자생생물조사 발굴연구 08. 4. 연구기관 : 원광대학교산학협력단 국립생물자원관
자생생물조사 발굴연구 08. 4. 연구기관 : 원광대학교산학협력단 국립생물자원관
제출문 국립생물자원관장귀하 본보고서를 자생생물조사 발굴연구 용역의 2 차년도 최종보고서로제출합니다. 08 년 4 월 원광대학교산학협력단장 [ 연구진 ] 자생생물조사 발굴연구사업단 사업단장 : 김병진 ( 원광대학교 ) 세부과제책임자 : 이종욱 ( 영남대학교 ) 김원 ( 서울대학교 ) 조기성 ( 한국외국어대학교 ) 이진환 ( 상명대학교 ) 선병윤 ( 전북대학교 ) 이충렬 ( 군산대학교 )
목 차 Ⅰ. 연구사업의배경및목적 1 1. 생물다양성의중요성 1 2. 국 내외생물다양성확보현황 2 3. 생물다양성조사의의의 4 4. 연구사업의목적 5 Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 6 1. 총괄 6 가. 최종목표 6 나. 총괄사업계획 7 (1) 개요 7 (2) 총괄사업계획 9 다. 연구사업구성및추진체제 10 라. 연구진구성체계 11 마. 사업관리 12 (1) 사업관리추진현황 12 (2) 수행조직및업무분장 13 (3) 참여연구원별업무분장표 14 2. 총괄사업 : 한반도자생생물자원발굴 관리 19 가. 당해연도연구목표 19 나. 당해연도연구개발계획 다. 연구범위 라. 연구내용및방법 마. 연구결과 26 3. 자생무척추동물 Ⅰ ( 곤충 ) 자원조사 발굴 32 가. 당해연도목표 32 나. 당해연도연구개발계획 32 다. 연구범위 32 라. 연구내용및방법 33 마. 연구결과 38 바. 개선및건의사항 49
4. 자생무척추동물Ⅱ ( 곤충제외, 원생생물포함 ) 자원조사 발굴 51 가. 당해연도연구목표 51 나. 당해연도연구개발계획 51 다. 연구범위 51 라. 연구내용및방법 52 마. 연구결과 64 바. 개선및건의사항 74 5. 자생하등생물자원조사 발굴 76 가. 당해연도연구목표 76 나. 당해연도연구개발계획 76 다. 연구범위 77 라. 연구내용및방법 77 마. 연구결과 85 바. 개선및건의사항 103 6. 자생하등식물 (Algae) 자원조사 발굴 105 가. 당해연도연구목표 105 나. 당해연도연구개발계획 105 다. 연구범위 105 라. 연구내용및방법 106 마. 연구결과 111 7. 자생고등식물자원조사 발굴 122 가. 당해연도목표 122 나. 당해연도연구개발계획 122 다. 연구범위 122 라. 연구내용및방법 123 마. 연구결과 124 8. 자생척추동물자원조사 발굴 131 가. 당해연도목표 131 나. 당해연도연구개발계획 131 다. 연구범위 132 라. 연구내용및방법 132 마. 연구결과 145
Ⅰ. 연구사업의배경및목적 Ⅰ. 연구사업의배경및목적 1. 생물다양성의중요성 생물다양성은유전적, 종적, 생태적다양성의총체로서지구생태계를구성하는필수요소 (Wilson, 1988) 생물다양성의구성요소는인류의건강유지에매우중요하며미국은조제되는약의 25% 가식물로부터추출된성분을포함하고있으며, 현재 3,000여종의항생제가미생물에서얻어짐 - 동양전통의약품의경우에도 5,100여종의동 식물을사용 즉, 생물다양성은작물품종개량, 전통의약및생명공학의원천재료 한반도고유생물을포함한생물다양성은 21세기가장중요한첨단산업인생물산업 (BT) 의원천소재이며인간환경의바탕으로서고유한국가적재산임 생물다양성으로부터인간이얻고있는최소한의경제적가치 - Piementel et al. (1997) - 2조9,280억달러 / 년으로추산 ( 표 1) 세계 GDP 26조달러의약 5% - Costanza et al. (1997) - 약 33조달러 / 년으로추산. < 표 1> 생물다양성의경제적가치 (Piementel et al., 1997) 구 분 미국 ( $10 9 ) 세계 ( $10 9 ) 폐기물처리 62 760 화학물질의생물학적처리 22.5 121 작물, 가축육종 40 155 생명공학 2.5 6 해충의생물학적방제 17 160 화분수정 40 0 야생생물식품 0.5 180 목재생산 8 84 생태관광 18 500 식물로부터추출된의약품 84 총계 319 2,928-1 -
Ⅰ. 연구사업의배경및목적 2. 국내 외의생물다양성확보현황 국내생물다양성 - 문헌상기록종수 : 동물 19,357종, 식물 9,728종 ( 균류및지의류포함 ) - 동물 : 곤충을제외한무척추동물 5,699종, 곤충류 12,156종, 척추동물 1,502종기록 - 식물 : 관속식물 3,954종, 선태식물 691종, 고등균류 1,6종, 지의류 600종, 수생하등식물 3,277종기록 ( 표 2, 3) - 한반도에분포하는것으로추정되는전체생물종수약 10만종으로현재기록된생물다양성은추정치의 25-30% 정도에불과 - 한반도고유생물은약 2,322 분류군 ( 식물 579 분류군, 동물 1,743 분류군 ) 으로현재기록되어있으나, 상당수의분류군에있어그실제분포여부, 분류학적실체등이아직확인불투명 생물다양성확보국내 외비교현황 국가 기관 종류 추정표본수 ( 만점 ) 한국 46개기관 동물 413 18개기관 식물 100 미국 스미소니언국립자연사박물관 동물 / 식물 / 광물 12,400 미주리식물표본관식물 5 영국런던자연사박물관동물 / 식물 / 광물 6,000 왕립큐식물원식물 700 한반도고유생물자원발굴및관리기반구축 ( 환경기술진흥원차세대핵심환경기술개발사업, 06) 식물유전자원국내 외비교현황 미국러시아일본 약 43 만 2 천종약 40 만종약 18 만종 한반도고유생물자원발굴및관리기반구축 ( 환경기술진흥원차세대핵심환경기술개발사업, 06) - 2 -
Ⅰ. 연구사업의배경및목적 < 표 2> 한반도자생동물기록종현황 문 (phylum) 전세계국내서식국내기록종기록종수예상종수기록종수비율 (%) 원생동물문 (Protozoa) 35,000 1,750 628 35.9 판형동물문 (Placozoa) 1-0 - 중생동물문 (Mesozoa) 100 5+ 0 0 해면동물문 (Porifera) 9,000 450 5 45.6 자포동물문 (Cnidaria) 9,000 450 245 54.4 유즐동물문 (Ctenophora) 100 0 0 편형동물문 (Platyhelminthes),000 1,000 124 12.4 유형동물문 (Nemertea) 900 45 1 2.2 악구동물문 (Gnatostomulida) 80 4+ 0 0 윤형동물문 (Rotifera) 1,800 (157+) 157 100? 복모동물문 (Gastrotricha) 450 23+ 0 0 동문동물문 (Kinorhyncha) 150 8+ 0 0 선형동물문 (Nematoda) 12,000 600 230 38.3 유선형동물문 (Nematomorpha) 230 12 5 41.7 새예동물문 (Priapula) 15-0 - 구두동물문 (Acanthocephala) 700 35 1 2.9 내항동물문 (Entoprocta) 150 8 1 12.5 Loricifera 9-0 - 환형동물문 (Annelida) 15,000 750 380 50.7 의충동물문 (Echiura) 135 7+ 2 28.6 성구동물문 (Sipuncula) 250 13+ 9 69.2 유수동물문 (Pogonophora) 135-0 - Vestimentifera 8-0 - 완보동물문 (Tardigrada) 400 (50+) 50 100? 유조동물문 (Onychophora) 80-0 - 절지동물문 (Arthropoda) 협각동물 (Chelicheriformes) 65,000 3,250 1,174 36.1 갑각류 (Crustacea) 32,000 1,600 972 60.8 다지류 (Myriapoda) 10,000 0 75 37.5 연체동물문 (Mollusca) 100,000 5,000 997 19.9 완족동물문 (Brachiopoda) 335 17 9 52.9 외항동물문 (Ectoprocta) 4,500 225 135 60.0 추형동물문 (Phoronida) 15-0 - 모악동물문 (Chaetognatha) 100 (39) 39 100? 극피동물문 (Echinodermata) 7,000 350 171 48.9 반색동물문 (Hemichordata) 85 5 0 0 척색동물문 (Chordata) 미색동물 (Urochordata) 3,000 150 89 59.3 두색동물 (Cephalochordata) 23 8 0 0 계 327,751 >16,231 5,699 35.1 * 곤충류 (Insecta) 850,000 >50,000 12,156 15-25 * 척추동물 (Vertebrata) 47,000 2,350 1,502 63.9 총계 1,224,751 >68,581 19,357 28.3 한반도고유생물자원발굴및관리기반구축 ( 환경기술진흥원차세대핵심환경기술개발사업, 06) - 3 -
Ⅰ. 연구사업의배경및목적 < 표 3> 한반도자생식물기록종현황 관속식물 종류과속 종류 ( 종및종이하분류군 ) 양치식물 21 64 250 나자식물 8 21 64 피자식물 쌍자엽식물 148 734 2,803 단자엽식물 30 229 837 소계 7 1,048 3,954 선태식물 - 77 226 691 고등균류 - 82 342 1,6 지의류 - - 600 수생 하등식물 (algae) 담수녹조류 33 123 1,004 해산녹조류 16-85 담수규조류 18 89 724 해산규조류 19 99 667 와편모조류 27 192 해산유글레나및기타편모조류 - - 36 갈조류 25-168 홍조류 14 147 401 소계 - - 3,277 총계 - - 9,728 한반도고유생물자원발굴및관리기반구축 ( 환경기술진흥원차세대핵심환경기술개발사업, 06) 3. 생물다양성조사의의의 국가생물자원의보전, 응용 개발연구및생물산업경쟁력확보 - 유용유전자도입을이용한바이오상품의연간세계시장규모는최소 5천억달러에서최대 8천억달러로추정 (Kate and Laird, 1999) - 생물다양성협약 (Convention on Biological Diversity; CBD) 은생물자원에대한주권적권리를인정하고있으며, 각국의생물 ( 유전 ) 자원의개발과상업적이용에서발생하는이득을생물 ( 유전 ) 자원제공국가와기술개발국가가공평하게분배하도록규정 - 4 -
Ⅰ. 연구사업의배경및목적 - 국내의고유및자생생물의실체파악미비로인한관리체계의허점때문에우리의고유생물자원이상당수상업적으로유출되어외국에서고부가가치의생물상품으로개발, 시장을선점되는사례의급증 ( 환경부, 01) 생물다양성협약등생물자원에대한국제환경변화에따른 생물자원의주권확보 및 동북아생물자원 R & D의중심국가 로도약하기위한기반구축이시급히요구됨 4. 연구사업의목적 신분류군및미기록생물종자원을집중발굴함으로써새로운유용생물자원 / 유전자원을대량확보 미확인기록종을발굴하여분포여부및실체를검증함과동시에확증표본을확보 절대적으로부족한고유생물을포함한주요생물자원의표본및기타생물재료 ( 생체, 종자, 조직, 균주, DNA) 를체계적으로수집 주요자생 / 유용생물군의유전자 / 조직재료은행을구축하고분류 유전특성평가를수행하여그응용 / 개발연구의기반을구축 궁극적으로는한반도고유생물과주요생물군의국가생물종목록을완성하고국가생물자원관리네트워크 (National Biological Resources Network) 를구축하여생물자원정보를체계화함으로써국가생물자원의보전 관리기반을확립 본연구사업과정을통해차세대생물분류인력양성및확보에기여함과동시에동북아생물자원연구의중심국가로서의위치선점이가능 - 5 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 1. 총괄 Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 1. 총괄 가. 최종목표 최종목표 ( 총괄 ) 한반도자생생물자원을중심으로국가생물자원에대한체계적인발굴조사 : 미기록및신분류군집중발굴 : 새로운국가생물자원및유전자원확보 주요생물자원 ( 표본, 생체, 조직, 균주, DNA, 기타생물재료 ) 의집중확보 확증표본자료시스템구축 : 자생및기록종실체파악및분류동정을위한확증표본자료구축 자생및주요생물군의유전자은행구축 : 한반도유용자생생물조직및유전자은행 DB 구축 국가생물자원관리네트워크 (National Biological Resources Network) 구축 자생및주요생물군종목록 DB 자생및주요생물자원표본 / 생물재료 DB 자생및주요생물자원분포 DB 자생및주요생물자원유전자 / 조직 DB 멸종위기야생동 식물 DB 자생및주요생물군국가생물종목록완성 국가생물자원정보의체계화 국가생물자원응용 / 개발연구기반구축 한반도자생및주요생물자원의포괄적보전 관리기반구축 차세대생물분류전문인력양성에기여 - 6 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 1. 총괄 본연구사업에서는한반도자생생물을중심으로국가생물자원에대한체계적인발굴조 사를수행하여 1) 신분류군및미기록생물종자원을집중발굴함으로써새로운유용생물자 원 / 유전자원을다수확보하고, 2) 자생및국가생물자원표본및기타생물재료 ( 생체, 종자, 조직, 균주, DNA 등 ) 를체계적으로확보하여분류동정을위한확증표본자료시스템을확립 한다. 3) 이와병행하여, 자생및주요생물군의조직및유전자은행을구축하여그응용 / 개발 연구의기반을구축하며, 4) 궁극적으로는자생및주요생물군의국가생물종목록을완성하 고, 5) 국가생물자원관리네트워크를구축하여생물자원정보를체계화함으로써한반도생 물자원의보전 관리기반을확립하는것을그최종목표로한다. 6) 그리고, 이러한연구사 업과정을통해차세대생물분류인력양성및확보에기여한다. 나. 총괄사업계획 (1) 개요 총괄연구사업계획 : 자생생물조사 발굴연구사업 전체과제추진 : 자생생물자원을중심으로미기록 / 신분류군의발굴과동정완료된 표본을포함한생물재료의체계적확보에중점을두어수행함 세부과제의내용및추진전략 : 화된연구추진전략을적용 주요생물군의발굴수준및연구현황에따라차별 과제구성 : 총괄과제및 6 개의세부과제로구성 총괄과제 : 한반도자생생물자원의발굴 관리 한반도유용자생생물조작및유전자은행구축 세부과제 : 자생무척추동물 I ( 곤충 ), 무척추동물 II ( 곤충제외, 원생생물포함 ), 하등 생물, 하등식물 (Algae), 고등식물, 척추동물자원조사 발굴 - 7 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 1. 총괄 ( 계속 ) 총괄과제 : 한반도자생생물자원의발굴 관리 추진전략 : 세부과제에서확보된표본및기타생물재료의통합관리 산출된생물자원정보의체계화 핵심연구내용 : 확보된표본및생물재료의포괄적관리 이용지원체계확립 자생생물자원종목록 / 분포 DB 구축 멸종위기야생동 식물 DB 구축 자생생물자원확증표본자료 DB 구축 총괄과제 : 한반도유용자생생물조작및유전자은행구축 추진전략 : 생물재료 ( 유전자, 조직 ) 은행구축을통한이용기반확립 핵심연구내용 : 유용자생생물조직및유전자정보축적 세부과제 추진전략 : 자생생물자원및미기록 / 신분류군의집중발굴과생물재료 ( 표본, 조직, DNA 등 ) 확보에중점을두어수행 미확인기록종탐색조사및분류동정을위한확증표본제작 주요자생생물종목록작성및연구기반구축 일차발굴대상 : - 종다양성이비교적높은분류군 - 다수의미기록 / 신종발굴이예상되는분류군 - 전문인력이존재하는분류군 핵심연구내용 : 한반도자생및주요무척추동물I ( 곤충 ), 무척추동물II ( 곤충제외, 원생생물포함 ), 하등생물, 하등식물 (Algae), 고등식물, 척추동물자원조사 발굴 한반도자생생물자원관리정보축적및 DB 자료입력 - 8 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 1. 총괄 (2) 총괄사업계획 한국가의생물자원발굴 확보 관리시스템은일반적으로다음과같은 3 단계를거쳐확 립된다. 제 1 단계는소규모지역생물상조사들을통해각지역분류군목록과표본이일차 확보되는초기단계이다. 제 2 단계는지역생물상조사결과를근거로생물자원의체계적인발 굴조사및 분포조사연구, 그리고주요분류군에대한분류학적, 유전학적특성평가및계 통연구를수행하여생물자원의표본및기타생물재료를광범위하게확보함과동시에그실체규명을위한특성정보를축적하는기반구축단계이다. 마지막제 3단계는축적된생물자원특성정보를체계화하여분류군검색기술을개발하고생물상의실체를밝히고그지속적이용을위한관리시스템을구축하는실용화단계이다. 우리나라의경우, 자생생물자원의중요성에대한그간의국가차원에서의인식부족, 지원부재, 그리고전문인력의부족등으로인해일부생물군을제외하고는종목록작성, 표본및기타생물재료확보, 실체규명을위한분류학적기반연구등이거의되어있지않은실정이며, 연구현황및발굴수준에있어서도주요생물군별로차이가존재한다. 따라서본연구사업의경우는전체적으로는자생및미기록 / 신분류군의새로운발굴과동 정완료된표본을포함한생물재료의체계적확보에중점을두어사업을추진하되, 세부적으 로는주요생물군의발굴수준및연구현황에따라차별화된연구추진전략을적용하는것이보다효율적일것으로판단된다. 또한본과제와같은대규모생물자원발굴사업에있어서는확보된생물자원재료 ( 표본및기타생물재료 ) 와산출된정보의효율적관리를통해그활용을극대화하는것이매우중 요하다. 이러한관점하에서본연구사업은다음과같이자생및주요무척추동물 I ( 곤충 ), 무 척추동물 II ( 곤충제외, 원생생물포함 ), 하등생물, 하등식물 (Algae), 고등식물, 척추동물을각각 집중발굴하는 6 개의세부과제와, 이들세부과제에서확보된표본및기타생물재료를통합관 리하고, 산출된생물자원정보를체계화하는총괄과제로구성된다. - 9 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 1. 총괄 다. 연구사업구성및추진체계 국립생물자원관 ( 총괄 ) 자문위원회 ( 외부및국립생물자원관전문가 ) 사업단장 ( 조사 발굴총괄 ) 운영위원회 ( 분류군별책임자 ) 무척추 (Ⅰ) 무척추 (Ⅱ) 하등생물 하등식물 고등식물 척추동물 곤충 무척추동물 ( 곤충제외 ) 원생생물 균류원핵생물 규조류편모조류홍조류 나자식물피자식물선태류 포유류조류양서 파충류어류 - 10 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 1. 총괄 라. 연구진구성체계 총괄 기관별참여연구원 원광대학교구분기관수인원수총인원수 사업단장김병진외 0 명대학 74 162 책임급 7 명선임급 84 명 원급 30 명 기술기능직 국공립기관 ( 대학제외 ) 14 32 80 명기타 4 7 1 총괄주관기관원광대학교총괄주관책임자김병진외 25 명책임급 1 명선임급 10 명 원급 3 명 기술기능직 12 명 무척추I 분야세부주관기관 하등식물분야세부주관기관 영남대학교 상명대학교 세부주관책임자이종욱외 32 명 세부주관책임자이진환외 28 명 책임급 1 명 선임급 15 명 책임급 1 명 선임급 13 명 원급 8 명 기술기능직 9 명원급 1 명 기술기능직 14 명 무척추II 분야세부주관기관 고등식물분야세부주관기관 서울대학교 전북대학교 세부주관책임자김 원외 30 명 세부주관책임자선병윤외 29 명 책임급 1 명 선임급 14 명 책임급 1 명 선임급 9 명 원급 5 명 기술기능직 11 명원급 3 명 기술기능직 17 명 하등생물분야세부주관기관 척추동물분야세부주관기관 한국외국어대학교 군산대학교 세부주관책임자조기성외 26 명 세부주관책임자이충렬외 24 명 책임급 1 명 선임급 12 명 책임급 1 명 선임급 11 명 원급 2 명 기술기능직 12 명원급 9 명 기술기능직 4 명 - 11 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 1. 총괄 마. 사업관리 (1) 사업관리추진계획 추진내용 추진일정 M+1 M+2 M+3 M+4 M+5 M+6 M+7 M+8 M+9 M+10 M+11 운영위원회구성 자문위원회구성 진도관리워크숍개최 착수보고회 점검회의 중간보고회 워크숍 최종보고회 성과물납품 CD 제작, 배포 - 12 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 1. 총괄 (2) 수행조직및업무분장 - 13 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 1. 총괄 (3) 참여연구원별업무분장표 성명 역할 추진일정 (M+) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 참여율 (%) 전체연구과제총괄 김병진 연구인프라구축및운영 한반도자생생물자원관리체계구축및운영 국가생물자원관리네트워크구축 30 강재신 김상태 길현종 배창환 유용생물자원조직및유전자은행인프라구축및운영유용생물자원조직및유전자은행구축 ( 하등식물 ) 유용생물자원조직및유전자은행구축 ( 고등식물 ) 유용생물자원조직및유전자은행구축 ( 무척추 ) 유용생물자원조직및유전자은행구축 ( 무척추 ) 서홍렬유용생물자원조직및유전자은행구축 ( 곤충 ) 여진동유용생물자원조직및유전자은행구축 ( 곤충 ) 이병윤 유용생물자원조직및유전자은행구축 ( 고등식물 ) 천태영유용생물자원조직및유전자은행구축 ( 척추 ) 최승호유용생물자원조직및유전자은행구축 ( 척추 ) 김익수유용생물자원조직및유전자은행구축 이종욱이종은전동준김중락안기정문태영 무척추Ⅰ( 곤충 ) 조사 발굴팀책임벌목발굴조사및분류동정 무척추Ⅰ( 곤충 ) 조사 발굴팀딱정벌레목발굴조사및분류동정 무척추Ⅰ( 곤충 ) 조사 발굴팀수서곤충류발굴조사및분류동정 무척추Ⅰ( 곤충 ) 조사 발굴팀딱정벌레목발굴조사및분류동정 무척추Ⅰ( 곤충 ) 조사 발굴팀딱정벌레목발굴조사및분류동정무척추Ⅰ( 곤충 ) 조사 발굴팀메뚜기목및미소곤충류발굴조사및분류동정 30-14 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 1. 총괄 < 계속 > 성명박해철배양섭정선우이관석배연재서경인이승환원홍식한호연최현정 김원김사흥노현수김주필박중기민기식백상규송성준박갑만이원철 역할 무척추Ⅰ( 곤충 ) 조사 발굴팀딱정벌레목발굴조사및분류동정 무척추Ⅰ( 곤충 ) 조사 발굴팀나비목발굴조사및분류동정 무척추Ⅰ( 곤충 ) 조사 발굴팀노린재목발굴조사및분류동정 무척추Ⅰ( 곤충 ) 조사 발굴팀총채버레목발굴조사및분류동정 무척추Ⅰ( 곤충 ) 조사 발굴팀수서곤충류발굴조사및분류동정 무척추Ⅰ( 곤충 ) 조사 발굴팀벌목발굴조사및분류동정 무척추Ⅰ( 곤충 ) 조사 발굴팀노랜재목발굴조사및분류동정 무척추Ⅰ( 곤충 ) 조사 발굴팀나비목발굴조사및분류동정 무척추Ⅰ( 곤충 ) 조사 발굴팀파리목발굴조사및분류동정 무척추Ⅰ( 곤충 ) 조사 발굴팀노랜재목발굴조사및분류동정 무척추II ( 원생생물포함 ) 조사 발굴팀책임절지동물 ( 생이류등십각류 ) 및편형동물 ( 다절류 ), 유즐동물발굴조사및분류동정무척추II ( 원생생물포함 ) 조사 발굴팀절지동물 ( 펠티드포함요각류 ) 및모악동물발굴조사및분류동정무척추II ( 원생생물포함 ) 조사 발굴팀선형동물발굴조사및분류동정 무척추II ( 원생생물포함 ) 조사 발굴팀거미류발굴조사및분류동정 무척추II ( 원생생물포함 ) 조사 발굴팀연체동물 ( 부족류 ) 발굴조사및분류동정 무척추II ( 원생생물포함 ) 조사 발굴팀섬모충류발굴조사및분류동정 무척추II ( 원생생물포함 ) 조사 발굴팀환형동물 ( 다모류 ) 발굴조사및분류동정무척추II ( 원생생물포함 ) 조사 발굴팀절지동물 ( 펠티드포함요각류 ) 발굴조사및분류동정무척추II ( 원생생물포함 ) 조사 발굴팀연체동물 ( 부족류 ) 발굴조사및분류동정무척추II ( 원생생물포함 ) 조사 발굴팀절지동물 ( 펠티드포함요각류 ) 발굴조사및분류동정 추진일정 (M+) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 참여율 (%) 30-15 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 1. 총괄 < 계속 > 성명신만균이원구정종우이경진이경숙조기성이향범김성환유승헌신광수김양섭이현환천종식김승범석순자조장천김규중장광엽이진환이정호최중기 역할 무척추II ( 원생생물포함 ) 조사 발굴팀섬모충류발굴조사및분류동정 무척추II ( 원생생물포함 ) 조사 발굴팀절지동물 ( 응애류 ) 발굴조사및분류동정 무척추II ( 원생생물포함 ) 조사 발굴팀절지동물 ( 단각류 ) 발굴조사및분류동정 무척추II ( 원생생물포함 ) 조사 발굴팀해면동물 ( 보통해면류 ) 발굴조사및분류동정 무척추II ( 원생생물포함 ) 조사 발굴팀절지동물 ( 올챙이새우류 ) 발굴조사및분류동정 하등생물조사 발굴팀책임원핵생물발굴조사및분류동정 하등생물조사 발굴팀진균류발굴조사및분류동정 하등생물조사 발굴팀진균류발굴조사및분류동정 하등생물조사 발굴팀진균류발굴조사및분류동정 하등생물조사 발굴팀진균류발굴조사및분류동정 하등생물조사 발굴팀원핵생물발굴조사및분류동정 하등생물조사 발굴팀원핵생물발굴조사및분류동정 하등생물조사 발굴팀원핵생물발굴조사및분류동정 하등생물조사 발굴팀원핵생물발굴조사및분류동정 하등생물조사 발굴팀원핵생물발굴조사및분류동정 하등생물조사 발굴팀원핵생물발굴조사및분류동정 하등생물조사 발굴팀원핵생물발굴조사및분류동정 하등생물조사 발굴팀원핵생물발굴조사및분류동정 하등식물조사 발굴팀책임규조류 ( 해양 ) 발굴조사및분류동정 하등식물조사 발굴팀규조류 ( 담수 ) 발굴조사및분류동정 하등식물조사 발굴팀규조류 ( 해양 ) 발굴조사및분류동정 추진일정 (M+) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 참여율 (%) 30 30-16 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 1. 총괄 < 계속 > 성명 조경제 박종규 김창훈 이준백 김한순 한명수 신웅기 김명숙 남기완 박종근 이경 선병윤 김철환 김호준 정규영 백원기 태경환 김휘 정영철 역할 하등식물조사 발굴팀규조류 ( 담수 ) 발굴조사및분류동정 하등식물조사 발굴팀규조류 ( 해양 ) 발굴조사및분류동정 하등식물조사 발굴팀편모조류 ( 해양 ) 발굴조사및분류동정 하등식물조사 발굴팀편모조류 ( 해양 ) 발굴조사및분류동정 하등식물조사 발굴팀편모조류 ( 담수 ) 발굴조사및분류동정 하등식물조사 발굴팀편모조류 ( 담수 ) 발굴조사및분류동정 하등식물조사 발굴팀편모조류 ( 담수 ) 발굴조사및분류동정 하등식물조사 발굴팀홍조류발굴조사및분류동정 하등식물조사 발굴팀홍조류발굴조사및분류동정 하등식물조사 발굴팀홍조류발굴조사및분류동정 하등식물조사 발굴팀홍조류발굴조사및분류동정 고등식물조사 발굴팀책임양치, 나자식물발굴조사및분류동정 고등식물조사 발굴팀양치식물발굴조사및분류동정 고등식물조사 발굴팀쌍자엽식물발굴조사및분류동정 고등식물조사 발굴팀쌍자엽식물발굴조사및분류동정 고등식물조사 발굴팀쌍자엽식물발굴조사및분류동정 고등식물조사 발굴팀쌍자엽식물발굴조사및분류동정 고등식물조사 발굴팀쌍자엽식물발굴조사및분류동정 고등식물조사 발굴팀쌍자엽식물발굴조사및분류동정 추진일정 (M+) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 참여율 (%) 30-17 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 1. 총괄 < 계속 > 성명이창숙이상태이충렬한성용이수일이우신유정칠이두표송재영박종영유정화한경호정충훈최윤 역할 고등식물조사 발굴팀쌍자엽식물발굴조사및분류동정 고등식물조사 발굴팀쌍자엽식물발굴조사및분류동정 척추동물조사 발굴팀책임어류발굴조사및분류동정 척추동물조사 발굴팀포유류발굴조사및분류동정 척추동물조사 발굴팀포유류발굴조사및분류동정 척추동물조사 발굴팀조류발굴조사및분류동정 척추동물조사 발굴팀조류발굴조사및분류동정 척추동물조사 발굴팀조류발굴조사및분류동정 척추동물조사 발굴팀양서 파충류발굴조사및분류동정 척추동물조사 발굴팀어류발굴조사및분류동정 척추동물조사 발굴팀어류발굴조사및분류동정 척추동물조사 발굴팀어류발굴조사및분류동정 척추동물조사 발굴팀어류발굴조사및분류동정 척추동물조사 발굴팀어류발굴조사및분류동정 추진일정 (M+) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 참여율 (%) 30-18 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 2. 총괄사업 2. 총괄사업 : 한반도자생생물자원발굴 관리 가. 당해연도연구목표 구분미기록 / 신분류군및신종발굴 ( 종 ) 표본확보 ( 점 ) 생물재료확보 ( 생체및조직 ) ( 점 ) G-DNA 확보 ( 종 / 점 ) 목표 800 80,000 2,400 300/600 분야별목표 분야 당해연도 무척추Ⅰ( 곤충 ) 0 무척추Ⅱ 160 하등생물 240 하등식물 160 고등식물 척추동물 소 계 800 무척추Ⅰ( 곤충 ) 16,000 무척추Ⅱ 16,000 하등생물 16,000 하등식물 16,000 고등식물 13,500 척추동물 2,500 소 계 80,000 유용자생생물자원조직및유전자은행 ( 총괄 ) 1,900 하등생물 500 소 계 2,400 유용자생생물자원조직및유전자은행 ( 총괄 ) 2/440 하등생물 80/160 소 계 300/600-19 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 2. 총괄사업 나. 당해연도연구개발계획 연구범위 생물재료의통합관리체계구축 국가생물자원관리네트워크구축확증표본자료시스템구축 한반도자생유용생물자원조직 / 유전자은행 DB 구축 세부목표및내용 표본및생물재료의포괄적관리 이용지원체계구축 표본및기타생물재료제작 / 관리 protocol 작성 표본및생물재료 DB 구축 표본관리 DB 자료입력 자생 / 주요생물자원확증표본자료확보 주요유용자생생물자원및연관분류군채집및생체조직재료확보 조직 / 유전자은행 DB 자료입력 추진일정 (M+) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 다. 연구범위 본과제에서확보된표본및기타생물재료 라. 연구내용및방법 (1) 생물재료의통합관리체계구축 본연구사업의각세부과제에서발굴사업이성공적으로수행될경우, 다양한생물군으로부 터매년약 100,000 여점의표본과기타생물재료가대량확보될것으로예측된다. 이와같은많 은양의다양한표본및생물재료를체계화하여그접근성및활용성을극대화하기위해서는이 들표본및생물재료를효율적으로통합관리하는체계가필요하다. 따라서본연구사업에서는 확보된표본및생물재료를포괄적으로관리할수있는표본및생물재료 DB 를구축하여이들이 - -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 2. 총괄사업 사장되지않고효율적으로활용될수있게하는관리지원체계를구축하고자한다. 이러한체 계를통해관리되는표본및생물재료들은 국립생물자원관 에모두이관할예정이다. 본연구에서확보된공간및전문인력을활용 본과제에서확보된표본및생물재료의포괄적관리 이용지원체계유지 기확보된확보표본및생물재료를소장, 관리 다양한표본및기타생물재료의제작, 처리및관리방법을보완발전 당해연도확보된표본및생물재료 DB 자료입력 (2) 자생및주요생물자원확증표본자료시스템구축 한편, 우리나라의경우현재약 3 만여종의자생생물이분포하고있는것으로문헌상보고 또는기록되어있으나, 표본소실 / 부재등으로인하여그분류학적실체또는존재여부가확 인되지않는분류군이상당수존재한다. 따라서본연구사업에서는이와같은미확인기록종 에대한문헌및확증표본자료를확보정리하여한반도분포종의실체를규명하는기반을구 축하고자한다. 이와같은확증표본은종의실체및존재를판단하고증명하는중요한학문적 증거가된다. 상기자료를근거로각분류군의정확한실체파악및동정을위한확증표본제작 분류특성자료를확립 확보된자료의 DB 시스템구축 (3) 국가생물자원관리네트워크구축본과제에서는총괄및각세부과제에서산출되는생물자원정보를체계화하여, 1) 자생및주요생물자원표본및생물재료 DB, 2) 자생및주요생물군국가생물종목록및분포 DB, 3) 멸종위기야생동 식물 DB, 4) 유전자 / 조직표본은행 DB 등을구축하고, 이들자료를유기적으로연계하여포괄적으로운영할수있는국가생물자원관리네트워크 (National Biological Resources Network) 를통하여, 국가생물권관리보전체계와국가생물산업육성 / 발전을위한기반을마련하고자한다. 확보된생물자원정보를체계화 - 21 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 2. 총괄사업 자생및주요생물군종목록 DB 구축 자생및주요생물자원표본 / 기타생물재료 DB 구축 멸종위기야생동 식물 DB 구축 (4) 한반도자생유용생물자원조직 / 유전자은행 DB 구축자원으로서의활용성이높은자생생물들의생체조직재료를체계적으로확보하여연관분야의연구및개발에이용할수있는조직은행을구축한다. 