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1 RESEARCH ARTICLE Kor. J. Aesthet. Cosmetol., 갈락토미세스발효여과물을함유한에센스타입화장료가각질, 모공, 피지, 피부밝기, 여드름개선에미치는영향 이민지 1, 김현수 2, 조아령 1, 전소현 3, 이나경 4, 안규중 5, 안인숙 1 * 1 건국대학교한국피부임상과학연구소, 2 ( 주 ) 마녀공장, 3 동원대학교뷰티디자인계열, 4 인천재능대학교미용예술과, 5 건국대학교의학전문대학원피부과학교실 The Effects of Essence-Formed Cosmetic Ingredients Containing the Galactomyces Ferment Filtrate on Skin Improvements in Keratinization, Pores, Sebum Excretion, Brightness and Acne Minji Lee 1, Hyun-Soo Kim 2, Aryeong Cho 1, So Hyeon Jeon 3, Na Kyeong Lee 4, Kyu Joong Ahn 5, In Sook An 1 * 1 Korea Institute for Skin and Clinical Sciences, Konkuk University, 2 Manyo Factory, Co. Ltd., 3 Department of Beauty Design, Dongwon University, 4 Department of Beauty Art, Jaeneung University, 5 Department of Dermatology, Konkuk University School of Medicine Abstract In this study, we evaluated the effects of essence-formed cosmetic ingredients containing the galactomyces ferment filtrate on human skin improvements in keratinization, pores, sebum excretion, brightness and acne. For analyzing the effects, twenty volunteers were participated and each results was determined by treating the essence containing 97% of galactomyces ferment filtrate on their faces in three times. The results showed that the number of the large opened pores and blackhead pores on faces were significantly reduced more than and 21.84% by treating the essence as compared to the number of pores on untreated control faces. Also the amount of sebum and keratin in faces were meaningfully reduced by and 16.47%, respectively. In addition, we further demonstrated that the levels of the skin brightness were improved after treatment of the reagent by 2.49% respectively. Moreover, the number of acne were decreased 9.59%. Survey analysis showed that the volunteers had highly satisfaction on the reagents. Collectively, the results indicated that the 97% of galactomyces containing essence-formed cosmetics have an improved effect on facial skin. Keywords: Galactomyces ferment filtrate, Pore, Sebum, Skin brightness, Acne 현대사회의발달로인해인간관계의중요성이증가함에따라 한사람의외모는첫인상을결정하는중요한요인이되었다. 