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도원 장
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6 1. 연구개발과제의개요 6 2. 국내외기술개발현황 9 3. 연구수행내용및결과 목표달성도및관련분야에의기여도 연구결과의활용계획등 연구과정에서수집한해외과학기술정보 연구개발성과의보안등급 국가과학기술종합정보시스템에등록한연구시설 장비현황 연구개발과제수행에따른연구실등의안전조치이행실적 연구개발과제의대표적연구실적 기타사항 참고문헌 43 < 별첨 1> 연구개발보고서초록 < 별첨 2> 자체평가의견서 < 별첨 3> 연구성과활용계획서 - 4 -

7 1. 연구개발과제의개요 D

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10 2. 국내외기술개발현황 D

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12 3. 연구수행내용및결과 D-05 Ingredients Percentage (%) Haemolymph 40 Chicken yolk 20 Infant formula 30 Neisenheimer s salt solution 10 Penicillin 400 units/ml Streptomycin 400 units/ml

Haemolymph No. eggs No. larvae (%) Period from egg to larva (Mean ± SE) No. pupae (%) Period of pupal stage (Mean ± SE) No. adults (%) Pupae of Caligula japonica 75 57 (76.0%) 21.40 ± 1.20a 5 (6.

13 Haemolymph No. eggs No. larvae (%) Period from egg to larva (Mean ± SE) No. pupae (%) Period of pupal stage (Mean ± SE) No. adults (%) Pupae of Caligula japonica (76.0%) ± 1.20a 5 (6.7%) 6.8 ± 0.74a 5 (6.7%) Pupae of Antheraea pernyi (57.5%) ± 2.14b 18 (15.9%) 6.5 ± 0.99a 18 (15.9%) Last instar larvae of Tenebrio molitor Last instar nymphs of Riptortus pedestris 3 0 Not hatched. 0 - No ovicidal behaviors observed

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15 Natural host egg Female (Mean ± SE) Male (Mean ± SE) Total (Mean ± SE) (Range) Sex ratio ( : ) n = ± ± ± 2.07 (1-7) 1.81 :

16 Age of female No. Mean no. of No. of Period No. of Period from No. of adults Emergence Sex parasitoids (inoculation date) of eggs eggs per egg shell larvae (%) from egg to pupae (%) egg to pupa (range) (per egg shell) (%) rate (%) from 1 st ratio ( : ) (range) larva larva 4-day-old adult ± ± (4.00) : 33 (Ⅴ , 2017) (0-21) (64.6%) (52.5%) (16 20) (48.5%) (1.91:1) 5-day-old adult ± ± (2.41) : 23 (Ⅴ , 2017) (0-17) (71.4%) (51.3%) (16 20) (37.7%) (1.52:1) 6-day-old adult ± ± (4.25) : 41 (Ⅴ , 2017) (0-22) (64.0%) (53.7%) (16 20) (50.2%) (1.49:1) 4-day-old adult ± ± (5.00) : 47 (Ⅸ , 2017) (0-20) (61.7%) (59.8%) (16 18) (57.4%) (1.55:1) ± ± (3.92) : 1 Mean (0-22) (65.1%) (54.6%) (16 20) (49.2%)

17 Reared on Female (Mean ± SD) Male (Mean ± SD) Artificial eggs ± 16.08a ± 17.44a Natural host eggs ± 14.02a ± 14.21a Items Artificial eggs (this study) Refrigerated host eggs Facilities Rearing cell (chamber) Refrigerator Incubator Materials Soil of plant growing Soybean seeds Egg shell Artificial medium Labor Soybean growing not needed not needed needed not needed not needed needed needed not needed (Alim and Limm 2010) needed with environment control needed for preserving eggs needed needed needed not needed not needed needed Parasitoid rearing needed needed Durability Within 1 week Within 1 month Automation Almost possible Partially possible