또한이조직들을이용하여특정분류군의유전적다양성및특성평가를수행한다. 한반도자생생물중고부가가치를지닌유용생물을우선적으로발굴하여그다양성에근거하여집단별로조직재료를확보한다. 본조직은행에서는이용방법에따라연차별로중점대상군을선정하고유용성정도를고려하여조직재료를확보할계획이다. 유전적다양성을가진집단을선정하여개체 ( 재료 ) 를채집함. 채집된개체 ( 재료 ) 는생체상태로드라이아이스에냉동시켜운반하거나, 살아있는상태로운반하여실험실에서동결건조시킴. 일부재료의경우 ( 수서곤충류 ) 생체를에탄올에고정하여실험실로운반한후, 동결건조시킴. 동결건조된조직은 -70 냉동고에보관관리함. 각집단별로증거표본을병행채집하여유전재료의채집및분류정보등에관한자료를확보함. 이들자료를근거로조직은행 DB를구축함. 유용성이높은특정분류군을대상으로 G-DNA를추출, 정제및정량화함. 특정분류군의유전적특성을평가함. < 무척추동물Ⅰ( 곤충 )> 채집즉시 90-100% Ethanol에채집물을보관한후저온고 (- ~-70 ) 에냉동보관 국내주요표본관에소장되어있는한반도자생동물의기준표본및확증표본들, 문헌자료또는전문가의뢰를통하여채집물의분류군과종명을파악 연구원은개체의크기에따라표본전체혹은일부분을사용하여 Qiagen사의 DNA extraction (purification) kit으로 Genomic DNA를추출 ( 변형가능 ) - 22 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 2. 총괄사업 Genomic DNA 추출시사용된표본의일부혹은외골격을검증을위하여보관하여야하며, 사용된표본의파손시는전문적으로동정되어진실험에사용된표본과동종의표본을대조표본으로보관 추출된 Genomic DNA는 DNA보관용장비에서저온 (-70 ) 보관후총괄연구기관에이송. Genomic DNA의결과를종합하여분류군별종목록및분포자료를작성 < 무척추동물Ⅱ> 각분류군으로부터 G-DNA를추출하기위해채집된모든개체는 95% 이상의에탄올에고정보관하거나생체로얼려보관. 선별된개체에서는 QIAGEN DNeasy tissue kit를이용하여 G-DNA를추출. Genomic DNA 추출시사용된표본의일부혹은외골격을검증을위하여보관하여야하며, 사용된표본의파손시는전문적으로동정되어진실험에사용된표본과동종의표본을대조표본으로보관 추출된 Genomic DNA는 DNA보관용장비에서저온 (-70 ) 보관후총괄연구기관에이송. Genomic DNA의결과를종합하여분류군별종목록및분포자료를작성 < 하등식물 > G-DNA 분석을위하여현장에서채집된해조류는아이스박스에넣어실험실로운반 멸균해수를이용하여시료를깨끗하게세척한뒤에 42 에서 24시간건조시키고, 지퍼백에넣은후실리카겔과함께실온에서보관 G-DNA 추출은 2 CTAB buffer을이용하고, 추출된 DNA의상태는 EtBr이첨가된 0.8% agarose gel 상에서확인 추출된 Genomic DNA는 DNA보관용장비에서저온 (-70 ) 보관후총괄연구기관에이송. Genomic DNA의결과를종합하여분류군별종목록및분포자료를작성 < 고등식물 > 보전의가치가높거나또는멸종위기종등보전의필요성이시급한종그리고자원적 - 23 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 2. 총괄사업 가치가크거나학술적으로중요한종의 G-DNA 및생체 ( 종자또는조직 ). Silica gel을이용한급속건조된잎 5g 이상에서 G-DNA 추출 추출된 Genomic DNA는 DNA보관용장비에서저온 (-70 ) 보관후총괄연구기관에이송. Genomic DNA의결과를종합하여분류군별종목록및분포자료를작성 < 척추동물 > 1 시료의선택과보관 각지역에서채집된자생동물들은 -40 의냉동상태로실험실까지운반되어온것중에서감염흔적이없고채집과정에서발생한시료의물리적손상이없는개체를한개체씩선택하여유전체 DNA 추출에사용. 시료채취는포유류와양서류에서는뒷다리근육조직 (femoral muscle tissue) 을, 조류는가슴근육조직 (pectoralis muscle tissue), 파충류는등쪽 (dorsal) 중간의척추 (column) 를포함하는근육조직을선택. 해양어류는꼬리지느러미로부터등쪽 (dorsal) 0.5 cm지점의조직을선택. 연한조직을가진물메기 (Liparis tessellatus) 등의어류들은냉동과해동과정에서 DNA가파괴될가능성이높기떄문에아가미 (gill) 조직을채취해유전체 DNA 추출 (Rodríguez et al., 1999). 2 유전체 DNA 추출방법 영하 40 에보관하고있던자생동물의조직시료약 1g을적출하여막자사발에넣고액체질소를부어급속냉동시킨다음완전한파우더가될때까지분쇄. 완전히분쇄된시료를미세원심분리튜브 (microcentrifuge tube) 에 0~300 mg씩옮겨넣음. 포유류, 조류그리고파충류시료에는 lysis buffer (10 mm Tris-HCl ph 8.0, 5 mm EDTA, 300 mm CH 3CO 2Na, 0.5 % SDS, 100 mm DTT) 를 300 μl넣고 5 μl의 protenase K ( mg/ ml ) 를첨가하여 55 항온수조에 8시간동안놓아둠 (Carter et al., 00). 해양어류와양서류의경우분쇄된조직시료에 DNA분리억제물질들과조직에포함된다량의수분을제거하기위해 10 mm Tris-HCl ph 8.0, 25 mm EDTA, 100 mm - 24 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 2. 총괄사업 NaCl, 0.5% SDS용액을넣고약 3분간혼합한후 6,000 g에서 2 분간원심분리하여상층액을완전히제거하는과정을 2회반복. 여기에 lysis buffer (10 mm Tris-HCl ph 8.0, 5 mm EDTA, 300 mm CH 3 CO 2 Na, 0.5% SDS, 100 mm DTT) 를 300 μl씩넣고 10 μl의 protenase K ( mg/ ml ) 를넣고잘섞어준다음 55 항온수조에놓아두어조직이완전히분해되어투명한색으로변할때까지약 6시간놓아둠. 반응이끝난후 phenol/chloroform (50 : 50) 을첨가하고 1분간천천히흔들어준다음 13,000 g에서 5분간원심분리한후상층액을새원심분리튜브 (microcentrifuge tube) 에옮겨담음. 이과정을 2회반복한후 chloroform / isoamylachol (24 : 1) 을넣고 15초간천천히 섞어주고 14,000 g 에서 10 분간원심분리한다음상층액을새원심분리튜브 (microcentrifuge tube) 에상층액을옮김. 여기에같은양의 isopropanol 을넣고위아래로혼합한후 - 냉동고에 10 분간놓 아두어 DNA의응집을촉진함 (Konomi et al., 02). 14,000 g에서 10분간원심분리한후 pellet을제외한상층액을제거하고 70% ethanol로 1회세척한다음 pellet을실온에서 30분간건조. 건조된 pellet에 TE buffer (10 mm Tris-HCl ph 8.0, 1 mm EDTA) 100 μl를넣고 65 항온수조에서 30시간반응시켜 DNA pellet을녹임. 여기에 1 μl의 RNase (10 mg / ml ) 를첨가하여 37 에서 3시간반응시켜 RNA를분해. 3 DNA 의전기영동 유전체 DNA 추출이끝난후 DNA 를 EtBr 이포함된 0.6% agarose gel (SeaKem LE agarose, USA) 에 2 μl의 DNA와 2 μl의 6 loading buffer (0.25% bromophenol blue, 0.25% xylene cyanol FF, 30% glycerol) 그리고 8 μl TE (ph 7.6) 를혼합하여각각의 well에 loading하고 100V에서 30분간전기영동함. 전기영동이끝난후겔을 gel photodocumentation system (Vilber Lourmat, France) 으로추출된자생동물의유전체 DNA의량과질을확인하고사진을찍어기록. - 25 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 2. 총괄사업 마. 연구결과 (1) 총괄표 구분미기록 / 신분류군및신종발굴 ( 종 ) 표본확보 ( 점 ) 생물재료확보 ( 생체및조직 ) ( 점 ) G-DNA 확보 ( 종 / 점 ) 목표 800 80,000 2,400 300/600 분야별목표달성률결과분야당해연도 (%) 무척추Ⅰ( 곤충 ) 0 7 103.5 무척추Ⅱ 160 161 100.6 하등생물 240 293 122.1 하등식물 160 159 99.4 고등식물 4.0 척추동물 100.0 소 계 800 844 105.5 무척추Ⅰ( 곤충 ) 16,000 16,718 104.5 무척추Ⅱ 16,000 17,237 107.7 하등생물 16,000 16,587 103.7 하등식물 16,000 16,831 105.2 고등식물 13,500 14,794 109.6 척추동물 2,500 2,813 112.5 소 계 80,000 84,980 106.2 유용자생생물자원조직및유전자 DB ( 총괄 ) 1,900 2,721 143.2 하등생물 500 1,183 236.6 소 계 2,400 3,904 162.7 유용자생생물자원조직및유전자 DB ( 총괄 ) 2/440 387/587 175.9/133.4 하등생물 80/160 130/163 162.5/101.9 소 계 300/600 517/750 172.3/125-26 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 2. 총괄사업 (2) 총괄사업연구결과 사업내용목표결과달성률 (%) 생물재료 ( 생체및조직 ) 확보 1,900 점 2,721 점 143.2 G-DNA 확보 2 종 /440 점 387 종 /587 점 175.9/133.4 ( 가 ) 생물재료 ( 생체및조직 ) 확보 당해연도연구목표생물재료 ( 생체및조직 ) 확보 : 총 1,900점 - 대상분류군 ; 본과제에서확보된표본및기타생물재료 - 생물재료 ( 생체및조직 ) 의체계적인확보 : 1,900점 연구사업결과총 2,721점확보 ( 목표의 143.2%) - 무척추동물Ⅰ( 곤충 ) 총 786점 ; 딱정벌레목 264점, ; 벌목 : 58점 ; 메뚜기목 : 49점 ; 파리목 : 7점 ; 노린재목 : 5점 ; 매미목 : 402점 ; 집게벌레목 : 1점 - 무척추동물Ⅱ 총 785점 ; 선형동물문 291점 ; 절지동물문 36점 ; 연체동물문 452점 ; 환형동물문 3점 ; 극피동물문 3점 - 27 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 2. 총괄사업 ( 계속 ) 당해연도연구목표 - 생물재료 ( 생체및조직 ) 의체계적인확보 : 1,900 점 연구사업결과 - 하등식물총 304점 ; 고등균류 : 25점 ; 해조류 : 76점 ; 담수녹조류 : 114점 ; 해산규조류 : 89점 - 고등식물총 719점 ; 양치식물 : 72점 ; 나자식물 : 9점 ; 단자엽식물 : 42점 ; 쌍자엽식물 : 596점 - 척추동물총 127점 ; 잉어목 : 18점 ; 메기목 : 1점 ; 숭어목 : 12점 ; 농어목 : 64점 ; 달고기목 : 2점 ; 아귀목 : 3점 ; 청어목 : 1점 ; 쏨뱅이목 : 13점 ; 가자미목 : 5점 ; 복어목 : 8점 < 표 1> 생물재료 ( 생체및조직 ) 확보현황목록작성양식 순 표본번호 채집번호 채집날짜 목명과명학명국명부위 증거자료 연구자 계목과종점점 - 28 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 2. 총괄사업 < 그림 2-1> 생물재료 ( 생체및조직 ) 증거자료 작성예 1. Myrmica cadusa Kim & Park ( 항아리뿔개미 ) 02.Ⅷ.09 계룡산 ( 충남공주 ) (050809-007) ( 나 ) G-DNA 확보 당해연도연구목표 G-DNA 확보 : 총 2종 /440점 - 대상분류군 ; 본과제에서확보된표본및기타생물재료 총 387 종 /587 점확보 연구사업결과 ( 목표의 175.9%/133.4%) - G-DNA : 총 2종 /440점확보 - 무척추동물Ⅰ( 곤충 ) 122종 /228점 ; 딱정벌레목 : 32종 /60점 ; 벌목 : 10종 /18점 ; 메뚜기목 : 16종 /32점 ; 노린재목 : 7종 /9점 ; 매미목 : 43종 /84점 ; 풀잠자리목 : 4종 /8점 - 29 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 2. 총괄사업 ( 계속 ) 당해연도연구목표 연구사업결과 - G-DNA : 총 2종 /440점확보 ; 나비목 : 2종 /2점 ; 날도래목 : 2종 /4점 ; 하루살이목 : 2종 /3점 ; 사마귀목 : 1종 /2점 ; 파리목 : 1종 /2점 ; 집게벌레목 : 2종 /4점 - 무척추동물Ⅱ 총 80종 160점 ; 선형동물문 : 11종 /22점 ; 절지동물문 : 18종 /36점 ; 연체동물문 : 49종 /98점 ; 환형동물문 : 1종 /2점 ; 극피동물문 : 1종 /2점 - 하등식물총 종 점 ; 담수산녹조류 : 10 종 /10 점 ; 해산규조류 : 10 종 /10 점 - 고등식물총 152종 155점 ; 양치식물 : 18종 /18점 ; 나자식물 : 2종 /2점 ; 단자엽식물 : 16종 /16점 ; 쌍자엽식물 : 116종 /119점 - 척추동물총 13종 24점 ; 농어목 : 5종 /9점 ; 잉어목 : 6종 /11점 ; 숭어목 : 1종 /2점 ; 메기목 : 1종 /2점 - 30 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 2. 총괄사업 < 표 2> G-DNA 확보현황목록작성양식 순목명과명학명국명확보점수연구자 계목과종점 < 그림 2-2> G-DNA 현황카드 작성예 - 31 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) 3. 자생무척추동물 Ⅰ ( 곤충 ) 자원조사 발굴 가. 당해연도목표 사업내용목표 미기록 / 신종 ( 후보 ) 발굴 표본확보 0 종 16,000 점 나. 당해연도연구개발계획 대상분류군 톡토기목, 흰개미붙이목, 귀뚜라미붙이목, 흰개미목, 뱀잠자리목, 약대벌레목, 밑들이목, 집게벌레목, 메뚜기목, 노린재목, 매미목, 딱정벌레목, 나비목, 파리목, 벌목, 하루살이목, 대벌레목, 강도래목등 세부목표및내용 기초문헌자료조사 자생종목록확인 분포현황확인 멸종위기자생곤충자원현황확인 야외조사를통한표본확보 표본제작 ( 액침또는건조 ) 분류군의동정및기재 분류군별종목록및분포자료작성 추진일정 (M+) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 다. 연구범위 톡토기목, 흰개미붙이목, 귀뚜라미붙이목, 흰개미목, 뱀잠자리목, 약대벌레목, 밑들이목, 집게벌레목, 메뚜기목, 노린재목, 매미목, 딱정벌레목, 나비목, 파리목, 벌목, 하루살이 목, 대벌레목, 강도래목등 - 32 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) 라. 연구내용및방법 연구기간중지형도 (1/25,000) 및가능한많은기존자료를활용하여미기록종및특정곤충류의서식가능성이높고종다양성이풍부할것으로예상되는지역과출현및번성시기를판단하여탐색조사를수행 선정지역을대상으로채집조사분류군들에대한개체수, 우점종, 희귀종, 미기록종등의상세한탐색조사를수행 미기록종및특정곤충류의발견시가능한경우개체수, 서식지환경, 출현시기및식이물등의서식현황을상세히기술 국내주요표본관에소장되어있는한반도자생동물의기준표본및확증표본들은연구기간중의방문연구또는표본대여를통해관찰하여그분류학적실체를파악 각분류군의기준표본및확증표본관찰결과와원기재문및관련문헌을근거로학명을정리 < 미기록 / 신종발굴 > 상기연구결과를종합하여분류군별종목록, 미기록종 / 신종목록및분포자료를작성 ( 미기록종의경우 속명 sp. 가가능하며, 신종의경우 속명 n. sp. 가가능 ) 곤충류의경우, 과거일부단행본과비전문학술지에서분포기록에대한정확한근거없이한국에기록된것으로표기한종이다양한곤충분류군에걸쳐많이나타남으로미기록에대한정확한근거를제시할필요가있음. 그러므로미기록의근거는국내외전문학술지에서발표된문헌중한국혹은한국의세부지명이명기되었거나충분한분포증거가있는종의경우, 단행본의경우분포기록과종의정확한문헌정보를포함하는 Checklist이상의자료를포함하는종의경우로제한을둠. 또한다음사항에해당하는것을미기록신종으로정의함. 1) 환경부에서운영관리하는 DB에는없는것. 2) 현재가장많이활용하고있는생물자원의목록집에없을것. ex) 한국동물명집 (1997), 한국곤충명집 (1994), 한국생물종현황 (1996) 등. 3) 국가및타공공기관에서운영관리하고있는 DB에는없을것. 4) 타연구사업에미기록 / 신종보고가되지않았을것. - 33 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) < 표본확보 > 상기연구결과중국내에분포하는것으로이미밝혀져동정된 ( 확증된 ) 곤충은액침또는건조표본으로제작하여보관 상기연구결과를종합하여분류군별종목록및분포자료를작성 확증된곤충표본은위의목표량에기재된점수를 ( 종당최소 1 set 이상 ) 환경부 국립생물자원관 에소장. < 생물재료확보 > 상기연구결과중국내에분포하는것으로이미밝혀져동정된 ( 확증된 ) 곤충중상태가양호하고생물재료로서의가치가있는표본을선정하여액침표본으로보관 상기연구결과를종합하여분류군별종목록및분포자료를작성 확증된생물재료용곤충표본은위의목표량에기재된점수를환경부 국립생물자원관 에소장. < 채집방법 > 나비, 나방, 벌, 매미, 파리등비행성곤충은기본적으로포충망 (netting) 을이용하여털어잡기 (beating), 쓸어잡기 (sweeping) 방법을이용하여채집하며 Malaise trap을이용하기도함 야행성곤충류 ( 나방, 딱정벌레류등 ) 는 light trap, fit fall trap법을이용하여채집 채집된곤충은현장에서즉시질식제 ( 에탄올, 클로로포름, 에틸아세테이트, KCN 등 ) 가들어있는독병에넣어질식시켜개체별로구분하여보관 채집물중커다란것은독병으로잡고, 미소곤충들은흡충관을이용하여채집 일반적인채집법으로채집할수없는곤충들은특정색체, 형태, 번쩍거리는빛, 움직이는모양등에자극을받아몰려드는습성을이용한황색수반채집법을이용 다양한방법에의해채집된개체들은신속하고깨끗하게표본으로제작함 ( 표본제작방법 참조 ) < 표본제작방법 > 나비류, 나방류중대형곤충들은삼각지표본또는전시판을이용한전시건조표본을 하고, 다른대부분의곤충류의경우 70% 이상의에탄올을이용한액침또는전족판 - 34 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) 등을이용하여다리를편후건조표본을제작한후액침의경우크기에맞는액침병에보관, 건조표본의경우표본상자에보관 약충과유충은액침표본으로제작하며, 건조표본의경우분류군에따라서핀을꽂는위치및방법을고려하여조직의훼손을최소화하도록표본제작 모든액침또는건조표본은채집지명, 채집일, 채집자등의정보포함하는라벨작성 < 라벨작성방법 > 라벨크기와내용은환경부에서실시하고있는전국자연환경조사지침서를기준으로작성함. 곤충표본중건조표본일경우에는채집라벨 < 그림세부1-1> 과동정라벨 < 그림세부 1-2> 2종류를기본으로하고, 기타추가적인내용 ( 예, host plant, parasite 등 ) 이있을경우는기타라벨의형식 < 그림세부1-3> 으로 pinning하며, 각라벨의표준규격은가로 22mm, 세로 15mm로함. 1 채집라벨 채집지의도명의경우약호 ( 예, 경남 : GN, 경기 : GG, 전북 : JB, 제주 : JJ) 를대괄호를사용하고진하게하여쉽게알수있도록기입하고, 군이나시단위의지역을영문명으로표기하여, 국명의영문명으로의변경은 국어의로마자표기법 ( 문화관광부고시, 제 00-8 호 ) 에따름. ( 산은 Mt. 섬은 Is. 등 ) < 그림세부 1-1> 채집라벨 채집일시를기입. ( 年, 月, 日의순서로하되, 月의경우는日과의혼동을피하기위 해로마자로사용 ) 채집자의정보를이름 + 성으로기입하며, 이름은약자를사용함. - 35 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) 2 동정라벨 학명을기입. 국명을한글로기입. 동정자의이름 + 성으로기입하며, 약자를사용함. < 그림세부 1-2> 채집라벨 3 기타라벨 < 그림세부 1-3> 채집라벨 특이사항 (host plant, parasite, GPS data 등 ) 을기록. 종의경우학명또는학명과국명을기입. 곤충표본중액침표본일경우에는동정, 채집라벨을기본으로하고각라벨의표준 규격은가로 50mm- 세로 25mm(100ml 용 ), 가로 30mm- 세로 15mm(25ml 용 ) 로함. < 그림세부 1-4)>. Papilio xuthus Linnaeus 호랑나비 [GB] Gyeongsan-si Daedong Yeungnam Univ. KOREA 06. viii. 7 Coll. J. W. Lee Det. J. W. Lee - 36 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) < 그림세부 1-4> 채집라벨 학명과국명기재, 국명을한글로기입시발음상혼동의우려가있을경우음절사 이에붙임표 (-) 를씀. 채집지의도명의경우약호 ( 예, 경남 : GN, 경기 : GG, 전북 : JB, 제주 : JJ) 를대괄호 를사용하고진하게하여쉽게알수있도록기입하고, 군이나시단위의지역을영문 명으로표기하여, 국명의영문명으로의변경은 국어의로마자표기법 ( 문화관광부 고시, 제 00-8 호 ) 에따름. ( 산은 Mt. 섬은 Is. 등 ) 채집일시를기입. ( 年, 月, 日의순서로하되, 月의경우는日과의혼동을피하기위 해로마자로사용한다 ) 채집자의정보를이름 + 성으로기입하며, 이름은약자를사용함. 동정자의이름 + 성으로기입하며, 약자사용. < 표본보관방법 > 동정된곤충은액침또는건조표본으로제작하여보관하며건조표본은전시상자에 액침은액침병 (90 % Ethanol 에보관 ) 에보관한다. 전시상자및액침병규격은다음과 같음 < 그림세부 1-5>. 액침병 (Vial) 표본상자 1. Vial 100ml, 2. Vial 25ml 가로 : 48 cm, 세로 : 42 cm, 높이 : 7.5 cm < 그림세부 1-5> 채집물보관 - 37 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) 마. 연구결과 사업내용목표결과달성률 (%) 미기록 / 신종 ( 후보 ) 발굴 0 종 7 종 103.5 표본확보 16,000 점 16,718 점 104.5 (1) 표본및생물재료확보당해연도연구기간중한반도분포무척추동물자원중곤충강에대한채집조사활동을수행한결과, 확보된표본의수는강도래목 5과 9속 11종 190점, 나비목 과 2속 243종 1,008점, 날도래목 10과 11속 17종 446점, 노린재목 23과 76속 89종 2,774점, 대벌레목 2과 2속 2종 6점, 딱정벌레목 38과 157속 193종 4,252점, 매미목 5과 23속 66종 1,237점, 메뚜기목 9과 37속 42종 1,382점, 밑들이목 1과 1속 1종 4점, 바퀴목 1과 1속 2종 44점, 벌목 13과 59속 77종 2,088점, 사마귀목 1과 3속 4종 50점, 잠자리목 6과 12속 17종 151점, 집게벌레목 2과 3속 3종 87점, 총채벌레목 2과 17속 29종 1001점, 톡토기목 3과 3속 3종 27점, 파리목 14과 36속 40종 744점, 풀잠자리목 3과 5속 5종 24점, 하루살이목 9과 23속 38종 1,113점, 흰개미목 1과 1속 1 종 90점등으로총 목 168과 681속 883종 16,718점 ( 당해연도목표의 104.5%) 의표본이확보 되었으며이를국가생물자원입력시스템에입력하였다 ( 표세부 1-1, 세부 1 부록 I-1). 연구계획 서에포함되었던분류군중계획된목중흰개미붙이목은전국각지역에걸쳐채집을실시하 였으며, 국내여러곤충소장기관의소장표본들을조사하였지만확보할수없었다. 이와같 은결과흰개미붙이목에속하는종들이대부분열대와아열대에분포하고, 국내에서기록된 1 종의채집지가서울시소재온실인점등으로미루어, 기주식물인중남미원산의 Pachira aquatica A. 가국내도입될당시에일시적으로국내에함께도입된종일수있을것으로사료되므로, 추가적이연구를통하여자생종의진위가확인되어야할것이다. 따라서흰개미붙이목을제외하고총 목에속하는곤충류의표본을확보하였는데이들은건조표본 12,387점, 액침표본 2,247점, 슬라이드표본 2,000점기타 84점으로제작 보관되어있 다 ( 표세부 1-3). 이로부터기록종 883 종의분포여부를확인함과동시에분류동정을위한확 증표본을제작완료하였다. 당해연도연구결과확보된무척추동물자원중곤충의표본및 생물재료의목록및상세한채집정보는 < 세부 1 부록 I-1> 에제시되어있다. - 38 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) < 표세부1-1> 표본확보 목 (Order) 과 (Family) 속 (Genus) 종 (Species) 점 (Individual) 강도래목 5 9 11 190 나비목 2 243 1,008 날도래목 10 11 17 446 노린재목 23 76 89 2,774 대벌레목 2 2 2 6 딱정벌레목 38 157 193 4,252 매미목 5 23 66 1,237 메뚜기목 9 37 42 1,382 밑들이목 1 1 1 4 바퀴목 1 1 2 44 벌목 13 59 77 2,088 사마귀목 1 3 4 50 잠자리목 6 12 17 151 집게벌레목 2 3 3 87 총채벌레목 2 17 29 1001 톡토기목 3 3 3 27 파리목 14 36 40 744 풀잠자리목 3 5 5 24 하루살이목 9 23 38 1,113 흰개미목 1 1 1 90 목 168과 681속 883종 16,718점 - 39 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) 당해연도연구목표표본및생물재료확보 : 총 16,000점 - 대상분류군 ; 강도래목, 나비목, 날도래목, 노린재목, 대벌레목, 딱정벌레목, 매미목, 메뚜기목, 밑들이목, 바퀴목, 벌목, 사마귀목, 잠자리목, 집게벌레목, 총채벌레목, 톡토기목, 파리목, 풀잠자리목, 하루살이목, 흰개미목 연구사업결과총 16,718점확보 < 세부1 부록 I-1. 표본확보참조 > - 확증표본 : 16,718점 - 확증표본 : 16,000점 16,718점확보 ( 목표의 104.5%) ; 강도래목 190점 ; 나비목 1,008점 ; 날도래목 446점 ; 노린재목 2,774점 ; 대벌레목 6점 ; 딱정벌레목 4,252점 ; 매미목 1,237점 ; 메뚜기목 1,382점 ; 밑들이목 4점 ; 바퀴목 44점 ; 벌목 2,088 점 ; 사마귀목 50점 ; 잠자리목 151점 ; 집게벌레목 87점 ; 총채벌레목 1,001점 ; 톡토기목 27점 ; 파리목 744점 ; 풀잠자리목 24점 ; 하루살이목 1,113점 ; 흰개미목 90점 - 40 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) (2) 미기록및신종 ( 후보 ) 발굴 자생곤충을대상으로한발굴조사결과, 신종 34 종과미기록종 173 종을포함하여총 7 종 ( 당해연도목표의 103.5%) 이새롭게발굴되었다 ( 표세부 1-2, 세부 1 부록 I-2). 본연구결과 발굴된신종을살펴보면노린재목의 Aphis (Aphis) veroniciphaga, Kim et Lee, 06 외 7종, 딱정벌레목의 Carabus stermbergi nsp. 외 10종, 벌목의 Kleidotoma nsp.1 외 8종, 파리목의 Adapsilia hispida 외 5종등총 4목에서 34종이새로이추가기록되었다 ( 표세부1-2). 아울러연구결과발굴된미기록분류군들은강도래목의 Kathroperla sp. 외 4종, 귀뚜라미붙이목의 Galloisiana sp., 나비목의 Melittia inouei Arita & Yata, 1987 외 12종, 날도래목의 Tinodes sp., 노린재목의 Aphis (Aphis) fabae Scopoli, 1763 외 31종, 딱정벌레목의 Pteroloma koebelei Von Dyke, 1928 외 49종, 벌목의 Aoplus rufulus (Uchida, 1925) 외 35종, 총채벌레목의 Haplothrips nipponicus Okajima, 06 외 8종, 파리목의 Polypedilum sp. 외 17종, 풀잠자리목의 Hemerobiidae sp.1 외 1종, 하루살이목의 Torleya sp. 외 5종등총 11목에서 173종이새로이추가기록되었다 ( 표세부1-3). < 표세부1-2> 미기록 / 신종발굴결과목 (Order) 신종 미기록종 강도래목 - 5 귀뚜라미붙이목 - 1 나비목 - 13 날도래목 - 1 노린재목 8 32 딱정벌레 11 50 벌목 9 36 총채벌레목 - 9 파리목 6 18 풀잠자리목 - 2 하루살이목 - 6 11목 34 신종 173 미기록종 이중특이할사항으로는첫째전세계적으로희귀분류군으로알려져있는귀뚜라미붙이 목에속하는갈로아벌레의일종인 Galloisiana sp. 의표본이확보되었으며, 둘째, 벌목에서는신 종 9 종과미기록종 36 종등많은수의자생종들이새로이발굴되었고이들중에는특히현재 - 41 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) 까지국내에미기록으로남아있던상과인 Stephanidea 상과의 1 종인 Schlettererius sp. 와국내 미기록과였던 Aulacidae 과의 Pristaulacus intermedius Uchida, 1932 의국내분포가밝혀짐으로 써국내미기록상위분류군에서의새로운추가가이루어졌다. < 표세부1-3> 분류군별발굴현황 목 (Order) 과 (Family) 속 (Genus) 종 (Species) 강도래목 3 5 5 귀뚜라미붙이목 1 1 1 나비목 1 8 13 날도래목 1 1 1 노린재목 6 25 40 딱정벌레 18 47 61 벌목 7 45 총채벌레목 2 9 9 파리목 5 16 24 풀잠자리목 1 1 2 하루살이목 6 6 6 11목 51과 139속 7종 당해연도연구목표 미기록 / 신종발굴 : 0 분류군 연구사업결과미기록 / 신종발굴 : 7 분류군 (173 미기록종, 34 신종후보 ) ( 목표의 103.5%) ; 강도래목 : 5미기록 ; 귀뚜라미붙이목 : 1미기록 ; 나비목 : 13미기록 ; 날도래목 : 1미기록 ; 노린재목 : 8신종, 32미기록 ; 딱정벌레 : 11신종, 50미기록 ; 벌목 : 9신종, 36미기록 ; 총채벌레목 : 9미기록 ; 파리목 : 6신종, 18미기록 ; 풀잠자리목 : 2미기록 ; 하루살이목 : 6미기록 - 42 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) (3) 주요자생생물자원의생물학적논의 ( 가 ) 미기록및신종 ( 후보 ) Grylloblattodea ( 귀뚜라미붙이목 ) 귀뚜라미붙이목에속하는 Galloisiana sp. 는몸이가늘고다소납작하며대체로연하고창 백하다. 귀뚜라미붙이목은유충시기가매우길며성충의수명은상대적으로짧다. 바퀴, 대벌 레와가까우며원시적인메뚜기형곤충의모습을하고있다. 세계적으로 1 과약 25 종이상이 기록되었으며한국에는 1 과 6 종이상이분포하지만고산지대숲속의습한바닥, 썩은나무 밑, 빙하의가장자리처럼추운곳, 낙엽과돌밑, 또한빛이없는동굴속에서주로발견되기 때문에표본확보에어려움이있었다 ( 그림세부 1-1). < 그림세부 1-1> Galloisiana sp. 의형태 ( 나 ) 멸종위기및희귀종 Neomacromyzus cyrtomicola, Lee 06 ( 국명미정 ) 노린재목진딧물하목진딧물과에속하는 Neomacromyzus cyrtomicola, Lee 06 는 02 년제주도성산일출봉부근에서처음으로발견되어신속, 신종으로기재되었다. 생김새가매 우특이한종으로진딧물아과수염진딧물족 (tribe Macrosiphini) 내에서도이와비슷한유사종 이없다. 본종은전세계적으로제주도에만자생하는고유종으로서식처또한특이하여화산 재로생긴현무암지대의음지에자생하는도깨비고비 (Cyrtomium falcatum (L.) Presl.) 만을 기주로삼는데그수가매우적고서식처가드물어발견하기힘든희귀종이다 ( 그림세부 1-2). 