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1 식품의약품안전청고시제 호 약사법 제52조제1 항에따른 생약등의잔류 오염물질기 준및시험방법 을다음과같이제정고시합니다. 2009년 6월 16일 식품의약품안전청장 생약등의잔류 오염물질기준및시험방법제정고시 생약등의잔류 오염물질기준및시험방법 제1장총 칙 제1 조( 목적) 이규정은 약사법 제52조제1 항에따라생약( 한 약과한약재를포함한다. 같다) 및그추출물( 엑스제, 유동 엑스제, 틴크제를포함한다. 같다) 과제제( 생약등 이라한다) 에대하여생약등의중금속, 잔류농약, 잔류이산화 황및곰팡이독소의기준및시험방법등을정함으로서생약 등의품질관리의적정을기함을목적으로한다.

2 제2 조( 일반원칙) 대한약전 및 대한약전외한약( 생약) 규격 집 ( 식품의약품안전청고시) 의의약품각조에중금속, 잔류농 약, 잔류이산화황및곰팡이독소의기준및시험방법을별도로 정한품목의경우에는그기준및시험방법을따른다. 제2 장생약등의잔류 오염물질기준및시험방법 제1절생약등의중금속기준및시험방법 제3 조( 적용대상) 생약등의중금속기준및시험방법은다음각 호의생약및그추출물에대하여적용한다 식물성생약 녹용 3. 노감석, 요사, 녹반, 대자석, 동청, 밀타승, 석종유, 양기석, 연 단, 영사, 운모, 웅황, 자석, 자석영, 자연동, 자황, 적석지, 주 사, 청몽석, 한수석, 해부석, 현정석, 화예석 4. 생약의추출물 5. 생약만을주성분으로하는제제 제4 조( 기준) 1 식물성생약은납 5 mg/kg, 비소 3 mg/kg

3 , 수은 0.2 mg/kg, 카드뮴 0.3 mg/kg 이다. 2 녹용은비소 3 mg/kg 이다. 3 노감석, 요사, 녹반, 대자석, 동청, 밀타승, 석종유, 양기석, 연단, 영사, 운모, 웅황, 자석, 자석영, 자연동, 자황, 적석지, 주 사, 청몽석, 한수석, 해부석, 현정석, 화예석은별표 1 에따른다. 4 생약의추출물은중금속 30 mg/kg 이다. 5 생약만을주성분으로하는제제는중금속 30 mg/kg, 납 5 mg/kg, 비소 3 mg/kg 이다. 다만, 광물성생약을 함유하는외용제는제외한다. 제5 조( 시험방법) 생약등의중금속시험방법은별표 1 및별표 2 에따른다. 제2절생약등의잔류농약기준및시험방법 제6 조( 적용대상) 생약등의잔류농약기준및시험방법은생약 및그추출물에적용한다. 다만, 별표 3에해당되는생약은적 용범위에서제외한다. 제7 조( 기준) 1 생약등의잔류농약기준은별표 4 와같다.

4 2 제1항에설정되지아니한농약이검출되었을때의적부판정은 다음각호로한다. 단, 별표 4 중 식품의기준및규격 ( 식품 의약품안전청고시) 의농약잔류허용기준을따르는생약의경 우설정되지아니한농약이검출된경우는 식품의기준및규 격 ( 식품의약품안전청고시) 의 농산물의잔류농약기준적용 및 가공식품의잔류농약잠정기준적용 을따른다. 1. 유럽약전(EP) PESTICIDE RESIDUES 항의기준에따를것 2. 유럽약전에기준이설정되지않은농약이검출되면식품의약 품안전청장은다음의계산식에따라위해평가를실시하여적 부판정할것 ADI M MDD 100 ADI: 해당농약의일일섭취허용량 (mg/kg/day) M: 성인평균체중 (60 kg) MDD: 해당생약의일일복용량(kg) 제8 조( 시험방법) 생약등의잔류농약시험방법은별표 5에따른 다. 제3절생약등의잔류이산화황기준및시험방법

5 제9 조( 적용대상) 생약등의잔류이산화황기준및시험방법은별 표 6 의생약에적용한다. 제10 조( 기준) 이산화황 (SO 2 ) 으로서 30mg/kg 이다 제11 조( 시험방법) 생약등의잔류이산화황시험방법은별표 7에따른다. 제4절생약의곰팡이독소기준및시험방법 제12 조( 적용대상) 생약의곰팡이독소기준및시험방법은별표 8 의생약에적용한다. 제13 조( 기준) 아플라톡신 B 1 10 μg/kg 이다. 제14조( 시험방법 ) 생약의곰팡이독소시험방법은별표 9 를따른다. 부 칙 제1 조( 시행일) 이고시는고시한날부터시행한다. 제2 조( 다른고시의폐지) 생약등의중금속허용기준및시험

6 방법, 생약의잔류농약허용기준및시험방법 및 생약 의곰팡이독소허용기준및시험방법, 생약의잔류이산화황 검사기준및시험방법 은각각이를폐지한다. 제3 조( 폐지고시에관한경과조치) 이고시시행당시부칙제2 조에따라폐지된각고시규정을인용하거나그에따라기준 및시험방법의심사그밖의행위를한경우이고시의규정에 따른것으로본다. 제4 조( 곰팡이독소의적용대상에관한경과조치) 1 이고시시 행당시별표 9 의적용대상중 괄루인, 귀판, 목과, 백편두, 연 자육, 울금, 육두구, 지구자, 파두, 행인 이이미수입되어검사 가진행중인사항에대하여는이고시를적용하지아니할수 있다. 2 이고시시행당시이미허가나신고가완료된의약품중 제1항에따른괄루인등 10품목은이고시시행일로부터 3개월 이경과한날부터이규정에적합한제품만제조하여야한다. 제5 조( 다른고시의개정) 1 수입의약품등관리규정 ( 식품의 약품안전청고시제 호) 중일부를다음과같이개정한 다. 별표 1의제1 호, 나를다음과같이한다. 나. 위해물질검사및그대상

7 중금속, 잔류농약, 잔류이산화황, 곰팡이독소, 벤조피렌등인 체위해물질함유여부를조사하는검사로서 생약등의잔 류 오염물질기준및시험방법 ( 식품의약품안전청고시) 및 생약의벤조피렌허용기준및시험방법 ( 식품의약품안전청 고시) 에규정된한약재를대상으로한다. 별표 나. 1의제4 호, 나를다음과같이한다. 위해물질검사는다음의기준및시험방법에의하여실시한 다. (1) 생약등의잔류 오염물질기준및시험방법 ( 식품의 약품안전청고시 ) (2) 생약의벤조피렌허용기준및시험방법 ( 식품의약품안 전청고시 ) 2 대한약전외한약( 생약) 규격집 ( 식품의약품안전청고시제 호) 의약품각조녹용절편중 3) 비소이약을가지고 생약등의중금속허용기준및시험방법( 식품의약품안전청고시제 호) 녹용 항에따라시험할때적합하다. 를 3) 비소 이약을가지고 생약등의잔류 오염물질기준및시험방 법 ( 식품의약품안전청고시제 호) 녹용 항에따라 시험할때적합하다. 로한다.

8 [ 별표 1] 광물성생약의중금속기준및시험방법( 제4조제3항 및제5 조관련) 1. 노감석 가. 기준 : 중금속 20 mg/kg 나. 시험방법 이약의가루( 미세말) 2.0 g을달아물 20 ml를넣고 10 분간잘 흔들어섞은다음 0.45 μm PTFE(polytetrafluoroethylene, hydrophil ic) syringe(all plastic) filter로곧여과한다. 여액 10 ml를네슬러 관에취하여시안화칼륨시액 20 ml를넣어잘흔들어섞고황 화나트륨시액 2 방울을넣어 5 분후에흰색배경으로하여위 에서관찰할때비교액보다진하지않다. 비교액은납표준액 2.0 ml를네슬러관에취하여물 8 ml 및시안화칼륨시액 20 ml를 넣고잘섞은다음황화나트륨시액 2 방울을넣는다 2. 요사 가. 기준 : 중금속 20 mg/kg 나. 시험방법 이약 1.0 g을달아대한약전일반시험법의중금속시험법제 1 법 에따라조작하여시험한다. 비교액에는납표준액 2.0 ml 를넣는다.

9 3. 녹반 가. 기준 : 중금속 30 mg/kg 나. 시험방법 이약 1.0 g을사기접시에달아왕수 3 ml에녹이고수욕에서증 발건고한다. 잔류물을 6 mol/l 염산시액 5 ml에녹여분액깔대 기에옮긴다. 사기접시를 6 mol/l 염산시액 5 ml씩으로 2 회씻고 씻은액을분액깔대기에합하고에텔 40 ml씩으로 2 회, 다음에 에텔 20 ml로흔들어섞은다음방치하여분리된에텔층을제거 한다. 물층에염산히드록실아민 50 mg을녹이고수욕에서 10 분간가열하고식힌다음강암모니아수를적가하여액의 ph를 3 ~ 4로조정한다음물을넣어 50 ml 로한다. 이것을검액으로하 여시험한다. 비교액은사기접시에납표준액 3.0 ml를넣고왕수 3 ml를 넣어같은방법으로조작한다 4. 대자석, 양기석, 자석, 자연동, 청몽석, 해부석 가. 기준 : 중금속 30 mg/kg 나. 시험방법 이약의가루( 미세말) 1.0 g을달아물 50 ml를넣고약 20 ml가 될때까지수욕에서가열하여끓이고식힌다음 0.45 μm PTFE(polyte

