(72) 발명자 하현지 서울특별시 노원구 한글비석로 480, 203동 607호 (상계동, 보람아파트) 장윤혁 서울특별시 서초구 서초대로40길 72, 서초한빛삼성 아파트 102동 402호 (서초동) - 2 -

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오성 봉
7 years ago
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1 (19) 대한민국특허청(KR) (12) 등록특허공보(B1) (51) 국제특허분류(Int. Cl.) A61K 31/722 ( ) A61P 3/10 ( ) (21) 출원번호 (22) 출원일자 2009년09월07일 심사청구일자 2009년09월07일 (65) 공개번호 (43) 공개일자 2011년03월15일 (56) 선행기술조사문헌 KR A* KR A *는 심사관에 의하여 인용된 문헌 (45) 공고일자 2012년08월13일 (11) 등록번호 (24) 등록일자 2012년08월06일 (73) 특허권자 세종대학교산학협력단 서울특별시 광진구 능동로 209 (군자동, 세종대학 교) (72) 발명자 곽해수 서울 강동구 둔촌동 70-4 현대2차 101동 601호 서미화 경기도 부천시 원미구 심곡2동 삼융아파트 102동 903호 (뒷면에 계속) (74) 대리인 황이남 전체 청구항 수 : 총 1 항 심사관 : 신창훈 (54) 발명의 명칭 나노키토산을 함유하는 당뇨성 질환의 예방 및 개선용 식이 조성물 (57) 요 약 본원발명은 100 ~ 1000 nm 크기의 나노키토산을 유효성분으로 함유하는 나노키토산을 함유하는 당뇨성 질환의 예 방 및 개선용 식이 조성물에 관한 것이다. 본원발명의 나노키토산을 함유하는 당뇨성 질환의 예방 및 개선용 식 이 조성물은 혈중 포도당 농도, 혈중 총 콜레스테롤 농도, 혈중 중성지질 농도, 혈중 인슐린 농도를 상당히 감소 시킬 수 있기 때문에 당뇨성 질환의 예방 및 개선에 탁월한 효과를 기대할 수 있다. 대 표 도 - 도1-1 -

2012년08월13일 (11) 등록번호 10-1173178 (24) 등록일자 2012년08월06일 (73) 특허권자 세종대학교산학협력단 서울특별시 광진구 능동로 209 (군자동, 세종대학 교) (72) 발명자 곽해수 서울 강동구 둔촌동 70-4 현대2차 101동 601호 서미화 경기도 부천시 원미구 심곡2동 삼융아파트 102동 903호 (뒷면에 계속)

2 (72) 발명자 하현지 서울특별시 노원구 한글비석로 480, 203동 607호 (상계동, 보람아파트) 장윤혁 서울특별시 서초구 서초대로40길 72, 서초한빛삼성 아파트 102동 402호 (서초동) - 2 -

