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현대패션의 로맨틱 이미지에 관한 연구

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ORIGINAL ARTICLE Light emitting diode를이용한광중합시금합금과교정용금속브라켓의전단접착강도 정민호 a ㆍ정신혜 b ㆍ손원준 c 성인교정환자의수요가증가하면서보철물표면에교정장치를부착해야하는빈도가늘어나고있다. 본연구는금속표면에교정장치를직접접착하고자할때사용하는 metal primer 와 silicoating 으로각각금합금의표면을처리한후 light emitting diode (LED) 광중합기를사용하여광중합을시행하여접착력을평가해보고자하였다. Type III gold alloy 표면에 aluminum oxide 를이용한 sandblasting 후 4-META 계열의 metal primer 로처리한시편과 silica 를이용한 sandblasting 후 silane 으로처리한시편에광중합형접착레진인 Transbond XT 를이용하여금속브라켓을접착하고접착후 1 시간, 6 시간, 24 시간후전단접착강도의변화를비교, 관찰하였다. 측정된값을이원분산분석 (two-way analysis of variance) 을이용하여비교하고두가지표면처리방법간에접착강도에차이가있는지도살펴보았다. 연구결과, metal primer 에비하여 silicoating 을시행한시편에서높은전단접착강도가관찰되었으며, 시간이경과할수록접착강도가증가하는경향을보였다. Adhesive remnant index (ARI) 에서는군간유의한차이를보이지않았다. LED 를이용하여광중합을시행하는경우법랑질에비하여긴시간의광중합을실시하고 metal primer 보다는 silicoating 방법을사용하는것이금합금표면에교정장치를부착할때더높은접착강도를얻을수있을것이다. ( 대치교정지 2010;40(1):27-33) 주요단어 : 금속표면, 접착강도, Metal primer, Silicoating 서론 최근성인교정환자의증가 1,2 와함께자연치아의법랑질이아닌여러가지수복재료혹은보철물의표면에교정장치를부착해야하는경우가늘어나고있다. 법랑질표면에직접교정장치를부착하는방법은이미 40 년이상사용되어져왔으나, 3 대구치에교정용밴드를이용하지않고직접브라켓을접착시키는방법이교정임상에서사용되기시작한것은그리오래되지않았다. 근래들어서는교정용접착 a 개원의 ; 임상조교수, 서울대학교치과병원교정과 ; 임상부교수, 삼성의료원교정과. b 대학원생, c 조교수, 서울대학교치의학대학원보존학교실. 교신저자 : 손원준. 서울시종로구연건동 28 서울대학교치의학대학원보존학교실. 02-2072-2651; e-mail, endoson@snu.ac.kr. 원고접수일 : 2009 년 9 월 14 일 / 원고최종수정일 : 2010 년 1 월 22 일 / 원고채택일 : 2010 년 1 월 26 일. DOI:10.4041/kjod.2010.40.1.27 제의발달등의영향으로대구치에서도교정용밴드보다직접접착법을사용하는임상가들의숫자가계속늘어나고있다. 2 아말감이나복합레진, 도재등다른수복재료들상에서는교정치료에필요한적절한접착력을얻을수있어많은임상가들이직접접착법을사용하고있으나, 4 전체치아를금속으로씌운경우에는높은접착력을얻기가쉽지않다고여겨지고있어아직까지교정용밴드를사용하는임상가들이적지않다. 대구치의경우교합력이강하게작용하기때문에 5 교정용브라켓을부착해야하는표면이금속으로수복되어져있는대구치의경우특히강한접착력이필요하고특별한접착술식이필요할것이다. 금속표면은법랑질과는달리인산에부식되는규칙적인조직구조가없으므로, 금속표면에교정장치를직접접착하고자할때가장흔히사용하는방법은금속표면을거칠게만든후화학적인결합력을부여해주는접착제를함께사용하는방법이다. 금속표면을거칠게만들어접착력을증가시켜주는방 27

정민호, 정신혜, 손원준 대치교정지 40 권 1 호, 2010 년 법에는 green stone이나 highspeed handpiece를사용하는방법도있으나이보다더효과적인방법은 sandblasting을이용하는방법이다. 6 화학적인결합력을부여해주는방법으로는 4-methacryloxyethyl trimellitate anhydride (4-META), 10-methacryloyloxydecyl dihydrogen phosphate (10-MDP) 등금속과결합력이높은성분을가진 metal primer 혹은 intermediate resin 등을사용하는방법 4,7,8 과 silica와 silane 을이용한 silicoating 방법등이있다. 9 근래에사용되는이러한물리적, 화학적접착법들의브라켓접착강도를서로비교한연구는아직매우부족하다. Light emitting diode (LED) 는 1907년소개되었지만치과용재료의중합에사용되기시작한것은 10 여년밖에되지않았다. 