10 trafluoro ethylene, hydrophilic) syringe(all plastic) filter로여과한 다. 여액을네슬러관에취하여묽은초산 2 ml 및물을넣어 50 ml 로하여검액으로한다. 황화나트륨시액 2 방울을넣어 5 분후 에흰색배경으로하여위에서관찰할때비교액보다진하지않 다. 비교액은물 50 ml를넣고약 20 ml가될때까지끓이고식 힌다음네슬러관에취하여납표준액 3.0 ml, 묽은초산 2 ml 및물 을넣어 50 ml 로한다. 5. 동청 가. 기준 : 중금속 20 mg/kg 나. 시험방법 이약의가루( 미세말) 2.0 g을달아물 40 ml를넣고 30 분간잘 흔들어섞은다음곧여과한다. 여액 20 ml를네슬러관에취하여 묽은초산 2 ml 및물을넣어 50 ml 로하여검액으로한다. 황화 나트륨시액 2 방울을넣어 5 분후에흰색배경으로하여위에서 관찰할때비교액보다진하지않다. 비교액은납표준액 2.0 ml를 네슬러관에취하여묽은초산 2 ml 및물을넣어 50 ml로한다 6. 밀타승, 연단 가. 기준: 중금속 30 mg/kg

11 나. 시험방법 이약의가루( 미세말) 2.0 g을달아에탄올 20 ml를넣고 10분간 잘흔들어섞은다음곧원심분리하여상징액을취하여 0.45 μm PTF E(polytetra fluoroethylene, hydrophobic) syringe(all plastic) filter로곧여과한다. 여액 10 ml를네슬러관에취하여염산 2 방울및 물을넣어 25 ml로하여검액으로한다. 황화나트륨시액 1 방울을 넣어 5 분후에흰색배경으로하여위에서관찰할때비교액보다 진하지않다. 비교액은납표준액 3.0 ml를네슬러관에취하여에 탄올 10 ml, 염산 2 방울및물을넣어 25 ml로한다 7. 석종유, 한수석, 현정석, 화예석 가. 기준 : 중금속 (20 mg/kg ). 나. 시험방법 이약의가루( 미세말) 1.0 g을달아물 50 ml를넣고약 20 ml 가될때까지수욕에서가열하여끓이고식힌다음여과지로 여과하고물 5 ml씩으로 2 회씻어여과지로여과한다. 여액을 모두네슬러관에취하여묽은초산 2 ml 및물을넣어 50 ml로하 여검액으로한다. 황화나트륨시액 2 방울을넣어 5 분후에흰색 배경으로하여위에서관찰할때비교액보다진하지않다. 비교액 은물 50 ml를넣고약 20 ml가될때까지끓이고식힌다음

12 네슬러관에취하여납표준액 2.0 ml, 묽은초산 2 ml 및물을넣 어 50 ml로한다 8. 영사, 주사 가. 기준 : 중금속 20 mg/kg, 수은 2 mg/kg, 비소 2 m g/kg 나. 시험방법 1) 중금속시험방법 이약의가루( 세말) 2.0 g을달아물 20 ml를넣고 10 분간잘흔들 어섞은다음곧원심분리하여상징액을취하여 0.45 μm PTFE(pol ytetrafluoroethylene, hydrophilic) syringe(all plastic) filter로곧 여과한다. 여액 10 ml를네슬러관에취하여염산 2 방울및물 을넣어 25 ml 로하여검액으로한다. 황화나트륨시액 1 방울을 넣어 5 분후에흰색배경으로하여위에서관찰할때비교액보다 진하지않다. 비교액은납표준액 2.0 ml를네슬러관에취하여염 산 2 방울및물을넣어 25 ml로한다 2) 수은시험방법 이약 10.0 g을달아유발에넣은다음물 20 ml를넣고유봉으 로 15 분간연마하는방법으로가루로하여곧여과지로여과한

13 다음차광한데시케이터( 실리카겔) 에서 48 시간건조한다. 건조물 1.0 g을달아물 10 ml를넣고 10 분간잘흔들어섞은다음곧 원심분리하여상징액을취하여 0.45 μm PTFE(polytetrafluoroethyl ene, hydrophilic) syringe(all plastic) filter 로곧여과한다. 여액에 과망간산칼륨용액 (3 50) 1 ml 및물 30 ml를넣고정제염산 을천천히넣어중화하고다시희석시킨황산 (1 2) 5 ml를넣 고여기에이산화망간의침전이없어질때까지염산히드록실아민 용액 (1 5) 을넣은다음물을넣어정확하게 100 ml로하여검 액으로한다. 검액을가지고원자흡광광도법( 냉증기방식) 에따라 시험한다. 검액을원자흡광분석장치의검수병에넣고염화제일 석 황산시액 10 ml를넣어곧원자흡광분석장치를연결하고 공기를순환시켜파장 nm에서기록계의지시가급속히상 승하여일정한값을나타낼때의흡광도를측정하여 A T 로한다. 따 로수은대조액 2.0 ml를취하여과망간산칼륨용액 (3 50) 1 ml, 물 30 ml 및검액의조제에사용한양의정제염산을넣어검액과같은 방법으로조작하여만든액에서얻은흡광도를 As 보다크지않다 As로할때 A T 는 수은대조액 : 염화수은(II) 을데시케이터( 실리카겔) 에서 6 시간건 조하여 13.5 mg을정확하게달아묽은질산 10 ml 및물을넣어 녹여정확하게 1000 ml 로한다. 이액 1.0 ml를정확하게취하

14 여묽은질산 0.1 ml 및물을넣어정확하게 10 ml 로한다. 쓸 때만든다. 3) 비소시험방법 중금속 의여액 4 ml에물 1mL를넣어검액으로하여대한 약전일반시험법의비소시험법에따라조작하여시험한다 9. 운모, 자석영, 적석지 가. 기준 : 중금속 20 mg/kg 나. 시험방법 이약의가루( 미세말) 1.0 g을달아물 50 ml를넣고약 20 ml가 될때까지수욕에서가열하여끓이고식힌다음 0.45 μm PTFE(polyte trafluoroethylene, hydrophilic) syringe(all plastic) filter로여과한 다. 여액을네슬러관에취하여묽은초산 2 ml 및물을넣어 50 m L 로하여검액으로한다. 황화나트륨시액 2 방울을넣어 5 분후에 흰색배경으로하여위에서관찰할때비교액보다진하지않다. 비 교액은물 50 ml를넣고약 20 ml가될때까지끓이고식힌다 음네슬러관에취하여납표준액 2.0 ml, 묽은초산 2 ml 및물을 넣어 50 ml로한다

15 10. 웅황, 자황 가. 기준 : 중금속 20 mg/kg 나. 시험방법 이약의가루( 세말) 2.0 g을달아물 20 ml를넣고 10 분간잘흔들 어섞은다음곧원심분리하여상징액을취하여 0.45 μm PTFE(pol ytetrafluoroethylene, hydrophilic) syringe(all plastic) filter로 곧여과한다. 여액 10 ml를네슬러관에취하여염산 2 방울및 물을넣어 25 ml로하여검액으로한다. 황화나트륨시액 1 방울 을넣어 5 분후에흰색배경으로하여위에서관찰할때황색으 로변하거나비교액보다진하지않다. 비교액은납표준액 2.0 ml 를네슬러관에취하여염산 2 방울및물을넣어 25 ml로한다

16 [ 별표 2] 생약등의중금속시험방법( 제5 조관련) 1. 납, 비소, 카드뮴 1) 검액의조제 (1) 극초단파분해법 : 분석용검체일정량을가지고가루로하여 그약 0.1 ~ 0.5 g을정확하게달아극초단파시료전처리장 치전용용기에넣고질산 12 ml 를넣는다. 분해가잘되지 않는경우염산또는 30% 과산화수소 1 ~ 2 ml를첨가한 다. 용기를후드안에정치시켜발생가스를제거하고극초단 파시료전처리장치를사용하여분해한다. 분해가끝난다음 분해액을여과지로여과하여용량플라스크에넣고물을넣어 적절하게표준액의농도범위로희석하여검액으로한다. 따 로질산 12 ml를극초단파시료전처리장치전용용기에넣어 검액조제와같은방법으로조작하여공시험액으로한다. (2) 습식분해법 : 분석용검체일정량을가지고가루로하여그약 2 ~ 5 g을정확하게달아비커에넣고질산 10 ~ 30 ml를넣 은다음시계접시로덮어하룻밤방치한다. 가열판위에올려 놓고천천히온도를높여갈색연기가발생하지않을때까지 분해한다. 분해가잘되지않는경우질산 10 ml를추가로 넣는다. 30 % 과산화수소 5 ~ 10 ml를넣어미황색 ~ 황

17 색이될때까지완전히분해한다. 완전히분해되지않을경 우극초단파시료전처리장치를사용하여분해할수있다. 이 액을가열판위에서 1 ~ 2 ml 로될때까지농축시킨다. 식힌 다음여과지로여과하여용량플라스크에넣고물을넣어적절 하게표준액농도범위로희석하여검액으로한다. 비소의경우검액 10 ml에요오드화칼륨시액 1 ml를넣은 다음 0.5 mol/l 염산으로정확하게 50 ml로하여비소측 정용검액으로한다(ICP-MS를사용하여측정할경우이과 정을생략한다 ). 따로질산 10 ~ 30 ml를가지고검액조제와같은방 법으로조작하여공시험액으로한다. 2) 측정 검액, 표준액및공시험액을가지고대한약전일반시험법중 원자흡광광도법에따라측정한다. 원자흡광광도계를이용하여각중금속의원자흡광분석용표준원액(1000 mg/l) 을 0.5 mol/ L 질산을사용하여적정농도로희석하여검량선을작성하고공시 험액으로보정하여검액의흡광도 ( 또는강도) 를측정한다. 원자흡광광도계 (AAS, Atomic Absorption Spectrometry) 대신유도결합플라즈마분광계 (ICP, Inductively Coupled Plasma S

18 pectrometer) 를사용하여측정할수있다. 2. 수은 분석검체일정량을가지고가루로하여그약 10 g을정확하게달아수은분석기를이용하여측정한다. ~ 500 m 3. 중금속 이약 1.0 g( 또는 1.0 ml) 를달아대한약전일반시험법중금속시 험법중제3법에따라조작하여시험한다. 비교액에는납표준 액 3.0 ml 를넣는다.