3 특허청구의 범위 청구항 1 당뇨병, 당뇨성 망막증, 당뇨성 신경증, 신장병, 죽상 동맥경화증, 심근 장해, 피부 장해, 당뇨성 발 증후군 및 말초혈관 질병의 합병증으로 구성된 그룹에서 선택되는 어느 하나인 당뇨성 질환의 예방 및 개선용 식이 조성물 에 있어서, 입자크기가 100~1000nm의 나노키토산 20g에 대하여 카제인(Casein) 200g, L-시스틴(L-Cystine) 3g, 수크로스 (Sucrose) 85g, 전분(Corn starch) 397g, 디에트로스(Dyetrose) 132g, 콩기름(Soybean Oil) 70g, t-부틸히드로 퀴논(t-Butylhydroquinone) 0.014g, 셀룰로스(Cellulose) 50g, 미네랄 믹스(Mineral mix) 35g, 비타민 믹스 (Vitamin mix) 10g, 타르타르산수소콜린(Choline Bitartrate) 2.5g을 포함하되, 상기 미네랄 믹스(Mineral mix)는 미네랄 믹스(Mineral mix) g 당 탄산칼슘(Ca Carbonate) 357g, 인산칼륨(Potassium Phosphate) 196g, 구연산칼륨(C 6 H 5 K 3 O 7?H 2 O) 70g, 염화나트륨(NaCl) 74g, 황산칼륨(K 2 SO 4 ) 46g, 산화마그네슘(MgO) 24g, 구연 산철(Ferric Citrate) 6g, 탄산아연(ZnCO 3 ) 1.7g, 탄산망간(Manganous Carbonate) 0.63g, 탄산구리(Cu Carbonate) 0.3g, 아이오딘산 칼륨(Potassium Iodate) 0.01g, 셀렌산 나트륨(Na Selenate) 0.01g, 몰리브덴산 암모늄(Ammonium Paramolybdate?4H 2 O) 0.008g, 규산나트륨(Na Metasilicate?9H 2 O) 1.45g, 황산칼륨크롬 12수화 물(Chromium Potassium Sulfate?12H 2 O) 0.28g, 염화리튬(LiCl) 0.02g, 붕산(Boric Acid) 0.08 g, 불화나트륨 (Sodium Flouride) 0.06g, 탄산니켈(Nickel Carbonate) 0.03g, 바나딘산 암모늄(Ammonium Vanadate) 0.007g, 자당 미세분말(Sucrose finely powdered) 221g이 포함된 것이고; 상기 비타민 믹스(Vitamin mix)는 비타민 믹 스(Vitamin mix) g 당 나이아신(Niacin) 3g, 판토텐산 칼슘(Ca Pantothenate) 1.6g, 염산 피리독신 (Pyridoxine HCl) 0.7g, 티아민 염산염(Thiamine HCl) 0.6g, 리보플라빈(Riboflavin) 0.6g, 엽산(Folic Acid) 0.2g, 비오틴(Biotin) 0.02g, 초산 토코페롤(Vitamin E Acetate(500 IU/g)) 15g, 비타민 B12(Vitamin B12(0.1%)) 2.5g, 레티닐 팔미틴산염(Vitamin A Palmitate(500,000 IU/g)) 0.8g, 비타민 D3(Vitamin D3(400,000 IU/g)) 0.25g, 비타민 K1/포도당 혼합물(Vitamin K1/Dextrose Mix(10mg/g)) 7.5g, 자당(Sucrose) 967g이 포함된 것 임을 특징으로 하는 당뇨성 질환의 예방 및 개선용 식이 조성물 청구항 2 삭제 청구항 3 삭제 명 세 서 발명의 상세한 설명 [0001] 기 술 분 야 본원발명은 나노키토산을 함유하는 당뇨성 질환의 예방 및 개선용 식이 조성물에 관한 것이다. [0002] 배 경 기 술 식생활의 변화 및 복잡한 사회적 요인에 의해 당뇨병 환자가 급증하고 있으며 중년 및 노년층 뿐만 아니라, 청 소년층에까지 발병되고 있는 실정이다. 당뇨병은 생체내 인슐린을 분비하는 췌장 소도세포의 β세포가 파괴되거 나 기능이 저하됨으로써 발병한다. 그 결과, 조직내 인슐린 수용체의 거부반응으로 혈당이 조직으로 운반되지 않고 소변을 통해 배설되는 고당뇨와 같은 대사성 질환이 발병하게 된다. 또한, 당뇨병은 생체내의 당 및 지질 대사에 이상을 초래하여 고혈압, 동맥경화증 등의 순환기 질환, 신장 질환 및 백내장 등의 합병증을 유발한다. 특히, 당뇨병에 의한 혈중 지질 구성이 비정상적으로 변화하게 된다. 즉, 혈중 중성지방의 증가, 고밀도 지단백 콜레스레롤의 감소 및 저밀도 지단백 콜레스테롤의 증가, 지단백의 산화에 의한 지단백 기능의 이상으로 인한 혈소판 응집의 증가 등의 현상이 일어나게 된다

014g, 셀룰로스(Cellulose) 50g, 미네랄 믹스(Mineral mix) 35g, 비타민 믹스 (Vitamin mix) 10g, 타르타르산수소콜린(Choline Bitartrate) 2.5g을 포함하되, 상기 미네랄 믹스(Mineral mix)는 미네랄 믹스(Mineral mix) 998.