10 LED가기존에사용되어온 halogen light보다우수한점은긴수명, 작은전력소모, 열발생이적고파장이치과용재료들의중합에유리한좁은파장범위의빛을만든다는점등이다. 11 LED는유사한장점을가진 plasma arc light 나 laser에비하여장치의크기가작고무선형태의제작이가능하며 12 가격이저렴하여그사용이크게증가하는추세이고, 미국의경우최근 LED를사용하는교정의사의수가 halogen을사용하는교정의사보다많아졌다. 2 교정용브라켓을광중합복합레진을사용하여접착할때 LED를이용하여광중합을시행하는경우법랑질표면에서는기존의 halogen을사용하는것과접착력, 12 탈락률, 13 중합정도 (degree of cure) 14 등에서차이를나타내지않는다고보고되었으나, 금속표면의접착력시험에 LED를사용한연구는아직보고된바가없었다. 본연구는가장흔하게금속표면에교정장치를접착할때사용되어져온 aluminum oxide를이용한 sandblasting 후 4-META계열의 metal primer를이용한방법과, 보철영역에서는널리사용되고있고교정장치의접착방법으로도소개된바있으나 9 아직까지교정영역에서는그다지널리사용되지는않고있는 silicoating 혹은 silica coating법을이용하여, 금합금표면에교정장치를접착한후 LED를사용하여광중합시키고, 시간경과에따른접착강도와 ARI의차이를비교해보는데그목적이있다. 연구방법 Type III gold alloy (Au 50%, Pd 5%, Ag 32.5%, Cu 11.45%, Argen Co. San Diego, CA, USA) 를사용하여 Fig 1. Alloy plates were embedded in cold curing acrylic and placed in acrylic rings. Each plate was oriented so that its surface would be parallel to the force during the shear bond test. 가로세로각각 10 mm, 두께 1.5 mm 의규격으로시편을제작하였다. 이들시편을자가중합형아크릴릭레진 (Leocryl, Leone, Sesto Fiorentino, Italy) 을사용하여 acrylic ring 에매몰하였다 (Fig 1). 각시편의노출된 10 10 mm 표면을전단접착강도 (shear bond strength) 실험에이용하였다. 각시편을 pilot study 를위하여 50μm 의 aluminum trioxide (GAC, Bohemia, NY, USA) 를 10 mm 거리에서 intraoral sandblaster (Air-Flow Handy II, EMS Corp USA, Dallas, TX, USA) 를사용하여 2.5 bar 의압력으로 15 초간처리하여표면을거칠게만든후깨끗하게수세, 건조시켰다. 그후 metal primer (Reliance Orthodontic Products, Itasca, IL, USA) 를시편의표면에바르고 1 분간건조시켰다. 022" slot 을가진상악좌측중절치금속브라켓 (item number: 017-875, Victory, 3M Unitek, Monrovia, CA, USA) 을 Transbond XT (3M, Monrovia, CA, USA) 를사용하여제조사의지시에따라부착하고, 주변의과도한레진은모두제거하였다. 사용된브라켓의 base 면적은 10.56 mm 2 였다. 먼저 10 개의시편을 LED 광중합기 (Ortholux LED curing light, 3M Unitek) 를사용하여근심측에서 5 초, 원심측에서 5 초간중합시킨후 24 시간동안 37 o C 의항온수조에서증류수에넣어보관후꺼내어 universal testing device (LF Plus, Ametek, Albany, NY, USA) 를이용하여 Toroglu 와 Yaylali 15 의연구방법과동일한방법으로전단접착강도를측정하였다. 측정시 crosshead speed 는 1 mm/min 으로설정하였다. 측정결과, 과거의 LED 를이용한법랑질상에서의접착시연구결과 12 와는달리중합과정에서 LED 광중합기를 10 초만사용하였을때에는매우낮은 28

Vol. 40, No. 1, 2010. Korean J Orthod 금합금과금속브라켓의전단접착강도 Table 1. Alloy surface-conditioning methods and test timing of each group Group N Surface conditioning Test timing 1 10 1 hour 50μm Al 2O 3 + metal 2 10 6 hour primer 3 10 24 hour 4 10 1 hour 5 10 30μm Silica + silane 6 hour 6 10 24 hour 전단접착강도 ( 평균 2 MPa 이하 ) 를보였다. 