발간등록번호 B1-2012-1-004 건강기능식품기능성평가가이드라인 건강기능식품기준과

목차 * 건강기능식품의기능성개요 1 * 약어 4 Ⅰ. 서론 5 Ⅱ. 일반적사항 5 Ⅲ. 기능성시험방법 15 Ⅳ. 기능성인정원칙및기준 29 Ⅴ. 기능성심사사례 31

Ⅵ. 참고문헌 36

건강기능식품의기능성개요 기능성정의 기능성구분 기능성구분 기능성내용 기능성을가진원료또는성분 - 1 -

기능성등급및내용 상당한과학적합의 (Significant Scientific Agreement) : 성분또는원료와건강효과간의상관성이새로운과학에의해뒤집어지지않을정도의수준으로관련분야의전문가들에의한만장일치에가까운합의수준을말함 - 2 -

기능성등급기능성내용인정기준 (RCT) * 1 (RCT) * 1 (RCT) 2 ( 1 ) * 3, (RCT) - 3 -

약 어 CAT ChE-OOH DCF DPPH ESR FPLP FRAP GPx GR GSH GST 8-iso-PGF 2α KMBA MDA 5-OHmdU ORAC 8-oxodG ROS SOD TBARS TEAC TOSC TRAP Catalase Cholesteryl ester hydroperoxides Dichlorofluorescin 1,1-Diphenyl-2picrylhydrazyl Electron spin resonance Fluorescent products of lipid peroxidation Ferric reducing antioxidant power Glutathione peroxidase Glutathione reductase Glutathione Glutathione S-transferase 8-Isoprostaglandin-F 2α α-keto-γ-methiolbutyric acid Malondialdehyde 5-Hydroxymethyl-deoxyuridine Oxygen radical absorbance capacity 8-Oxo-2'-deoxyguanosine Reactive Oxygen Species Superoxide Dismutase Thiobarbituric acid reactive substance Trolox equivalents antioxidant capacity Total oxyradical scavenging capacity Total radical-trapping antioxidant parameter - 4 -

Ⅰ 서론 Ⅱ 일반적사항 가. 항산화의의의 - 5 -

나. 산화적스트레스의개념 1) 활성산소종 (ROS) Superoxide radical O 2 - Ozone O 3 Hydroxyl radical OH Singlet oxygen 1 O 2 Hydroperoxyl radical HO 2 Hypochlorous acid HOCL Alkoxyl radical LO,RO Hydrogen peroxide H 2 O 2 Peroxyl radical LO 2,RO 2 2) 산화적스트레스에의한손상 - 6 -

다. 주요작용기전 - 7 -

- 8 -

1) 효소적항산화시스템 - 9 -

2) 비효소적항산화시스템 α β γ δ α β γ δ α - 10 -

α α β 3) 항산화물질의재생 - 11 -

- 12 -

2. 보건학적중요성 - 13 -

3. 기능성내용인정범위 가. 인정되는기능성내용 : 항산화에도움 나. 인정되지않는기능성사례 다. 기능성인정등급에따른기능성내용의표현 - 14 -

Ⅲ 기능성시험방법 1. 바이오마커의선정 α - 15 -

α 1) 효소적항산화시스템 1 Superoxide dismutase(sod) 활성 2 Glutathione peroxidase(gpx) 활성 3 Glutathione S-transferase(GST) 활성 - 16 -

4 Glutathione reductase(gr) 활성 5 Catalase 활성 2) 비효소적항산화시스템 1 Glutathione 2 Ascorbic acid - 17 -

α 3 Carotenoids 4 비타민 E α 5 Thiol(-SH) group 3) 총항산화능 1 Ferric reducing antioxidant power(frap) - 18 -

2 Total radical-trapping antioxidant parameter(trap) 3 Oxygen radical absorbance capacity(orac) 또는 Trolox equivalents antioxidant capacity(teac) μ 4 1,1-diphenyl-2picrylhydrazyl(DPPH) assay 5 Total oxyradical scavenging capacity(tosc) assay - 19 -

α γ 4) 활성산소수준 1 Peroxyl radical 2 Hydroxyl radical 3 ROS 수준 - 20 -

5) DNA 손상 1 Commet assay 2 8-oxo-2'-deoxyguanosine(8-oxodG) 3 5-hydroxymethyl-deoxyuridine(5-OHmdU) - 21 -

6) 지질과산화물 1 Malondialdehyde(MDA) 2 Cholesteryl ester hydroperoxides(che-ooh) 3 8-Isoprostaglandin-F 2α (8-iso-PGF 2α ) α 4 Conjugated diene - 22 -