4 [0003] 이와 같은 당뇨병의 주 원인은 고에너지의 식생활 습관과 운동 부족이나, 급박한 사회적 환경으로 인해 식이 조 절이나 운동이 여의치 않다는 문제점이 발생한다. 그에 따라 효과적으로 당뇨병을 비롯한 당뇨성 질환의 예방 및 치료할 수 있는 물질에 대한 연구 및 개발에 대한 필요성이 절실하다. 발명의 내용 [0004] 해결 하고자하는 과제 상기 문제점을 해결하기 위한 본원발명은, 효과적으로 당뇨성 질환을 예방하고 개선할 수 있는 식이 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다. [0005] 과제 해결수단 상기 목적을 달성하기 위한 본원발명은 100 ~ 1000 nm 크기의 나노키토산을 유효성분으로 함유하는 나노키토산 을 함유하는 당뇨성 질환의 예방 및 개선용 식이 조성물을 제공한다. [0006] 효 과 본원발명의 나노키토산을 함유하는 당뇨성 질환의 예방 및 개선용 식이 조성물은 혈중 포도당 농도, 혈중 총 콜 레스테롤 농도, 혈중 중성지질 농도, 혈중 인슐린 농도를 상당히 감소시킬 수 있기 때문에 당뇨성 질환의 예방 및 개선에 탁월한 효과를 기대할 수 있다. [0007] [0008] [0009] 발명의 실시를 위한 구체적인 내용 본원발명은 나노키토산을 함유하는 당뇨성 질환의 예방 및 개선용 식이 조성물에 관한 것으로서, 100 ~ 1000 nm 크기의 나노키토산을 유효성분으로 함유한다. 상기 나노키토산은 상기 조성물 전체 중량 대비 0.1 ~ 50 중량% 함유되는 것이 바람직하다. 상기 당뇨성 질환은 당뇨병, 당뇨성 망막증, 당뇨성 신경증, 신장병, 죽상 동맥경화증, 심근 장해, 피부 장해, 당뇨성 발 증후군 또는 말초혈관 질병의 합병증이 될 수 있다. [0010] 이하에서, 본원발명의 바람직한 제조예, 비교예를 참조하여 상세히 설명한다. 아래의 제조예, 비교예는 본원발 명의 내용을 이해하기 위해 제시된 것일 뿐이며 당해 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 본원발명의 기술적 사상 내에서 많은 변형이 가능할 것이다. 따라서 본원발명의 권리범위가 이러한 제조예, 비교예에 한정되는 것 으로 해석되어서는 안 된다. [0011] [0012] [0013] [0014] <제조예> : 당뇨성 질환의 예방 및 개선용 식이 조성물 삼성키토피아로부터 구입한 키토산 분말을 분쇄하여, 나노크기의 입자가 되도록 하였다. 그 결과 본원발명의 나노키토산 분말(Nanopowdered chitosan)을 얻었다. 상기 키토산 분말과 본원발명의 나노키토산 분말의 입자크 기를 비교하기 위하여 SEM 사진을 찍어서 각각 도 1 및 도 2에 나타냈다. 도 1에서 볼 수 있는 바와 같이, 키토 산 분말의 직경은 평균 150 μm이었다. 또한, 도 2에서 볼 수 있는 바와 같이, 본원발명의 나노키토산 분말의 직경은 100 ~ 1000 nm 범위에서 다양한 크기로 존재하였다. 상기 나노키토산, 카제인(Casein), L-시스틴(L-Cystine), 수크로스(Sucrose), 전분(Corn starch), 디에트로스 (Dystrose), 콩기름(Soybean Oil), t-부틸히드로퀴논(t-butylhydroquinone), 셀룰로스(Cellulose), 미네랄 믹 스(AIN-93G Mineral mix), 비타민 믹스(AIN-93G Vitamin mix), 타타르산수소콜린(Choline Bitartrate)을 혼합 하여 당뇨성 질환의 예방 및 개선용 식이 조성물을 제조하였다. 상기 미네랄 믹스(AIN-93G Mineral mix) g 당 Ca Carbonate 357 g, Potassium Phosphate 196 g, - 4 -

