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1 pissn / eissn J. Fd Hyg. Saf. Vl. 34, N. 2, pp. 191~198 (2019) Jurnal f Fd Hygiene and Safety Available nline at 쑥갓중 bifenthrin 과 chlrthalnil 의경시적잔류량변화및생물학적반감기 강민성 * 박포현 김기유 임부건 유경신 이유진 임정화강충원 김윤호 이선영 서정화 박용배 윤미혜경기도보건환경연구원구리농수산물검사소 Dissipatin f Bifenthrin and Chlrthalnil in Crwn Daisy during Cultivatin and their Bilgical Half-lives Min-Seng Kang*, P-Hyun Park, Ki-Yu Kim, Bu-Gen Lim, Kyng-Shin Ryu, Yu-Jin Lee, Jeng-Hwa Lim, Chng-Wn Kang, Yun-H Kim, Sun-Yung Lee, Jeng-Hwa Se, Yng-Bae Park, and Mi-Hye Yn Guri Agr-fishery Prducts Inspectin Center, Gyenggi prvince Institute f Health and Envirnment Guri, Krea (Received February 13, 2019/Revised March 12, 2019/Accepted April 2, 2019) ABSTRACT - This study investigated the residual characteristics f bifenthrin and chlrthalnil in crwn daisy and suggested pre-harvest residue limits (PHRLs) based n their dissipatin patterns and bilgical half-lives. The samples fr residue analysis were harvested at 0 (3 hr), 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 18, 22 and 26 days after treatment, and analyzed by GC/ µ-ecd and TOF/MS. The limit f quantitatin (LOQs) f bifenthrin and chlrthalnil were mg/kg and mg/ kg, respectively. Recveries ranged frm ± 7.97% and ± 16.03%, shwing that this methd is apprpriate fr the analysis f the pesticide residues in crwn daisy. Being well within first rder kinetics, the bilgical half-lives f the pesticide residues in crwn daisy were 9.63 days fr bifenthrin and 6.54 days fr chlrthalnil. The PHRLs f bifenthrin and chlrthalnil were recmmended as mg/kg and mg/kg fr 26 days befre harvest, respectively. Key wrds : Bifenthrin, Chlrthalnil, Crwn daisy, Bilgical half-life, Pre-harvest residue limit 쑥갓 (Chrysanthemum crnarium) 은국화과 (Cmpsitae) 에속하는 1년생초본식물로우리나라전역에서재배하고있다. 동양에서는채소로, 서양에서는관상용으로재배되고있으며쑥갓은잎의크기에따라대엽종, 중엽종, 소엽종이있는데우리나라에서는중엽종이대부분이다. 또한쑥갓은식용으로뿐만아니라한방에서는쑥갓의경엽을동호 ( 동蒿 ) 라부르며, 심기를편하게하며비위를보양하고, 담즙을삭히는효능이있다고알려져있다 1). 쑥갓에는향긋한맛이있어입맛을돋우고장의기능을활발히해준다하여변비치료에이용되기도한다 1). 주요성분으로는 essential il 2), quercetin, quercetagetin, lutelin 3), cyclpentanid 화합물인 chrycrin, chryclide 4) 등의물질이분리되어보고된바있다. 쑥갓은일반적으로시설재배되고있으며, 봄철재배시 3~4월, 가을철재배는 8~9월경에파종하여 50일전후수확하며재배기간이짧아두차례나누어파종및수확하 *Crrespndence t: Kang min seng, Guri Agr-fishery Prducts Inspectin Center, Gyenggi Prvince Institute f Health and Envirnment, Guri 11916, Krea Tel: , Fax: pearlstar72@gg.g.kr 고연작으로재배되는특성이있다. 