목적기초연구
1 *
Anticomplement Activities of Korean Indigeneous Plants No. Plant name Srientific name Family Activity(IC50) 98112 해변싸리 Lespedeza martrima 콩과 12.2 96019 지리산오갈피 Acanthopamax chiisanensis 오갈피나무과 100 96076 섬오갈피나무 A. koreanum 오갈피나무과 20.4 99063 황칠나무 Dendropanax morbiferum 두릅나무과 34.9 20001 개비자나무 ( 지상 ) Cephalotaxus koreana 주목과 25 20002 둥근범꼬리 ( 지상 ) Bistorta globispica 마디풀과 28.3 20003 매자나무 ( 지상 ) Berberis koreana 매자나무과 25 20004 개족도리풀 ( 지상 ) Asarum maculatum 쥐방울과 14.8 20005 개족도리풀 ( 지하 ) Asarum maculatum 쥐방울과 12.5 20006 큰고추나무 ( 지상 ) Hypericum attenuatum 물레나무과 25 20007 큰고추나무 ( 지하 ) Hypericum attenuatum 물레나무과 50 20008 산오이풀 ( 지상 ) Sanguisorba hakusanensis Makino 장미과 25 20009 산오이풀 ( 지하 ) Sanguisorba hakusanensis Makino 장미과 25 20010 나래완두 ( 지상 ) Vicia anguste-pinnata var. hirticalycina 콩과 6.9 20011 가는갈퀴나물 ( 지상 ) Vicia anguste-pinnata 콩과 5.6 20012 가는갈퀴나물 ( 지하 ) Vicia anguste-pinnata 콩과 25 20013 노랑갈퀴 ( 지상 ) V. venosissima 콩과 25 20014 노랑갈퀴 ( 지하 ) V. venosissima 콩과 25 20015 부전쥐손이 ( 지상 ) Geranium eriostemon var. glabrescens 쥐손이풀과 12.5 20016 부전쥐손이 ( 지하 ) Geranium eriostemon var. glabrescens 쥐손이풀과 25 20017 참이질풀 ( 지상 ) G. koraiens 쥐손이풀과 28.6 20018 큰세잎쥐손이 ( 지상 ) G. kunthii 쥐손이풀과 25 20019 금강제비꽃 ( 지상 ) Viola diamantica 제비꽃과 25 20020 금강제비꽃 ( 지하 ) Viola diamantica 제비꽃과 100
No. Plant name Srientific name Family Activity(IC50) 20021 서울제비꽃 ( 지상 ) V. soeulensis 제비꽃과 12.5 20022 서울제비꽃 ( 지하 ) V. soeulensis 제비꽃과 25 20023 개나리 ( 지상 ) Forsythia koreana 물푸레나무과 25 20024 산개나리 ( 지상 ) F. saxatilis 물푸레나무과 100 20025 갈퀴아재비 ( 지상 ) Asperula lasiantha 꼭두서니과 25 20026 광릉골무꽃 ( 지상 ) Scutellaria insignis 꿀풀과 25 20027 광릉골무꽃 ( 지하 ) Scutellaria insignis 꿀풀과 25 20028 병꽃나무 ( 지상 ) Weigela subsessilis 인동과 100 20029 통영병꽃나무 ( 지상 ) W. toensis 인동과 25 20030 금마타리 ( 지상 ) Patrinia saniculaefolia 마타리과 25 20031 금마타리 ( 지하 ) Patrinia saniculaefolia 마타리과 25 20032 실제비쑥 ( 지상 ) Artemisia japonica var. angustissima 국화과 25 20033 어리병풍 ( 지상 ) Cacalia pseudo-taimingasa 국화과 25 20034 고려엉겅퀴 ( 지상 ) Cirsium setidens 국화과 25 20035 벌개미취 ( 지상 ) Aster koraiensis 국화과 28.8 20036 각시서덜취 ( 지상 ) Saussurea macrolepis 국화과 31.8 20037 각시서덜취 ( 지하 ) Saussurea macrolepis 국화과 25 20038 백설취 ( 지상 ) S. rectinervis 국화과 100 20039 백설취 ( 지하 ) S. rectinervis 국화과 25 20040 털분취 ( 지상 ) S. rorinsanensis 국화과 25 20041 털분취 ( 지하 ) S. rorinsanensis 국화과 25 20042 분취 ( 지상 ) S. seoulensis 국화과 25 20043 분취 ( 지하 ) S. seoulensis 국화과 25 20044 물골취 ( 지상 ) S. stenolepis 국화과 3.9 20045 물골취 ( 지하 ) S. stenolepis 국화과 100 20046 지리고들빼기 ( 지상 ) Youngia koidzumiana 국화과 12.5 20047 지리고들빼기 ( 지하 ) Youngia koidzumiana 국화과 25 20048 노랑무늬붓꽃 ( 지상 ) Iris odaesanensis 붓꽃과 25 20049 노랑무뉘붓꽃 ( 지하 ) Iris odaesanensis 붓꽃과 25 20119 좀갈매나무 ( 줄기 ) Rhamnus taqueri 감매나무과 19.0 20050 매미꽃 ( 지상부 ) Hylomecon hylomeconoides 양귀비과 7.1 20051 구상나무잎 ( 헥산층 ) Abies koreana 소나무과 14.1
Fig. 3. Low resolution FAB-MS spectrum of compound 1 (in MeH with PEG300/NBA(Na))
위의 data 로부터 constituent 1 의구조를다음과같이확정하였다. glucose H
통경의목적으로도사용하는芳香性식물이다.
