07 (03-04-수정).hwp

Size: px

Start display at page:

Download "07 (03-04-수정).hwp"

재연 한
4 years ago
Views:

1 J Korean Soc Food Sci Nutr 한국식품영양과학회지 45(6), 828~834(16) 보리수나무열매, 잎및줄기에탄올추출물의함유성분분석과간암세포증식억제효과 김민주 1 임종순 2 양선아 1 1 계명대학교식품가공학전공 2 계명대학교전통미생물자원개발및산업화연구센터 Component Analysis and Anti-Proliferative Effects of Ethanol Extracts of Fruits, Leaves, and Stems from Elaeagnus umbellata in HepG2 Cells Min-Ju Kim 1, Jong-Soon Lim 2, and Seun-Ah Yang 1 1 Major in Food Science and Technology and 2 Center for Traditional Microorganism Resources (TMR), Keimyung University ABSTRACT The aim of this study was to evaluate the physicochemical properties and antioxidant and anti-proliferative activities of different plant parts of Elaeagnus umbellata Thunb. extracted with ethanol (EtOH). EtOH extract of stems presenting the highest content of polyphenols showed the strongest 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical scavenging activity (EC 5=54.4 µg/ml). The total content of free amino acids decreased in the order of leaves (6, mg/ g)> stems (1, mg/ g)> fruits EtOH extract ( mg/ g), and asparagine (1,97.57 mg/ g), γ-aminobutyric acid (3.17 mg/ g), and proline ( mg/ g) were the major free amino acid in leaves, stems, and fruits, respectively. Five phenolic compounds in each extract were measured by using liquid chromatography-tandem mass spectrometry, and gallic acid (98.95 mg/ g) and (+)-catechin (1, mg/ g) were present as major components in leaves and stems, respectively. EtOH extract of leaves showed the highest anti-proliferative activity against HepG2 cells as measured by 3-(4,5-dimethyl-thiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide and lactate dehydrogenase assay but had no effects on Chang liver cells. Key words: Elaeagnus umbellata Thunb., antioxidant, free amino acids, phenolic compounds, antiproliferation 서 보리수나무 (Elaeagnus umbellata Thunb., Autumn olive) 는보리수나무과 (Elaeagnaceae) 보리수나무속 (Elaeagnus) 에속하는낙엽활엽관목으로서국내에서는합천군가야면에널리분포하고있으며민간에서보리똥나무, 뻘똥, 핑크팝보리수로알려져있다. 이는거제, 고성등의지역에서재배되어 6~7월수확되는뜰보리수 (Elaeagnus multiflora Thunb.) 및 7~8월에화천, 춘천등의지역에서재배되며주황색원형모양의둥근열매를갖는갈매보리수나무 ( 일명비타민나무, Hippophae rhamnoides L.) 와는달리 1~11월에열매가포도송이처럼열려붉은색으로익는다. 열매는길이 1 cm의구형으로다소떫은맛과단맛을가지며, 잎은어긋나고타원형으로윗부분은짙은녹색을띤다. 