별표 4

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1 식품의약품안전처고시제 호 식품의기준및규격일부개정고시 식품의약품안전처 -1-

2 식품의약품안전처고시제 호 식품의기준및규격일부개정고시 1. 개정이유사료, 환경오염등으로인해축 수산물에비의도적으로오염되어잔류되는농약성분의잔류관리를위한축 수산물의잔류물질잔류허용기준을신설하고닭고기및알의잔류물질 22종잔류허용기준및시험법을신설하고자함국내외에서사용되는농약에대한잔류허용기준과잔류농약시험법을개정하여국민에게안전한식품을공급하고자함 2. 주요내용가. 식품원료의분류개정 [ 제 )] 1) 식품원료분류의식물성원료의과일류중열대과일류, 채소류중결구엽채류와엽채류분류개정 나. 축 수산물의잔류물질잔류허용기준신설 [ 제 ) 9), 제 ), 별표 4 및 5] 1) 해당축 수산물에대해직접사용이허가되지않았으나비의도적오염에의한잔류관리를위해현행농약잔류허용기준에서축 수산물을분리 신설 2) [ 별표 4] 축산물의농약잔류허용기준 을 [ 별표 5] 축 수산물의잔류물질잔류허용기준 으로개정 -2-

3 3) 축 수산물에대한잔류물질안전관리기준마련으로국민건강보호 다. 일반시험법개정등 [ 제 , 제 , 제 , 제 ~28, 제 , 제 , 제 , 제 , 제 , 제 ~57, 제 , 제 , 제 , 제 , 제 , 제 ] 1) 국내 외에서사용되는농약및동물용의약품의안전관리를위한시험법마련필요 2) 닭고기및알의살충제시험법신설및시험법오기및누락된사항을정정 3) 식품의잔류물질에대한시험법신설및개정으로안전관리가능 라. 농산물중농약잔류허용기준신설및개정 [ 별표 3 중 (14) 디메토에이트, (61) 비펜트린, (114) 카보퓨란, (192) 프로피코나졸, (227) 아세타미프리드, (228) 아족시스트로빈, (234) 펜피록시메이트, (237) 피메트로진, (239) 플루아지남, (246) 스피노사드, (248) 아바멕틴, ( 249) 에마멕틴벤조에이트, (290) 인독사카브, (321) 디노테퓨란, (3 32) 클로티아니딘, (338) 티아클로프리드, (370) 벤티아발리카브아이소프로필, (373) 스피로메시펜, (386) 플로니카미드, (399) 사이플루메토펜, (422) 펜티오피라드, (424) 피리플루퀴나존, (427) 이미시아포스, (428) 플루오피람, (430) 설폭사플로르, (439) 스피로테트라맷, (441) 피리벤카브, (453) 만데스트로빈, (455) 옥사티아피프롤린, (456) 인다지플람, (458) 사이클라닐리프롤, (459) 피플루뷰마이드, (461) 벤조빈디플루피르 ] -3-

4 1) 농약관리법 에신규등록된농약의안전관리및수입농산물에농약잔류허용기준설정신청에따른관련기준신설및개정필요 2) 디메토에이트등 33종의농약잔류허용기준신설및개정 3) 농산물에농약잔류허용기준을합리적으로신설및개정하여국민에게안전한식품공급 마. 축 수산물의잔류물질잔류허용기준신설및개정 [ 종전별표 4 중 (13) 메타미도포스, (17) 모노크로토포스, (21) 사이퍼메트린, (35) 아이소펜포스, (50) 페니트로티온, (53) 펜설포티온, (56) 포레이트, (65) 피리미포스메틸, (85) 클로티아니딘, (86) 피프로닐, (87) 이미다클로프리드, (88) 스피노사드, (89) 이버멕틴, (90) 아미트라즈, (91) 아바멕틴, (92) 카탑, (93) 클로르페나피르, (94) 에톡사졸, (95) 플루페녹수론, (96) 피리다벤, (97) 스피로메시펜, (98) 티오사이클람, (99) 테트라코나졸 ] 1) 사료로부터비의도적으로이행되어축산물에잔류가능성이있는농약 22종잔류허용기준신설 2) 동물용의약품잔류허용기준신설에따른중복기준 1종 ( 사이퍼메트린 ) 삭제 3) 축산물의농약잔류허용기준을신설하여국민에게안전한식품공급 3. 기타참고사항 가. 관계법령 : 식품위생법 제 7 조제 1 항 나. 예산조치 : 별도조치필요없음 다. 합 라. 기 의 : 해당사항없음 타 -4-

5 1) 행정예고가 ) 공고제 호, ( ~ ) 2) 식품및축산물위생심의위원회가 ) 식품위생심의위원회잔류물질분과심의 : 나 ) 축산물위생심의위원회잔류물질분과심의 : (1차) , (2차) ( 서면 ) 3) 규제심사가 ) 국무조정실규제심사대상여부 : 규제심사비대상 ( 국조실접수번호제 호, ) -5-

6 식품의약품안전처고시제 호 식품위생법 제7조제1항에따른 식품의기준및규격 ( 식품의약품안전처고시제 호, ) 을다음과같이개정고시합니다. 2018년 5월 1일식품의약품안전처장 식품의기준및규격일부개정고시 식품의기준및규격일부를다음과같이개정한다. 제 ) 의과일류중열대과일류, 채소류중결구엽채류와엽채류를 다음과같이한다. 대분류소분류품목 과일류열대과일류 바나나, 파인애플, 키위 ( 참다래 ), 아보카도, 파파야, 대추야자, 망고, 구아바, 코코넛, 리치, 패션프루트, 두리안, 망고스틴, 용안, 용과등 결구엽채류배추, 양배추, 브로콜리 ( 콜리플라워포함 ) 등 채소류 엽채류 엇갈이배추 ( 쌈배추, 봄동등포함 ), 상추, 양상추, 시금치, 들깻잎, 쑥갓, 아욱, 근대, 머위, 무 ( 열무포함, 잎 ), 취나물 ( 곰취, 참취, 미역취 ), 고춧잎, 참나물, 케일, 청경채, 갓, 냉이, 치커리 ( 잎 ), 앤디브, 파슬리, 호박잎, 신선초, 고추냉이 ( 잎 ), 비름나물, 씀바귀, 우엉잎, 겨자채, 뉴그린, 다청채, 당귀잎, 쑥, 둥글레 ( 잎 ), 뽕잎, 유채 ( 동초 ), 춘채, 고들빼기, 왕고들빼기, 민들레, 갯기름나물 ( 방풍나물 ), 고려엉겅퀴 ( 곤드레나물 ), 섬쑥부쟁이 ( 부지깽이나물 ), 엉겅퀴, 산마늘잎 ( 명이나물 ), 다채 ( 비타민 ), 원추리, 파드득나물 ( 삼엽채 ), 돌나물, 비트잎등 -6-

7 제 ) 농약의잔류허용기준중 (4) 및 (5) 를삭제한다. 제 ) (1) 2 및제 ) (2) 중 [ 별표 5] 를각각 [ 별표 4] 로한다. 제 ) 17) 을각각 10) 18) 로하고제 ) 를다음과같이신 설한다. 9) 축 수산물의잔류물질잔류허용기준 (1) 해당축수산물에직접사용이허가되지않았으나비의도적오염 ( 사료, 환경오염등 ) 에의한살충제, 살균제등농약성분의잔류관리를위해설정된기준을말하며 [ 별표 5] 와같다. (2) 축산물의농약잔류허용기준적용범위 1 포유류고기 : 근육내지방및피하지방과같이부착된지방조직을포함하는동물의도체 ( 혹은이를자른덩어리 ) 의근육조직으로소, 돼지, 양, 염소, 토끼, 말, 사슴등의고기를말한다 ( 해양동물의고기는제외 ). 2 포유류지방 : 동물의지방조직에서얻어진가공되지않은지방으로소, 돼지, 양, 염소, 토끼, 말, 사슴등의지방을말하며, 유지방은포함하지않는다. 3 포유류부산물 : 도살된동물의고기및지방을제외한식용조직및기관으로소, 돼지, 양, 말, 염소, 토끼, 말, 사슴등의간, 폐, 심장, 위장, 췌장, 비장, 콩팥, 머리, 꼬리, 발, 껍질, 혈액, 뼈 ( 건, 조직이포 -7-