18 재료비용산출근거 Heamolymph Chicken yolk Infant formular N.S. solution Penicillin Streptomycin 인공알제작 산누에나방번데기 20$/kg ( 라오스시장가격 ) 3kg 에서 320ml 혈림프추출 60$/3kg( 환율 1,150 원 )=69,000 원 ( 원 /ml) 계란 200 원 / 개노른자 15ml/ 개 원 /ml 분유 10,800 원 /750g = 14.4 원 /g 증류수 12,000 원 /1000ml= 12 원 /ml NaCl 55원 /7.5g KCl 0.2원 /0.1g CaCl2 0.2원 /0.1g NaHCO3 1.77원 /0.2g 증류수 12,000원 /1000ml 1,000ml제조 = 12,057.23원 (12.06원/ml) Penicillin 2,500 원 /mg 400 units/ml 증류수 12,000 원 /1000ml 0.4g+400ml = 1000 원 +4,800 원 = 5,800 원 14.5 원 /ml Streptomycin 1,500원 /mg 400 units/ml 증류수 12,000원 /1000ml 0.4g+400ml = 600원 +4,800원 = 5,400원 13.5원 /ml PVC film 36,000 원 / 롤 (50cm*457m) 5cm*5cm/bagform; 1,250 bag forms = 50cm*(125*5cm) = 50cm*6.25m 36,000 원 /457m = 원 /m 인공배지 6ml 제작을위한용량 비용 ( 원 ) 2ml ml g+1.5ml ml ml ml m 계

19 재료규격단가비용산출근거비용 ( 원 ) Soybeen seed 2kg 19,000 원 Peanut seed 1kg 19,000 원 5 일당 1 회급이약 175g (1 일 35g) 9.5 원 /g 5 일당 1 회급이약 57g (1 일 15g) 19 원 /g Kidney bean seed 1kg 11,000 원 2 주 1 회 25 개화분에 3 개씩파종 75 개 =40g; 2.86g 종자 /1 일 ; 11 원 /g Mixed soil 25kg 15,000 원 1 회용화분 거즈 ( 산란받기 ) 롤 (45cm*3600cm) 7,990 원 14 일간 25 개화분필요 = 1.78 개 / 일상토무게 500g/ 화분상토 0.06 원 /g 1 일상토사용량 890g 14 일간 25 개화분필요 = 1.78 개 / 일화분 25 원 / 개 45cm*15cm/1 개 ; 6 개 / 일 = 45cm*90cm (7990 원 *90cm)/3600cm = 원 계

20 톱다리개미조사알락수염노린재썩덩나무노린재갈색날개노린재풀색노린재허리노린재시기 상 트랩설치 3중 3하 4상 2 4중 하 상 중 하 상 중 하 상 중 하 상 중 하 상 중 하 상 중 하 합계 953 3,

1 4 28 12 7 19 67.9 5 46 22 8 30 65.2 6 27 23 23 85.

21 반복 알수 / 난괴 기생봉우화수 3 일후 5 일후 7 일후 10 일후 11 일후 12 일후계 기생율 (%) 계 ( 평균 )

22 조사시기 5 상 48 톱다리개미허리노린재 알락수염노린재썩덩나무노린재갈색날개노린재풀색노린재 중 하 상 중 하 상 중 하 상 중 495 1, 하 515 2, 상 584 1, 중 1, 하 1,371 1, 상 중 하 계 7,244 9, ,

23 조사시기 시기별발생량 ( 마리 /50주) 알 ( 난괴 ) 약충성충 기생율 (%) 5중 1 5하 6상 1 6중 6하 7상 7중 7하 8상 8중 하 상 중 하 상

구분 합성농약 유기농업자재 시험자재 처리농처리충수살충율 (%) 도 ( 마리 ) 1일후 2일후 3일후 델타메트린유제 1,000 60 100 2,000 20 100 디노테퓨란 2,000 60 100 입상수화제 4,000

7 액상수화제 4,000 20 100 스피네토람 2,000 60 100 액상수화제 4,000 20 100 고삼 70+ 계피 15 1,000 60 90 100 2,000 20 60 65 고삼 91+ 목초액 7.