아름다운외모를가꾸기위해깨끗하고건강한피부에대한사회 Both authors contributed equally to this work. *Corresponding author: In Sook An, Korea Institute for Skin and Clinical Sciences, Konkuk University, 120 Neungdong-ro, Gwangjin-gu, Seoul , Republic of Korea Tel.: , Fax: anis@skinresearch.or.kr Received December 10, 2013; Revised February 8, 2014; Accepted February 13, 2014; Published February 28, 2014 적관심이증가하면서여러분야에서피부를가꾸기위한방법들이개발되고있다 ( 이선화등, 2012). 갈락토미세스는 Saccharomyces 속의효모 (Yeast) 로예로부터발효식품을만드는데이용되어왔다. 최근갈락토미세스의발효산물에여러유용한성분들에대한연구가진행되고있으며 (Kataoka et al., 2013), 최근국내업계에서는갈락토미세스발효여과물 (Galactomyces ferment filtrate) 을함유한화장료의개발을위한연구가점점늘고있는추세이다. 인체노출부위에서피부이상 (Skin disorder) 은미용적인측면과결합되어있어심리적불안감, 사회생활의거부감과정신적인스트레스를초래하고삶의질을저하시킬수있으며, 그대표적인예가여드름이다 ( 김현주, 1998). 여드름의병인은남성호르몬에의한피지분비의증가, 과각화된모낭 77

2 Kor. J. Aesthet. Cosmetol., 벽의증가, Propionibacterium acnes (P. acnes) 의증식에의한염증유발, 피부장벽이상, 유전, 환경적요인, 모낭의반응성등복합적인요인으로발생한다 ( 김성과리순화, 2012; Farrar & Ingham, 2004). 여드름은남성호르몬이피지분비를촉진하고배출구인모공이두꺼운각질로채워지고, 모공속의여드름박테리아가피지의주성분인트리글리세라이드 (Triglyceride) 를분해하여유리지방산 (Free fatty acid) 으로변하게한다. 인체는이런반응에대처하기위해서면역반응이시작되고백혈구가모이고그로인해염증이발생하며모공이막혀피지와각질이섞여서배출되지못하고여드름이발생한다 ( 박은선등, 2009; 설재원, 2010; 최광성과김영근 1999; 최문희등, 2012). 여드름의종류는난포벽파열유무에따라비염증성과염증성여드름으로나눈다. 비염증성여드름에는가벼운면포가나타나모공이각화되는단계로모공내에피지와각질이뭉쳐빠져나오지못하고고여있는상태로블랙헤드와화이트헤드가있다 ( 홍지연, 2007). 염증성여드름에는붉은여드름인구진과여드름이곪은농포, 모낭의염증이진피에서파괴되어그주변이넓고깊게부풀면서딱딱한낭포여드름의가장심한형태로크기가크고염증이심하면서다량의농을포함하고있는결절이있다 ( 김미라, 2006). 여드름은주로사춘기부터시작되고, 남자는 15~19세, 여자는 14~16세사이에흔하게발생한다. 약 80% 의여드름질환자는 20세중반부터서서히여드름병변이없어지기시작한다 ( 나명순등, 2009; 신실, 1973). 그러나성인여드름은청소년기부터성인기까지이어지는지속형여드름 (Persistent acne) 과 25세이후처음발생하는후발형여드름 (Late-onset acne) 으로나누어지며 ( 신민경, 2008), 여성의경우 40대까지지속될수있다 (Cunliffe & Gould, 1979). 여드름을조절하기위해서는박탈된각질형성세포의응집을막는방법, P. acnes를감소시키거나없애는방법, 면포용해제를이용해모공을막는물질을제거하는방법, 항염증제를적용하여염증성반응을치료하는방법, 피지선활동을감소시켜피지분비를막는방법등이있다 (Baumann, 2004). 여드름을치료하기위해국부성레티노이드류치료제, 호르몬치료, 국부성항균제, 구강투여항생제치료등많은치료방안이개발되어왔다. 최근에는유분, 수분, 각질상태를완화하는화장품을이용한여드름개선방안에대한관심이꾸준히증가하고있으며, 동시에지속적이고안전한효과에대한중요성이대두되고있다. 