보리수나무의열매, 잎과뿌리를중국에서우내자 ( 牛奶子 ) Received 3 March 16; Accepted 31 March 16 Corresponding author: Seun-Ah Yang, Major in Food Science and Technology, Keimyung University, Daegu 421, Korea seunahy@kmu.ac.kr, Phone: 론 라고하며, 이질, 지혈, 지사제로사용되고있다 (1). 한편우리나라에서는보리수나무의열매를한방에서는목반하 ( 木半夏 ) 라고하며효능으로는설사, 출혈, 소화불량등에효과가있는것으로알려져있으며 (2,3), 민간에서는열매뿐만아니라잎, 뿌리및가지를기침, 천식등의치료에많이사용하고있다 (4). 보리수나무에관한효능연구는많지않은실정으로열매, 잎, 꽃추출물의항균활성 (5), 열매의일반성분및라이코펜함량분석 (6,7), 열매추출물의항산화및암세포증식억제효과 (8), 열매와잎용매분획물의항산화활성비교 (9) 가보고되어있으며, 뜰보리수관련연구로서잎의유용성분분석 (1), 열매추출물의항산화및항암 (11,12), 미백효과, 항혈소판및항염증 (13,14) 등의보고가있다. 보리수나무는현재합천군일대에서무농약유기농으로재배되고있으나체계적인연구가전무한상태이며, 열매와잎은식용으로허가되어있으나식품소재로써활용이전혀되지않고있다. 이에본연구에서는보리수나무의잎, 줄기및열매의부위별기능성및유용성분에대한기초활성을비교하여고부가가치바이오소재로서의활용도를제고하

2 보리수나무부위별함유성분및항암활성 829 고자하였다. 재료및방법보리수나무잎, 줄기, 열매의추출물제조본연구에사용된보리수나무잎, 줄기, 열매는보사모영농조합법인 (Gyeongnam, Korea) 으로부터제공받아사용하였다. 건조상태의보리수나무잎, 줄기, 냉동열매를분쇄기로분쇄하여 7% 에탄올 (Duksan, Ansan, Korea) 로 3회반복추출하였다. 추출한시료는 Advantec(No. 5A, Tokyo, Japan) 여과지로여과한후감압농축기를이용하여농축한다음동결건조하여분석용시료로사용하였다. 총폴리페놀함량측정보리수나무잎, 줄기, 열매의총폴리페놀함량은 AOAC법 (15) 에따라측정하였다. 7% 에탄올추출물을농도별로희석한용액 1 ml를취하여 2%(w/v) Na 2CO 3 용액 1 ml를가하여 3분간방치한후, 5% Folin-Ciocalteu 시약 (Junsei Chemical Co., Tokyo, Japan).2 ml를가하여반응시켜 75 nm에서흡광도를측정하였다. 표준곡선은증류수로 gallic acid.1%(w/v) 를제조한후최종농도가,,,,, μg/ml 용액이되도록조제하고이를일정량취하여위와같은방법으로 75 nm에서흡광도를측정하여계산하였다. 보리수나무잎, 줄기, 열매의플라보노이드함량측정보리수나무잎, 줄기, 열매의플라보노이드함량은 Nieva Moreno 등 (16) 의방법에따라측정하였다. 시료를 1배희석한희석액.1 ml를 % 에탄올.9 ml에희석한후.1 ml를취하여 1% aluminium nitrate와 1 M potassium acetate를함유하는 % 에탄올 4.3 ml에혼합하여실온에서 분방치한뒤 spectrophotometer(uvicon 922, Kontron Instruments, Milan, Italy) 를이용하여 415 nm에서흡광도를측정하였다. 이때플라보노이드함량은 quercetin을이용하여작성한표준곡선으로부터함량을구하였다. DPPH radical 소거활성 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl; Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO, USA) 라디칼에대한소거활성은 Blois(17) 의방법에따라측정하였다. 시료를각각의용매에녹여농도별로희석한희석액.8 ml와에탄올에녹인.15 mm DPPH 용액.2 ml를가하여실온에서 3분방치한후 517 nm에서흡광도를측정하였다. 각시료의유리라디칼소거활성은시료를첨가하지않은대조구의흡광도를 1/ 2로환원시키는데필요한시료의농도인 EC 5 값으로나타내었다. 이때상대활성의비교를위하여대조군으로 butylated hydroxy toluene(bht), butylated hydroxy anisole(bha), 비타민 C를사용하였다. 유리아미노산측정일정량의시료를취하여완전히건조한후 phenylisothiocyanate(pitc) 로유도체를만들고용매 A( mm NaHAc,.1% triethanolamine(tea), 6% CH 3CN, ph 6.1) 에용해, 원심분리한후시료로사용하였다. 이때사용한칼럼은 Waters Nova-Pak C18 4 μm(3.9 3mm), 검출기는 UV detector(hp Agilent 1 HPLC, GMI, Ramsey, MN, USA) 를사용하여 254 nm에서측정하였고, 이동상은용매 A와용매 B(% CH 3CN) 를 gradient 법으로용매이동속도 1. ml/min, 시료주입량 1 μl, 칼럼온도 46 C의조건으로측정하였다. 