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- 이우 구
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2 01 생물분자의특성 5 02 세포막의구조와기능 세포와소기관 효소 세포호흡 광합성 세포분열 유전학 복제 유전자의발현 바이러스및원핵생물의분자생물학 진핵생물의게놈과분자생물학 돌연변이 DNA Technology 세포신호전달계 신경 신경계 호르몬 감각계 효과기 순환계 호흡계 소화와영양 배설계 체온조절 273
3 26 발생학 생식 면역계 식물학 진화 생태학 분류 실험실전편 실험이론편 407
4 PART 01 생물분자의특성 생물분자의특성 5
5 01 탄수화물 ( 글리코시드결합 ) 1 단당류 리보오스 (RNA 구성 ), 디옥시리보오스 (DNA 구성 ) 6 탄당 : 포도당, 갈락토오스, 과당 생체내대부분의당은 D form, 모든단당류는환원당 2 이당류 반응성이낮은설탕은식물에서체관으로의양분을수송할때사용 엿당 젖당 설탕 구성 포도당 + 포도당 포도당 + 갈락토오스 포도당 + 과당 결합 α1 4 결합 β1 4 결합 α1 β2 결합 환원성 환원당 환원당 비환원당 6 이선주생물
6 PART 01 생물분자의특성 3 다당류 P 모두비환원당 양분저장 식물 동물 아밀로오스포도당 α1 4 결합아밀로펙틴 포도당 α1 4 결합, 곁가지는 α1 6결합 한개환원말단, 여러개비환원말단글리코겐 글리코겐이아밀로펙틴보다곁가지가많아더빠르게포도당획득 식물 곤충, 균류 셀룰로오스 키틴 식물의세포벽성분 포도당의 β 1 4 결합 곤충의외골격, 균류의세포벽성분 N-아세틸글루코사민의 β1 4 결합 구조 프로테오글리칸글라이코칼릭스 M 예비.3 펩티도글리칸아가로오스 단백질 + GAG( 음전하를띠는이당류연속체 ) 결합조직형성 당사이의음전하반발력 염과물끌어당김 부푼구조 세포밖분비또는막관통형 hyaluronan, 콘드로이틴황산염, 케라탄황산염, 헤파란황산염 GAG 헤파란황산염 : 혈액응고억제, 막관통형으로존재하며리간드결합도움 M2005. 예비,32 / M 세포의표면을보호하는당구조 적혈구의표면 진정세균의세포벽, NAG + NAM의 β1 4 결합 세균용혈방지 해조류의세포벽, 전기영동에사용 7
7 02 지질 ( 에스터결합 ) 1 중성지방 : 글리세롤 + 3 지방산 주로에너지원으로사용 백색지방세포에저장 지방산의종류 M 탄소사슬에이중결합없음 포화지방산 상온에서고체, 동물성기름 탄소사슬에 cis 이중결합 cis - 불포화지방산 상온에서액체, 식물성기름 필수지방산 ( 리놀레산 ) cis- 불포화지방산에서수소첨가반응 trans- 불포화지방산 상온에서고체 체내축적시분해안됨. 오직에너지원 2 막지질 생체막구성성분, 구획화, 반투과성막 한쪽은소수성, 다른한쪽은친수성의인지질로구성인산지질 ( 인지질 ) 글리세롤 + 2지방산 + R기 ( 친수성 ) 당지질 스핑고지질 에터지질 식물엽록체틸라코이드내막의주요성분 스핑고신 + 1 지방산 + R기 수초막지질, ABO식혈액형 막지질은단일층또는이중층가능 고세균 ( 호염균, 호열균, 메탄생성균 ) 은극한환경에살기위해더안정한에터결합선택 8 이선주생물
8 PART 01 생물분자의특성 3 스테롤 6각형고리 3개 + 5각형고리 1개 진핵생물 ( 동물 ) 은콜레스테롤을간에서합성 세포막안정성유지 ( 더울때해리억제, 추울때응고억제 ) 기능 스테로이드호르몬전구체 ( 코티솔, 알도스테론, 남녀성호르몬 ) vit D 전구체 담즙산생성 4 지질흡수과정 : 유미입자 ( 소장 ) 암죽관 쇄골하정맥 심장 간 지방세포 조직세포 유미입자 - Apo B 48, 간에서 VLDL - Apo B 100, 지방세포에서 LDL - Apo B 지용성비타민 비타민 A 비타민 D 비타민 E 비타민 K 베타카로틴에서만들어짐 콜레스테롤유도체 항산화제 장내세균이생성 시각성립에관여, 부족시야맹증 소장에서칼슘과인산흡수도와줌 피부에서광화학반응으로합성 간, 소장거쳐활성화 혈액응고인자의합성시 γ 카르복실화변형에관여 결합시혈액응고 와파린 : 비타민 K 유사체, 혈액응고억제 9
9 03 단백질 ( 펩티드결합 ) 1 아미노산 R 기에따라 20 가지 생체내에서주로 L form 으로존재 양전하성 ( 염기성 ) 아미노산 리신, 아르기닌, 히스티딘 등전점이비교적 음전하성 ( 산성 ) 아미노산 아스파르트산, 글루탐산 등전점이비교적 방향성 페닐알라닌, 티로신, 트립토판 이황화결합 시스테인 α 나선구조 글리신, 프롤린 적게분포 β 병풍구조 글리신, 프롤린 많이분포 10 이선주생물
