Printed in the Republic of Korea 정적초임계유체방식에의한토양중의 PCBs 추출 유건상 * 이원경 홍용표 오인경 김용균七 국립안동대학교응용화학과 ' 국립안동대학교농생물학과 (2003. 8. 27 접수 ) Static Supercritical Fluid Extraction of PCBs from Soil Matrix Keon Sang Ryoo*, Won Kyoung Lee, Yong Pyo Hong, In-Gyung Oh, and Ybnggyun Kim* Department of Applied Chemistry, Andong National University, Andong 760-749, Korea School of Bioresource Sciences, Andong National University, Andong 760-749, Korea (Received August 27, 2003) 요약. 토양오염표준공정시험법과정적초임계 CO2 추출방식을사용하여환경오염물질로알려져있는토양중의 PCBst- 분석하였다. 토양오염표준공정시험법에의한 PCBs의평균회수율은 25-35% 의범위였으며표준편차는 10% 를초과하였다. 이와는대조적으로, 정적초임계 CO2 추출방식에의한 PCBs의평균회수율은토양오염표준공정시험법보다도 2-2.5배높았으며표준편차는 7% 이내였다. 이러한결과들은정적초임계 COz 추출방식이토양오염표준공정시험법에서공인된시료전처리과정을대체할수있을가능성을제시하고있다. 40 (2의일정한온도에서점차적으로초임계 CO? 의압력을 1130psi에서 1196 psi로증가시킴에따라토양으로부터 PCB congener의회수율도역시증가하는경향을보였으나, 같은추출조건 ( 같은온도와압력 ) 에서평형시간 (5분과 60분으회수율의어떠한영향도주지않았다. 마지막으로, 각 PCB congener의회수율은같은추출조건에서 PCB의분자량이나구조 (coplanar versus non-coplanar) 와는관계없이거의비슷한수준의값을보였다. 주제어 : PCBs, 토양오염표준공정시험법, 정적초임계유체추출방식 ABSTRACT. Polychlorinated biphenyls (PCBs) known as environmental contaminants in soil were analyzed by the soil pollution standard process test and the static supercritical CO2 extraction mode. It was shown that the percent average recoveries of PCBs by the soil pollution standard process test were ranged in 25-35% and the corresponding standard deviations were above 10%. In contrast, the percent average recoveries of PCBs by the static supercritical CO2 extraction mode were 2-2.5 times higher and standard deviations were within 7%. These results indicate that static supercritical COj extraction mode may be a useful alternative to sample pretreatment certified by the soil pollution standard process test. The increasing supercritical CO2 pressure from 1130 psi to 1996 psi at 40 C enhanced the recovery of all PCB congeners from soil. However, at same Tc and Pc, the equilibrium time (5 versus 60 minutes) had no effect on the recovery of each PCB congener. Finally, similar PCB recoveries were obtained under the same extraction