형태적으로몸길이 1.0-1.5 mm 로진딧물아과내에서매우작은편에속한다. 몸표면은 - 43 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) 검은색에가까운짙은청색을띄며각부속지에해당하는더듬이, 다리, 털, 뿔관등이투명하 게관찰되는것이특징이다. 슬라이드표본상에서관찰하면머리등면은작은돌기가나있 으며, 더듬이혹이발달하여안쪽으로약간휘어져있다. 등면위쪽과측면에난털은곤봉형 으로끝이납작하고, 가슴과복부등면의털기부는모두볼록하게튀어나와있다. 뿔관뒤쪽 의등판은울퉁불퉁한돌기가더욱강하게나타난다. 아직까지생활사, 기주이동에관한정확 한생태는밝혀진바없다. < 그림세부 1-2> Neomacromyzus cyrtomicola 의형태 < 그림세부 1-3> Pristaulacus intermedius Uchida, 1932-44 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) Pristaulacus intermedius Uchida, 1932 본종은 Aulacidae 과에속하며전세계에널리분포하여 13속약 150여종이현재까지보고되어있다. 주로목질부에구멍을뚫는딱정벌레와잎벌아목의 Xyphydriidae 과에기생한다. 북미와유럽에서다수의종이보고되었으나, 우리나라에서는본연구를통하여처음기록되어 지는분류군이다. 체형은보통가늘고 propleura 가길어서마치목처럼보이는특징이있다 ( 그림세부 1-3). Schlettererius sp. 본종은 Stephanidae 과에속하며대부분의종들이대형수목천공성딱정벌레에기생하는 것으로알려져있으며송곳벌에기생하는종도기록되어있다. 9 속 100 여종이보고되어있으 며대부분이열대에분포한다. 머리는공모양으로가운데홑눈주변에몇개의치상가시를가 지는것이특징이다 ( 그림세부 1-4). 본종이속하는 Stephanoidea 상과가본연구를통하여 우리나라에서처음으로기록되었다. < 그림세부 1-4>. Schlettererius sp. < 그림세부 1-5>. Celebarches sp. 의형태 - 45 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) Celebarches sp. 본종에속하는속은전세계 3 종으로아주귀한표본으로인도, 인도네시아, 일본에서각각 한종씩보고되어있다. 우리나라에서도전문가에의해서수년간조사, 연구끝에단 4 개체만 이발견된속이다 ( 그림세부 1-5). ( 다 ) 국외반출승인대상종환경부는금년 1월에기존의국외반출승인대상생물자원으로지정 고시되어있던기존의 528종 ( 이중곤충류 139종 ) 에추가적으로생물자원으로활용가치가높아보호관리가필요한 3( 이중곤충류 180) 종을선정하였다. 국외반출승인대상종은한반도고유종을중심으로생 태적가치, 경제적가치, 학술 사회문화적가치등을종합적으로고려하여선정되었다. 국외 반출승인대상종은환경부장관의승인을받지아니하고는국외반출이금지되며, 이는살아있 는생물체이외에그알, 종자, 구근, 뿌리, 표본등에도적용된다. 생명공학기술의발달로생 물자원을이용하여신품종, 신물질개발등고부가가치창출이가능해져 BT 산업이 21세기성장을주도할핵심산업으로부상함에따라, 앞으로생물주권확보를위한국가간생물자원확보경쟁은더욱치열해질전망이다 (08, 환경부보도자료 ). 본조사결과의종목록중자나방과네눈은빛애기자나방 (Problepsis diazoma Prout, 1938), 두눈강도래 (Neoperla quadrata Wu et Claassen), 사슴벌레 (Lucanus maculifemoratus dybowskyi Parry), 애기뿔소똥구리 (Copris tripartitus Waterhouse), 연날개수염치레각날도래 (Stenopsyche bergeri Martynov), 한국강도래 (Kamimuria coreana Ra & Al.), 한국큰그물강도래 (Pteronarcys macra Ra & Al.) 등이국외반출승인대상종에속하는것으로조사되었다. 네눈은빛애기자나방 (Problepsis diazoma Prout, 1938) 네눈은빛애기자나방 (Problepsis diazoma Prout, 1938) 은날개편길이 28-42mm 이고, 남 한전역에분포하나울릉도에서의기록은없다. 국외에는일본에분포한다. 성충은 6 월 - 8 월 에걸쳐나타난다. 앞날개횡맥상의회갈색원형무늬속의 CuA 1 과 M 3 의밑부분은각각흰색 무늬를이룬다. 횡맥상에는백색의짧은선이있다. 외황선의바깥쪽에는흑색무늬의줄이 있다. 뒷날개에는횡맥상의큰무늬가한층가늘고길며, 그속에는흑색무늬가없다. 연모는 담흑색으로은색비늘이산재하고있기때문에진주빛광택을띤다. ( 그림세부 1-6). - 46 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) < 그림세부 1-6> Problepsis diazoma Prout 의형태 ( 라 ) 도입종 Aphis (Aphis) fabae Scopoli, 1763 잠두진딧물노린재목진딧물하목진딧물과에속하는잠두진딧물 (Aphis (Aphis) fabae Scopoli, 1763) 은국내에는최근에발생이확인된침입종으로 (Kim et al., 06), 유럽에서는기주이동을하며완 전세대형을갖는진딧물로보고되어있다. 전세계분포지역은북미, 아프리카, 유럽을포함한 북반구일대에광범위하게서식하는것으로기록되어있다. 일차기주로는노박덩굴과참빗살 나무와인동과백당나무가잘알려져있다. 이차기주로는대부분의콩과, 가지과, 국화과식물 중특히농작물을선호하지만국내농작물에서는아직까지큰피해가알려진바없다 ( 그림세 부 1-7). < 그림세부 1-7> Aphis (Aphis) fabae Scopoli, 1763 잠두진딧물의형태 - 47 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) 국내에서는 5 월경에출현하여신초부위에주로발생하며, 군집이커질수록기주의여러부 분으로전파된다. 다른진딧물속과같이개미와공생관계를갖는다. 목화진딧물과조팝나무진 딧물과마찬가지로광역기주를갖는생태적특징때문에외국에서는경제적피해가큰종으로 경계시하고있으며, 국내에서도잠재적인해충으로서관리가필요하다. 이들은북미지역에 서특히콩류에심각한피해를일으키는해충으로알려져있으며현재국립식물검역원관리해 충으로지정되어있다. 형태적특징으로무시충은다리와더듬이부분을제외하고검은색또는짙은갈색을띤다. 유시충은검은색이짙고, 무시충과달리가슴및복부에광택을띠는형태적특징이있다. 무 시형, 유시형약충모두흰밀랍가루를쓰고있으며, 유시형약충의경우밀랍가루가배부분 에끊어진가로무늬로뚜렷하게배열되어있는것이큰특징이다. 성충일때는밀랍가루가약 충일때보다현저히적거나아예없다. 일반적으로소루쟁이진딧물 (A. rumicis) 과기주를공유하고그형태가유사하여오인될여지가있으나다음의뚜렷한형태적차이를보인다. 더듬이제 3마디털길이는지름의 0.8~ 1.1배이다. 복부등판제 6마디의뿔관사이의털은 4개이다 ( 소루쟁이진딧물의경우 6개 ). 복부등판제 1~6마디는가로줄무늬모양으로경화되어있지않고그물무늬가뚜렷하지않다. (4) 논문, 학술발표및도서출판등 ( 가 ) 논문 Bong-Woo Lee and Yang-Seop Bae. 07. A review of the tribe Pyralini Latreille (Lepidoptera, Pyralidae, Pyralinae) from Korea. Trans. Lepid. Soc. Japan 58(1): 47-68 (07.1.10) Jong Chul Jeong, Seol Mae Lee and Jong-Wook Lee. 07.11. Redescriptions of Four Ichneumonidae Genera and Species (Hymneoptera: Ichneumonidae: Ichneumoninae) New to Korea. Korean J. Syst. Zool. 23(2): 189-197 Jong-Wook LEE and Won-Young CHOI. 07. New species of the genus Skiapus Morley (Hymenoptera: Ichneumonidae: Campopleginae) from Korea. Entomological Research 37(4): 294-297 Seok Kim and Yang-Seop Bae. 07. Rediscovery of Tinea translucens Meyrick (Lepidoptera: Tineidae) infesting the Stuffed Mammal in Korea. Korean Journal of - 48 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) Applied Entomology, 46(1): 5-11.(07.4.30) Won-Young Choi, Jong-Wook Lee and Kyong-In Suh. 07. 11 A Taxonomic Study of the Tribe Poemeniini (Hymenoptera: Ichneumonidae: Poemeniinae) from Korea. Korean J. Syst. Zool. 23(2): 183-188 ( 나 ) 학술발표 Do-Young Chae and Yang-Seop Bae. 07. Systematic study of the genus Cyidia Hubner (Lepidoptera, Tortricidae, Olethreutinae) from Korea. 한국응용곤충학회추계학술발표회 초록집 : 16 (07. 10. 18) 바. 개선및건의사항 (1) 흰개미붙이목은전세계에 8 과약 0 여종이보고되어있는미소분류군으로, 대부분의 종이열대와아열대지방에분포하는것으로알려져있다. 국내에서는현재까지 Oligotoma saunderssii (W.) 의 1 종이 Lee 등에의해서 02 년에보고되었다. 본연구에서는우리나라 에분포하는흰개미붙이목의분포를확인하기위하여전국각지의여러지역에걸쳐채집을 실시함과아울러국내여러곤충소장기관에의뢰하여표본의확보를시도하였으며특히국 내기록시에사용된확증표본을확인하고자하였으나그소재를파악할수없었다. 따라서 문헌기록을토대로유추하여보건데흰개미붙이목의대부분의종들이열대와아열대에분포하고또한국내기록된 1종의채집지가서울시온실소재인점등으로미루어보아중남미원산인 Pachira aquatica A. 가국내도입될당시일시적으로함께도입된종일수있을것으로사료되므로본종을한반도자생종에포함시킬지의여부에관한추가적인연구가필요할것으로사료된다. (2) 현행분류체계에따르면과거 Homoptera( 매미목 ) 는현재 Hemiptera( 노린재목 ) Auchenorrhyncha( 매미하목 ) 으로되어분류군이하향개편되었으며, 옛매미목진딧물, 깍지벌 레, 가루이, 나무이등은 Sternorrhyncha( 진딧물하목 ) 로역시노린재목에편입된상태이다. 또 한이전의 Hemiptera 는현행 Heteroptera( 노린재하목 ) 로분류체계가바뀐지오래되었으나아 직까지업데이트되지않은상태로서버에적용되고있으므로수정이요구된다. - 49 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 3. 무척추동물 Ⅰ( 곤충 ) < 그림세부 1-> Hemiptera 현행분류체계 (3) 곤충의경우한국곤충명집 (1994) 를기준으로목록을작성하였으나, 오늘날경제곤충시리즈 (00- 현재 ) 와 IK(Insecta Koreana) 시리즈 (1997-현재) 의출간으로인하여문헌간에서로상이한학명, 국명이현재 D/B상에사용되고있으므로동물이명의문제가지속적으로나타나고있다. 추후에 synonym 문제를어떻게처리할것인지에대한협의가필요하다. (4) 잦은 D/B 입력프로그램의수정으로한번입력된자료를여러번수정하여야하는번 거로움이있었으며, D/B 입력시신종이나미기록종의경우검색이되지않는데이를사용자가 업데이트하여사용할수있도록프로그램의개선이필요하다. - 50 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 4. 자생무척추동물 Ⅱ ( 곤충제외, 원생생물포함 ) 자원조사 발굴 가. 당해연도연구목표 사업내용 발굴예정미기록 / 신종수 확보할표본점수 목표 160 종 16,000 점 나. 당해연도연구개발계획 대상분류군 연체동물 ( 부족류, 신복족류, 후새류 ), 절지동물 ( 생이류, 펠티디드요각류, 거미류, 감마로이드단각류, 물맞이게류, 하르팍티키드요각류등 ), 해면동물 ( 보통해면류 ), 편형동물 ( 다절류 ), 거미류 ( 홑생식기류 ), 유증동물, 모악동물, 선형동물 ( 도마뱀선충류 ), 원생동물 ( 해산섬모충류 ), 환형동물다모류, 태형동물, 극피동물등 세부목표및내용 기초문헌자료조사 자생종목록확인 분포현황확인 멸종위기자생무척추동물현황확인 야외조사를통한표본확보 표본제작 분류군의동정 추진일정 (M+) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 분류군별종목록및분포자료작성 다. 연구범위 연체동물 : 부족류, 후새류, 신복족류등 절지동물 : 생이류, 펠티디드요각류, 거미류, 감마로이드단각류, 하르팍티키드요각류 등 - 51 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 해면동물 : 보통해면류 편형동물 : 다절류 거미류 : 홑생식기류 유즐동물, 모악동물, 선형동물 : 도마뱀선충류 원생동물 : 해산섬모충류 환형동물 : 다절류, 다모류등 태형동물, 극피동물등 라. 연구내용및방법 연구기간중지형도 (1/25,000) 및가능한많은기존자료를활용하여미기록종및특정무척추동물의서식가능성이높고종다양성이풍부할것으로예상되는지역과출현및번성시기를판단하여탐색조사 선정지역을대상으로채집조사분류군들에대한우점종, 희귀종, 미기록종등의상세한탐색조사 미기록종및특정무척추동물의발견시서식지환경, 출현시기및기타서식현황을상세히기술 각분류군의기준표본및확증표본관찰결과와원기재문및관련문헌을근거로학명을정리 상기연구결과를종합하여분류군별종목록, 미확인기록종목록작성 가능한모든분류군의확증표본은 3세트이상이채집이되었을경우그중최소 2set 를환경부 국립생물자원관 에소장 < 채집방법 > 각분류군에맞는채집방법에따라표본채집 수중생물전문조사팀을구성하여표본채집 다양한방법에의해채집된개체들은신속하고깨끗하게표본으로제작 각분류군의특성에따라표본제작 - 52 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 1 선충류 우리나라전역의다양한연구조사지점을대상으로조간대및조하대의서식처를현장조사 형태분류연구를통해한반도에서식하고있는각선충류 ( 특히도마뱀선충류 ) 의종류상과분포상을파악 분석결과를정리하여목록화와데이터베이스화구축을위한준비작업 미기록및신분류군들에대해서는기재및도판을작성 주로조간대의표층을체로걸려채집하며조하대의경우는 SCUBA diving 조사로수심 30 m 내외의다양한서식처를조사 모식표본및대조표본제작은에탄올과 glycerine 혼합액 (95:5 비율 ) 을표본들이담긴용기에부어 36 항온기에넣고약 7일동안서서히탈수 순수한 glycerine에담겨있는탈수된표본을한개체씩영구파라핀슬라이드제작 2 다모류 조간대및조하대등다양한서식처를현장조사 형태분류연구를통해한반도에서식하고있는다모류의종류상과분포상파악 결과를정리하여목록화를하며미기록및신분류군들에대해서는기재및도판을작성 조간대에서는주로손과삽으로다모류를채집하며조하대의경우 scuba diving을통해다른무척추동물덩어리를채집한후이들덩어리속에들어있는각종다모류를핀셋등으로분리 분류군의표면, 두부감각모의배열, 구강구조및생식기부분등의중요분류형질들을 400배 -1,500배로정밀하게관찰하면서관련문헌에따라동정 70% 알코올로고정하고관병속에 70% 알코올로보관 3 요각류 전국해안의다양한지역을선정하여다양한마이크로서식처에서요각류를채집 기초적인문헌조사와소모성재료및장비의점검과구비, 문헌의정리및자료의데이터베이스화를수행 아울러채집된재료를바탕으로정확한동정과분류를하여주요자생생물에대하여 - 53 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 도판을작성 조간대에비해종조성이매우다른조하대에는 scuba diving 조사를병행하되다른무척추동물과공생하는것들은 scuba diving을통해서무척추동물을채집한뒤 5-10% 에탄올, 10% 의탄산수, 또는염화마그네슘수용액으로무척추동물로부터요각류들을분리해낸뒤체로걸러고정 표본의제작은해양의조간대및조하대의모래와펄등여러서식지에서표본을채집하여담수쇼크를준후 95% 의에탄올로현장고정 필요에따라 lignin pink 또는 rose bengal을넣어염색 해부현미경하에서선별하며표본의동정을위해표본을 cavity slide 위에 lactic acid 로옮겨 clearing 한후해부 사용되는해부핀은직경 0.2mm의텅스텐선을전기분해하여날카롭게만들어사용 해부된표본은정확한관찰을위해 lactophenol 이있는슬라이드에옮겨 sandwich slide를만들어관찰을하고 DIC광학현미경에부착된 drawing tube를이용하여도판을작성 4 십각류 다양한서식지에살고있는십각류중생이류를중심으로채집하고동정 채집은조간대에서는주로맨손으로채집하며, 조하대에서는 scuba diving을통해채집하되여러무척추동물들을함께채집하여이들에붙어있는십각류를핀셋등으로채집 표본은 70% 알코올이들어있는관병에저장 5 해면동물 남한의동 서 남해연안과부근섬들을채집지로선정하여지속적인채집 조간대의경우간조시를이용하여드라이버, 쇠갈퀴, 핀셋, 칼등으로재료를직접채집 조간대부위 ( 수심 5-30m) 는스킨이나 SCUBA-diving을이용하여채집 심해산 ( 수심 30-100m) 일경우는자망, 저인망, 어선및주낙배를이용 채집시 Canon EOS V나 Nikonos V를이용하여생태사진과생체사진을찍는다. 몇몇종은육상으로올라오면바로색이변하므로현장에서즉시색을기입하고, 채집일, 채집장소, 서식지의형태, 표면의형태등을정확히기록 - 54 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 표본은현장에서 80-100% 메칠알콜에고정 표본은실험실로옮긴후곧바로새로운 70% 메칠알콜로바꾸고동정 분류를위하 여표본병에보관 6 거미류 다양한서식처에살고있는거미들을포충망또는맨손으로채집 70% 알코올에고정하고보관 7 단각류 다양한서식지에살고있는단각류를대상으로연구 조간대조수웅덩이나하조대에서식하는해조류의밑부분을칼로잘라내고, 잘라낸해조류를포르말린을섞은바닷물이든통에넣고세척 채집된단각류는체에의해걸러서 5% 포르말린에고정시킨후표본병에보관 밤에서식지에나와서바다의표면까지이동하는분류군을잡기위해특별히제작된 light trap을이용하여채집 무척추동물과공생하는단각류는 scuba diving을통해서무척추동물을채집한뒤 5-10% 에탄올, 10% 의탄산수, 또는염화마그네슘수용액으로무척추동물로부터단각류들을분리해낸뒤체로걸러고정 채집된단각류들을해부현미경및광학현미경하에서관찰하여동정 해부현미경하에서부속지들을해부 더듬이와가슴다리, 구기부와꼬리마디를분리하여순서대로평편한슬라이드글라스위에마운팅시키고나머지는 depression slide에마운팅 8 후새류 주로 scuba diving에의해표본을채집 멘톨에마취후에 10% 포르말린에고정하고여러번물로 wash한수에 70% 에탄올에저장 9 원시복족류 다양한서식처에서맨손이나끌, 호미등으로채집 - 55 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 조하대의경우 scuba diving 을통해바위틈에붙어있는여러원시복족류를채집 70% 알코올에고정저장 10 섬모충류 한국의해산섬모충류의분류학적연구를수행하기위하여다양한서식처의섬모충류를대상으로연구 표본을채집하고실험실로운반하여분리하고순계배양 야외에서채집된표본과실험실에서배양된 clone 표본의생체를아울러검경하여관찰하고더불어 Protargol staining, Silver carbonate staining 등다양한 Silver impregnation 방법으로고정. 염색한표본의형질들을관찰하면서입수한문헌에의거동정 생체와염색표본의사진과도판을작성하여기재하며기재한종들의전반에대하여검색표를작성 재고찰이필요한분류군의경우기술통계적방법 (descriptive statistics) 을이용하여각형질들을검토 < 표본제작방법 > 확증표본은각분류군의특성에따라제작한다. 1 선충류 에탄올과글리세린혼합액 (95:5 비율 ) 을표본들이담긴용기에부어 36 항온기에넣고약 7일동안서서히탈수 순수한글리세린에담겨있는탈수된표본을한개체씩영구파라핀슬라이드로제작. 2 원생동물 채집된표본은실험실로운반하여분리하고순계배양. 야외에서채집된표본과실험실에서배양된 clone 표본의생체를검경 더불어 Protargol staining, Silver carbonate staining 등다양한 Silver impregnation 방법으로고정염색. - 56 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 3 십각류 조간대또는 Scuba diving 을이용한조하대에서채집된샘플을해부현미경또는나안 으로개체선별후 50%, 70% 의에탄올에순차적으로고정, 보관. 4 해면동물 조간대부위는스킨이나 Scuba diving을이용하여채집하고심해산일경우는자망, 저인망, 어선및주낙배를이용하여표본을채집. 채집된표본은현장에서 80-100% 메칠알코올에고정한후실험실로옮겨바로새로운 70% 메칠알콜로바꾸어보관. 5 거미류 다양한서식지의거미들을포충망또는맨손으로채집한후 70% 에탄올에고정후 보관. 6 단각류, 올챙이새우류 조간대조수웅덩이나조하대에서식하는해조류의밑부분을잘라내고잘라낸해조류를포르말린을섞은바닷물이든통에넣고세척. 채집된단각류는 5% 포르말린에고정후 70% 에탄올에보관하며부속지등의세부형태관찰을위해 lactophenol 을이용하여슬라이드제작하고표본동정을위한해부는 lactic acid 하에서시행하며, 해부된표본은 lactophenol을이용하여고정. 표본은 transparent nail varnish로밀봉하여영구보관. 7 후새류 채집된표본을멘톨로마취후 10% 포르말린에고정하고여러번물로세척후 70% 에탄올에보관. 8 연체류 채집된표본은 70% 에탄올에고정후보관. - 57 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 9 요각류 채집된모든샘플은 70% 알콜에고정및보관하며, lactophenol을이용하여동정을위한슬라이드제작. 표본동정을위한해부는 lactic acid 하에서시행하며, 해부된표본은 lactophenol 을이용하여고정한다. 표본은 transparent nail varnish로밀봉하여영구보관. 10 다모류 채집된표본들은채집후현장에서얼린후실험실에서고정을하거나멘톨등으로마취후 5% 포르말린에고정. 다모류에있어서마취과정은매우중요한데이과정을거치지않으면고정시개체들의형태가많이훼손되거나주요분류형질이드러나지않은상태로고정될수있음으로 5% 포르말린으로고정된개체는 2-3일정도후에보존액을 70% 에탄올로바꾸어보존. < 미기록및신종 ( 후보 ) 발굴방법 > 1 해면류 해면류의동정 분류를위해먼저표면의형태를관찰하며, 색, 피층과내층의관계, 다른해면의부착여부등을관찰. 재료들로부터피층과내층의일부를떼어해부현미경하에서해면질로부터섬유를분리해낸후광학현미경을통하여골격의형태를관찰하고사진을촬영. 저배율현미경을이용하여골격의배열상태를관찰하고현미경사진을촬용. SEM을이용하여골격내골편의배열상태와미소골편의형태를관찰하고사진을촬용. 내층의구조및 filament의미세구조는 SEM을이용하여관찰. 부족한문헌은외국의여러학자들과연락하여유료또는무료로입수하며, 고문헌일경우에는소장기관에유료로복사를의뢰. 문헌을통하여미기록종을밝히고, 재료중신종으로인정되는것이있으면외국여러지역에문의하고확인하여기재, 보고. 서식지 ( 조간대, 조하대, 하부천해대 ), 성장형, 외형의특징 ( 색, 질감, 소공, 대공 ), 피층 - 58 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 골격배열, 내층골격배열, 골편의구성, 골편의크기등이분류의기준이되며분류 체계는 Hooper and Van Soest (02) 의체계를따름. 2 요각류 요각류의미기록종및신종샘플의분류동정에는 Boxshall & Halsey (04) 와 Huys, et. al.(1996) 이제시한분류키를이용하며, Lang (1948) 의 Monograph와 Bodin (1997) 의카탈로그를참고. 표본의확인은샘플을 70% 알콜에고정및보관하며, lactophenol을이용하여동정을위한슬라이드제작 표본동정을위한해부는 lactic acid 하에서이루어져야하며, 해부된표본은 lactophenol을이용하여고정. 표본은 transparent nail varnish로밀봉하여영구보관. 3 진드기류 토양의표본을실험실에서 Tulgren 장치에넣어진드기류를추출하고알코올에고정한다음투명화시켜 polyvinyle alcohol로포매하여현미경으로관찰동정. 전기문목의혹응애는식물의잎을수집하여실험실에서절개, 해부현미경하에서진드기류를추출하고주사전자현미경으로표면구조를촬영하여판독. 4 다모류 다모류의신종미기록종을동정분류하기위해표본을채집즉시 7% MgCl 2 또는멘톨 에마취시킨후 10% 중성포르말린을이용하여고정. 동정시측각등의미세구조를관찰하기위해경우에따라슬라이드표본을제작. 분류체계는 Pettibone (Blake, 1994) 에의한 25 목 86 과의기본분류체계따름. 5 원생동물 원생돌물의미기록종및신종을동정하기위해다음의과정을통해관찰재료를제작. - Protargol staining방법. 표본고정 : Block dish에준비된 HgCl 2 로 10~분간고정. 세척 : 고정액을따내고증류수를첨가하는세척을 3회반복. - 59 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 표백 : 0.5~1% 의 NaOCl용액으로표백 세척 : 표백액을따내고증류수를첨가하는세척을 3회반복. 은침투 : Protargol가루를 1-3% 용액으로 50~60 에서 45분간침투시킴. 현상 : 0.1~0.2% 의 Hydroquinone을 Protargol이침투된표본주위에주입. 현상정지 : 표본을 5% sodium thiosulfate로옮겨현상을정지함. 세척 : 현상이완료된표본을증류수로 3회세척. 표본부착 : Mayer's albumin을 Slide glass위에한방울떨어뜨리고표본을분리하여옮김. 표본건조 : Incubator에서 5~10분간건조. 탈수 : 70-80-90% Ethanol에각 2분씩, 100-100% Ethanol에각 5분씩탈수. 투명화 : Xylol-XylenⅠ-XylenⅡ 단계로각 2분씩투명화시킴. Mount : Canada balsam으로 Mount. - Dry silver nitrate method. 알부민을 slide grass 에한방울을떨어뜨리고매우얇게편후, 약 1 분정도건조시킴. 알부민에는 glycerol 을첨가하지않고처음만든알부민을약 시간 정도저온보관 을해놓고나서사용 표본고정은건조된알부민이있는 slide 부위에시료를떨어뜨림. 가능한알부민층을건들지않게조심해서시료를폄. 실온에서건조된표본을제작한 slide 위에 sliver nitrate (AgNO 3) 를몇방울떨어뜨리고 1분정도 UV 조사 D.W. 로 3초정도 slide를세척후, 다시건조 0.1~0.2% hydroquinone (10 μm ) + 5% sodium sulfate (250 μm ) +D.W. (5 ml ) 을 1~2 방 울떨어뜨린후, 뒷면을세척 Mount 은 Canada balsam 으로 Mount. Lynn, D.H. and E.B. Small (1997) 과 Lynn(02) 의분류체계에따라분류및종동정 8 십각류 채집된개체의온전한형태보존을위해채집후 50% 에서 70% 로순차적으로고정. 이때후일의 DNA 를이용한실험등을고려해포르말린고정은피함. - 60 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 게하목미기록종은 Matin and Davis(01) 의분류체계를따르며, Sakai(1976), Griffin and Tranter(1986), Serene(1984) 의기재를기준으로함. 생이하목의경우 Holthuis(1993) 의분류체계, Hayashi(1996, 1997), Nomura and Komai(00) 의기재를기준으로함. 9 단각류및올챙이새우류 단각류, 올챙이새우류의미기록신종발굴을위해전국연안의조간대와조하대부근에서채집. 주간에는저조때를이용하여조간대의모래갯벌과펄갯벌에서 hand net( 망목 0.5 0.5 mm ) 로쳐서걸러내는방법으로채집. 야간에는만조때를이용하여실험실에서직접제작된 light trap을설치한뒤 3-4시간후에건져내어채집하고, 아울러 plankton net( 망목 0.5 0.5mm ) 의수평끌기방법으로채집. 조하대의조사는 Scuba diving을실시하여조사. 채집된표본들은현장에서 50~70% 에탄올또는 4% 포르말린으로즉시고정하여실험실로운반함. 실험실에서는해부현미경하에서채집지와형태형로선별한후다시 80% 에틸알코올에보관. 재료는해부현미경하에서종별로구별하여채집지, 채집일자, 채집자, 개체수순으로기록 정리. 혼동되는표본들은 cavity slide glass에올려놓고광학현미경하에서 40~600 배로관찰. 구기부와기타부속지들을관찰할때는 glycerol과 lactic acid의 7:3 정도의혼합액에표본을담가두었다가해부하며, 둥근 cover glass를부착한 alumium hole slide 위에해부된각부위를올려놓고 100~1,000배로자세히관찰한후동정. 때로는위혼합액에소량의 lignin pink를섞어서각부속지를염색시켜관찰함. 해부에사용한해부침은직경 0.2 mm의텅스텐선을끓는 NaNO 2 용액에넣어부식시켜 만듬. 분류체계는단각류의경우 Barnard and Kalaman(1991) Mayer(1882, 1890, 1903), McCain(1968), Vassilenko(1974) 그리고 Arimoto(1976) 를따르고, 올챙이새우류의분 - 61 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 류체계는 Gamo(1967a, 1967b, 1968), Day(1975, 1978a, 1978b, 1980) 그리고 Bacesue(1988, 1992) 의체계를기준. 10 후새류 후새류표본의채집은조간대의경우최간조시현장에서직접각분류군의서식처조건을확인한후표본을확보하거나조하대의경우스쿠버다이빙을이용하여수중에서직접채집. 채집된표본은분류군에따라 7% MgCl 2 수용액이나멘톨로마취한후 80 % 메탄올 이나 10 % 포르말린으로고정하여실험실로운반. 종의동정에는 Choe(1992), Habe(1977), Okutani(1986), Okutani & Habe(1990) 등을참고한다. 상기한분류군에대한종상위의분류체계및국명은한국동물명집 (1997) 을따름. 한국동물명집에없는분류군의분류체계는 Abott and Boss(1989) 를따름. 모식표본의확인이어려운경우각분류군의원기재문헌이나종의상위분류군의모노그래프등의문헌을확인. 11 연체류 연체류표본의채집은조간대의경우간조시현장에서직접각분류군의서식처조건을확인한후표본을확보하거나조하대의경우스쿠버다이빙을이용하여수중에서직접채집. 채집된표본은분류군에따라 7% MgCl 2 수용액이나멘톨로마취한후 80 % 메탄올 이나 10 % 포르말린으로고정하여실험실로운반. 종의동정에는각분류군의원기재문헌을확인하거나원기재문헌의확인이어려운경우에는온라인에서제공되는후새류전문사이트 (www.opisthobranch.org 또는호주온라인박물관의 www.seaslugforum.net) 를이용. 상기한분류군에대한종상위의분류체계및국명은한국동물명집 (1997) 을따름. 한국동물명집에없는분류군의분류체계는 Rudman & Willan(1998) 을따름. < 라벨작성방법 > 라벨크기와내용은환경부에서실시하고있는전국자연환경조사지침서를기준으로 - 62 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 작성함 선충류, 요각류, 진드기류의영구프레파라트를만들경우옆부분에종명, 국명, 동정자순으로작성하고채집일시, 채집장소, 채집자정보는리스트를따로작성한다. 해면류, 원생동물류, 다모류, 십각류, 단각류및올챙이새우류, 후새류, 연체류의액침표본의경우학명, 국명, 채집지, 채집일시, 채집자, 동정자순으로레이블을작성, 표본병또는팩안에같이동봉한다. G-DNA의경우 e-tube에번호를기입하고리스트는보관상자에동봉한다. 