그래서각각 10 개의시편을가지고 20 초와 30 초간중합후동일한방법으로전단접착강도를측정하였으며, 역시임상에서사용이어려운낮은접착강도 ( 평균 3 Mpa 이하 ) 를얻었다. 법랑질표면과는달리빛의투과가어려운금속판이기때문에충분한중합이이루어지지못하여낮은접착강도를보인것이라고판단하여, 본실험은브라켓 base 에도 primer 를도포하고 10 초간중합하고, 그후 adhesive 를바른후시편에부착하고근원심에서 20 초씩 40 초간광중합을시키기로결정하였다. 제작된시편은총 30 개로서, 전단접착강도를측정한후각시편의표면을 Shofu Gold Polishing Kit (HP 0303, Shofu Inc., Tokyo, Japan) 을이용하여 polishing 하고 5 분간 ultrasonic bath (Bransonic, Ultrasonic Cleaner, Shelton, CT, USA) 에서깨끗하게한후 oil-free air 를이용하여건조시켰다. Pilot study 에서 30 개의시편이모두사용되었고, 위에기술한 polishing 방법을거쳐본실험에사용되었으며본실험과정에필요한시편이총 60 개였기때문에실험과정에서도시편의 polishing 과정이시행되었다. 실험과정중의시편 polishing 은 Nergiz 등 9 의연구방법을참조하였다. 시간경과에따른전단접착강도의변화와, metal primer 를사용한군과 silicoating 을시행한군의접착강도차이를알아보기위하여전체실험을총여섯군으로나누기로하고, 군당 10 개의시편을사용하기로하였다 (Table 1). 1-3 군은앞서설명한방법에따라 metal primer 를사용하여시편의표면에접착을실시하고 LED 광중합기로 40 초간중합시킨후 1 시간, 6 시간, 24 시간동안 pilot study 에서와동일한방법으로항온수조에서보관후전단접착강도를측정하였다. 측정이끝난시편은앞서언급한방법대로표면을 polishing 한후다음실험과정에사용하였다. 4-6 군은 silica coating 과정을실시하였다. 30μm silicon dioxide (Cojet-Sand, 3M ESPE, Seefeld, Germany) 를이용하여제조사의지시에따라시편의표면에서 10 mm 떨어진높이에서 2.5 bar 의압력으로 15 초간표면처리한후표면을 air 로깨끗하게하고 silane (ESPE-Sil, 3M ESPE) 을바른후 2 분간 oil-free air 를사용하여표면을건조시켰다. 이렇게처리된시편에 1-3 군과동일한방법으로금속브라켓을접착한후항온수조에서각기 1 시간, 6 시간, 24 시간보관하고전단결합강도를측정하였다. 통계처리를위하여 SPSS program version 11.0 (SPSS Inc, Chicago, IL, USA) 을이용하였다. 측정된전단결합강도는 MPa 로환산하고 Kolmogorov- Smirnov test 로검정한결과 (p = 0.05) 모든군이정규분포를보였으므로, 표면처리와시간요소에따른영향력을알아보기위하여이원분산분석 (two-way analysis of variance; two-way ANOVA) 을시행하였다. 각군의전단접착강도와이원분산분석의결과는 Table 2 에나와있다. 전단결합강도를측정한후시편과브라켓표면에잔존해있는접착제의양을 Adhesive Remnant Index (ARI) 16 로평가하고, 각군에따른차이가있는지살펴보기위하여 Kruskal-Wallis test 를사용하였다. 연구성적 이원분산분석의결과 metal primer 를사용한군이 Table 2. Mean and standard deviation in shear bond strength of each group Group Shear bond strength (MPa) Significance sign (surface conditioning) Significance sign (test timing) 1 4.84 ± 1.34 a 2 4.72 ± 1.15 a a 3 7.39 ± 1.18 b 4 8.45 ± 2.68 c 5 9.69 ± 2.55 b c 6 13.63 ± 2.55 d MPa, Megapascal. The same letters are not statistically significant at α = 0.05 by Scheffe's multiple comparison. 29

