특허청구의범위청구항 1 나한과 ((Siraitia grosvenorii) 를 2중건조후절단하는제 1단계 : 상기제 1단계를거쳐얻어진건조물을추출용매로가열추출하는제 2단계 : 상기추출된침출액을 1차여과하는제 3단계 : 상기 1차여과된침출액을 1차농축하는제 4단계 : 상기농

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서대 원
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1 (19) 대한민국특허청 (KR) (12) 공개특허공보 (A) (51) 국제특허분류 (Int. Cl.) A61K 36/42 ( ) A61K 9/16 ( ) A61K 9/20 ( ) (21) 출원번호 (22) 출원일자 2013 년 05 월 09 일 심사청구일자 없음 (11) 공개번호 (43) 공개일자 2014년11월19일 (71) 출원인 ( 주 ) 화평디엔에프 경기도하남시조정대로 150, 아이테코 710 ( 덕풍동 ) (72) 발명자 백두하 경기도남양주시와부읍덕소로 180 두산위브아파트 신소림 경기도군포시번영로 380 한라 1 차아파트 408 동 507 호 전체청구항수 : 총 9 항 (54) 발명의명칭나한과 (Siraitia grosvenorii) 추출물의제조방법및이를포함하는조성물 (57) 요약 본발명은나한과의추출방법및나한과추출물을함유한조성물에관한것으로, 보다상세하게는, 나한과추출물의이취를절감하고단맛을상승시키며유효성분의용출을증가시킬수있는추출방법의개발과이를이용한조성물의개발에관한것이다. 상기의방법으로나한과를추출한경우나한과추출물의 mogroside, 총폴리페놀및총플라보노이드가증가하고항산화효과가증가되므로상기추출물은약학및식품학적소재로써유용하게사용될수있다. 본발명에따른나한과의추출방법은나한과를건조하는단계, 건조된나한과를분쇄하는단계, 나한과분쇄물을추출하는단계, 나한과추출물을여과하는단계, 나한과추출물을농축하는단계, 나한과농축액을건조하여분말로만드는단계를포함하는것을특징으로한다. 대표도 - 도 1-1 -

2 특허청구의범위청구항 1 나한과 ((Siraitia grosvenorii) 를 2중건조후절단하는제 1단계 : 상기제 1단계를거쳐얻어진건조물을추출용매로가열추출하는제 2단계 : 상기추출된침출액을 1차여과하는제 3단계 : 상기 1차여과된침출액을 1차농축하는제 4단계 : 상기농축물을건조하여 2차여과하는제 5단계 : 상기여과물을 2차농축하는제 6단계 : 및상기 2차농축물을가열건조하여분말화하는제 7단계를포함하는나한과연조및건조추출물의제조방법 청구항 2 제 1항에있어서, 상기제 1단계의상기나한과는 8 내지 9월에수확하여 6 내지 8일동안 15 내지 25, 습도 40 내지 60% 의조건에서자연건조한다음 40 내지 70에서 7 내지 9일동안열풍건조한건조물을조절내지중절로절단하는제조방법 청구항 3 제 1항에있어서, 상기제 2단계의추출용매는정제수, 알코올또는이들의혼합물을이용하고, 추출용액은건조물의 6 내지 9배를투입한다음 80 내지 100 에서 2 내지 5시간추출하는것을특징으로하는제조방법 청구항 4 제 1 항에있어서, 상기제 3 단계의여과는추출물을 300 내지 400 메쉬을통과시켜이루어지는것이특징인제조방법 청구항 5 제 1항에있어서, 상기제 4단계의농축은 50 내지 60 이하에서농축하여당도를 50 내지 65 Brix로조절하는것을특징으로하는제조방법 청구항 6 제 1 항에있어서상기제 5 단계의건조는 45 내지 55 에서건조하고, 여과는 50 내지 70 메쉬를통과시켜여과 하는것을특징으로하는제조방법 - 2 -