[0005] 과제 해결수단 상기 목적을 달성하기 위한 본원발명은 100 ~ 1000 nm 크기의 나노키토산을 유효성분으로 함유하는 나노키토산 을 함유하는 당뇨성 질환의 예방 및 개선용 식이 조성물을 제공한다.

5 C 6 H 5 K 3 O 7 xh 2 O 70 g, NaCl 74 g, K 2 SO 4 46 g, MgO 24 g, Ferric Citrate 6 g, ZnCO g, Manganous Carbonate 0.63 g, Cu Carbonate 0.3 g, Potassium Iodate 0.01 g, Na Selenate 0.01 g, Ammonium Paramolybdate?4H 2 O g, Na Metasilicate?9H 2 O 1.45 g, Chromium Potassium Sulfate?12H 2 O 0.28 g, LiCl 0.02 g, Boric Acid 0.08 g, Sodium Flouride 0.06 g, Nickel Carbonate 0.03 g, Ammonium Vanadate g, Sucrose finely powdered 221 g이 포함되어 있다. [0015] 상기 비타민 믹스(AIN-93G Vitamin mix) g 당 Niacin 3 g, Ca Pantothenate 1.6 g, Pyridoxine HCl 0.7 g, Thiamine HCl 0.6 g, Riboflavin 0.6 g, Folic Acid 0.2 g, Biotin 0.02 g, Vitamin E Acetate(500 IU/g) 15 g, Vitamin B12 (0.1%) 2.5 g, Vitamin A Palmitate(500,000 IU/g) 0.8 g, Vitamin D3(400,000 IU/g) 0.25 g, Vitamin K1/Dextrose Mix (10 mg/g) 7.5 g, Sucrose 967 g이 포함되어 있다. [0016] [0017] [0018] [0019] <비교예 1> : 체중 증가량 및 식이효율 상기 제조예의 나노키토산을 함유하는 당뇨성 질환의 예방 및 개선용 식이 조성물이 당뇨병에 효과가 있는지 살 펴보기 위하여, 8주령의 C57BLKS/J-db/db 마우스(이하 본원발명 이라 함)에게 섭취시켜서 실험을 하였다. 상 기 나노키토산을 함유하는 당뇨성 질환의 예방 및 개선용 식이 조성물은 본원발명의 마우스에게 사료로 사용하 였다. 일반사료를 섭취시킨 C57BLKS +/+종 정상 마우스 7마리를 대조군 1, 일반사료를 섭취시킨 C57BLKS/J-db/db 마우 스 7마리를 대조군 2, 키토산 분말이 포함된 사료를 섭취시킨 C57BLKS/J-db/db 마우스 7마리를 대조군 3으로 설 정하였다. 하기의 표 1에서 대조군 1 내지 대조군 3, 본원발명의 마우스에게 섭취시킨 사료의 조성을 나타냈다. <표 1> [0020] 성분 대조군 1 대조군 2 대조군 3 본원발명 Casein 200 g L-Cystine 3 g Sucrose 85 g Corn starch 397 g Dyetrose 132 g Soybean Oil 70 g t-butylhydroquinone g Cellulose 50 g Mineral Mix 35 g Vitamin Mix 10 g Choline Bitartrate 2.5 g Chitosan g - Nanopowdered chitosan g 합계(sum) g g g g [0021] [0022] 상기의 표 1의 사료를 8주 동안 섭취한 대조군 1 내지 대조군 3, 본원발명의 마우스의 사료 섭취량 및 체중증가 량을 측정하여 하기의 식 1에 따라 식이효율(Food efficiency ratio)을 계산하여, 하기의 표 2에 나타냈다. <식 1> [0023] [0024] <표 2> [0025] 구분 체중 증가량(g) 사료 섭취량(g) 식이효율(%) 대조군 ± ± ±0.13 대조군 ± ± ±0.34 대조군 ± ± ±0.08 본원발명 7.97± ± ±