8 함된뼈 ) 등식용가능한부위를말한다. 4 가금류고기 : 부착된지방및표피를포함하는가금류도체의근육조직으로닭, 꿩, 오리, 거위, 칠면조, 메추리등의고기를말한다. 5 가금류지방 : 가금류의지방조직에서얻어진가공되지않은지방으로닭, 꿩, 오리, 거위, 칠면조, 메추리등의지방을말한다. 6 가금류부산물 : 고기및지방을제외한도살된가금류의식용조직및기관으로닭, 꿩, 오리, 거위, 칠면조, 메추리등의간, 심장, 모래주머니, 표피, 발등식용가능한부위를말한다. 7 유 : 포유류로부터생산된우유, 양유, 염소유등의원유를말한다. 8 유가공품 : 원유또는유가공품을주원료로하여제조 가공한우유류, 가공유류, 산양유, 발효유류, 버터유류, 농축유류, 유크림류, 버터류, 치즈류, 분유류, 유청류, 유당, 유단백가수분해식품등을말한다. 9 알 : 가금류로부터생산된계란, 오리알, 메추리알등으로껍질을제거한부위를말한다. 제 중인삼검체를다음과같이한다. 식품검체 인삼 수삼 ( 산양삼포함 ), 건삼, 홍삼또는 인삼 홍삼농축액 제 의바. 시험조작중 2) 를다음과같이한다. 2) 액체크로마토그래프의측정조건 -8-

9 가 ) HPLC-FLD(Post-derivatization 포함 ) (1) 칼럼 :C 18 (3.9 mm 150 mm, 5 μm) 또는이와동등한것 (2) 검출기 :Excitation 340 nm, Emission 455 nm (3) 이동상 : 물및메탄올 - 메탄올 : 물 (3:7) 의혼합액에서메탄올 : 물 (7:3) 의혼합액으로 23분간농도균배한후 5분이상흘려보낸다. (4) 이동상유량 :0.8 ml/min (5) Post Reaction Pump 유량 :0.5 ml/min(naoh 0.25 ml/min, O PA 0.25 ml/min) 또는기타최적조건나 ) HPLC-UVD (1) 칼럼 :C 18 (4.6 mm 250 mm, 5 μm) 또는이와등등한것 (2) 검출기 : 자외부흡광검출기 (UV photometric detector)(254 nm) (3) 이동상 : 물및아세토니트릴 - 아세토니트릴 / 물혼합액 (20/80, v/v) 에서 (80/20, v/v) 의혼합액으로 40분간농도균배한후 10분이상흘려보낸다. - 메탄올 / 물 (35/65, v/v) 에서 (90/10, v/v) 의혼합액으로 40분간농도균배한후 10분이상흘려보낸다. 이동상의조건은상기두가지중선택하여사용함 (4) 이동상유량 :1.0 ml/min 다 ) LC-MS/MS(LC-MS 포함 ) (1) 칼럼 :C 18 (4.6 mm 250 mm, 5 μm) 또는이와등등한것 (2) 검출기 : 자외부흡광검출기 (UV photometric detector)(254 nm) (3) 이동상 : A(0.1% 포름산과 10 mm 아세트산암모늄함유한물용액 -9-

10 ), B(0.1% 포름산과 2 mm 아세트산암모늄함유한아세토니트릴용액 ) 또는이와동등한것 - A/B(95/5, v/v) 에서 (5/95, v/v) 의혼합액으로 20분간농도균배한후 10분이상흘려보낸다. (4) 이동상유량 :1.0 ml/min (5) 칼럼온도 : 40 (6) 주입량 : 2 μl (7) 이온화 : ESI positive 또는 negative-ion mode 제 의자. 이시험법의분석대상농약및검출기중 1) 의주 7) 을다음과같이한다. 주 7) GC-MS/MS 분석대상 (281 종 ) 및상세조건은아래와같다. 연번 물질명 (Compound) 2, 6 - 디이소프로필나프탈렌 (2,6-Diisopropylnap hthalene) 아크리나트린 (Acrinathrin) 알드린 (Aldrin) 알레트린 (Allethrin) 알리도클로르 (Allidochlor) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) 아메트린 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) -10-

11 연번 물질명 (Compound) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) (Ametryn) 아닐로포스 (Anilofos) 아스폰 (Aspon) 아트라진 (Atrazine) 아자코나졸 (Azaconazole) 아진포스에틸 (Azinphos-ethyl) 아진포스메틸 (Azinphos-methyl*) 베나락실 (Benalaxyl) α- 비에이치씨 (α-bhc) β- 비에이치씨 (β-bhc) δ- 비에이치씨 (δ-bhc) γ- 비에이치씨 (γ-bhc) 베노다닐 (Benodanil) 벤조일프로프에틸 (Benzoylprop-ethyl) 비페녹스 (Bifenox) 비펜트린 (Bifenthrin) 비나파크리 (Binapacry) 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) -11-

12 연번 물질명 (Compound) 브로마실 (Bromacil) 브로모부타이드 (Bromobutide) 브로모포스메틸 (Bromophos-methyl ) 브로모프로필레이트 (Bromopropylate) 뷰피리메이트 (Bupirimate) 뷰타페나실 (Butafenacil) 뷰트랄린 (Butralin) 뷰틸레이트 (Butylate) 카두사포스 (Cadusafos) 캡타폴 (Captafol*) 캡탄 (Captan*) 카보페노티온 (Carbophenothion) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) 35 키노메티오네이트 (Chinomethionat) 클로르부팜 (Chlorbufam) 클로르단 (Chlordane)

13 연번 물질명 (Compound) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) 클로르단트랜스 (Chlordane-trans) 클로르에톡시포스 (Chlorethoxyfos) 클로르페나피르 (Chlorfenapyr) 클로르펜손 (Chlorfenson) 클로르플루아주론 (Chlorfluazuron) 클로르플루레놀메틸 (Chlorflurenol-methy l) 클로리다존 (Chloridazon) 클로로벤질레이트 (Chlorobenzilate) 클로로넵 (Chloroneb) 클로로프로필레이트 (Chloropropylate) 클로로탈로닐 (Chlorothalonil*) 클로르피리포스 (Chlorpyrifos*) 클로르피리포스메틸 (Chlorpyrifos-methy l) 클로르탈디메틸 (Chlorthal-dimethyl ) 클로르틴

14 연번 물질명 (Compound) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) (Chlorthin) 클로르티오포스 (Chlorthiophos) 클로졸리네이트 (Chlozolinate) 신메틸린 (Cinmethylin) 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) 클로메프로프 (Clomeprop) 시아나진 (Cyanazine) 시아노포스 (Cyanophos) 사이클로에이트 (Cycloate) 사이플루페나미드 (Cyflufenamid*) 시플루트린 (Cyfluthrin*) 사이할로포프뷰틸 (Cyhalofop-butyl) 사이할로트린 (Cyhalothrin*) 사이퍼메트린 (Cypermethrin*) 사이프로코나졸 (Cyproconazole) 사이프로디닐