학명과국명을기재, 국명을한글로기입시발음상혼동의우려가있을경우음절사이에붙임표를씀. 채집일시를기입할때월과일의혼동을피하기위해월은영문으로표시. 채집자와동정자의이름은약자로사용한다. ( 성은약자를사용하지않는다. ) < 표본보관방법 > 선충류, 요각류, 진드기류의영구프레파라트의경우슬라이드메일러에정리하고균사체에의해프레파라트가망가지지않게습도를조절하기위한건조기구를사용하여보관한다. 해면류, 원생동물류, 다모류, 십각류, 단각류및올챙이새우류, 후새류, 연체류의액침표본의경우는보정액 (70~90% EtOH) 이지속적으로증발하기때문에제출시점까지계속적으로보정을채워줌과직사광선이비추지않는곳에보관, 관리한다. 생체표본는 -70 로 setting 되어있는 Deep freezer 에보관하고 Genomic DNA는전용보관상자에정리하여역시 Deep freezer에보관, 관리한다. < 표본제출형태 > 선충류, 요각류, 진드기류의영구프레파라트의경우플라스틱슬라이드메일러에정리되어있기에제출시파손또는추락에의한개폐에대비하여테잎을이용하여 sealing 하여제출한다. 해면류, 원생동물류, 다모류, 십각류, 단각류및올챙이새우류, 후새류, 연체류의액침표본제출시표본병이유리재질인경우는완충제를이용하여팩킹한다. 생체표본의경우는제출시이동중에부패를막기위해온도유지용드라이아이스를이용하여아이스박스에넣어제출한다. - 63 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 마. 연구결과 사업내용목표결과달성률 (%) 발굴예정미기록 / 신종수 160 종 161 종 100.6 확보할표본점수 16,000 점 17,237 점 107.7 (1) 표본및생물재료확보 당해연도연구목표표본및생물재료확보 : 총 16,000점 - 대상분류군해면류, 연체류, 후새류, 거미류, 선충류, 다모류, 요각류, 원생동물류, 단각류, 진드기류 연구사업결과 총 17,237 점확보 ( 목표의약 107.7%) - 확증표본 : 16,000점 - 확증표본 : 17,237점 ; 연체류 ( 해산 ) 50종 /2,410점 ; 거미류 56종 /1,031점 ; 선충류 종 /1,104점 ; 십각류 19종 /1,105점 ; 모악동물 1종 /1점 ; 섬모충류 ( 해산 ) 종 /1,3점 ; 연체류 ( 담수산 ) 19종 /1,097점 ; 다모류 21종 /1,225점 ; 요각류 35종 /2,268점 ; 섬모충류 ( 담수산 ) 22종 /1,149점 ; 해면류 34종 /1,100점 ; 진드기류 종 /1,177점 ; 단각류 37종 /2,367점 본연구기간중한반도분포무척추동물자원에대한채집조사활동을수행한결과, 거미 류 19 과 39 속 56 종 1,031 점, 선충류 5 과 16 속 종 1,104 점, 섬모충류 ( 해산 ) 10 과 11 속 종 1,3 점, 섬모충류 ( 담수산 ) 18 과 19 속 22 종 1,149 점, 다모류 13 과 속 21 종 1,225 점, 해면류 18-64 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 과 24속 34종 1,100점, 연체류 ( 담수산 ) 7과 14속 19종 1,97점, 단각류 15과 23속 37종 2,367점, 요각류 16과 25속 35종 2,268점, 모악동물 1과 1속 1종 1점, 십각류 15과 18속 19종 1,105점, 연체류 ( 해산 ) 31과 46속 50종 2,410점, 진드기류 10과 14속 종 1,177점등총 178과 270속 354 종이확인되었으며, 17,237점 ( 당해연도목표의약 108%) 의표본이확보되어당해여도연구목표를달성하였다. 이들은액침표본, 슬라이드표본및건조표본으로제작 보관되었다. (2) 미기록및신종 ( 후보 ) 발굴 당해연도연구목표 미기록 / 신종발굴 : 160 분류군 연구사업결과미기록 / 신종발굴 : 161 분류군 (117 미기록종, 44신종후보 ) ( 목표의 100.6%) [ 미기록종 ] ; 요각류 : 19종 ; 십각류 : 6종 ; 선충류 : 10종 ; 해산섬모충류 : 15종 ; 후새류 : 9종 ; 연체류 : 9종 ; 다모류 : 11종 ; 담수산섬모충류 : 11종 ; 해면류 : 2종 ; 단각류 : 14종 ; 진드기류 : 11종 [ 신종후보 ] ; 요각류 : 14종 ; 후새류 : 2종 ; 연체류 : 2종 ; 해면류 : 8종 ; 단각류 : 9종 ; 선충류 : 9종 - 65 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 본발굴조사결과, 신종및신종후보 44 분류군과미기록 117 분류군등미기록 / 신종 ( 후 보 ) 161 분류군 ( 당해연도목표의 100%) 을발굴하였다. 발굴된신종 ( 후보 ) 분류군들은선충류 Draconema new species, Dracograllus new species, Prochaetosoma new species, Cygnonema new species, Paradraconema new species, Tenuidraconema new species 1, Tenuidraconema new species 2, Desmoscolex (Desmolorenzenia) coreensis, Desmoscolex (Desmolorenzenia) pedunculus등의 9 분류군, 후새류 Sakuraeolis sp., Tambja sp. 2 2 분류군, 요각류 Tisbe n. sp., Laophontidae n. gen., n. sp., Idomene n. sp., Tegastes n. sp., Halectinosoma n. sp., Maraenobiotus n. sp., Paramesochra n. sp., Laophontidae n. gen. sp., Paralaophonte n. sp.1, Paralaophonte n. sp.2, Tisbe n. sp.1, Tisbe n. sp.2, Porcellidium n. sp., Coullia n. sp., 등의 14 분류군, 단각류 Gitanopsis n. sp., Guernea n. sp. 1, Guernea n. sp. 2, Atylus (Atylus) n. sp., Perioculodes n. sp. 1, Perioculodes n. sp. 2, Perioculodes n. sp. 3, Concarnes sp. 1, Concarnes sp. 2 등의 9 분류군, 연체류 Limnoperna coreana, Allopeas chois 등의 2 분류군, 해면류 Penares sp., Biemna sp., Halichondria sp., Halichondria sp. 2, Haliclona sp. 1, Haliclona sp. 2, Haliclona (Gellius) sp., Petrosia sp. 등 의 8 분류군등총 44 분류군이신종및신종후보로써새로이추가기록되었다. 아울러발굴 된미기록분류군들은선충류 Epsilonema sp., Leptepsilonema sp., Metepsilonema sp., Bathyepsilonema sp., Desmoscolex sp., Greeffiella sp., Tricoma sp., Quadricoma sp., Enoplus sp., Thoracostomopsis sp. 등 10분류군, 해산섬모충류 Uronychia setigera, Uronychia binucleata, Uronychia multicirrus, Euplotes minuta, Aspidisca sp., Oxytricha lanceolata, Pseudokeronopsis rubra, Pseudokeronopsis sp., Dysteria brasiliensis, Dysteria derouxi, Condylostoma magnum, Frontonia sp., Loxophyllum rostratum, Loxophyllum shini, Uronema marinum 등의 15 분류군, 후새류 Elysia obtusa Baba, Placida sp., Pleurobranchus mamillatus, Thecacera sp., Tambja sp. 1, Diaphorodoris sp., Doto sp., Actinocyclus sp., Dermatobranchus otome 등, 총 9 분류군, 다모류 Lumbrinerides hayashii, Rhynchospio glutaea, Heterospio sp., Prionospio casfersi, Pista wui, Asabellides sp., Euzonus williamsi, Clavodorum sp., Spaerodorum sp., Praxillella gracilis, Petaloproctus borealis 등 11 분류군, 요각류 Orthopsyllus sp., Danielssenia typica, Porcellidium sp., Dactylopusia gracialis, Parastenhelia spinosa, Parastenhelia sp., Onychostenhelia bispinosa, Parvocalanus elegans, Perisscope cristatus, Scutellidium arthuri, Orthopsyllus linearis curvaspina, Paramesochra mielkei, Tisbe graciloides, Tisbe japonica, Amphiascus polaris, Amphiascus gracilis, - 66 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ Amphiascopsis southgeorgiensis, Idomene sp., Tegastes sp. 등의 19 분류군, 담수산섬모충류 Blepharisma steini, B. undulans, Climacostomum virens, Linostomella vorticella, Dileptus margaritifer, Homalozoon vermiculare, Glaucoma dragescui, Ophryoglena sp., Trichodina pediculus, Histriculus histrio, Notohymena australis 등의 11 분류군, 해면류 Mycale laevis, Haliclona (Gellius) marismedi 등의 2 분류군, 단각류 Paramphilochus sp., Abludomelita sp., Anonyx sp., Orchomene sp., Sinocorophium sinensis, Apocorophium acutum, Orchomene japonicus, Eohaustorius sp., Orchomene sp. 1, Orchomene sp. 2, Hyale sp., Monocorophium insidiosum, Monocorophium oaklandense, Crassicorophium bonelli 등의 14 분류군, 진드기류 Pergalumna duplicata, Malaconothrus squamaeus, Suctobelbella naginata, Oppia tokyoensis, Nothrus palustris, Protoribates monodactylus, Protoribates lophotricus, Rostrozetes foveoletus, Ceratozetes gracilis, Archoplophora villosa, Hoplophorella cuculata 등의 11 분류군, 십각류 Asthenognathus sp., Macrophthalmus sp., Eriphia sp., Philyra sp., Microcassiope sp., porcellanopagurus sp. 등의 6 분류군, 연체류 Allopeas sp., Cavernacmella sp., Aegista sp., Akiyoshia sp., Paladilbiopsis sp., Diplommatina sp., Georissa sp., Carychium sp., Nobuea sp. 등의 9 분류군등, 총 117 분류군이새로이기록되었다. (3) 무척추동물 Ⅱ 자원의생물학적논의 ( 가 ) 미기록및신종 ( 후보 ) < 선충류 > 해양선형동물은주요한해양간극수동물중의하나이며해양생태계에서차지하는생태 적중요성이매우크다. 해양선형동물은규조를포함한단세포조류, 박테리아, 원생동물, 선 형동물을포함한다른미소한무척추동물들을섭식하는저차소비자이며, 해양의저질속에서 식하는다른대형무척추동물 ( 연체동물, 환형동물 ) 이나어류등의중요한먹이공급원으로써 해양생태계의먹이사슬에중요한연결고리역할을담당하고있다. 이러한중요성에도불구하 고한국에서는극희일부의해양선형동물만이분류학적으로연구가되어있을뿐이다. 2 차년 도의자생생물에대한분류학적연구결과다수의신종들이조사되었다. 본연구자는모든신 종들에관한분류학적연구논문을작성할계획이다. 자국내의다양한서식지에서식하는자 - 67 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 생종에대한정확한분류학적연구는향후의생태학적연구, 분자생물학적연구등다양한연 구분야에매우중요한기반이되리라판단된다. 다년간의연구결과본연구자는해양선형 동물이여타다른해양생물분류군들에비해서고유성이매우높음을파악하였다. 지속적인 분류학적연구가필요하리라판단된다. < 섬모충류 ( 해산 )> 섬모충류는수생부유생태계에서종다양성이높고생물량이많을뿐아니라상위단계로의에너지전달자로중요한역할을담당하고있어생태및분류학적으로매우중요한분류군이다. 분류형질관찰을위해선다양한염색법 (Lee et al. 00) 과배양이필수적인섬모충류는종분류에많은시간이소요되고실험적어려움이많아그중요성에비하여연구가거의이루어져 있지않은상태이다. 당해년도에는해양섬모충류 10 과 11 속 종 1,6 개체의표본을확보하 였다. < 연체류 ( 해산 )> 1) Sakuraeolis sp. : 나새목하늘소갯민숭이과에속하는하늘소갯민숭이류의일종으로국 내의서해 ( 인천시옹진군자월면뭉퉁도 ) 에서최초로채집되었으며근래에서해안에서수중사 진작가에의하여촬영되었다. 본속내의유사종인 S. sakuacea, S. gerberina 와는체색과촉 각및촉각의무늬양상에있어서차이점이확인되어현재해부학적형질 ( 생식기구초, 치설등 ) 을확인하는과정에있으며신종후보종으로판단된다. 2) Tambja sp. 2,, : 나새목 Polyceridae에속하는종으로그간수중사진작가등에의해사진자료를통하여서식가능성이있었으나본조사를통하여국내에처음으로보고되는종이다. 전세계적으로뉴질랜드와한국에서만서식이확인되고있어보다많은연구가필요한종으로신종의가능성이있다. 3) Elysia obtusa Baba, 1938 : 낭설목날씬이갯민숭붙이과에속하는종으로그간수중사진작가등에의해사진자료를통하여서식가능성이있었으나본조사를통하여표본이확보되 어국내에처음으로보고되는종이다. 전세계적으로는홍콩, 일본, 호주동부등서태평양에광 범위하게분포하는것으로알려져있으며먹이생물인해조류 ( 깃털말류, 초록엉킨실등 ) 이번무하는시기에채집이되어먹이특이성및계절성을보이는종으로현재까지제주지역에서만서식이확인되었다. 4) Placida sp. : 낭설목날씬이갯민숭붙이과에속하는종으로그간수중사진작가등에의 - 68 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 해사진자료를통하여서식가능성이있었으나본조사를통하여표본이확보되어국내에처음 으로보고되는종이다. 전세계적으로는홍콩, 일본, 호주동부등서태평양지역과지중해연안 에분포하는것으로알려져있으며먹이생물인해조류 ( 깃털말류, 초록엉킨실등 ) 이번무하는시기에채집이되어먹이특이성및계절성을보이는종으로현재까지제주지역에서만서식이확인되었다. 5) Pleurobranchus mamillatus Quoy & Gaimard, 1832 : 측새목 ( 배순목 ) 군소붙이과에속하는종으로그간수중사진작가등에의해사진자료를통하여서식가능성이있었으나본조사 를통하여표본이확보되어국내에처음으로보고되는종이다. 전세계적으로는뉴칼레도니니 아, 호주, 일본에서식하는것으로알려져있으며수심 - 40 m 의펄모래지역에서식한다. 6) Thecacera sp. : 나새목 Polyceridae에속하는종으로그간수중사진작가등에의해사진자료를통하여서식가능성이있었으나본조사를통하여국내에처음으로보고되는종이다. 대서양의유럽연안에서최초로보고된이래남, 서아프리카, 브라질, 뉴질랜드, 호주, 일본등전세계에결쳐산발적으로분포하며먹이생물인수지상태형동물에서만채집되어먹이특이성 및인간활동 ( 선박을통한 ) 종의이입등과관련된연구에중요하다. 또한, 본종이기회적으로 출현하는것인지혹은국내환경에적응하여정착한것인지등의지속적인연구가필요하다. 7) Tambja sp. 1 : 나새목 Polyceridae에속하는종으로그간수중사진작가등에의해사진자료를통하여서식가능성이있었으나본조사를통하여국내에처음으로보고되는종이다. 열대서태평양지역에주로서식하며남방한계는뉴질랜드이고북방한계는한국, 일본등으로알려져있어연체류의동물지리분포및진화에중요한종이다. 8) Diaphorodoris sp. : 나새목 Onchidoridae에속하는종으로그간수중사진작가등에의해사진자료를통하여서식가능성이있었으나본조사를통하여국내에처음으로보고되는종이다. 일본, 홍콩, 호주등지에서서식이보고되었다. 9) Doto sp. : 나새목 Dotidae에속하며서대서양의카리브해연안에서플로리다에분포하는종으로 1971년일본에서서식이확인된이래본조사사업을통하여국내에서서식이확인도었다. 인간활동에의해태평양으로전파된것으로보고되고있으나보다많은비교연구가필요다. 10) Actinocyclus sp. : 나새목 Arminidae에속하며본열대의인도태평양지역에분포하는 것으로알려져있다. 본종은수중사진가에의해사진으로확인된바있으나현재까지 1 개체 만이채집되고있어표본확보를통한지속적인연구가필요하다. 11) Dermatobranchus otome Baba, 1992 : 나새목 Arminidae 에속하며그간수중사진작가 - 69 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 등에의해사진자료를통하여서식가능성이있었으나본조사를통하여국내에처음으로보고 되는종으로현재까지한국과일본에서만분포하는것으로판단된다. < 섬모충류 ( 담수산 )> 본발굴조사결과, 11 종의미기록종의원생동물 ( 섬모충류 ) 를발굴하였다. 발굴된미기 록종은 Blepharisma steini, B. undulans, Climacostomum virens, Linostomella vorticella, Dileptus margaritifer, Homalozoon vermiculare, Glaucoma dragescui, Ophryoglena sp., Trichodina pediculus, Histriculus histrio, Notohymena australis 이다. 이종의대부분은육상 의저수지, 연못, 습지, 강, 하천등의다양한담수서식처에서채집된것이다. 다른서식처에 비해상대적으로연구가많이수행된담수서식처에서대부분의미기록종이발견된것을고려해볼때우리나라에는아직도담수서식처뿐아니라육상, 해양등의다양한서식처에서많은미기록, 신종의원생동물 ( 섬모충류 ) 이발굴될것으로예상되기때문에보다집중적인조사발굴이요망된다. < 해면류 > 자생생물종발굴사업을통하여 8종의신종후보와 2종의미기록종을발굴함으로써국내해면동물의분포도작성은물론국제적분포양상을파악하는데매우큰의미가있다할수있으며천연물연구에있어주요재료로활용될가능성을갖고있는종들로자원종으로써의가치또한크다고할수있다. < 요각류 > 갈고리노벌레목 (order Harpacticoida) 에속하는요각류는주로저서성으로해조류의엽체, 해저의다양한기질, 무척추동물의몸이나패각, 모래틈등에다양하게서식한다. 2 차년도 Harpacticoid 요각류의미기록및신종발굴을위하여다양한서식기질을대상으로하였으며, 다음과같은결과를얻었다. 대상서식처가운데무척추동물인얼룩참집게 (Pagurus similis) 의 패각과썩은나무 (teredinid bored wood) 에서가장많은종류의요각류가출현하였는데, 1차년도결과와종합해보면얼룩참집게에서 7종, 썩은나무에서 10종등으로전체 (40종) 의약 42.5% 를차지한다. 그밖에꽃갯지렁이류 (Sabellastarte sp.), 산호모래, 잘피류등에서도다양한종류의미기록종과신종이출현하였다. 출현한요각류들가운데분류학적으로중요한종들이다수있었는데, Coullia 속은 Hamond(1973) 에의해수컷없이암컷의형질만으로새로운 - 70 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 속이설정된무리로써그동안주변근연속들과의관계성이불분명하였는데, 2 차년도사업을 통해울릉도꽃갯지렁이류에서 Coullia 속에속하는신종이발견되었으며, 다수의수컷도발견되었다. 따라서이속의분류학적위치가확실해진셈이다. 한편 Harpacticoid 요각류에서다양한종류의신종이출현한것은그동안적극적으로다루어지지않았던다양한유형의서식처를대상으로표본을확보한결과로판단된다. 저서성요각류의일종인 Orthopsyllidae 과의 Orthopsyllus속은 Huys(1990) 에의해비교적 최근에설정된과이며전세계 6 종이알려져있다. 그러나우리나라에서는아직알려져있지 않으나금번연구를통하여수심 10m 의저질모래로부터채집이되었다. 과거주로해조류에 서발견되던것에비하면이들분류군의분포역이확장됨을알수있었다. Parastenheliidae 과 는현재까지 1 종의고유종만이기록되어있지만실제 cosmoporitan 한종인 P. spinosa 가금 번조사에서확인되었고아직정확한작업이이루어지진않았지만최소한 2 종이상국내에서 식하고있는것으로추측된다. 전세계 10 여종에불과한것에비하여국내의종들은높은다양 성을가지고있으며이들종의서식지와분포에대한조사와더불어지속적인분류학적인재 검토가필요한실정이다. Harpacticoida 목 Canthocamptidae 과에속하는 Maraenobiotus n. sp. ( 그림세부 2-1) 이전 라남도영암월출산에서채집이되었다. 이종은 P5 baseoendopod 에서 5 개의강모가나타는 것과 mandibular palp가한마디로이루어져있는게특징이다. 또한, 이 Genus는전세계적인분포를살펴보면북동아시아에서는거의알려지지않았는데, 국내에서처음으로발견되어그의미가크다. 해양생태계에서동물플랑크톤은기초생산자로서대표되는식물플랑크톤을먹이로하여보다상위영양단계인어패류, 어류등에에너지를전달하는중간고리로서중요한역할 을수행한다. 이중가장풍부한. 요각류는 90% 가해산으로부유, 저서또는기생생활을하 며, 주로식물플랑크톤을섭취하며모악동물등 2차소비자의주요한먹이공급원으로이용되기때문에, 해양먹이연쇄의중요한부분을차지한다. 이번연구를통해서연안에서 Laophontidae 의신속 ( 그림세부 2-2) 과신종 Paralaophonte 속의 2종, 미기록종 Scutellidium arthuri, Parvocalanus elegans 등이발견되었으며, 외양에서는서해태안반도앞바다에서도미기록종 Onychostenhelia bispinosa ( 그림세부 2-3) 과신종 Paramesochra n. sp. 등이발견되어현재기재되어지고있다. 이들외양성요각류의종다양성은매우높게나타나고있음에도불구하고접근성에매우어려움이있어분류학적검토가매우제한적이다. - 71 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ < 그림세부 2-1> Maraenobiotus n. sp. < 그림세부 2-2> Laophontidae n. gen. < 그림세부 2-3> Onychostenhelia bispinosa (4) 논문, 학술발표및도서출판등 ( 가 ) 논문 1. Rho, H. S., W. Kim and C. Y. Chang, 07. Description of two new free-living marine nematode species of the subgenus Desmolorenzenia (Desmoscolecida, genus Desmoscolex) from Korea. Journal of Natural History, 41(5-8): 313-326. 2. Kang D. W. and Sim C. J., 07. Two New Sponges of the Genus Haliclona (Demospongiae: Haplosclerida: Chalinidae) from Korea. 3. Kang D. W. and Sim C. J. 08. Two species of Callyspongiidae (Demospongiae: Haplosclerida) from Korea. 4. Kim H. J., Sim C. J. 08. Two New Clathrids Sponges (Poecilosclerida: Microcionidae) from Jejudo Island, Korea. 5. Kang D. W. and Sim C. J., 08. Two New Species of the Halichondriidae (Demospongiae: Halichondrida) from Korea. 6. Kang D. W. and Sim C. J., 08. Two New Sponges of the genus Halichondria (Halichondrida : Halichondriidae) from Korea. 7. Jeon Y. J. and Sim C. J. 08. Two Species of Chalinidae (Demospongiae: Haplosclerida) from Korea. ( 투고예정 ) - 72 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 8. Kim Y.H and S.K. Lee, 08. Two Newly Recorded Species of Pareurystheus (Crustacea: Amphipoda: Corophiidae) from Korea. Korean J Sys Zool, 24(1) 107-114. 9. 이동주. 08. 한국영광연안담수및기수역에서식하는동물플랑크톤군집구조와우점종 Pseudodiaptomus inopinus의분류학적재고찰. 한양대학교대학원석사학위논문 (08 년 2월 ). 10. Jung J. and Kim W., 07. New record of Sinocorphium sinensis (Crustacea: Amphipoda: Corophiidae) in Korea. Korean J. Syst. Zool. 23: 241-245. 11. Jung J. and Kim W., 07. Apocorophium acutum (Chevreux, 1908) (Crustacea: Amphipoda: Corophiidae), newly recorded corophiid species in Korea. Korean J. Syst. Zool. 23: 247-250. 12. Jung J. and Kim W., 08. Newly Recorded Lysianassid Species, Orchomene japonicus (Crustacea: Amphipoda) from Korea. Korean J. Syst. Zool. 24: 139-142. 13. G. M. Park. 07. Limnoperna coreana n. sp. (Bivalvia: Mytiloidea: Mytilidae) from Baengnyong Cave, Gangweon-do, Korea. 논문투고중 ( 나 ) 학술발표 1. Rho, H. S., W. G. Min, C. H. Park and D. S. Kim, 07. Prochaetosoma dokdoense n. sp. (Nematoda: Draconematidae), a new free-living marine nematode from a subtidal zone of Dokdo Island in Korea. 07년도춘계해양학회포스트발표. 2. 김형준, 심정자, 07. Two New Clathrids Sponges (Poecilosclerida: Microcionidae) from Jejudo Island, Korea. 한국생물과학협회정기학술대회 발 표 (07. 8. 16-18) 3. 강동원, 심정자, 07. Two New Sponges of the Genus Haliclona (Demospongiae: Haplosclerida: Chalinidae) from Korea. 한국생물과학협회 정기학 술대회발표 (07. 8. 16-18) 4. Kim Y.H., Y. Eun and K.S. Lee, 07. Two New Records of the Genus Atylus (Amphipoda, Dexaminidae) from Korea. 한국생물과학협회정기학술대회발표 (07. 8. 16-17) 5. 홍순상, 김영효, 이경숙, 07. 칼세오리옆새우 (Gammarus zeongogensis) ( 단각목, 옆새우과 ) 의서식지재발견. 한국생물과학협회정기학술대회발표 (07. 8. 16-17) - 73 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ 6. Kim, Ki choon and Wonchoel Lee. 07. A New Species of the genus Onychostenhelia (COPEPODA: HARPACTICOIDA: MIRACIIDAE) from the Yellow Sea, Korea. 한국 해양학회 (07 년 11 월 8-9 일 ) 바. 개선및건의사항 (1) 표본의제시 - 신종 / 미기록종은연간 11 종이나오기가쉽지않음. (2) 과제평가 - 표본의점수계산이다른분야에비해서불리하게되어있음. (3) 국가생물입력시스템 - Window Vista호환문제 (Vista 입력시오류 ) - 오타로인한 DB내종목록혼란예 - 긴호랑거미 Argiope bruennichii 또는 A. bruennichi 모두맞는것으로입력되어있어같은종인데도검색에서 2종으로계산 - 진드기류벚나무응애같은국명에저자도같은데다른속다른종으로두개가분류 - 74 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 4. 무척추동물 Ⅱ Amphitetranychus vinensis Tetranychus v-innensis - 75 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 5. 자생하등생물자원조사 발굴 가. 당해연도연구목표 사업내용목표 미기록 / 신종발굴종수표본확보생물재료 ( 생체및조직 ) 확보 G ー DNA 확보 240종 16,000점 500점 80종 /160점 나. 당해연도연구개발계획 대상분류군 진균류 : 민주름버섯목, 주름버섯목, 반균버섯강, 복균버섯강, 깜부기균목, 목이버섯류불완전균문 : Penicillium 속, Aspergillus 속, Alternaria 속자낭균문 : Pyrenomycetes 류, 충생자낭균목, 갈반병균목, 누룩곰팡이목, 외자낭균목, 엔도미세스목, 흑분병균목, Hypocreales 목담자균문 : Agaricales 목, Aphyllophorales 목, Gasteromycetes 류, Discomycetes 류점균문 Proteobacteria ; alpha group beta group delta group epsilon group 세부목표및내용 기초문헌자료조사 자생종목록확인 기관소유별존재확인 조사를통한균주분리 분류군의동정및기재 분류군별종목록및분포자료작성 균주보관및 stock 화 진균특성에맞춘관리및표본제작 야외조사를통한시료채취 유전학적조사및생리학적조사 균주의보관및 DNA 확보보관 추진일정 (M+) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11-76 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 다. 연구범위 진균류 ; 민주름버섯목, 주름버섯목, 반균버섯강, 복균버섯강, 깜부기균목, 목이버섯류가루균목불완전균문 : Penicillium속, Aspergillus 속, Alternaria속자낭균문 : Pyrenomycetes 류, 충생자낭균목, 갈반병균목, 누룩곰팡이목, 외자낭균목, 엔도미세스목, 흑분병균목, Hypocreales 목담자균문 : Agaricales목, Aphyllophorales 목, Gasteromycetes류, Discomycetes류점균문 (Myxomycophyta) 원핵생물 Proteobacteria (alpha, beta, delta, epsilon, sub-group) 라. 