PATHFAST CK-MB <REAGENT FOR PATHFAST> 60 determinations 사용목적 PATHFAST CK-MB는 헤파린첨가 전혈과 혈장의 CK-MB 양측정을 위한 PATHFAST 체외진단시스템의체외진단용제품이다. 이분석을통해얻어진결 과는급성심근

PATHFAST CK-MB <REAGENT FOR PATHFAST> 60 determinations 사용목적 PATHFAST CK-MB는 헤파린첨가 전혈과 혈장의 CK-MB 양측정을 위한 PATHFAST 체외진단시스템의체외진단용제품이다. 이분석을통해얻어진결 과는급성심근경색증 (acute myocardial infarction) 진단을도와주는데이용된다. 요약 Creatine kinase( 크레아틴키나제, CK) 는근육내에너지대사의주요효소인데이것은크레아틴의가역성인산화를촉진시킨다. 이 2분자체효소는 M과 B 두개의소단위를가지고있는데이것은결합하여 3가지동종효소 (isoenzyme) CK-MM, CK-MB, CK-BB를형성한다. CK-MM과 CK-BB는주로골격근과뇌로각각분배된다. CK-MB는주로심근에서발견되는데심근 CK의 10-40% 를차지한다. 심근손상은순환속의 CK-MB의일과성그리고진행성방출을초래한다. CK-MB 농도는가슴통증시작후 25-5시간에증가하여 12~24시간에최고조에달하여 48~72시간내에정상수준으로돌아온다. 이특징적인관자형태는 AMI 진단용이다. 건강한환자의혈청과비심장조직의낮은 CK-MB 농도때문에심근손상의진단과관찰을도움을주는수단으로널리이용되고있다. PATHFAST CK-MB는화학발광면역측정 (chemiluminescent enzyme immunoassay, CLEIA) 형식으로 CK-MB를측정하기위한분석이다. 이검사를실시하기위한모든요소는한시약카트리지에포장되어있다. PATHFAST CK-MB 를 PATHFAST 체외진단용시스템적재하면 17분내에 CK-MB의양이측정된다. 패키지구성시약카트리지 6 카트리지 x 10 트레이시약카트리지는 16 well로이루어져있다. 샘플 well(#1) 과카운팅 well(#10) 을제외한모든 well은바코드와함께알루미늄밀봉되어있다. 검사를위한모든시약은시약카트리지의각 well에채워져있다. wells 형태성분용량자료알칼리성포스파타제장 #2 액체 50L 접합항 CK-BB MoAb* 쥐 #7 액체항 CK-MB MoAb* 입혀짐 50L 쥐

자기입자 #13 액체 화학발광기질 CDP-Star 100L #11 액체 샘플희석완충액 50L #3,4,5 액체 세척완충액 40L # 1,6,8,9,10,12,14,15,16 는빈 well 이다. CDP-Star 는 Applied Biosystems 의등록상표이다. *MoAb= 단클론항체 교정기 1. 교정기1(CAL-1) 1.0mL x 2vial ( 동결건조됨 ) 2. 교정기2(CAL-2) 1.0mL x 2vial ( 동결건조됨 ) 3. 교정기희석제 1.0mL x 4bottles ( 액체 ) Note: CAL-1 과 CAL-2 는가공되면 0.75g/L 의아지드화나트륨을포함한다. MC ENTRY CARD 사용안내서 1 sheet 1 sheet 분석원리 PATHFAST CK-MB의절차는 CLEIA와 MAGTRATION 에기초한다. 이절차에서알카리성포스파타제표지항 CK-BB 단클론항체와자기입자가입혀진항 CK-MB 단클론항체가샘플과함께혼합된다. 표본에포함된 CK-MB는효소표지항체와자기입자가입혀진항체와함께항체. 항원복합체 (immunocomplex) 를이루면서 CK-MB 항체에결합된다. 결합되지않은효소표지항체를제거한후, 항체. 항원복합체에화학발광기질을첨가한다. 잠시배양시키면효소반응에의해발광이검출된다. 측정된발광의강도는표본내의 CK-MB 농도와연관이있으며이것은표준곡선에의해계산된다. * MAGTRATION 는 pipette tip 내의자기입자가세척되는 B/F 분리기술이며 Precision System Science 의등록상표이다. 주의사항시약카트리지 1. 시약카트리지를재사용하지않도록한다. 이것은오직일회사용하도록제작되었다.