이런식물을재배할때병, 해충, 잡초에의한작물손실을줄이고생산량을증대시키며, 품질을향상시키기위해다양한화학물질로구성되어있는농약을사용하고있다 5,6). 농약은현대농업에있어필수적인농업자재로서여러가지장점에도불구하고독성과잔류안전성등으로인해농약의남용은인체, 작물및환경등에악영향을야기하고있는것으로보고되었다 7). 그러므로농산물또는식품에잔류하는농약의위해성을평가하여농산물의농약잔류허용기준 (Maximum Residue Limits, MRLs) 을설정하고국제적, 국가적으로관리하고있으며 8), 농촌진흥청에서는농약성분별로여러작물에대한안전사용기준연구를통하여안전한농산물생산에만전을기하고있다. 국민의생활수준향상과건강에대한관심이높아지면서소비자들은농산물에대한잔류농약의안전성을우선적으로고려하고있어정부는농약사용에따른국내생산농산물의안전성확보를위해 2019년부터농약잔류허용물질목록관리제도 (Psitive list system, PLS) 를시행하며, 농림축산식품부에서는농산물안전성강화를위하여잔류허용기준을초과하는농산물의신속하고체계적인조치와농 191

2 192 Min-Seng Kang et al. 약판매관리인자격요건을강화하고있다. 현재 498종의농약성분에대해 MRLs이설정되어있고, MRLs을초과한부적합농산물은대부분폐기처분조치되며, 이는생산자인농민에게막대한경제적손실을초래될수있고, 농약이과다잔류된농산물을소비자가섭취하였을시에는인체건강상의문제를일으킬수있기때문에농산물중잔류농약검사는매우중요한사안이라할수있다 9). 따라서농산물중잔류농약안전성검사가출하전생산단계에서수행될때유통농작물의효율적인안전관리가가능할것이다 10). 그러므로각각의농약과해당작물에대한과학적인분석으로출하시 MRLs을초과할가능성을내포한농산물의출하연기또는용도변경등의조치를취할수있는제도인생산단계잔류허용기준 (Pre-Harvest Residue Limits, PHRLs) 이필요하며식품의약품안전처에서는 생산단계농산물등의유해물질잔류기준 을고시하여안전한농산물생산에기여하고있다 11,12). 그러나쑥갓에대해 bifenthrin과 chlrthalni의 PHRLs은설정되어있지않은상태이다. Bifenthrin은 pyrethrid ester계살충제로나트륨이온통로를조절하여살충효과를나타내는약제로적용대상작물은사과, 고추, 배추등잎말이나방류, 진딧물, 배추흰나비방제를위해사용되고있으며, chlrthalnil은 armatic 계살균제로다점접촉작용 ( 보호살균제, 무기유황제, 무기구리제, 유기비소제등 ) 으로주로사과, 포도의탄저병, 노균병방제를위해사용되고있다. 현재 bifenthrin은배추에대해안전사용기준과쑥갓에 MRL이 5.0 mg/kg이설정되어있고 chlrthalnil은사과에대해안전사용기준과쑥갓에대한 MRL이 5.0 mg/kg이설정되어있다. 그러나쑥갓에대한두농약의 PHRLs은설정되어있지않아이를위한연구가필요하다. 본연구에서는쑥갓의재배기간중 bifenthrin과 chlrthalnil의잔류양상을조사하여시험농약별잔류량감소추이와생물학적반감기를바탕으로한생산단계잔류허용기준설정의기초자료로활용하고자수행되었다. Materials and Methds 시험작물재배시험작물인쑥갓은경기도구리시동구릉로일대에위 치한시설재배지에서직접재배하며수행하였다. 시설재배지의총면적은가로 세로, 5.8 m 15.5 m ( 포장 90 m 2 ) 의각시험포장에약제살포시험구역 ( 각 36 m 2 ) 과무처리구역사이의완충지대를 3m 이상설치하여교차오염을방지하였다. 파종및관수와같은작물의관리는관행적으로수행되는방법에준하여진행하였다. 쑥갓을 2018 년 4월 5일파종하여, 동년 5월 4일에 1차농약을살포하였고, 살포후부터 15일까지는관수를중지하고그이후부터 26일까지뿌리에관수하였다. 시험농약및시약본연구에서살포를위해사용한농약 bifenthrin 1% 유제, 살충제 ( 상표명 : 뉴증원군, 인바이오 ( 주 )) 와 chlrthalnil 75% 수화제, 살균제 ( 상표명 : 다코닐, ( 경농 )) 을시중농약판매점에서구입하여사용하였으며, Table 1 과같이 bifenthrin은 kg ai/10a, chlrthalnil은 kg ai/10a의약량으로안전사용기준을준수하면서사용하였다. Bifenthrin과 chlrthalnil의표준품은각각 mg/kg 과 mg/kg으로제조된제품을희석하여사용하였으며, 희석한표준품은냉장보관하면서분석시이용하였다. 본실험에사용한실험농약의구조식및물리화학적특성은 Table 2에나타내었다. 잔류농약의추출및정제는 acetnitrile, dichlrmethane, acetne, hexane, methanl 등을사용하였고, 시료의정제에필요한 SPE (slid phase extractin) 는 flrisil cartridge를사용하였다. 