페놀성화합물의정량분석페놀성화합물의 LC-MS/MS 분석은 Agilent Technologies(Palo Alto, CA, USA) model series HPLC와 Agilent 641 Triple Quad, tandem mass spectrometry 를이용하였다. ESI 방법으로이온화하였고, negative selected ion monitoring(sim) mode를사용하였다. 이온화조건으로는 capillary temperature와 voltage가각각 35 C, 4 kv였으며, nebulizer pressure는 psig, nitrogen flow rate는 12 L/min으로설정하였다. 칼럼은 Halo column( mm, 2.7 μm, Advanced Materials Technology Co., Wilmington, DE, USA) 을사용하여 flow rate.2 ml/min 및 injection volume 1 μl로설정하였고, 이동상은다음과같다. A:.1% formic acid in D.W. B:.1% formic acid in ACN-5~15% B; 5~1 min, 15~3% B; 1~15 min, 3~% B; 15~ min, ~% B; ~ 25 min, % B. 표준액은각각 MeOH를사용하여.5~ mg/ml로제조하였으며, myricetin, kaempferol, gallic acid, (+)-catechin 및 chlorogenic acid의혼합용액은 1 mg/ml의농도를사용하였다. 시료는고감도분석을위하여 EtOAc, BuOH, 그리고 H 2O층으로분획하여 H 2O층은제거한후나머지두분획을합쳐서 2 mg/ml MeOH로제조하여분석하였다. 세포주배양본실험에사용한인간유래정상간세포주 Chang cell과간암세포주 HepG2 cell은한국세포주은행 (KCLB, Seoul, Korea) 으로부터분양받았으며, 1% fetal bovine serum (FBS; Gibco BRL, Rockville, MD, USA) 과 1% antibiotics (penicillin/streptomycin) 를첨가한 Dulbecco's modified Eagle's medium(dmem) 배지 (Gibco BRL) 를이용하여 5% CO 2 가존재하는 37 C incubator에서 2~3회계대배양한후사용하였다. 세포생존율측정 HepG2 및 Chang 세포생존율에대한시료의영향을측정하기위해 3-(4,5-dimethyl-thiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-

3 83 김민주 임종순 양선아 tetrazoliumbromide(mtt; Amresco, Solon, OH, USA) assay를실시하였다. MTT assay는미토콘드리아의탈수소효소작용때문에노란색의수용성기질인 MTT가불용성의보라색 formazan으로환원되는원리를이용한방법으로, 생성된 formazan의흡광도는대사가왕성하고살아있는세포의농도를반영한다. HepG2 세포를 96 well plate에 cells/well로분주하고, 37 C, 5% CO 2 incubator에서 24시간동안배양하였다. 시료를다양한농도로 HepG2 cell에 2~16시간동안전처리하였고, 그후 1 mm의농도로증류수에녹여첨가한후 2시간배양하였다. 이상태의 HepG2 cell에 MTT stock solution(5 mg/ml, 1 μl/well) 을처리하여 37 C에서 4시간배양한후 dimethyl sulfoxide(dmso) μl를활용하여반응을종결시켰다. 배양종료후상등액을제거하고각 well에 μl의 DMSO를첨가하여생성된 formazan crystal을용해해 55 nm 파장에서 ELISA reader(spectra max 3PC, Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA) 로흡광도를측정하였다. 세포생존율은시료의흡광도를대조군의흡광도에대한백분율로나타내었다. Lactate dehydrogenase(ldh) leakage 억제효과세포의세포막손상에따라세포질내에존재하는효소인 LDH가유출된다. 이에대한억제효과를측정함으로써세포생존율에대한시료의영향을평가할수있다. LDH leakage 억제효과를알아보기위하여 Lima 등 (18) 의방법을이용하여 LDH assay kit(biovision, Milpitas, CA USA) 을이용하여측정하였다. 배양된 HepG2 cell을 96 well에 cells/well로분주한후 CO 2 incubator에서 16~24시간예비배양한다음, 농도별로희석한시료를세포에처리하여 24시간동안배양하였다. 그후 25 g에서 1분간원심분리한후상층액 μl를새로운 plate에분주하고, reaction mixture μl를각 well에넣고혼합한후암소상태에서 3분동안반응시킨다. ELISA reader(spectra max 3 PC, Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA) 를사용하여 49 nm 파장에서흡광도를측정하였다. 