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서진 신
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1 대한안과학회지 2018 년제 59 권제 1 호 J Korean Ophthalmol Soc 2018;59(1):9-16 ISSN (Print) ISSN (Online) Original rticle 다양한실험동물에서의마이봄샘촬영및면역조직화학적구조관찰 Meibography and Immunohistochemistric Structures in nimal Models 이현규 1 우인호 1 강보람 1 엄영섭 1 강수연 1 황호식 2 김효명 1 송종석 1 Hyun Kyu Lee, MD 1, In Ho Woo, MD 1, oram Kang, MS 1, Young Sub Eom, MD, PhD 1, Su-Yeon Kang, MD, PhD 1, Ho Sik Hwang, MD, PhD 2, Hyo Myung Kim, MD, PhD 1, Jong Suk Song, MD, PhD 1 고려대학교의과대학안과학교실 1, 한림대학교의과대학춘천성심병원안과학교실 2 Department of Ophthalmology, Korea University College of Medicine 1, Seoul, Korea Department of Ophthalmology, Chuncheon Sacred Heart Hospital, Hallym University College of Medicine 2, Chuncheon, Korea Purpose: We evaluated differences in the meibographic findings and immunohistochemical structures of mice, rats, and rabbits (commonly used in animal experiments). Methods: Meibomian gland images were taken using an animal meibograph in mice, rats, and black and white rabbits (five of each animal).the size ratios of the upper and lower Meibomian glands were calculated. fterm meibographic imaging, the eyes were cut sagittally or transversely and the histological structures were compared using hematoxylin-and-eosin (H&E) and immunohistochemical staining. In addition, the diameters of the central ducts and the areas of ducted glands and the acini were compared using image analysis software. Results: The meibographic findings were clearer in black rabbits than in the other animals. The upper to lower length ratio of the gland did not differ significantly among the three species. Histologically, no central duct epithelial cells were apparent in mice. The diameters of the central ducts and the areas of ducted glands and acini increased in the following order: mouse, rat, and rabbit. However, the Meibomian gland areas did not differ significantly between mice and rats. On immunohistochemical staining, the central ductal epithelium and the Meibomian gland acini were stained for cytokeratin 5 (CK 5) but only the central ductal epithelium was stained for cytokeratin 6 (CK 6). Conclusions: The larger the experimental animal, the greater the sizes of the Meibomian gland ducts and acini. In addition, black rabbits yielded better gland images because contrast was enhanced. Compared with sagittal sections of Meibomian glands, transverse sections facilitated a better understanding of the structures of the central ducts and surrounding Meibomian gland acini. J Korean Ophthalmol Soc 2018;59(1):9-16 Keywords: nimal, Meibography, Meibomian gland, Immunohistochemistry 마이봄샘은지질을분비하며, 눈물막의표면의안정성 Received: Revised: ccepted: ddress reprint requests to Jong Suk Song, MD, PhD Department of Ophthalmology, Korea University Guro Hospital, #148 Gurodong-ro, Guro-gu, Seoul 08308, Korea Tel: , Fax: crisim@korea.ac.kr * Conflicts of Interest: The authors have no conflicts to disclose. 에기여하는역할을한다. 1 또한마이봄샘기능부전, 안구건조증, 안검염등의질환은눈물막의안정성이파괴되어시력저하를유발하며삶의질을떨어트리는주요질환이다. 1 마이봄샘기능부전을중심으로병인및치료효과를파악하기위하여다양한동물실험이진행되고있다. 1 대표적으로생쥐, 쥐, 토끼가있으며, 인간과의비교및적용을위해다양한동물모델이제시되어왔다. 2-8 마이봄샘기능부전의경우마이봄샘의각질화가중요하며이는여러동물실험을통해밝혀졌는데, 9 이에더해서 c2018 The Korean Ophthalmological Society This is an Open ccess article distributed under the terms of the Creative Commons ttribution Non-Commercial License ( which permits unrestricted non-commercial use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited. 9

동물들의마이봄샘을촬영하기위하여특수제작된동물실험용마이봄샘촬영장비를이용하였다 (Meiboviewer for animal experiments; Visual Optics, Chuncheon, Korea) (Fig. 1). 동물들의마취를위하여, tiletamine/zolazepam (Zoletin, 30 mg/kg, Virbac Lab.