그외의시약들은모두잔류농약분석용및 GR급을사용하였다. 시험약제살포, 시료채취, 증체율조사액상수화제인 bifenthrin과입상수화제인 chlrthalnil을농약안전사용기준 13) 에따라희석하여살포하였으며, 토출량은 1,250 ml이었고, 약액이충분히흐를정도로 1회살포하였다. 시료채취는최종약제살포후 0일 (3시간), 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 18, 22 및 26일차에처리구역별 3kg 씩취하여뿌리를제거한가식부위를공시재료로사용하였다. 또한쑥갓의경시적증체량을조사하기위하여채취일자별로뿌리에서줄기까지 2cm 자르고 10회측정후평균무게로구하였으며, 이를근거로생장곡선을작성하였다. Table 1. Applicatin cnditins f the pesticides N. Pesticides Frmulatin A.I a) (%) MRL b) (mg/kg) Safe use standard Dilutin (ml & g in 20 L water) 1 Bifenthrin EC d) Chlrthalnil WG e) a)a.i, Active Ingredient; MRL, Maximum residue limit; MAF, Maximum applicatin frequency; b) c) d)ec, Emulsifiable Cncentrate; WG, water dispersible granule e) (Time) MAF c)

3 Dissipatin f Bifenthrin and Chlrthalnil 193 Table 2. Chemical structures and physic-chemical prperties f bifenthrin and chlrthalnil Bifenthrin (Insecticide) Chlrthalnil (Fungicide) Chemical structure Chemical name 2-methylbiphenyl-3-ylmethyl(Z)3-(2-chlr-3,3,3- triflurprp-1-enyl)-2,2-dimethylcyclprpanecarbxylate 2,3,5,6-tetrachlr-1,3-benzenedicarbnitrile Ml. wt v.p. (mpa) mpa (25 C) mpa (25 C) lgp (25 C) Slubility in water 1 μg/l 0.81 mg/l CAS N Table 3. Analytical cnditin f GC/µ-ECD and TOF/MS Instrument GC/µ-ECD TOF/MS Injectin mde Clumn Oven temp. Detectr temp. Split(4:1), Inj. Vl. : 1 μl Heater 270 C DB-5 (30 m L mm I.D., 0.25 μm) Flw rate, 1.0 ml/min C/min next hld Splitless, Inj. Vl. : 1 μl Heater 250 C Rtx-5MS (30 m L mm I.D., 0.25 μm) Flw rate, 1.5 ml/min C/min next hld initial initial C Transfer line : 260 C, Surce temp. : 230 C 시료의전처리시료는식품공전 ( ) 의다종농약다성분분석법 (Multi class pesticide multiresidue methds)-제2법에따라분석하였다 14). 검체 1kg을세절기로분쇄하여약 50 g을정밀하게달아 acetnitrile 100 ml를가하여추출기에서 4,000 rpm으로 3분간균질하였다. 균질물을여과한여액은 sdium chlride 15 g이담긴분액깔때기에넣어 1분간심하게흔들어층분리하였다. 이어서 4,000 rpm에서 1분간원심분리하고상층의 acetnitrile 20 ml를취하여 40 C 이하수욕상에서감압농축하였다. 농축한시료의정제로 n-haxane 5 ml와 20% acetne/nhexane 5 ml로활성화한 flrisil cartridge에시료액을주입한후용출시켜시험관에받았다. 다시 cartridge에 20% acetne/hexane 5 ml를용출하여같은시험관에받아 40 C 이하수욕상에서 nitrgen gas를 분사하여 2차농축하였다. 용매가완전히제거된시험관에 20% acetne/n-hexane 4 ml를넣어녹이고 0.2 µm PTFE filter로여과하여시험용액으로사용했다. GC/µ- ECD(7890A, Agilent, Singapre, Singapre) 를사용하여잔류농약을정량분석하였고 TOF/MS(Pegasus HT, Lec, St. Jsep, USA) 로성분을확인하였다. 분석기기조건예비실험으로각각농약성분별 1 mg/kg 용액을분석하여얻은머무름시간과검출기감응성에의하여최종확정된기기분석조건은 Table 3과같다. 표준검량선작성, 검출한계및정량한계각각 mg/kg 과 mg/kg 으로제조된 bifenthrin 과 chlrthalnil 을 20% acetne/hexane 에녹여단계별희