2. 알루미늄봉인을뜯지않는다. 3. 시약카드리지의가장자리로뜯어서열도록하고손가락으로알루미늄봉인에접촉하지않도록한다. 4. 시약카트리지를떨어뜨려손상되었을때그것을사용하지않는다. 5. 일정기간의보관과운반후시약일부가알루미늄호일에붙어있을수있다. 이러한상황이발견되면사용하기전에책상위에서카트리지를부드럽게쳐준다. 6. 폐기물은국내그리고해당지역협회의합당한규정에따라처분한다. 일반주의사항을따르고모든구성요소들을감염원을전염시킬수있다는가정하에다루도록한다. 7. 오염을방지하고직사광선을피한다. 교정기 건강및안전사항안내서를따른다. Health and safety information( 건강및안전사항 ) CAL-1과 CAL-2는가공되면 0.75g/L의아지드화나트륨을함유한다. 이것은합당한 European Community(EC) 지침에의해초독성 (very toxic, T+) 로분류되어있다. 다음은이에따른위험및안전항목이다. R26/27/28 흡입시아주독성이강함, 피부접촉혹은삼켰을시 R32 산성진동된유독가스와접촉 R52/53 수중생물에게유해함, 수중환경에장기간에걸친유해효과를유발 할수있음. S20 사용시먹거나마시지않도록함. S28 피부접촉시, 즉시충분한물로세척하도록함. S29/35 하수도에버리지않도록함. 이물질폐기혹은보관시안전한방 법 으로처리함. S36/37/39 접합한방호복, 장갑안구보호대를착용한다. S43b 화재발생시, 물혹은건조소화물질을사용함. S45 사고발생혹은몸상태의이상을느낄시는즉시전문의사의진 찰을받도록함.( 가능한사용물표지를보여준다 ) 아지드가 폭염 (explosive salts) 을형성하는배관시설에사용될때는구리와납 에반응을일으킬수있음. 이 kit에사용되는양은작음. 그러나아 지드를함유한물질폐기시, 충분한양의물로흘려보내야함. 보관방법 +2~+8 에서보관한다. 사용전카트리지트레이를열지않도록한다.

만료일 만료일은시약카트리지, 카트리지트레이그리고패키지에표시되어있다. 샘플수집 1. Heparin-Na 혹은 Heparin-Li를포함한적합한수집관에채집된전혈혹은혈장을사용한다. 2. 전혈은채집후 4시간내에분석하여야한다. 3. 섬유소확산배양과다른불용성물질이혈장샘플에남아있지않도록확실히확인하여야한다. 그렇지않으면이물질은원심분리혹은여과를통해제거되어야한다. 4. 혈장샘플은 -20 에보관되어야하며그렇지않으면낮은 till 검사를하여야한다. 그러나동결된샘플을반복적으로동결, 해동시켜서는안된다. 준비와절차방법시약준비 1. 시약카트리지, 바로사용가능 2. 교정기각각의 CAL-1, CAL-2 vial과 1mL의교정희석액한병을가공한다. 가공된교정기는 3일동안 2-8 그리고 1달동안 -20 에서안정적으로유지된다. NOTE: CAL-1, CAL-2 를가공할때, 같은 CAL-1, CAL-2 lot 과교정기희석액을 사용한다. 다른 lot 를함께섞지않도록한다. 마스터교정곡선설치 1. 새로운시약 lot이사용할때, 마스터교정곡선설치는필수적이다. 2. PATHFAST의휴대용바코드인식기와함께각패키지에포함된 MC ENTRY CARD 상의바코드를해독하여마스터교정곡선을설치한다. 사용자교정기 1. MC ENTRY CARD의마스터교정곡선을설치한후새로운시약 lot이사용될때사용자교정기는필수이다. 2. 첫사용자교정기후 4주마다사용자교정기는필수적이다. ( 이때 MC ENTRY CARD는필요하지않다.) 3. 교정기, CAL-1, CAL-2는같은방법으로두번검사되어야한다.