15 연번 물질명 (Compound) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) (Cyprodinil*) 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) 델타메트린 (Deltamethrin*) 디메톤 -O (Demeton-O) 디메톤 -S (Demeton-S) 디메톤 -S- 메틸 - 설폰 (Demeton-S-methyl -sulfone) 데스메트린 (Desmetryn) 다이알레이트 (Diallate) 다이아지논 (Diazinon) 디클로펜티온 (Dichlofenthion) 디클로플루아니드 (Dichlofluanid*) 디클로르미드 (Dichlormid) 디클로르보스 (Dichlorvos*) 디클로란 (Dicloran) 디코폴 (Dicofol) 디엘드린 (Dieldrin*) 디에타틸에틸 (Diethatyl-ethyl) 디에토펜카브 (Diethofencarb)

16 연번 물질명 (Compound) 디플루페니칸 (Diflufenican) 디메피페레이트 (Dimepiperate) 디메타클로르 (Dimethachlor) 디메테나마이드 (Dimethenamid) 디메토에이트 (Dimethoate) 디메틸비포스 (Dimethylvinphos) 디니코나졸 (Diniconazole) 디니트라민 (Dinitramine) 디옥사티온 (Dioxathion) 디페나마이드 (Diphenamid) 디페닐아민 (Diphenylamine) 디티오피르 (Dithiopyr) p,p- 디디디 (p,p-ddd) p,p- 디디이 (p,p-dde) o,p- 디디티 (o,p-ddt) p'p- 디디티 (p,p-ddt) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev)

17 연번 물질명 (Compound) 에디펜포스 (Edifenphos) α- 엔도설판 (α-endosulfan) β- 엔도설판 (β-endosulfan) 엔도설판설페이트 (Endosulfan-sulfate ) 엔드린 (Endrin) 이피엔 (EPN) 에톡시코나졸 (Epoxiconazole) 이피티씨 (EPTC) 에스프로카브 (Esprocarb) 에타코나졸 (Etaconazole) 에탈플루랄린 (Ethalfluralin) 에토펜프록스 (Etofenprox) 에티온 (Ethion) 에토퓨메세이트 (Ethofumesate) 에토프로포스 (Ethoprophos) 에톡사졸 (Etoxazole) 에트리디아졸 (Etridiazole) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) -17-

18 연번 물질명 (Compound) 에트림포스 (Etrimfos) 페나미돈 (Fenamidone) 페나리몰 (Fenarimol*) 페나자퀸 (Fenazaquin*) 펜뷰코나졸 (Fenbuconazole*) 펜클로르포스 (Fenchlorphos) 펜퓨람 (Fenfuram) 페니트로티온 (Fenitrothion) 페노뷰카브 (Fenobucarb) 페노티오카브 (Fenothiocarb*) 페녹사닐 (Fenoxanil) 페녹시카브 (Fenoxycarb) 펜프로파트린 (Fenpropathrin*) 펜손 (Fenson) 펜티온 (Fenthion) 펜발러레이트 (Fenvalerate*) 피프로닐 (Fipronil) 플람프로프이소프로필 (Flamprop-isopropy l) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) -18-

19 연번 물질명 (Compound) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) 134 플로니카마이드 (Flonicamid*) 플루클로랄린 (Fluchloralin) 플루디옥솔닐 (Fludioxonil) 플루펜피르에틸 (Flufenpyr-ethyl) 플루메트랄린 (Flumetralin) 플루미클로락펜틸 (Flumiclorac-pentyl ) 플루미옥사진 (Flumioxazine) 플루오피람 (Fluopyram) 플루오로디펜 (Fluorodifen) 플루오클로리돈 (Flurochloridone) 플루르타몬 (Flurtamone) 플루실라졸 (Flusilazole) 플루티아셋메틸 (Fluthiacet-methyl) 플루토라닐 (Flutolanil) 플루트리아폴

20 연번 물질명 (Compound) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) (Flutriafol) 플루발리네이트 (Fluvalinate*) 폴펫 (Folpet*) 포노포스 (Fonofos) 포스티아제이트 (Fosthiazate) 프탈라이드 (Fthalide) 퓨라티오카브 (Furathiocarb) 할펜프록스 (Halfenprox) 헵타클로르 (Heptachlor) 헵타클로르에폭사이드 (Heptachlor-epoxid e) 헵테노포스 (Heptenophos) 헥사클로르벤젠 (Hexachlorbenzene) 헥사코나졸 (Hexaconazole) 이마자릴 (Imazalil*) 인다노판 (Indanofan) 인독사카브 (Indoxacarb) 이프로벤포스 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) -20-

21 연번 물질명 (Compound) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) (Iprobenfos) 이프로디온 (Iprodione) 이프로발리카브 (Iprovalicarb) 이사조포스 (Isazofos) 이사펜포스 (Isofenphos) 이소펜포스메틸 (Isofenphos-methyl *) 이소프로파린 (Isopropalin) 이소프로티오란 (Isoprothiolane) 이속산티온 (Isoxanthion) 크레속심메틸 (Kresoxim-methyl) 락토펜 (Lactofen) 렙토포스 (Leptophos) 말라티온 (Malathion) 메카밤 (Mecarbam) 메페나셋 (Mefenacet) 메펜피르디에틸 (Mefenpyr-diethyl) 메프로닐 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) -21-

22 연번 물질명 (Compound) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) (Mepronil) 메트코나졸 (Metconazole) 메티다티온 (Methidathion) 메토프로트린 (Methoprotryne) 메톡시클로르 (Methoxychlor) 메틸펜타클로로페닐설파이드 (Methyl pentachlorophenyl sulfide) 메틸트리티온 (Methyl trithion) 메톨라클로르 (Metolachlor) 메트라페논 (Metrafenone) 메트리뷰진 (Metribuzin) 엠지케이 -264 (MGK-264) 몰리네이트 (Molinate) 마이클로뷰타닐 (Myclobutanil) 나프로파마이드 (Napropamide) 니트라피린 (Nitrapyrin) 니트로탈이소프로필 (Nitrothal-isopropyl ) cis- 노나클로르 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) -22-

23 연번 물질명 (Compound) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) (cis-nonachlor*) trans- 노나클로르 (trans-nonachlor*) 뉴아리몰 (Nuarimol) 오퓨레이스 (Ofurace) 옥사딕실 (Oxadixyl) 옥시데메톤메틸 (Oxydemeton-methy l) 파클로뷰트라졸 (Paclobutrazol) 파라티온에틸 (Parathion-ethyl) 파라티온메틸 (Parathion-methyl) 페뷰레이트 (Pebulate) 펜코나졸 (Penconazole) 펜디메탈린 (Pendimethalin*) 펜타클로로아닐린 (Pentachloroaniline) 퍼메트린 (Permethrin) 펜토에이트 (Phenthoate) 펜톡사존 (Pentoxazone) 포살론 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) -23-

24 연번 물질명 (Compound) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) (Phosalone) 포스멧 (Phosmet) 포스파미돈 (Phosphamidone) 피콜리나펜 (Picolinafen) 피콕시스트로빈 (Picoxystrobin) 피페로포스 (Piperophos*) 피리미카브 (Pirimicarb*) 피리미포스에틸 (Pirimiphos-ethyl) 피리미포스메틸 (Pirimiphos-methyl) 프로베나졸 (Probenazole) 프로클로라즈 (Prochloraz*) 프로시미돈 (Procymidone) 프로페노포스 (Profenofos) 프로플루랄린 (Profluralin) 프로메톤 (Prometon) 프로나마이드 (Pronamide) 프로파클로르 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) -24-