condition, regardless of the molecular weight and structure (coplanar versus non-coplanar) of PCB congeners. Keywords: PCBs, Soil Pollution Standard Process Test, Static Supercritical Fluid Extraction Mode 서른 PCB s(polychlorinated biphenyls) 는 biphenyl frame^l 있는하나이상의수소가염소로치환된화합물들을총 칭하며, 치환된염소의수와위치에따라 209개의 congener 로이루어져있다. PCBs는화학적으로안정하고쉽게타지않으며전기적으로높은저항을가지고있어변압기나축전기의전기절연체로, 기타용도로는윤활유나 -578 -
정적초임계유체방식에의한토양중의 PCBs 추출 579 절삭유, 가소제, 도료, 복사지등에널리사용되어왔다 그러나 PCBs가생태계를교란하거나인간의생명에위해를가할수있는독성물질로알려짐에따라 1970년후반부터 PCBs의생산은완전히금지되었다.2 전세계각국에서생산된 PCBs 총생산량은약 120만톤으로이중 65% 는아직사용중에있으며나머지대부분은이들의넓은사용범위와부주의한취급으로인하여주변환경2로유출되었다. 환경에유입된 PCBs는화학적, 생물학적저항성이매우강하기때문에수백년동안지속적으로존재하며, 물에대한용해도는낮지만물표면의 PCBs 극소량은계속해서휘발하고연속적으로며칠동안대기중에존재하여땅이나수면위에다시쌓이게된다. 이러한메커니즘에의해서 PCBs는전세계로이동되어왔으며, 심지어극지역이나바다속에서조차 PCBs의상당량이확인되었다. 또한지방질세포에서의 PCBs 용해때문에이물질은먹이사슬을통해서생체내에서도고농도로검출되고있다. 荒현재토양중의 PCBs 분석은국내의경우토양오염표준공정시험법의규정에의하여시험하도록되어있다.6 이규정에의하면토양중의 PCBs를확인및정량하기위해서추출 (extraction), 알칼리분해 (alkali degradation), 정제 (clean-up) 과정과같은여러단계의시료전처리 (sample pretreatmemt) 과정을반드시거쳐야한다. 그러나시료전처리과정동안사용할유기용매의양이많고, 시간이오래걸리며, 특히이과정에서상당한오차가개입될소지가있는등여러문제점을지니고있어이를대체할수있는새로운시료전처리방법이필요한실정이다. 최근고체상시료의전처리를위해서초임계유체추출 (supercritical fluid extraction, SFE) 에대한관심이점차적으로높아지고있다. 일반적으로어느물질이임계점이상의온도와압력하에있을때를초임계유체라일컫는데, 초임계유체상태에서는그물질의물리 화학적성질즉밀도, 점도, 용해도등이보통상태와는아주다르게변화한다. 초임계유체의밀도는액체와비슷한수준이고, 점도의수치는액체보다훨씬작아기체에근접하며, 확산계수는매우커서액체의약 100배에해당하는큰값을나타낸다이러한현상으로인해초임계유체는기체와동등한큰운동에너지를가지면서도액체에필적하는높은밀도를함께갖춘매우활성화된유체라할수있다. 초임계유체를고체상시료의추출공정에이용할경우많은장점을갖추고있는데, 우선온도와입력을변화시켜용해력을조절할수있고, 고체시료내부로의침투성이용이하여추출효율이향상되며, 추출속도가매우빨라시간을절약할수있으며, 특히상온에서기체상태인물질을초임계유체로선정시에는잔존용매의문제를해결할수있다. 이외에도이산화탄소와같이값이싸고인체에무해하며환경오염에미치는영향이적은용매를사용하게되면경제성, 무독성, 환경친화성추출공정이가능하다이 초임계유체추출은전형적으로정적추출 (static extraction) 과동적추출 (dynamic extraction) 2가지방식으로나뉜다. 정적추출은초임계유체가추출용기로들어가일정한시간동안머무른후시료중의성분을용해시켜추출하는방식이고, 동적추출은초임계유체가추출용기에머무름없이연속적으로이동하면서시료중의성분을추출하는방식이다. 지금까지대부분의연구는연속적으로운전되는동적초임계유체추출방식 (dynamic SFE mode) 에중점을두어왔으나, 이방식은공정상사용되는용매의양이증가하여소요비용이많이드는취약함을지니고있다,9 본연구는토양중의 PCBs 분석을위해정적초임계유체추출방식 (static SFE mode) 이토양오염표준공정시험법에의거한기존의전통적인시료전처리를대신할수있는가하는가능성을검토하기위한것으로, 이를위해밀도와평형시간의변화에따른토양중의 PCBs 의추출효율 (extraction efficiency) 즉회수율 (recovery) 과표준편차를측정하였고더나아가서는 PCB congener 의분자량과구조 (coplanar vs non-coplanar) 에따른선택적인추출등을탐구하였다. 