3 청구항 7 제 1 항에있어서, 상기제 5 단계이후에상기 2 차여과된추출물을농축및건조하는단계를추가로포함하는 제조방법 청구항 8 상기방법으로추출한나한과를함유하는것을특징으로하는약학적조성물 청구항 9 상기방법으로추출한나한과를함유하는것을특징으로하는건강식품 명세서 [0001] 기술분야본발명은나한과 (Siraitia grosvenorii) 의추출방법, 나한과추출물함유농축엑스, 과립및정제의제조방법에관한것으로, 보다상세하게는나한과의향미를증진시키고인체에흡수가용이하게개선된나한과추출액및추출분말을얻을수있는추출방법과나한과의유요성분을인체에용이하게흡수하기위하여약학및식품학적형태로제조할수있는나한과추출물의조성물에관한것이다. [0002] [0003] [0004] [0005] [0006] [0007] 배경기술나한과는조롱박과의초본다년생식물이며중국및태국등지에자생한다. 나한과의열매와잎은한방에서약재로사용하는데, 주로고랭지에서자생하며안개가많고서늘한기후와햇볕을좋아하고배수가잘되며부식질이많은토양에서서식하므로재배조건이까다로워인위적인재배가어려운식물로예로부터귀한약재로사용되어왔다. 나한과의열매는한방에서나한과라부르며, 맛이달고성질은서늘하며독이없고, 청폐윤장 ( 淸肺潤腸 ) 의효능이있어백일해, 담화, 해수등호흡기질환의치료에주로사용한다. 나한과의화학적구성은저분자당, 아미노산, 비타민, 마그네슘, 인, 철분, 지방산등으로구성되어있다. 주요구성성분은 calabash triterpene glucoside이며, 특히자당의약 250배이상의당도를지니는 mogroside가주요구성성분으로알려져있다. 나한과는설탕보다약 300~400배높은당도를보이는데, 나한과의감미성분은설탕과달리당류에기인하지않고, triterpene glycoside에기인한단맛이므로대체감미료로사용되며특히비만, 고혈압, 당뇨등대산질환환자의대체감미료로활용되기도한다. 최근에들어나한과의기능성에관한연구가보다활발하게진행되었으며, 나한과에함유된 mogroside, flaveone, falvonoid, terphene glycoside, vitamins 등의유효성분은항암, 항산화, 항당뇨, 항염증, 항알레르기등다양한효능을나타내는것으로보고되었다. 그러나, 추출조건과방법에따라추출되는유효성분의조성및함량이크게달라지므로상기의나한과의기능성물질을활용하기위한정확한추출방법및이를활용한보다다양한제품의개발이필요하다. 나한과의생과일은약간불쾌한이취가있으며, 쉽게발효되어썩는듯한냄새를풍기기때문에수확후건조하여사용해야한다. 나한과의열매를건조하는동안발생하는당화과정으로인하여단맛이형성되고이취가제거되는데, 이과정에서건조조건에따라약간의쓴맛이생길수있으므로수확후건조환경의관리가매우중요하다. 발명의내용 - 3 -

4 [0008] [0009] 해결하려는과제본발명은상기와같은종래의문제점을해결하고, 나한과 (Siraitia grosvenorii) 를이용한다양한제품의개발이필요하다는점을인식하여고안된것으로, 본발명의목적은나한과의이취를제거하고향미를증진시킬수있으며유효성분의추출을용이하게하는나한과추출물의제조방법을개발하기위함이다. 아울러본발명의또다른목적은나한과의유효성분의체내흡수를용이하게하기위하여농축액, 과립, 정제등약학적 식품학적조성물을제조할수있는방법을제공하기위함이다. [0010] [0011] 과제의해결수단 본발명은나한과를건조하여추출하는방법을제공한다. 아울러본발명은나한과추출물을유효성분으로함유 하는농축액, 과립, 정제등다양한조성물의제조방법을제공한다. [0012] [0013] 발명의효과상기와같은구성에의하여본발명에따른나한과의추출방법은나한과의향미를증진시켜기호도가증가하고, 나한과의유효성분의함량이증가되는장점을갖는다. 