19 [ 별표 3] 생약등의잔류농약기준및시험방법의적용범위에 서제외되는품목( 제6 조관련) 연번 생약명 연번 생약명 연번 생약명 연번 생약명 1 건칠 29 몰약 57 용뇌 85 트라가칸타 2 곤포 30 소합향 58 유향 86 혈갈 3 교이 31 아선약 59 장뇌 87 호동루 4 노회 32 아위 60 죽력 88 흑사당 5 등황 33 안식향 61 천축황 89 저담 6 계내금 34 백화사 62 아교 90 전갈 7 귀판 35 별갑 63 어교 91 제조 8 노봉방 36 사담 64 영양각 92 지룡 9 녹각 37 사세 65 영와 93 진주 10 녹각교 38 사향 66 오공 94 천산갑 11 녹용 39 상표초 67 오령지 95 합개 12 녹용절편 40 석결명 68 오배자 96 해구신 13 누고 41 석룡자 69 와릉자 97 해마 14 동충하초 42 석연 70 용골 98 해분 15 맹충 43 선퇴 71 우담 99 해삼 16 모려 44 섬서 72 우황 100 해표초 17 문합 45 섬수 73 웅담 101 한수석 18 반묘 46 수질 74 자충 102 해부석 19 백강잠 47 야명사 75 잠사 103 현정석 20 경분 48 석고 76 웅황 104 화예석 21 금박 49 석유황 77 은박 105 활석 22 노감석 50 석종유 78 자석 106 주사수비 23 녹반 51 수은 79 자석영 24 대자석 52 양기석 80 자연동 25 동청 53 연단 81 자황 26 망초 54 영사 82 적석지 27 밀타승 55 요사 83 주사 28 백반 56 운모 84 청몽석

20 [ 별표 4] 생약( 별표3 의생약제외) 및생약의추출물의잔류 농약기준( 제7조제1 항관련) 1. 갈근 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 3) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 5) 엔도설판(Endosulfan : α, β-엔도설판및엔도설판설페이트의 합계) : 0.2 mg/kg 6) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 7) 캡탄(Captan) : 2 mg/kg 2. 감초 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 3) 디페노코나졸(Difenoconazole) : 0.05 mg/kg

21 4) 메톡시클로르(Methoxychlor) : 1 mg/kg 5) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 6) 아족시스트로빈(Azoxystrobin) : 0.05 mg/kg 7) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 8) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 3. 강활, 결명자, 괄루근, 당삼, 방풍, 사삼, 상지, 석창포, 오수유, 우슬, 원지, 절패모, 지실, 창이자, 향부자, 현초 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 3) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 5) 엔도설판(Endosulfan : α, β-엔도설판및엔도설판설페이트의 합계) : 0.2 mg/kg 6) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg

22 4. 갱미 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표 4] 농산물의농약잔류허용기준의 쌀 에따름 5. 건율 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표 4] 농산물의농약잔류허용기준의 밤 에따름 6. 고추 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표 4] 농산물의농약잔류허용기준의 고추( 건조) 에따름 7. 구기자 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표 4] 농산물의농약잔류허용기준의 구기자( 건조) 에따름 8. 구맥, 상엽 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg

23 3) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 5) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 6) 프로시미돈(Procymidone) : 0.1 mg/kg 9. 길경 1) 나프로파마이드(Napropamid) : 0.1 mg/kg 2) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 3) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 4) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 5) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 6) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 7) 치노메치오네이트(Chinimathionat) : 0.3 mg/kg 10. 녹두 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표 4] 농산물의농약잔류허용기준의 녹두 에따름

24 11. 당귀 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 3) 메톡시클로르(Methoxychlor) : 1 mg/kg 4) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 5) 아조싸이클로틴(Azocychlotin) : 0.2 mg/kg 6) 아족시스트로빈(Azoxystrobin) : 0.1 mg/kg 7) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 8) 엔도설판(Endosulfan : α, β-엔도설판및엔도설판설페이트의 합계) : 0.2 mg/kg 9) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 10) 터부코나졸(Tebuconazole) : 1.0 mg/kg 11) 펜디메탈린(Pendimethalin) : 0.2 mg/kg 12) 펜프로파스린(Fenpropathrin) : 0.2 mg/kg 12. 대산 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표 4] 농산물의농약잔류허용기준의 마늘 에따름

25 13. 대추 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표 4] 농산물의농약잔류허용기준의 대추( 건조) 에따름 14. 도인 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 3) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 5) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 6) 클로로타로닐(Chlorothlonil) : 0.1 mg/kg 15. 맥문동 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 3) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 5) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 6) 펜디메탈린(Pendimethalin) : 0.2 mg/kg

26 16. 면실자 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표 4] 농산물의농약잔류허용기준의 면실 에따름 17. 목과 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표4] 농산물의농약잔류허용기준의 모과 에따름 18. 목단피 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 3) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 5) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 6) 클로르피리포스(Chlorpyrifos) : 0.5 mg/kg 19. 미삼 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표 5] 인삼의농약잔류허용기준의 건삼 에따름

27 20. 박하 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 3) 메톡시클로르(Methoxychlor) : 1 mg/kg 4) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 5) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 6) 엔도설판(Endosulfan : α, β-엔도설판및엔도설판설페이트 의합계) : 0.2 mg/kg 7) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 21. 백과 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표 4] 농산물의농약잔류허용기준의 은행 에따름 22. 백출 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg

28 3) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 5) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 6) 캡탄(Captan) : 2 mg/kg 7) 프로시미돈(Procymidon) : 0.1 mg/kg 23. 백편두 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표4] 농산물의농약잔류허용기준의 기타콩류 에따름 24. 복분자 1) 식약청고시 식품의기준및규격 중 [ 별표4] 농산물의농약 잔류허용기준의 복분자 에따름 25. 부소맥 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표4] 농산물의농약잔류허용기준의 밀 에따름 26. 산수유, 산초, 진피, 차전자 1) 총디디티(DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p'-d

29 DT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 3) 메톡시클로르(Methoxychlor) : 1 mg/kg 4) 총비에이치씨 (BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 5) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 6) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 27. 산약 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표4] 농산물의농약잔류허용기준의 마* 에따름 28. 생강, 건강 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표4] 농산물의농약잔류허용기준의 생강 에따름 29. 시호 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 3) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg

30 4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 5) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 6) 펜디메탈린(Pendimethalin) : 0.2 mg/kg 7) 포스치아제이트(Fosthiazate) : 0.02 mg/kg 30. 영지 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표4] 농산물의농약잔류허용기준의 버섯류 에따름 31. 오매 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표4] 농산물의농약잔류허용기준의 매실 에따름 32. 우방근 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표4] 농산물의농약잔류허용기준의 우엉 에따름 33. 의이인 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표4] 농산물의농약잔류허용기준의 율무 에따름

31 34. 인삼 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표5] 인삼의농약잔류허용기준의 건삼 에따름 35. 임자 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표4] 농산물의농약잔류허용기준의 종실류 에따름 36. 작약 1) 나프로파마이드(Napropamid) : 0.1 mg/kg 2) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 3) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 4) 마이클로부타닐(Mychlorbutanil) : 0.1 mg/kg 5) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 6) 싸이프로디닐(Cyprodinil) : 0.1 mg/kg 7) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 8) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 9) 이민옥타딘(Iminoctadine) : 0.3 mg/kg 10) 카벤다짐(Carbendazim) : 0.05 mg/kg

32 11) 트리아디메놀(Triadimenol) : 0.1 mg/kg 12) 트리아디메폰(Triadimefon) : 0.5 mg/kg 13) 트리포린(Triforine) : 0.1 mg/kg 14) 트리프루미졸(Triflumizole) : 1.0 mg/kg 15) 펜디메타린(Pendimethalin) : 0.2 mg/kg 16) 프로피네브(Propineb) : 0.2 mg/kg 17) 후루디옥소닐(Fludioxonil) : 0.1 mg/kg 37. 적소두 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표4] 농산물의농약잔류허용기준의 팥 에따름 38. 지모 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 3) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 5) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 6) 싸이퍼메쓰린(Cypermethrin) : 0.5 mg/kg

33 39. 창출 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 3) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 5) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 6) 토릴플루아니드(Tolyfluanid) : 1 mg/kg 7) 프로시미돈(Procymidon) : 0.1 mg/kg 40. 천궁 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 3) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 4) 비펜스린(Bifenthrin) : 0.5 mg/kg 5) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 6) 엔도설판(Endosulfan : α, β-엔도설판및엔도설판설페이트 의합계) : 0.2 mg/kg

34 7) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 8) 클로르피리포스(Chloropyrifos) : 0.5 mg/kg 9) 클로르훼나피르(Chlorfenapyr) : 0.05 mg/kg 41. 총백 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표4] 농산물의농약잔류허용기준의 파 에따름 42. 택사 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 3) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 5) 엔도설판(Endosulfan : α, β-엔도설판및엔도설판설페이트 의합계) : 0.2 mg/kg 6) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 7) 클로르피리포스(Chloropyrifos) : 0.5 mg/kg

35 43. 해송자 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표 4] 농산물의농약잔류허용기준의 잣 에따름 44. 호도 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표 4] 농산물의농약잔류허용기준의 호두 에따름 45. 홉 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표 4] 농산물의농약잔류허용기준의 호프 에따름 46. 홍삼 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표 4] 농산물의농약잔류허용기준의 홍삼 에따름 47. 홍화 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg

36 3) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 5) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 6) 퀸토젠(Quntozene, 퀸토젠과펜타클로로아닐린및메칠펜타 클로로페닐설파이드의합계) : 0.1 mg/kg 48. 홍화자 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 3) 메티람(Methiram) : 0.3 mg/kg 4) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 5) 비펜스린(Bifenthrin) : 0.1 mg/kg 6) 아세타미프리드(Acetamiprid) : 0.1 mg/kg 7) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 8) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 9) 이미다크로프리드(Imidacloprid) : 0.1 mg/kg 10) 이민옥타딘(Iminoctadine) : 0.1 mg/kg 11) 티람(Thiram) : 0.1 mg/kg 12) 펜디메타린(Pendimethalin) : 0.1 mg/kg

37 13) 피메트로진(Pymetrozine) : 0.05 mg/kg 49. 황기 1) 나프로파마이드(Napropamid) : 0.1 mg/kg 2) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 3) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 4) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 5) 아세타미프리드(Acetamiprid) : 0.1 mg/kg 6) 아족시스트로빈(Azoxystrobin) : 0.1 mg/kg 7) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 8) 엔도설판(Endosulfan : α, β-엔도설판및엔도설판설페이트 의합계) : 0.2 mg/kg 9) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 10) 이미다크로프리드(Imidacloprid) : 0.3 mg.kg 11) 트리프루미졸(Triflumizole) : 0.1 mg/kg 12) 티아메톡삼(Thiametoxam) : 0.1 mg/kg 13) 페나리몰(Fenarimol) : 0.5 mg/kg 14) 피메트로진(Pymetrozine) : 0.05 mg/kg

38 50. 흑두 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표 4] 농산물의농약잔류허용기준의 콩류 에따름 51. 흑지마 ( 호마) 1) 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전청고시) 중 [ 별표4] 농산물의농약잔류허용기준의 참깨 에따름 52. 기타생약( 단, [ 별표3] 의생약제외) 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 3) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 5) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 53. 생약( 단, [ 별표3] 의생약제외) 의추출물 1) 총디디티( 총DDT : p,p'-ddd, p,p'-dde, o,p'-ddt 및 p,p' -DDT 의합계) : 0.1 mg/kg 2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg

39 3) 총비에이치씨 ( 총BHC : α, β, γ및 δ-bhc 의합계) : 0.2 mg/kg 4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 5) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg

40 [ 별표 5] 생약등의잔류농약시험방법( 제8조제1 항관련) 1. 나프로파마이드 (Napropamide), 디디티 (p,p'-ddd, p,p'-dde, o, p'-ddt, 및p,p'-DDT), 디엘드린 (Dieldrin), 마이클로부타닐 (Myclobutanil), 메톡시클로르 (Methoxychlor), 비에치씨 ( α, β, γ, 및 δ-bhc), 비펜스린 (Bifenthrin), 싸이퍼메쓰린 (Cypermet hrin), 싸이프로디닐 (Cyprodinil), 아세타미프리드 (Acetamipri d), 아족시스트로빈 (Azoxystrobin), 알드린(Aldrin), 엔도설 판( α, β-endosulfan 및 Endosulfan sulfate), 엔드린(Endri n), 치노메치오네이트 (Chinomethionat), 캡탄(Captan), 퀸토 젠[Quintozene (PCNB)], 클로로타로닐 (Chlorothalonil), 클 로르피리포스 (Chlorpyrifos), 클로르훼나피르 (Chlorfenapy r), 터부코나졸 (Tebuconazole), 토릴플루아니드 (Tolylfluani d), 트리아디메놀 (Triadimenol), 트리아디메폰 (Triadimefo n), 트리프루미졸 (Triflumizole), 페나리몰 (Fenarimol), 펜디 메타린(Pendimethalin), 펜프로파스린(Fenpropathrin), 포 스치아제이트 (Fosthiazate), 프로시미돈 (Procymidone), 후루 디옥소닐 (Fludioxonil) 1) 장치 : 가스크로마토그래프[ 전자포획검출기(ECD), 질소 인 검출기(NPD) 및질량분석기(MSD)]

41 2) 시약및시액 가) 용매 : 잔류농약시험용또는이와동등한것 나) 물 : 증류수또는이와동등한것 다 ) 후로리실 (Florisil) : 후로리실 (1 g) 이충전되어있는카트리지 ( 용 량 6 ml) 라) 여과보조제 : 셀라이트 545(celite 545) 마 ) 표준원액 : 각농약의표준품을아세톤등에녹여 100 mg/ kg 으로만든다. 바) 표준용액 : 표준원액을각각아세톤에녹여적당한농도로혼 합 희석한다. 사) 기타시약 : 잔류농약시험용또는특급 3) 시험용액의조제 가) 추출 : 시료(500 ~ 600 g) 를잘분쇄한후약 5 g을달아 물 40 ml를넣고 4 시간방치한다( 필요에따라시료의양은 적절히조정할수있다). 여기에아세톤 90 ml를넣고균 질기(homogenizer) 로 5분간균질화한후진공펌프와가지 달린삼각플라스크및부크너깔때기로감압여과한다. 이 여액을 500 ml 분액깔때기에옮기고포화식염수 50 ml 와증류수 100 ml 를가한다. 이에디클로로메탄 70 ml를 넣고심하게흔들어섞은다음정치하여층을분리시킨다.

42 아래층( 디클로로메탄층) 은다른분액깔때기에모은다. 물층 에다시디클로로메탄 70 ml를넣고심하게흔들어섞은 후정치하여층을분리시킨다음아래층( 디클로로메탄층) 을모은다. 디클로로메탄층은무수황산나트륨을통과시켜 탈수하고감압농축기에넣어농축한다음헥산 4 ml에녹 인다. 나 ) 정제 : 미리후로리실카트리지(6 ml, 1 g) 에헥산 6 ml 를넣고 2분간멈춘다음유출시켜버리고, 이카트리지에 20 % 아세톤함유헥산 6 ml를위와같은방법으로유출 하여버린다. 이어서추출액을카트리지상단에넣고 2분 간컬럼에머무르게한다음서서히유출액을받는다. 카 트리지가용매에젖어있는상태에서헥산 디클로로메 탄 아세톤 (50:48.5:1.5) 5 ml 로유출하여유출액을모은다. 유출액은수욕상(40 ) 에서감압농축시켜용매를날 려보낸다음 20 % 아세톤함유헥산 2 ml에녹여시험 용액으로한다. 4) 시험조작 가) 가스크로마토그래프의측정조건 (1) 전자포획검출기(GC-ECD) ( 가) 칼럼 : 안지름 0.25 mm, 길이 30 m의규산유리제캐필

43 러리칼럼관에가스크로마토그래프용 5 % 메칠실리콘을 0.25 μm의두께로코팅한것, 안지름 0.25 mm, 길이 30 m의규산유리제캐필러리칼럼관에 가스크로마토그래프 용 50 % 페닐, 50 % 메칠실리콘을 0.25 μm의 두께로 코팅한것또는이와동등한것 ( 나) 캐리어가스및유량 : 질소, 1.0 ml/ 분 ( 다) 칼럼온도 : 80 에서시료를주입하고 2분간유지한다 음분당 10 의비율로 280 까지온도를상승시켜 10 분이상(50 % 페닐, 50 % 메칠실리콘을 0.25 μm의 두께 로코팅한것은 15 분이상) 유지한다. ( 다) 주입부 : 260, split mode(10:1) ( 라) 검출기온도 : 280 (2) 질소 인검출기(GC-NPD) ( 가) 칼럼 : 안지름 0.25 mm, 길이 30 m의규산유리제캐필 러리칼럼관에가스크로마토그래프용 5 % 메칠실리콘 을 0.25 μm의두께로코팅한것, 안지름 0.25 mm, 길이 30 m 의규산유리제캐필러리칼럼관에가스크로마토그 래프용 50 % 페닐, 50 % 메칠실리콘을 0.25 μm의 두께 로코팅한것또는이와동등한것 ( 나) 캐리어가스및유량 : 질소, 1.0 ml/ 분

44 ( 다) 칼럼온도 : 80 에서시료를주입하고 2분간유지한다 음분당 10 의비율로 280 까지온도를상승시켜 1 0 분이상(50 % 페닐, 50 % 메칠실리콘을 0.25 μm의 두 께로코팅한것은 15 분이상) 유지한다. ( 라) 주입부온도 : 260, split mode(10:1) ( 마) 검출기온도 : 280 (3) 질량분석기(GC-MSD) ( 가) 칼럼: 질량분석기용안지름 0.25 mm, 길이 30 m의규 산유리제캐필러리칼럼관에가스크로마토그래프용 5 % 메칠실리콘을 0.25 μm 의두께로코팅한것또는이와동 등한것 ( 나) 캐리어가스및유량: 헬륨, 0.9 ml/ 분 ( 다) 칼럼온도: 100 에서시료를주입하고 2분간유지한 다음분당 10 의비율로 280 까지온도를상승시 켜 15 분이상유지한다. ( 라) 주입부온도: 260, split mode(10:1) ( 마) Interface 온도: 280 ( 바) 이동상유량: 1.0 ml/ 분 나) 정성시험 (1) 칼럼충전제 2개이상을선정하여표준용액및시험용액

45 을가스크로마토그래프에각각주입한다. 얻어진크로마 토그램상의각피크를표준용액의피크와비교할때어 느측정조건에서도그머무름시간이일치하여야한다. (2) GC-MSD 검출기를이용하여머무름시간및질량스펙 트럼으로각농약의성분을확인할수도있다. 다) 정량시험 : 정성시험과동일한조건에서얻어진시험결과 에의해피크높이법또는피크면적법에따라정량한다. 2. 메티람 (Metiram), 티람 (Thiram) 및프로피네브 (Propineb) 1) 장치 : 고속액체크로마토그래프 [ 자외부흡광광도검출기 (UV Detector)] 2) 시약및시액 가) 용매 : 잔류농약시험용또는이와동등한것 나) 물 : 증류수또는이와동등한것 다 ) 표준원액 : 티람(thiram) 표준품은메탄올에녹이고, 메티람 (metiram) 과프로피네브(propineb) 표준품은시료추출용매 ( 0.25M EDTA가함유된 0.45M NaOH 수용액 100 ml에 L -cysteine HCl 0.5 g 이첨가된액/ 2M 염산을사용하여 p H를 7.0으로조절) 로완전히용해시켜 100 mg/l 농도로만들어즉시사용한다. 라) 표준용액 : 상기표준원액을 ph를 7.0으로조절된추출용매