이러한사회적관심과함께최근여드름과관련된많은화장품들이출시되고있다. 그중피지와각질, 모공상태를개선함으로서여드름을개선하는화장품의개발이활발하게이루어지고있으나이에대한과학적연구는드문실정이다. 따라서본인체적용시험에서는갈락토미세스발효여과물 97% 함유에센 스타입화장료를 20명의성인남녀피시험자들을대상으로시험물질적용전과후의각질, 모공, 피지, 피부밝기, 여드름상태를비교함으로써, 갈락토미세스발효여과물이피부상태개선에미치는영향을연구하였다. 1. 연구대상본연구는자발적으로모집된 20세이상의안면부위에여드름이있는성인남녀중에서시험기간동안추적관찰이가능한사람, 시험책임자의문진과이학적검사상얼굴에여드름이있고 Global acne grading system에따라 mild~very severe 등급에해당되는경우의피시험자 20명을선정하였다. 또한임신또는수유중인여성과임신가능성이있는여성, 피부질환치료를위해스테로이드가함유된피부외용제를 1개월이상적용하는사람, 민감성 과민성피부를가진사람, 연구시작전 3개월내에시험부위에여드름개선화장품을적용한사람, 연구시작전 6개월내에시험부위에시술을받은사람은제외하였다. 2. 시험물질의용법 용량본인체적용시험에사용된시험물질은갈락토미세스발효여과물 97% 가함유된에센스타입의시험용화장품으로준비되었다. 모든시험은항온항습실 ( 온도 : 22±1, 습도 : 45±5%) 에서진행되었으며, 동일한세안제로세안후 30분간안정을취한뒤측정하였다. 피시험자는에센스적당량을안면부에고르게도포하도록하였으며, 시험기간 4주동안아침, 저녁으로하루 2번적용하도록하였다. 인체적용시험기간중에는시험물질이외에시험결과에영향을미칠수있는여드름개선화장품의적용을일체금하였으며, 팩이나마사지등의시술도금하였다. 3. Keratin sticker에의한각질개선평가각질개선평가를위해 Keratin sticker ( 한국피부임상과학연구소, Korea) 와 Digital Light Microscope (Advanced Microscopy Group Inc., USA) 를적용하였다. 각질개선평가는 Keratin sticker를이용하여동일한시험담당자가피시험자의왼쪽볼부위의각질을채취한후, Coomassie brilliant blue G (Sigma-Aldrich, Inc., USA) 를이용하여 24시간동안염색한뒤, 탈염색및수세하여각질세포만이염색되도록하였다. 염색된각질세포는 Microscope에내장된카메라로 100배확대한이미지를촬영한뒤, 각질개선도를 score 1~5 (score : 1=very mild, 2=mild, 3=moderate, 4=severe, 5=very 78

3 갈락토미세스발효여과물함유화장료가피부개선에미치는영향 severe) 로육안평가하였다. 기기측정은시험물질적용전과적용 2주, 4주후의시점에서이루어졌다. 4. 전안촬영시스템에의한피부의모공개선평가피부의모공개선평가를위해전안촬영시스템 (Robo Skin Analyzer CS50, Inforward, Inc., Japan) 을적용하였다. 일관된촬영을위해균일한조명과동일한포지션에서한명의시험담당자가모든피시험자의안면을측정하였다. 피시험자이마의헤어라인을확보하기위하여모발을헤어밴드로고정시킨후동일한상의가운을착용하고의자에앉도록하여, 얼굴을케이지아래에있는툴바의상단에고정시킨채얼굴의정면과좌 우측면총 3면을측정하였다. 기기측정은시험물질적용전과적용 2주, 4주후의시점에서이루어졌으며, 정확한재현성을위하여적용전안면촬영결과물의특징점들과오버랩시켜적용후촬영결과물을비교하였다. 모공에대한평가는크게열린모공 (0~215 단계의음영및 0.3~0.6 mm 2 의사이즈의음영 ), 블랙헤드모공 ( 눈에띄는모공중내부에 0~40 단계의어두운음영 ) 에대하여분석하였다. 5. DermaLab USB sebum probe에의한피지개선평가피지개선평가를위해 DermaLab USB sebum probe (Cortex Technology, Inc., Denmark) 를적용하였다. 피지측정은동일한시험담당자가피지측정스트립을피시험자의오른쪽코부위에동일한압력으로 30초간지그시눌러피지를흡착시킨후, Tape reader기에피지측정스트립을삽입하였다. 삽입된피지측정스트립이피지에의해반투명화된정도를계산하여피지량을측정하며단위는 % 이다. 기기측정은시험물질적용전과적용 2주, 4주후의시점에서이루어졌다. 