정민호, 정신혜, 손원준 대치교정지 40 권 1 호, 2010 년 Table 3. Frequency and percentage distribution of the ARI scores of the 6 groups Group ARI scores * N 0 1 2 3 1 10 0 10 0 0 2 10 0 10 0 0 3 10 0 7 3 0 4 10 0 6 4 0 5 10 0 7 3 0 6 10 0 5 4 1 * ARI scores: 0, No adhesive left on the specimen; 1, less than half of the adhesive left on the specimen; 2, more than half of the adhesive left on the specimen; 3, all adhesive left on the specimen. 나 silicoating 을사용한군이나 24 시간후의전단접착강도가유의하게높았으며, 같은시간대에서는 silicoating 을사용한군이 metal primer 를사용한군보다유의하게높은접착강도를보였다. Metal primer 군은접착 1 시간후에는 4.84, 6 시간후에는 4.72 MPa 로접착력의변화가없었으며, 24 시간후에는 7.39 MPa 로유의한증가를보였다. Silicoating 군의경우접착 1 시간후에는 8.45, 6 시간후에는 9.69 MPa 로약간증가하는경향은있었지만통계적으로유의한차이는없었고, 24 시간후에는 13.63MPa 로전단접착강도의유의한증가를관찰할수있었다 (Table 2). 각군의 ARI 는 Table 3 에나타나있다. Kruskal- Wallis test 결과각군간의 ARI 에는유의한차이는보이지않았다 (p > 0.05). 고찰 실험에서관찰된전단결합강도는 Nergiz 등 9 이자가중합형레진을사용하여합금표면에접착 1 주일후에측정한값보다는낮으나 (silicoating 시전체합금평균 19 MPa), silicoating 을시행한군의경우에는 Swanson 등 12 이자연치아표면에 LED 를사용하여광중합한후 24 시간후에측정한값 (20 초중합시 12.2-14.8 MPa) 과는유사하였다. 광중합형복합레진의경우에도중합과정에서발생하는자유라디칼 (free radical) 의수명이길기때문에 17 광중합이후에도중합이지속되는것으로알려 져있다. Halogen 광중합기로광중합하는경우 6시간후에는중합진행이크게줄어들지만 24시간뒤에도약간의증가를관찰할수있으며, 18 Lee 19 는레진브라켓을할로겐광중합기를사용하여법랑질표면에접착하는경우중합률은 24시간후까지소량증가하나처음 5분이후에는결합력의차이는보이지않는다고하였다. 이번연구에서는 24시간후의접착력이 metal primer를사용한군이나 silicoating을사용한군모두에서 1시간후나 6시간후에비하여높은경향을나타내었다. LED는근래들어교정영역에서도널리사용되기시작하였다. 시술시간이짧고장치의부피가작아사용이편리하지만, 9 curing depth가 halogen에비하여매우얕다고알려져있다. 20 더구나이번실험과같이금속표면에금속교정장치를부착하는경우시편과장치모두빛이통과하지못하기때문에, 자연치아에서복합레진을사용할때중합의상당부분을차지하는 transillumination 21 에의한중합효과는거의얻을수없다. 자연치아에서는 20초가더높은접착강도를보이기는했으나 10초의 LED 광중합만으로도임상적으로적절한접착강도 12 를얻을수있었다고하며, 10초의 LED 광중합만으로도 halogen 광중합과유사한브라켓탈락률 13 을보였다고보고된바있다. 그러나브라켓의크기가큰구치부용 tube 의경우에는동일한시간빛을조사하여도 LED가 halogen보다낮은접착강도를보였다는보고도있었으며, 22 이러한차이역시 curing depth와연관되었을것으로생각된다. 본실험에서도이러한 curing depth의영향으로 30초의 LED 광중합을했을때에도 3MPa 이하의, 임상에서사용하기에는너무낮은전단접착강도가관찰되었고 40초의광중합을해야만적절한접착강도를얻을수있었던것으로생각된다. LED를이용한이번실험에서 halogen을사용한금속표면접착강도실험들에비하여 6,9 두가지방법모두낮은접착력값을보였고, 앞서언급한 halogen 광중합시의시간경과에따른변화 18 와는달리 6시간이후에오히려더많은양의접착력증가경향을관찰할수있었던것은이러한 LED 광중합기의특성으로인하여광중합직후에는중합되지않은부분이많았다가점차중합이진행되었기때문일것으로추측된다. 이번실험에서는 LED의이러한특성을고려하여브라켓 base에 primer를얇게바른후광중합하여줌으로써 base 전체에자유라디칼을형성시켜준후 30

Vol. 40, No. 1, 2010. Korean J Orthod 금합금과금속브라켓의전단접착강도 접착을하는방법을시행하였다. 브라켓 base에미리 precure를해주는방법은법랑질에접착하는과정에는접착력강화에효과가있을수있다는연구가발표된바 23 있으나, 금속표면에접착하는과정에미치는영향에대해서는아직발표된바가없어이에대한추가적인실험이필요할것으로보인다. 4-META계열의 metal primer를사용하는경우접착 1, 6시간후에는임상적으로필요하다고알려진최소접착강도 (6-8 MPa) 24 보다낮은값을보였으며, 24시간이지나서야적절한접착강도를얻었다. Metal primer보다 silicoating이더높은접착강도를보인이유를생각해보면, 먼저 4-META는금속표면의산화막에있는산소나 hydroxyl기와수소결합을형성하여결합력을제공하기때문에, 25 nonprecious metal에서더강력한접착력을발휘하는특성을가지고있다는점이 8,26 금합금의표면에작용할때에는불리할수있을것이다. Silane과 silica는표면의 hydroxyl기가떨어져나가는탈수반응으로강하게결합하며, silane은복합레진의다량체 (oligomer) 와도탄소이중결합이끊어지면서쉽게결합한다. 