23± ±16.10 Change from baseline -0.20± ± p-value** Baseline( 방문2) 32.54± ± 주 ( 방문 3) 33.37± ±8.92 전반적 피로도 Change from baseline 0.83± ± p-value** 주 ( 방문4) 33.20± ±7.80 Change from baseline 0.66± ± p-value** Baseline( 방문2) 26.63± ±5.92 6주 ( 방문3) 24.77± ±6.41 Change from baseline -1.86± ± 일상생활기능장애 p-value** 주 ( 방문4) 25.94± ±5.49 Change from baseline -0.69± ± p-value** Baseline( 방문2) 21.86± ±4.71 6주 ( 방문3) 21.11± ±5.66 Change from baseline -0.74± ± 상황적피로 p-value** 주 ( 방문4) 22.09± ±4.47 Change from baseline 0.23± ± p-value**

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270 시험군 대조군 평가변수 N=50 N=50 p-value* Mean±SD Mean±SD Baseline( 방문 2) 75.48± ± 주 ( 방문 3) 75.10± ±19.13 Change from baseline -0.38± ± TOTAL p-value** 주 ( 방문4) 76.28± ±16.82 Change from baseline 0.80± ± p-value** Baseline( 방문2) 30.34± ±9.43 6주 ( 방문3) 31.12± ±8.66 전반적 피로도 Change from baseline 0.78± ± p-value** 주 ( 방문 4) 31.12± ±7.82 Change from baseline 0.78± ± p-value** Baseline( 방문2) 24.86± ±6.40 6주 ( 방문3) 23.84± ±6.89 일상생활 기능장애 Change from baseline -1.02± ± p-value** 주 ( 방문 4) 24.60± ±6.02 Change from baseline -0.26± ± p-value** Baseline( 방문2) 20.28± ±4.70 6주 ( 방문3) 20.14± ±5.40 상황적 피로 Change from baseline -0.14± ± p-value** 주 ( 방문 4) 20.56± ±4.45 Change from baseline 0.28± ± p-value**

271

272 시험군 대조군 N=50 N=50 p-value* Mean±SD Mean±SD Baseline( 방문 1) 4.87± ±0.40 RBC (106/ml) 12 주 ( 방문 4) 4.85± ±0.42 Change from baseline -0.01± ± p-value** Baseline( 방문 1) 15.14± ±1.16 Hb (g/dl) 12 주 ( 방문 4) 15.22± ±1.23 Change from baseline 0.08± ± p-value** Baseline( 방문 1) 44.84± ±3.23 Hct (%) 12 주 ( 방문 4) 44.60± ±3.53 Change from baseline -0.25± ± p-value** Baseline( 방문 1) 6.31± ±1.72 WBC (103/ml) 12 주 ( 방문 4) 6.62± ±1.64 Change from baseline 0.31± ± p-value** Baseline( 방문 1) ± ±66.44 Platelet (103/ml) 12 주 ( 방문 4) ± ±78.22 Change from baseline 5.74± ± p-value**

273 Na (mmol/l) K (mmol/l) Cl (mmol/l) Calcium (mg/dl) CK (IU/L) Protein (g/dl) 시험군 대조군 N=50 N=50 Mean±SD Mean±SD Baseline( 방문 1) ± ± 주 ( 방문 4) ± ±2.48 p-value* Change from baseline -0.04± ± p-value** Baseline( 방문 1) 4.26± ± 주 ( 방문 4) 4.25± ±0.25 Change from baseline -0.01± ± p-value** Baseline( 방문 1) ± ± 주 ( 방문 4) ± ±2.40 Change from baseline 0.08± ± p-value** Baseline( 방문 1) 9.41± ± 주 ( 방문 4) 9.27± ±0.27 Change from baseline -0.14± ± p-value** Baseline( 방문 1) ± ± 주 ( 방문 4) ± ±81.27 Change from baseline ± ± p-value** Baseline( 방문 1) 7.56± ± 주 ( 방문 4) 7.46± ±0.34 Change from baseline -0.10± ± p-value**

274 Albumin (g/dl) Glucose (mg/dl) T. Bilirubin (g/dl) ALP Creatinine (mg/dl) BUN (mg/dl) Uric acid (mg/dl) LDH 시험군 대조군 N=50 N=50 Mean±SD Mean±SD Baseline( 방문 1) 4.68± ± 주 ( 방문 4) 4.65± ±0.24 p-value* Change from baseline -0.04± ± p-value** Baseline( 방문 1) ± ± 주 ( 방문 4) ± ±22.92 Change from baseline -3.46± ± p-value** Baseline( 방문 1) 0.88± ± 주 ( 방문 4) 0.88± ±0.32 Change from baseline -0.00± ± p-value**