6. 분광광도계에의한피부밝기개선평가피부밝기개선평가를위해분광광도계 (Spectrophotometer CR-2600D, Konica Minolta, Inc., Japan) 를적용하였다. 동일한시험담당자가모든피시험자의안면오른쪽볼부위에 3 번연속하여측정하고, 그평균값을계산하여분석에적용하였다. 기기측정은시험물질적용전과적용 2주, 4주후의시점에서이루어졌다. 분광광도계의측정값은 L*, a*, b* 3가지인자로구성되어있으며, L* 값은명암 (brightness), a* 값은붉은색 (redness), b* 값은노란색 (yellowness) 을나타낸다. 따라서피부밝기를측정하는값으로는 L* 값을분석에적용하였다. 7. Global acne grading system에따른여드름육안평가여드름개선평가를위해시험물질의적용전, 적용 2주, 적용 4주후에 Global acne grading system 에따라육안평가하였다. Global acne grading system (GAGS) 은얼굴과흉부 와등을 6구역 ( 이마, 양볼, 코, 턱, 흉부와등상부 ) 으로나누어각각의구역을여드름병변의심각성에따라 0-4점 (0=Nil, 1=Comedone, 2=Papule, 3=Pustule, 4=Nodule) 으로평가한다. 한구역에다양한병변이나타난경우는가장심각한병변을기준으로평가한다. 여기에서도출한각구역의병변점수를기준으로 GAGS의계산공식을적용한총합산점수에따라피시험자의여드름등급 (1-18점 =mild, 19-30점 =moderate, 31-38점 =severe, 39점이상 =very severe) 을분류하였다. 8. 설문평가피시험자들의안면피부상태특성과시험후의시험물질에대한주관적평가및물질기호도평가등을실시하였다. 안면피부상태특성은 16문항을선다형설문평가를실시하여조사하였고, 시험후에는피시험자가주관적으로느끼는모공, 피지조절, 피부결등에대한각항목별주관적평가및물질기호도등을살펴보기위해 Likert형 5점척도 (1= 전혀그렇지않다, 5= 정말그렇다 ) 를이용하여 29문항을실시하였다. 9. 통계분석방법본시험의통계처리는 SPSS 17.0 for Windows 프로그램을이용하여분석하였다. 피시험자의설문지분석을위하여평균, 표준편차, 빈도, 백분율을실시하였고, 다양한피부개선도에대한기기측정결과의유의한변화여부를분석하기위하여 paired t-test 분석을실시하였다. 1. 피시험자의특성자발적으로모집된안면부위에여드름이있는성인남녀각각 13명, 7명, 총 20명피시험자의평균연령은 23.40±2.68이었다 ( 표 1). 피시험자의피부타입에는건성인비율이 45.0% 로가장높았으며, 가장큰피부고민은여드름 (45.0%) 이라고응답하였다 ( 표 2). 피지분비가많다고생각하는피시험자의비율이 80.0%, 크게열린모공이많다고응답한피시험자비율은 75.0%, 블랙헤드모공이많다고응답한피시험자비율은 65.0%, 피부탄력이떨어진다고응답한비율은 40.0%, 얼굴이잘붉어진다고응답한비율은 35.0%, 피부에홍조가있다고표 1. 피시험자기본정보 ( 20 ) (13), (7)

4 Kor. J. Aesthet. Cosmetol., 표 2. 안면피부상태특성 (%) ( 표 2 계속 ) ( ) (%) 표 3. 각질변화량육안평가결과 p-value *** N=20, score 1: very mild, 2: mild, 3: moderate, 4: severe, 5: very severe. 80

5 갈락토미세스발효여과물함유화장료가피부개선에미치는영향 그림 1. 각질개선도에대한이미지분석사진. 그림 2. 크게열린모공이미지분석사진. 81

6 Kor. J. Aesthet. Cosmetol., 응답한비율은 30.0% 로그렇지않다고응답한비율 (60.0%) 보다낮게나타났다. 피부톤이칙칙하다고응답한비율은 55.0%, 각질이많이일어난다고응답한비율은 45.0% 로나타났다. 윤기가없고푸석푸석하다고응답한비율은 40.0%, 색소침작및잡티가많다고응답한비율은 60.0% 로나타났으며, 잔주름이많다고응답한비율은 25.0% 로그렇지않다고응답한비율 (35.0%) 보다낮게나타났다. 깊은주름이많다고응답한비율은 30.0% 로그렇지않다고응답한비율 (45.0%) 보다낮게나타났다. 피부결이거칠다고응답한비율은 15.0% 로그렇지않다고응답한비율 (40.0%) 보다낮게나타났다. 