연구내용및방법 < 진균류 > 균류자원의수집및보관, 미생물분리보존등은 CBS, ATCC, DSM, CABI 등의미생물연구소의기준에준하여실행 시료제작과관련하여균류자원의확보와 herbarium 의보관및제출용으로함께나누어준비함. 자실체를형성하는담자균및자낭균의표본준비는기존의표본제작방법으로수행 보관용시료제작과관련하여균류의자실체, 토양및식물체등은시료의종류와연구목적에따라수집 곰팡이의계통분류는분자계통분류학적인방법이외에도전통적인방법으로곰팡이의형태 ( 균사, 포자, 자실체등의미세구조, 초미세구조 ) 의 description을추가조사. 종내 strain간및종간계통분류에많이이용되고있는 rrna내 ITS (internal transcribed spacer) 영역증폭 primer 등을이용, 분자생물학적지표를계통분류에적용하거나, 신종 (new species) 및신속 (new genus) 의탐색을위하여새로운분자 marker를개발하여분류 국내고유자생균류및미기록종의탐색을위해균분리원의다양화를시도하며, 선택적균분리방법을연구 - 77 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 PCR 기술을이용하여유전자의특정부분을선별적으로증폭하며이들증폭된 DNA 를분석하고염기서열을결정하여각균주들에대한분자정보를얻은후분석프로그램들을이용하여계통도를작성하고, 그결과를바탕으로균류들의진화경로및계통관계에대한결론을추론하고, 특정유전자의염기서열을통합정리하여 DB화 국내고유자생균류및미기록종의탐색을위해시기 ( 계절 ) 별, 자연환경조건별, 지역별발생분포를조사하고균분리원, 즉서식지 ( 기주 ) 를다양화하고, 다양한선택적균분리방법등을개발활용 체계적인조사를통하여멸종위기가아닌경우가능한한표본을 3점이상을채집및제작하며, 이중완전한 2set을 국립생물자원관 에제출하도록함 < 원핵생물 > 국내에서신뢰깊은 culture collection의균주목록과 data를수집하여기존에보고된균주들에대한정보수집 원핵생물의계절적분포를감안하고다양한종이출연할장소와미기록종및신종의검출확률이높은장소및대상시료를선정 일반적인원핵생물의시료채취에따라멸균된용기를이용하여해당시료를무균조작을이용하여채취하여신속히연구실로이동하며, 시표채취시주변환경조건에대해상세히기록 다양한배지를이용하여시표로부터세균을배양하며, 배양된세균으로부터는그세균의기본적인 DNA data를확보 추출된 DNA이용하여분류군별로탐색가능한 primer를제작, PCR을수행하여쉽게원핵생물의분류군별로탐색 시료채취된장소로부터 DNA를전체조사하여 uncultured microorganism의존재를확인하고, 이원핵생물의배양방법과생물학적위치에대한연구진행 분리된모든원핵생물의 16s rrna의염기서열을분석하고, 그결과를기존에알려진 DNA의 data의자료 (gene bank 등 ) 와비교분석 유전자분석과배양을통해획득한생리학적, 생태학적특성을고려하여종합적으로분류작업진행 위연구결과를종합하여분류군별종목록, 미기록종및신종목록을확보 배양된균주를원핵생물의장기보관가능한방법을이용하여원핵생물의표본을제 - 78 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 작하여저장 체계적인조사를통하여멸종위기가아닌경우가능한한표본을 3 점이상을채집및 제작하며, 이중완전한 2set 을 국립생물자원관 에제출하도록함 < 표본제작방법 > 확증표본의제작을위해진균류자원의확보와 Herbarium의보관및제출용으로함께나누어준비 자실체를형성하는담자균및자낭균의표본준비는기존의표본제작방법으로수행. 보관용시료제작과관련하여균류의자실체, 토양및식물체등은시료의종류와연구목적에따라수집 식물병원균등기생진균류의경우다양한기주식물의병반으로부터균류를분리하기위하여병반을차아염소산나트륨으로소독한후에 Agar plate상에병반을올려놓고병원균의균사나포자가발생될때까지 25 에서배양 각각의병반으로부터형성된포자를단리하고배지에성장시켜포자, 균사형태를각각입체현미경과광학현미경으로관찰 배지에형성된균사체형태를사진으로촬영하고그특성을조사 획득된균주를 PDA배지에접종하고균사체를성장시킨후에 cork borer로직경 5mm 로찍어내어표본을제작 기타표본저장에일치하는표본은사진으로촬영하여첨부 Glycerol 보존균주제작 : 1 균주당 2-3개의 agar plug를 % glycerol 500ml를튜브에넣고 4 또는 -70 의 deep freezer에저장하며 1-5개균주를생균표본으로준비 건조표본은위의 cork borer균사체를 2cm tube에넣고동결건조하여수분을완전히제거시켜제작 불완전균류 ( 유사분열균류 ) 는완존세대의모습을자연에서잘형성하지않기때문에분류학상임의적으로형성시킨그룹으로서형태적으로종구분이매우힘들므로유전자염기서열분석또는 RAPD, RFLP 등의분자적방법및주사전자현미경을이용한미세구조관찰을주로이용하여분류 형태적으로는균에따라배지에자란콜로니 ( 균총 ) 형태, 배지변색, 균총의색, 균총의질감, 특이한모습, 향, 균사의굵기및넓이, 균사에가근이있는지여부, 균사가뻗 는형태및균사끝의분지정도, 균사끝에포자가달리는방법, 포자가달리는 균 - 79 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 사가지의길이및분지모습, 균사가지끝에포자가떨어져나오는모습, 균사가지가뭉쳐서나오는지여부및가지의색깔, 가지끝에맺히는포자가 1개냐여러개냐여부, 포자가맺히는시점이하나씩하나씩이냐동시다발적이냐여부, 포자의형태, 크기, 색, 격벽의존재유무, 격벽의수, 점질물함유여부등등이속에따라기준됨 생리, 생화학, 생태적으로는병원성의여부, 기주의종류, 병원성의정도, 서식지, 약제저항성정도 ( 서로다른항진균제및농약에대한저항력정도 ), 환경적응력 ( 건조, 포화, 온도, ph, 삼투압, UV 저항성, 최소영양배지생존성, 공생관계, 기질분해력, 생장력, 다른균류와의길항성유무등이동정및분류된균류의중요성을파악하는데기준이되고있기도함 유전적으로는 vegetative compatibility 그룹존재유무, mycovirus 함유여부, 염색체 수, +( 자성 ) 또는 -( 웅성 ) 균사로서의기능유무, 일핵균사냐이핵균사냐의여부등이분류지표가됨 유사분열균류 ( 불완전균류에속하는 ) 모식표본의확인은건조표본표면의관찰또는생채표본을키워서속또는종에따라이상열거한내용에합당한것을확인하든지, 특정유전자의분석을통해서만가능 원핵생물의계절적분포를감안하고다양한종이출연할장소와미기록종및신종의검출확률이높은장소및대상시료를선정하여시료를채취 채취된시료는일반적인원핵생물의시료처리과정에따라멸균된용기를이용하여해당시료를무균조작을이용하여채취한후신속히연구실로이동하며, 시표채취시주변환경조건에대해상세히기록 실험실에서다양한배지를이용하여시료로부터세균을분리배양하며, 배양된세균으로부터확증표본및그세균의기본적인 DNA data를확보함 표본은 colony를 70% Ethanol 및 Formalin 용액에현탁한후 Cryo vial에넣고 vortexing하여 1종당 9~15점을제조 균주가들어있는 vial은상온에보관 표본은이후 cell 특징관찰및 DNA 추출에사용될수있음 <G-DNA 확보 > 확보하고자하는 G-DNA 균체는주로확보한 colony 중가급적염기서열분석이끝 난균주 ( 미기록및신종균주 ) 를대상으로실시 - 80 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 DNA를추출한후에 Ethanol ppt후건조하거나 Speed Vac을이용하여건조하여 pellet의형태로 microcentrifuge에담음 이때 DNA의추출은해당미생물의 DNA를 kit혹은기타방법으로추출하여 Speed vac으로건조후 microcentrifuge tube (Eppendorf tube) 1.5ml, 혹은 cryo vial에넣어보관 진균류는배지에균사체를접종하고배양한후균사체를수거하고 tube에넣어동결건조하고이쑤시게로건조된균사체를마쇄하고 SDS 2% 를함유한 Lysis buffer를첨가하고 μl Proteinase K (mg/ml) 를첨가하여 1시간동안 37 에서반응 동량의 2 X CTAB buffer를첨가하고잘혼합한후에 65 에서 1시간유지시키고 Phenol:Chroroform (1:1) 를동량첨가하고잘 mix하고 1,00 rpm에서원심분리 상층액을새튜브에옮기고 1.5 volume의 Isopropanol 를첨가하여 G-DNA를침전하였으며침전된 DNA를 0 μl TE buffer에녹이고 G-DNA 시료로준비 < 미기록및신종 ( 후보 ) 발굴 > 1 진균류 본발굴사업에서발굴하고자하는균류의분류군은접합균문 (Zygomycota), 자낭균문 (Ascomycota), 담자균문 (Basidiomycota), 불완전균문 (Deuteromycota) 등전분야의균류체계를포함 균류의분류체계는아직완전히정립되어있지않은상태이어서계통분류시어떤분류체계를따라야하는지어려움이많은것이사실임 세균의경우유전자표식인자 (genetic marker) 로서 DB가잘이루어진 16S rdna의염기서열분석에기초하여계통분류가용이하게이루어지고있는반면균류의경우아직까지형태분류가매우중요하며최근에 18S rdna( 주로 ITS 유전자 ) 또는 mtdna 분석등에기초한분자계통분류가수행되고있으나분류군에따라서는아직분자표식인자가정해지지않은상태이어서분류연구에어려움이많이있을것이라고예상 국립생물자원과과제속성상환경보존과관련된습지등특수환경및다양환환경에서다양한균을분리발굴하는등지금까지미개척분야에서다양한진균류발굴 국내에서자생하는고등균류는일차적으로현지에서사진촬영을하고, 정확한분류를위해자실체채집 - 81 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 채집한고등균류는채집장소, 채집일, 채집자, 기주식물및발생상황등을기록한후자실체가손상되지않도록봉투에넣어실험실로운반 고등균류의분류및동정은자실체의색및크기, 갓의특징, 주름살의수및모양, 대의발생상태등육안으로일차동정 현미경을사용하여 Largent 등 (1977) 의방법에따라포자, 담자기및자낭, 낭상체및조직상태등미세구조를확인하여최종동정을한후필요한경우, Melzer용액, KOH, H 2 SO 4, Phenol, NaOH 또는 Guaiacol 등에의한화학반응을조사하고, 색은 Kornerup과 Wanscher(1978) 의방법으로기록 고등균류의동정은주름버섯목 (Agaricales) 은 Singer(1986) 의분류체계를따르며, 민주름버섯목 (Aphyllophorales) 은 Donk (1964) 의분류체계, 고약버섯과 (Corticiaceae) 는 Eriksson과 Ryvarden(1973-1976) 및 Eriksson 등 (1978-1984, 1988) 의분류체계, 구멍장이버섯과 (Polyporaceae) 와소나무비늘버섯과 (Hymenochaetaceae) 는 Gilbertson과 Ryvarden(1986-1987, 1993-1994) 의분류체계, 복균강 (Gasteromycetes) 은 Coker와 Couch (1928) 등의분류체계를따라동정 자낭균아문 (Ascomycotina) 은 Dennis (1981) 의분류체계에따라동정하며, 원생모균아강 (Protohymenomycetidae) 은 McNabb (1973) 의분류체계에따라동정 자실체의외부형태는 Breitenbach와 Kränzlin (1984-05) 및 Imazeki와 Hongo (1987-1988) 의도감을참고 동정된고등균류의한국명은이와이 (00) 의명명법에따름 2 원핵생물 미생물은형태적으로매우단순하고, 암컷과수컷의구별되지않는무성생식을하기때문에고등생물에적용되는종의정의는미생물에는적용될수가없음 이러한이유로근 100여년동안어떻게미생물의종의정의를내릴것인가하는문제는학자들의주된관심이되어왔으며 1987년에야비로소지금의학자들이동의하는수준의종의정의가완성되어왔음 하지만여전히계통분류학학자들사이에서는미생물종에대한개념을더욱치밀하게수립하기위하여연구가계속진행되고있음 1987년에 Wayne et al. (1987) 은미생물의종의정의를 전체 DNA의유사도가 70% 이상이거나서로다른두 DNA의재결합 (re-association) 시 Tm 값이 5 미만인 - 82 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 개체군 이라하였으며이정의는아직까지도유효하며 원핵생물계통분류국제위원회 에서인정되어사용되고있음 1987년도이래로많은수의미생물신종이보고, 등록되었으나 DNA-DNA 재결합실험을할수있는연구실이국제적으로얼마되지않아서신종의증가의속도는매우더뎠다. 따라서 DNA-DNA 재결합유사도 70% 를간접적으로추정하는분자적지표에대한연구가진행되었으며보조적분자지표로 16S rrna 유전자가사용 리보소옴에존재하는 small subunit rrna ( 원핵생물은 16S rrna, 진핵생물은 18S rrna) 는모든생물체에존재하며, 단백질합성에필수적이며, 진화의속도가매우느리고, 잘보전된염기서열과변이가심한염기서열이공존하고있어서분자진화의지표로사용될수있음 Stackebrandt 와 Goebel (04) 은그당시까지알려져있던두미생물개체사이의 16S rrna 유전자염기서열의유사도와 DNA-DNA 재결합도를분석하여, 70% 미만의 DNA-DNA 유사도를보이는두개체의 16S rrna 유전자염기서열은항상 97% 이하라는결론을내림 이러한결과가거의모든미생물학자들에게동의를얻게되어 16S rrna 유전자유사도의조사를통해폭발적인미생물신종이최근 10여년사이에등록되게되었음 하지만 16S rrna 유전자염기서열의유사도가미생물의종을결정하는데에가장중요하다고할지라도분자적지표하나만으로는신종의기록을하지못함 신종은기존의종과반드시표현형의형질이달라야만신종으로인정받게된다. 따라 서, 신종의공식적인기술을위해서는모양, 크기, 콜로니색깔등전자현미경및육안으로관찰되는표현형, G+C 함량, 인지질의구성, 퀴논의종류, 극성지방의구성등화학분류적특징, 그리고탄소원이용도, 자가영양여부, 화학합성여부등생리적인특징이종합적으로관찰되어보고가이루어져야함 16S rrna 유전자의유전정보를분석하기위해서미생물의 DNA를추출하고 PCR증폭을통해서 16S rrna 유전자를증폭하고그것을 sequencing 방법을통해서분석하는일련의과정을수행 PCR에사용할 DNA의경우, 여타의정밀한실험에비해순도자체에는크게구애를받지않으므로 DNA를추출하는과정에서과도하게정제할필요없이 bead-beating 방법이나 freezing and thawing 방법을통하여미생물의세포벽을부수어주는것에초점을맞춤. - 83 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 이렇게얻어진 DNA를주형 (template) 으로하여 PCR 반응을시행하는데, 한개의반응당 1X의 PCR 버퍼, 0uM 의 dntp (deoxynucleoside triphosphate), 400nM 의 PCR primer와 1U의 Taq polymerase를첨가한후반응을진행 PCR은 94 에서 5분후, 94 에서 1분 55 에서 1분, 72 에서 1분씩 30회반복후 72 에서 7분을반응시킴 16S rrna 유전자를증폭하기위한 PCR primer의경우많은데이터를근거로하여 16S rrna 유전자상의유전정보가매우잘보존된지역을타겟으로제작되었기때문에현재보고된대부분의미생물에서 16S rrna 유전자를증폭시킬수있음 따라서동정하고자하는미생물의종류나특징에상관없이그 16S rrna 유전자확보 경우에따라서는 DNA 추출과정을생략한채 PCR에 DNA가아닌미생물셀자체를넣어주는 colony PCR을시행하여실험과정을간소화할수도있음 PCR 생성물을앞서 PCR에이용했던 primer를이용하여 sequencing 반응을진행하고이를통해 16S rrna 유전자의유전정보를획득. < 표세부 3-1> 16S rrna 유전자를증폭하기위한 PCR primer Name Sequence Target pbact-27f TTC CGG TTG ATC CYG CCG GA Bacterial 16S rrna puniv-1492r GGY TAC CTT GTT ACG ACT T Bacterial 16S rrna 이러한유전정보를 BLAST(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/) 나 EzTaxon (http://www.eztaxon.org/) 과같은프로그램을이용하여기존의축적된데이터베이스와비교. 일반적으로 16S rrna gene sequence similarity를기존의 Approved List에등록된종의것과비교해서다음과같은기준으로동정을함. 16S rrna gene Similarity 판정 97% 이하신종 98% 이하아종 ( 신종일가능성 90%) 99% 이하변종 - 84 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 < 라벨작성방법 > 균명은종, 속명을영어로표기 채집장소는시군단위로, 채집날짜는연월일로표기 제출표본의상태를표시. (formalin F, glyceol G, ethanol E) 시료번호는샘플제출번호와일치 연구자 : 동정자 / 채집자의연구원을영어식으로표기 균명 시료채집장소 채집날짜 보관방법시료번호연구자 라벨은라벨용지를이용 (38*21 mm) 마. 연구결과 사업내용 목표 결과 달성률 (%) 발굴예정미기록 / 신종수 240종 293종 122.1 확보할표본점수 16,000점 16,587점 103.7 생물재료확보 ( 생체및조직 ) 500점 1,183점 236.6 G-DNA 확보 80종 /160점 130종 /163점 162.5/101.9 (1) 표본및생물재료확보 본연구기간중한반도분포하등생물에대한채집조사활동을수행한결과, 진균류의경우 Ascomycota에속하는 454종 3,987점, Basidiomycota 2,438종 2,941점, Deuteromycotina 5종 5점, Myxomycotina 5종점으로모두 2,902종 6,935점, 원핵생물의경우 Bacillale가 272종 2,615 점, Pseudomonadales 169종 1,501점. Rhodobacteiales 77종 832점, Enterobacteriales 79종 743-85 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 점, Actinomycetales 60 종 598, Aeromodales 58 종 559 점, Vibrionales 62 종 530 점, Clostridiales 46 종 506 점, Flavobacteriales 47 종 479 점기타 134 종 1,289 점으로모두 1,004 종 9,652 점등총 3906 종이확인되었으며, 16,587 점 ( 당해연도목표의 104%) 의표본이확보되어당해연도연구목 표를달성하였다. 이들은액침및건조표본으로제작 보관되어있다. 생체및조직등의생 물재료는 Ascomycota 78 종 176 점, Basidiomycotina 3 종 3 점, Bacillales 등원핵생물 1,004 종 1,004 점등총 1,085 종 1,183 점 ( 목표대비 237%) 이확보되었다. 당해연도연구결과확보된하 등생물자원표본및기타생물재료의목록및상세한채집정보는 < 세부 3 부록 > 에제시되어 있다. 당해연도연구목표 표본및생물재료확보 : 총 16.000 점 - 대상분류군진균류 : 민주름버섯목, 주름버섯목, 반균버섯강, 복균버섯강, 깜부기균목, 목이버섯류불완전균문 : Penicillium 속, Aspergillus 속, Alternaria 속자낭균문 : Pyrenomycetes 류, 충생자낭균목, 갈반병균목, 누룩곰팡이목, 외자낭균목, 엔도미세스목, 흑분병균목, Hypocreales 목담자균문 : Agaricales 목, Aphyllophorales 목, Gasteromycetes 류, Discomycetes 류점균문 : Proteobacteria ; alpha group, beta group, delta group, epsilon group 연구사업결과총 17,770점확보 ( 목표 - 확증표본 16,587 점 - 생물재료 1,183점 - GDNA 130종 / 163점 - 확증표본 : 16,000 점 - 16,587 점확보 ( 목표의 104%) - [ 세균류 ] 1,004 종확보 ; Bacillales 272 종 ; Pseudomonadales 169 종 - 86 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 ( 계속 ) 당해연도연구목표 연구사업결과 - 확증표본 : 16,000점 ; Rhodobacterales 77종 ; Enterobacteriales 79종 ; Actinomycetales 60종 ; Aeromonadales 58종 ; Vibrionales 62종 ; Clostridiales46종 ; Flavobacteriales 47종 ; etc. 34종 [ 진균류 ] 2,902종확보 ; Ascomycota 454종 ; Basidiomycota 2,438종 ; Deuteromycota 5종 ; Myxomycota 5종 [ 세균류 ] ; Actinomycetales 등을포함한 1,004 종 / 9,652 점 [ 진균류 ] ; Ascomycota 등을포함한 2,902 종 /6,935 점 - 표본및기타생물재료 ( 생체및조직 등 ) 의체계적인확보 : 500 점 - 1,183 점확보 ( 목표의 237 %) [ 세균류 ] 1,004 종 / 1004 점 [ 진균류 ] 81 종 / 179 점 - G-DNA: 80 종 /160 점 - 130 종 / 163 점 ( 목표의 162%/101%) [ 세균류 ] 91 종 / 114 점 [ 진균류 ] 39 종 / 49 점 - 87 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 (2) 미기록및신종 ( 후보 ) 발굴 본발굴조사결과, 진균류의경우 50 종의미기록을발굴하였다. 주발버섯과에속하는 1 속 genus Caloscypha Boud. 와 1 분류군 Caloscypha fulgens (Pers.) Boud., 종버섯속의 Conocybe fragilis (Peck) Sing. 복균류의방귀버섯과속하는 Geastrum pectinatum Pers., 등 1 속 3 분류 군이새로이추가기록되었다. 또지금까지분리된기주에대한보고가없는식물내생곰팡이 및토양유래의곰팡이분류군들로서전남장성의백양사인근의고사리식물체의잎에서식물내생균 (endophyte) 인 Pestalotiopsis sp., Fusicoccum sp. 근연종, Hypoxylon sp. 근연종등이분리되었으며, 광주시용봉동전남대인근의왕벗나무잎으로부터내생균으로처음분리된 Colletotrichum boninense와또한백양사소나무근권토양으로부터분리된 Myxotrichum sp. 와백양사인근토양으로부터분리된 Endomyces sp. 와대전지역아카시아근권에서분리된 Cordyceps sp. ( 불완전세대 : Beauveria sp.) 가포함된다. 특히이러한균들은현재기주식물 체및토양으로부터국내미기록균이면서몇개균주의경우는향후연구에따라서는신종균주가될가능성이있는균으로생각되어진다. 특히, 28S rdna 유전자분석에기초한 Fusicoccum sp. 근연종, Hypoxylon sp. 근연종등은향후다른분자마커를이용한심도있는연구가필요할것으로생각되고있다. Ampelomyces quercinus, A. foetidus, A. sydowii, Cladosporium dominicanum, C.oxysporum, C. sphaerospermum, C. tenuissimu, C. uredinicola, Eurotium amstelodami, E. chevalieri, E. repens, E. rubrum, Penicillium fellutanum, P. radicicola, P. sclerotigenum, P. toxicarium, Phome herbarum등의미기록종도 이번연구를통하여확인되었다. Aspergillus niger 는국내에서땅콩및양파에검은곰팡이병 을일으키는것으로보고되어있으나이번조사에서는스트로브잣나무의내생균으로처음발 굴되었다. Cladosporium cladosporioides 는감나무그을음병과벼이삭마름병균으로보고되어 있으나민들레와소나무의내생균으로는처음보고되는것이다. Penicillium polonicum 은감 귤에서분리된바있으나새로운기주로이를처음보고한다. 자낭균류의 Microascales 목에속 하는 Ceratocystis sp., Herpotrichiellaceae 과에속하는 Exophiala sp., Davidiellaceae 에속하는 Cladosporium sp., C. sphaerospermum, Trichocomaceae 과에속하는 Penicillium adametzii, P. minioluteum, P. pinophilum, P. sclerotiorum, P. variabile, Edyuillia athecia, Aspergillus penicillioides, Hypocreales목에속하는 Fusarium sporotrichioides, Ophiostomataceae 과에속하는 Sporothrix sp., Saccharomycetaceae 과에속하는 Pichia zsoltii, Saccharomycopsidaceae 과에속하는 Saccharomycopsis crataegensis, Xylariales목에속하는 Microdochium sp., - 88 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 Amphisphaeriaceae 에속하는 Pestalotiopsis sp., Phoma 속인 P. glomerata., 담자균류의 Filobasidiales목에속하는 Cryptococcus vishniacii, Sporidiobolales목에속하는 Rhodotorula mucilaginosa 등도우리나라에서발견된균주로새로이추가되었다. 원핵생물의경우모두 243종의균주가신종및새로운아, 변종의후보균주로발굴되었다. 이들은 Rhodobacteriales 42, Flavobacteriales 32, Bacillales 29, Pseudomonadales 41, Enterobacteriales 22, Clostridiales 18, Actinomycetales 13, Alteromonadales 14, 기타분류군 32종등이었으며이중 1 분류군이신종으로나머지 63 분류군이아종후보로그리고 60 분류군이변종후보로간주되었다. 당해연도연구목표 연구사업결과 미기록 / 신종발굴 : 240 종 293 종 ( 목표의 122%) - 세균 : 243 종 1. 신종 : 1종 ; Actinomycetales : 7종 ; Alteromonadales : 6종 ; Bacillales : 15종 ; Clostridiales : 15종 ; Flavobacteriales : 24종 ; Rhodobacterales : 27종 ; etc. : 26종 2. 아종 : 63종 ; Actinomycetales : 2종 ; Alteromonadales : 3종 ; Bacillales : 11종 ; Clostridiales : 3종 ; Enterobacteriales : 10종 ; Flavobacteriales : 3종 ; Pseudomonadales : 종 ; Rhodobacterales : 3종 ; etc. : 8종 - 89 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 당해연도연구목표 연구사업결과 3. 변종 : 60종 ; Actinomycetales : 4종 ; Alteromonadales : 5종 ; Bacillales : 3종 ; Enterobacteriales : 5종 ; Flavobacteriales : 5종 ; Pseudomonadales : 15종 ; Rhodobacterales : 12종 ; Vibrionales : 8종 ; etc. : 3종 - 버섯 ( 미기록종 :50종) 자낭균분류군담자균분류군 : 종기주미기록종 : 3종기타 : 27종 결과적으로하등생물세부분야의 2 차년도발굴사업을통하여모두 50 종의국내미기록종이 확인되었으며 1 종의신종후보및 63 종의새로운아종후보균주, 60 종의변종후보들이개 발되어목표대비 122% 의성과를획득하였다. (3) 하등생물자원의생물학적논의 ( 가 ) 미기록및신종 ( 후보 ) Clostridium 은 Firmicutes 문에속하는절대혐기성세균으로서자연환경및다양한환경 에서발견된다. 다양한질병의병원균이기도하며, 보톡스나포자를이용한암치료법등의료에 이용되기도해중요한분류군중하나라평가받고있다. Clostridium 은종구성이매우이질적 으로되어있어서, 1994 년에 Collins 등에의해 l9 개의분류군으로개정되어있다. 그중표준종 (type species) 인 Clostridium butyricum 을포함한제 1 군 (cluster I) 이진정한 Clostridium 으 - 90 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 로인정받고있으며, 현재까지 170 개의종이인정되고있다. 이번연구에서모두 16 종의 Clostridiales 에속하는신종후보가발견되었으며발견된 Clostridium은대부분제 1 군에속하는것으로판명되었으며제 11 군과제 14a군역시많이발견되었다. 또한발견된신종및아종에서도대부분을차지하고있다. 새로운신종후보군인 Lysobacter sp. 와 Pedobacter sp. 몇몇종으로계통학적인분석을통해신종후보군에진화적인유연관계를살펴보았다 ( 그림세부3-2). 발굴기간중시화호인근지역의저질층에서분리된균주인 B808은 16S rrna의염기서열분석결과가기존에보고된다른균주들과비교하면 91% 이하의낮은유사도를보여신속의균주로생각된다 ( 그림세부 3-3, 3-4). 이미언급한바와같이원핵생물의종의개념은유전학적유사성에그바탕을두고있으며그유사성을구분하는확실한기준은 total genome 의개념으로 70% 이상의유사도를갖을경우이들은동일종으로간주한다. 그러나이의실험적, 현실적한계때문에 total genome을 16S rrna의염기서열분석으로대치하고있으며이경우유전자전체의유사도와 16S rrna의유사도사이의상관관계에대해서는아직도학자들간에의견의차이가존재한 다. 그러나차이가있다하여도그범위는최고 3% 차이를벗어나지는않으며다수의분류학 자들은 2.5% 이상의 16S rrna 의염기서열차이가나타나는두균주는별도의종에속하는것 으로보아야한다고생각하고있다. 따라서그차이가 9% 이상의경우에해당하는 B808 균주 는확실이신종이아닌신속에해당하는균주라고판단된다. 신속의경우는그유전적특성뿐아니라 생리적, 생태적특성에서도기존의종혹은속 의다른균주들과차이를보여야한다. 이를위하여균주의일반적인특성과생리학적특성 ( 그림세부 3-3) 을조사한결과이균주는그람음성의간균으로특이하게탄소원으로탄수화 물을거의이용하지못하며대신단백질및아미노산을주로사용하는독특한생리적특성을 갖고있음을확인하였다. 또한이균주는수은등의중금속에도내성을지니고있었다. - 91 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 < 그림세부 3-2> Lysobacter sp. 와 Pedobacter sp. 