46 를사용하여적당한농도로희석한다음 1 ml 취하여 3) 시 험용액의조제가 ) 추출및나) 유도체화과정과동일하게조 작한다음적당한농도로희석하여사용한다. 마 ) 기타시약 : methyl iodide, tetrabutyl ammonium hydrogen s ulfate, EDTA(tetra sodium), L-cysteine HCl 등잔류농약 시험용또는특급시약 3) 시험용액의조제 가) 추출 : 시료(500 ~ 600 g) 를잘분쇄한다음약 20 g을정 밀히달아삼각플라스크에넣는다. 0.25M EDTA가함유된 0.45M NaOH 수용액(pH를 9.5 ~ 9.6 으로정밀조정) 80 ml 에 L- cysteine HCl 0.5 g을넣고마개를하여즉시진탕 기에서 10 분간흔들어추출한다. 이를유리여과기로여과 하고삼각플라스크와잔사를위추출용매 10 ml씩으로 수회씻어여액과합친다. 여기에 0.41M tetrabutyl ammo nium hydrogen sulfate 수용액 5 ml 및 NaCl 10 g을넣 어잘흔들어섞고 2M HCl을사용하여 ph를 7.0 부근으 로신속히조절하고이를 300 ml 분액깔때기에옮긴다. 주 : 검체를갈거나분쇄하여균질화시키면디치오카바메이트계 농약은급속히분해되며, 이농약은알카리조건에서불안정하 여추출용매로추출직후부터급속히분해되므로추출단계의

47 과정은 15분이내로하고세척및여과시간을최소화하여야 하고 ph 7.0 으로신속히조절하여야한다. 나) 유도체화 : 위의분액깔때기에 0.05M methyl iodide가함유 되어있는디클로로메탄및헥산의혼합액(1:1) 40 ml를넣 고 5 분간심하게흔들어섞은다음방치한다. 유기용매층( 윗 층) 을 50 ml 원심분리관으로옮기고 800rpm으로 5분간원심 분리후 20 ml를분취하여 20 % 1,2-propanediol을함유한 디클로로메탄 5 ml 를넣고수욕(30 ) 중에서질소기 류하에 1,2-propanediol을제외한용매를감압으로제거한 다. 즉시메탄올에녹여서일정량으로하여시험용액으로 한다. 4) 시험조작 가) 고속액체크로마토그래프의측정조건 (1) 칼럼 : 안지름 2 ~ 5 mm, 길이 20 ~ 30 cm인스테인레스 강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴화한 실리카겔을충전한다. (2) 검출기및파장 : 자외부흡광광도검출기(272 nm) (3) 이동상 : 아세토니트릴 물 메탄올 (22 : 65 : 13) (4) 유속 : 1.0 ml/ 분 나) 정성시험

48 (1) 위의조건으로얻어진크로마토그램상의각피크를표준 용액의피크와비교할때어느측정조건에서도그머무름 시간이일치하여야한다. (2) LC/MS/MS 를이용하여머무름시간및질량스펙트럼으로 확인할수도있다. 다) 정량시험 : 정성시험과동일한조건에서얻어진시험결과 그림 1. 액체크로마토그라프크로마토그램 1 티람(thiram), 2 메티람(metiram), 3 프로피네브(propineb) 3. 아조싸이클로틴(Azocyclotin) 1) 장치 : 가스크로마토그래프 [ 불꽃광도검출기 (FPD) : 황용간섭필터 ] 2) 시약및시액 가) 용매 : 잔류농약시험용또는이와동등한것 나) 물 : 증류수또는이와동등한것 다) 후로리실(Florisil) : 칼럼크로마토그래프용후로리실(60 ~

49 100 mesh) 을 130 에서하룻밤가열한다음데시케이터 에서식힌다. 라) 여과보조제 : 셀라이트 545 (celite 545) 마 ) 표준원액 : 아조싸이클로틴을헥산등에녹여 100 mg/kg 으 로만든다. 사) 표준용액 : 표준원액을헥산에녹여적당한농도로희석한다. 아) 기타시약 : 잔류농약시험용또는특급 3) 시험용액의조제 가) 추출 : 시료(500 ~ 600 g) 를잘분쇄한후약 30 g을달아 증류수 40 ml 및초산 10 ml 를넣고잘섞는다. 아세톤 100 ml를넣어균질기로 3분간균질화한다음감압여과 한다. 잔사를아세톤소량으로씻는다. 여액을모아서분 액깔때기에옮기고헥산 100 ml씩 2회추출하여무수황 산나트륨을통과시켜탈수한다음감압농축한다. 나) 유도체화 : 농축액을에텔 20 ml로녹인다음 3 M 염화 메칠마그네슘 (methylmagnesium chloride)/thf 용액 3 m L을가하고잘흔들어준다음 10 분간정치한다. 물 10 ml와염산 1 ml을넣어가수분해한다음분액깔때기로 옮긴다. 플라스크를에텔 10 ml로깨끗이씻어분액깔때기 에모은다. 물층( 아래층) 은버리고에텔층을모아무수황

50 산나트륨으로탈수시킨다음농축 건고시킨다. 다) 정제 : 안지름 20 mm, 길이 30 mm 유리칼럼에후로리실 10 g을헥산으로충전하고농축액을약 10 ml의헥산으 로용해하여미리준비한칼럼에넣고헥산 120 ml로유 출하여유출액을모은다. 유출액을수욕상(40 ) 에서 감압농축하여건고시킨다. 아세톤에녹여일정량으로하여 시험용액으로한다. 4) 시험조작 가) 가스크로마토그래프의측정조건 (1) 칼럼 : 안안지름 0.25 mm, 길이 30 m의규산유리제캐필 러리칼럼관에가스크로마토그래프용 50% 시아노프로필 페닐, 50% 메칠실리콘을 0.25 μm의 두께로코팅한것또 는이와동등한것 (2) 시험용액주입구및검출기온도 : 270, 300 (3) 칼럼온도 : 80 에서시료를주입하고 2분간유지한다 음분당 10 의비율로 260 까지온도를상승시켜 20 분이상유지한다. (4) 캐리어가스및유량 : 질소(1.0 ml/ 분), 수소(3 ml/ 분), 공 기(30 ml/ 분) 나) 정성시험

51 (1) 위의조건으로얻어진크로마토그램상의피크는어느측 정조건에서도표준용액피크의머무름시간과일치하여야 한다. (2) GC-MSD 검출기를이용하여머무름시간및질량스펙트 럼으로확인할수도있다. 다) 정량시험 : 정성시험과동일한조건에서얻어진시험결과 에의해피크높이법또는피크면적법에따라정량한다. 4. 카벤다짐(Carbendazim) 1) 장치 : 고속액체크로마토그래프[ 자외부흡광광도검출기(UV-D etector) 또는형광검출기(Fluorescence Detector)] 2) 시약및시액 가) 용매 : 잔류농약시험용또는이와동등한것 나) 물 : 증류수또는이와동등한것 다) 후로리실(Florisil) : 칼럼크로마토그래피용후로리실을 130 에서하룻밤가열한후데시케이터에서식힌다. 라) 표준원액 : 카벤다짐을메탄올에녹여 100 mg/kg으로만 든다. 마) 표준용액 : 표준원액을메탄올에녹여적당한농도로희석 한다.

52 사) 기타시약 : 잔류농약시험용또는특급 3) 시험용액의조제 가) 추출 : 시료(500 ~ 600 g) 를잘분쇄한후약 10 g에아스 코르빈산나트륨(sodium L-ascorbate) 4 g, 증류수 40 ml, 메탄올 80 ml, 하이플로슈퍼셀 5 g을넣어 1 시간진탕 추출하고감압여과한다. 메탄올 50 ml로용기와잔사를 씻어여액과합한다. 나) 추출(2 차) : 추출액을분액깔때기에옮기고증류수 200 m L, 포화염화나트륨 20 ml, 를가한후 0.1M 염산시액으로 ph 2-3 으로조절한다. 헥산 70 ml로 2회추출하여헥산 층을버린다. 물층을 ph 6-7로조절한후수층에초산에 칠 100 ml씩 2회추출한다음 1 PS 여지를통과시킨용 매층을수욕상(40 ) 에서농축 건고시킨다. 다) 정제 : 안지름 15 mm, 길이 300 mm 유리칼럼에후로리 실 5 g 을헥산으로충전하고, 농축잔류물을헥산 아세톤 (7:3) 혼합액 5 ml 로옮겨넣고헥산 아세톤(7:3) 혼합액 8 0 ml 로유출하여유출액을모은다. 유출액을수욕상(40 ) 에서농축 건고시킨다음메탄올 2 ml로녹여시험용 액으로한다.

53 4) 시험조작 가) 고속액체크로마토그래프의측정조건 (1) 칼럼 : 안지름 2 ~ 5 mm, 길이 20 ~ 30 cm인스테인레스 강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴화한 실리카겔을충전한다. (2) 칼럼온도 : 40 (3) 이동상 : 0.01M KH 2 PO 4 용액 물 (4 : 6) (4) 검출기파장 : 자외부흡광광도검출기 UV 285 nm, 형광검 출기여기파장 280 nm, 형광파장 315nm (5) 유속 : 1.0 ml/ 분 나 ) 정성시험 (1) 위의조건으로얻어진크로마토그램상의각피크를표준 용액의피크와비교할때어느측정조건에서도그머무름 시간이일치하여야한다. (2) LC/MS/MS 를이용하여머무름시간및질량스펙트럼으로 확인할수도있다. 다) 정량시험 : 정성시험과동일한조건에서얻어진시험결과 에의해피크높이법또는피크면적법에따라정량한다.

