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1 목적기초연구

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9 Anticomplement Activities of Korean Indigeneous Plants No. Plant name Srientific name Family Activity(IC50) 해변싸리 Lespedeza martrima 콩과 지리산오갈피 Acanthopamax chiisanensis 오갈피나무과 섬오갈피나무 A. koreanum 오갈피나무과 황칠나무 Dendropanax morbiferum 두릅나무과 개비자나무 ( 지상 ) Cephalotaxus koreana 주목과 둥근범꼬리 ( 지상 ) Bistorta globispica 마디풀과 매자나무 ( 지상 ) Berberis koreana 매자나무과 개족도리풀 ( 지상 ) Asarum maculatum 쥐방울과 개족도리풀 ( 지하 ) Asarum maculatum 쥐방울과 큰고추나무 ( 지상 ) Hypericum attenuatum 물레나무과 큰고추나무 ( 지하 ) Hypericum attenuatum 물레나무과 산오이풀 ( 지상 ) Sanguisorba hakusanensis Makino 장미과 산오이풀 ( 지하 ) Sanguisorba hakusanensis Makino 장미과 나래완두 ( 지상 ) Vicia anguste-pinnata var. hirticalycina 콩과 가는갈퀴나물 ( 지상 ) Vicia anguste-pinnata 콩과 가는갈퀴나물 ( 지하 ) Vicia anguste-pinnata 콩과 노랑갈퀴 ( 지상 ) V. venosissima 콩과 노랑갈퀴 ( 지하 ) V. venosissima 콩과 부전쥐손이 ( 지상 ) Geranium eriostemon var. glabrescens 쥐손이풀과 부전쥐손이 ( 지하 ) Geranium eriostemon var. glabrescens 쥐손이풀과 참이질풀 ( 지상 ) G. koraiens 쥐손이풀과 큰세잎쥐손이 ( 지상 ) G. kunthii 쥐손이풀과 금강제비꽃 ( 지상 ) Viola diamantica 제비꽃과 금강제비꽃 ( 지하 ) Viola diamantica 제비꽃과 100

10 No. Plant name Srientific name Family Activity(IC50) 서울제비꽃 ( 지상 ) V. soeulensis 제비꽃과 서울제비꽃 ( 지하 ) V. soeulensis 제비꽃과 개나리 ( 지상 ) Forsythia koreana 물푸레나무과 산개나리 ( 지상 ) F. saxatilis 물푸레나무과 갈퀴아재비 ( 지상 ) Asperula lasiantha 꼭두서니과 광릉골무꽃 ( 지상 ) Scutellaria insignis 꿀풀과 광릉골무꽃 ( 지하 ) Scutellaria insignis 꿀풀과 병꽃나무 ( 지상 ) Weigela subsessilis 인동과 통영병꽃나무 ( 지상 ) W. toensis 인동과 금마타리 ( 지상 ) Patrinia saniculaefolia 마타리과 금마타리 ( 지하 ) Patrinia saniculaefolia 마타리과 실제비쑥 ( 지상 ) Artemisia japonica var. angustissima 국화과 어리병풍 ( 지상 ) Cacalia pseudo-taimingasa 국화과 고려엉겅퀴 ( 지상 ) Cirsium setidens 국화과 벌개미취 ( 지상 ) Aster koraiensis 국화과 각시서덜취 ( 지상 ) Saussurea macrolepis 국화과 각시서덜취 ( 지하 ) Saussurea macrolepis 국화과 백설취 ( 지상 ) S. rectinervis 국화과 백설취 ( 지하 ) S. rectinervis 국화과 털분취 ( 지상 ) S. rorinsanensis 국화과 털분취 ( 지하 ) S. rorinsanensis 국화과 분취 ( 지상 ) S. seoulensis 국화과 분취 ( 지하 ) S. seoulensis 국화과 물골취 ( 지상 ) S. stenolepis 국화과 물골취 ( 지하 ) S. stenolepis 국화과 지리고들빼기 ( 지상 ) Youngia koidzumiana 국화과 지리고들빼기 ( 지하 ) Youngia koidzumiana 국화과 노랑무늬붓꽃 ( 지상 ) Iris odaesanensis 붓꽃과 노랑무뉘붓꽃 ( 지하 ) Iris odaesanensis 붓꽃과 좀갈매나무 ( 줄기 ) Rhamnus taqueri 감매나무과 매미꽃 ( 지상부 ) Hylomecon hylomeconoides 양귀비과 구상나무잎 ( 헥산층 ) Abies koreana 소나무과 14.1

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13 Fig. 3. Low resolution FAB-MS spectrum of compound 1 (in MeH with PEG300/NBA(Na))

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16 위의 data 로부터 constituent 1 의구조를다음과같이확정하였다. glucose H

17 통경의목적으로도사용하는芳香性식물이다.