25 연번 물질명 (Compound) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) (Propachlor) 프로파진 (Propazine) 프로페탐포스 (Propetamphos) 프로팜 (Propham) 프로피소클로르 (Propisochlor) 프로티오포스 (Prothiofos) 피라카볼리드 (Pyracarbolid) 피라클로포스 (Pyraclofos) 피라졸포스 (Pyrazophos) 피리다벤 (Pyridaben) 피리달릴 (Pyridalyl*) 피리페녹스 (Pyrifenox) 피리미디펜 (Pyrimidifen) 피리미노박메틸 (Pyriminobac-methyl ) 퀴날포스 (Quinalphos) 퀴녹시펜 (Quinoxyfen) 퀸토젠 (Quintozene) 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) -25-

26 연번 물질명 (Compound) 세크뷰메톤 (Secbumeton) 시메코나졸 (Simeconazole) 스피록사민 (Spiroxamine) 설포텝 (Sulfotep) 설프로포스 (Sulprofos) 티씨엠티비 (TCMTB) 테뷰코나졸 (Tebuconazole*) 테뷰펜피라드 (Tebufenpyrad) 페뷰피림포스 (Tebupirimfos) 테플루트린 (Tefluthrin) 터바실 (Terbacil) 터뷰포스 (Terbufos) 터뷰메톤 (Terbumeton) 터뷰틸라진 (Terbuthylazine) 테트라클로르빈포스 (Tetrachlorvinphos) 테트라코나졸 (Tetraconazole) 테트라디폰 (Tetradifon) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) -26-

27 연번 물질명 (Compound) 테트라메트린 (Tetramethrin) 테트라설 (Tetrasul) 티아조피르 (Thiazopyr) 티플루자마이드 (Thifluzamide) 디오메톤 (Thiometon) 톨클로포스메틸 (Tolclofos-methyl) 톨펜피라드 (Tolfenpyrad) 폴리플루아니드 (Tolyfluanid) 트랄로메트린 (Tralomethrin) (Deltamethrin 으로분석 ) 트리아디메폰 (Triadimefon) 트리아디메놀 (Triadimenol) 트리아조포스 (Triazophos) 트리뷰포스 (Tribufos) 트리플루미졸 (Triflumizole) 트리플루뮤론 (Triflumuron) 트리플루랄린 (Trifluralin) 유니코나졸 (Uniconazole) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) -27-

28 연번 물질명 (Compound) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragmen tion, m/z) 충돌에너지 (Colllisio nenergy, ev) 버놀레이트 (Vernolate) 빈클로졸린 (Vinclozolin) 족사마이드 (Zoxamide) 각토막이온 (fragment ion) 에대한질량분석기의기기조건은사용기기의최적값으로변경하여사용할수있으며, 제시된이외의토막이온도적용이가능함. 위의조건으로얻어진크로마토그램상의피크는표준용액피크의머무름시간과비교하여일치하여야한다. 또한표준용액과시험용액의선구이온 (precursor ion) 및토막이온 ( fragment ion) 이일치하여야하고, 표준용액과시험용액의토막이온 (fragment ion) 간반응세기의비율 (response ratio) 을비교하여그비율이 ± 20 30% 이내에서일치하여야한다. 제 의자. 이시험법의분석대상농약및검출기중 2) 의주 8) 을다음과같이한다. 주 8) LC-MS/MS 분석대상 (114 종 ) 및상세조건은아래와같다. 연번 물질명 (compound) 이온화 (Ionization mode) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragment ion, m/z) 충돌에너지 (Collision energy, ev) 1 아세타미프리드 (Acetamiprid*) positive 알디카브 (Aldicarb) positive

29 연번 물질명 (compound) 이온화 (Ionization mode) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragment ion, m/z) 충돌에너지 (Collision energy, ev) 아미설브롬 (Amisulbrom) negativ e 아설람 (Asulam) positive 아자메티포스 (Azamethiphos ) positive 아족시스트로빈 (Azoxystrobin) positive 벤디오카브 (Bendiocarb) positive 벤설라이드 (Bensulide) positive 벤족시메이트 (Benzoximate* ) positive 빅사펜 (Bixafen) positive 보스칼리드 (Boscalid) positive 브로목시닐 (Bromoxynil) negativ e 뷰토카복심 (Butocarboxim ) positive 카바릴 (Carbaryl) positive

30 연번 물질명 (compound) 이온화 (Ionization mode) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragment ion, m/z) 충돌에너지 (Collision energy, ev) 카베타마이드 (Carbetamide) positive 카보퓨란 (Carbofuran) positive 클로란트라닐리프롤 (Chlorantraniliprole ) positive 클로리뮤론에틸 (Chlorimuron-eth yl) positive 클로로벤쥬론 (Chlorobenzuro n) negativ e 클로로톨루론 (Chlorotoluron ) positive 크로마페노자이드 (Chromafenozide *) positive 시노설퓨론 (Cinosulfuron) positive 클로티아니딘 (Clothianidin*) positive 사이아조파미드 (Cyazofamid) 사이클로프로트린 (Cycloprothrin ) 사이목사닐 (Cymoxanil) positive positive positive 디크로토포스 positive

31 연번 물질명 (compound) 이온화 (Ionization mode) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragment ion, m/z) (Dicrotophos) 디메토모르프 (Dimethomorp h) 에타복삼 (Ethaboxam) 에타멧설퓨론메틸 (Ethametsulfuro n-methyl) 에티오펜카브 (Ethiofencarb) 펜헥사미드 (Fenhexamid) 펜피록시메이트 (Fenpyroximat e*) 페림존 (Ferimzone) 플루아크리피림 (Fluacrypyrim) 플루아지남 (Fluazinam) 플루벤디아마이드 (Flubendiamide ) 플루페나셋 (Flufenacet) positive positive positive positive positive positive positive positive negativ e positive positive 플루페녹수론 negativ 충돌에너지 (Collision energy, ev) -31-

32 연번 물질명 (compound) 이온화 (Ionization mode) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragment ion, m/z) (Flufenoxuron) e 플루오메투론 (Fluometuron) 플루퀸코나졸 (Fluquinconazole ) 플루리돈 (Fluridone) 플루설파마이드 (Flusulfamide) 포클로르페뉴론 (Forchlorfenuro n) 헥사플루뮤론 (Hexaflumuron ) 이마자목스 (Imazamox) 이마자픽 (Imazapic) 이마자퀸 (Imazaquin) 이마제타피르 (Imazethapyr) 이미벤코나졸 (Imibenconazol e) 이프코나졸 (Ipconazole) positive positive positive negativ e positive negativ e positive positive positive positive positive positive 이소프로카브 positive 충돌에너지 (Collision energy, ev) -32-

33 연번 물질명 (compound) 이온화 (Ionization mode) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragment ion, m/z) (Isoprocarb) 이소프로튜론 (Isoproturon) 이속사벤 (Isoxaben) 레나실 (Lenacil) 루페뉴론 (Lufenuron) 말라옥손 (Malaoxon) 메파니피림 (Mepanipyrim) 메소설퓨론메틸 (Mesosulfuron -methyl) 메타미포스 (Metamifop*) 메타미트론 (Metamitron) 메타벤즈티아주론 (Methabenzthi azuron) 메티오카브 (Methiocarb) 메토밀 (Methomyl*) positive positive positive negativ e positive positive positive positive positive positive positive positive 충돌에너지 (Collision energy, ev) -33-