실험시료와시약생토 (native soil) 는경북안동지역의한농가에서채취하여 105 C 오븐에서 2 饥간동안탈수시킨후체 (sieve) 로걸러 20-40 mesh 사이의생토입자만을선택하여본연구의시료로사용하였다. 생토시료에첨가된 PCB congener는 IURAC 번호가- 77(3,3',4,4'-PCB), 96(2,2',3,6,6,-PCB), 126(3,3',4,4',5-PCB), 145(2,2,3,4,6,6- PCB), 176(2,2',3,3',4,6,6'-PCB), 202(2,2,3,3,,5,5',6,6-PCB) 로 Accustandard Inc., USA로부터구입하였다. 주줄및표
580 유건상 이원경 홍용표 오인경 김용균 준용액조제용유기용매 (n 헤산, 아세톤, MTBE, 아세 토니트릴, 디클로로메탄 ) 는모두잔류농약분석용용매 를사용하였다. 실리카겔 (Dag grade 923,10-20 mesh, Aldrich) 은사용하기에앞서아세토니트릴 / 디클로로메 탄 (v/v 40:60) 혼합용매를사용하여정제한후건조시 켜 110 (2 오븐에서활성화시켰다. 초임계유체추출용 매로사용한 COz 는 99.999% 인초고순도로 ( 주 ) 명신 종합가스로부터구입하였다. 실험방법 토양오염표준공정시험법에의한시료전처리. 토양시 료에알고있는양의 PCBst 넣은후 n- 헥산으로추출 하여알칼리분해한다음다시 n- 헥산으로추출하고실 리카켈컬럼을통과하여정제하였다. 이액을회전증 발기와질소가스를이용하여소량의정확한부피까지 농축시킨후 GC/ECD 분석기기를이용하여 PCBs 를확 인하고정량하였다. 토양중의 PCBs 분석을위한표준 공정시험법의전체흐름도 (flow chart) 는 Fig. 1 에나타 내었다. I Soil sample I Alkali degradation with KOWCz 压 OH(1M) I water Filter the solution in flask and add water Extraction with n-hexane Organic solvent Anhydrous sodium sulfate Clean-up with silica gel column Reduce volume to 2 by rotary evaporator and N2 gas Add internal standard &/ecd Fig. 1. Flow chart of soil pollution standard process test PCBs analysis on soil. 정적초임계 CO2 추출. 초임계유체추출장치 (Eg. 2) 는정적초임계유체추출방식으로설계하여실험실규모로제작하였다. 추출용기 (extraction vessel) 는사용온도및압력이 500 C, 400 atm까지견딜수있도록스테인레스스틸 (316ss, Monel, Hastelloy) 을사용하였다. CO? 의임계온도와임계압력은 thermostated water bath 와공기로구동되는 gas booster(dle 75-1, Maxpro Technologies, Inc., Germany) 를이용하여조정하였다. 초임계 CO? 에의한토양중의 PCBs 추출은 Fig. 3과같은순서로행하였다. 우선추출용기안에생토시료 10 g을넣은후알고있는농도의 PCBst- 마이크로실린지를사용하여시료에가하였다. 이후초임계 co2 를추출용기안에서 5분과 60분동안추출용기에머무르게하였다. 이때온도는 40 C, 압력은각각 1130, 1360, 그리고 1996 psi를유지시켰다. 실험에서행한임계압력의유지는 relief control valve를사용하여조절하였다. 일정한평형시간경과후추출용기로부터배출되는 COj는 MTBE(methyl tert-butyl ethe» 가들어있는냉각포집장치 (cold trap) 를통과하도록하였다. CO2 가추출용기로부터완전히빠져나간후토양시료와 MTBE 용매를각각회수하여 PCBs의추출효율, 즉회수율과표준편차를측정하였다. PCBs 분석. PCBs의정량적수치의결정은전자포획검출기 (ECD) 가장착되어있는 GC(Trace GC 2000, Italy) 를이용해수행하였다. 