통계처리실험결과는평균 (mean)± 표준편차 (SD) 로나타내었고통계적유의성은 Student's t-test를이용하여그룹간의차이를통계처리한후 P<.5 수준에서유의성을검정하였다. 결과및고찰항산화효과보리수나무각부위의총폴리페놀및플라보노이드함량을측정한결과, Table 1과같이총폴리페놀함량에는큰차이가없었으나줄기에탄올추출물에서가장높게나타났으며 ( mg/g), 플라보노이드는잎, 줄기, 열매에탄올 Table 1. Contents of polyphenol and flavonoid of E. umbellata extracts (Unit: mg/g) Sample Polyphenol content Flavonoid content Leaves Stems Fruits 3.22± ± ± ± ± ±. Data represent mean±sd of three independent experiment. Table 2. DPPH radical scavenging activity of E. umbellata extracts (Unit: µg/ml) Sample DPPH radical scavenging activity (EC 5) Leaves Stems Fruits 93.53± ± ±33.29 Data represent mean±sd of three independent experiment. 추출물의순으로각각 28.84, 15.5, 2.64 mg/g으로나타났다. 또한, 보리수나무각부위의라디칼소거능을측정한결과폴리페놀함량이가장많은줄기에탄올추출물에서가장낮은 EC 5 값을나타내어 5% 의라디칼을소거하는데필요한시료농도가가장낮음을확인하였다 (Table 2). 부위별라디칼소거능 (EC 5 값 ) 은열매 ( µg/ml), 잎 µg/ml), 줄기 (54.4 µg/ml) 에탄올추출물의순으로나타났다. Kang 등 (9) 은핑크팝보리수열매와잎분획물의총폴리페놀함량을측정한결과부탄올분획물에서각각 및 mg/g으로클로로포름및물분획불보다높은것을보고하였으며, 이는 Kim 등 (19) 이보고한뜰보리수열매의총폴리페놀함량인 2.8 mg/g보다훨씬높은것을알수있다. 핑크팝보리수의 DPPH 라디칼소거능도잎부탄올분획물에서가장높게나타나핑크팝보리수잎의기능성식품소재로서의활용가능성이보고되었다 (9). 유리아미노산함량보리수나무잎, 줄기, 열매에탄올추출물의유리아미노산함량을측정하기위하여시료건조후 PITC(phenylisothiocyanate) 로유도체화하여 HPLC로분석하였다. 그결과열매에서는 proline( mg/ g) 의함량이가장높았고그다음으로 GABA, tryptophan, glutamine, alanine 의순이었으며, 잎에서는 asparagine(1,97.57 mg/ g), GABA, alanine, proline, valine의순이었고줄기에서는 GABA(3.17 mg/ g), proline, asparagine, alanine의순으로나타났다. 또한보리수나무잎에탄올추출물의총유리아미노산함량은 6, mg/ g으로열매 ( mg/ g) 및줄기 (1, mg/ g) 에탄올추출물보다높았다 (Table 3). Kim 등 (19) 은뜰보리수열매의유리아미노산은 serine 과 alanine의함량이가장높았으며그다음 aspartic acid, cysteine, methionine의순으로보고하여본연구의보리수

4 보리수나무부위별함유성분및항암활성 831 Table 3. Free amino acids contents of E. umbellata extracts Free amino acids Cysteine Aspartic acid Glutamic acid Asparagine Serine Glutamine Glycine Histidine Arginine Threonine Alanine γ-amino-n-butyric acid (GABA) Proline Tyrosine Valine Methionine Isoleucine Leucine Phenylalanine Tryptophan Lysine Concentration (mg/ g) Leaves Stems Fruits , Total 6, , 나무열매의유리아미노산조성과는큰차이가있는것으로나타났다. 유리아미노산은식품에있어서단백질의합성, 면역계강화, 신경전달물질기능등의중요한역할과함께관능적기능도하는데, 본연구결과보리수나무열매와잎에비교적높게함유된것으로나타난 alanine 및 serine은단맛에관여하며소량함유된 tryptophan, phenylalanine, leucine, valine 등은쓴맛을부여하는것으로알려져있다 (,21). 또한잎에월등히높게함유된 asparagine은암모니아의독성을감소시키며 (22) 체내에서알코올탈수소효소의합성을촉진해숙취에효과가뛰어난것으로알려져있다 (23). 