Table 1. Anti-complementary activities of subfractions and compounds from A. koreana Wilson % Inhibition Conc.(/ml) 250 125 62.5 32 16 8 IC50 AKLHF050401 52.3 28.6 24.5 22.3 238.6 AKLHF050402 AKLHF050403-48.3-18.2 10.7 19.2 AKLHF050404 25.8-11.2-26.6-14.6 AKLHF050405-13.0 4.2 19.8 26.9 AKLHF050406 98.0 78.6 39.0-12.7 AKLHF050407 72.9 9.2-5.8 76.2 AKLHF050408 98.5 79.7 22.7 11.3 50.5 AKLHF0701 99.6 95.8 43.7 11.5 72.8 AKLHF0702 99.1 98.3 88.2 10.9 51.3 AKLHF0703 99.7 98.8 95.5 94.4 91.9 58.8 <8 AKLHF0704 99.2 98.7 95.2 93.9 76.2 50.6 <8 AKLHF0705 37.0 12.6 0.3 AKLHF0706 18.8-4.5-2.2 4.3 AKLHF0801 99.2 72.1 47.3 35.0 69.5 AKLHF0802 99.6 98.3 78.5 12.7 52.1 AKLHF0803 90.1 52.7 30.7 15.6 121.0 AKLHF0804 99.0 92.0 78.2 53.2 44.9 9.8 25.0 AKLHF0805 99.0 99.0 96.4 94.7 67.5 40.4 10.2 AKLHF0806 99.5 97.6 95.9 93.8 54.0 37.8 13.6 AKLHF0807 98.7 99.6 95.2 36.7-1.9 40.0 AKLHF0808 94.5 96.6 92.9 31.4 8.5-4.6 39.5 AKLHF0809 97.5 98.8 94.1 83.3 23.9-2.6 23.8 AKLHC02 81.6 52.6 33.7 22.3 122.3 AKLHC03-24.3-22.3-20.7-9.8
구상나무 (Abies koreana Wilson) (1999 년 10 월지리산 ) 부위별로선별 줄기 (stems) (2.8 kg) MeH 추출 (23 L 3 회 ) MeH ext. (294 g) Hexane/H 2 추출 (1 L 1 회 ) 잎 (leaves) (2.7 kg) Hexane ext. (AKSH, 28 g) Aqueous layer EtAc ext. 20.3 (AKSE, 155 g) μg /ml Si gel column chromatography (CHCl 3-MeH) EtAc 추출 (2 L 3 회 ) evaporate in vacuo Aqueous ext. (AKSA, 56 g) F01 F02 32.7g F03 F04 F05 F06 F07 Si gel column chromatography (CHCl 3-MeH = 50:1) F01 15.0 g F02 16.5 g Si gel column chromatography (Hexane:EtAc) F01 F02 0.36 g F03 0.40 g F04 F05 0.33 g F06 F07 F08 F09 F10 F11 0.12 g F12 F13 F14 AKSEC01 2.9 mg AKSEC03 7.4 mg MPLC (Hexane-Et 2) PTLC (MEH 70%) AKSEC02 8.1 mg F01 80 mg F02 F03 F04 F05 F06 MPLC RP-18 (EtH 60%) AKSEC04 2.2 mg AKSEC05 5.2 mg