몇몇종신종후보군의진화적인유연관계 - 92 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 < 그림세부 3-3> 신속후보균주 B808 의전자현미경사진 AJ4576 Chryseobacterium daecheongense AJ309324 Chryseobacterium defluvii DQ256729 Chryseobacterium wanjuense AY315443 Chryseobacterium formosense DQ318789 Chryseobacterium taiwanense AY883416 Chryseobacterium taeanense AY883415 Chryseobacterium soldanellicola AJ271009 Chryseobacterium scophthalmum AM040439 Chryseobacterium piscium EF4450 Chryseobacterium haifense AM159183 Chryseobacterium hispanicum AJ843132 Chryseobacterium taichungense AJ575430 Cloacibacterium normanense U60101 Riemerella anatipestifer M58772 Chryseobacterium gleum M58773 Chryseobacterium indologenes EF154516 Chryseobacterium flavum AJ271010 Chryseobacterium joostei AJ871397 Chryseobacterium vrystaatense AM489609 Chryseobacterium luteum EF554366 Sejongia marina AY553294 Sejongia jeonii AY553293 Sejongia antarctica AF493696 Epilithonimonas tenax AJ704540 Elizabethkingia meningoseptica AB071953 Elizabethkingia miricola 808-27F U87101 Ornithobacterium rhinotracheale 0.01 < 그림세부 3-4> 신속후보균주인 B808 의진화학적유연관계 - 93 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 < 표세부 3-3> 신속후보균주 B808 의생리학적특성 Carbon Source α-cyclodextrin Dextrin Glycogen Tween 40 Tween 80 N-Acetyl-D-Galactosamine N-Acetyl-D-Glucosamine Adonitol L-Arabinose D-Arabitol - 94 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 Ampelomyces 속은자낭균문 (Ascomycota), 불완전균강 (Deuteromycetes, mitosporic fungi), 분생자각균목 (Sphaeropsidales) 에속하는균으로서병자각 (pycnidium) 을형성하는균인데 A. quisqualis 는흰가루병균 (powdery mildew) 에기생하는생물적방제제로잘알려진균이다. A. quercinus는잣나무 (PInus koraiensis) 의잎조직내부에서분리한내생균류 (endophytic fungus) 로서국내에서는보고된바가없으며처음보고되는균이다 ( 그림세부 3-5). Aspergillus 속은자낭균문 (Ascomycota), 불완전균강 (Deuteromycetes, mitosporic fungi), 총생균목 (Moniliales), 담색선균과 (Moniliaceae) 에속하는균으로서, 이번조사에서 3종의국내미기록 Aspergillus 가발굴되었다. 그중 A. niger( 그림세부 3-5) 와 A. sydowii( 그림세부 3-6) 는식물내생균으로서스트로브잣나무 (Pinus strobus) 의잎조직속에서분리되었고, A. foetidus는토양에서분리되었다 ( 그림세부 3-6). Ampelmomyces quercinus Aspergillus niger < 그림세부 3-5> Ampelomyces quercinus, Aspergillus niger 의형태 Aspergillus sydowii < 그림세부 3-6>Aspergillus sydowii, A. foetidus 의형태 A. foetidus - 95 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 Cladosporium속은자낭균문 (Ascomycota), 불완전균강 (Deuteromycete, mitosporic funfi), 총생균목 (Moniliales), 암색선균과 (Dematiaceae) 에속하는균으로서공기, 식물병원균, 토양중에흔히분포하는균으로알려져있으나식물내생균중에서는국내에서보고된바없다. 금번발굴조사를통하여식물내생균중에서 5종의국내미기록 Cladosporium 균이발굴되었다. C. cladosporioides는민들레와소나무조직속의내생균으로처음보고되며 ( 그림세부 3-7), C. dominicanum이두릅나무의잎조직에서분리되었고 ( 그림세부 3-7), C. oxysporum이소나무잎조직에서분리되었으며 ( 그림세부 3-8), C. sphaerospermum이소나무잎조직에서 ( 그림세부 3-8), C. tenuissimum이민들레와두릅나무에서 ( 그림세부 3-9), C. uredinicola가민들레에서 ( 그림세부 3-9) 처음으로분리되었다. Cladosporium cladosporioides C. dominicanum < 그림세부 3-7>Cladosporium cladosporioides, C. dominicanum 의형태 Cladosporium oxysporum C. sphaerospermum < 그림세부 3-8>Cladosporium oxysporum, C. sphaerospermum 의형태 - 96 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 Cladosporium tenuissimu < 그림세부 3-9>Cladosporium tenuissimu, C. uredinicola 의형태 C. uredinicola Eurotium amstelodami < 그림세부 3-10>Eurotium amstelodami, E. chevalieri 의형태 E. chevalieri Eurotium repens <그림세부3-11>Eurotium repens, E. rubrum 의형태 E. rubrum Eurotium 속은자낭균문 (Ascomycota), 누룩곰팡이목 (Eurotiales), 누룩곰팡이과 (Eurotiaceae) 에속하는균으로서무성세대 (anamorphic stage) 는 Aspergillus 이다. 이속은자 - 97 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 연계에널리분포하는균으로알려져있으나국내에서는그다양성에관한연구보고가미진한실정이다. 본연구를통하여국내토양과건초등에서 4종의미기록 Eurotium 즉 E. amstelodami( 그림세부 3-10), E. chevalieri( 그림세부 3-10), E. repens( 그림세부 3-11), E. rubrum( 그림세부 3-11) 이발굴되었다. Penicillium fellutanum < 그림세부 3-12>Penicillium fellutanum, P. radicicola 의형태 P. radicicola Penicillium sclerotigenum P. toxicarium < 그림세부 3-13>Penicillium sclerotigenum, P. toxicarium 의형태 Penicillium속은자낭균문 (Ascomycota), 불완전균강 ( Deuteromycetes, mitospric fungi), 총생균목 (Moniliales), 담색선균과 (Moniliaceae) 에속하는균으로서자연생태계에널리분포하는균이다. 이번조사에서 2종의식물내생 Penicillium과, 1종의토양분리 Penicillium, 그리고 1종의식물병원 Penicillium이국내에서최초로발굴되었으며 1종은새로운기주에서분리되었다. 미기록식물내생 Penicillium은리기다소나무에서분리된 P. fellutanum( 그림세부 3-12), 토양에서분리된 P. radicicola( 그림세부 3-12), 리기다소나무에서분리된 P toxicarium( 그림세부 - 98 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 3-13) 이었고식물병원 Penicillium은저장중인마의부패에관여하는 P. sclerotigenum이었다 ( 그림세부 3-13). 마에서는 P. polonicum도처음으로 ( 기주미기록종 ) 보고되었다 ( 그림세부 3-14). Phoma는자낭균문 (Ascomycota), 불완전균강 (Deuteromycetes, mitosporic fungi), 분생자각균목 (Sphaeropsidales) 에속하는균으로서병자각 (pycnidium) 을형성하는균으로서금번조사에서 P. herbarum이소나무내생균으로서최초로발굴되었다 ( 그림세부 3-14). Penicillium polonicum Phoma herbarum < 그림세부 3-14>Penicillium polonicum, Phoma herbarum 의형태 Ceratocystis 속에는고구마에검은무늬병을일으키는 Ceratocystis fimbriata, 참나무마름 병을일으키는 C. fagacearum 등식물에여러가지병을일으키는종이많이있다. 본발굴 조사를통하여식물병원에관여하는 Ceratocystis속에대한검증을확대할수있었다. Sporothrix sp. 는나무에침입하여수목병을야기시키는데관여하는종의불완전세대이다. Sporothrix의완전세대는목재변색을야기시킴으로써임목산업에피해를주는균류가많이포함되어있다. 게다가 S. chenckii는인체병원성균으로많이알려져있다. 본발굴조사로 Sporothrix속에대한검증을확대할수있었다 ( 그림세부3-15). Cladosporium sp., C. sphaerospermum, P. adametzii, P.minioluteum, P. pinophilum, P. sclerotiorum, P. variabile, Aspergillus penicillioides 은환경에 존재하면서인체에알러지를 일으킬수있는공기의질과관련되어취급되고있는균류중의하나이다. 특히최근국내에서 도실내환경에서의공기의질이중요시되고있는가운데바이오에어로졸의일부로서이들분 류군에대한향후분포조사가요구된다. Pichia zsoltii, Saccharomycopsis crataegensis 는많 이알려져있지는않지만참나무시들음병이걸린감염목과매개충에서분리된균주로국내 전국적으로발생하여문제가되고있는참나무시들음병에관여하는매개충또는병원균과공 - 99 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 생관계가있을것이라추측되어앞으로많은연구를필요로하는균이다 ( 그림세부 3-15). Sporothrix sp. Ceratocystis sp. Pichia zsoltii < 그림세부 3-15> Sporothrix sp., Ceratocystis sp., Pichia zsoltii 의배지사진과현미경사진 주발버섯목주발버섯과속하는 Caloscypha fulgens (Pers.) Boud. (1885) 는제주도선흘곶 자왈삼나무림내지상에 2 월에발생하는종으로국내에서처음으로발견되었다. 유럽에서는 주로고산지대의침엽수림또는활엽수림내에발생하는종이며, 일본에서는봄-초여름에침엽수림내지상에발생한다하였으나, 국내 ( 제주도 ) 종은 2월에해발 100m 이내저지대의삼나무림에서만발생한다는점에서국외종과발생환경적으로매우상이하므로앞으로세밀한조사관찰이요구된다 ( 그림세부 3-16). 주름버섯목소똥버섯과에속하는 Conocybe fragilis (Peck) Sing. (1950) 는강원인제점봉 산의옥수수밭에 8 월에군생하던버섯이다. 동구릉에서발견이되었으나아직국내에기록된 예가없으며, 활엽수부식토에서발생하는종이다 ( 그림세부 3-16). 복균류의방귀버섯과속하는 Geastrum pectinatum Pers.(1801) 07 년 10 월에 월정사입 구전나무림에서국내처음으로발견하였으며, 내피막이청색을띠는완벽한자실체를수집하 였다. 세계적으로희귀종이며, 국내버섯유전자원으로서가치가매우높다 ( 그림세부 3-16). - 100 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 Caloscypha fulgens (Pers.) Boud Conocybe fragilis (Peck) Sing Geastrum pectinatum Pers. < 그림세부 3-16> Caloscypha fulgens, Conocybe fragilis, Geastrum pectinatum 의형태 버섯류는지구생태계에서유기물을분해하는분해자로서중요한역할을담당하고있으며, 일부버섯은분해된모든무기양료를수분과함께흡수하여뿌리를통하여식물 ( 기주 ) 에전달하고버섯이성장하는데필요한양분은기주로부터공급받아공생하고있어부휴균뿐만아니라공생균은광합성을하는식물성장에중요한역할을하고있다. 하지만, 우리나라부휴균과 - 101 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 공생균에관한분류학적연구는그들이차지하는생태적인중요성에도불구하고인프라구축의미흡과관련연구자의절대적인부족으로답보상태에놓여있다. 특히, 이러한버섯류는비가온후습기가풍부할때짧은시기에발생하고없어지므로 유성세대생존시기가매우짧다 적기에수집하지않으면발생시기를놓치게되어분류학적검토가매우제한적이다. (4) 논문, 학술발표및도서출판등 ( 가 ) 논문김원기, 등건신, 이하나, 유승헌, 07. Penicillium sclerotigenum and P. polonicum associated with tuber rot of the Chinese yam in Korea. 한국미생물연합국제학술대회발표 (07. 10. 11-12) Seok, S-J. et al. (07, 3/4), Antioxidant polyphenols from the mycelial culture of the medicinal fungi Inonotus xeranticus and Phellinus linteus (J. Nat. Prod. 70: 3/6, ISSN : 0163-3864 ) Seok, S-J. et al. (07, 5/7), Effect of Heavy Metals on Mycelial Growth Color Mutants in Pleurotus ostreatus, 한국균학회, 35(2) Seok, S-J. et al. (07, 3/3), Screening Test of Wild Mushroom Methanol Extracts for Fibrinolytic and α-glucosidase Inhibitory Activity, 한국균학회, 35(2) ( 나 ) 학술발표전영재, 차상도, 김성환. 지하철역사에서의주요실내진균의종류. 07 제 1차아시아포럼및제 4회한국실내환경학회연차학술대회 (07. 9. 14) 석순자, 07. A Taxonomic Study of Genus Pluteusin Korea, Xian, China 한중균학회발표. (07. 11. 17-22) 김미선, 석순자등, 07. A Taxonomic Study of Family Lycoperdaceae in Korea. 한국균학회춘계학술발표 (07. 5. 12 ) ( 다 ) 도서출판독버섯지침서발간 ( 이문출판사 07. 12. 31) 야생독버섯류개나리광대버섯등 60종에대하여독성분으로그룹을나누고발생지역의생태자료수록 - 102 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 ( 라 ) 기타석순자, 07. 12월호과학전문잡지 ( 동아사이언스 > 버섯관련글기고석순자. 07. 12월, 생태전문잡지 ( 자연과생태 ), < 곰팡이의화려한변신버섯 > 자료기고석순자, 07. 11., 도서출판예림당 <Why? 독이있는동식물 >, 독버섯류자료제공석순자, 김양섭, 08. 2-12월호, 과학전문잡지 ( 동아사이언스 >, < 공생버섯류와기생버섯류의버섯생태자료연재 > 바. 개선및건의사항 (1) 진균내의분류그룹에따라불완전균류의취급문제에있어최근국제적추세가유전자와게놈분석을통해분류를하는실정에서형태에기준하여불완전균류로취급하여오던균류를유전자분석을하여 Phylogram을그리면대부분자낭균류나담자균류로나오는데이들균류를 DB 상에서불완전균류 ( 유사분열균류, 전통적인형태분류에서사용하는분류그룹이며임의적그룹임 ) 로취급해서마련해야할지자낭균에또는담자균류로취급해서마련해 야할지문제이다. GenBank 에등록을하기위해서는그곳의분류체계를따르는데분자생물 학적방법을이용하지않는학자들은그분류체계를따르지않는이견이있어서어려움이있 다. 형태적으로분석으로임의적속명종명은불완전균류이더라도유전자분석에따른결과가 있으면자낭균또는담자균분류체계를따라 DB 에정리하도록하여야하며, 더불어임의적속 그룹에대한 DB 체계도만들어져야할것이다. (2) 많은전문학자들이지난 30 여년간버섯류자원에대한채집조사활동을수행한결과 매년최대연구자한사람이버섯을수집하여동정하고표본을제작하는일은 0 점을넘지못 하였다. 그이유는버섯류는채집하면현장에서생태적분류학적사진을찍고, 대부분의버섯 류는어린시기, 성장기노숙기에따라자실체의모양이나색깔등이다양할뿐만아니라, 몇 시간내에색깔이나형태적특징이변하기때문에채집과동시에그특징을육안적으로빨리 기술을하고, 부패하기전에건조기에서표본을제작하여야하기때문이다. 그리고표본을 Herbarium 에증거표본으로보존하고, 종을동정하기위해서는표본을꺼내현미경하에서포자, 담자기, 표피구조등미세구조를조사관찰하며 drawing 하고, 그특징을기술하여야함으로 - 103 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 5. 하등생물 그자료를가지고종을확정하므로서하나의분류군이끝이나는것이다. 이러한일련의과정 은상당한시간을요하기때문에연간 0 점이상은정상적으로본과제를수행하고, 요구하는 과제결과물을제출하는데적절하지못하므로본사업을실제수행하는전문연구진의의견이 수렴되기를바란다. - 104 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 6. 하등식물 6. 자생하등식물 (algae) 자원조사 발굴 가. 당해연도목표 사업내용목표 발굴예정미기록 / 신종수 확보할표본점수 160 종 16,000 점 나. 당해연도연구개발계획 대상분류군편모조류, 규조류, 홍조류 세부목표및내용 기초문헌자료조사 자생종목록확인 분포현황확인 야외조사를통한표본확보 표본제작 분류군의동정및기재 분류군별종목록및분포자료작성 추진일정 (M+) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 다. 연구범위 편모조류 홍조류 규조류 - 105 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 6. 하등식물 라. 연구내용및방법 연구기간중가능한많은기존자료를활용하여미기록종및특정하등식물의서식가능성이높고종다양성이풍부할것으로예상되는지역과출현시기를판단하여조사를수행 채집지역에서출현하는조류에대한광학현미경및전자현미경을활용한상세한검경 출현종에대한출현장소와시기, 서식지환경등의서식현황을상세히기술 국내 외분류도감을근거로하여학명을결정 분류군별종목록, 미확인기록종목록작성 채집된조류에대하여생태환경, 즉출현시기, 조간대서식처, 우점종, 준우점종등을기록 채집된재료는현장에서 5~10 % 포르말린으로고정하여실험실로운반 고정된재료중일부는실험실에서표본을제작 홍조류의경우, 동정작업중내부구조를관찰하기위해서는박편절단기를사용하거나, 수동으로절편을만들어 1 % 아닐린블루수용액으로염색한후 검경 규조류와편모조류의경우는마운팅메디어등을사용하여영구표본을제작 미기록종이발견되면분류학적인기재문과함께생태환경도같이기술 < 편모조류 > 부유성편모조류는채수기또는식물플랑크톤네트를이용하여채집 채집된편모조류는현장에서 formaldehyde로고정시키거나시료를실험실로운반 저질속의와편모조류의포자를채집하기위해 gravity corer 또는 mud crab을사용 포자를형성하는와편모조류는저질시료에서포자를발아시킴 < 규조류 > 부유성규조류는채수기및식물플랑크톤네트를이용하여채집하며, 부착규조는솔 등을이용하여피부착물을긁어채취 피부착물은수중의돌이나수생식물등을선택하며, 저니나수중토양층위의 규조는 스포이드나그랩을사용하여채집 - 106 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 6. 하등식물 < 홍조류 > 사리때에조사지역의조간대또는저조선아래의해조류를일자드라이버를이용하여부착기에서부터전체를완전하게채집 해안암반의파도를잘받는곳과보호된곳을따라서중점적으로채집하며, 조사지역의해안을넓게다니면서바위및파도에밀려온것등모두채집 다른해조에착생, 기생하는해조류들은숙주해조류와같이채집 작은돌이나조개껍질에빛깔이다른것이있을때는주의깊게살펴보면서채집 간조시에해수가그대로고여있는조수웅덩이에서식하는해조류들도유의해서채집 해조류는같은종류라해도생육장소에따라모양이나, 색깔이아주다르다. 그러므로동일종이라고생각되는것도많이채집하도록하며, 생식기관도분류상중요하므로가급적성숙체를채집 채집한재료들은플라스틱통, 비닐봉투및양파주머니등에넣어운반 채집한해조류는현장에서 5-10% 포르말린-해수액에고정하거나, 얼음이들어있는아이스박스에넣어서실험실로운반 < 표본제작방법 > 1 플랑크톤 ( 규조류 ) 시료내고정액이나해수염분기제거를위해증류수를사용하여시료를 5회세척 시료들만남기고거의건조될정도로가능한한상등액을제거 위의시료와동량의 HNO 3 와 4배의 H 2SO 4 를첨가 시료를알콜램프로끓인다. 끓는동안 bubble이확실히생길때까지끓여야되나넘치지않도록한다. 끓인시료는약 분정도식힘 ( 끊일때강산이기에특별한조심이요구됨. 시험관입구를시험자와반대쪽에위치시키며시험관을약 45도정도기울임.) 증류수로 5회이상세척하며, 물기를가능한한제거 cleaning된시료를커버유리위에적정량떨어뜨림 ( 시료를고루게퍼트리기위해커버유리는 96% 에탄올에세척한것을사용 ) 슬라이드건조기에서건조또는하루동안방치하여시료를건조 - 107 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 6. 하등식물 봉입제 (mountant) 를커버유리위에떨어뜨린후슬라이드위에거꾸로덮는다. 이때슬라이드내에기포가발생했을시아주약한미열로기포를제거 슬라이드위커버유리주변에나온봉입제를알코올로닦아냄 투명한 nail polish ( 매니큐어 ) 으로주변을봉합하고, 동정라벨을붙임 슬라이드상자에넣고, 봉입제가녹아내릴수있으므로서늘한곳에보관 2 해조류 조간대에생육하고있는해조류를부착기까지완전한개체로채집 실험실로가져온해조류샘플을바트에담아서담수로세척하여염분과이물질을제거 녹조류, 갈조류, 홍조류로분류 깨끗한대지위에개체가겹쳐지지않도록잘펴주는데 ( 힘들면물속에서작업을함 ), 이때샘플에손상이가지않도록조심함 시료에있는수분을흡수하기위해거즈로덮어줌 그위에흡수지 ( 또는신문지 ) 를올림 마지막으로샘플이압착되도록무거운물체를이용하여압축시켜줌 표본이완전히건조해지기전까지흡수지를자주갈아줌 처음에는하루에 2회이상갈아주어야하며완전히건조된새것을사용하고거즈는최종적으로건조표본이만들어질때까지떼어내지않음 건조표본이완성되면거즈를떼어내고 30 x 42cm 크기의표본대지위에붙임 거즈를떼어낼때건조해진표본이부서지지않도록주의 라벨을부착한후보관 < 라벨작성방법 > 1 플랑크톤 영구슬라이드에는맨위에기관명, 채집지, 채집날짜, 학명, 슬라이드번호, 채집자등을아래와같이명기 - 108 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 6. 하등식물 라벨의크기는가로 23cm x 세로 23cm 로제작 라벨은슬라이드오른쪽끝에부착 참고로본연구팀에서자체적으로제작하여본과제에서공동으로사용 2 해조류 학명, 과명, 국명, 채집자, 채집장소, 채집날짜등을포함 라벨의크기는가로 12 x 세로 7cm 정도로제작 라벨을표본대지 (30 x 42cm) 오른쪽하단에부착 참고로본연구팀에서자체적으로제작한라벨을예시 - 109 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 6. 하등식물 < 채집라벨 > 1 플랑크톤 플랑크톤의채집은통상적으로 250ml 유리병또는플라스틱병으로하므로별도라벨없이병위에채집정보를기록 채집지는약호 ( 예, 경남 : GN, 경기 : GG, 전북 : JB, 제주 : JJ) 를대괄호를사용하고진하게하여쉽게알수있도록기입하고, 군이나시단위의지역을영문명으로표기하여, 국명의영문명으로의변경은 국어의로마자표기법 ( 문화관광부고시, 제 00-8호 ) 을따름 ( 섬은 Is. 등 ) 채집일시를기입. ( 年, 月, 日의순서로하되, 月의경우는日과의혼동을피하기위해로마자로사용 채집의정보는경위도, 채집자, 기타필요한정보를기입 2 해조류 해조류의채집은비닐봉지를사용하며, 별도라벨없이맥직펜으로비닐 봉지에채 집정보를기록 채집지는약호 ( 예, 경남 : GN, 경기 : GG, 전북 : JB, 제주 : JJ) 를대괄호를사용하고진하게하여쉽게알수있도록기입하고, 군이나시단위의지역을영문명으로표기하여, 국명의영문명으로의변경은 국어의로마자표기법 ( 문화관광부고시, 제 00-8호 ) 을따름 ( 섬은 Is. 등 ) 채집일시를기입. ( 年, 月, 日의순서로하되, 月의경우는日과의혼동을피하기위해로마자로사용함 채집의정보는경위도, 채집자, 기타필요한정보를기입함 < 표본보관방법 > 1 플랑크톤 제작된영구프레파라아트 ( 슬라이드 ) 는채집시간별로정리 슬라이드상자는서늘한별도의표본장에넣음 표본실보관온도는연중 를유지하도록함 - 110 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 6. 하등식물 표본장마다통풍이잘되도록함 2 해조류 제작된건조표본을분류군별로정리 해충에의한건조표본의손상을방지하기위하여 -30 에서 1주일간냉동하는방법으로살충및살균 살균된건조표본을표본장에분류군별로보관 표본실보관온도는연중 를유지 표본장마다해충기피제로나프탈렌을넣어둠 마. 연구결과 사업내용목표결과달성률 (%) 발굴예정미기록 / 신종수 160 종 159 종 99.4 확보할표본점수 16,000 점 16,831 점 105.2 (1) 표본및생물재료확보 2 차년도한반도분포하등식물 ( 규조강, 편모조강, 와편모조강, 홍조강 ) 에대한채집조사활 동에서확보된분류군은다음과같다. 규조강 64 과 198 속 565 종, 와편모조강 39 과 56 속 5 종, 편모조강 11 과 24 속 7 종, 홍조강 53 과 94 속 168 종총 167 과 372 속 1,145 종의표본및생물재료확보를위한확증표본은 16,831 점 (105.2%) 으로당해년도표본목표치 16,000 점의 831 점을초과달성하였다. 이중 2,886 점은 건조표본이며, 13,945 점은슬라이드표본으로제작하였다. 제작된규조류및편모조류의슬라 이드표본의경우, 각각의슬라이드표본내의깃대종을슬라이드표본이름으로명명하였으며, 그위치는 Object marker lens 로표시하였다. 하등식물은슬라이드표본특성상동일지역의 슬라이드표본의깃대종 1 종에대해 5 점까지중복인정이가능하며, 동일종이라하더라도채집 일자및채집장소가다를경우에는별개의표본으로인정한다. - 111 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 6. 하등식물 당해연도연구목표 표본및생물재료확보 : 총 16,000 점 - 대상분류군 : 규조강, 편모조강, 홍조강등 3 강 총 16,831 점확보 - 확증표본 : 16,831 점 연구사업결과 - 확증표본 : 16,000 점 - 확증표본 : 16,831 점 (2) 미기록및신종 ( 후보 ) 발굴 본미기록및신종 ( 후보 ) 발굴조사결과확인된미기록종은총 159분류군 ( 당해연도목표의 99.4%) 으로조사되었으며, 규조강이 78종, 와편모조강 49종, 편모조강 32종으로확인되었다. 본조사에서발굴된미기록종및신종은다음과같다. 1 규조강 -Achnanthes sp. -Amphipleura lindheimeri -Amphiprora paludosa -Amphora costata var.inflata -Amphora sp. -Amphora terroris -Bacteriastrum sp. -Caloneis alpestris -Caloneis fenzlii -Catenula adhaerens -Chaetoceros baculites -Chaetoceros cf. peruvianus -Coscinodiscus subconcavus -Coscinodiscus sp. 1 -Coscinodiscus sp. 2-112 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 6. 하등식물 -Coscinodiscus sp. 3 -Dactyliosolen phuketensis -Diploneis aestiva var. fusca -Encyonema neogracile -Encyonema sp. -Encyonopsis leei -Fragilaria capucinavar.austriaca -Fragilariopsis sp. -Gomphonema angustatum var. linearis -Gomphonema clavatum -Gomphonema olivaceoides var. densestriata -Gomphonema parvulum var. parvulum f. saprophilum -Gomphonema productum -Gomphonema sp. -Hantzschia virgata -Hantzschia virgata var. gracilis -Haslea sp. -Luticola sp. -Mastogloia fimbriata -Navicula aff. lundii -Navicula alpha -Navicula atomus -Navicula costulata -Navicula eta -Navicula forcipata -Navicula lyra var. constricta -Navicula marina -Navicula normaloides -Navicula perminuta -Navicula pseudony - 113 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 6. 하등식물 -Navicula tenera -Navicula upsaliensis -Navicular digitatoradiata -Nitzschia capitellata -Nitzschia commutatoides -Nitzschia sp. -Nitzschia subtilis -Pleurosigma aestuarii -Pleurosigma delicatulum -Pleurosigma strigosum -Pseudoguinardia recta -Pseudo-nitzschia cf. delicatissima -Pseudo-nitzschia cf. pseudodelicatissima -Skeletonema dohrnii -Skeletonema marinoi -Skeletonema sp. -Synedra tabulata var. obtusa -Thalassiosira curviseriata -Thalassiosira decipiens -Thalassiosira guillardii -Thalassiosira lentiginosa -Thalassiosira lundiana -Thalassiosira mala -Thalassiosira oceanica -Thalassiosira partheneia -Thalassiosira psedonana -Thalassiosira simonsenii -Thalassiosira sp. 1 -Thalassiosira sp. 2 -Thalassiosira sp. 3-114 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 6. 하등식물 -Thalassiosira sp. 4 -Thalassiosira tealata -Triceratium pentacrinus 2 와편모조강 -Actinomonas mirabilis -Alexandrium sp. -Calciodinellum operosum -Carteria sp. -Ceratium azoricum -Ceratium lamellicorne -Ceratium platycorn var. cuneatum -Ceratium praelongum -Ceratium ranipes var. palmatum -Ceratocorys gourretii -Cochlodinium polykrikoides -Dinophysis mitra -Dinophysis rapa -Diphylleia rotans -Dissodinium elegans -Dissodium asymmetricum -Gonyaulax sp. 1 -Gonyaulax sp. 2 -Gonyaulax sp. 3 -Gymnodinium sp. -Lepocinoclis playfairiana -Lepocinoclis sp. -Ornithicercus thumii -Ornithocercus heteroporus -Ornithocercus quadratus - 115 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 6. 