275 시험군 대조군 N=50 N=50 Mean±SD Mean±SD p-value* Total Chole. (mg/dl) Triglyceride HDL-chole. LDL-chole. PT aptt

276 체중 (kg) 시험군 대조군 N=50 N=50 p-value* Mean±SD Mean±SD Baseline( 방문2) 74.78± ±9.80 6주 ( 방문3) 74.72± ±9.76 Change from baseline -0.06± ± p-value** 주 ( 방문4) 74.88± ±9.67 Change from baseline 0.10± ± p-value** Baseline( 방문2) 77.92± ±9.09 6주 ( 방문3) 77.32± ±9.12 Change from baseline -0.60± ± 맥박 p-value** ( 회 /min) 12주 ( 방문4) 77.76± ±8.43 Change from baseline -0.16± ± p-value** Baseline( 방문2) ± ± 주 ( 방문3) ± ±11.48 Change from baseline 1.18± ± 수축기압 p-value** (mmhg) 12주 ( 방문4) ± ±11.74 Change from baseline -0.42± ± p-value** Baseline( 방문2) 82.74± ±8.49 6주 ( 방문3) 84.34± ±7.84 Change from baseline 1.60± ± 이완기압 p-value** (mmhg) 12주 ( 방문4) 84.38± ±8.03 Change from baseline 1.64± ± p-value**

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285 원료명지표성분표시량 (1일 3,360mg) 비고도라지추출물로써 3g 개별인정서도라지추출물 (Platycodin D 27.9mg) 호

286 상온 (25 ) 가속 (40 ) 시험항목제조시 1 개월 2 개월 3 개월 1 개월 2 개월 3 개월 성상적합적합적합적합적합적합적합 대장균군음성음성음성음성음성음성음성 붕해도 ( 장용성 ) 적합적합적합적합적합적합적합 납불검출 - - 불검출 - - 불검출 총비소불검출 - - 불검출 - - 불검출 카드뮴불검출 - - 불검출 - - 불검출 총수은불검출 - - 불검출 - - 불검출

287 항목

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296 β β β β

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299 HO OH OH O OH HO 3 O HOH 2 C H CH 2 OH OH H OH OH O 28 O O O OH O O OH O CH 3 OH O OH O OH OH OH

300 μ μ μ μ μ μ μ μ

301 μ

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316 1 차년도 (2011) 구분 출원 특허신품종 등록 품종명칭등록 품종생산수입판매신고 품종보호 출원 등록 유전자원등록 목표 달성 논 SCI 문 비 SCI 기타 2차년도 (2012) 3차년도 (2013) 계 목표 달성 목표 달성 목표 달성 구분기술실시 ( 이전 ) 상품화정책자료교육지도언론홍보기타 1) 활용건수목표 달성

317

318 β

319 Two New Isoflavone Glycosides from the Extracts of the Fungus Monascus pilosus-fermented Black Soybean Bull. Chem. Soc. Korean Triterpenoid Saponins Isolated from Platycodon grandiflorum Inhibit Hepatitis C Virus Replication H i n d a w i P u b l i s h i n g Corporation

320 지원대상 ( 학위별취득자 ) 성별 계열별 박사 석사 학사 기타 남 여 공학 농림수산학 의약보건학 인력양성자수

321 Global Market HCV Therapy

322 α

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337 γ γ

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339 주 의 이보고서는농림축산식품부에서시행한발효미생물을이용한기능성식품 산업화연구사업단의연구보고서입니다 이보고서내용을발표할때에는반드시농림축산식품부에서시행한발효 미생물을이용한기능성식품산업화연구사업단의연구결과임을밝혀야 합니다 국가과학기술기밀유지에필요한내용은대외적으로발표또는공개하여서는 아니됩니다

농림축산식품부장관귀하 본보고서를 미생물을활용한친환경작물보호제및비료의제형화와현장적용매뉴 얼개발 ( 개발기간 : ~ ) 과제의최종보고서로제출합니다 주관연구기관명 : 고려바이오주식회사 ( 대표자 ) 김영권 (

농림축산식품부장관귀하 본보고서를 미생물을활용한친환경작물보호제및비료의제형화와현장적용매뉴 얼개발 ( 개발기간 : ~ ) 과제의최종보고서로제출합니다 주관연구기관명 : 고려바이오주식회사 ( 대표자 ) 김영권 ( 농림축산식품부장관귀하 본보고서를 미생물을활용한친환경작물보호제및비료의제형화와현장적용매뉴 얼개발 ( 개발기간 :2014. 7. 29 ~ 2016. 7. 28.) 과제의최종보고서로제출합니다. 2016. 7. 28. 주관연구기관명 : 고려바이오주식회사 ( 대표자 ) 김영권 ( 인 ) 협동연구기관명 : 목원대학교산학협력단 ( 대표자 ) 고대식 ( 인 ) 협동연구기관명

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