24 구분 합성농약 유기농업자재 시험자재 처리농처리충수살충율 (%) 도 ( 마리 ) 1일후 2일후 3일후 델타메트린유제 1, , 디노테퓨란 2, 입상수화제 4, 클로티아니딘 2, 액상수화제 4, 티아메톡삼 2, 입상수화제 4, 스피로테트라맷 2, 액상수화제 4, 스피네토람 2, 액상수화제 4, 고삼 70+ 계피 15 1, , 고삼 91+ 목초액 7.5 1, , 님 80 1, , 석회유황합제 , 무처리

25 구분 합성농약 유기농업자재 시험자재 처리농처리충수살충율 (%) 도 ( 마리 ) 1일후 2일후 3일후 델타메트린유제 2, 디노테퓨란입상수화제 3, 클로티아니딘 3, 액상수화제 4, 티아메톡삼 3, 입상수화제 4, 스피로테트라맷 2, 액상수화제 3, 스피네토람액상수화제 3, 고삼 70+ 계피 15 1, , 고삼 91+ 목초액 7.5 1, , 님 80 1, , 석회유황합제 고삼75+ 계피0.5 1, 채종유15 2, 고삼80+ 채종유10 1, , 무처리

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39 4. 목표달성도및관련분야기여도 연구개발목표 연구개발내용 가중치 달성도 인공사료조성개발 o 인공배지조성 - 혈림프 (40%), chicken york (20%), infant formula (30%), Neisenheimer s salt solution (10), Penicillin (400 units), Streptomycin (400 units) % - 곤충 (4종) 의혈림프중산누에나방 ( 작잠 ) 번데기혈림프가알깡충좀벌의산란및유충의발육에가장적합 인공기주개발 o 인공알제작 - 난각소재로 polypropylene film 양호, 두께 0.4mm - bag form 형태로제작하여인공배지분주후실링 - 알깡충좀벌암컷성충이인공알에정상적으로산란 % - 산란된알은부화하여 1령유충에서성충까지최고 93% 우화 카이로몬탐색 o 유인및산란자극물질탐색 - 톱다리개미허리호리노린재의여러부위중복부에서에탄올로 12시간이상추출한용액에알깡충좀벌암컷성 5 100% 충유인및산란행동관찰 - 추출액을인공알표면에발라산란유도성공 생물적속성평가 o 인공알로부터생산된알깡충좀벌의생물적속성 - 인공알에산란된알은자연알과마찬가지로인공난각표면에 egg stalk 형성 - 부화율평균 65.1%, 용화율평균 54.6%, 우화율 49.2%, 성비평균 1.61:1-1령유충에서성충까지우화율최고 93% - 인공알에서알부터유충까지 9-12일소요 % - 인공알에서번데기기간은자연알과같이 7일소요 - 인공알과자연알에서우화한암수성충모두뒷다리종아리마디의길이에서통계적유의차가없었음 - 인공알에서발육한성충은자연알과인공알모두에서 3 세대까지활력의변화없이산란 야외발생소장 o 콩밭에서노린재발생최성기및기생율 - 톱다리개미허리노린재 : 8월중순 ~9월상순 ( 착협기 ) - 갈샐날개노린재 : 7월상순 ~ 하순 - 풀색노린재 : 9월하순 ~10월상순 - 풀색노린재알기생봉기생율평균 63.1% % o 단감에서노린재발생최성기및기생율 - 톱다리개미허리노린재 : 8월중순 ~10월하순 ( 비대착색기 ) o 고추에서노린재발생최성기및기생율 - 꽈리허리노린재 : 8월중순 ~9월하순, 기생율 20.5% 기생벌의살충제감수성검정 o 알깡충좀벌의살충제감수성평가 - 합성농약 (6종) 및유기농업자재 (6종) 에대하여기준량및반량에서모두치사, 그보다낮은농도에서도 80% % 이상의감수성을나타냄 노린재및기생벌산란행동조사 o 톱다리개미허리노린재섭식및산란행동조사 - 성충과약충은장류용콩, 콩꼬투리, 햇콩에섭식선호 - 암컷성충은아크릴판과솜 ( 거즈 ) 에산란선호 o 알깡충좀벌의산란행동조사 % - 산란유도물질을바른유리구슬에서도산란행동관찰 - 산란행동 : 기주탐색 ( 더듬이이용 )-탐침( 산란관 )-산란 인공알대량생산공정조사 o 인공알대량생산을위한단계별공정조사 - 인공알제작공정 : 배지준비-배지혼합-배지주입-밀봉-멸균처리 - 인공알대량제작장치자료수집 - 시제품제작 : 접종및증식-수확-포장-운반 % D