2 - 대한안과학회지 2018 년제 59 권제 1 호 - 면역조직화학염색을통해좀더다양한연구가진행되고있다. 1,5,6,10-14 하지만아직동물이살아있는상태에서동물의마이봄샘을확인할수있는시스템이없었다. 따라서본연구를통해동물실험으로대표적으로사용되고있는생쥐, 쥐, 토끼의마이봄샘촬영소견및면역조직화학적구조를비교하여동물별결과의차이를파악하였고, 또한마이봄샘을촬영하기에가장적합한동물모델이무엇인지알아보았다. 대상과방법 생쥐, 토끼는검은색및흰색으로구분을하였으며, 각동물마다다섯마리씩연구를하였다. 쥐의경우흰색동물만을이용하였다 (Table 1). 동물들의마이봄샘을촬영하기위하여특수제작된동물실험용마이봄샘촬영장비를이용하였다 (Meiboviewer for animal experiments; Visual Optics, Chuncheon, Korea) (Fig. 1). 동물들의마취를위하여, tiletamine/zolazepam (Zoletin, 30 mg/kg, Virbac Lab., Carros, France) 및 xylazine (Rompun 10 mg/kg, ayer, erkley, MI, US) 을근육주사하여마취시킨다음, 눈에대한특별한전처치없이살아있는상태에서눈꺼풀의마이봄샘을촬영하였다 (Fig. 1). 촬영후사람의마이봄샘과가장유사한동물모델이무엇인지알아보기위하여이미 지분석소프트웨어를이용하여윗눈꺼풀의마이봄샘길이와아랫눈꺼풀의마이봄샘길이의비율을측정하였다. 눈꺼풀의마이봄샘촬영을시행한후눈꺼풀조직을잘라적출하여눈꺼풀정중앙부위를시상면, 가로면두가지방법으로단면을잘라서단면에따른조직학적결과의차이를확인하였다. 이에추가적으로가로면으로자른 200 배율의사진을통해중심관의장축길이와중심관및주변세엽세포를포함한면적을이미지분석소프트웨어를이용하여측정하여평균을측정하였다. 또한 Hematoxylin and Eosin (H&E) stain과 CK 5 (Cytokeratin 5, ab :100 dilution; bcam, Cambridge, M, US), CK 6 (Cytokeratin 6, GTX :100 dilution, GeneTex, San ntonio, TX, US) 에대한면역조직화학염색을시행하였다. 보통 CK 5의경우중심관의상피세포와주변세엽세포를염색하며, CK 6의경우중심관의상피세포를염색하는것이차이인데, 이를이용하여 CK 5, 6 사이의결과의차이및동물간의결과차이를확인하였다. 통계학적분석은 SPSS 18 for Windows (IM Corp., rmonk, NY, US) 를이용하였다. 세군의결과를분산분석 (analysis of variance, NOV) 하였으며, 통계학적유의성의기준은 p값이 0.05 미만인경우로하였다. 유의한차이가있는경우각각의집단간 Tukey 검정을통해확인하였다. Table 1. nimal models (mouse, rat, rabbit) Mouse Rat Rabbit White C57L/6 Dutch belted pigmented rabbits lack L/c Sprague-Dawley New Zealand Figure 1. Meibography for animals. () Meibography for animals. () The animals were anesthetized by intramuscular injection, and meibography of animals was performed. 10

- 이현규 외 : 실험동물 간의 마이봄샘 비교 - 결 하였다(Fig. 2). 이렇듯 모든 동물에서 윗눈꺼풀의 마이봄 과 샘이 보다 더 길고 관찰하기 더 용이하였다.

길이의 비율을 측정한 결과 각 동물 간에 통계 쥐에서 조금 더 분명하게 관찰할 수 있었다(Fig. 2). 또한 적으로 유의한 차이는 없었다(Table 2).

다음으로 쥐의 경우, 흰색 동물만을 이용하여 검사를 시행하였기 때문에 검은색 및 흰색 간의 비교는 하지 못하였지만 마이봄샘을 촬영하는 것에는 무리가 없었다.

또한 검은색과 흰색 동물을 비 교하였을 때, 검은색 동물이 조금 더 뚜렷한 관찰이 가능 D Table 2.

Upper/Lower ratio 2.0 ± 0.4 1.5 ± 0.2 1.7 ± 0.3 1.7 ± 0.2 1.7 ± 0.2 0.