각각의 PCB congener의분리는 30 m lengthx0.25 mm I.D. 용융실리카컬럼 (DB 5, Supelco Inc., Belefonte, PA) 을사용하였다. GC는 2단계온도상승을통해서온도프로그램 (temperature program) 화하였다. 첫번째온도상승단계는 10 C/min로 80 C 부터 180 0로, 두번째단계는 MC/min의상승속도로 260 (3까지온도를증가하였다. 운반가스로는아르곤에 10% 메탄이섞여있는혼합기체를사용하였다. PCB congener의크로마토그래피피크들은내부표준물질인 PCBz(pentachloro benzene) 의상대머무름시간에의해서확인하였다. 분리된각각의 PCB congener의정량은검정곡선과상대적인피크면적을비교해서결정하였다. 결과및고찰 PCBs spiked on soil. Fig. 4는토양시료에각각의 PCB congener(iupac Number 77, 96, 126, 145, 176,
정적코임계유체방식에의한토양중의 PCBs 추출 581 Pressure gauge Pressure gauge Fig. 2. Schematic diagram of the static supercritical fluid extraction mode system. To vent Fig. 3. Flow chart of static supercritical CO2 extraction mode for PCBs analysis on soil. 202) 를넣어 GC/ECD 로측정한크로마토그램을나타낸 것으로각 PCB congener 의농도는 5 ppm 이었다. 각 PCB congener 는 biphenyl frame 에있는염소원자의위 치에따라서 coplanar와 non-coplanar 구조로구별된다. Ortho 위치에염소치환이없는경우나, 단지하나만의염소치환이있는 PCB congener는 coplanar 구조인상태로되어있다. 그러나 ortho 위치에 2개이상의염소원자가치환되어있을경우에는염소원자들간의입체효과 (steric effect) 로인해 phenyl ring의회전을야기시켜이때의 PCB congener는 non-coplanar 구조를나타낸다. Coplanar PCB congener는다이옥신과같은공통 Ah 수용기매개응답 ( 입체선택성리간드수용기및이에상응하는구조활동도관계 ) 을나타내며다이옥신과유사한생물학적효과 (biological effect) 나독성효과 (toxic effect)!- 나타낸다고알려져있다.^3 본연구의대상인 PCB congener 중 IUPAC #77과 126은 coplanar 구조를 IUR\C #96, 145, 176, 그리고 202는 non-coplanar 구조를띠고있으며, 초임계 CO에의한이들간의선택적인추출이가능한가를탐구하기위해서이들의상대적인추출효율을측정하였다. 토양오염표준공정시험법에의한토양중의 PCBs 분석. 토양오염표준공정시험법에의거하여토양중의 PCBs 분석을위한시료전처리과정중의첫번째단계는알칼리분해인데, 알칼리분해과정은환류냉각기를부착하고 1M 농도의수산화칼륨 에틸알코올용액을이용하여토양을수욕상에서 1시간정도끓이는과정이다. 두번째단계인추출은위의용액을여지 (filter paper)
582 유건상 이원경 흥용표 오인경 김용균 Fig. 4. GC chromatogram of individual PCB congener spiked on soil. 를통해거른후 n-hexane을사용하여추출하고, 추출액에물을넣어세게흔들어정치한후수층과 n-hexane 층을각각분리한다음, 다시수층에 n-hexane을넣어추출하여기존의 n-hexane과합한후, n-hexane을무수황산나트륨을충전시킨컬럼을통과시킨후일정한부피까지회전증발기를이용하여농축하는과정이다. 마지막단계인정제는농축액을실리카겔컬럼을통과시켜정제하여회전증발기와 Nz를이용하여최종적으로정확하게소량의부피까지농축하는과정이다. 