34 연번 물질명 (compound) 메톡시페노자이드 (Methoxyfenozid e) 메톨카브 (Metolcarb) 메토미노스트로빈 (Metominostrob in) 메토설람 (Metosulam) 니텐피람 (Nitenpyram) 노발루론 (Novaluron) 옥사밀 (Oxamyl*) 옥사지클로메폰 (Oxaziclomefon ) 펜메디팜 (Phenmedipham ) 피녹사덴 (Pinoxaden) 프로메카브 (Promecarb) 프로파퀴자포프 (Propaquizafop ) 이온화 (Ionization mode) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) positive positive positive positive positive negativ e 선구이온 (Precurso r ion, m/z) positive positive positive positive positive positive 토막이온 (Fragment ion, m/z) 프로폭수르 positive 충돌에너지 (Collision energy, ev) -34-

35 연번 물질명 (compound) 이온화 (Ionization mode) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragment ion, m/z) (Propoxur) 프로피리설퓨론 (Propyrisulfuron ) 프로설포카브 (Prosulfocarb) 프로티오코나졸 (Prothioconazol e) 피라크로닐 (Pyraclonil) 피라클로스트로빈 (Pyraclostrobin ) 피라플루펜에틸 (Pyraflufen-eth yl) 피라졸레이트 (Pyrazolate) 피리벤족심 (Pyribenzoxim ) 피리뷰티카브 (Pyributicarb) 피리데이트 (Pyridate) 피리메타닐 (Pyrimethanil) 피리프록시펜 (Pyriproxyfen) positive positive negativ e positive positive positive positive positive positive positive positive positive 충돌에너지 (Collision energy, ev) -35-

36 연번 물질명 (compound) 피로퀼론 (Pyroquilon) 퀴노클라민 (Quinoclamine) 림설퓨론 (Rimsulfuron) 스피로디클로펜 (Spirodiclofen) 설펜트라존암모늄 (Sulfentrazone _NH4) 테부페노자이드 (Tebufenozide ) 테부티우론 (Tebuthiuron) 테플루벤주론 (Teflubenzuron ) 테프랄록시딤 (Tepraloxydim ) 테닐클로르 (Thenylchlor) 티아클로프리드 (Thiacloprid*) 이온화 (Ionization mode) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) positive positive positive positive positive positive positive negativ e positive positive positive 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragment ion, m/z) 티아메톡삼 positive 충돌에너지 (Collision energy, ev) -36-

37 연번 물질명 (compound) (Thiamethoxam* ) 티오디카브 (Thiodicarb) 티아디닐 (Tiadinil) 트랄콕시딤 (Tralkoxydim) 트리아설퓨론 (Triasulfuron) 트리벤주론메틸 (Tribenuron-meth yl) 트리사이클라졸 (Tricyclazole) 트리데모르프 (Tridemorph) 프리플록시스트로빈 (Trifloxystrobi n) 트리플록시설퓨론 (Trifloxysulfuro n) 2,3,5- 트리메타카브 (2,3,5-Trimethaca rb) 3,4,5- 트리메타카브 (3,4,5-Trimethaca rb) 이온화 (Ionization mode) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) positive negativ e positive positive positive positive positive positive positive positive positive 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragment ion, m/z) 트리디코나졸 positive 충돌에너지 (Collision energy, ev) -37-

38 연번 114 물질명 (compound) 이온화 (Ionization mode) 머무름시간 ( 분 ) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurso r ion, m/z) 토막이온 (Fragment ion, m/z) (Triticonazole) 엑스엠씨 (XMC) positive 충돌에너지 (Collision energy, ev) 각토막이온 (fragment ion) 에대한질량분석기의기기조건은사용기기의최적값으로변경하여사용할수있으며, 제시된이외의토막이온도적용이가능함. 위의조건으로얻어진크로마토그램상의피크는표준용액피크의머무름시간 (retention time) 과비교하여일치하여야한다. 또한표준용액과시험용액의선구이온 (precusor ion) 및토막이온 (fragment ion) 이일치하여야하고, 표준용액과시험용액의토막이온 (fragment ion) 간반응세기의비율 (response ratio) 을비교하여그비율이 ± 20 30% 이내에서일치하여야한다. 토막이온간반응세기의비율허용범위이온간반응세기의비율 (%) 허용범위 (%) 50 ±20 20, 50 ±25 10, 20 ±30 제 을다음과같이신설한다 아바멕틴등 27종동시다성분시험법가. 시험법적용범위닭고기및알에적용한다. 나. 분석원리 -38-

39 검체중대상성분을 1% 아세트산포함아세토니트릴로추출하고, 원심분리하여상징액을취해 PSA(primary secondary amine), C 18 및 GCB( Graphitized carbon black) 를이용하여정제한후액체크로마토그래프- 질량분석기로분석한다. 다. 장치 1) 액체크로마토그래프-질량분석기 (LC-MS/MS) 라. 시약및시액 1) 용매 : 잔류농약시험용또는특급 2) 물 : 3차증류수또는이와동등한것 3) 표준원액 : 표준품을메탄올에녹여 1,000 mg/l가되게한다. 4) 표준용액 : 표준원액을무처리시료추출물을이용하여적당한농도로혼합희석한다 ( 무처리시료추출물 90% 이상포함 ) 5) 기타시약 : 잔류농약시험용또는특급마. 시험용액의조제 1) 추출검체 ( 닭의경우피부와뼈, 내장제거한근육부위 100 g, 알의경우계란, 오리알은 10개, 메추리알 20개또는이와동등한양 ) 를균질화한후 5 g을정확히달아 50 ml 용량원심분리관에넣고 1% 아세트산이함유된아세토니트릴 15 ml를가하여 1분간격렬하게진탕한다. 원심분리관에무수황산마그네슘 6 g과무수아세트산나트륨 1.5 g을차례로가하고 10분간격렬하게진탕한후 4, 4,000 G에서 1 0분간원심분리한다. 2) 정제새로운 15 ml 용량원심분리관에무수황산마그네슘 1,200 mg, C

40 00 mg, PSA(primary-secondary amine) 400 mg과 GCB(graphitized c arbon black) 45 mg을넣고 1) 추출 로부터얻은용액중상징액 6 ml 를넣고 1분간격렬하게진탕한후 4, 4000 G에서 10분간원심분리한다. 상징액중 3 ml를취하여질소기류하에서농축, 건고한후잔류물에메탄올을 1 ml를가하여재용해한다. 추출액을멤브레인필터 (nylon 재질, 0.2 μm) 로여과하여시험용액으로한다. 바. 시험조작 1) 액체크로마토그래프분석조건 가 ) 칼럼 : C 18 (Imtakt, Cadenza CD, 2.0 mm i.d. 50 mm, 3 μm) 또 는이와동등한것 나 ) 칼럼온도 : 40 다 ) 이동상 (1) 이동상 A : 0.1% 포름산함유메탄올 (2) 이동상 B : 0.1% 포름산및 5 mm 아세트산암모늄함유물 시간 ( 분 ) A(%) B(%)

41 라 ) 이동상유량 : 0.2 ml/ 분마 ) 주입량 : 2 μl 2) 질량분석기분석조건가 ) 이온화방법 : ESI positive 및 negative ion mode 나 ) Capillary voltage : 5.5 kv 다 ) Collision gas : 질소 (N 2 ) 또는아르곤 (Ar) 표. 액체크로마토그래프 - 질량분석기분석을위한특성이온 분석성분 (Compound) RT (min) 2,4- 디메틸아닐린 3.5 (2,4- Dimethylaniline ***) 3 아바멕틴 (Abamectin * ) 아미트라즈 (Amitraz *** ) 비펜트린 (Bifenthrin **** ) 카바릴 (Carbaryl) 클로티아니딘 (Clothianidin) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurs or ion, m/z) 생성이온 (Produc t ion, m/z) 충돌에너지 (Collision energy, ev) 사이퍼메트린 이온화 (Ioniz ation mode)