구상나무 (Abies koreana Wilson) (1999년 10월지리산 ) 부위별로선별 줄기 (stems) (2.8 kg) 잎 (leaves) (2.7 kg) MeH ext. (813 g) MeH 추출 (20 L 3 회 ) Hexane 추출 (2.4 L 2 회 ) Hexane ext. (AKLH, 28 g) Aqueous layer Si gel chromatography EtAc 추출 (2.4 L 3 회 ) F01 F02 F03 F04 F05 F06 F07 F08 F09 F10 F11 <16 μg /ml <16 μg /ml Aqueous layer EtAc ext. (AKLE, 289 g) F01 F02 F03 F04 F05 F06 F07 <16 μg /ml F01 F02 F03 F0 F05 F06 F07 <35 μg /ml <25 μg /ml <31 μg /ml BuH 추출 (2.4 L 3 회 ) BuH ext. (214 g) Aqueous ext. (222 g)
AKLHF05 F01 F02 F03 F04 F05 F06 F07 103 mg 375 mg MPLC RP-18 (EtH 90%) AKLHC01 AKLHC02 30.6 mg 203 mg AKLHF07 Si gel chromatography (CHCl 3-Acetone) F01 F02 F03 <8 μg /ml F04 <8 μg /ml F05 F06 F07 AKLHF08 F01 F02 F03 348 mg F04 F05 F06 F07 F08 F09 25.0μg /ml 10.1μg /ml 13.6μg /ml MPLC Hexane-Et 2-CHCl 3 (50:3:2 4:3:2) AKLHC03 104 mg AKLEF05 Si gel chromatography (CHCl 3-MeH) F01 F02 F03 F04 1.63 g F05 F06 F07 F08 F09 Si gel chromatography (CH 2Cl 2-MeH) F01 F02 F03 F04 F05 Recrystallization AKLEC0501 66.9 mg
에서 흡수 를나타내었다 H
에서분자이온 를나타내었으며 자료는이물질이 와 에서흡수를나타냄을보여주었다 및 를포함한 을바탕으로이물질을 로동정하였다 CH 3 H
과 을분석한결과 모핵을가진배당체로추정되었으며 확인시험은이물질에 모핵이존재함을확인시켜주었다 초기 자료 정색반응및문헌조사를바탕으로 물질을 ββ로동정하였다 H H H H β
및
자료는 δ 기능기 δ 및 기 δ 의존재를나타내었으며 또한 이중결합의존재 δ 과 를보여주었다 한편 자료는 의수많은 기δ 와이 과결합된 기 δ 의존재를보여주었다 와 를포함하는 자료를통해각기능기사이의정확한결합형태를확정지었으며 자료에서이물질은 분자이온 및 에서주요 를보였으며 와 에서 의 를나타내었다 위와같은결과를바탕으로이물질을 로동정하였다 H 4 7 H 3 C 3 2 5 6 1 C 8 H H 9 C 10 C R R = 11 12 13 14 17 21 25 29 33 34 35 36
1 3 5 6 9 10 12 14 11 13 16 18 19 H
와 을분석한결과 모핵의존재가능성이추정되었으며 확인시험은이물질에 모핵이존재함을확인시켜주었다 여러기기분석을통한정확한구조분석이진행중이다
H H H H 3 C H 3 C H H H RT-21-C H RT-26-B H H H H H
6) 바늘엉겅퀴.