한편, 보리수나무모든부위에서공통으로높게함유된것으로나타난 proline은콜라겐의주요성분으로서피부조직개선과연골및근육강화유지에중요한역할을하는것으로알려져있으며, GABA는천연에존재하는비단백아미노산으로써뇌영양소로작용하여뇌기능활성화 (24), 억제성신경전달물질로서숙면촉진효과 (25), 간기능개선 (26), 항당뇨효과 (27) 등이밝혀지면서기능성식품소재로기대되는물질로잘알려져있다. LC-MS/MS 를이용한추출물의페놀성화합물의분석보리수나무잎, 줄기, 열매에함유된 flavonol 및 phenol 성분분석에대한정확한보고는없으나뜰보리수 (28) 에함유된것으로알려진성분을참고하여 myricetin, kaempferol, gallic acid, (+)-catechin 및 chlorogenic acid의함량을각각의표준용액을바탕으로분석하였다. 보리수나무의각에탄올추출물을 LC-MS/MS로정량분석한결과는 Table 4와같다. 잎에탄올추출물에는 kaempferol 이 mg/ g, gallic acid가 mg/ g이함유되어있었으며, 줄기에탄올추출물의경우 catechin이 1, mg/ g, kaempferol이 mg/ g, gallic acid가 9. mg/ g의순으로확인되었다. 한편열매에탄올추출물에서는후보물질중 myricetin 및 kaempferol만이미량검출되었으며모든추출물에서 chlorogenic acid는검출되지않았다. Fordham 등 (6) 은보리수나무열매의 lycopene 함량이 15~54 mg/ g이며, 이는 lycopene의주요공급원으로잘알려진토마토 (3 mg/ g) 에비해월등히높은함량을나타낸다고보고하였다. 페놀성화합물은식물계에함유된 2차대사산물로서다양한기능을나타내는활성성분으로잘알려져있는데, 항균활성, 항산화효과, 항염증작용, 콜레스테롤저하작용, 지방간억제작용및여러종양세포의성장및분화를저해시키는효과등이다수보고되어있다 (29,3). 하지만보리수나무부위별유용성분에대해최초로보고하는본연구결과를바탕으로보리수나무의기능성을밝히고식품소재로활용하기위해서는부위별활성성분및지표성분을좀더체계적으로규명할필요가있다. 간암세포증식억제활성보리수나무잎, 줄기및열매의 7% 에탄올추출물을농도별 (.1~1, µg/ml) 로 24시간동안처리한후인체간암세포인 HepG2의증식억제정도에미치는영향을검토한결과는 Fig. 1과같다. 열매에탄올추출물의경우.1~25 µg/ml의구간에서는암세포증식억제가비교적낮게나타났으나, 추출물의농도가 5, 1, µg/ml에서는각각 42.4 및 76.7% 의억제효과를나타내었다. 잎에탄올추출물의경우는 25, 5, 1, µg/ml에서 83.5, 92.1 및 93.2% 의억제효과를, 줄기에탄올추출물은 75.6, 75.8 및 83.9% 로농도의존적으로유의한암세포증식억제효과가관찰되었다. 이처럼잎과줄기에탄올추출물은유사한암세포증식억제효과를보였으며, 열매에탄올추출물과 1, Table 4. Phenolic compounds in E. umbellata extracts Sample Leaves Stems Fruits Concentration (mg/ g) Gallic acid (+)-Catechin Myricetin Kaempferol : Not detected. LOQ: Limit of quantitation. 1, <LOQ <LOQ <LOQ

5 832 김민주 임종순 양선아 A A Cont LDH leakage (%). Triton X- cont ** B B LDH leakage (%). * ** Cont Triton X- cont C C * LDH leakage (%). Cont Triton X- cont Fig. 1. Effects of E. umbellata extracts on HepG2 cells proliferation. (A) Leaves, (B) Stems, (C) Fruits. Values represent mean±sd of three independent experiments performed in triplicate. * P<.5 versus control, P<1 versus control. Fig. 2. Effects of E. umbellata extracts on LDH leakage in HepG2 cells. (A) Leaves, (B) Stems, (C) Fruits. Values represent mean±sd of three independent experiments performed in triplicate. * P<.5 versus control, ** P<.1 versus control, P<1 versus control. µg/ml에서억제능을비교하면각각 93.2, 83.9 및 76.7% 로잎, 줄기, 열매의순으로억제효과가나타났다. 