03 g, Ammonium Vanadate 0.007 g, Sucrose finely powdered 221 g이 포함되어 있다. [0015] 상기 비타민 믹스(AIN-93G Vitamin mix) 999.77 g 당 Niacin 3 g, Ca Pantothenate 1.6 g, Pyridoxine HCl 0.7 g, Thiamine HCl 0.

6 [0026] [0027] [0028] [0029] <비교예 2> : 혈중 포도당 농도의 변화 상기 비교예 1의 대조군 1 내지 대조군 3 및 본원발명의 마우스의 혈중 포도당을 측정하였다. 혈당 측정은 test-strip method를 사용하였으며, 실험에 사용된 혈액은 꼬리정맥에서 일주일 간격으로 오전 10 ~ 12시 사이 에 채혈하여 혈당측정기(Gluco Dr. AGM-300, (주)올메디쿠스, 한국)로 측정하였다. 측정된 혈중 포도당 농도 (Glucose level)는 도 3에 나타냈다. 도 3에서 볼 수 있는 바와 같이, 대조군 2의 당뇨병이 있는 마우스의 혈중 포도당 농도는 490 ~ 590 mg/dl로써, 초기 0주째에서 8주째까지 꾸준히 증가하는 경향을 나타냈다. 또한, 대조군 3의 당뇨병이 있는 마우스는 키토산 분말이 포함된 사료를 섭취하면서 꾸준히 혈중 포도당 농도가 감소하여, 8주 동안 혈중 포도당 농도의 감소율은 약 28%였다. 이에 반해, 본원발명의 당뇨병이 있는 마우스는 나노키토산 분말이 포함된 사료를 섭취하면서, 대 조군 3보다 탁월하게 혈중 포도당 농도가 감소하여, 8주 동안의 혈중 포도당 농도의 감소율은 약 56%였다. 이러한 결과로부터, 나노키토산 분말이 포함된 사료, 즉 당뇨성 질환의 예방 및 개선용 식이 조성물은 우수한 당뇨병 예방 및 개선용의 용도로서 사용될 수 있음을 알 수 있다. [0030] [0031] [0032] [0033] [0034] [0035] [0036] <비교예 3> : 혈중 콜레스테롤 농도의 변화 상기 비교예 1의 대조군 1 내지 대조군 3 및 본원발명의 마우스의 혈중 총콜레스테롤을 측정하였다. 혈중 총 콜 레스테롤의 측정은 (주)아산제약의 효소시액을 사용하여 효소법에 의하였으며, 구체적인 실험방법은 다음과 같 다. 실험이 시작된 후 8주 후에, 대조군 1 내지 대조군 3 및 본원발명의 마우스의 꼬리정맥에서 채혈하여 3,000 rpm 에서 20분간 원심분리하여 혈청을 분리하여 test tube에 모은 후, 각각 냉동 보관하였다. 냉동 보관된 혈청을 4 에서 24 시간 동안 해동한 후 0.02 ml를 취한 후, 효소시액 3.0 ml와 혼합하여 준비한 검체를 37 에서 5분 동안 방치하였다. 시약 블랭크와 대조하여 60분 이내에 파장 500 nm에서 흡광도를 측정하였다. 또한, 증류수 0.02 ml와 효소시액 3.0 ml를 혼합하여 준비한 표준액을 시약 블랭크와 대조하여 60분 이내에 파 장 500 nm에서 흡광도를 측정하였다. 상기에서 측정한 검체의 흡광도를 표준액의 흡광도로 나눈 후 300을 곱한 값을 혈중 총 콜레스테롤 농도(Total cholesterol level)로 하였고, 이를 도 4에 나타냈다. 도 4에서 볼 수 있는 바와 같이, 대조군 2의 당뇨병이 있는 마우스의 혈중 총 콜레스테롤 농도는 mg/dl였 으며, 대조군 3의 당뇨병이 있는 마우스의 혈중 총 콜레스테롤 농도는 mg/ml였다. 즉, 대조군 3의 마우스 는 키토산 분말이 포함된 사료를 섭취하면서 혈중 총 콜레스테롤 농도가 감소하여, 8주 동안의 혈중 총 콜레스 테롤 농도의 감소율은 약 18.2%였다. 이에 반해, 본원발명의 당뇨병이 있는 마우스는 나노키토산 분말이 포함된 사료를 섭취하면서 대조군 3보다 탁월하게 혈중 포도당 농도가 감소하여, 8주 동안의 혈중 포도당 농도의 감소 율이 약 31.6%였다. 이러한 결과로부터, 나노키토산 분말이 포함된 사료, 즉 본원발명의 당뇨성 질환의 예방 및 개선용 식이 조성물 은 우수한 당뇨병 예방 및 개선용의 용도로서 사용될 수 있음을 알 수 있다. [0037] [0038] [0039] <비교예 4> : 혈중 중성지질 농도의 변화 상기 비교예 1의 대조군 1 내지 대조군 3 및 본원발명의 마우스의 혈중 중성지질을 측정하였다. 상기의 비교예 3과 같은 방법에 의하되, 550 nm에서 흡광도를 측정하였고, 측정한 검체의 흡광도를 표준액의 흡광도로 나눈 후 300을 곱한 값을 혈중 중성지질의 농도(Triglyceride level)로 하였고, 이를 도 5에 나타냈다. 도 5 에서 볼 수 있는 바와 같이, 대조군 2의 당뇨병이 있는 마우스의 혈중 중성지질의 농도는 mg/dl였으 며, 대조군 3의 당뇨병이 있는 마우스의 혈중 중성지질의 농도는 83.1 mg/ml였다. 즉, 대조군 3의 마우스는 키 토산 분말이 포함된 사료를 섭취하면서 혈중 중성지질 농도가 감소하여, 8주 동안의 혈중 중성지질 농도의 감소 - 6 -