아울러본발명에의한나한과추출물함유농축액, 과립, 정제등의조성물의제조방법은나한과추출물의유효성분을간편하게섭취할수있는장점을갖는다. [0014] 도면의간단한설명 도 1 은나한과추출물을추출하는과정을포함하여본발명의실시예에따른나한과의추출방법을도시한흐름 도이다. 도 2는본발명으로생산된나한과추출물과시중에서구입한나한과추출물의 Mogroside, 플라보노이드및폴리페놀함량의비교를나타내는도이다. 도 3은본발명으로생산된나한과추출물과시중에서구입한나한과추출물의항산화효과를비교하여나타내는도이다. [0015] [0016] [0017] [0018] [0019] [0020] [0021] [0022] [0023] [0024] [0025] 발명을실시하기위한구체적인내용이하에서는도면및실시예를참조하여본발명에따른나한과의추출방법, 나한과추출물이함유된조성물의제조방법을보다상세하게설명한다. 본발명은나한과를추출하는방법을제공한다. 상기나한과추출물은하기의단계를포함하는제조방법으로제조되는것이바람직하나이에한정하지않는다. 1) 나한과를자연건조하는단계 ; 2) 단계 1의나한과를가열건조하는단계 ; 3) 단계 2의나한과를세절하는단계 ; 4) 단계 3의나한과에추출용매를가하여추출하는단계 ; 5) 단계 4의추출물을 1차여과하는단계 ; 6) 단계 5의여과물을 1차농축하는단계 ; 7) 단계 6의농축물을건조하고 2차여과한다음농축하여연조엑스로만드는단계및 ; 8) 단계 7의농축물을건조하여건조엑스로만드는단계 - 4 -

5 [0026] [0027] [0028] [0029] [0030] [0031] [0032] [0033] [0034] [0035] [0036] 상기방법에있어서, 단계 1) 의나한과는재배한것, 시판되는것등제한없이사용할수있다. 상기나한과는나한과및동속근연계식물의열매를말하며어느시기에수확한것을이용하여도무방하나 8~10월에아직청색으로단단한상태인열매를이용하는것이가장바람직하다. 상기방법에있어서상기단계 1) 의건조방법은실온에서자연건조하는것이바람직하다. 상기자연건조방법으로는 15 내지 30 의온도조건과 40 내지 70% 의상대습도의조건에서건조하는것이바람직하며, 23±2 의온도조건과 55±5% 의상대습도에서건조하는것이가장바람직하나이에한정하지않는다. 건조시간으로는 5 내지 10일이바람직하며, 더욱바람직하게는 7 내지 9일, 가장바람직하게는 6일 16시간 ( 총 160시간 ) 건조하는것이가장바람직하나이에한정하지않는다. 상기단계 2) 의가열건조방법은열풍건조를하는것이가장바람직하나, 이에한정하지않는다. 건조온도는 40 내지 70 가바람직하며, 50±5 가가장바람직하나이에한정하지않는다. 건조시간으로는 5 내지 10일이바람직하며, 더욱바람직하게는 6 내지 8일이바람직하며, 가장바람직하게는 7일 12시간 (180시간) 이가장바람직하나이에한정하지않는다. 상기단계 3) 의세절방법은건조물을조절내지중절로절단하는방법이가장바람직하나이에한정하지않는다. 상기단계 4) 의추출용매는정제수, 알코올, 주정또는이들의혼합물을사용하는것이바람직하며, 정제수를사용하는것이가장바람직하나이에한정하지않는다. 추출방법으로는가열추출, 진탕추출, Soxlet 추출또는환류추출을이용하는것이바람직하며, 가열추출하는것이가장바람직하나이에한정하지않는다. 상기추출용매를건조된나한과분량에 6 내지 9배를투입하는것이바람직하며, 8배투입하는것이가장바람직하나이에한정하지않는다. 추출온도는 80 내지 100 인것이바람직하며 100 인것이가장바람직하나이에한정하지않는다. 또한, 추출시간은 2 내지 5시간인것이바람직하며 3시간인것이가장바람직하나이에한정하지않는다. 