54 5. 디페노코나졸(Difenoconazole) 1) 장치 : 가스크로마토그래프[ 질소 인검출기(NPD)] 2) 시약및시액 가) 용매 : 잔류농약시험용또는이와동등한것 나) 물 : 증류수또는이와동등한것 다 ) 후로리실 (Florisil) : 후로리실 (1 g) 고정상이충전되어있는카 트리지 ( 용량 6 ml) 라) 여과보조제 : 셀라이트 545 (celite 545) 마) 표준원액 : 디페노코나졸을아세톤에녹여 100 mg/kg으로 만든다. 바) 표준용액 : 표준원액을아세톤에녹여적당한농도로희석 한다. 사) 기타시약 : 잔류농약시험용또는특급 3) 시험용액의조제 가) 추출 : 시료(500 ~ 600 g) 를잘분쇄한다음약 50 g에아 세톤 100 ml를넣어 30 분간진탕추출한다. 셀라이트 54 5에통과시켜감압여과하고포화염화나트륨시액 50 ml 를넣어헥산 50 ml씩 2 회추출한다. 헥산층을무수황산 나트륨을통과시켜탈수시키고수욕상(40 ) 에서갑 압농축 건고한다음헥산 5 ml 에녹인다.

55 나) 정제 : 미리후로리실카트리지에헥산 5 ml를초당 2~3 방울정도의속도로유출하여버린다. 이카트리지에추출 액을흡착시킨다. 헥산 아세톤(95:5) 20 ml를유출시켜 버린다음헥산 아세톤(70:30) 40 ml로유출시켜유출액 을모은다. 유출액을수욕상(40 ) 에서감압농축 건고시킨다음아세톤 2 ml 로녹여시험용액으로한다. 4) 시험조작 가) 가스크로마토그래프의측정조건 (1) 칼럼 : 안지름 0.25 mm, 길이 30 m의규산유리제캐필러 리칼럼관에가스크로마토그래프용 50 % 페닐, 50 % 메 칠실리콘을 0.25 μm의 두께로코팅한것또는이와동등 한것 (2) 시험용액주입구및검출기온도 : 280 (3) 칼럼온도 : 100 에서시료를주입하고 1분간유지한다 음분당 10 의비율로 250 까지온도를상승시켜 12 분이상유지한다. (4) 캐리어가스및유량 : 질소, 1.0 ml/ 분 나) (1) 정성시험 위의조건으로얻어진크로마토그램상의피크는어느측 정조건에서도표준용액피크의머무름시간과일치하여야

56 한다. (2) GC-MSD 검출기를이용하여머무름시간및질량스펙트럼 으로확인할수도있다. 다) 정량시험 : 정성시험과동일한조건에서얻어진시험결과 에의해피크높이법또는피크면적법에따라정량한다. 6. 이미다크로프리드(Imidacloprid) 1) 장치 : 고속액체크로마토그래프[ 자외부흡광광도검출기(UV-De tector)] 2) 시약및시액 가) 용매 : 잔류농약시험용또는이와동등한것 나) 물 : 증류수또는이와동등한것 다) 여과보조제 : 셀라이트 545(celite 545) 라) 실리카겔카트리지: SPE용실리카겔(1 g) 고정상이충전되어 있는카트리지 ( 용량 6 ml) 또는이와동등한것 마) 표준원액 : 이미다크로프리드를아세토니트릴 물(20:80) 의 혼합액에녹여 100 mg/kg 으로만든다. 바) 표준용액 : 표준원액을아세토니트릴 물(20:80) 의혼합액 에녹여적당한농도로희석한다. 사) 기타시약 : 잔류농약시험용또는특급

57 3) 시험용액의조제 가) 추출 : 시료(500 ~ 600 g) 를잘분쇄한다음약 25 g을달 아아세토니트릴 100 ml 및물 100mL를정확히넣고 5분 간고속균질화한다. 추출액은감압여과하고, 여액중 100 ml를정확하게취하여 40 의수욕상에서물만남 을때까지감압농축한다. 물층에싸이클로헥산 50mL씩 2 회추출하여사이클로헥산층은버리고, 디클로로메탄 50 m L씩 2 회추출한다. 추출액은무수황산나트륨을통과시켜 탈수시키고수욕상(40 ) 에서감압농축하여디클로로 메탄 2 ml 로녹인다. 나) 정제 : 미리활성화한실리카겔카트리지에추출액을흡착 시킨다음헥산 에칠아세테이트(50:50) 10 ml를유출시켜 버리고, 이어서헥산 에칠아세테이트(30:70) 15 ml로용 출시킨후농축건고시킨다. 건고물을아세토니트릴: 물(5:5) 로일정량으로하여시험용액으로한다. 4) 시험조작 가) 고속액체크로마토그래프의측정조건 (1) 칼럼 : 안지름 2 ~ 5 mm, 길이 20 ~ 30 cm인스테인레스 강관에 5 μm의액체크로마토그래프용옥타데실실릴화한 실리카겔을충전한다.

58 (2) 검출기및파장 : UV 270 nm (3) 이동상 : 아세토니트릴 0.01M Na2HPO 4 (ph 6.5) (25:75) (4) 유속 : 0.8 ml/ 분 (5) 칼럼온도 : 40 나. 정성시험 (1) 위의조건으로얻어진크로마토그램상의각피크를표준 용액의피크와비교할때어느측정조건에서도그머무름 시간이일치하여야한다. (2) LC/MS/MS 를이용하여머무름시간및질량스펙트럼으로 확인할수도있다. 다. 정량시험 : 정성시험과동일한조건에서얻어진시험결과 에의해피크높이법또는피크면적법에따라정량한다. 7. 이민옥타딘(Iminoctadine) 1) 장치 : 고속액체크로마토그래프( 형광검출기) 2) 시약및시액 가) 용매 : 잔류농약시험용또는이와동등한것 나) 물 : 증류수또는이와동등한것 다) 표준원액 : 이민옥타딘트리아세테이트를증류수에녹여이 민옥타딘으로써 100 mg/kg 으로만든다( 이민옥타딘환산계

59 수 : 0.664). 라) 표준용액 : 표준원액을증류수에녹여적당한농도로희석 한다. 마) 기타시약 : 잔류농약시험용또는특급 3) 시험용액의조제 가) 추출 : 시료(500 ~ 600 g) 를잘분쇄한다음약 20 g을 취하여염산구아니딘 7 g 을넣고잘섞는다. 메탄올 100 m L를정확히넣어약 5 분간고속균질화한다. 추출액은감 압여과하고, 여액중 50 ml를정확하게취하여 2 M NaOH 50 ml, 물 50 ml 및클로로포름 100 ml를넣어 2분간 3회 분배하여유기용매층을취한다. 여기에 1 M H 2 SO 4 2 ml 및물 40 ml 로분배하여물층을취하고, 다시 1 M H 2 SO ml 및물 20 ml 로분배한다. 물층을합하여약 70 수욕상에서약 2 ml 로농축하고, 농축액에 16% Sodium ac etate 수용액을가하여 5 ml 로한다. 4) 시험조작 가) 고속액체크로마토그래프의측정조건 (1) 칼럼 : 안지름 2 ~ 5 mm, 길이 20 ~ 30 cm인스테인레스 강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴화한실 리카겔을충전한다.

60 (2) 검출기및파장 : 형광광도검출기여기파장 305 nm,, 형 광파장 500 nm (3) 이동상 : A - 물 28 % 암모니아수(69 : 1) 혼합액(pH 2. 5/60 % HClO 4 로조정 ) B - 40 % 메탄올 (4) 이동상 gradient : A : B(8 : 2) 의혼합액에서 A : B(1 : 9) 의혼합액으로 30분간농도균배한후 10분이상흘려보낸 다( 또는기타최적조건). (5) 칼럼온도 : 40 (6) 유속 : 0.7 ml/ 분 (7) Post Reaction Pump 유량 : 0.7 ml/ 분(0.5 M NaOH 0.7 ml/ 분, 0.15 % Ninhydrin 0.7 ml/ 분)( 또는기타최적조건) (8) Reactor 온도 : 80 나) (1) 정성시험 위의조건으로얻어진크로마토그램상의각피크를표준 용액의피크와비교할때어느측정조건에서도그머무름 시간이일치하여야한다. (2) LC/MS/MS 를이용하여머무름시간및질량스펙트럼으로 확인할수도있다. 다) 정량시험 : 정성시험과동일한조건에서얻어진시험결과

61 에의해피크높이법또는피크면적법에따라정량한다. 그림 2. 이민옥타딘시험장치 8. 피메트로진(Pymetrozine) 1) 장치 : 고속액체크로마토그래프[ 자외부흡광광도검출기(UV-De tector)] 2) 시약및시액 가) 용매 : 잔류농약시험용또는이와동등한것 나) 물 : 증류수또는이와동등한것 다) 카트리지 : ENVI-Carb Sep-Pak 카트리지, 250 mg 라) 여과보조제 : 셀라이트 545 마) 표준원액 : 피메트로진을아세토니트릴에녹여 500 mg/kg 으로만든다. 바) 표준용액 : 표준원액을아세토니트릴을사용하여적당한 농도로희석한다.