피부당김 ( 건조함 ) 이있다고응답한비율은 55.0% 로나타났다 ( 표 2). 2. 피부각질변화시험담당자가 Keratin sticker 와 Microscope 를이용해육안평가한결과시험물질적용전과적용 2주후, 적용 4주후의각각의각질변화량살펴본결과는표 3과같다. 적용전평균값은 4.25±0.64이며적용 4주후 3.55±0.83으로평균값이감소되었다. 또한적용전과비교하여적용 4주후통계적으로유의하게나타나 (p<.001) 각질개선에도움을주는것으로판단된다. 그림 1에서는 20명피험자를대상으로한 Keratin sticker 분석내용중대표적으로 5명에대한각질변화량이미지결과를정리하였다. 3. 피부모공변화피시험자의크게열린모공, 블랙헤드모공을측정하여시험물질적용전과적용 2주후, 적용 4주후의각각의모공변화량을살펴본결과는표 4, 표 5와같다. 적용전평균값은 ±523.91이며적용 4주후 ±538.60으로평 균값이감소되었다. 또한적용전과비교하여적용 4주후통계적으로유의하게나타나 (p<.05) 모공개선에도움을주는것으로판단된다. 그림 2에서는 20명피험자를대상으로한크게열린모공변화분석내용중대표적으로 5명에대한크게열린모공변화량이미지결과를정리하였다. 4. 피부피지변화피시험자의시험물질적용전, 적용 2주후, 적용 4주후의피부피지량변화량을평가한결과는표 6과같다. 적용전평균값은 6.74±5.63이며적용 4주후 2.42±2.36으로평균값이감소되었다. 또한적용전과비교하여적용 4주후통계적으로유의하게나타나 (p.<.05) 피지개선에도움을주는것으로판단된다. 5. 피부밝기변화피시험자의시험물질적용전, 적용 2주후, 적용 4주후의피부밝기변화량을평가한결과는표 7과같다. 적용전 L* value 평균값은 57.46±2.93이며적용 4주후 58.90±3.25으로평균값이증가하였다. 또한적용전과비교하여적용 4주후통계적으로유의하게나타나 (p<.05) 피부밝기개선에도움을주는것으로판단된다. 표 6. 피부피지량 (%) p-value -.033*.001** : %, N=20, *p<.05, **p<.01, ***p<.001 표 4. 크게열린모공수 p-value -.020*.000*** :, N=20, *p<.05, **p<.01, ***p<.001 표 7. L* value 측정값 p-value * N=20, *p <.05, **p <.01, ***p <.001 표 5. 블랙헤드모공수 p-value -.011*.000*** :, N=20, *p<.05, **p<.01, ***p<.001 표 8. 전문가에의한여드름육안평가 p-value ** Score 0: none, 1~18: mild, 19~30: moderate, 31~38: severe, >39: very severe. 82

7 갈락토미세스발효여과물함유화장료가피부개선에미치는영향 6. 전문가에의한여드름육안평가피시험자의시험물질적용전, 적용 2주후, 적용 4주후의여드름정도를육안평가한결과는표 8과같다. 적용전평균값은 14.60±3.36이며적용 4주후 13.20±3.73으로평균값이감소하였다. 또한적용전과비교하여적용 4주후통계적으로유의하게나타나 (p<.05) 여드름개선에도움을주는것으로판단된다. 7. 사용감설문평가피시험자의시험물질에대한만족도를설문평가한결과는다음과같다 (data not shown). 시험물질적용후모공이촘촘해졌다고응답한비율은 2주적용후 30.0% 에서 4주적용후 40.0% 로증가하였으며, 피지분비량이감소했다고응답한비율은 2주적용후 40.0%, 4주적용후 45.0% 로증가하였다. 피부각질이개선되었다고응답한비율은 2주적용후 35.0%, 4주적용후 40.0% 로증가하였으며, 홍조가감소하였다고응답한비율은 2주적용후 20%, 4주적용후 25.0% 로증가하였다. 피부표면이환해지는것을느꼈다고응답한비율은 2주적용후 35.0%, 4주적용후 45.0% 로증가하였으며, 여드름의수가감소하였다고응답한비율은 2주적용후 25.0%, 4주적용후 45.0% 로증가하였다. 본연구에서갈락토미세스발효여과물을함유한에센스타입화장료가각질, 모공, 피지, 피부밝기, 여드름개선에대한인체적용시험을실시하였으며, 그결과를요약하면다음과같다. 첫째, 각질개선도평가에서는각질개선율이 3.53% 에서 16.47% 로개선되었다 (p<.001). 