또한세포손상시배지내로유출되는 LDH 의활성을측정한결과 Fig. 2와같이모든추출물에서농도에의존적으로 LDH 유출이증가하였으며, 1, µg/ml의열매, 잎및줄기에서 Triton X- 처리군대비각각 32.2, 48.9 및 49.2% 가유출되어 MTT assay에의한세포생존율에대한경향과일치하는결과를얻었다. 이러한보리수나무잎, 줄기및열매의암세포증식억제효과가암세포를특이적으로공격하는지를검토하기위하여정상간세포에처리하여세포증식에대한영향을측정한후간암세포에대한독성과비교검토한결과, 잎과열매에탄올추출물의경우대조군과비교하여유 의적인정상간세포생장억제효과가나타나지않았으며, 줄기에탄올추출물은 µg/ml까지의농도에서는유의적인독성이나타나지않았고 1, µg/ml에서 58.6% 의세포손상을나타냈으나암세포 (93.9%) 와비교하여손상이현저히줄어든것을확인할수있었다 (Fig. 3). 이러한결과로보리수나무에탄올추출물의세포증식억제효과가정상세포보다간암세포에높은활성을나타내며, 특히잎과줄기에더욱유효한항암활성물질이존재할것으로추정된다. 이와같은정상간세포와간암세포주의증식억제에대한유효성비교는만병초잎 (31) 등의다양한식물추출물을이용하여보고되어있다. Wang 등 (8) 은보리수나무열매추출물의백혈암세포 HL- cell 및폐암세포 A549 cell

6 보리수나무부위별함유성분및항암활성 833 A B Cont 험에사용된농도구간에서암세포에만특이적으로높은활성을나타내어항암및면역증진등의항노화식품소재로활용가능성의여지가있다고생각한다. 본연구에서보리수나무의부위별에탄올추출물의생리적기능에대한특징을탐색한결과, 열매에탄올추출물은주요유리아미노산으로 proline과 GABA를함유하고, 잎에탄올추출물은 asparagine과 gallic acid의함량이높고뛰어난간암억제활성을나타내며, 줄기에탄올추출물은 GABA와 catechin의함량이높고라디칼소거능이우수한것을확인할수있었다. 따라서이는보리수나무를향후기능성식품, 화장품등의바이오소재자원으로개발하기위한기초자료로중요한의미가있다고생각한다. C Cont Cont Fig. 3. Effects of E. umbellata extracts on Chang cells proliferation. (A) Leaves, (B) Stems, (C) Fruits. Values represent mean±sd of three independent experiments performed in triplicate. ** P<.1 versus control. 에대한증식억제효과를보고하였으며, Oh와 Lee(12) 는뜰보리수종실의에탄올추출물이과육에비해암세포 ( 자궁경부암세포 HeLa cell, 유방암세포 MCF-7 cell, 위암세포 SNU-638 cell) 증식억제효과가큰것으로보고하였다. 또한 Park 등 (32) 은비타민나무로알려진갈매보리수의경우뿌리에서대장암세포 HT-29 cell과전립선암세포 DU- 145 cell에높은항암효과를나타내었다고보고하였다. 현재까지이와같은보리수나무과식물이외에도많은천연식물에서다양한암세포주를이용하여항암활성이보고되고있으며식품소재로활용하기위한연구가활발히진행되고있다. 이번연구에서는매년수확량이많은보리수나무부위별로간암세포증식억제활성을비교차원에서측정하였으며활성의차이를확인하였다. 특히보리수나무잎은본실 ** 요 경남합천일대에서재배된보리수나무 (Elaeagnus umbellata Thunb.) 의생리활성을부위별 ( 열매, 잎, 줄기 ) 로평가한결과는다음과같다. 항산화특성을측정한결과, 총폴리페놀함량이높게나타난줄기 (829.6 mg/g) 에탄올추출물에서 DPPH 라디칼소거능 (EC 5=54.4 µg/ml) 이가장우수하였다. 유리아미노산분석에서는잎 (6, mg/ g) 에탄올추출물이열매 ( mg/ g) 와줄기 (1, mg/ g) 에탄올추출물보다유리아미노산함량이높았으며, 열매의 proline, 잎의 asparagine 및줄기의 GABA가대표적인유리아미노산인것을확인하였다. LC-MS/MS를이용한주요페놀성분분석에서는잎에탄올추출물에서 gallic acid, 줄기에탄올추출물에서 catechin의함량이가장높았으며, HepG2 cell과 Chang cell의암세포증식억제효과를측정한결과잎에탄올추출물이 HepG2에특이적으로높은억제활성이나타났다. 향후보리수나무를국내우수자원으로활용하기위해서는추가로다양한암세포에대한활성차이, 부위별활성물질의구명및작용기전등에대한계속된연구가수행되어야할것이다. 약 감사의글 이논문은중소기업청에서지원하는 15년도산학연협력기술개발사업 (No. C351348) 의연구수행으로인한결과물임을밝힙니다. REFERENCES 1. Shanghai Science and Technology Press Chinese dictionary. Shogakukan, Tokyo, Japan. Vol 1, p Park J. 4. South Korea herb encyclopedia. Book Publishing Shinil Books, Seoul, Korea. p Lee S Korean folk medicine. Publishing Center of Seoul National University, Seoul, Korea. p Kim JG Illustrated natural drugs encyclopedia. Namsandang, Seoul, Korea. Vol 1, p 279.