42 분석성분 (Compound) RT (min) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurs or ion, m/z) 생성이온 (Produc t ion, m/z) 충돌에너지 (Collision energy, ev) (Cypermethrin) 다이아지논 (Diazinon) 디클로르보스 (Dichlorvos *** ) 에톡사졸 (Etoxazole) 페니트로티온 (Fenitrothion) 페노뷰카브 (Fenobucarb) 펜설포티온 (Fensulfothion) 이온화 (Ioniz ation mode) 피프로닐 (Fipronil) 피프로닐설폰 (Fipronil sulfone) 플루페녹수론 (Flufenoxuron) 아이소펜포스 (Isofenphos)

43 분석성분 (Compound) RT (min) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurs or ion, m/z) 생성이온 (Produc t ion, m/z) 충돌에너지 (Collision energy, ev) 이온화 (Ioniz ation mode) 이버멕틴 (Ivermectin ** ) 메타미도포스 (Methamidophos) 메티다티온 (Methidathion) 모노크로토포스 (Monocrotophos) 포레이트 (Phorate) 포레이트옥손 (Phorate oxon) 포레이트옥손설폰 (Phorate oxon sulfone) 포레이트옥손설폭사이드 (Phorate oxon sulfoxide) 포레이트설폰 (Phorate sulfone) 포레이트설폭사이드 (Phorate sulfoxide)

44 분석성분 (Compound) RT (min) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precurs or ion, m/z) 생성이온 (Produc t ion, m/z) 충돌에너지 (Collision energy, ev) 이온화 (Ioniz ation mode) 피리미포스메틸 (Pirimiphos methyl) 프로폭서 (Propoxur) 피리다벤 (Pyridaben) 스피로메시펜 (Spiromesifen) 설폭사플로르 (Sulfoxaflor) 테트라코나졸 (Tetraconazole) 트리클로르폰 (Trichlorfon) 밑줄표시되어있는것은정량이온이며, 그외는정성이온임 각생성이온 (Product ion) 에대한질량분석기의기기조건은사용기기의최적값으로변경하여사용할수있으며, 제시된이외의생성이온도적용이가능함. Abamectin * 의분석대상물질은 Avermectin B1a 이고, Ivermectin ** 의분석대상물질은 22, 23-Dihydroavermectin B1a 임. 이시험법을이용하여위의분석대상성분중 *** 표시된성분이가금류고기또는알에서검출될경우정량분석은식품공전 8.3의정량시험법을따르고, **** 표시된성분은가금류고기의경우식품공전 계열별시험법을따른다. -44-

45 3) 검량선작성농도별표준용액을일정량취하여무처리시료추출용액과각각혼합한후액체크로마토그래프 -질량분석기에각각주입한다. 얻은크로마토그램상의각피크높이또는면적을구하여검량선을작성한다. 4) 표준품의크로마토그램 그림. 액체크로마토그래프 - 질량분석기에서표준품의크로마토그램 5) 정량한계 표. 정량이가능한농약 구분 2,4- 디메틸아닐린 (2,4-Dimethylaniline) 아바멕틴 (Abamectin) 아미트라즈 (Amitraz) 비펜트린 (Bifenthrin) 카바릴 (Carbaryl) 클로티아니딘 (Clothianidin) 사이퍼메트린 (Cypermethrin) 정량한계 (mg/kg) 농약가금류고기알

46 다이아지논 (Diazinon) 구분 디클로르보스 (Dichlorvos) 에톡사졸 (Etoxazole) 페니트로티온 (Fenitrothion) 페노뷰카브 (Fenobucarb) 펜설포티온 (Fensulfothion) 피프로닐 (Fipronil) 피프로닐설폰 (Fipronil sulfone) 플루페녹수론 (Flufenoxuron) 아이소펜포스 (Isofenphos) 이버멕틴 (Ivermectin) 메타미도포스 (Methamidophos) 메티다티온 (Methidathion) 모노크로토포스 (Monocrotophos) 포레이트 (Phorate) 포레이트옥손 (Phorate oxon) 정량한계 (mg/kg) 농약가금류고기알 포레이트옥손설폰 (Phorate oxon sulfone) 포레이트옥손설폭사이드 (Phorate oxon sulfoxide) 포레이트설폰 (Phorate sulfone)

47 구분 정량한계 (mg/kg) 농약가금류고기알 포레이트설폭사이드 (Phorate sulfoxide) 피리미포스메틸 (Pirimiphos methyl) 프로폭서 (Propoxur) 피리다벤 (Pyridaben) 스피로메시펜 (Spiromesifen) 설폭사플로르 (Sulfoxaflor) 테트라코나졸 (Tetraconazole) 트리클로르폰 (Trichlorfon) 으로표시된농약은정성만가능하고검출시정량분석은식품공전 8.3 의정량시험법을 따르고, 으로표시된농약은식품공전 계열별시험법을따름 사. 정량시험위조건으로얻어진크로마토그램상의피크가표준용액피크의머무름시간과일치할때피크높이또는면적을검량선에대입하여정량한다. 아. 확인시험액체크로마토그래프-질량분석기상의머무름시간과특성이온으로확인한다. 제 을다음과같이신설한다 이미다클로프리드 (Imidacloprid) -47-

48 가. 시험법적용범위닭고기및알에적용한다. 나. 분석원리검체중이미다클로프리드및대사산물을 1% 아세트산포함아세토니트릴로추출하여원심분리한후 C 18 을이용하여정제하여액체크로마토그래프-질량분석기로분석한다. 다. 장치 1) 액체크로마토그래프-질량분석기 (LC-MS/MS) 라. 시약및시액 1) 용매 : 잔류농약시험용또는특급 2) 물 : 3차증류수또는이와동등한것 3) 표준원액 : 이미다클로프리드 (imidacloprid) 및대사산물이미다클로프리드우레아 (imidacloprid urea), 이미다클로프리드올레핀 (imidaclopr id olefin), 5-하이드록시이미다클로프리드 (5-hydroxy imidacloprid), 6-클로로니코티닉엑시드 (6-chloronicotinic acid) 표준품을각각아세토니트릴에녹여 1,000 mg/l가되게한다. 4) 표준용액 : 표준원액을무처리시료추출물을이용하여적당한농도로혼합, 희석한다 ( 무처리시료추출물 90% 이상포함 ). 5) 기타시약 : 잔류농약시험용또는특급마. 시험용액의조제 1) 추출검체 ( 닭의경우피부와뼈, 내장제거한근육부위 100 g, 알의경우계란, 오리알은 10개, 메추리알 20개또는이와동등한양 ) 를균질화한후 5 g을 50 ml 용량의원심분리관에정확히달아넣고 1% 아세트산이함유된아세토니트릴 15 ml를가하여 10분간격렬하게 -48-