둘째, 크게열린모공측정값변화에서는모공개선율이 10.84% 에서 15.66% 로개선되었다 (p<.05). 셋째, 블랙헤드모공측정값변화에서는모공개선율이 14.39% 에서 21.84% 로개선되었다 (p<.05). 넷째, 피부피지개선측정에서는피지개선율이 39.61% 에서 64.17% 로감소되었다 (p<.05). 다섯째, 피부밝기개선도평가에서 L* value값이적용전과비교하여 2주적용후 1.58%, 4주적용후 2.49% 로나타나피부밝기가개선되었다 (p<.05). 여섯째, 여드름육안평가에서는여드름개선율이 3.60% 에서 9.59% 로개선되어시험물질이여드름개선에효과가있음을나타냈다. 종합적으로판단할때, 갈락토미세스발효여과물을함유한에센스타입화장료는각질, 모공, 피지, 피부밝기, 여드름개선에서통계적으로유의한결과를나타냈다. 피시험자들의만족도설문결과와도유사한결과를보였다. 이러한결과를미루어보아, 갈락토미세스발효여과물을함유한에센스타입화장료는 각질, 모공, 피지, 피부밝기, 여드름과등의피부개선에효과적인것으로판단된다. 김금란. 피부관리가 40세전후여성의안면피부상태에미치는영향. 건국대학교박사학위논문, 김미라. 청소년여드름에대한관리방법과실태에관한연구. 숙명여자대학교석사학위논문, 김성은, 리순화. 토사자추출물을함유한화장품이여드름피부에미치는영향. 대한피부미용학회지, 10: , 설재원, 여드름유발균에대한프로폴리스추출물과 Tea Tree Oil의항균활성. 강원대학교석사학위논문, 신실. 한국인청소년에발생하는좌창 ( 挫瘡 ) 에대한통계적고찰. 대한피부과학회지, 11: 17-26, 이선숙, 임지영, 한영숙. 연잎추출물의여드름피부개선효과. 대한피부미용학회지, 10: , 최광성, 김영근. 여드름의원인과치료. 한국의학사, 19: , 최문희, 류은미, 오득실, 신현재. 동백나무잎추출물의여드름피부개선효과. 대한피부미용학회지, 10: , 홍지연. 천연항균성분을이용한여드름개선화장품에관한연구. 숙명여자대학교석사학위논문, Baumann L. Cosmetic dermatology: principles and practice. McGraw Hill Professional, pp20, Cunliffe WJ, Gould DJ. Prevalence of facial acne vulgaris in late adolescence and in adults, Br. Med. J., 1: , Denecker G, Hoste E, Gilbert B, Hochepied T, Ovaere P, Lippens S, Van den Broecke C, Van Damme PD, Herde K, Hachem JP, et al. Caspase-14 protects against epidermal UVB photodamage and water loss. Nat. Cell Biol., 9: , Doshi A, Zaheer A, Stiller MJ. A comparison of current acne grading systems and proposal of a novel system, Int. J. Dermatol. Treat, 9: , Hoste E, Kemperman P, Devos M, Denecker G, Kezic S, Yau N, Gilbert B, Lippens S, De Groote P, Roelandt R et al. Caspase-14 is required for filaggrin degradation to natural moisturizing factors in the skin. J. Invest. Dermatol., 131: , Kataoka, S, Hattori K, Date A, Tamura H. Human 83

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Kor. J. Aesthet. Cosmetol., 및 자아존중감과 스트레스와도 밀접한 관계가 있고, 만족 정도 에 따라 전반적인 생활에도 영향을 미치므로 신체는 갈수록 개 인적, 사회적 차원에서 중요해지고 있다(안희진, 2010). 따라서 외모만족도는 개인의 신체는 타

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