7 834 김민주 임종순 양선아 5. Sabir MS, Ahmad DS, Hussain IM, Tahir KM. 7. Antibacterial activity of Elaeagnus umbellata (Thunb.) a medicinal plant from Pakistan. Saudi Med J 28: Fordham IM, Clevidence BA, Wiley ER, Zimmerman RH. 1. Fruit of autumn olive: a rich source of lycopene. Hort- Science 36: Khattak KF. 12. Free radical scavenging activity, phytochemical composition and nutrient analysis of Elaeagnus umbellata berry. J Med Plants Res 6: Wang SY, Bowman L, Ding M. 7. Variations in free radical scavenging capacity and antiproliferative activity among different genotypes of autumn olive (Elaeagnus umbellata). Planta Med 73: Kang SK, Jeong CH, Heo HJ, Shim KH. 1. Antioxidant activities of various solvent fractions from fruit and leaf of Pinkpop Borisu. J Agric Life Sci 44: Yoon KY, Hong JY, Shin SR. 7. Analysis on the components of the Elaeagnus multiflora Thunb. leaves. Korean J Food Preserv 14: Kim SA, Oh SI, Lee MS. 7. Antioxidative and cytotoxic effects of solvent fractions from Elaeagnus multiflora. Korean J Food & Nutr : Oh SI, Lee MS. 8. Antioxidative and cytotoxic effects of ethanol extracts from Elaeagnus multiflora. Korean J Food & Nutr 21: Park SH, Hwang HS, Han JH. 4. Development of drink from composition with medicinal plants and evaluation of its physiological function. Korean J Nutr 37: Kim CK, Chung JD, Lee HS, Kim CB, Yoon JT, Choi BS Effect of plant growth regulators on organogenesis of rhizome in mature embryo cultures of Nelumbo nucifera. Korean J Plant Tissue Culture 23: AOAC.. Official method of analysis. 17th ed. Association of Official Analytical Chemists, Washington, DC, USA. p Nieva Moreno MI, Isla MI, Sampietro AR, Vattuone MA.. Comparison of the free radical-scavenging activity of propolis from several regions of Argentina. J Ethnopharmacol 71: Blois MS Antioxidant determinations by the use of a stable free radical. Nature 181: Lima CF, Andrade PB, Seabra RM, Fernandes-Ferreira M, Pereira-Wilson C. 5. The drinking of a Salvia officinalis infusion improves liver antioxidant status in mice and rats. J Ethnopharmacol 97: Kim NW, Joo EY, Kim SL. 3. Analysis on the components of fruit of Elaeagnus multiflora Thumb. Korean