도 3에서 볼 수 있는 바와 같이, 대조군 2의 당뇨병이 있는 마우스의 혈중 포도당 농도는 490 ~ 590 mg/dl로써, 초기 0주째에서 8주째까지 꾸준히 증가하는 경향을 나타냈다.

7 율은 약 22.5%였다. 이에 반해, 본원발명의 당뇨병이 있는 마우스는 나노키토산 분말이 포함된 사료를 섭취하면 서 대조군 3보다 탁월하게 혈중 중성지질 농도가 감소하여, 8주 동안의 혈중 중성지질의 농도는 약 33.6%였다. [0040] 이러한 결과로부터, 나노키토산 분말이 포함된 사료, 즉 본원발명의 당뇨성 질환의 예방 및 개선용 식이 조성물 은 우수한 당뇨병 예방 및 개선의 용도로서 사용될 수 있음을 알 수 있다. [0041] [0042] [0043] [0044] <비교예 5> : 혈중 인슐린 농도의 변화 상기 비교예 1의 대조군 1 내지 대조군 3 및 본원발명의 마우스의 혈중 인슐린을 측정하였다. 혈중 총 인슐린은 마우스 인슐린 ELISA kit(shibayagi, Japan)를 이용하여 micro plate reader(elx800, Bio-TEK, USA)로 측정하 여 도 6에 나타냈다. 도 6에서 볼 수 있는 바와 같이, 대조군 2의 당뇨병이 있는 마우스의 인슐린의 농도는 86.6 μu/ml였으며, 대조 군 3의 당뇨병이 있는 마우스의 혈중 인슐린의 농도는 μu/ml였다. 즉, 대조군 3의 마우스는 키토산 분말 이 포함된 사료를 섭취하면서 혈중 인슐린 농도가 증가하여, 8주 동안의 혈중 인슐린 농도의 감소율은 약 51.7% 였다. 이에 반해, 본원발명의 당뇨병이 있는 마우스는 나노키토산 분말이 포함된 사료를 섭취하면서 대조군 3보 다 탁월하게 혈중 인슐린 농도가 증가하여, 8주 동안의 혈중 인슐린의 농도는 약 92.9%였다. 이러한 결과로부터, 나노키토산 분말이 포함된 사료, 즉 본원발명의 당뇨성 질환의 예방 및 개선용 식이 조성물 은 우수한 당뇨병 예방 및 개선의 용도로서 사용될 수 있음을 알 수 있다. [0045] [0046] [0047] [0048] [0049] [0050] <비교예 6> : 췌장의 형태학적 변화 상기 비교예 1의 대조군 1 내지 대조군 3 및 본원발명의 마우스의 췌장의 형태학적 변화를 살펴보았다. 실험방 법은 다음과 같다. 먼저, 8주가 경과한 마우스의 췌장을 떼어내서 포르말린(10% neutral buffered formalin, NBF)에서 고정하였다. 그 후, 포르말린에 고정한 췌장을 물에 수세하고, 70% 알코올, 80% 알코올, 90% 알코올, 95% 알코 올, 무수 알코올의 순서로 차례대로 1시간씩 탈수하였다. 