하등식물 -Oxyrrhis marina -Oxytoxum milneri -Oxytoxum tesselatum -Peridinium africanum -Peridinium lomnickii -Peridinium sp. -Peridinium umbonatum -Phacus alatus var. atviensis -Phacus applanatus -Phacus elegans -Phacus hispidulus -Phacus monilatus var. suecicus -Phacus pyrum -Protoperidinium sp. 1 -Protoperidinium sp. 2 -Protoperidinium sp. 3 -Pyramimonas sp. -Pyrocystis hamulus var. inaequalis -Rhodomonas sp. -Scrippsiella precaria -Trachelomonas cylindrica -Trachelomonas rugulosa var. steinii -Trachelomonas sp. 1 -Trachelomonas sp. 2 3 편모조강 -Colacium vesiculosum -Cryptomonas sp. 1 -Cryptomonas sp. 2 -Cryptomonas sp. 3-116 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 6. 하등식물 -Discoplastis sp. -Euglena tristella -Euglena velata -Hydrosera whampoensis -Mallomonas acaroides var. obtusa -Mallomonas corymbosa -Mallomonas crassisquama var. papillosa -Mallomonas cratis -Mallomonas heterospina -Mallomonas peronoides var. bangladeshica -Mallomonas portae-ferrae -Mallomonas pseudocratis -Mallomonas sp. nov. -Mallomonas striata var. serrata -Merotrichia capitata -Mischococcus confervicola var. confervicola -Paraphysomonas bandaiensis -Phacus horridus -Phacus longicauda var. major -Phacus oscillans -Phacus ranula var. ranula -Phacus similis -Pleurosira laevis -Strombomonas sp. -Trachelomonas nexilis var. nexilis -Trachelomonas sp. -Trachelomonas spirogyra -Trachelomonas stokesiana - 117 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 6. 하등식물 당해연도연구목표 미기록 / 신종발굴 : 160 분류군 연구사업결과 미기록 / 신종발굴 : 159 분류군 ( 목표의 99.4%) 미기록 / 신종 ( 후보 ) 발굴자료는 미기록 - 신종보고서로제출할예정임 (3) 주요자생생물자원의생물학적논의 ( 가 ) 미기록및신종 ( 후보 ) 가규조류 돌말강의중심돌말목끈원반돌말과의 3 종, Skeletonema dohrnii, Skeletonema marinoi, Skeletonema sp., 끈원반돌말속의 3종 Thalassiosira mala, Thalassiosira curviseriata, Thalassiosira sp., 체돌말과체돌말속의 1종 Coscinodiscus sp., 반원반돌말과의 1종 Pseudoguinardia recta, 관돌말아목관돌말과껍질돌말과 1종 Dactyliosolen phuketensis, 실패돌말아목센털돌말과센턴돌말속의 1종 Chaetoceros cf. peruvianus, 깃돌말목등줄돌말아목땅콩돌말과땅콩돌말속의 1종 Achnanthes sp., 쪽배돌말과의 1종 Haslea sp., 등침돌말과 1종 Fragilariopsis sp. 과사슬등침돌말속의 2종 Pseudo-nitzschia cf. delicatissima, Pseudo-nitzschia cf. pseudodelicatissima 가국내에서처음으로발견되었다. 돌말강의깃털말 목 (Pennales) 에속하는 11종류와중심돌말목 (Centrales) 의 3종류를미기록종으로보고하였다. 즉, 쪽배돌말과 (Naviculaceae) 의 9종류 Amphipleura lindheimeri, Amphiprora paludosa, Caloneis alpestris, Diploneis aestiva var. fusca, Gomphonema angustatum var. linearis, Gomphonema olivaceoides var. densestriata, Pleurosigma aestuarii, Pleurosigma delicatulum, Pleurosigma strigosum, 등침돌말과 (Nitzschiaceae) 의 1종 Nitzschia sp., 막돌말과 (Diatomaceae) 의 Synedra tabulata var. obtusa 등이었으며, 중심돌말목 (Centrales) 에서 3종류로서체돌말과 (Coscinodiscaceae) 의 Coscinodiscus subconcavus, Coscinodiscus sp. 와끈원반돌말과 (Thalasiosiraceae) 의 Thalassiosira sp., Amphora 속 1종인 Amphora. sp. 와 Encyonema 속 2종 Encyonema neogracile, Encyonema sp., Encyonopsis 속 1종 Encyonopsis leei, Fragilaria 속 1종인 Fragilaria capucina var. austriaca, Gomphonema 속 4종 Gomphonema - 118 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 6. 하등식물 clavatum, Gomphonema parvulum var. parvulum f. saprophilumt, Gomphonema productum, Gomphonema sp., Luticola 속 1 종 Luticola sp., Navicula 속 3 종 Navicula aff. lundii, Navicula normaloides, Navicula upsaliensis, Nitzschia 속 2 종 Nitzschia capitellata, Nitzschia commutatoides 등, 돌말강의중심돌말목 (Centrales) 의센털돌말과 (Chaetoceraceae) 에 2종Bacteriastrum sp., Chaetoceros baculites, 체원반돌말과 (Coscinodiscaceae) 에 1종 Coscinodiscus sp. 1, 끈원반돌말과 (Thalasiosiraceae) 의 11종 (Thalassiosira decipiens, Thalassiosira guillardii, Thalassiosira lentiginosa, Thalassiosira lundiana, Thalassiosira mala, Thalassiosira oceanica, Thalassiosira partheneia, Thalassiosira pseudonana, Thalassiosira simonsenii, Thalassiosira tealata, Thalassiosira sp. 1, 눈돌말과 (Eupodiscaceae) 에 1종 (Triceratium pentacrinus), 쪽배돌말과 (Naviculaceae) 의 13종류로서 Caloneis fenzlii, Catenula adhaerens, Navicula alpha, Navicula atomus, Navicula costulata, Navicula digitatoradiata, Navicula eta, Navicula forcipata, Navicula lyra var. constricta, Navicula marina, Navicula perminuta, Navicula pseudony, Navicula tenera, 등침돌말과 (Nitzschiaceae) 의 2종 Hantzschia virgata, Hantzschia virgata var. gracilis 등, 쪽배돌말과 (Naviculaceae) 의 3종류 Amphora costata var. inflata, Amphora terroris, Mastogloia fimbriata와등침돌말과 (Nitzschiaceae) 의 1종 Nitzschia substilis 등총 78종이발견되었다.. 나와편모조류고니오라목 (Gonyaulacales) 고니올라과 (Gonyaulaceae) 의 3종 (Alexandrium sp., Gonyaulax sp. 2종 ), 김노디니움목 (Gymnodiniales) 김노디니움과 (Gymnodiniaceae) 의 2종 (Gymnodinium sp., Cochlodinium polykrikoides), 프로녹티루카과 (Pronoctilucaceae) 의 1종 (Oxyrrhis marina), 유각와편모조목 (Dinophysiales) 유각와편모과 (Dinophysiaceae) 의 1 종 (Dinophysis mitra), 페리 디니움목 (Peridiales) 푸로토페리디니움과 (Protoperidiniaceae) 의 Protoperidinium sp. 3종은국내에서처음으로발견되었다. Dinophysis mitra 는쿠로시오해류에분포하고주로일본에서보고되었으나국내에서처음발견되었고, Oxyrrhis marina 도미국, 일본등에서보고되었으나국내에서는처음발견되었다. 국내에서대규모양식피해를일으키는 Cochlodinium polykrikoides는명백한생활사가보고된바없으나이번조사에서세계최초로이종의휴면포자를발견하여앞으로적조발생메카니즘과적조발생제어에대한많은연구가수행될것으로생각된다. Peridiniaceae과에속하는미기록 2 분류군과 Euglenaceae과에속하는미기록 12 분류군 - 119 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 6. 하등식물 등총 14 분류군을발굴하였다. 미기록분류군은 Peridinium속 2종 : Peridinium lomnickii, Peridinium africanum, Trachelomonas속 4종 : Trachelomonas cylindrica, Trachelomonas rugulosa var. steinii, Trachelomonas sp. 1, Trachelomonas sp. 2, Phacus 속 6종 : Phacus alatus var. atviensis, Phacus applanatus, Phacus elegans, Phacus hispidulus, Phacus monilatus var. suecicus, Phacus pyrum, Lepocinoclis속 2종 : Lepocinoclis playfairiana, Lepocinoclis sp., 와편모조강 (Dinophyceae) Dinophysiales 목 Dinophysiaceae 과 1종 Dinophysis rapa, Ornithocercaceae과 3종 Ornithocercus heteroporus, Ornithocercus quadratus, Ornithocercus thumii, Gonyaulacales 목 Ceratiaceae과 5종 Ceratium azoricum, Ceratium lamellicorne, Ceratium platycorn var. cuneatum, Ceratium praelongum, Ceratium ranipes var. palmatum, Ceratocoryaceae 과 1종 Ceratocorys gourretii, Peridiniales 목 Oxytoxaceae과 2종 Oxytoxum milneri, Oxytoxum tesselatum, Peridiniaceae과 1종 Dissodium asymmetricum, Pyrocystales 목 Pyrocystaceae 과 2종 Dissodinium elegans, Pyrocystis hamulus var. inaequalis, 와편모조류강 (Dinophyceae) 의고니오라목 (Peridiniales) 페리디니움과 (Peridiniaceae) 의 4종 Peridinium umbonatum, Calciodinellum operosum, Scrippsiella precaria, Peridinium sp., 고니올라과 (Gonyaulaceae) 의 1종 Gonyaulax sp. 이관찰되었다. 원생생물문 (Eukaryota) 의 Collodictynidae과 1종 Diphylleia rotans (=Aulacomonas submarina) 이관찰되었고, Chlorophyceae 강 Volvocales목 Chlamydomonadaceae 과 1종 Carteria sp., 황갈조강 (Chrysophyceae) Pedinellales목 Pedinellaceae과 1종 Actinomonas mirabilis, Cryptomonadales 목 Cryptomonadaceae 1종 Rhodomonas sp., Prasinophyceae 강 Pyramimonadales 목 Pyramimonadaceae 과에 1 종 Pyramimonas sp. 등총 49 종이발견되었 다. 다편모조류시누라조강 (Synurophyceae) 의 시누라목 말로모나스과 4종 Mallomonas acaroides var. obtusa, Mallomonas crassisquama var. papillosa, Mallomonas striata var. serrata, Mallomonas sp. nov., 황갈조강 (Chrysophyceae) 의크로물리나목 (Chromulinales) 파라피소모나 스과 (Paraphysomonadaceae) 의 1종 Paraphysomonas bandaiensis, 침편모조강 (Raphidophyceae) 라피도목 (Raphidomonadales) 바쿠오라리아과 (Vacuolariaceae) 의 1종 Merotrichia capitata, 황 녹색조강 (Xanthophyceae) 미스코크스목 (Mischococcales) 미스코크스과 (Mischococcaceae) 의 1 종 Mischococcus confervicola var. confervicola, 유글레나조강 (Euglenophyceae) 유글레나목 - 1 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 6. 하등식물 (Euglenales) 유글레나과 (Euglenaceae) 8종 Colacium vesiculosum, Phacus ranula var. ranula, Phacus longicauda var. major, Trachelomonas Stokesiana, Trachelomonas spirogyra, Trachelomonas nexilis var. nexilis, Trachelomonas sp., Strombomonas sp. 및규조강 (Bacillariophyceae) 중심규조목비듈피아과 2종 Hydrosera whampoensis, Pleurosira laevis는 국내에서처음으로발견되었다. Torquatae 절의 Mallomonas inornata 와 M. liturata 와유사하 나 body scales 의모양, 순판의 pore 와 window 가없고, apical scalerhk rear scale 의 spine 형 태등이현저히달라신종으로생각되는한종 (Mallomonas sp. nov.) 이발견되었다. 그리고 침편모조강은세계각지에서 10 속 30 여종이보고되어있으며, 06 년도에국내에서는처음으로 2 속 2 종이보고된바있으며, 다른조류군에비해매우드물게출현하는 Merotrichia 속의 Merotrichia capitata Skuja 가이번조사에서발견되었다. 규조류의중심규조목 Hydrosera whampoensis 와 Pleurosira laevis 는세계적으로도드물게보고되어있으며, 본조사에서영양 염이높은수체에서수온이높은여름철에서초가을에걸쳐조사되었다. 유글레나류의 Phacus simiis, Phacus oscillans, Phacus horridus, Discoplastis sp., Euglena tristella, Euglena velata,, 은편모조류의 Cryptomonas sp. ( 대평늪 ), Cryptomonas sp. ( 쪽지벌 ), Cryptomonas sp. ( 팔락늪 ) 이기록되었다. 또한, 황갈조류의 Mallomonas portae-ferrae, Mallomonas corymbosa, Mallomonas cratis, Mallomonas heterospina, Mallomonas pseudocratis, Mallomonas peronoides var. bangladeshica가새로이분포하는것으로밝혀졌다. - 121 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 7. 고등식물 7. 자생고등식물자원조사 발굴 가. 당해연도목표 발굴예정미기록 / 신종수 확보할표본점수 사업내용 목표 종 13,500 점 나. 당해연도연구개발계획 대상분류군 세부목표및내용 기초문헌자료조사 추진일정 (M+) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 자생종목록확인 양치식물, 나자식물, 쌍자엽식물 ( 목련아강, 석죽아강, 딜레니아아강 ) 분포현황확인 멸종위기자생식물자원현황확인 야외조사를통한표본확보 표본제작 분류군의동정및기재 분류군별종목록및분포자료작성 다. 연구범위 양치식물, 나자식물, 쌍자엽식물 ( 목련아강, 석죽아강, 딜레니아아강 ) - 122 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 7. 고등식물 라. 연구내용및방법 < 연구내용 > 고등식물발굴 ( 채집 ) 조사계획은기존의표본및문헌자료를기초로수립하며, 분포및지역변이양상파악을위해분류군별또는지역별로체계적인채집조사계획을연차별로수립함. 분포및지역변이양상을파악하기위해분류군별로가능한한많은지역집단에서채집하며, 최소한 5, 6개이상의지역집단에서집단별 3 set 이상의확증표본을제작 함. 단멸종위기종, 희귀종또는분포가극히제한적인종류의경우, 생육현황에따 라확보할표본의수를최소로결정함. 보전의가치가높거나또는멸종위기종등보전의필요성이시급한종그리고자원적가치가크거나학술적으로중요한종에대해서는종자또는생체를채취하여앞으로국립생물자원관의온실또는포장에이식 재배하여장외증식을시도함. 표본및기타생물재료확보, DB 자료확보 : 채집조사를통해종별 / 지역별로표본 을충분히확보하고, 정확한분포역및서식지정보를조사함. 특히분포 ( 채집지 ) 에 대한 GIS 정보를확보함. 모든표본은희귀또는멸종위기종이아닌경우가능한한채집품 (collection) 당 3점이상을채집하며, 이중완전한 2 set을 국립생물자원관 에소장함. 채집확보된표본및기타생물자료목록및이에관련된모든정보는 DB화하여궁극적으로국가생물종목록작성의자료로사용함. 종목록및분포도작성 : 상기자료를근거로일차적으로분류군별종목록및분포도 를작성하고관련정보를축적, 체계화함. 종목록에는종별로학명, 출전, 국명, 분 포, 서식지정보, 표본목록을수록하고, 가능한경우관련문헌정보및기준표본정보도제시함. 국가생물종목록발간 : 각분류군 / 지역의탐사연구사업이완료되면, 분류군별 / 지역별종목록및기타자료를종합하여국가생물종목록을완성하고궁극적으로는총괄과제에서구축될국가생물자원관리네트워크와연계하여 DB화함. < 해당분류군별표본제출 > 분류군별표본은종당 7-8 개지역집단정도를조사하여집단별 3 장이상의중복품 - 123 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 7. 고등식물 을제작하여제출함. < 표본라벨정보의작성 > 확증표본의 lable은최소한다음의정보는꼭포함 지리적정보 : Locality, latitude, longitude - 도, 시 ( 군 ), 읍 ( 면 ), 리 ( 동 ) 까지꼭표기. 국립공원내일경우별도로표시 - 예 ) 전북남원군산내면반선리지리산뱀사골입구 ( 지리산국립공원 ) 생태적정보 : Habitat and ecology, altitude (GPS 이용 ). 식물체정보 : Description of plants ( 특별한사항 ) 채집자정보 : Collector's name and number 채집일정보 : Date of collection < 표본보관방법 > 동정된표본은가로 34cm, 세로 40 cm 의백색 240 모조의대지위에창호지또는 본드를이용하여고정시킨후, 라벨을대지오른쪽하반부에부착한다. 충분히건조 가된표본은 -C 또는그이상의저온냉동고에서최소한 3 일이상보관하여해충 을방제한후식물표본장에수장하여보관 마. 연구결과 사업내용목표결과달성률 (%) 발굴예정미기록 / 신종수 종 4 종.0 확보할표본점수 13,500 점 14,794 점 109.6 (1) 표본및생물재료확보 본연구기간중한반도에분포하는유관속식물을대상으로조사활동을수행한결과, 양 치식물이 24 과 54 속 142 종 1,337 점, 나자식물이 6 과 14 속 종의 246 점이채집, 확보되었다. 그 - 124 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 7. 고등식물 리고피자식물중, 국화아강은 23과 151속 347종 3,4점, 닭의장풀아강은 6과 69속 168종 1,099점, 딜레니아강은 19과 46속 124종 1,767점, 목련아강은 14과 50속 107종 1,456점, 백합아강은 6과 50속 103종 974점, 생강아강은 1과 1속 1종 3점, 석죽아강은 9과 31속 81종 777점, 장미아강은 33과 144속 316종 3,215점, 조록나무아강은 12과 31속 69종 627점, 종려아강은 2과 4 속 11종 54점및택사아강은 6과 8속 13종 35점등도합 131과 585속 1,340종 13,211점이채집, 조사되었다. 따라서채집된유관속식물은총 161 과 653 속 1,502 종 14,794 점 ( 당해년도목표의 109.6 %) 의표본이확보되어당해연도연구목표를초과달성하였다. 당해연도연구목표 표본확보 : 총 13,500 점 연구사업결과 총 14,794 점확보 ( 목표의 109.6 %) - 대상분류군 ; 양치식물 ; 나자식물 ; 쌍자엽식물 ( 목련아강, 석죽아강, 딜레니아아강등 ) - 확증표본 : 14,794 점 - 확증표본 13,500 점 - 14,794 점확보 ( 목표의 109.6 %) - 양치식물 1,337점 - 나자식물 246점 - 피자식물 13,211점 ; 국화아강 3,4점 ; 닭의장풀아강 1,099점 ; 딜레니아강 1,767점 ; 목련아강 1,456점 ; 백합아강 974점 ; 생강아강 3점 ; 석죽아강 777점 ; 장미아강 3,215점 ; 조록나무아강 627점 ; 종려아강 54점 ; 택사아강 35점 - 125 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 7. 고등식물 (2) 미기록및신종 ( 후보 ) 발굴 본발굴조사결과, 신분류군 1 변종, 미기록분류군 3 분류군등미기록 / 신종 ( 후보 ) 4 분류 군 ( 당해연도목표의 %) 과멸종위기야생식물 10 분류군및기타주요식물군으로는닻꽃을 비롯하여 6 종등 분류군을발굴하였다. 발굴된신분류군으로는현삼과의흰꽃며느리밥풀 (Melamphyrum roseum var. album) 로한반도식물상에새로이추가기록되었다. 그리고발 굴된미기록식물군들은가는물마디꽃 (Rotala mexicana subsp. pusilla), 민누리장나무 (Clerodendron trichotomum var. fargesii), 가거꼬리고사리 (Asplenium yoshinagae) 등도합 3 개의분류군이새로이한반도식물상에추가되었다. 한편, 주요멸종위기야생식물로는솔잎 난, 깽깽이풀, 히어리, 미선나무, 단양쑥부쟁이, 진노랑상사화, 대흥란, 백운란, 섬시호, 섬개야광 나무등도합 10 분류군의새로운분포지및장소가추가되기도하였다. 아울러기타주요식 물군으로는닻꽃, 만주바람꽃, 참좁쌀풀, 참배암차즈기, 벌개미취및금강초롱꽃등이새로운 분포지에서발견되기도하였다. 당해연도연구목표 연구사업결과 미기록 / 신종 ( 후보 ) : 분류군미기록 / 신종발굴 : 4 분류군 ( 목표의 %) (3 미기록종, 1 신변종후보 ) 신분류군 1 변종 ; 흰꽃며느리밥풀 (Melamphyrum roseum var. album) ( 전남외나로도 ) 미기록분류군 3분류군 ; Rotala mexicana subsp. pusilla ( 가는물마디꽃 : 전남장흥군과광양시 ) ; Clerodendron trichotomum var. fargesii ( 민누리장나무 : 전남신안군가거도 ) ; Asplenium yoshinagae ( 가거꼬리고사리 : 전남신안군가거도 ) - 126 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 7. 고등식물 당해연도연구목표 연구사업결과 기타주요종 멸종위기종 10종 ; 솔잎난 ( 전남외나로도 ) ; 깽깽이풀 ( 경기도연천군 ) ; 히어리 ( 경기도포천군 ) ; 미선나무 ( 경북안동시갈라산 ) ; 단양쑥부쟁이 ( 경기여주군 ) ; 진노랑상사화 ( 제주시아라동 ) ; 대흥란 ( 서귀포시돈네코계곡 ) ; ; 백운란 ( 경북울진군금장산 ; 섬시호 ( 경북울릉도도동-행남등대 ) ; 섬개야광나무 ( 경북울릉도도동-행남등대 ) 기타 6종 ; 닻꽃 ( 경기가평군화악산 ) ; 만주바람꽃 ( 경기도소요산 ) ; 참좁쌀풀 ( 경북포도산 ) ; 참배암차즈기 ( 경북문경시공덕산 ) ; 금강초롱꽃 ( 강원오대산 ) ; 벌개미취 ( 경기용인시시궁산 ) (3) 고등식물자원의생물학적논의 ( 가 ) 미기록및신종 ( 후보 ) 흰꽃며느리밥풀 (Melamphyrum roseum var. album): 전남고흥군봉래면외나로도에서 군락을이루어생육하는것이확인되었다. 이들은꽃며느리밥풀과형태적으로유사하지만꽃 색이흰색인점에서구분된다. 한편, 며느리밥풀속의여러분류군, 수염며느리밥풀, 알며느리 밥풀및애기며느리밥풀은기존에흰색꽃이확인되어이들은모두품종으로처리하고있다 ( 이, 07). 그러나꽃며느리밥풀의흰색변종은처음으로발견되었다. - 127 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 7. 고등식물 가는물마디꽃 (Rotala mexicana subsp. pusilla): 전남장흥군강진은임촌저수지와전남 광양시온양면영곡리의논에서발견되었다. 그동안국내의마디꽃속의식물중, 화판이없는 식물은유일하게가는마디꽃 (R. mexicana subsp. mexicana var. spruceana) 만이알려졌으나 본조사에서가는물마디꽃이확인되었다. 이들은 3-4 개의잎이윤생하는 1 년초로잎의선단이 평두이거나드물게 2 열하기도하며, 꽃받침열편은 5 개이고, 수술은 2-3 개인점등에서다른분 류군들과식별된다. 민누리장나무 (Clerodendron trichotomum var. fargesii): 전남신안군가거도의산자락에 서발견되었다. 이들은원변종인누리장나무와는달리잎의앞면은털이없고, 뒷면에도중앙 맥의기부에만털이일부있는점에서구별된다. 아울러누리장나무의염색체수는 2n=46 과 92 인반면본변종은 2n=24 개로식별된다. 이들은일본의 Kyushu 의남부, 중국및오키나와 군도등지에분포하는것으로알려져있다. 가거꼬리고사리 (Asplenium yoshinagae): 본양치식물은전남신안군가거도의숲속습한 바위틈새에생육하고있다. 이들은국내에분포하지않는 Asplenium planicaule 와가장유사 하지만우편이보다두껍고, 중축에무성아가달리는점에서구별된다. 기존에일본, 대만및 중국에분포하는것으로알려져있지만본조사에서한반도자생종으로추가하였다. ( 나 ) 멸종위기및희귀종 멸종위기야생식물은 10 종의식물군이확인되었는데, 이중분포지가새로이밝혀진종 류로는다음과같다. 솔잎난은제주도의해안가근처의바위틈새에생육하는알려지고있었지 만전남고흥군외나로도남쪽해안가바위틈에소수의개체가생육하는것이확인되었다 ( 그림세부 5-1). 솔잎난의경우, 도서지역이아닌전남화순의한야산에서도발견된바있다. 깽깽이풀은경북주왕산, 대구청룡산, 용제봉, 경기지장봉, 명지산, 화산, 부천, 수원, 경남집현산, 미륵도, 충북단양, 광주무등산, 전남순천및경북안동등지에분포하는것으로알려 져있다. 본조사에서경기연천군연천읍동막리절골의 3 x 2 m 내에수개체가산발적으로 생육하고있는것으로확인되었다. 손될우려가큰것으로나타났다. 그러나이들의자생지가국도변강가에위치하고있어훼 히어리는국내주로전남및경남에분포하고, 일부개체군 은전북등지에분포하는남방계고유식물로불연속적으로경기도와강원도에분포하는특성 을갖는다. 이들은본조사에서채집된경기도포천백운산이북방한계지역이다. 미선나무는 한반도에만국한하여자라는고유식물로북한지역에서는황해도장수산, 국내에서는충북진 - 128 -