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41 5. 연구결과의활용계획 D 연구과정에서수집한해외과학기술정보 코드번호 D-08 체내기생벌의산란과사육을위한인공배지로하이드로겔비즈또는캡슐의제작기술 ( 특허번호 US ) - 생체고분자를이용한캡슐형태의인공알제작기술및그인공알에진딧물기생벌의산란확인 7. 연구개발결과의보안등급 공개 코드번호 D 등록한연구시설 장비현황 코드번호 D-10 구입기관연구시설 / 연구장비명 규격 ( 모델명 ) 수량 구입연월일 구입가격 ( 천원 ) 구입처 ( 전화번호 ) 비고 ( 설치장소 ) NTIS 장비 등록번호 없음

42 9. 수행에따른연구실등의안전조치이행실적 D-11 구분점검분야중점점검사항비고 자체 외부전문기관 담당자별점검 공조 / 유틸리티장비및배관일일 안전관리팀합동 야간및휴일 화학약품사용및관리상태 시설운영상태 24 시간가동장비운영상태 매월, 안전점검의날관련 비상대응훈련 안전시설시험동작및대피훈련년 2 회 위험시설안전진단 실험실안전관리상태 가스및약품안전관리상태 일일 년 2 회 수칙명주요내용비고 안전보건관리요령 실험실관리수칙 전기관리수칙 화학약품관리수칙 환경관리수칙 - 안전관리총괄, 고압가스, 전기, 화학약품안전관리세부사항 - 관리자편성및임무 - 전기시설물취급및구매설치 ; 전기시설물설치등에관한규제 - 안전관리자임무, 조치및의무 ; 취급, 통제구역, 비상재해 - 오염물질배출및방지준수사항 ; 장비도입및폐기시준수사항

43 10. 연구개발과제의대표적연구실적 구분 ( 논문번호논문명 / 특허명 / 기타 / 특허 / 기타알깡충좀벌을특허 1 인공사육하기위한출원인공알주머니특허알깡충좀벌의 2 출원인공사육방법알깡충좀벌의특허 3 인공사육을위한출원인공배지조성물 In Vitro Rearing of Ooencyrtus nezarae 국제 (Hym.: Encyrtidae), 4 학술 an Egg Parasitoid 발표 of the Bean Bug, Riptortus pedestris (Hem.: Alydidae) In vitro rearing of Ooencyrtus nezarae (Hymenoptera: 5 논문 Encyrtidae), an egg (SCI) parasitoid of Riptortus pedestris (Hemiptera: Alydidae) 소속기관명역할 순천대학교순천대학교순천대학교순천대학교순천대학교 D-12 사사여부논문게재지 / 특기사항 Impact 논문게재일 ( 단독사사특허등록국 (SCI 여부 / 인 Factor / 특허등록일또는가용횟수등 ) 중복사사 ) 주발명 대한민국 자 주발명 대한민국 자 주발명 대한민국 자 Joint International 발표자 대만 단독사사 Conference (NTU & ScNU) Biocontrol 교신 Science and - 단독사사 - 저자 ( 투고일 ) Technology 11. 기타사항 코드번호 D-13 없음