Ht Hc 1 2 3~7 8 9 10 11 12 13 14 15 C CH (CH 2 ) 5 CH CH CH Cl H H C C C C CH 2 CH 2 CH 3 16 17
MeH 추출 (20 L 3 회 ) MeH ext. (95.98 g) Hexane 추출 (2.0 L 2 회 ) Hexane ext. (CRH, 23.73 g) Aqueous layer Si gel chromatography EtAc 추출 (2.0 L 3 회 ) F01 F02 F03 F04 F11 F06 F17 F18 F01 F02 F03 F04 F05 F06 F07 F08 Aqueous layer EtAc ext. (CRE, 8.37 g) F01 F02 F03 F04 F05 F09 BuH 추출 (2.0 L 3 회 ) CRHC01 26.5 mg MPLC (Hexane-EtAC) BuH ext. (34.23 g) Aqueous ext. (22.92 g) Si gel column chromatography (CHCl 3-MeH-H 2) Recrystallization CRBC04 54.0 mg CRBC05 14.0 mg CRBC06 80.0 mg
MeH 추출 (20 L 3 회 ) MeH ext. (95.98 g) Hexane/H 2 추출 (1 L 1 회 ) Hexane ext. Aqueous layer (CRH, 23.75 g) CHCl 3 추출 (2 L 3 회 ) evaporate in vacuo CHCl 3 ext. Aqueous ext. (CRC, 5.82 g) (CRA, 22.92 g) Si gel column chromatography (Hexane-CHCl 3) F01 F02 F03 F04 F05 405 mg F06 F07 F08 F09 F10 MPLC (CHCl 3-MeH=95:5) F01 F02 F04 F06
Ht Hc 1 2 3~7 8 9 10 11 12 13 14 15 17 C CH (CH 2 ) 5 CH CH CH C C C C CH 2 CH 2 CH 3 Cl H H 16 2 1t 1c 10 9-H 10-H 3 2 1t 1c 10 8 9 9,10-H 15 3 16 17 Ht Hc 1 2 3~7 8 9 10 11 12 13 14 15 17 C CH (CH 2 ) 5 CH CH CH C C C C CH 2 CH 2 CH 3 Cl H H 1 6 2 1 14 9 11 12 10 8 13 7 3 5 4 6 16 15 17
17 16 3 15 16 15 17 9 8 10 1 1 9 8 10 2 2 8 10 (H-17: 16) 17 16 3 15 (10H: 10) (H-16: 15, 17) (H-15: 16, 17) (9H: 9) (H-3: 2, 4) 9 8 10 1 (H-10: 9) (H-8: 7) (H-1: 2) 2 (H-2: 3)
CH 3 H H
H H 3 C H 3 C H
H 3 C 7 8 9 2' 1' 2 3' 6' 4' 5' H 1" 2" 3" H 4" 6" H 5" CH 2 H H 3 C 6 5 10 4 3 H
H H H H 3 C CH 2 H H 3 C H
H H H H CH 3 H 3 C H
H H H 3 C H H H H CH 3 H 3 C H
7) 새며느리밥풀
3 실험결과및고찰
CCH 3 H 6 4 7 8 H 1 CH 3 3 H 2 C Glc Glc H H 2 C Glc 새며느리밥풀에서분리정제된 iridoid 화합물
H
H cis or trans
H H H H H
H H H H H H
H H H H H H H
H H H H H H H H H H H H H H H H
R 1 1 20 R 3 15 R 4 R 2 CH 26 27 R 1 29 28 30 R 2 R 24 25 5 R R 3 4 2 3 4 5 6 7 R 1 R 2 R 3 R 4 β H β H β H β H H 2 H 2 β H β H β H β H β H H 2 H 2 H 2 α H α H 8 9 10 R 1 R 2 R 3 R 4 24(25) R 5 CH 2 H CH 2 H α H H CH 3 CH 3 α H H CH 2 H CH 3 12 β Hα H H CH 3 CH 3 H H 11 Fig. 1 Structure of compounds isolated from Ganoderma lucidum spores.
α) β α β α β α β
10) 택사
Alismatis Rihzoma (4kg) refluxed with MeH (3L) for 12 hrs. MeH extract (500 g) suspended with water (2 L), washed with hexane (2 L) and extracted with ethyl acetate (2 L) Ethyl acetate extract (60 g) chromatographed on Si. column with hexane/acetone (3:1~2:1). 1 (3.1 g) 2 (0.6 g) 3 (0.2 g) 4 (0.2 g) Isolation of the compounds from Alismatis Rhizoma H R 2 R 3 R 1 R 2 R 3 R 4 H R 4 R 1 1 Ac H 2 Ac = 3 H H H 4 H Ac H H H
Anticomplementary Activity on Classical Pathway Compound Final conc. (µg/ml) 250 % Inhibition 125 62.5 32 IC 50 µm 1-3.7-9.1 1.2 0.2 2 1.9 2.2 3.5 8.3 3 91.6 64.1 47.4 26.7 150.0 4 94.8 76.1 38.4 22.4 130.3 Tiliroside 102.2
ββ 4 5 6 8 한국특산식물인새며느리밥풀로부터
10 영지로부터분리된 12종의 triterpenoid 화합물중