아울러추출횟수는 1 내지 5회인것이바람직하며, 1 내지 3회인것이더욱바람직하고 1회인것이가장바람직하나이에한정하지않는다. 상기방법에있어서단계 5) 의 1차여과는추출물을 300내지 500메쉬의체를통과시켜이루어지는것이바람직하고 350메쉬를통과시키는것이가장바람직하나이에한정하지않는다. 상기방법에있어서단계 6) 의농축은진공감압농축기또는진공회전증발기를이용하는것이바람직하나이에한정하지않는다. 농축온도는 70 이하가바람직하며더욱바람직하게는 40 내지 60, 가장바람직하게는 55 ±5 가가장바람직하다. 상기농축은추출물의당도를 50 내지 65 Brix로조절하는것이바람직하며, 60 Brix 까지농축하는것이가장바람직하다. 상기방법에있어서단계 7) 의건조는감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조, 또는동결건조하는것이바람직하고, 진공건조하는것이가장바람직하나이에한정하지않는다. 건조온도는 40 내지 60 가바람직하고, 50 ±5 가가장바람직하나이에한정하지않는다. 상기방법에있어서단계 7) 의여과는건조물을 50 내지 70메쉬를통과시켜여과하는것이가장바람직하나이에한정하지않는다. 상기방법에있어서단계 7) 의농축은진공감압농축기또는진공회전증발기를이용하는것이바람직하고진공감압농축기를이용하는것이가장바람직하나이에한정하지않는다. 농축은투입된생약을기준으로 3:1 내지 6:1의농도로농축하는것이바람직하고, 4:1 내지 5:1로농축하는것이더욱바람직하고 4.51:1로농축하는것이가장바람직하나이에한정하지않는다. 상기방법에있어서단계 7) 에서생산되는연조엑스는농축후급냉하여포장하는것이바람직하나이에한정하지않는다. 상기방법에있어서단계 8) 의건조는감압건조, 열풍건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조, 또는동결건조하는것이바람직하고, 열풍건조하는것이가장바람직하나이에한정하지않는다. 상기방법에있어서단계 8) 에서생산되는건조엑스는상기단계 7) 의연조엑스의수분이제거될때까지건조하여분쇄한다음포장하는것이바람직하나이에한정하지않는다. 본발명의구체적인실시예에서본발명자들은새롭게개발된나한과추출물제조방법의우수성을확인하기위하여상기의방법으로개발된나한과추출물의관능평가를실시한결과, 시중에서구입한나한과의추출물보다향과맛등의특징이향상되는것으로나타났다 ( 표 1 참조 ). 본발명자들이상기의방법으로생산된나한과추출물의유효성분을측정한결과, 시중에서판매되는나한과의추출물보다나한과의주요성분인 mogroside, 플라보노이드, 폴리페놀의함량이많았다 ( 도 2 참조 )

6 [0037] [0038] [0039] [0040] [0041] [0042] [0043] [0044] [0045] [0046] 또한본발명자들은상기의방법으로추출된나한과추출물의항산화효과를측정하여항산화효과가우수한것을확인하였다 ( 도 3 참조 ). 따라서본발명의나한과추출물생산방법은기존에시판되고있는나한과추출물에비해향미감이증진되고유효성분및기능성효과가상승된추출물을생산할수있는방법으로유용하게사용할수있다. 본발명의나한과추출물을함유하는조성물은상기성분에추가로동일또는유사한기능을나타내는유효성분을 1종이상함유할수있다. 본발명의조성물은약제학적으로허용가능한첨가제를더포함할수있으며, 이때약제학적으로허용가능한첨가제로는전분, 젤라틴화전분, 미결정셀룰로오스, 유당, 포비돈, 콜로이달실리콘디옥사이드, 인산수소칼슘, 락토스, 만니톨, 엿, 아라비아고무, 전호화전분, 옥수수전분, 분말셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 오파드라이, 전분글리콜산나트륨, 카르나우바납, 합성규산알루미늄, 스테아린산, 스테아린산마그네슘, 스테아린산알루미늄, 스테아린산칼슘, 백당, 덱스트로스, 소르비톨및탈크등이사용될수있다. 