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21 Table 1. Anti-complementary activities of subfractions and compounds from A. koreana Wilson % Inhibition Conc.(/ml) IC50 AKLHF AKLHF AKLHF AKLHF AKLHF AKLHF AKLHF AKLHF AKLHF AKLHF AKLHF <8 AKLHF <8 AKLHF AKLHF AKLHF AKLHF AKLHF AKLHF AKLHF AKLHF AKLHF AKLHF AKLHF AKLHC AKLHC

22 구상나무 (Abies koreana Wilson) (1999 년 10 월지리산 ) 부위별로선별 줄기 (stems) (2.8 kg) MeH 추출 (23 L 3 회 ) MeH ext. (294 g) Hexane/H 2 추출 (1 L 1 회 ) 잎 (leaves) (2.7 kg) Hexane ext. (AKSH, 28 g) Aqueous layer EtAc ext (AKSE, 155 g) μg /ml Si gel column chromatography (CHCl 3-MeH) EtAc 추출 (2 L 3 회 ) evaporate in vacuo Aqueous ext. (AKSA, 56 g) F01 F g F03 F04 F05 F06 F07 Si gel column chromatography (CHCl 3-MeH = 50:1) F g F g Si gel column chromatography (Hexane:EtAc) F01 F g F g F04 F g F06 F07 F08 F09 F10 F g F12 F13 F14 AKSEC mg AKSEC mg MPLC (Hexane-Et 2) PTLC (MEH 70%) AKSEC mg F01 80 mg F02 F03 F04 F05 F06 MPLC RP-18 (EtH 60%) AKSEC mg AKSEC mg

23 구상나무 (Abies koreana Wilson) (1999년 10월지리산 ) 부위별로선별 줄기 (stems) (2.8 kg) 잎 (leaves) (2.7 kg) MeH ext. (813 g) MeH 추출 (20 L 3 회 ) Hexane 추출 (2.4 L 2 회 ) Hexane ext. (AKLH, 28 g) Aqueous layer Si gel chromatography EtAc 추출 (2.4 L 3 회 ) F01 F02 F03 F04 F05 F06 F07 F08 F09 F10 F11 <16 μg /ml <16 μg /ml Aqueous layer EtAc ext. (AKLE, 289 g) F01 F02 F03 F04 F05 F06 F07 <16 μg /ml F01 F02 F03 F0 F05 F06 F07 <35 μg /ml <25 μg /ml <31 μg /ml BuH 추출 (2.4 L 3 회 ) BuH ext. (214 g) Aqueous ext. (222 g)

24 AKLHF05 F01 F02 F03 F04 F05 F06 F mg 375 mg MPLC RP-18 (EtH 90%) AKLHC01 AKLHC mg 203 mg AKLHF07 Si gel chromatography (CHCl 3-Acetone) F01 F02 F03 <8 μg /ml F04 <8 μg /ml F05 F06 F07 AKLHF08 F01 F02 F mg F04 F05 F06 F07 F08 F μg /ml 10.1μg /ml 13.6μg /ml MPLC Hexane-Et 2-CHCl 3 (50:3:2 4:3:2) AKLHC mg AKLEF05 Si gel chromatography (CHCl 3-MeH) F01 F02 F03 F g F05 F06 F07 F08 F09 Si gel chromatography (CH 2Cl 2-MeH) F01 F02 F03 F04 F05 Recrystallization AKLEC mg

25 에서 흡수 를나타내었다 H

26 에서분자이온 를나타내었으며 자료는이물질이 와 에서흡수를나타냄을보여주었다 및 를포함한 을바탕으로이물질을 로동정하였다 CH 3 H

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29 과 을분석한결과 모핵을가진배당체로추정되었으며 확인시험은이물질에 모핵이존재함을확인시켜주었다 초기 자료 정색반응및문헌조사를바탕으로 물질을 ββ로동정하였다 H H H H β

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31 자료는 δ 기능기 δ 및 기 δ 의존재를나타내었으며 또한 이중결합의존재 δ 과 를보여주었다 한편 자료는 의수많은 기δ 와이 과결합된 기 δ 의존재를보여주었다 와 를포함하는 자료를통해각기능기사이의정확한결합형태를확정지었으며 자료에서이물질은 분자이온 및 에서주요 를보였으며 와 에서 의 를나타내었다 위와같은결과를바탕으로이물질을 로동정하였다 H 4 7 H 3 C C 8 H H 9 C 10 C R R =

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34 H

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38 와 을분석한결과 모핵의존재가능성이추정되었으며 확인시험은이물질에 모핵이존재함을확인시켜주었다 여러기기분석을통한정확한구조분석이진행중이다

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40 H H H H 3 C H 3 C H H H RT-21-C H RT-26-B H H H H H

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43 6) 바늘엉겅퀴.