5 Hexanal 6 Fluorescent products of lipid peroxidation(fplp) 7) 단백질과산화물 1 산화형 Thiol(-SH) group 2 Protein carbonyl - 23 -

2. 주요바이오마커의측정방법 Total radical-trapping antioxidant parameter(trap) Oxygen radical absorbance capacity(orac) μ 1,1-diphenyl-2picrylhydrazyl(DPPH) assay Total oxyradical scavenging capacity(tosc) assay α γ - 24 -

ROS 수준 Commet assay - 25 -

8-oxo-2'-deoxyguanosine(8-oxodG) 5-hydroxymethyl-deoxyuridine(5-OHmdU) Malondialdehyde(MDA) Cholesteryl ester hydroperoxides(che-ooh) 8-Isoprostaglandin-F 2α (8-iso-PGF 2α ) α - 26 -

Conjugated diene Hexanal 산화형 Thiol(-SH) group - 27 -

3. 시험설계시고려사항 가. 시험관시험 나. 동물시험 다. 인체적용시험 - 28 -

Ⅳ 기능성인정원칙및기준 1. 인정원칙 2. 인정기준 가. 질병발생위험감소기능 나. 생리활성기능 1 등급 - 29 -

다. 생리활성기능 2 등급 라. 생리활성기능 3 등급 - 30 -

Ⅴ 기능성심사사례 1. 심사항목별사례 가. 피험자선정 나. 시험물질과대조물질의조성 - 31 -

다. 혼동요인의통제 라. 바이오마커설정 - 32 -

2. 종합심사사례 제안된기능성내용및섭취량 기능성제출자료 검토자료 시험관시험동물시험인체적용시험 4 1 2 1 1) 시험관시험 [ 시험관시험자료요약 ] 실험물질바이오마커결과 신청원료 DPPH radical 소거능 carbon-centered radical 소거능 radical 소거능 (NO, O - 2, OH, ONOO - ) 신청원료 2 mg/ml 에서 DPPH radical 을전부소거 신청원료 0.1~0.5 mg/ml 에서 carbon-centered radical 을 10~80% 소거 신청원료 0.1 mg/ml 에서 OH 를약 40% 소거, 0.5~2 mg/ml 에서 O 2 - 를용량의존적으로소거 - 33 -

2) 동물시험 [ 동물시험자료요약 ] 시험물질 실험동물 섭취량 / 섭취기간 바이오마커 결과 신청 SD Rat, 4 주령 50mg/kg bw GPx 활성 -GPx 활성및 GSH 함량증가 원료 (n=35, 그룹당 n=5) 15 일 GSH 함량 MDA 함량 GSSG 함량 GSSG/GSH 비율 ( 대조군대비, p<0.01) - MDA 함량, GSSG 함량, GSSG/GSH 비율감소 ( 대조군대비, p<0.01) 신청 ICR mice, 4 주령 50mg/kg bw SOD 활성 -SOD 활성및 CAT 활성증가 원료 (n=35, 그룹당 n=5) 15 일 CAT 활성 ( 대조군대비, p<0.01) Hydrogen peroxide - Hydrogen peroxide 함량및 MDA 함량함량감소 MDA 함량 ( 대조군대비, p<0.01) 3) 인체적용시험 [ 인체적용시험자료요약 ] 시험물질 신청원료 디자인 DB RCT 대상자 흡연으로인한산화적스트레스를받은사람 (n=69) 섭취량 / 섭취기간 지표성분으로서 2.4~80 mg/ 일 8 주 바이오마커 DNA 손상지표 GPx 활성 SOD 활성 CAT 활성 ox-ldl 함량 MDA 함량 결과 -DNA 손상지표감소 ( 대조군대비, p<0.05) - GPx, SOD, CAT 활성증가 ( 대조군대비, p<0.05) - ox-ldl 및 MDA 함량감소 ( 대조군대비, p<0.01) - 34 -