본발명에따른약제학적으로허용가능한첨가제는상기조성물에대해 0.1 ~ 90 중량부포함되는것이바람직하나이에한정되는것은아니다. 즉, 본발명의조성물은실제임상투여시에경구및비경구의여러가지제형으로투여될수있는데, 제제화할경우에는보통사용하는충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제등의희석제또는부형제를사용하여조제될수있다. 경구투여를위한고형제제에는정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제등이포함되며, 이러한고형제제는나한과추출물또는이의분획물에적어도하나이상의부형제예를들면, 전분, 칼슘카보네이트 (Calcium carbonate), 수크로스 (Sucrose), 락토오스 (Lactose) 또는젤라틴등을섞어조제될수있다. 또한, 단순한부형제이외에마그네슘스티레이트탈크같은윤활제들도사용될수있다. 경구를위한액상제제로는현탁제, 내용액제, 유제및시럽제등이해당되는데흔히사용되는단순희석제인물, 리퀴드파라핀이외에여러가지부형제, 예를들면습윤제, 감미제, 방향제, 보존제등이포함될수있다. 비경구투여를위한제제에는멸균된수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가포함될수있다. 비수성용제, 현탁용제로는프로필렌글리콜 (Propylene glycol), 폴리에틸렌글리콜, 올리브오일과같은식물성기름, 에틸올레이트와같은주사가능한에스테르등이사용될수있다. 좌제의기제로는위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴등이사용될수있다. 본발명의조성물은목적하는방법에따라경구투여하거나비경구투여할수있으며, 비경구투여시피부외용또는복강내주사, 직장내주사, 피하주사, 정맥주사, 근육내주사또는흉부내주사주입방식을선택하는것이바람직하다. 투여량은환자의체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율및질환의중증도등에따라그범위가다양하다. 투약단위는, 예를들면개별투약량의 1, 2, 3 또는 4배를함유하거나또는 1/2, 1/3 또는 1/4배를함유할수있다. 개별투약량은구체적으로유효약물이 1회에투여되는양을함유하며, 이는통상 1일투여량의전부, 1/2, 1/3 또는 1/4배에해당한다. 본발명의조성물의유효용량은 ~ 10 g/ 일수있고, 구체적으로 ~ 1 g/kg일수있으며, 하루 1 ~ 6회투여될수있다. 그러나, 투여경로, 질병의중증도, 성별, 체중, 연령등에따라서증감될수있으므로상기투여량이어떠한방법으로도본발명의범위를한정하는것은아니다. 본발명의건강식품은나한과추출물을그대로첨가하거나다른식품또는식품성분과함께사용될수있고, 통상적인방법에따라적절하게사용될수있다. 상기건강식품의종류에는특별한제한은없다. 상기나한과추출물을첨가할수있는식품의예로는육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타면류, 껌류, 아이스크림류를포함한낙농제품, 각종스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료및비타민복합제등이있으며, 통상적인의미에서의건강식품을모두포함한다. 본발명의건강음료조성물은통상의음료와같이여러가지향미제또는천연탄수화물등을추가성분으로서함유할수있다. 상술한천연탄수화물은포도당, 과당과같은모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와같은디사카라이드, 및덱스트린, 사이클로덱스트린과같은폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨등의당알콜이다. 감미제로서는타우마틴, 스테비아추출물과같은천연감미제나, 사카린, 아스파르탐과같은합성감미제등을사용할수있다. 상기천연탄수화물의비율은본발명의조성물 100 당일반적으로약 0.01 ~ 0.04 g, 바람직하게는약 0.02 ~ 0.03 g 이다