위에서언급한바와같이토양오염표준공정시험법에의한시료전처리과정은토양시료하나만을분석할경우라도소요되는유기용매의양이많아경제적인부담이가중되고, 시료전처리과정을거치는시간이너무길어실 Table 1. % recovery of PCBs from soil by soil pollution standard test lur^c number (PCB congener)6 % recovery3 C 77(3,3,4,4) 32.2 15.2 46.1 31.2±10.9 96(2,2,3,6,6) 29.6 10.4 42.2 27.4±11.3 126(3,3',4,4,,5) 33.9 16.8 48.3 33.0+11.2 145(2,2,3,4,6,6) 33.1 15.2 45.2 31.2±10.7 176(2,2,3,3,4,6,6) 34.7 14.7 46.5 32.0±11.4 202(22,33,5,S,6,6) 35.2 18.4 49.0 34.2±10.8 apercent recovery was achieved with a soil pollution standard test ^Ea 사 } individual PCB congener is identified by its chlorine substitution pattern. Standard deviations are based on triplicate extractions performed at same condition. 험자의집중력을분산시키며, 또한폐기처분되어야할 유기용매나시약의양이너무과다한문제점을지니고있다하겠다. 토양오염표준공정시험법에의한토양중의 PCBs 분석은한연구자가 3번반복하여실험하였고, 각 PCB congener의 % 평균회수율과이에상응하는표준편차의값을 Table 1에나타내었다. Table 1에나타낸각 PCB congener의평균회수율의범위는 25~35% 정도로매우낮았으며표준편차는 10% 를초과하여그다지좋지못한결과를얻었다. 이를해석하면, 토양오염표준공정시 험법에의한토양중의 PCBs를분석할경우 PCBs의상당량이여러단계의복잡한시료전처리를거치는동안필연적으로손실되었다는것을시사한다. 그리하여만약토양오염표준공정시험법에의한환경시료로부터극미량의 PCBs를분석할경우에는감도 (sensitivity) 와검출한계 (detection limit) 를극복할수없을것이고, 이외에도표준편차가너무크기때문에토양오염표준공정시험에의한 PCBs 분석방법은재현성이매우떨어져신뢰성이결여된다하겠다.
정적초임계유체방식에의한토양중의 PCBs 추출 583 정적초임계 CO2 방식에의한토양중의 PCBs 추출. 정적초임계 C02 방식에의한토양중의 PCBs의분석은 Fig. 3에서나타낸흐름도 (flow chart) 에의거하여실험하였다. 정적초임계 CO2 방식에의한토양중의 PCBs 추출의최적화조건 (optimum condition) 을찾기위해서임계온도와임계압력그리고평형시간과같은추출인자들을변화시켜추출효율즉회수율을측정하였다. PCB congener의추출조건은임계온도를 40 (2로고정시킨후이일정한온도에서임계압력을 1130,1360, 그리고 1996 psi로변화시켜실험하였다. 이조건에서밀도는각각 0.25, 0.50, 그리고 0.75 g/ml 이었다. 평형시간 (equilibrium time) 은위의밀도에서각각 5분과 60 분으로선택하여실험하였다. Table 2와 3은정적초임계 CO2 추출조건 ( 임계온도 ; 40 C, 임계압력 ; 1130, 1360, 그리고 1996 psi, 평형시간 ; 5분과 60분 ) 의변화에따른각 PCB congener의평 균회수율과이에대응하는표준편차의수치를나타낸것이다. 각 PCB congener의평균회수율과표준편차는추출실험을 3번씩반복하여구하였다. PCB congener의숫자인 77, 96, 126 등의번호는 IUPAC 규칙에의한것이며, 괄호안에있는 3, 3', 4, 4은 biphenyl framed] 치환되어있는염소원자의수와위치를나타낸다. Table 2와 3에서, 각 PCB congener의평균회수율은 74-94% 의범위에놓여있고표준편차는최소 1.2% 에서최대 6.6% 를보였다. 이와같은값은토양오염표준공정시험법과비교해서평균회수율은대략 2-2.5 배정도크며표준편차는매우낮은수준이었다. 