그 후, 자일렌(xylene)으로 치환한 paraplast(60 ) 로 4시간 동안 침투시킨 다음, 포매하였다. 포매된 췌장을 microtome(microme-hm325, USA)을 이용하여 3 ~ 4 μm의 두께로 절편한 후, 파라핀 제거 과정을 거쳐 헤마토시린(hematosylin)과 에오신(eosin)으로 염색하여 광 학현미경으로 관찰하였다. 대조군 1 내지 대조군 3, 본원발명의 마우스의 염색된 췌장의 광학현미경 사진은 도 7 내지 도 10에 각각 나타냈다. 도 7의 대조군 1의 정상 마우스의 췌장 소도세포의 형태는 큰 타원형이며 이들 조직의 형태가 잘 보존되어 있음 을 알 수 있었다. 반면, 도 8의 대조군 2의 당뇨병이 있는 마우스의 췌장 소도세포는 약간 수축되어 있고 부분 적으로 파괴되어 침윤 단핵세포가 관찰되었으며, 지방세포의 분포도 대조군 1에 비해 현저히 많았다. 그러나 도 9에서 볼 수 있듯이, 키토산 분말이 함유된 사료를 섭취한 대조군 3의 마우스의 췌장 소도세포는 대조군 2에 비 해 형태가 뚜렷하였고, 지방세포의 분포도 적었다. 반면, 도 10에서 볼 수 있듯이, 나노키토산이 함유된 사료를 섭취한 본원발명의 마우스의 췌장 소도세포는 대조 군 1의 정상마우스의 췌장 소도세포와 유사한 크기를 보였다. 또한, 본원발명의 마우스의 췌장 소도세포가 거의 파괴되지 않았기 때문에 침윤 단핵세포도 발견하기 어려웠으며, 지방세포의 분포도 대조군 2에 비해 현저히 적 었다. 즉, 나노키토산을 이용하면 당뇨병이 있는 마우스의 췌장 소도세포의 형태학적 변화를 완화시켜서, 췌장 의 β-세포의 파괴를 막을 수 있음을 알 수 있다. 또한, 췌장의 β-세포의 파괴를 방지함으로써, 과도한 인슐린 분비를 막을 수 있기 때문에 당뇨병을 예방 및 개선할 수 있게 된다. 삭제 [0051] 이상 본 발명의 구체적 실시형태와 관련하여 본 발명을 설명하였으나 이는 예시에 불과하며 본 발명은 이에 제 한되지 않는다. 당업자는 본 발명의 범위를 벗어나지 않고 설명된 실시형태를 변경 또는 변형할 수 있으며, 이 러한 변경 또는 변형도 본 발명의 범위에 속한다. 또한, 본 명세서에서 설명한 각 구성요소의 물질은 당업자가 - 7 -

[0041] [0042] [0043] [0044] <비교예 5> : 혈중 인슐린 농도의 변화 상기 비교예 1의 대조군 1 내지 대조군 3 및 본원발명의 마우스의 혈중 인슐린을 측정하였다.