3 - 이현규 외 : 실험동물 간의 마이봄샘 비교 - 결 하였다(Fig. 2). 이렇듯 모든 동물에서 윗눈꺼풀의 마이봄 과 샘이 보다 더 길고 관찰하기 더 용이하였다. 동물 간 비교 먼저 마이봄샘촬영을 시행한 검사결과 중 생쥐의 결과 를 위해 윗눈꺼풀의 마이봄샘의 길이와 아랫눈꺼풀의 마 를 보면, 모두 마이봄샘을 촬영할 수 있었지만 검은색 생 이봄샘의 길이의 비율을 측정한 결과 각 동물 간에 통계 쥐에서 조금 더 분명하게 관찰할 수 있었다(Fig. 2). 또한 적으로 유의한 차이는 없었다(Table 2). 윗눈꺼풀보다 아랫눈꺼풀에서 마이봄샘이 조금 더 길게 관찰이 되었음을 확인하였다. 다음으로 쥐의 경우, 흰색 동물만을 이용하여 검사를 시행하였기 때문에 검은색 및 흰색 간의 비교는 하지 못하였지만 마이봄샘을 촬영하는 것에는 무리가 없었다. 마지막으로 토끼에서는 생쥐, 쥐와 비교하여 검은색 및 흰색 동물 모두에서 마이봄샘의 촬영 이 수월하게 진행되었으며, 마이봄샘의 용적과 모양 모두 만족스러운 결과를 보였다. 또한 검은색과 흰색 동물을 비 교하였을 때, 검은색 동물이 조금 더 뚜렷한 관찰이 가능 D Table 2. Ratio of upper meibomian gland length to lower meibomian gland length in mouse, rat and rabbit Upper/Lower ratio 2.0 ± ± ± ± ± lack mouse White mouse lack rat lack rabbit White rabbit p-value Values are presented as mean ± SD unless otherwise indicated. C E Figure 2. M eibographic images of upper and lower eyelids using M eiboviewer for animal experiments. lack mice (), white mice (), white rat (C), black rabbit (D), and white rabbit (E). 11

- 대한안과학회지 2018년 제 59 권 제 1 호 - H&E 염색을 이용한 조직학적 검사에서, 세 동물의 마 만 생쥐에서는 중심관의 상피세포가 명확히 관찰되지 않 이봄샘의 모양을 보면 토끼가 중심관 및 주변 세엽세포 았다(Fig. 3). 중심관의 장축직경을 측정한 결과, 토끼군에 등의 구조물이 다른 동물에 비해 균일하게 배열되어 관찰 서 평균 129.

또한 쥐와 토끼에서는 관의 상피세포가 관찰되었지 한 결과, 토끼군에서 평균 47257.7 μm2, 생쥐군에서 평균 Figure 3. Histologic results of meibomian gland.

4 - 대한안과학회지 2018년 제 59 권 제 1 호 - H&E 염색을 이용한 조직학적 검사에서, 세 동물의 마 만 생쥐에서는 중심관의 상피세포가 명확히 관찰되지 않 이봄샘의 모양을 보면 토끼가 중심관 및 주변 세엽세포 았다(Fig. 3). 중심관의 장축직경을 측정한 결과, 토끼군에 등의 구조물이 다른 동물에 비해 균일하게 배열되어 관찰 서 평균 μm로 가장 길게 측정되었으며, 생쥐군에서 이 되었다(Fig. 3). 확대한 사진에서 보면, 세 동물 모두 중 평균 19.1 μm로 가장 짧게 측정되었고 이는 통계적으로 심관 및 주변 세엽세포의 구조를 파악하기에는 무리가 없 유의하였다(Table 3). 중심관 및 세엽세포의 면적을 측정 었다. 또한 쥐와 토끼에서는 관의 상피세포가 관찰되었지 한 결과, 토끼군에서 평균 μm2, 생쥐군에서 평균 Figure 3. Histologic results of meibomian gland. The structures such as the central duct and the surrounding lobules of the rabbit were observed more uniformly than the other animals. In rats and rabbits, ductal epithelial cells were observed, but in the mouse, epithelial cells of the central duct were not clearly observed (Upper: mouse, M iddle: rat, Lower: rabbit) (Hematoxylin and Eosin [H&E] stain, : 40, : 200). Table 3. Central duct, acinar area and central duct diameter in mouse, rat and rabbit Duct diameter (μm) Mouse 19.1 ± 2.3 Rat 65.8 ± 25.2 Rabbit ± 21.6 * <0.05 p-value Values are presented as mean ± SD unless otherwise indicated. * nalysis of variance (NOV). 12 Duct & acinar area (μm2) 2,011.7 ± 1, ,785.3 ± 20, ,275.7 ± 18,959.0 <0.05

- 이현규 외 : 실험동물 간의 마이봄샘 비교 2 2,011.7 μm 로 중심관의 직경결과와 동일한 양상의 결과 추가로 마이봄샘을 가로면과 시상면으로 잘라 어떤 차 를 보였고 통계적으로 유의한 결과를 보였으나 생쥐와 쥐 이점이 있는지 확인해 보았다. 시상면에서는 마이봄샘의 간에는 유의한 차이를 보이지 않았다(p=0.108, Table 3).