10 PART 01 생물분자의특성 아미노산적정곡선 : ph 변화에따라 R기와 N말단, C말단의전하변화 등전점 : 물질의알짜전하가 0이되는 ph 음전하아미노산 pi < 무극성아미노산 pi < 양전하아미노산 pi 음전하아미노산 pk R < 양전하아미노산 pk R P / P / P pi보다낮은 ph에서는 + 전하, pi보다높은 ph에서는 - 전하. 등전점전기영동 섞여있는아미노산들을 pi값에따라분류 ( 아미노산들이이동하다가각자의 pi값이되면이동을멈춘다.) + 극에는낮은 ph, -극에는높은 ph 걸어줌 시료는젤상에아무곳에나놓아도된다. 11
11 2 중합체 1 차구조 아미노산이펩티드결합으로일렬배열 N 말단 C 말단 polypeptide R 기의배열로접힐정보들어있음 펩티드결합을이룬원자들사이의수소결합 pro, gly 없음 2 차구조 α 나선구조 β 병풍구조 소수성아미노산많음. 막관통구조 케라틴 pro, gly 풍부 명주 3 차구조 4 차구조 폴리펩티드사슬의복합구조로 R기들사이의다양한결합 이온결합 / 수소결합 / 소수성결합 / 반데르발스결합 / 이황화결합 단백질구조변성요인 : ph( 이온결합 ), 열 ( 수소결합 ), 계면활성제 ( 소수성결합 ), 요소 ( 수소결합 ), 환원제 (β-머갑토에탄올, DTT, 이황화결합 ) 폴리펩티드가여러개가모인구조 R기들사이의다양한결합 헤모글로빈 단백질은자발적으로또는샤페론의도움을받아접힘 3 단백질과염의관계 염석 : 지나치게많은염은단백질이변성되지않은온전한상태로침전되게함 4 몇가지단백질들 ( 세포외기질을구성 ) 콜라겐 : 신장력. 합성과정에서비타민 C 을이용해 hydroxy-pro 변형일어남 [ 단백질실험 ] 1 조추출액획득 : 단백질성분들은위층에존재 2 염석 : 단백질침전물얻기 ( 나중에침전될수록용해도 ) 3 투석 : 염제거하며단백질농축 12 이선주생물
12 PART 01 생물분자의특성 4 크로마토그래피 고정상과이동상이시료와상호작용을하는정도에따라분리 전개율 = 용질전개거리 / 용매전개거리 박층 크로마토그래피 P 다공성충전제를사용 큰분자가먼저, 작은분자가나중에나옴 겔여과 크로마토그래피 P 전하간상호작용을이용 음이온교환크로마토그래피 : 양이온수지 양이온교환크로마토그래피 : 음이온수지 NaCl 처리시약한결합력의분자부터차례로용출 이온교환크로마토그래피 M / P / 임용.A
13 화학기와결합하는성질을이용 NaCl 또는경쟁적저해제 ( 기질유사체 ) 의결합강도에따라차례로용출 친화 크로마토그래피 M 등전점전기영동 (IEF) : PI 값으로단일단백질각각분리 임용 A.14 6 SDS-PAGE : 분자량에따라단백질을밴드로분리, 단백질의수 ( 밴드수 ), 양 ( 밴드두께 ), 크기측정. M / P SDS : 계면활성제, 단백질선형구조로변성, 아미노산에음전하를띠게함. 14 이선주생물
14 PART 01 생물분자의특성 [4 차구조단백질분석 ] P 겔여과크로마토그래피 ( 온전한단백질 ), SDS-PAGE( 변성된단백질 ) 로분자량측정후값을 나누면 subunit 수알수있다. [2D- 전기영동 ] M / P 단백질들을 pi 값과분자량으로분리 실험순서 : IEF(1 차 ) SDS-PAGE(2 차 ) 15
15 7 아미노산서열분석 각절편들의서열순서대로맞추기 이황화결합위치추적 : 단백질가수분해효소로절단 1차크로마토그래피 환원제처리 2차크로마토그래피 대각선에서벗어나는분리되는점확인 임용 A.6 16 이선주생물
16 PART 01 생물분자의특성 04 핵산 ( 인산디에스터결합 ) 1 기본단위체 : 5 탄당 + 염기 + 인산 2 중합체 RNA DNA 퓨린 : A, G / 피리미딘 : U, C NTP, 인산디에스터결합 5` 3`으로합성 단일가닥이어서불안정 ribose의 2`-OH 때문에알칼리조건에서쉽게가수분해 퓨린 : A, G/ 피리미딘 : T, C dntp, 인산디에스터결합 5` 3`방향으로합성됨 역평행이중가닥 (A=T, C G) deoxyribose의 2`-H 변형으로쉽게가수분해되지않음 17
17 3 DNA 와흡광도 A260 흡광측정 : GC 비율이높을수록 Tm 값증가 M DNA 와염관계 NaCl 농도높을수록 Tm 값증가한다. DNA 에염과알코올을넣어주면침전형성 05 검출법 환원당 p 베네딕트반응 Cu 사용, 청록색 황적색 녹말요오드 - 요오드화칼륨용액노란색 청남색 지방수단 Ⅲ 붉은색 선홍색 아미노산닌히드린 ( 아미노기검출 ) 반응무색 파란색 ( 프롤린만노란색 ) 단백질 뷰렛반응 A280 흡광측정 Bradford assay M Cu 와배위결합, 청록색 보라색 티로신, 트립토판이주로흡광 coomassie blue 가단백질에비특이적으로결합해흡광 DNA 삽입물질 EtBr, acridine orange, propidium iodide 음전하를이용한염색 염기성시약 ( 메틸렌블루, 아세트산카민 ) P 이선주생물
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