8 공지된 다양한 물질로부터 용이하게 선택하여 대체할 수 있다. 또한 당업자는 본 명세서에서 설명된 구성요소 중 일부를 성능의 열화 없이 생략하거나 성능을 개선하기 위해 구성요소를 추가할 수 있다. 뿐만 아니라, 당업 자는 공정 환경이나 장비에 따라 본 명세서에서 설명한 방법 단계의 순서를 변경할 수도 있다. 따라서 본 발명 의 범위는 설명된 실시형태가 아니라 특허청구범위 및 그 균등물에 의해 결정되어야 한다. [0052] [0053] [0054] [0055] [0056] [0057] [0058] [0059] [0060] [0061] 도면의 간단한 설명 도 1은 제조예의 키토산 분말의 SEM 사진이다. 도 2는 제조예의 나노키토산 분말의 SEM 사진이다. 도 3은 비교예 2의 대조군 1 내지 대조군 3 및 본원발명의 마우스의 혈중 포도당 농도(Glucose level)를 나타낸 것이다. 도 4는 비교예 3의 대조군 1 내지 대조군 3 및 본원발명의 마우스의 혈중 총 콜레스테롤 농도(Total cholesterol level)를 나타낸 것이다. 도 5는 비교예 4의 대조군 1 내지 대조군 3 및 본원발명의 마우스의 혈중 중성지질 농도(Triglyceride level)를 나타낸 것이다. 도 6은 비교예 5의 대조군 1 내지 대조군 3 및 본원발명의 마우스의 혈중 인슐린 농도(Insulin level)를 나타낸 것이다. 도 7은 비교예 6의 대조군 1의 마우스의 췌장의 광학현미경 사진이다. 도 8은 비교예 6의 대조군 2의 마우스의 췌장의 광학현미경 사진이다. 도 9는 비교예 6의 대조군 3의 마우스의 췌장의 광학현미경 사진이다. 도 10은 비교예 6의 본원발명의 마우스의 췌장의 광학현미경 사진이다. 도면 도면1-8 -

도 3은 비교예 2의 대조군 1 내지 대조군 3 및 본원발명의 마우스의 혈중 포도당 농도(Glucose level)를 나타낸 것이다. 도 4는 비교예 3의 대조군 1 내지 대조군 3 및 본원발명의 마우스의 혈중 총 콜레스테롤 농도(Total cholesterol level)를 나타낸 것이다.

9 도면2 도면3-9 -

10 도면4 도면5-10 -

11 도면6 도면7-11 -

12 도면8 도면9 도면

특허청구의 범위 청구항 1 복수개의 프리캐스트 콘크리트 부재(1)를 서로 결합하여 연속화시키는 구조로서, 삽입공이 형성되어 있고 상기 삽입공 내면에는 나사부가 형성되어 있는 너트형 고정부재(10)가, 상기 프리캐스 트 콘크리트 부재(1) 내에 내장되도록 배치되는 내부

특허청구의 범위 청구항 1 복수개의 프리캐스트 콘크리트 부재(1)를 서로 결합하여 연속화시키는 구조로서, 삽입공이 형성되어 있고 상기 삽입공 내면에는 나사부가 형성되어 있는 너트형 고정부재(10)가, 상기 프리캐스 트 콘크리트 부재(1) 내에 내장되도록 배치되는 내부 (19) 대한민국특허청(KR) (12) 등록특허공보(B1) (51) 국제특허분류(Int. Cl.) E01D 19/12 (2006.01) E01D 2/00 (2006.01) E01D 21/00 (2006.01) (21) 출원번호 10-2011-0036938 (22) 출원일자 2011년04월20일 심사청구일자 2011년04월20일 (65) 공개번호 10-2012-0119156