49 진탕한후 4, 4,000 G에서 10분간원심분리한다. 2) 정제새로운 15 ml 용량원심분리관에 C mg을넣고 1) 추출 로부터얻은원심분리상징액중 6 ml를첨가하여 1분간격렬하게진탕한후 4, 4,000 G에서 10분간원심분리한다. 상징액중 3 ml를취하여질소기류하에서농축, 건고한후잔류물에 1% 포름산함유 50% 아세토니트릴 1 ml를가하여재용해한다. 추출액을멤브레인필터 (nylon 재질, 0.2 μm) 로여과하여시험용액으로한다. 바. 시험조작 1) 액체크로마토그래프분석조건가 ) 칼럼 : C 18 (Waters XBridge, 2.1 mm i.d. 100 mm, 3.5 μm) 또는이와동등한것나 ) 칼럼온도 : 40 다 ) 이동상 (1) 이동상 A: 0.1% 포름산함유아세토니트릴 (2) 이동상 B: 0.1% 포름산및 5 mm 아세트산암모늄함유물 시간 ( 분 ) A(%) B(%)

50 라 ) 이동상유속 : 0.2 ml/ 분마 ) 주입량 : 5 μl 2) 질량분석기분석조건가 ) 이온화방법 : ESI positive-ion mode 나 ) Capillary voltage: 3.2 kv 다 ) Collision gas: 아르곤 (Ar) 라 ) Cone voltage: 54 V(imidacloprid), 44 V(imidacloprid urea), 38 V(imida cloprid olefin), 58 V(5-hydroxy imidacloprid), 60 V(6-chloronicotinic acid) 표. 액체크로마토그래프 - 질량분석기분석을위한특성이온 분석성분 (Compound) 이미다클로프리드 (Imidacloprid) 이미다클로프리드우레아 (Imidacloprid urea) 이미다클로프리드올레핀 (Imidacloprid olefin) 5- 히드록시이미다클로프리드 (5-Hydroxy 평균분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precursor ion, [M+H] +, m/z) 생성이온 (Product ion, m/z) 충돌에너지 (Collision energy, ev)

51 imidacloprid) 6- 클로로니코틴산 (6-Chloronicotinic acid) 밑줄표시되어있는것은정량이온이며그외이온들은정성이온임 각생성이온에대한질량분석기의기기조건은사용기기의최적값으로변경하여사용할수있으며, 제시된이외의생성이온도적용이가능함. 3) 검량선작성표준용액을농도별로일정량취하여액체크로마토그래프-질량분석기에각각주입하여얻은크로마토그램상의각피크높이또는면적값으로검량선을작성한다. 4) 표준품의크로마토그램 -51-

52 그림. 액체크로마토그래프-질량분석기에서표준품의크로마토그램 Imidacloprid(A: 4.6분 ), imidacloprid urea(b: 4.4분 ), imidacloprid olefi n (C: 4.3분 ), 5-hydroxy imidacloprid(d: 4.4분 ), 6-chloronicotinic acid( E:4.5분 ) 5) 정량한계 0.01 mg/kg 사. 정량시험위조건으로얻어진크로마토그램상의피크가표준용액피크의머무름 -52-

53 시간과일치할때피크높이또는면적을검량선에대입하여정량한다. 아. 확인시험액체크로마토그래프 -질량분석기상의머무름시간과특성이온으로이미다클로프리드및각대사산물을확인한다 스피노사드 (Spinosad) 가. 시험법적용범위가금류고기및알에적용한다. 나. 분석원리검체중스피노사드를아세토니트릴로추출하고, 황산마그네슘, 아세트산나트륨을가하여원심분리한상층액을취해정제한후액체크로마토그래프-질량분석기로분석한다. 다. 장치 1) 액체크로마토그래프-질량분석기 (LC-MS/MS) 라. 시약및시액 1) 용매 : 잔류농약시험용또는특급 2) 물 : 3차증류수또는이와동등한것 3) 표준원액 : 스피노신 A 및스피노신 D 표준품을각각아세토니트릴에녹여 100 mg/l가되게하여갈색병에보관한다. 4) 표준용액 : 표준원액을무처리시료추출물을이용하여적당한농도로희석한다.(Matrix matched calibration) 5) 기타시약 : 잔류농약시험용또는특급마. 시험용액의조제 1) 추출균질화한닭고기에서추출한지방 1 g( 알은 10 g) 을정밀히달아 50 ml -53-

54 원심분리관에취하여지방 ( 닭고기 ) 은증류수 5 ml와 1% 아세트산함유아세토니트릴 10 ml, 알은아세토니트릴 10 ml를가한뒤 1분간균질화한후, 황산마그네슘 6 g과아세트산나트륨 1.5 g을차례로가하고 1분간진탕한다. 진탕후추출물을 1,700 G으로 5분간원심분리한다. 상층액 1.5 ml을 2.0 ml 원심분리관에옮긴후불순물제거를위한다중벽탄소나노튜브 (multi-wall carbon nano tubes, 직경 nm, 길이 5 15 μm ) 6 mg과황산마그네슘 225 mg을가하고 10초간진탕한후 1,400 G로 5분간원심분리한다. 원심분리후상층액 1 ml를멤브레인필터 (PTFE, 0.2 μm) 로여과한후갈색바이알에옮겨시험용액으로한다. 바. 시험조작 1) 액체크로마토그래프분석조건가 ) 칼럼 : C 18 (Agilent Eclipse Plus, 3.0 mm i.d. 150 mm, 3.5 μm) 또는이와동등한것나 ) 칼럼온도 : 30 다 ) 이동상 (1) 이동상 A: 아세토니트릴 (2) 이동상 B: 0.1% 포름산함유물시간 ( 분 ) A(%) B(%)

55 라 ) 이동상유속 : 0.3 ml/ 분마 ) 주입량 : 5 μl 2) 질량분석기분석조건가 ) 이온화방법 : ESI positive-ion mode 나 ) Capillary Voltage: 3.5 kv 다 ) Collision gas: 아르곤 (Ar) 라 ) Cone voltage: 42 V 표. 액체크로마토그래프-질량분석기분석을위한특성이온 분석성분 (Compound) 평균분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precursor io n, [M+H] +, m/z) 생성이온 (Product ion, m/z) 충돌에너지 (Collision energy, ev) 스피노신 A (Spinosyn A) 스피노신 D (Spinosyn D) ) 밑줄표시되어있는것은정량이온이며, 그외는정성이온임 각생성이온에대한질량분석기의기기조건은사용기기의최적값으로변경하여사용할수있으며, 제시된이외의생성이온도적용이가능함. 3) 검량선작성표준용액을농도별로일정량취하여액체크로마토그래프 -질량분석기에각각주입하여얻은크로마토그램상의각피크높이또는면적값으로검량선을작성한다. 4) 표준품의크로마토그램 -55-

56 그림. 액체크로마토그래프-질량분석기에서표준품의크로마토그램스피노신 A(A: 4.95분 ), 스피노신 D(B: 5.01분 ) 5) 정량한계가 ) mg/kg( 알 ) 나 ) 0.01 mg/kg( 가금류고기 ( 지방 )) 사. 정량시험위조건으로얻어진크로마토그램상의피크가표준용액피크의머무름시간과일치할때피크높이또는면적을각각의검량선에대입하여스피노신 A와스피노신 D의합으로써스피노사드함량을정량한다. 아. 확인시험액체크로마토그래프-질량분석기상의머무름시간과특성이온으로스피노신 A와스피노신 D를확인한다 클로르페나피르 (Chlorfenapyr) 가. 시험법적용범위닭고기및알에적용한다. 나. 분석원리검체중대상성분을 1% 아세트산포함아세토니트릴로추출하고, 원심 -56-