결론적으로분석과정및분석결과를종합적으로검토해볼때, 정적초임계 CO2 추출방식은토양오염표준공정시험법의시료전처리과정보다매우우수한회수율을얻을수있어감도및검출한계를극복할수있고, 낮은표준편차로인한분석데이터의신뢰성이높으며, 사용될용매의양의 Table 2. Extraction efficiencies of PCBs from soil using static supercritical CO2 mode at different critical temperature and pressure with 5-min extraction time IUPAC number (PCB congener)6 40 C 1130 psi C % recovery3 40 C 1360 psi 40 C 1996 psi 77(3,3',4,4') 74.8±3.3 88.3±2.2 91.6±3.8 96(2,2,3,6,6) 80.5±3.5 92.9±0.7 93.9±2.8 126(33,44,5) 80.0+1.3 89.0±4.3 91.3±2.9 145(2,2,3,4,6,6) 78.9±2.3 89.8±3.2 93.5±3.2 176(2,2,33,4,6,6) 79.0±1.2 90.4±1.3 91.9±3.4 202(2,2,3,3',5,5,6,6) 80.2±2.3 90.9±2.1 92.2±2.8 apercent recovery was achieved with a static extraction mode. beach individual PCB congener is identified by its chlorine substitution pattern. "Standard deviations are based on triplicate extractions performed at each condition. Table 3. Extraction efficiencies of PCBs from soil using static supercritical CO2 mode at different critical temperature and pressure with 60-min extraction time. lub^c number (PCB congener)b 40 C 1130 psi C % recovery3 40 C 1360 psi 40 C 1996 psi 77(33,4,4) 80.1±2.6 85.4±5.3 88.1±4.9 96(2,2,3,6,6) 86.0±2.5 90.8±6.0 93.0±4.2 126(33,44,5) 79.6±3.7 85.3±6.3 89.1±5.4 145(2,2,3,4,6,6) 80.8±6.7 88.5±5.8 91.6±5.3 176(2,2,3,8,4,6,6) 80.7+4.1 86.1 ±6.6 90.7±5.4 202(2,2',33,5,5,,6,6) 80.2±4.6 86.4±6.1 90.9±5.3 Tercent recovery was achieved with a static extraction mode. beach individual PCB congener is identified by its chlorine substitution pattern. Standard deviations are based on triplicate extractions performed at each condition.
584 유건상 이원경 홍용표 오인경 김용균 감소로인한경제적인이득과분석시간을단축할수있는등여러가지많은장점을지니고있어정적초임계 CO2 추출방식이토양오염표준공정시험법의시료전처리과정을대체할수있다고생각한다. Table 2에서 IUPAC 번호가 77인 PCB congener는 40 C, 1130 psi, 그리고 5분의평형시간의추출실험조건에서평균회수율이 74.8% 를보였다. 그러나압력을점차증가시킴에따라회수율도역시증가하여 1196 psi 압력조건에서는평균회수율이 91.6% 까지증가하였다. 이러한현상은다른모든 PCB congenei에서도같은경향을보였으며, 이와같은결과는 C6의밀도가증가함에따라 CO? 의용매강도 (solvent strength)?} 증가하여그만큼용해능력이커졌다는것을의미한다하겠다. 그러나 Table 3과비교해서, IUR\C 번호가 77인 PCB congener뿐만아니라이외의 PCB congener에서도평형시간이 5분이나 60분일경우에상관없이같은추출조건에서는평균회수율의뚜렷한차이를거의볼수없었다. 이는비록 5분의짧은평형시간이라도초임계 COz가토양중의 PCBM이성분을거의완전히포화할수있으며, 비록평형시간을길게유지하더라도용해도는무한히증가하는것이아니므로포화능력의한계점에다다르면더이상회수율이증가하지않는다는것을알수있었다. 