Ⅱ. 연구사업 수행 내용 및 결과 : 7. 고등식물 천, 괴산, 영동군 및 전북의 내변산의 전석지나 야산에서 자생하고 있다. 본 조사에서 미선나 무는 경북 안동의 갈라산 계곡 부근에서 100개체 내외가 군락적으로 자생하고 있는 것을 확인 하였다. 이들은 법적으로 멸종위기 야생식물로 지정하여 보호하고 있을 뿐만 아니라 국내 대 부분의 지역 개체군이 천연기념물로 보호받고 있다. 본 종의 희귀성이 알려지면서 무분별한 남획으로 인하여 진천군의 미선나무 개체군은 절멸되어 천연기념물에서 제외되기도 하였다. 본 조사지역 또한 경작지와 인접해 있어 훼손될 위험에 처해 있는 것으로 나타나고 있다. 백 운란은 전남 백운산을 포함하여 울릉도, 제주도, 내장산 등지의 습기가 많은 산지의 낙엽수림 대에 소수의 개체가 자라는 것으로 알려지고 있다. 본 조사에서는 경북 금장산의 계곡 근처에 서 5개체 정도를 확인할 수 있었다. 진노랑상사화는 기준표본 채집지인 내장산을 포함하여 고 창 선운산, 영광 불갑산 등지에 소수의 개체가 자라고 있으며, 본 조사에서는 제주시의 아라동 공원 주변에도 수개체가 자라고 있는 것을 확인하였다. (다) 특이종 기타 주요종으로는 닻꽃이 경기 가평군의 화악산에서, 만주바람꽃은 경기도의 소요산에 서, 참좁쌀풀은 경북의 포도산에서, 참배암차즈기는 경북 문경의 공덕산에서, 벌개미취는 경기 도 용인시 시궁산의 애덕고개에서 그리고 금강초롱꽃은 강원도 오대산에서 각각 자생하고 있 음을 확인하였다. <그림 세부 5-1>전남 외나로도의 멸종위기 야생식물, 솔잎난 군락. - 129 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 7. 고등식물 (4) 논문, 학술발표및도서출판등 ( 가 ) 논문 1. 이상태등. On the taxonomic status of apetalous Rotala (Lythraceae) distributed in Korea. ( 투고예정 ). 2. Lee, C. S. 08. First report of Asplenium yoshinagae (Aspleniaceae) from Korea and its phylogenetic position based on morphology. 한국식물분류학회지 38(2). (accpeted). - 130 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 8. 자생척추동물자원조사 발굴 가. 당해연도목표 미기록 / 신종발굴종수 표본확보 사업내용 목표 종 2,500 점 나. 당해연도연구개발계획 대상분류군 세부목표및내용 추진일정 (M+) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 연골어강 ( 상어류, 가오리류 ), 동갈치목, 농어목, 쏨뱅이목, 아귀목, 큰가시고기목, 가자미목, 복어목, 기타경골어류도롱뇽목, 뱀아목바다오리류식충목 ( 땃쥐속작은땃쥐, 제주땃쥐, 땃쥐 ) 익수목 ( 집박쥐속, 긴날개박쥐속 ) 토끼목 ( 토끼과북방토끼, 멧토끼 ) 설치목 ( 청설모과청설모, 하늘다람쥐, 다람쥐 ) 식육목 ( 곰속, 불곰속 ), 우제목 ( 산양속 ) 기초문헌자료조사 자생종목록확인 분포현황확인 멸종위기자생동물현황확인 야외조사를통한표본확보 표본제작 분류군의동정및기재 분류군별종목록및분포자료작성 - 131 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 다. 연구범위 어류 : 뱀장어목, 농어목, 쏨뱅이목, 동갈치목, 큰가시고기목, 가자미목, 복어목, 청어목, 연골어강 ( 상어류, 가오리류 ), 홍어목, 아귀목, 바다빙어목, 기타경골어류 양서 / 파충류 : 도룡뇽목, 뱀아목 포유류 : 식충목 ( 땃쥐속작은땃쥐, 제주땃쥐, 땃쥐 ), 익수목 ( 집박쥐속, 긴날개박쥐속 ), 토끼목 ( 토끼과북방토끼, 멧토끼 ), 설치목 ( 청설모과청설모, 하늘다람쥐, 다람쥐 ), 식육목 ( 곰속, 불곰속 ), 우제목 ( 산양속 ), 조류 : 해양성조류중동해안이동조류 ( 바다오리류 ) 라. 연구내용및방법 < 포유류 > 소형, 중형포유류의표본확보에중점 쥐류와같은소형설치류는주로 Sherman Trap 및기타소형포획트랩을이용하여현장에서직접채집 ( 예 ; 쥐과동물포획시 1장소에통상 30-50개트랩설치필요 ) 두더지의경우는묵정밭에두더지이동흔적을따라다수의전용트랩을설치하고, 직접채집시도 기타, 동물의종류에따라그에맞는적절한포획방법이선택되어져야함. 단, 직접채집을위해서는과도한예산과인력이소요되므로, 연구예산의규모에따라직접채집법의시행여부결정 중형포유류의경우에는, Harvart Box 트랩, Foot Trap, Snare Trap 등으로포획을시도 이경우에도각동물별로적합한서식지를찾아야하며, 그주변에포획틀을설치 ( 이경우통상 1서식지당 10-개이상의포획틀설치가필요 ) 대형종의경우에는현실적으로직접채집이거의불가능 소장표본을최대한찾아보도록할것임 표본제작은박제표본, 모피표본, 액침표본 ( 박쥐류 ), 골격표본, 냉동표본 (-40 이하저온냉동보관 ), 기타표본 ( 훼손되고, 일부만남은표본의경우, 남아있는재료역시 - 132 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 부분표본으로입수 ) 등으로제작 출용표본은각종별또는개체별가박제상태또는냉동표본상태로제출 실물표본확보가어려운종이나개체는사진이나기타종을증명할만한증거품또는그림등대상종을정확히판별하고증거할수있는자료를제출 < 조류 > 현재국내에서식하는조류중도래실태에관한조사가가장미진한부분이해양성조류이다. 따라서당해연도의경우해양성조류에중점을두어조사 월동시기별초기와중기, 말기그리고지역적으로는조사가능지역을선별하여조사를실시 조사는해상과육상에서실시할계획이며해상조사의경우선박을이용하여육지에서동쪽 1~2마일해상에서남북으로이동하며관찰되는조류조사 육상조사의경우해안선을따라이동하면서육지에가까이접근한조류조사 정기적인수거를통해표본을확보할계획 겨울철동해상에서는많은어망이설치되며이곳에많은해양성조류가걸려서폐사하는경우가많으므로동해안주요항구를정기적으로순회하며수거 해마다겨울철이면항구주변에쌓아둔사체가쉽게관찰되므로정기적인수거방법이효과적일것으로보임 표본제작은수거한표본의경우상태에따라외피를벗긴후외피만을보관하거나또는외피내부를고형물로채운후살아있을때의모습을복원하는방법등두가지경우의표본을만들계획 제출용표본은각종별또는개체별가박제상태또는냉동표본상태로제출 실물표본확보가어려운종이나개체는사진이나기타종을증명할만한증거품또는그림등대상종을정확히판별하고증거할수있는자료제출 < 양서 파충류 > 양서류중에서유미류는물이흐르는계곡중유속의흐름이완만한곳을찾아작은바위를들추어유생을확인하거나, 물이고여있는작은웅덩이에산란한알을수집하여종을확인하고, 성체는고지대의활엽수림이있는음지쪽에쓰러져있는고목을들추거나, 바위틈에서확인 - 133 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 무미류는등산로를따라이동하면서그주변에서식하는개체를확인하거나, 바위틈혹은논, 수로그리고저습지주변에서포충망을이용하여채집 논이나웅덩이에서발견된개구리류유생중동정에어려움이있는개체는 10% 포르말린에고정하여실체현미경을통하여유생의치열을확인후동정 야간에무미류의울음소리를청취한후종을식별 파충류중에서장지뱀류는묵정밭주변, 도로변과등산로주변의햇볕이잘드는곳에쌓여있는돌을들추어확인 도마뱀류는그늘지고낙엽이많이싸인산림지역내에서낙엽이나크고작은돌을들추어확인 뱀류는저지대의임연부일대, 묵정밭, 등산로주변에서확인 추가적으로뱀의허물이발견된경우표본을제작하고이를동정 정확한동정을위해, 강과윤 (1975), Ji et al., (1987), Maeda and Matsui (1999), Zhao and Adler (1993) 등을활용 채집은대부분의양서류는쓰러진고목이나, 바위틈, 기타물가주변에서발견되는개체를직접채집 하지만, 뱀류의경우채집할당시얻어야할기초자료가있음으로, 절대로손을이용해포획하지않는다. 뱀의경우뱀집게를이용하여채집 채집후, 우선적으로각개체의체온측정, 주변온도, 날씨등을기록 거북류의경우 Trap을이용하여일몰시간에설치한후, 다음날새벽에수거 채집된양서류는 1차적으로마취제를이용하여마취를한후, 차후에 DNA분석을위해조직을적출 조직이적출된개체는밀폐용기에넣고모양을만든후, 포르말린가스를이용하여고정 개체가딱딱하게고정후 10% 포르말린에채우고, 이후 70% Ethanol에보관 적출된조직은 E-tube에넣은후냉동고에보관하거나, 95% 이상의시약용 ethanol에넣어보관 각종들의표본제작을먼저포르말린용액에고정한표본을 5~10% 포르말린요액또는 75% 에틸알코올로제작하여제출 표본제출용기는불투명프라스틱표본병또는기타용기및비닐팩에넣어라벨을부착하여제출 - 134 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 < 어류 > 담수어류채집은우리나라의연안에유입되는여러하천을중심으로투망 ( 망목 7 7 mm) 족대 ( 망목 4 4 mm), 정치망 ( 망목 5 5 mm), 자망등을이용하여채집을실시 정치망은조사지점별로하나씩설치하여 24시간후에수거 채집된어류는현장에서동정한후일부는방류 해산어류의채집은연구자가직접채집은불가능하므로우리나라의연안에서소형선박을가지고어업에종사하는어민들의협조를직접받아채집 일부표본은각연안에위치하고있는포구나어시장을통하여우리나라의연안에서조업한어류를위판할때구입 채집한어류들은현장에서사진촬영하고모든표본은 10% 포르말린용액에고정하여실험실로운반 분류체계는 Nelson (1994) 과김 (1997), 김과박 (02), 김등 (05) 등의방법을따름 표본제작은모두액침표본을제작 하천이나어시장에서수집한표본은현장에서 10% 포르말린용액에고정한후표본이완전히고정시킨후 ( 약일주일이상 ), 포르말린용액을제거한다음 75% 에틸알콜에다시재고정하여보관 표본보관은투명유리병을많이사용하나여러가지단점이많기때문에불투명프라스틱 4각통또는불투명원형통을이용하여보관 표본에대한라벨은학명, 과명, 한국명, 채집장소, 채집일, 표본번호등을기재하여표본대장을정리 각종들의표본제작을먼저포르말린용액에고정한표본을 1~5% 포르말린용액또는 75% 에틸알코올로제작하여제출 표본제출용기는불투명프라스틱표본병또는기타용기및비닐팩에넣어라벨을부착하여제출 < 미기록및신종 ( 후보 ) 발굴 > 미기록종으로판정하는것은현재한국동물명집 (1997) 에수록되어있지않으면서각분류군을담당하고있는전문연구원의판단에의하여현재우리나라에서기록되지않은종을중심으로발굴하게되는것이며, 특히어류분야에서는최근김등 (05) 의기재를근거로하여미기록종여부를판정. - 135 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 < 표본채집방법 > 1 포유류 소형, 중형포유류의표본확보에중점 쥐류와같은소형설치류는주로 Sherman Trap 및기타소형포획트랩을이용하여현장에서직접채집 ( 예 ; 쥐과동물포획시 1장소에통상 30-50개트랩설치필요 ) 두더지의경우는묵정밭에두더지이동흔적을따라다수의전용트랩을설치하고, 직접채집시도 기타, 동물의종류에따라그에맞는적절한포획방법이선택되어져야함. 단, 직접채집을위해서는과도한예산과인력이소요되므로, 연구예산의규모에따라직접채집법의시행여부결정 중형포유류의경우에는, Harvart Box 트랩, Foot Trap, Snare Trap 등으로포획을시도 이경우에도각동물별로적합한서식지를찾아야하며, 그주변에포획틀을설치 ( 이경우통상 1서식지당 10-개이상의포획틀설치가필요 ) 대형종의경우에는현실적으로직접채집이거의불가능 소장표본을최대한찾아보도록할것임 2 조류 현재국내에서식하는조류중도래실태에관한조사가가장미진한부분이해양성조류이다. 따라서당해연도의경우해양성조류에중점을두어조사 월동시기별초기와중기, 말기그리고지역적으로는고성군과포항등의지역에서조사를실시 조사는해상과육상에서실시할계획이며해상조사의경우선박을이용하여육지에서동쪽 1~2마일해상에서남북으로이동하며관찰되는조류조사 육상조사의경우해안선을따라이동하면서육지에가까이접근한조류조사 정기적인수거를통해표본을확보할계획 겨울철동해상에서는많은어망이설치되며이곳에많은해양성조류가걸려서폐사하는경우가많으므로동해안주요항구를정기적으로순회하며수거 해마다겨울철이면항구주변에쌓아둔사체가쉽게관찰되므로정기적인수거방법이효과적일것으로보임 - 136 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 3 어류 담수어류채집은우리나라의연안에유입되는여러하천을중심으로투망 ( 망목 7 7 mm) 족대 ( 망목 4 4 mm), 정치망 ( 망목 5 5 mm), 자망등을이용하여채집을실시 정치망은조사지점별로하나씩설치하여 24시간후에수거 채집된어류는현장에서동정한후일부는방류 해산어류의채집은연구자가직접채집은불가능하므로우리나라의연안에서소형선박을가지고어업에종사하는어민들의협조를직접받아채집 일부표본은각연안에위치하고있는포구나어시장을통하여우리나라의연안에서조업한어류를위판할때구입 채집한어류들은현장에서사진촬영하고모든표본은 10% 포르말린용액에고정하여실험실로운반 분류체계는 Nelson (1994) 과김 (1997), 김과박 (02), 김등 (05) 등의방법을따름 < 표본제작방법및보관방법 > 1 포유류 표본제작은박제표본, 모피표본, 액침표본 ( 박쥐류 ), 골격표본, 냉동표본 (-40 이하저온냉동보관 ), 기타표본 ( 훼손되고, 일부만남은표본의경우, 남아있는재료역시부분표본으로입수 ) 등으로제작 출용표본은각종별또는개체별가박제상태또는냉동표본상태로제출 실물표본확보가어려운종이나개체는사진이나기타종을증명할만한증거품또는그림등대상종을정확히판별하고증거할수있는자료를제출 표본보관방법은포획된실물과잔흔 ( 식흔, 배설물, 사체잔해, 골격, 체모등 ) 을포함하는것으로정의 표본은소형및일부중형포유류대표종의표본은냉동보관하되일부소형포유류의경우표본병 (70% 에틸알콜또는포르말린 ) 에보관 포획된표본에대하여종류, 포획방법, 덫번호, 지점, 서식지평가내용등을포유류채집조사야장의경우와같이취급, 상세하게기록보관 채집된모든표본은 zip-lock plastic(vinyl) bag에 label과함께넣어부패되지않도록보관 - 137 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 포유동물채집조사야장 No.. 조사자 : 조사지역 조사일 : / / / ( 요일 ) 날씨 : 번호시각종명 ( 개체수 ) 확인물종류지점 ( 좌표 ) 비고 서식환경 번호임상음폐율 (%) 지형타환경요소, 간섭요인과거리등관계서술 상기번호의항목별특기사항 2 조류 연구용박제제작 (Bird Stuffing) 및 관리 죽은조류의근육, 뼈, 내장등을제거하고내부에약품을바른후솜등을채워넣고건조상태로보존하는기법을 ' 박제 ' 라고한다. 박제는제작기법에따라크게본박제와가박제로나눈다. 본박제는조류의살아있는모습그대로재현하는기법으로보통전시용, 장식용으로이용되고있다. 가박제는반듯하게누어있는형상으로내부에약품과솜만을넣어간단하게만드는기법으로분류등연구용으로활용되며제작비용이적고보관하기에편리함 처리절차 - 138 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 습득한조류는야생조류보호및처리대장에습득일시, 장소, 죽은원인, 습득자등을 6하원칙에의거구체적으로기록 각부위를측정하고표본제작기록장의양식에맞게기록 측정이완료된개체 ( 천연기념물및환경부지정특정종을제외한일반조류 ) 는가능한한빠른시간내에표본제작하여자료로활용하며, 여건상즉시표본제작이불가능할경우밀폐된비닐용기에넣고냉동보관 측정항목 습득한조류는비교적흔한야생조류일지라도뜻하지않게그종에대해밝혀진정보가매우부족한경우도있으며, 기존문헌과달리지리적아종혹은새로운종일가능성이늘존재하기마련 따라서아무리흔한종이라도최대한많은정보를얻도록각부위를정밀하게측정하고사진촬영 구분측정및기록항목비고 외부측정 몸길이, 날개길이, 날개깃수, 꼬리길이, 꼬리깃수, 부척길이, 부리길이, 깃털갈이진행정도등 내부측정 생식기확인, 지방축적상태, 기생충여부등 기타성별, 연령등, 각부위별사진촬영 특별한경우를제외하고모든표본은가박제로제작하여연구용으로활용가능토록제작하여, 가박제로제작이불가능한경우는골격표본등을제작 세척과소독방법 습득한개체는먼저오염과기생충등을제거해야한다. 이를제거하지않으면표본의완성된모습이좋지않고보존을오래할수없다. 따라서이조작이첫째작업임 보통때가묻은것은비눗물로써간단하게지울수있임 혈액은과산화수소를탈지면에묻혀그장소만닦고, 곧물에씻는다. 특히, 흰깃털은이방법을취해야한다. 그러나오래되지않은혈액은물에축인탈지면을대놓는것만으로도혈액이녹아탈지면에빨려나옴 - 139 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 지방은벤젠으로축인탈지면을이용하여닦아내면됨 동물에는기생충이많으므로반드시 DDT나 BHC등으로구제 물에씻은동물을불로건조시키거나그대로건조시키는것은좋지않다. 겨를태워서만든필분이나석고를몸에뿌리면서건조시키는것이좋고건조시간이적게걸림 또총알의흔적이있는것은절개하기전에상처구멍을꿰매놓아야함 3 양서류 채집된양서 파충류는마취제 ( 클로로포름등 ) 를이용하여마취를한후 DNA분석을위해조직을적출함. 조직적출방법은다음과같음 마취된개구리는배부분의우측상단을십자모양으로절개한후간을분리, Tube에보관 ( 냉동보관 ) 뱀은배비늘을해부가위로떼어낸후 Tube에보관 조직이적출된개체는밀폐용기에넣고포르말린솜을이용하여고정 고정된개체는 10% 포르말린에채우고, 이후 70% 에탄올에보관 모든액침또는건조표본은채집지명, 채집일, 채집자등의정보포함하는라벨작성 동정된양서 파충류는액침표본으로제작하여 70% Ethanol을이용하여액침병에보관하고, 동정된개체의정보가기록된레벨을부착 4 어류 하천이나어시장에서수집한표본은현장에서 10% 포르말린용액에고정한후표본이완전히고정시킨후 ( 약일주일이상 ), 포르말린용액을세척한다음 75% 에틸알콜에다시재고정하여보관 표본보관은투명유리병을많이사용하나여러가지단점이많기때문에불투명프라스틱 4각통또는불투명원형통을이용하여보관 표본에대한라벨은학명, 과명, 한국명, 채집장소, 채집일, 표본번호등을기재하여표본대장을정리 각종들의표본제작을먼저포르말린용액에고정한표본을세척한다음 75% 에틸 알코올로제작하여제출 제출용표본은거즈나소량의 75% 의에틸알콜을넣어비닐팩에넣어봉합한후라벨 을낸부에넣거나외부에부착하여제출 - 140 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 표본라벨작성방법 -- 표본라벨지에학명, 과명, 종명, 채집지명, 채집날자, 채집자 순으로작성하여첨부 ( 견본예참고 ). 표본보관방법 -- 표본을포르말린 10% 에고정후 75% 에틸알콜에재고정함 < 가박제표본만드는법 > 1 포유류 동물을건조시키면발꿈치따위가오므라지는일이있는데이것을막기위해서는탈지면에물을축여방치해두면됨 박피가끝나면방부와방충을충분히행한다. 방부, 방충은앞에서말한것이외에다음으로조제하면됨 < 붕산 50g, 태운명반 30g, 나프탈린 30g( 무독성 )> 박피한털가죽에심을넣고꿰맬때심과털가죽사이에솜등으로메꾸어놓으면모양이정돈되어좋음 표본을선반에정리할때에는습기가없는곳을고르고나프탈렌등을옆에두는것이좋음 완성된표본은방충및방부처리하며, 습기와빛이닳지않는곳에보관 2 조류 동물을건조시키면발꿈치따위가오므라지는일이있는데이것을막기위해서는탈지면에물을축여방치해두면됨 박피가끝나면방부와방충을충분히행한다. 방부, 방충은앞에서말한것이외에다음으로조제하면됨 < 붕산 50g, 태운명반 30g, 나프탈린 30g( 무독성 )> 박피한털가죽에심을넣고꿰맬때심과털가죽사이에솜등으로메꾸어놓으면모양이정돈되어좋음 표본을선반에정리할때에는습기가없는곳을고르고나프탈렌등을옆에두는것이좋음 완성된표본은방충및방부처리하며, 습기와빛이닳지않는곳에보관 < 표본기록방법 > 1 포유류 포유동물의채집등조사시확인사례에대하여일일이야장에기록하고별도로필요한 - 141 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 사항을비고란에첨가서술해둠 조사일과후종별일간출현개체수와빈도 (frequency: 시간당, 거리당혹은면적당빈도 ) 를야장의끝부분에별기함 목격사항의종류와지점은조사야장에번호 ( 기호 ) 로표시하고, 서식지평가내용을야장기입요령에따라기입하며, 특기사항은비고란을활용, 기재 < 라벨기록방법 > 1 포유류 포유류채집표본 label (sample: 반드시연필로기재하여 bag 안에표본과함께보관조치 ) 표본제작이완료된즉시표본의고유번호등이기록된레이블을작성하여표본발목등에부착하여개체식별이가능하도록함 레이블은표본보관과정에서탈락될우려가있으므로제작일시, 제작자등의자료를기록한레이블과각부위를측정한레이블을별도로작성하여 2장의레이블을표본에부착하여반영구적으로보존하여활용토록함 레이블작성이후표본제작일지에종별로측정항목등을기록함 채집일 / / 채집자 채집장소 ( 위치 ): 채집물종류 : [ 실물, 근육, 두개골, 잔해, 기타 ] 비고 2 조류 표본제작이완료된즉시표본의고유번호등이기록된레이블을작성하여표본발목등에부착하여개체식별이가능하도록함 레이블은표본보관과정에서탈락될우려가있으므로제작일시, 제작자등의자료를기록한레이블과각부위를측정한레이블을별도로작성하여 2장의레이블을표본에부착하여반영구적으로보존하여활용토록함 레이블작성이후표본제작일지에종별로측정항목등을기록 - 142 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 3 양서류 라벨크기는특별한경우에표본병의크기에따라변경가능하지만각라벨의표준규격은가로 270mm, 세로 30mm로함 라벨에는채집지, 채집일, 채집자, 학명, 국명, 동정자를기록한다. 채집지의도명의경우약호 ( 예, 경남 : GN, 경기 : GG, 전북 : JB, 제주 : JJ) 를대괄호를사용하고진하게하여쉽게알수있도록기입하고, 군이나시단위의지역을영문명으로표기하여, 국명의영문명으로의변경은 국어의로마자표기법 ( 문화관광부고시, 제 00-8호 ) 에따름 ( 산은 Mt. 섬은 Is. 등 ) 채집일를기입 ( 年, 月, 日의순서로하되, 月의경우는日과의혼동을피하기위해로마자로사용 ) 채집자의정보를이름 + 성으로기입하며, 이름은약자를사용함 학명을기입 국명을한글로기입 동정자의이름 + 성으로기입하며, 약자를사용함 [JB] Namwon-si, Jucheon-myeon Hoyeong-ri Date : 07.Ⅵ. Coll. : J. Y. Song Name : Rana coreana (Okada) 한국산개구리 Det. : J. Y. Song Size : 70mm (W) 35mm(L) 표본라벨의예시 < 표본제출방법 > 1 포유류 제출용표본은각종별또는개체별가박제상태또는냉동표본상태로제출 실물표본확보가어려운종이나개체는사진이나기타종을증명할만한증거품또는그림등대상종을정확히판별하고증거할수있는자료를제출 표본제작은수거한표본의경우상태에따라외피를벗긴후외피만을보관하거나또는외피내부를고형물로채운후살아있을때의모습을복원하는방법등두가 - 143 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 지경우의표본을만들계획 제출용표본은각종별또는개체별가박제상태또는냉동표본상태로제출 실물표본확보가어려운종이나개체는사진이나기타종을증명할만한증거품또는그림등대상종을정확히판별하고증거할수있는자료제출 2 조류 제출용표본은각종별또는개체별가박제상태또는냉동표본상태로제출. 실물표본확보가어려운종이나개체는사진이나기타종을증명할만한증거품또는그림등대상종을정확히판별하고증거할수있는자료를제출 표본제작은수거한표본의경우상태에따라외피를벗긴후외피만을보관하거나또는외피내부를고형물로채운후살아있을때의모습을복원하는방법등두가지경우의표본을만들계획 제출용표본은각종별또는개체별가박제상태또는냉동표본상태로제출 실물표본확보가어려운종이나개체는사진이나기타종을증명할만한증거품또는그림등대상종을정확히판별하고증거할수있는자료제출 3 어류 고정된표본을외부용라벨지 (A type) 또는내부용라벨지 (B type) 를이용하여, 모든표본을기록된라벨과함께거즈로감싼다음비닐내부에표본과같이넣거나 ( 내부용라벨 ), 비닐접착기로완전씰링후표본포장위에첨부 ( 외부용라벨 ) 하여제출 표본라벨용지 A type (8 4 cm)( 외부용 ) 라벨용지 B type (6 2.3 cm) 내부용 - 144 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 마. 연구결과 사업내용목표결과달성률 (%) 발굴예정미기록 / 신종수 종 종 100.0 확보할표본점수 2,500 점 2,813 점 112.5 (1) 표본및생물재료확보 2차년도자생생물조사 발굴사업의척추동물분야 ( 포유류, 조류, 파충류, 양서류, 어류 ) 에대한생물표본자료는모두 42목 134과 236속 287종 2,813점을확보하여 2차년도당초목표액의 112.5% 를달성하였다. 이들표본중에포유류는 3목 7과 12속 16종 8점이확보되었고, 조류는 12목 31과 50속 67종 285점, 파충류는 1목 4과 6속 7종 30점, 양서류는 2목 6과 7속 9 종 86점, 어류는 24목 86과 161속 188종 2,4 점이확증표본으로확보되어당해연도목표를 달성하였다. 척추동물의분류군중에확보된표본의비율중에가장높은분류군은어류로전 체표본중에약 78.4% 를차지하였고, 다음으로는조류가 10.1%, 포유류가 7.4%, 양서류가 3.1%, 파충류가 1.1% 의순으로나타났다. 이들표본가운데어류와양서류, 파충류는거의액침표본으로제작되었고, 조류와포유류는냉동상태관리되고있으며, 최종적으로표본을제출될경우에는각동물군의특성에적합한상태즉어류를비롯한액침표본상태로보관된표본은표본이건조되지않도록알콜에젖은거즈로쌓아진공비닐팩에넣어라벨을붙여발송하고, 냉동상태의표본은드라이아이스를넣어계속냉동시켜발송하여국립생물자원관에서가박 제나완박제또는냉동상태로표본을작업할수있도록조치한다. 척추동물분야는현재는 모든표본을해당분류군의연구원이보관관리하고있으며, 각분류군의연구원들이차후에 지정된장소에각분류군의특성에맞게포장하여직접납품할계획이다. - 145 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 당해연도연구목표표본및생물재료확보 : 총 2,500점 - 대상분류군 ; 포유류, 조류, 파충류, 양서류, 어류 연구사업결과 총 2,813 점확보 ( 목표의 112.5%) - 확증표본 : 2,500 점 - 확증표본 2,813 점확보 - 어류 2,4점 ; 먹장어목 : 14점 ; 은상어목 : 7점 ; 흉상어목 : 5점 ; 홍어목 : 85점 ; 뱀장어목 : 18점 ; 청어목 : 184점 / 잉어목 : 152점 ; 메기목 : 31점 ; 바다빙어목 : 31점 ; 연어목 : 6점 ; 홍메치목 : 21점 ; 첨치목 : 8점 ; 대구목 : 13점 / 아귀목 : 11점 ; 숭어목 : 23점 ; 색줄멸목 : 2점 ; 동갈치목 : 39점 ; 금눈돔목 : 2점 ; 달고기목 : 3점 ; 큰가시고기목 : 71점 ; 쏨뱅이목 : 308점 ; 농어목 : 1,003점 ; 가자미목 : 114점 ; 복어목 : 53점 - 파충류 30 점 ; 유린목 : 30 점 - 양서류 86 점 ; 유미목 : 10 점 ; 무미목 : 76 점 - 146 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 당해연도연구목표 연구사업결과 - 조류 285점 ; 슴새목 : 1점 / 황새목 : 18점 ; 기러기목 : 19점 ; 매목 : 6점 ; 도요목 : 44점 ; 비둘기목 : 8점 ; 두견이목 : 1점 ; 올빼미목 : 13점 ; 파랑새목 : 2점 ; 딱따구리목 : 3점 ; 참새목 : 169점 ; 닭목 : 1점 - 포유류 8 점 ; 식충목 : 21 점 / 설치목 : 106 점 ; 박쥐목 : 81 점 (2) 미기록및신종 ( 후보 ) 발굴 2차년도연구조사에서확인된신종후보는 3종, 그리고미기록종모두 17종이확인되어총 종으로당초목표량의 100% 를달성하였다. 확인된분류군을분석해보면포유류, 조류, 파충류, 양서류에서는전혀확인되지않았고, 어류에서만출현이확인되었다. ( 표 2) 에서나타낸바와같이신종후보로확인된어류는쏨뱅이목의양볼락과에서 1종즉 Sebastes n. sp., 농 어목의망둑어과에서 2 종즉 Chaeturichthys n. sp., Mugilogobius n. sp. 로확인되었다. 한편 미기록종은큰가시고기목에서 Solenostomus cyanopterus, Syngnathoides biaculeatus의 2종이고, 쏨뱅이목에서 Parascopaena mossambica와 Icellus stenosomus의 2종이각각출현하였고, 가자미목에서 Engyprosopon multisquama, Dexistes ricuzenius, Psettina tosana 등의 3종이, 농어목에서 Chaenogobius laevis, Decapterus russelli, Amphiprion ocellaris, Acentrogobious caninus, Acanthocepola indica 등의 5 종이출현였다. 아울러이외도흉상어목의두툽상어과 - 147 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 에해당되는 Galeus niphonensis가, 홍어목의전기가오리과어류인 Crassinarke domitor, 뱀장어목의바다뱀과에속하는 Scolecenchelys macroptera가, 첨치목의첨치과에서는 Oligopus robustus가, 홍매치목의매퉁이과에서는 Synodus fuscus가각각 1종씩이새로이출현하고있는것으로확인되었다. 앞으로이들어류에대한종의기재와보고를위하여보다면밀한조사와분류학적형질을분석을통하여계통분류학적으로유사종과의차이점을밝히면서신종또는미기록종으로기재할수있도록연구할계획이다. 당해연도연구목표 미기록 / 신종발굴 : 분류군 연구사업결과미기록 / 신종발굴 : 분류군 (17 미기록종, 3 신종후보 ) ( 목표의 100%) - 어류 17종 ; 쏨뱅이목 : 2종 ; 농어목 : 5종 ; 흉상어목 : 1종 ; 홍어목 : 1종 ; 뱀장어목 : 1종 ; 첨치목 : 1종 ; 홍매치목 : 1종 ; 큰가시목 : 2종 ; 가자미목 : 3종 [ 신종후보 ] 총 3종 - 어류 3종 ; 쏨뱅이목 : 1종 ; 농어목 : 2종 (3) 척추동물자원의생물학적논의 ( 가 ) 미기록및신종 ( 후보 ) - 148 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 2 차년도척추동물분야에서한반도에서서식하면서출현하고있는포유류, 조류, 파충류, 양서류, 어류가운데우리나라에서서식하고있으나출현이확인되지않아기록되지않은신종 및미기록종을면밀히조사한결과다른분류군에서는확인되지않았고, 어류에서만 종이확 인되었다. 현재한반도에서출현하고있어이번조사에서확인된신종후보및미기록종은 2 표 에서나타난바와같이신종후보가 3종이었고, 미기록종은 17종이확인되어이번 2차년도의사업목표인신종및미기록종 종을기록하게되었다. 이들종들의정확한분류학적위치에대하여앞으로많은자료를근거로하여지속적으로분류학적특징을중심으로비교검토한후에종을확정할것이나, 현재까지나타난신종후보에는쏨뱅이목의양볼락과에해당되는 Sebaster n. sp. 와, 농어목의망둑어과에서 Chaeturichthys n. sp. 와 Mugilogobius n. sp. 등의 3종이확인되었다. 아울러 2차년도에미기록종으로확인된어류는모두 17종으로확인되었는데, 이들가운데큰가시고기목과쏨뱅이목에서각각 2종씩이출현하였고, 가자미목에서 3종, 농어목에서 5종이출현하는것으로보고되었고, 이외흉상어 목, 홍어목, 뱀장어목, 첨치목, 홍매치목등에서각각 1 종씩확인되었다. 따라서이들어류에 대한종의기재와보고는앞으로면밀한조사와분류학적형질을분석을통하여분류학적으로 유사종과의차이점을밝히면서신종또는미기록종으로서인정할수있는확실한근거를제시 하면서한반도산신종또는미기록종으로보고될예정이다. ( 나 ) 멸종위기및희귀종 맹꽁이 (Kaloula borealis) 의종보존맹꽁이 (K. borealis) 는과거우리나라의저지대농경지나하천주변에서흔히관찰된종이다 ( 그림세부6-1). 하지만, 산업사회로접어들고, 도시화되면서서식지의파편화및오염으로인하여서식지의급격한축소와서식환경의악화로인하여개체수가급감하고있어이대로방치한다면머지않아우리나라에서멸종위험에처해질가능성이매우농후한야생동물에해당된다. 맹꽁이는현재환경부의멸종위기종 (Ⅱ급) 으로지정되어있다. - 149 -
Ⅱ. 연구사업수행내용및결과 : 8. 척추동물 표 2. 척추동물분야에서확인된한국산신종후보및미기록종 분류군목명과명종명채집장소비고 어류쏨뱅이목양볼락과 Sebestes n. sp. 인천남구논현동 신종후보 어류농어목망둑어과 Chaeturichthys n. sp. 인천시옹진군덕적면선갑리 신종후보 어류농어목망둑어과 Mugilogobius n. sp. 인천시옹진군연평면신종후보 어류흉상어목두툽상어과 Galeus niphonensis 제주도서귀포어판장미기록 어류홍어목전기가오리과 Crassinarke domitor 부산자갈치어시장미기록 어류뱀장어목바다뱀과 Scolecenchelys macroptera 인천시남동구논현동소래포구 미리록 어류첨치목첨치과 Oligopus robustus 제주도미기록 어류홍매치목매퉁이과 Synodus fuscus 전남강진군마량면마량항미기록 어류큰가시고기목 Solenostomidae Solenostomus cyanopterus 경북영덕 미기록 어류큰가시고기목실고기과 Syngnathoides biaculeatus 완도 (N 34 21'6.24", E 126 44'14.40") 미기록 어류쏨뱅이목양볼락과 Parascopaena mossambica 인천남구논현동 미기록 어류쏨뱅이목둑중개과 Icellus stenosomus 강원도고성군거진읍거진항 미기록 어류농어목망둑어과 Chaenogobius laevis 경북울진군평해읍남대천미기록 어류농어목홍갈치과 Acanthocepola indica 경남통영시한사면매물도미기록 어류농어목전갱이과 Decapterus russelli 강원도속초시동명항, 경북포항시항구동포항항 미기록 어류농어목자리돔과 Amphiprion ocellaris 제주도미기록 어류농어목망둑어과 Acentrogobious caninus 인천시옹진군연평면미기록 어류가자미목둥글넙치과 Engyprosopon multisquama 제주도서귀포어판장 미기록 어류가자미목가자미과 Dexistes ricuzenius 경남사천시동동미기록 어류가자미목둥글넙치과 Psettina tosana ( 사량넙치 ) 경남통영시사량면 미기록 - 150 -
Ⅱ. 연구사업 수행 내용 및 결과 : 8. 척추동물 그림 1. 맹꽁이 전국 분포 현황 (제2차 전국자연환경조사 결과) 맹꽁이 알 포접중인 맹꽁이 맹꽁이 유생 맹꽁이 성체 <그림 세부6-1> 맹꽁이(Kaloula borealis)의 알, 유생, 성체의 형태 - 151 -