4 194 Min-Seng Kang et al. 석하여표준용액을만들고일정량을 GC/µ-ECD에주입하여나타난 chrmatgram 상의 peak 면적을이용하여표준검량선을작성하였다. 분석시험법의검출한계 (Limit f detectin; LOD) 와정량한계 (limit f quantitatin ; LOQ) 는 ICH (Internatinal Cnference n Harmnizatin) 에서제시한아래산출방법에따라구하였다 15). LOD = 3.3 δ/s LOQ = 10 δ/s δ : The standard deviatin f the respnse S : The slpe f the calibratin curve 회수율시험농약을살포하지않은무처리구역쑥갓시료 50 g에정량한계의 10배, 50배농도인 0.1 mg/kg, 0.5 mg/kg의농도가되도록 3반복처리후균일하게혼합하고 30분간방치한후, 상기의분석과정을행하여회수율을산출하였다. 생물학적반감기및생산단계농약잔류허용기준산출생물학적반감기는시간경과에따른잔류량감소식 C t =C 0 e -kt (C t : 잔류량, C 0 : 초기농도, k: 감소상수, t: 시간 ) 으로회귀식을계산하고 k값을이용하여시험농약의생물학적반감기를 0.693/k 식으로산출하였으며시험농약의생산단계잔류허용기준은잔류성시험성적회귀분석검정표를이용하여산출하였다. 희석효과가포함된 bifenthrin과 chlrthalnil의잔류량은아래식 (1) 에의해산출하고, 이를근거로잔류감소곡선을작성하였다 16). 중량변화에의한희석효과를고려한잔류량 (mg/kg) =( 채취일자별쑥갓의중량 (g) 수확일자별잔류량 ((mg/kg)) /0일차쑥갓의중량 (g) (1) Results and Discussin 재배기간중쑥갓의증체율약제살포후 15일동안채취한쑥갓의경과일별쑥갓의증체율과평균무게를산출한결과 0일에는 5.4 g인것에비해 15일에는 17.8 g으로증가하였으며, 증체율은 229.6% 였다. 재배기간중쑥갓의평균무게와증체율은 Fig. 1과같다. 살포액의부착량채취당일살포구역에서 bifenthrin의경우쑥갓에서 0.90 mg/kg 검출되었고, chlrthalnil 은 mg/kg이검출되었다. 이결과를바탕으로시험작물농약살포액의부착량을식 (2) 에따라계산한결과이론적으로부착될수있는살포액의약량으로 bifenthrin은쑥갓 1kg당 ml이었고, chlrthalnil은 ml으로조사되었다 (Table 4). 생장에의한희석효과분석채취일자별쑥갓시료의중량변화에의한잔류농도 살포액부착량 (ml/kg) = A 100/B 1/C 1000 (2) Fig. 1. Grwth curves and rates f gain f crwn daisy during cultivatin perid.

5 Dissipatin f Bifenthrin and Chlrthalnil 195 A = 수확당일잔류량 (mg/kg) B = 유효성분함량 (%) C = 살포액조제시희석배수 (1,000) 분석법의검증시험농약인 bifenthrin 및 chlrthalnil의분석을위한표준검량선의직선식과상관계수는각각 y=11223x (R 2 =0.9999) 와 y=11223x (R 2 =0.9996) 으로우수한직선성을나타내었다. GC/µ-ECD 분석을통한 bifenthrin 의머무름시간은 min, chlrthalnil의머무름시간은 min이었으며, 크로마토그램상에서시험농약의 peak를방해하는물질은존재하지않는것을확인할수있었다. 재배기간중잔류량변화쑥갓중 bifenthrin의초기잔류량은 0.90 ± 0.07 mg/kg이었고, 최대잔류량은허용기준이하로나타났다. 반면 chlrthalnil의경우초기잔류량이 ± 6.02 mg/kg으로나타나잔류허용기준은초과하였으나시간의경과에따라잔류량은감소하여약제살포후 26일에는잔류허용기준미만인 4.60 mg/kg ± 1.33 mg/kg으로나타났다. Table 4. The residue and depsit f spray slutin in crwn daisy after applicatin 쑥갓생산단계중안전사용기준에따라표준희석살포농도로 1회살포한후 26일까지 12회시료를채취하여잔류량변화를조사한결과, bifenthrin은살포후 0일 (3시간) 은 0.90 ± 0.07 mg/kg이었고, 26일후에는 0.14 ± 0.01 mg/kg, chlrthalnil은 ± 6.02 mg/kg ~ 4.60 ± 1.33 mg/kg로나타났다. 약제살포후 12회조사한잔류량변화는 Fig. 2, 3과같다. 