7 [0047] 상기외에본발명의건강식품은여러가지영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산및그의염, 알긴산및그의염, 유기산, 보호성콜로이드증점제, ph 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에사용되는탄산화제등을함유할수있다. 그밖에천연과일주스, 과일주스음료및야채음료의제조를위한과육을함유할수있다. 이러한성분은독립적으로또는혼합하여사용할수있다. 이러한첨가제의비율은크게중요하진않지만본발명의조성물 100 중량부당 0.01 ~ 0.1 중량부의범위에서선택되는것이일반적이다. [0048] [0049] 이하, 본발명을실시예, 실험예및제조예에의해상세히설명한다. 단, 하기실시예, 실험예및제조예는본발명을예시하는것일뿐, 본발명의내용이하기실시예, 실험예및 제조예에의해한정되는것은아니다. [0050] [0051] 실시예 1 본발명에사용된나한과추출물을제조하였다. 구체적으로, 중국계림성에서채집된나한과를중국하북성안국시기주공업성에위치한금강적중약재한약유한공사에서구입하였다. 나한과 10kg을세척한다음 23, 60% 의상대습도의조건으로 160시간열풍건조하였으며, 건조온도를 50 로올려 180시간동안연속건조하였다. 건조물을중절로세절하여추출탱크에투입하고, 정제수 80kg 투입하여 100 에서 3시간추출하였다. 상기추출과정에서추출액은 350 메쉬로여과하였으며, 55 에서 60 Brix로감압농축하였고, 50 에서진공건조하고이를 60메쉬를통과시켜여과하여 4.51:1의비율로농축하여농축액 ( 연조엑스 ) 으로사용하거나, 분무건조하여건조엑스로사용하였다. [0052] [0053] [0054] < 실험예 1> 관능평가비교상기의 < 실시예 1> 의방법으로제조된나한과추출물과시중에서구입한나한과추출물의관능평가를위하여 20 내지 40대의성인남성명과여성명을대상으로실시하였다. 평가항목으로는나한과추출물로조제한음료의향기, 단맛, 쓴맛, 전체적인기호도를선정하였고, 관능검사는 10점평점법으로실시하였다. 그결과, 본발명으로생산된나한과추출물이향기와쓴맛및전체적인기호도가상승되는것을확인하였으며, 특히섭취후남는약간의쓴맛을줄이는데효과적인것을확인하였다 ( 표 01). 표 1 [0055] 관능특성시중에서판매되는 본발명을통해개발된 나한과추출물 나한과추출물 향 3.72 ± ± 4.19 색상 4.16 ± ± 1.41 단맛 5.84 ± ± 1.31 쓴맛 2.45 ± ± 1.08 전체적인기호도 6.72 ± ± 1.41 [0056] [0057] < 실험예 2> Mogroside 함량의비교상기의 < 실시예 1> 의방법으로제조된나한과추출물과시중에서구입한나한과추출물의 mogroside 함량의비교를위하여 mogroside 표준물질은 0.01 내지 0.2 mg/ml 농도로준비하였으며, 각나한과추출물은 0.5 mg/ml 농도로준비하였다. mogroside 함량의측정은 HPLC를이용하였으며, mm, 5 μm의 C 18 컬럼을사용하였 으며컬럼의온도는 25 로조절하였다. 이동상은아세토니트릴과정제수를사용하였으며, 유속을 1.0 ml/min 으 로하여총 40 분의분석시간동안 5% 의아세토니트릴이 68% 의아세토니트릴로흐를수있도록기울기용리로분 석하였으며, mogroside 는 18.5 분에서검출되었으며, 아래의수학식을이용하여 mogroside 의함량을구하였다