하지만 silane은금속표면과는직접결합하지않는다. 금속표면에 silica 입자를강하게분사하여세라믹표면과유사하게 silica 입자가미세하게박혀있는거친표면을만들어주는 silicoating 방법은금속의조성이나표면의산화막형성등에영향을별로받지않기때문에 27 복합레진을금속에부착할때강하면서안정적인접착력을제공한다. 28 4-META와금속표면간의결합력과 silane과 silica 입자와의결합력을직접비교한문헌은찾아볼수없었으나, 발표된문헌들에서 silicoating 시금속표면과복합레진간의접착강도는 18-30 MPa로 9,29 4-META를이용한브라켓접착강도 (14.1-17.1 MPa 30 ) 보다는비교적높았던것으로미루어보아 silane과 silica 입자와의결합력이좀더강할것으로생각된다. 4-META가수소결합을하는과정과 silane이 silica 입자와결합하는과정은시간이소요되는과정이다. 본실험에서사용한 metal primer의경우제조사에서는도포후 30초를기다리도록추천하고있으나, 31 다른 4-META계열의 primer나 adhesion booster 들의경우접착레진을도포하기전 1분혹은 5분간기다리는것을추천하는경우도있다. 25,32 Silane의경우제조사에서는도포후구강내에서는 1분, 구강외에서는 5분을기다리는것을추천하고있다. 33 본실험에서는 metal primer에서는 1분, silane에서는 2분의시간을사용하였으며도포후기다리는시간이접착력에미치는영향은아직까지비교발표된문헌이없는실정이다. 실제구강내에서적용시에는시간조건이임상의편의성에매우중요한요소가되므로, 이러한시간조건을다르게하는경우접착력의변화에대한연구가앞으로필요할것으로생각된다. 1군에서 6군까지전단결합강도를측정한후의모든시편표면에는소량의중합되지않은복합레진이남아 ARI가 0을보인시편은전혀발견되지않았다. 일반적으로치아표면 ( 혹은시편표면 ) 과접착재료간의결합력이약하면장치제거후표면에접착재료가남아있지않게되나, 34 이번실험에서는중합되지못한복합레진이표면에잔존됨으로써접착강도와상관없이 ARI가 0인시편이나오지않았다. 1, 2, 3군에비하여 4, 5, 6군에서시편표면에남아있는복합레진의양이좀더많아지는경향은있었으나통계적유의성은발견되지않았다. 본실험의결과에따르면금합금표면에서 LED 광중합기를사용하여교정장치부착시 metal primer를사용하면초기접착력이부족하여접착첫날장치의탈락가능성이높을우려가있으므로 silicoating 방법이유리할것으로예상되고, halogen과다름없이 40초혹은그이상의광중합시간이필요할것으로생각된다. 종류에따른차이는있으나복합레진은법랑질과인장강도나전단강도가비슷하기때문에, 29 법랑질표면에강한접착강도를갖도록교정장치를부착하게되면법랑질이손상될수있으며, 도재수복물의경우강한접착강도를갖도록교정장치를부착하게되면소성변형이없고깨지기쉬운도재의특성때문에장치제거과정에서수복물의손상이일어나기쉽다. 35 금속표면에교정장치를부착할때에는높은접착강도로인한부작용을걱정할필요가없고, 금속으로제작된수복물이나보철물은대부분강한교합력을많이받는대구치에 5 위치하므로, 금속표면에교정장치를부착할때에는가장높은접착강도를얻을수있는방법을사용하는것이바람직할것이다. 결론 금속표면에교정장치를부착할때 LED 광중합기를이용하고자한다면법랑질에교정장치를접착할 31

정민호, 정신혜, 손원준 대치교정지 40 권 1 호, 2010 년 때와는달리 40 초이상의긴광중합시간이필요하며, sandblasting 후 4-META 계열의 metal primer 를사용하는방법보다는 silicoating 후 silane 을사용하는것이더높은접착력을얻을수있을것이다. 참고문헌 1. Jung MH. Current trends in orthodontic patients in private orthodontic clinics. Korean J Orthod 2009;39:36-42. 2. Keim RG, Gottlieb EL, Nelson AH, Vogels DS 3rd. 2008 JCO study of orthodontic diagnosis and treatment procedures, part 1: results and trends. J Clin Orthod 2008;42:625-40. 3. Newman GV. Epoxy adhesives for orthodontic attachments: progress report. Am J Orthod 1965;51:901-12. 4. Zachrisson BU. Bonding in orthodontics. In: Graber TM, Vanarsdall RL Jr, editors. Orthodontics: current principles and techniques. 