62 사) 기타시약 : 잔류농약시험용또는특급 3) 시험용액의조제 가) 추출 : 시료(500 ~ 600 g) 를잘분쇄한다음약 20 g을메 탄올 100 ml와증류수 30 ml를넣고실온에서 2시간방 치한다음 1 시간동안진탕추출한다. 추출액을셀라이트 545를이용하여감압여과하고잔사를메탄올 100 ml로 씻어여과액과합하여정확히 250 ml 로만든다. 이중 10 0 ml를정확히취하여분액깔때기에넣고헥산 100 ml로 진탕추출하여헥산층을제거한다. 메탄올층을모아서 5 ml 정도가남을때까지감압농축한다. 나) 정제 : 메탄올 5 ml와증류수 5 ml로미리활성화시킨 그라파이트카본계카트리지컬럼 (ENVI-Carb Sep-Pak 카트리 지, 250 mg) 에추출액을흡착시킨다음메탄올 증류수(5:5) 5 ml 와메탄올 아세토니트릴(7:3) 5 ml 그리고에칠아세 테이트 5 ml 를유출시켜불순물을제거시킨다. 감압상태에 서 3분간건조한다음디클로로메탄 30 ml로유출시켜유 출액을모은다. 유출액을수욕상 (35 ) 에서갑압농 축 건고시킨다. 아세토니트릴 2 ml에녹여시험용액으로 한다. 4) 시험조작

63 가) 고속액체크로마토그래프의측정조건 (1) 칼럼 : 안지름 2 ~ 5 mm, 길이 20 ~ 30 cm인스테인레스 강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴화한 실리카겔을충전한다. (2) 검출기및파장 : UV 300 nm (3) 이동상 : 아세토니트릴 증류수 (13 : 87) (4) 유속 : 1.0 ml/ 분 나) 정성시험 (1) 위의조건으로얻어진크로마토그램상의각피크를표준 용액의피크와비교할때어느측정조건에서도그머무름 시간이일치하여야한다. (2) LC/MS/MS 를이용하여머무름시간및질량스펙트럼으로 확인할수도있다. 다) 정량시험 : 정성시험과동일한조건에서얻어진시험결과 에의해피크높이법또는피크면적법에따라정량한다. 9. 티아메톡삼(Thiamethoxam) 1) 장치 : 고속액체크로마토그래프[ 자외부흡광광도검출기(UV-De tector)] 2) 시약및시액

64 가) 용매 : 잔류농약시험용또는이와동등한것 나) 물 : 증류수또는이와동등한것 다) 실리카카트리지 : SPE 용또는이와동등한것( 실리카겔 (1 g) 고정상이충전되어있는카트리지(Silica sep-pack, 용량 6 ml)) 라) 여과보조제 : 셀라이트 545 마) 표준원액 : 티아메톡삼을아세토니트릴에녹여 100 mg/kg 으로만든다. 바) 표준용액 : 표준원액을아세토니트릴을사용하여적당한 농도로희석한다. 사) 기타시약 : 잔류농약시험용또는특급 3) 시험용액의조제 가) 추출 : 시료(500 ~ 600 g) 를잘분쇄한다음약 20 g을아 세톤 에틸아세테이트(40:60) 100 ml를넣고진탕기를이 용하여 30 분간진탕추출한다. 추출액을셀라이트 545에 통과시켜감압농축기를이용하여용매를제거한다. 10 % 염화나트륨 50 ml를가하여디클로로메탄 50 ml씩 2회 추출하고, 추출액을무수황산나트륨을통과시켜탈수시킨다. 감압농축 건고시킨다음헥산 아세톤(90:10) 5 ml에녹 인다.

65 나) 정제 : silica sep-pack 카트리지에추출액을흡착시키고 헥산 아세톤(90:10) 10 ml 를유출시켜버린다. 이어서헥 산 아세톤(60:40) 20 ml 를유출시켜유출액을모은다. 유 출액을감압농축 건고한다음아세토니트릴 2 ml에녹 여시험용액으로한다. 4) 시험조작 가) 고속액체크로마토그래프의측정조건 (1) 칼럼 : 안지름 2 ~ 5 mm, 길이 20 ~ 30 cm인스테인레스 강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴화한 실리카겔을충전한다. (2) 검출기및파장 : UV 254 nm (3) 이동상 : 아세토니트릴 증류수(50:50) (4) 유속 : 1.0 ml/ 분 (5) 칼럼온도 : 25 나) (1) 정성시험 위의조건으로얻어진크로마토그램상의각피크를표준 용액의피크와비교할때어느측정조건에서도그머무름시간이일치하여야한다. (2) LC/MS/MS를이용하여머무름시간및질량스펙트럼으로확인할수도있다.

66 다) 정량시험 : 정성시험과동일한조건에서얻어진시험결과 에의해피크높이법또는피크면적법에따라정량한다. 10. 트리포린(Triforine) 1) 장치 : 가스크로마토그래프[ 전자포획검출기(ECD)] 2) 시약및시액 가) 용매 : 잔류농약시험용또는이와동등한것 나) 물 : 증류수또는이와동등한것 다) 실리카겔(Silicagel) : 칼럼크로마토그라피용실리카겔( mesh) 라) 표준원액 : 트리포린을아세톤에녹여 100 mg/kg으로만 든다. 마) 표준용액 : 표준원액을아세톤에녹여적당한농도로희석 한다. 사) 기타시약 : 잔류농약시험용또는특급 3) 시험용액의조제 가) 추출 : 시료(500 ~ 600 g) 를잘분쇄한다음약 20 g을취 하여아세톤 200 ml 를가하여균질화하여감압여과한다. 아세톤을제거하여분액깔때기에옮기고 5 % 염화나트륨 200 ml를가한후벤젠 100 ml 씩 2회추출한다음벤젠

67 층을모아서감압농축하고, 아세톤 5 ml 에녹인다. 나) 정제 : 내경 10 mm, 길이 40 mm 유리칼럼에 130 에서 하룻밤활성화시킨실리카겔 5 g과무수황산나트륨 2 g을 충전시켜헥산 50 ml로유출시켜버린다음농축액을벤 젠소량에녹여흡착시킨다. 헥산 아세톤(9:1) 150 ml를 유출시켜버리고다시헥산 아세톤(7:3) 혼합용액 100 ml 로유출시킨유출액을모은다. 유출액을감압농축 건고 한다음메탄올 에칠아세테이트(1:1) 혼합액으로일정량으 로하여시험용액으로한다. 4) 시험조작 가) 가스크로마토그래프의측정조건 (1) 칼럼 : 안지름 0.25 mm, 길이 30 m의규산유리제캐필러 리칼럼관에가스크로마토그래프용 50% 페닐, 50% 메칠 실리콘을 0.25 μm의 두께로코팅한것또는이와동등한 것 (2) 시험용액주입구온도 : 270 (3) 검출기온도 : 280 o C (4) 칼럼온도 : 150 (5) 캐리어가스및유량 : 1.0 ml/min 나) 정성시험

68 (1) 위의조건으로얻어진크로마토그램상의각피크를표준 용액의피크와비교할때어느특정조건에서도그머무름 시간이일치하여야한다. (2) GC-MSD 검출기를이용하여머무름시간및질량스펙트 럼으로확인할수도있다. 다) 정량시험 : 정성시험과동일한조건에서얻어진시험결과 에의해피크높이법또는피크면적법에따라정량한다.

69 [ 별표 6] 생약등의잔류이산화황기준및시험방법적용대상 ( 제9 조관련) 연번 생약명 연번 생약명 연번 생약명 연번 생약명 1 가자 31 괴각 61 만형자 91 백화사설초 2 갈근 32 괴화 62 맥문동 92 보골지 3 갈화 33 구기자 63 맥아 93 보두 4 감국 34 구맥 64 면실자 94 복령 5 감송향 35 구자 65 모근 95 복분자 6 감수 36 구절초 66 목과 96 복신 7 감초 37 구척 67 목단피 97 부소맥 8 강활 38 권백 68 목통 98 부자 9 강황 39 금앵자 69 목향 99 부평 10 개자 40 금은화 70 미삼 100 비파엽 11 건강 41 길경 71 박하 101 빈랑자 12 건율 42 내복자 72 반하 102 사간 13 검인 43 노근 73 방기 103 사과락 14 견우자 44 단삼 74 방풍 104 사군자 15 결명자 45 담죽엽 75 백과 105 사삼 16 계지 46 당귀 76 백급 106 사상자 17 계혈등 47 당삼 77 백단향 107 사인 18 고량강 48 대계 78 백두구 108 산두근 19 고련피 49 대극 79 백두옹 109 산사 20 고본 50 대복피 80 백렴 110 산수유 21 고삼 51 대추 81 백미 111 산약 22 곡기생 52 대황 82 백부근 112 산자고 23 골담초근 53 도인 83 백부자 113 산조인 24 골쇄보 54 독활 84 백선피 114 산초 25 곽향 55 동과자 85 백수오 115 삼릉 26 관동화 56 두충 86 백자인 116 상기생 27 관중 57 등심초 87 백지 117 상륙 28 괄루근 58 마치현 88 백출 118 상백피 29 괄루인 59 마황 89 백편두 119 상심자 30 광곽향 60 마황근 90 백합 120 상엽

70 연번 생약명 연번 생약명 연번 생약명 연번 생약명 121 상지 151 영지 181 자소자 211 천궁 122 생강 152 오가피 182 자완 212 천남성 123 생지황 153 오매 183 작약 213 천련자 124 석곡 154 오미자 184 저령 214 천마 125 석위 155 오수유 185 저백피 215 천문동 126 석창포 156 오약 186 저실자 216 천오 127 선모 157 옥촉서예 187 전호 217 청피 128 선복화 158 용담 188 절패모 218 초과 129 세신 159 용아초 189 정력자 219 초두구 130 소두구 160 용안육 190 정향 220 초오 131 소목 161 우방자 191 제니 221 충위자 132 속단 162 우슬 192 조각자 222 측백엽 133 속수자 163 욱리인 193 조구등 223 치자 134 쇄양 164 울금 194 조협 224 칠피 135 숙지황 165 원지 195 종대황 225 택란 136 승마 166 위령선 196 죽여 226 택사 137 시라자 167 위유 197 지각 227 토복령 138 시체 168 유백피 198 지골피 228 토사자 139 시호 169 육두구 199 지구자 229 파극천 140 식방풍 170 육종용 200 지모 230 판람근 141 신곡 171 은시호 201 지부자 231 팔각회향 142 신이 172 음양곽 202 지실 232 패장 143 아마인 173 의이인 203 지유 233 편축 144 아출 174 익모초 204 지황 234 포공영 145 애엽 175 익지 205 진교 235 포황 146 어성초 176 인동 206 진피 236 필발 147 여로 177 인삼 207 질려자 237 하고초 148 여정실 178 인진호 208 차전자 238 하수오 149 연교 179 자근 209 창이자 239 한련초 150 연자육 180 자소엽 210 창출 240 한속단