J Food Preserv 1: Mau JL, Chyau CC, Li JY, Tseng YH Flavor compounds in straw mushrooms Volvariella volvacea harvested at different stages of maturity. J Agric Food Chem 45: Solms J The taste of amino acids, peptides, and proteins. J Agric Food Chem 17: Byun SM, Huh NE, Lee CY Asparagine biosynthesis in soybean sprouts. J Korean Agric Chem Soc : Park SC Effect of bean sprout extracts on metabolism and biological functions of ethanol in vitro and in vivo. Korea Soybean Digest 1: Leventhal AG, Wang Y, Pu M, Zhou Y, Ma Y. 3. GABA and its agonists improved visual cortical function in senescent monkeys. Science 3: Kim SS, Oh SH, Jeong MH, Cho SC, Kook MC, Lee SH, Pyun YR, Lee HY. 1. Sleep-inductive effect of GABA on the fermentation of mono sodium glutamate (MSG). Korean J Food Sci Technol 42: Butterworth RF Cerebral dysfunction in chronic alcoholism: role of alcoholic liver disease. Alcohol Alcohol Suppl 2: Soltani N, Qiu H, Aleksic M, Glinka Y, Zhao F, Liu R, Li Y, Zhang N, Chakrabarti R, Ng T, Jin T, Zhang H, Lu WY, Feng ZP, Prud'homme GJ, Wang Q. 11. GABA exerts protective and regenerative effects on islet beta cells and reverses diabetes. Proc Natl Acad Sci USA 18: Lee JH, Seo WT, Cho KM. 11. Determination of phytochemical contents and biological activities from the fruits of Elaeagnus multiflora. J Food Sci Nutr 16: Cha JY, Kim HJ, Chung CH, Cho YS Antioxidative activities and contents of polyphenolic compound of Cudrania tricuspidata. J Korean Soc Food Sci Nutr 28: Choi Y, Gu JB, Kim M, Lee J. 8. Antioxidant and antiproliferative activities of methanolic extracts from thirty Korean medicinal plants. Food Sci Biotechnol 17: Byun KS, Lee YW, Jin HJ, Lee KM, Lee HY, Lee KJ, Heo MY, Yu CY, Lee JH. 5. Genotoxicity and cytotoxicity in human cancer and normal cell lines of the extracts of Rhododendron brachycarpum D. Don leaves. Korean J Med Crop Sci 13: Park YH, Lim SH, Ham HJ, Jeong HN, Lee KJ, Kim KH, Kim S. 1. Comparison of biological activities of extracts from different parts of seabuckthorn (Hippophae rhamnoides L.). J Korean Soc Food Sci Nutr 39:

Journal of Life Science 2011, Vol. 21. No μ μ

Journal of Life Science 2011 Vol. 21. No. 8. 1120~1126 ISSN : 1225-9918 DOI : http://dx.doi.org/10.5352/jls.2011.21.8.1120 μ μ μ α β Journal of Life Science 2011, Vol. 21. No. 8 1121 μ μ 1122 생명과학회지 2011,