8 수학식 1 [0058] [0059] 그결과, 본발명의방법으로제조된나한과추출물에서 mogroside 가약 1.6 배가량많이함유된것을확인하였 다 ( 도 2). [0060] [0061] < 실험예 2> 총플라보노이드함량비교상기의 < 실시예 1> 의방법으로제조된나한과추출물과시중에서구입한나한과추출물 0.1 ml에디에틸렌글리콜 1 ml를넣고 1 노르말의 NaOH 0.1 ml을첨가한후혼합하여 37 의수욕상에서 1시간동안반응시킨후 420 nm에서흡광도를측정하여총플라보노이드의함량을측정하였다. 총플라보노이드의함량은표준물질인나린진을농도별로제조하여상기의방법으로흡광도를측정한다음작성한검량석에대입하여계산하였다. 그결과, 본발명으로제조된나한과추출물의총플라보노이드함량이약 1.2배많은것을확인하였다 ( 도 2). [0062] [0063] < 실험예 3> 총폴리페놀의함량비교상기의 < 실시예 1> 의방법으로제조된나한과추출물과시중에서구입한나한과추출물 0.1 ml에 2% 의탄산나트륨용액 2 ml을넣고혼합한다음 3분후 1 노르말의 Folin-Ciocalteu 시약 0.1 ml을넣고혼합하여실온에서 30분동안반응시킨후 750 nm에서흡광도를측정하여총폴리페놀의함량을측정하였다. 총폴리페놀의함량은표준물질인탄닌을농도별로제조하여상기의방법으로흡광도를측정한다음작성한검량석에대입하여계산하였다. 그결과, 본발명으로제조된나한과추출물의총폴리페놀함량이약 1.3배많은것을확인하였다 ( 도 2) [0064] [0065] < 실험예 4> 항산화효과비교상기의 < 실시예 1> 의방법으로제조된나한과추출물과시중에서구입한나한과추출물 (5 mg/ml) 0.2 ml에 0.15 mm의 DPPH 용액 0.8 ml를혼합한다음암소에서 30분동안반응시켜소거된 DPPH radical의농도를 517 nm에서측정하여항산화효과를확인하였다. DPPH radical 소거활성은수학식 2번을이용하여계산하였다. 수학식 2 [0066] [0067] 그결과, 본발명의방법으로제조된나한과추출물은시중에서구입한나한과추출물보다약 1.2 배가량항산화 효과가우수한것으로확인할수있었다 ( 도 3). [0068] [0069] < 제조예 1> 약학적제제의제조 <1-1> 산제의제조 [0070] [0071] [0072] 본발명의나한과추출물의건조분말 유당 상기의성분을혼합하고기밀포에충진하여산제를제조하였다. 2 g 1 g - 8 -

9 [0073] [0074] [0075] [0076] [0077] [0078] <1-2> 정제의제조 본발명의나한과추출물건조분말 100 옥수수전분 100 유당 100 스테아린산마그네슘 2 상기의성분을혼합한후, 통상의정제의제조방법에따라서타정하여정제를제조하였다. [0079] [0080] [0081] [0082] [0083] [0084] <1-3> 캡슐제의제조 본발명의나한과추출물 100 옥수수전분 100 유당 100 스테아린산마그네슘 2 상기의성분을혼합한후, 통상의캡슐제의제조방법에따라서젤라틴캡슐에충전하여캡슐제를제조하였다. [0085] <1-4> 환의제조 [0086] [0087] [0088] [0089] 본발명의나한과추출물건조분말유당글리세린자일리톨 1 g 1.5 g 1 g 0.5 g [0090] 상기의성분을혼합한후, 통상의방법에따라 1 환당 4 g 이되도록제조하였다. [0091] [0092] [0093] [0094] [0095] [0096] <1-5> 