시험기간중쑥갓에잔류된 bifenthrin의초기농도는 MRL 인 5.0 mg/kg보다낮은농도를나타내었고, chlrthalnil은 MRL인 5.0 mg/kg 보다높은 mg/kg으로 15.8배높게나타났다. 이를토대로회귀식을산출한결과는 Table 5와같이 y=0.7841e x (R 2 =0.9797), y=75.681e x (R 2 =0.9875) 이고생물학적반감기는 9.63일과 6.54일로각각산출되었다. 생물학적반감기에대한연구자들의결과로쑥갓에대한 bscalid는각각 4.9일 ~ 4.2일이었고 spinetram은각각 3.0일 ~2.4일로조사되었다 17). 또한시금치에 bscalid는 5.9일, 얼갈이배추 7.4일, 비타민 4.6일및청경채 4.3일로조사되었으며 fludixnil의경우시금치 3.0일, 얼갈이배추 4.0일, 비타민 3.2일및청경채 3.5일로조사되었다 18). 본실험과는다르게생물학적반감기를보이는것은사용한약제의물리화학적특성과작물의형태에기인한것으로판단된다. N. Pesticides Residue after applicatin (mg/kg) Depsit f spray slutin a) (ml/kg f crp) Table 5. Regressin curves and bilgical half life f bifenthrin and chlrthalnil in crwn daisy 1 Bifenthrin Chlrthalnil a)depsit f spray slutin (L/kg f crp) = Residue (mg/kg) 100/cntent f a.i.(%) 1/dilutin facter(1000) N. Pesticides Regressin curve Equatin R 2 Half life(days) 1 Bifenthrin y=0.7841e x Chlrthalnil y=75.681e x Fig. 2. Dissipatin curve f bifenthrin. Fig. 3. Dissipatin curve f chlrthalnil.

6 196 Min-Seng Kang et al. Table 6. Recvery rates, and LOD, LOQ f pesticides a) b) N. Pesticides Recvery(%) LOD(mg/kg) LOQ(mg/kg) R 2 1 Bifenthrin 88.67± Chlrthalnil 99.90± LOD, Limit f Detectin; LOD, Limit f Quantitatin b) a) Table 7. Recmmended pre-harvest residue limits f the pesticides in crwn daisy PHRLs (mg/kg) a) Dissipatin b) cnstants (day -1 ) Pesticides Days prir t harvest (day) Harvesting day Bifenthrin c) Chlrthalnil d) a) PHRLs, Pre-harvest residue limit; Dissipatin cnstant f ne time applicatin b) c)maximum residue limits f bifenthrin; Maximum residue limits f chlrthalnil d) Fig. 4. Recmmended PHRLs f bifenthrin and chlrthalnil in crwn daisy. 회수율, 검출한계및정량한계쑥갓중시험분석법을통한 bifenthrin 및 chlrthalnil의회수율은 88.67%~99.90% 범위로상대표준편차 (Relative Standard Deviatin, RSD%) 는 7.97%~16.03% 이며검출한계는 ~ mg/kg이고정량한계는 ~ mg/ kg으로검량선의상관계수 (R 2 ) 는 ~ 로분석되었으며 Table 6과같다. Pre-harvest Residue Limits (PHRLs) 산출공시약제에대한생산단계농약잔류허용기준은농약잔류감소회귀식 (PHRLs = MRL e reductin cnstant pre-harvest interval ) 에신뢰구간을적용하여 PHRLs곡선을이용하여산출하였다. 생산단계잔류허용기준은작물수확시잔류량이 MRLs 을초과하지않도록수확전일정일자별잔류량을설정한기준수치로서현재농림수산식품부에서는농산물품질관리법에의거출하예정일을기준으로하여출하 10일전 까지일자별로잔류허용기준을설정하여생산단계농산물의잔류농약에대한안전성을확보하고있다. 생산단계잔류허용기준설정을위한여러연구결과로취나물에 chlrfenapyr는수확 10일전에 mg/kg, 수확 5일전에는 6.25 mg/kg, fenariml은각각 2.80 mg/kg~1.67 mg/kg로보고하였으며 19) 또한엇갈이배추의수확 10일전잔류량이 8.86~9.47 mg/kg 또는 5일전에 4.21~4.35 mg/kg 이하라면수확시 amisulbrm의잔류농도가 MRL수준이하로잔류할것으로예측하였다 20). Bifenthrin과 chlrthalnil를표준희석살포농도로살포했을때쑥갓재배중 bifenthrin과 chlrthalnil의생산단계잔류허용기준을 Table 7과 Fig. 4와같이추천할수있다. 증체율을배제한 bifenthrin 과 chlrthalnil 의희석효과작물의재배기간중농약의잔류량에영향을미치는것