57 분리하여상징액을취해 PSA(primary secondary amine), C 18 및 GCB( Graphitized carbon black) 를이용하여정제한후기체크로마토그래프- 질량분석기로분석한다. 다. 장치 1) 기체크로마토그래프 -질량분석기(GC-MS/MS) 또는기체크로마토그래프-전자포획검출기 (GC-ECD) GC-ECD는 GC-MS/MS가없는경우에한하여정성분석을위해사용이가능하나, GC-ECD 로정성분석시검출이되면반드시 GC-MS/MS 를이용하여정량분석을실시하여야함 라. 시약및시액 1) 용매 : 잔류농약시험용또는특급 2) 물 : 3차증류수또는이와동등한것 3) 표준원액 : 표준품을아세톤에녹여 1,000 mg/l가되게한다. 4) 표준용액 : 표준원액을무처리시료추출물을이용하여적당한농도로혼합희석한다 ( 무처리시료추출물 90% 이상포함 ) 5) 기타시약 : 잔류농약시험용또는특급마. 시험용액의조제 1) 추출검체 ( 닭의경우피부와뼈, 내장제거한근육부위 100 g, 알의경우계란, 오리알은 10개, 메추리알 20개또는이와동등한양 ) 를균질화한후 5 g을정확히달아 50 ml 용량원심분리관에넣고 1% 아세트산이함유된아세토니트릴 15 ml를가하여 1분간격렬하게진탕한다. 원심분리관에무수황산마그네슘 6 g과무수아세트산나트륨 1.5 g을차례로가하고 10분간격렬하게진탕한후 4, 4,000 G에서 1 0분간원심분리한다. -57-

58 2) 정제새로운 15 ml 용량원심분리관에무수황산마그네슘 1,200 mg, C mg, PSA(primary-secondary amine) 400 mg과 GCB(graphitized c arbon black) 45 mg을넣고 1) 추출 로부터얻은용액중상징액 6 ml 를넣고 1분간격렬하게진탕한후 4, 4,000 G에서 10분간원심분리한다. 상징액중 3 ml를취하여질소기류하에서농축, 건고한후잔류물에메탄올을 1 ml를가하여재용해한다. 추출액을멤브레인필터 (nylon 재질, 0.2 μm) 로여과하여시험용액으로한다. 바. 시험조작 1) 기체크로마토그래프-질량분석기의분석조건가 ) 칼럼 : HP-5MSUI(Agilent, 0.25 mm i.d. x 30 m, 0.25 μm) 또는이와동등한것나 ) 이동상가스및유속 : 헬륨 (He), 1.0 ml/ 분다 ) 주입부온도 : 300 라 ) 칼럼온도 온도 ( ) 비율 ( / 분 ) 시간 ( 분 ) 마 ) 검출기온도 : 310 바 ) 주입모드 : splitless 사 ) 주입량 : 1 μl -58-

59 표. 기체크로마토그래프 - 질량분석기분석을위한특성이온 분석성분 (Compound) 클로르페나피르 (Chlorfenapyr) 분자량 (MW) 관측질량 (Exact mass) 선구이온 (Precursor ion, m/z) 토막이온 (Fragment ion, m/z) 충돌에너지 (Collision energy, ev) 밑줄표시되어있는것은정량이온이며, 그외는정성이온임 각토막이온 (Fragment ion) 에대한질량분석기의기기조건은사용기기의최적값으로변경하 여사용할수있으며, 제시된이외의토막이온도적용이가능함. 2) 기체크로마토그래프-전자포획검출기의분석조건가 ) 칼럼 : DB-5MS(Agilent, 0.25 mm i.d. x 30 m, 0.25 μm) 또는이와동등한것나 ) 이동상가스및유속 : 질소 (N 2 ), 1.0 ml/ 분다 ) 주입부온도 : 260 라 ) 칼럼온도 온도 ( ) 비율 ( / 분 ) 시간 ( 분 ) 마 ) 검출기온도 : 300 바 ) 주입모드 : splitless 사 ) 주입량 : 1 μl -59-

60 3) 검량선작성농도별표준용액을일정량취하여무처리시료추출용액과각각혼합한후기체크로마토그래프 -질량분석기에각각주입한다. 얻은크로마토그램상의각피크높이또는면적을구하여검량선을작성한다. 4) 표준품의크로마토그램 그림. 기체크로마토그래프-질량분석기에서표준품의크로마토그램 Chlorfenapyr (13.4분) 5) 정량한계 0.01 mg/kg 사. 정량시험위조건으로얻어진크로마토그램상의피크가표준용액피크의머무름시간과일치할때피크높이또는면적을검량선에대입하여정량한다. 아. 확인시험기체크로마토그래프 -질량분석기상의머무름시간과특성이온으로확인한다 카탑 (Cartap), 티오사이클람 (Thiocyclam) -60-

61 가. 시험법적용범위가금류고기및알에적용한다. 나. 분석원리검체중카탑, 티오사이클람을 2% 시스테인염산용액, 3% 염화니켈용액및암모니아수를사용하여네레이스톡신 (nereistoxin) 으로전환시켜헥산및아세토니트릴로추출한후액체크로마토그래프-질량분석기로분석한다. 다. 장치 1) 액체크로마토그래프-질량분석기 (LC-MS/MS) 라. 시약및시액 1) 용매 : 잔류농약시험용또는특급 2) 물 : 3차증류수또는이와동등한것 3) 표준원액 : 옥살산수소네레이스톡신 (nereistoxin hydrogen oxalate) 표준품을아세토니트릴에녹여네레이스톡신 (nereistoxin) 으로써 100 mg/l 가되게한다. 4) 표준용액 : 표준원액을무처리시료추출물을이용하여적당한농도로희석한다.(Matrix matched calibration) 5) 2% 시스테인 (cysteine) 용액 : 무수염산시스테인 (L-cysteine-HCl, anhydrous ) 20 g을 0.02 N 염산용액 950 ml에녹인후 10 N 수산화나트륨용액을첨가하여 ph 3로맞춘다음 0.02 N 염산용액을첨가하여 1,000 ml가되게한다. 6) 3% 염화니켈 (nickel chloride) 용액 : 염화니켈 3 g을물에녹여 100 m L가되게한다. 7) 기타시약 : 잔류농약시험용또는특급마. 시험용액의조제 -61-

62 1) 추출균질화한시료 10 g을정밀히달아 50 ml 원심분리관에취하여 2% 시스테인용액 40 ml( 알의경우 30 ml) 를가하고 30분간진탕추출한다 ( 단, 추출액의 ph가 4 5 범위를벗어날경우, 2 N 염산용액으로조절한후 30분간다시진탕추출한다 ). 이를 3,500 G, 4 에서 10분간원심분리한후상층액 20 ml를별도의 50 ml 원심분리관에취한다 ( 알의경우상층액을별도의 50 ml 원심분리관에옮긴후추출용액으로전체부피를 40 ml로한다음그중 20 ml를취한다 ). 여기에 3% 염화니켈용액과진한암모니아수를각각 1.5 ml씩첨가한다음 5분간진탕한후 70 수욕상에서 1시간동안진탕반응시킨다. 반응이끝난추출액을냉각시킨다음 10 N 황산용액을첨가하면서 ph 5로맞춘후헥산 10 ml를가하여진탕한다. 이를 3,5 00 G, 4 에서 10분간원심분리한후상층액을버린다음 10 N 수산화나트륨용액을첨가하면서 ph 9로맞춘다. 여기에염화나트륨 6 g 과아세토니트릴 20 ml을가한후진탕하고, 다시 3,500 G, 4 에서 10분간원심분리한다음상층액 ( 아세토니트릴층 ) 을멤브레인필터 (PTFE, 0.45 μm) 로여과한후시험용액으로한다. 바. 시험조작 1) 액체크로마토그래프분석조건가 ) 칼럼 : HILIC(Waters XBridge, 2.1 mm i.d. 100 mm, 3 μm) 또는이와동등한것나 ) 칼럼온도 :