기능성종합의견 항산화에도움을줄수있음 ( 생리활성기능2등급 ) - 35 -

Ⅵ 참고문헌 - 36 -

[ 별첨 ] 항산화 기능성원료현황 구분 고시형 기능성원료 엽록소함유식물 클로렐라 스피루리나 녹차추출물 프로폴리스추출물 코엔자임 Q10 기능 ( 지표 ) 성분 총엽록소로서 ( 맥류약엽으로서 ) 2.4 mg/g 이상, 알팔파로서 0.6 mg/g 이상, 식용해조류및기타식용식물로서 1.2 mg/g이상총엽록소로서 10 mg/g이상총엽록소로서 5 mg/g 이상 카테킨으로서 200 mg/g 이상 총플라보노이드로서 10 mg/g 이상, ρ-쿠마르산, 계피산으로서확인코엔자임 Q10 으로서 980 mg/g 이상 일일섭취량 총엽록소로서 8~150 mg 총엽록소로서 8~150 mg 총엽록소로서 8~150 mg 카테킨으로서 0.3~1 g 총플라보노이드로서 16~17 mg 코엔자임 Q10 으로서 90~100 mg 섭취시주의사항 - - - 카페인이함유되어있어초조감, 불면등을나타낼수있음프로폴리스에알레르기를나타내는사람은섭취에주의 - 스쿠알렌스쿠알렌으로서 980 mg/g 이상스쿠알렌으로서 10 g - 개별인정형 TEAVIGO ( 고순도녹차 EGCG 90%) ( 제2008-62 호 ) 끼꼬망포도종자추출물 ( 제2005-9 호 ) 포도종자추출물 ( 제2008-42 호 ) PME-88 메론추출물 ( 제2008-9 호 ) 복분자주정추출폴리페놀 EA108 ( 제2006-24 호 ) 비즈왁스알코올 (Bees Wax EGCG 프로안토시아니딘 1 총플라바놀 2 프로안토시아니딘 SOD 활성 EGCG 로서 300~330 mg/ 일 끼꼬망포도종자추출물로서 200~300 mg/ 일포도종자추출물로서 200 mg/ 일 SOD 활성으로서 500~1,000 IU/ 일 임산부, 수유기여성및어린이는섭취에주의하여야함 - - 밀단백질에알르레기를나타내는사람은섭취에주의 Ellagic acid - - 11-tetracosanol(C24) 21-hexacosanol(C26) 비즈왁스알코올 어린이, 임산부및수유부는섭취시 - 37 -

구분 기능성원료 Alcohol, BWA) ( 제 2010-1 호 ) 토마토추출물 ( 제 2008-50 호 ) ( 제 2008-51 호 ) 피크노제놀 - 프랑스해안송껍질추출물 ( 제 2006-1 호 ) 유니벡스대나무잎 추출물 ( 제 2005-1 호 ) 코엔자임 Q10 ( 제 2006-29 호 ) ( 제 2007-3 호 ) ( 제 2007-5 호 ) ( 제 2007-6 호 ) ( 제 2007-7 호 ) ( 제 2007-11 호 ) ( 제 2007-14 호 ) ( 제 2008-13 호 ) ( 제 2008-24 호 ) ( 제 2008-39 호 ) ( 제 2008-48 호 ) ( 제 2009-9 호 ) 기능 ( 지표 ) 성분 31-octacosanol(C28) 41-triacotanol(C30) 51-dotriacotanol(C32) 61-tetratriacontanol(C34) 7 1 부터 6 의합 일일섭취량 (Bees Wax Alcohol, BWA) 로서 50 mg/ 일 섭취시주의사항 주의하시기바랍니다. 1알레르기체질이신분은개인에따라과민반응을나타낼수있습 (all-trans)-lycopene 48~72 mg/g (all-trans)-lycopene 니다. 로서 5.7~15 mg/ 일 2라이코펜이함유된식품을과량섭취시피부색이오렌지색으로변할수있습니다. 식물스타놀에스테르 85% 이상 [ 시토스타놀 (sitostanol) 과 캄페스타놀 (campestanol) 의 합으로서 55.0% 이상, 유리 스테롤 3.0% 이하 ] 1 tricin: 1.15~3.45 mg/g 2 p-coumaric acid: 3.65~10.95 mg/g 코엔자임 Q10 식물스타놀에스테르 로서 2.5~3.4 g/ 일 1 유니벡스대나무잎 추출물로서 300~600 mg/ 일 2 tricin 로서 0.345~2.07mg/ 일 1 임산부는섭취전의사와의상담이필요합니다. 2 수술전후에는섭취에주의하시기바랍니다. 3 p-coumaric acid 로서는것이좋습니다. 1.095~6.57 mg/ 일 코엔자임 Q10 로서 90~100 mg/ 일 임신중이거나수유중인 분또는콜레스테롤저하 약물을복용중인분은 의사의상담하에섭취하 - - 38 -

건강기능식품기능성평가가이드라인 - (4) 항산화에도움 편 - 발 행 인 편집위원장 편집위원 발 행 처 문 의 처 : 이희성 : 김승희 : 손문기, 오혜영, 김수창, 이혜영, 오금순, 이근영, 박경식, 신승정, 김진홍, 이지은, 홍진, 김방현, 정현숙, 문진아, 박여진 : 식품의약품안전청 : 건강기능식품기준과 Tel. 043-719-2454~2463 Fax. 043-719-2450 ffkfda@korea.kr