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45 Ht Hc 1 2 3~ C CH (CH 2 ) 5 CH CH CH Cl H H C C C C CH 2 CH 2 CH

46 MeH 추출 (20 L 3 회 ) MeH ext. (95.98 g) Hexane 추출 (2.0 L 2 회 ) Hexane ext. (CRH, g) Aqueous layer Si gel chromatography EtAc 추출 (2.0 L 3 회 ) F01 F02 F03 F04 F11 F06 F17 F18 F01 F02 F03 F04 F05 F06 F07 F08 Aqueous layer EtAc ext. (CRE, 8.37 g) F01 F02 F03 F04 F05 F09 BuH 추출 (2.0 L 3 회 ) CRHC mg MPLC (Hexane-EtAC) BuH ext. (34.23 g) Aqueous ext. (22.92 g) Si gel column chromatography (CHCl 3-MeH-H 2) Recrystallization CRBC mg CRBC mg CRBC mg

47 MeH 추출 (20 L 3 회 ) MeH ext. (95.98 g) Hexane/H 2 추출 (1 L 1 회 ) Hexane ext. Aqueous layer (CRH, g) CHCl 3 추출 (2 L 3 회 ) evaporate in vacuo CHCl 3 ext. Aqueous ext. (CRC, 5.82 g) (CRA, g) Si gel column chromatography (Hexane-CHCl 3) F01 F02 F03 F04 F mg F06 F07 F08 F09 F10 MPLC (CHCl 3-MeH=95:5) F01 F02 F04 F06

48 Ht Hc 1 2 3~ C CH (CH 2 ) 5 CH CH CH C C C C CH 2 CH 2 CH 3 Cl H H t 1c 10 9-H 10-H 3 2 1t 1c ,10-H Ht Hc 1 2 3~ C CH (CH 2 ) 5 CH CH CH C C C C CH 2 CH 2 CH 3 Cl H H

49 (H-17: 16) (10H: 10) (H-16: 15, 17) (H-15: 16, 17) (9H: 9) (H-3: 2, 4) (H-10: 9) (H-8: 7) (H-1: 2) 2 (H-2: 3)

50 CH 3 H H

51 H H 3 C H 3 C H

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53 H 3 C ' 1' 2 3' 6' 4' 5' H 1" 2" 3" H 4" 6" H 5" CH 2 H H 3 C H

54 H H H H 3 C CH 2 H H 3 C H

55 H H H H CH 3 H 3 C H

56 H H H 3 C H H H H CH 3 H 3 C H

57 7) 새며느리밥풀

58 3 실험결과및고찰

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60 CCH 3 H H 1 CH 3 3 H 2 C Glc Glc H H 2 C Glc 새며느리밥풀에서분리정제된 iridoid 화합물

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64

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66 H

67 H cis or trans

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69 H H H H H

70 H H H H H H

71 H H H H H H H

72

73 H H H H H H H H H H H H H H H H

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76 R R 3 15 R 4 R 2 CH R R 2 R R R R 1 R 2 R 3 R 4 β H β H β H β H H 2 H 2 β H β H β H β H β H H 2 H 2 H 2 α H α H R 1 R 2 R 3 R 4 24(25) R 5 CH 2 H CH 2 H α H H CH 3 CH 3 α H H CH 2 H CH 3 12 β Hα H H CH 3 CH 3 H H 11 Fig. 1 Structure of compounds isolated from Ganoderma lucidum spores.

77 α) β α β α β α β

78

79 10) 택사

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82 Alismatis Rihzoma (4kg) refluxed with MeH (3L) for 12 hrs. MeH extract (500 g) suspended with water (2 L), washed with hexane (2 L) and extracted with ethyl acetate (2 L) Ethyl acetate extract (60 g) chromatographed on Si. column with hexane/acetone (3:1~2:1). 1 (3.1 g) 2 (0.6 g) 3 (0.2 g) 4 (0.2 g) Isolation of the compounds from Alismatis Rhizoma H R 2 R 3 R 1 R 2 R 3 R 4 H R 4 R 1 1 Ac H 2 Ac = 3 H H H 4 H Ac H H H

83 Anticomplementary Activity on Classical Pathway Compound Final conc. (µg/ml) 250 % Inhibition IC 50 µm Tiliroside 102.2

84 ββ 한국특산식물인새며느리밥풀로부터

85 10 영지로부터분리된 12종의 triterpenoid 화합물중

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μ μ μ μ μ μ μ μ μ α μ μ β μ α μ α γ μ α β α α γ γ μ μ μ αα αα α α β μ α Diabetic Patients ( 천만 ) 35 30 25 20 15 10 5 0 1985 2003 2010 2025 Year Anual number of Diabetic Patients α β α α

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