3rd ed. St. Louis: Mosby; 2000. p.557-646. 5. Proffit WR, Fields HW, Nixon WL. Occlusal forces in normal- and long-face adults. J Dent Res 1983;62:566-70. 6. Zachrisson BU, Buyukyilmaz T. Recent advances in bonding to gold, amalgam and porcelain. J Clin Orthod 1993;27: 661-75. 7. 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ORIGINAL ARTICLE Shear bond strength between gold alloy and orthodontic metal bracket using light emitting diode curing light Min-Ho Jung, DDS, MSD, PhD, a Shin-Hye Chung, DDS, b Won-Jun Shon, DDS, MSD, PhD c Objective: The need to bond orthodontic brackets onto various alloys has increased because of the increasing demand for adult orthodontic treatment. This study tried to evaluate the shear bond strength between gold alloy and metal bracket using light emitting diode (LED) light curing after metal primer and silicoating surface conditioning. Methods: Half of the type III gold alloy plates were treated with sandblasting with aluminum oxide and metal primer containing 4-META, the other half were treated with silica and silane. Metal brackets were bonded with Transbond XT light curing adhesive on these plates and shear bond strength were evaluated 1 hour, 6 hours, and 24 hours later. The differences of shear bond strength between groups were evaluated with two-way ANOVA. Results: The results showed higher bond strength in the silicoating group and a tendency of bond strength increase over time. Conclusions: When using LED curing lights for metal bracket bonding to alloy surfaces, long curing time and silicoating can produce a reliable bonding strength. (Korean J Orthod 2010;40(1):27-33) Key words: Alloy surface, Shear bond strength, Metal primer, Silicoating a Private Practice; Clinical Assistant Professor, Department of Orthodontics, School of Dentistry, Seoul National University; Clinical Associate Professor, Samsung Medical Dental Center. b Postgraduate Students, c Assistant Professor, Department of Conservative Dentistry, Seoul National University. Corresponding author: Won-Jun Shon. Department of Conservative Dentistry, Seoul National University, 28, Yeongeon-dong, Jongno-gu, Seoul 110-744, Korea. +82 2 2072 2651; e-mail, endoson@snu.ac.kr. Received September 14, 2009; Last Revision January 22, 2010; Accepted January 26, 2010. 33