과립의제조본발명의나한과추출물건조분말 150 대두추출물 50 포도당 200 전분 600 상기의성분을혼합한후, 30% 에탄올 100 을첨가하여섭씨 60에서건조하여과립을형성한후포에충진하였다. [0097] [0098] [0099] < 제조예 2> 건강식품의제조 <2-1> 밀가루식품의제조본발명의나한과추출물 0.5 ~ 5.0 중량부를밀가루에첨가하고, 이혼합물을이용하여빵, 케이크, 쿠키, 크래커및면류를제조하였다. [0100] [0101] <2-2> 스프및육즙 (gravies) 의제조 본발명의나한과추출물 0.1 ~ 5.0 중량부를스프및육즙에첨가하여건강증진용육가공제품, 면류의수프 - 9 -

10 및육즙을제조하였다. [0102] [0103] <2-3> 그라운드비프 (ground beef) 의제조 본발명의나한과추출물 10 중량부를그라운드비프에첨가하여건강증진용그라운드비프를제조하였다. [0104] [0105] <2-4> 유제품 (dairy products) 의제조 본발명의나한과추출물 5~10 중량부를우유에첨가하고, 상기우유를이용하여버터및아이스크림과같은다 양한유제품을제조하였다. [0106] [0107] [0108] [0109] [0110] [0111] [0112] [0113] [0114] [0115] <2-5> 선식의제조현미, 보리, 찹쌀, 율무를공지의방법으로알파화시켜건조시킨것을배전한후분쇄기로입도 60 메쉬의분말로제조하였다. 검정콩, 검정깨, 들깨도공지의방법으로쪄서건조시킨것을배전한후분쇄기로입도 60 메쉬의분말로제조하였다. 본발명의나한과추출물을진공농축기에서감압농축하고, 분무, 열풍건조기로건조하여얻은건조물을분쇄기로입도 60 메쉬로분쇄하여건조분말을얻었다. 상기에서제조한곡물류, 종실류및본발명의나한과추출물을다음의비율로배합하여제조하였다. 곡물류 ( 현미 30 중량부, 율무 15 중량부, 보리 20 중량부 ), 종실류 ( 들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부 ), 본발명의나한과추출물 (3 중량부 ), 영지 (0.5 중량부 ), 지황 (0.5 중량부 ) [0116] [0117] [0118] < 제조예 3> 음료의제조 <3-1> 건강음료의제조액상과당 (0.5%), 올리고당 (2%), 설탕 (2%), 식염 (0.5%), 물 (75%) 과같은부재료와본발명의나한과추출물의혼합물 5 g을균질하게배합하여순간살균을한후이를유리병, 패트병등소포장용기에포장하여제조하였다. [0119] [0120] <3-2> 야채주스의제조 본발명의나한과추출물의혼합물 5 g 을토마토또는당근주스 1,000 에가하여야채주스를제조하였다. [0121] [0122] <3-3> 과일주스의제조 본발명의나한과추출물의혼합물 1 g 을사과또는포도주스 1,000 에가하여과일주스를제조하였다

11 도면 도면

12 도면 2 도면

(52) CPC 특허분류 A23L 1/3002 ( ) A23L 1/337 ( ) A61K 2236/19 ( ) - 2 -

(52) CPC 특허분류 A23L 1/3002 ( ) A23L 1/337 ( ) A61K 2236/19 ( ) - 2 - (19) 대한민국특허청 (KR) (12) 공개특허공보 (A) (51) 국제특허분류 (Int. Cl.) A61K 36/03 (2006.01) A23L 1/30 (2006.01) A23L 17/60 (2016.01) A23L 33/00 (2016.01) (52) CPC 특허분류 A61K 36/03 (2013.01) A23L 1/29 (2013.01) (21) 출원번호