44 12. 참고문헌 D

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46 [ 별첨 1] 연구개발보고서초록

47 [ 별첨 2] 1. D-15 과제번호 사업구분 농식품기술개발사업 연구분야단위과제구분사업명농생명산업기술개발사업주관 총괄과제 기재하지않음 총괄책임자 기재하지않음 과제명 노린재알기생봉알깡충좀벌 (Ooencyrtus nezarae) 의대량인공사육기술개발 과제유형 개발 연구기관 순천대학교 연구책임자 홍기정 연차 기간 정부 민간 계 1차년도 ~ ,000 25, , 연구기간 2차년도 100,000 25, ,000 ~ 연구비 3차년도 ( 천원 ) 4차년도 5차년도계 ~ ,000 50, ,000 참여기업 농업회사법인 ( 주 ) 한국유용곤충연구소 상대국 상대국연구기관 2. 평가일 : 2018년 1월 31일 3. 평가자 ( 연구책임자 ) : 소속 직위 성명 순천대학교 부교수 홍기정 4. 평가자 ( 연구책임자 ) 확인 : 평가대상과제에대한연구결과에대하여객관적으로기술하였으며, 공정하게평가하였음을확약하며, 본자료가전문가및전문기관평가시에기초자료로활용되기를바랍니다. 확약

48 Ⅰ. 연구개발실적 다음각평가항목에따라자체평가한등급및실적을간략하게기술 (200 자이내 ) 1. 연구개발결과의우수성 / 창의성 등급 : 아주우수 2. 연구개발결과의파급효과 등급 : 아주우수 3. 연구개발결과에대한활용가능성 등급 : 아주우수 4. 연구개발수행노력의성실도 등급 : 아주우수 5. 공개발표된연구개발성과 ( 논문, 지적소유권, 발표회개최등 ) 등급 : 보통

49 Ⅱ. 연구목표달성도 세부연구목표 ( 연구계획서상의목표 ) 비중 (%) 달성도 (%) 자체평가 o 인공사료조성개발 적합한인공배지개발완료 o 인공기주개발 제작된인공알에서산란성공 o 카이로몬탐색 추출액산란유도성공 o 생물적속성평가 o 야외발생소장 o 기생벌의살충제감수성검정 o 노린재및기생벌산란행동조사 o 인공알대량생산공정조사 합계 100 점 100 인공알에서발육한성충 3세대까지활력유지하면서산란활동지속톱다리개미허리노린재는착협기인 8월중순 ~9월상순이발생최성기풀색노린재알의기생율 63.1% 합성농약및유기농업자재의반량이하농도에서 80% 이상감수성기주탐색 ( 더듬이 ) 탐침 ( 산란관 ) 산란으로이어지는일련의행동인공알제작공정체계수립및시제품제작 Ⅲ. 종합의견 1. 대한종합의견 2. 평가시고려할사항또는요구사항

50 3. 활용방안및향후조치에대한의견 Ⅳ. 보안성검토 o 보완성이필요하지않음 1. 의견 2. 연구기관자체의검토결과

51 [ 별첨 3] 연구성과활용계획서

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54 주의 1. 이보고서는농림축산식품부에서시행한농생명산업기술개발사업의연구보고서입니다. 2. 이보고서내용을발표하는때에는반드시농림축산식품부에서시행한농생명산업기술개발 사업의연구결과임을밝혀야합니다. 3. 국가과학기술기밀유지에필요한내용은대외적으로발표또는공개하여서는아니됩니다.

농림축산식품부장관귀하 본보고서를 미생물을활용한친환경작물보호제및비료의제형화와현장적용매뉴 얼개발 ( 개발기간 : ~ ) 과제의최종보고서로제출합니다 주관연구기관명 : 고려바이오주식회사 ( 대표자 ) 김영권 (

농림축산식품부장관귀하 본보고서를 미생물을활용한친환경작물보호제및비료의제형화와현장적용매뉴 얼개발 ( 개발기간 :2014. 7. 29 ~ 2016. 7. 28.) 과제의최종보고서로제출합니다. 2016. 7. 28. 주관연구기관명 : 고려바이오주식회사 ( 대표자 ) 김영권 ( 인 ) 협동연구기관명 : 목원대학교산학협력단 ( 대표자 ) 고대식 ( 인 ) 협동연구기관명