71 연번 생약명 연번 생약명 연번 생약명 연번 생약명 241 한인진 242 합환피 243 해동피 244 해방풍 245 해백 246 행인 247 향부자 248 향유 249 현삼 250 현호색 251 형개 252 호로파 253 호장근 254 호황련 255 홍삼 256 홍화 257 홍화자 258 황금 259 황기 260 황련 261 황백 262 황정 263 회향 264 후박 265 희렴

72 [ 별표 7] 생약등의잔류이산화황시험방법( 제11 조관련) < 모니어- 윌리암스변법> 가. 장치 그림과같은장치를쓴다. A : B : C : D : E : F : 호스연결부 분액깔때기(100 ml 상용량 ) 증류플라스크(1,000 ml) 가스주입관 아린냉각관(300 mm) 가스유도관(Bubbler) 또는그이 G : 수기( 안지름 25 mm, 깊이 150 mm) 나. 시액 1 메칠렛시액: 메칠렛 250 mg을에탄올에녹여 100 ml로 2 한다. 3% 과산화수소액: 30% 과산화수소액 10 ml에물을넣 어 100 ml로하고메칠렛시액 3방울을넣은다음 0.01 mol/l 수산화나트륨액을넣어엷은황색이되도록한다 ( 쓸때만든다). 다. 조작법 증류플라스크(C) 에물 400 ml 를넣는다. 분액깔때기(B) 의코 크를잠그고 4 mol/l 염산 90 ml 를넣는다. 가스주입관(D) 으로

73 질소가스를 0.21 L/min 의속도로통과시키고냉각기(E) 에냉수를 통과시킨다. 수기(G) 에는 3% 과산화수소액 30 ml 를넣는다. 15 분이지난후, 분액깔때기(B) 를떼어낸다. 검체가루 50 g과 5% 에탄올액 100 ml 를혼합하여증류플라스크(C) 내로넣는다. 다시분액깔때기(B) 를달고코크를열어미리넣어놓은 4 mol/l 의염산을증류플라스크(C) 내로흘려넣은다음마지막 2~3 m L 를남기고코크를잠그고가열한다. 증류플라스크(C) 안의혼합 액이끓기시작하여 1시간 45 분이지나면, 수기(G) 를떼어낸다음 가스유도관(F) 의끝을소량의 3% 과산화수소액으로씻어수기 에합한후마이크로뷰렛을써서 0.01 mol/l 수산화나트륨액으로 적정한다. 적정의종말점은 20초이상지속되는황색이나타날때 로한다 (V 1 ml). 같은방법으로공시험을수행한다(V 2 ml) mol/l 수산화나트륨액 1 ml = 320 μg SO2 V 1 이산화황 (mg/kg) = 320 ( V 1 - V 2 ) f S : 0.01 mol/l 수산화나트륨액의소비량 (ml) V 2 : 공시험시 0.01 mol/l 수산화나트륨액의소비량 (ml) f S : : 0.01 mol/l 검체의취한양(g) 수산화나트륨액의역가

74 [ 별표 8] 생약의곰팡이독소기준및시험방법적용대상( 제12 조관련 ) 연번 생약명 연번 생약명 1 감초 11 산조인 2 결명자 12 연자육 3 괄루인 13 울금 4 귀판 14 원지 5 도인 15 육두구 6 목과 16 지구자 7 반하 17 파두 8 백자인 18 행인 9 백편두 19 홍화 10 빈랑자

75 [ 별표 9] 생약의곰팡이독소시험방법( 제14 조관련) 이약 500 ~ 600 g을잘분쇄한후가루로하여잘섞고약 5.0 g 을정밀하게달아물 메탄올혼합액(3 : 7) 100 ml를넣고 30 분간초음파추출한다음여과한다. 물 메탄올혼합액(3 : 7) 을 넣어정확하게 100 ml 로하고, 다시이액 10 ml를정확하게취하 여물로 80 ml 가되게희석하여추출액으로한다. 추출액 40 ml을정확히취하여아플라톡신용면역친화성칼럼 을통과시키고, 물 10 ml를 3 ml/ 분의유속으로 2회통과시켜 나온유출액은버린다. 아플라톡신용면역친화성칼럼에 5 ~ 1 0 초간약한진공을통과시키거나, 주사기로 10 초간공기를통과 시켜건조시킨다. 건조된아플라톡신용면역친화성칼럼에 0.5 ml 의메탄올을넣어중력에의해용출액이나오도록한다. 1 분간 방치한후 0.5 ml의메탄올을 2 회통과시켜용출액을모두합하 여물로 5 ml 가되게한다. 이때유속은 5 ml/ 분을넘지않도 록한다. 만약용출액이투명하다면이를검액으로하고, 필요 하면 0.45 μm 필터로여과한다. 따로아플라톡신 B 1 표준품을약 1.0 mg을정밀하게달아아 세토니트릴 톨루엔혼합액(2 : 98) 을넣어정확히 100 ml가되게하 여이를아플라톡신 B 1 1 차표준원액으로한다. 이표준원액 1

76 ml를정확하게취하여아세토니트릴 톨루엔혼합액(2 : 98) 을넣 어정확히 100 ml로하여아플라톡신 B 1 2차표준원액으로하고 이를적당히희석하여표준액을조제하여검량선을작성한다. 이때검액의검출농도가검량선의범위를벗어나면표준액의농도가검량선의범위에들어오도록농도를조정하여검량선을작성한다. 검액및표준액 10 ~ 500 μl를가지고다음조건으로대한약전 일반시험법액체크로마토그래프법에따라시험하여각각시험액 중아플라톡신 B 1 의피크면적 At 및 As 를측정한다. 얻어진피크 면적에따라작성한검량선에의한검액중아플라톡신 B 1 의양을 계산한다음, 다음식에따라생약중아플라톡신 B 1 의양을계산 한다. V 1 V 2 C m V i m = 건조물로환산한검체채취량 (g) V 1 = 추출시사용한용매량 (ml) V i = 아플라톡신용면역친화성칼럼에사용한용출액 (ml) V 2 = 아플라톡신용면역친화성칼럼으로부터용출후물로희석한용액의최종부피 (ml) C = 검액에서측정된아플라톡신 B 1 농도 (ng/ml)

77 < 조작조건> 검출기 : 형광검출기( 여기파장 : 365 nm, 형광파장 : 435 nm) 칼럼 : 안지름 4.6 mm, 길이 15 ~ 25 cm인스테인레스강 관에 3 ~ 5 μm의액체크로마토그래프용옥타데실실릴화한실 리카겔을충전한것또는이와동등한것 이동상 : A - 아세토니트릴 메탄올 물혼합액(2 : 3 : 6) B - 이동상 A에리터당브롬화칼륨 0.12 g 및묽은질 산 350 μl가함유된용액 유속 : 1.0 ml/ 분또는아플라톡신 B 1 의유지시간이약 10 ~ 15 분이되도록조정한다. 후칼럼유도체화장치 여시험할수있다. ; 다음의세가지장치중하나를선택하 ( 가) 피리듐브롬화수소산과브롬산염 (PBPB) 1 펄스리스펌프 2 폴리테트라플루오로에틸렌반응튜브 : 0.45 m 0.5 mm 3 이동상 : 이동상 A 4 유도체화용액 : 피리듐브롬화수소산과브롬산염 50 m g을물 1000 ml 에녹여차광하여보관하고, 4일이내 에사용

78 5 유도체화용액유속 : 0.4 ml/ 분 ( 나) 광화학반응장치 (PHRED) nm 저압수은자외선전구 ( 최소 8 W) 2 연마지지금속판 3 편성반응장치코일 : 자외선전구주변의폴리테트라플 루오로에틸렌튜빙 4 노출시간 : 2 분 5 이동상 : 이동상 A ( 다) 브롬전기발생장치 (KOBRA) 1 KOBRA cell : 아플라톡신을유도체화하여형광성을증폭 시켜브롬의활성화형태를발생시키기위한전기화학적 장치 2 KOBRA cell 에연결되는직류유도장치 : 100 ua 정 도의일정한전류공급장치 3 폴리테트라플루오로에틸렌반응튜브 : 0.12 m 0.25 mm 4 이동상 : 이동상 B 비고) 단, 표준품구입및보관후일정기간이지나면다음의방 법에따라표준품의농도를보정하여사용하여야한다.

79 아플라톡신 B 1 표준품을약 1.0 mg을정밀하게달아아세토 니트릴 톨루엔혼합액(2 : 98) 을넣어정확히 100 ml가되게하여 이를아플라톡신 B 1 1차표준원액으로한다. 이표준원액을가지고 대한약전일반시험법자외가시부흡광도측정법에따라 330 및 370 nm 사이의흡광도를측정하여다음의식에따라아플라톡신 B 1 1 차표준원액의농도( μg/ml) 를계산할수있다. 아플라톡신 B 1 (C 17 H 12 O 6 ) 1차표준원액의농도 ( μg/ml) = A M 100 ε ζ A = 흡수극대에서흡광도 M = 아플라톡신 B 1 의분자량 ; 312 g /mol 톨루엔아세토니트릴혼합액에서아플라톡신 ε = B 1의몰흡광계수 ; 1930 m 2 /mol ζ = 흡광도측정시사용하는셀의광학거리 ; 1 cm 주) 표준원액은차광하여 4 에보관하여사용한다. 본용액은사용전표준원액의온도가실온과같아질때 까지알루미늄호일을제거해서는안된다.