그러므로시약카트리지 4개, 2개의 CAL-1, 2개의 CAL-2 이사용자교정기에필수적이다. 4. 시약카트리지를카트리지선반에설치하고약 100mL의 CAL-1과 CAL-2를샘플 well에투여하여 PATHFAST에설치한다. 5. PATHFAST 사용자메뉴얼에따라사용자교정기를실행한다. 샘플분석 1. 헤파린첨가전혈혹은혈장샘플 (heparin-na 혹은 heparin-li) 을사용한다. 2. 시약카트리지를카트리지선반에설치하고약 100mL의샘플을카트리지샘플 well에투여하여 PATHFAST에설치한다. 3. PATHFAST 사용자메뉴얼에따라사용자교정기를실행한다. Note: 1. 전혈샘플사용시, PATHFAST에개인별헤마토크리트값 (hematocrit value) 을입력하는것은선택사항이다. PATHFAST의사용자매뉴얼을참고한다. 2. 결과치가 >500ng/mL인샘플은샘플희석액 (Product #PF01D) 혹은식염수로희석되어야하며정확한결과가요구될경우에는다시검사하여야한다. 표준범위 1. 표준값은각실험실혹은각나라별로여러요인에의해달라질수있다. 그러므로각기관별로대응가능한표준값을설정하도록권장한다. 2. PATHFAST CK-MB 분석을이용하여 302 건강한성인 CK-MB의교준간격이정해진다. 95% 간격 (ranging from 25th to 97.5th%) 0.34.. 4.99ng/mL 분석을위한정확한실행데이타 PATHFAST 의표본실행데이터는아래와같다. 1. 분석범위 : 2-500 ng/ml 2. 비교방법 ( 혈장샘플 ) 이하 PDF화일확인바랍니다. 3. PATHFST을통한전혈과혈장간의상관관계이하 PDF화일확인바랍니다. 4. 표준화 PATHFAST CK-MB를위한교정기는표준물질과측정협회 (Institute for Reference Materials and Measurements, IRMM) 의보증표준물질

IRMM/IFCC-455로추적할수있고 CK-MB(mass) 의집중가치 (concentration value) 는 Geel/Belgium에배당되어왔다. 5. 불명확 재현성은최근의방법인한프로토콜에서다음과같이 3개의제어물질을사용하여 정해진다. 3개의혈장샘플이연속적이지않은 20일동안두번씩분석이된다. 내 부운영 (within-run) 과전체표준편차는 NCCLS EP-5A 프로토콜에의해계산된다. 다음과같은결과를얻었다. 내부운영불명확 전체불명확 샘플 평균 (ng/ml) S.D.(ng/mL) C.V.(%) S.D.(ng/mL) C.V.(%) QC-L 4.57 0.248 5.4 0.380 8.3 QC-M 61.2 2.411 3.9 3.888 6.4 QC-H 359 11.39 3.2 24.54 6.8 6. 검출한계 : 2.0ng/mL 검출한계는교정기의가장낮은분석물농도로정해지고여기서이것의평균 2SD 는제로교정기의평균 2SD 보다높다. 방해가능성 다음의요소들은분석의농도에 10% 미만의영향을미치는것으로나타났으며이 는괄호안에표시되어있다. 유리빌리루빈 (free bilirubin) (60mg/dL) 접합빌리루빈 (conjugated bilirubin) (60mg/dL) 중성지방, 샘플내지질혈증 (triglyceride, lipemia in sample (1000mg/dL) 헤모글로빈 ( 용혈 ) (hemoglobin(hemolysis) (Hb 1000mg/dL) 류마티스인자 (Rheumatoid Factor) (500IU/mL) 절차의한계 1. 이장치의보고시스템은에러코드를포함하여특정한이상작동을이용자에게경고한다. 이러한경고코드를포함한어떠한보고라도그후속조치에따라야한다. PATHFAST의사용자매뉴얼을참고한다. 2. 환자샘플은이염색 (heterophilic) 항체를포함할수있는데이는면역분석시반응을일으켜부풀려지거나혹은줄어든결과를가져온다. 이분석은이염색항체의방해요소를최소화하도록만들어졌다. 그러나모든환자표본의완벽한방해요소제거는보장할수없다. 임상용태와환자이력과일치하지않는검사결과는주의깊게해석되어야한다.

참고 1. Lang H,ed. Creatine Kinase isoenzyme; pathophysiology and clinical application. Berlin: Springer-Verlag, 1981 2. Roberts R. Diagnostic assessment of myocardial infarction based on lactate dehydrogenase and creatine kinase isoenzymes. Heart Lung 1981; 10:486-506 3. Galen RS and Gambino RT. Isoenzyme of CPK and LDH in myocardial infarction and certain other diseases. Pathobiol Annu 1975;5:283-315 4. Lott JA. Serum enzyme determination in the diagnosis of acute myocardial infarction; an update. Hum Pathol 1984;15:706-716