7 Dissipatin f Bifenthrin and Chlrthalnil 197 Fig. 5. Dissipatin bar graph f bifenthrin and chlrthalnil after subtractin effect in crwn daisy during experimental perid. 은온도, 광미생물및작물의증체등과같은것에영향을받는다. 이중농약의잔류량감소에가장많은영향을주는요인은작물의증체에따른희석효과를들수있다 21). 기준량처리시 bifenthrin 및 chlrthalnil의경시적잔류변화를기준으로하여쑥갓의무게증가에따른희석효과를비교해보았다. 농약의작물잔류성에영향을주는가장큰요인중에는작물의비대성장에따른희석효과를들수있다. 비대성장에의한희석효과를고려한시험농약의잔류소실곡선은 Fig. 5와같으며, 이잔류소실곡선에서 bifenthrin과 chlrthalnil의생물학적반감기는각각 일, 로희석효과를배제하였을때각각 일과 13.26일이길어진것을확인할수있었다. 본연구에서두시험농약의잔류감소곡선과생물학적반감기를기준으로쑥갓의비대생장을배제한결과와비대생장에따른희석효과를고려한잔류양상은큰차이를나타내고있다. 따라서쑥갓의비대성장으로인한희석효과가시험농약의잔류에영향을줄수있기때문에생산단계잔류허용기준설정연구에있어대상작물의품종과생육도, 수분함량등의요인을고려하여검토되어야할것으로판단된다. 국문요약 쑥갓의안전성확보를위하여쑥갓재배기간중 bifenthrin 및 chlrthalnil의잔류양상을연구하였다. 쑥갓에유효성분 bifenthrin을살포후 0일 (3시간) 은 0.90 ± 0.07 mg/kg을보였고, 26 일후에는 0.14 ± 0.01 mg/kg이었으며, chlrthalnil은 0 일 (3시간) 에 ± 6.02 mg/kg, 26일후에는 4.60 ± 1.33 mg/kg 으로나타났다. 쑥갓중 bifenthrin과 chlrthalnil의회수율은각각 ± 7.97% 와 ± 16.03% 로유효한회수율범위를보였다. 쑥갓의생육기간중농약의잔류량변화는 first rder kinetics mdel을적용하여해석한결과 bifenthrin의반감기는 9.63일이었으며, chlrthalnil은 6.54일이었다. 산출된두농약의감소상수를이용하여생산단계잔류허용기준을산출한결과 bifenthrin의수확 26일전잔류량은 11.7 mg/kg이었으며, chlrthalnil은 24.1 mg/kg이었는데수확예정일에는두농약의잔류허용기준이모두 5.0 mg/kg 이하로잔류하여안전할것으로판단되었다. 쑥갓생산단계농산물의농약잔류허용기준을설정하는데기초자료로활용하여농산물유통단계의부적합에따른생산자의경제적손실을최소화하고소비자에대한안전성을강화할수있다고사료된다. References 1. Jung E.B. and Shin M.K.:In Hyang Yak Dae Jun, Yung Lim Sa(3rd Ed.) Seul, Krea, (1990). 2. Kameka, H. Kitagawa, C. Husebe, Y.:The cnstituents f the steam vlatile il frm Chrysanthemum crnarium L. var spatisum. J. Agri. Chem. Sc., 49, (1975). 3. Anys, T. Steelink, C.:Fluresent petal cnstituents f Chrysanthemum crnarium L. Arch. Bichem. Biphys., 90, (1960). 4. Mahahir, T. Kazuhir, C.:Nvel plant grwth inhibitrs and an insect antifeedant frm Chrysanthemum crnarium L. Agric Bil. Chem., 48, (1984). 5. Fenik, J. Tankiewicz, M. Biziuk, M.:Prperties and determinatin f pesticides in fruits and vegetables, Trac-Trend anal. Chem., 30, (2011). 6. Jeng Y.H., Kim J.U., Lee Y.D., Lim C.H., Hur J.H.:Mdern pes-

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