일반적으로 IUPAC 번호가커짐에따라 PCB congener의분자량도역시커진다. Table 2 와 3에서, IURAC 번호 77과 202의평균회수율은같은추출조건에서거의비슷한값을지니고있어회수율의수준이 PCBs의분자량과는무관하다는것을입증할수있었다. 또한 PCB congenei의 coplanar(iur^c 77, 126) 나 non-coplanar(iupac 96, 145, 176) 구조들간의회수율을상호비교하더라도회수율은구조와관계없이거의비슷한정도의수준을보이고있어본연구에서설정한추출조건에서는 coplanai나 non-coplanar인 PCB congener간의선택적인추출은이룰수없었다. 결론토양중의환경오염물질인 PCBs를토양오염표준공정시험법과정적초임계 CO2 추출방식으로분석하여다음과같은결과를얻었다. 토양오염표준공정시험법에의거한시료전처리과정 ( 알칼리분해, 추출, 정제 ) 을거친토양중의 PCB 词평균회수율은 25-35% 정도였고표준편차는 10% 를초과하였다. 이에반해정적초임계 CO2 추출방식으로분석한 PCBs 의평균회수율은본연 구에서설정한추출조건 ( 밀도 ; 0.25, 0.50, 0.75 g/ml, 평 형시간 ; 5 분과 60 분 ) 의전범위에서 74-94% 정도로매 우높았고표준편차는 7% 이내의수준을보였다. 정적 초임계 CO? 추출방식에의한토양중의 PCB congener 의회수율의정도를일정한온도조건에서밀도와평형 시간을변화시켜측정하였다. PCB congener 의회수율 은초임계 C6 의밀도를점차적으로증가시킴에따라 역시증가하였으나, 같은밀도에서는평형시간이 5 분이 나 60 분에관계없이거의비슷한수준을보였다. 마지 막으로각 PCB congener 의분자량과구조 (planar vs non-coplanar) 를상호비교하여초임계 CO? 로 PCB congener 의선택적인추출이가능한가를탐구하였다. 본연구에서설정한추출조건에서는 PCB congener 의 구조나분자량과는상관없이회수율은거의같았으며 정적초임계 CO2 추출방식으로는 PCB congenerf- 특 별히선택적으로추출할수없었다. 본연구는 2003 년도국립안동대학교교내연구비지 원사업에의하여수행된결과로이에대한깊은감사를 드립니다. 인용문헌 1. Erickson, M. D. Analytical Chemistry of PCBs; CRC Press-Lewis Publishers: New York, U.S.A., 1997. 2. U. S. EPA Fed. Regist. 1979, 44, 31514. 3. Ross, R. A.; Lemay, R. Environ. Sci. Technol. 1987,27, 1115. 4. Iwata, H.; Tanabe, S.; Sakai, N.; Tatsukawa, R. Environ. Sci. Technol. 1993, 27, 1080. 5. Anton, K.; Jan, P.; Stanislav, J.; Jana, C.; Beata, D. Chemosphere, 2001, 43, 595. 6. 편집부저, 수질 폐기물, 토양공정시험방법 ; 동화기술, 2001. 7. Hawthorne, S. B. Analytical Chemistry, 1990,62,633A. 8. Hawthorne, S. B.; Langenfeld, J. J.; Miller, D. J.; Burford, M. D. Analytical Chemistry, 1992, 64, 1614. 9. Langenfeld, J. J.; Hawthorne, S. B.; Miller, D. J.; Pawliszyn, J. Analytical Chemistry, 1994, 65, 338. 10. Yang, Y; Hawthorne, S. B.; Miller, D. J. J. Chromatogr. 1995, A699, 265. 11. Gere, D. R.; Knipe, C. R.; Pipkin, W.; Randal, L. G. Int. Environ. Technology, 1995, 5(4), 20. 12. Safe, S. Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 1986, 26, 371. 13. Safe, S. Critical Rev. Toxicology, 1990, 27, 51.