또한 CK 5, 6 (Fig. 5). 모두 중심관 상피세포의 염색 여부를 파악하기가 어려웠 다(Fig. 4). 그러나 쥐에서는 CK 5는 관의 상피세포와 고 찰 세엽세포에 염색되는 것이 뚜렷이 관찰되었고 CK 6는 관 의 상피세포에 국한되어 염색되는 차이를 보였다(Fig. 사람의 마이봄샘의 구조에는 윗눈꺼풀과 아랫눈꺼풀 4).

In the case of mouse, the size of the lobules and the central ducts was small, so that the difference between CK 5 and CK 6 was not apparent ().

5 - 이현규 외 : 실험동물 간의 마이봄샘 비교 2 2,011.7 μm 로 중심관의 직경결과와 동일한 양상의 결과 추가로 마이봄샘을 가로면과 시상면으로 잘라 어떤 차 를 보였고 통계적으로 유의한 결과를 보였으나 생쥐와 쥐 이점이 있는지 확인해 보았다. 시상면에서는 마이봄샘의 간에는 유의한 차이를 보이지 않았다(p=0.108, Table 3). 전체를 볼 수 있었고, 가로면으로 자르는 경우엔 국소적인 CK 5, 6에 대한 면역조직화학염색결과, 생쥐의 경우 마 부분만 관찰 가능한 측면이 있었으나 시상면에 비해 중심 이봄샘의 세엽과 중심관의 크기가 작아 CK 5와 CK 6의 관과 주변의 세엽세포를 좀 더 자세히 확인할 수 있었다 차이가 뚜렷이 나타나지 않았다(Fig. 4). 또한 CK 5, 6 (Fig. 5). 모두 중심관 상피세포의 염색 여부를 파악하기가 어려웠 다(Fig. 4). 그러나 쥐에서는 CK 5는 관의 상피세포와 고 찰 세엽세포에 염색되는 것이 뚜렷이 관찰되었고 CK 6는 관 의 상피세포에 국한되어 염색되는 차이를 보였다(Fig. 사람의 마이봄샘의 구조에는 윗눈꺼풀과 아랫눈꺼풀 4). 토끼에서는 CK 5와 CK 6의 차이를 가장 선명하게 사이에 차이점이 존재한다. 윗눈꺼풀의 마이봄샘은 평균 확인할 수 있었다(Fig. 4C). 31개, 5.5 mm의 길이로 존재하며, 아랫눈꺼풀의 마이봄샘 15 C Figure 4. Immunohistochemistry results of meibomian gland (CK 5, CK 6). In the case of mouse, the size of the lobules and the central ducts was small, so that the difference between CK 5 and CK 6 was not apparent (). In addition, it was difficult to determine whether the central duct epithelial cells were stained in both CK 5 and CK 6 (). However, in rats, CK 5 was stained in the epithelium and lobules of the duct, and CK 6 was stained only in the ductal epithelial cells (). In rabbits, the difference between CK 5 and CK 6 was most obvious (C) (: M ouse, : Rat, C: Rabbit) (Left: CK 5, Right: CK 6, 100). 13

- 대한안과학회지 2018 년제 59 권제 1 호 - 은평균 26개, 2 mm의길이로존재한다. 15 마이봄샘의용적측면에서보면, 윗눈꺼풀의용적이아랫눈꺼풀의용적보다약 2배로큰것으로알려져있다. 15 마이봄샘기능부전및안구건조증의병태생리, 치료효과등을알아보기위하여생쥐, 쥐, 토끼, 원숭이등의다양한동물모델들을통해그동안여러연구들이진행되었다.

사람의마이봄샘은윗눈꺼풀에위치한것이아랫눈꺼풀에위치한것보다샘의수도많으며, 길이도긴것이특징이라고볼수있는데, 15 본연구에서진행한세동물에서측정한마이봄샘길이의비율을측정한결과상윗눈꺼풀의마이봄샘이아랫눈꺼풀의마이봄샘보다길고관찰하기용이하였다. 그러나동물간에윗눈꺼풀의마이봄샘과아랫눈꺼풀의마이봄샘비율은유의한차이를보이지않았다.

6 - 대한안과학회지 2018 년제 59 권제 1 호 - 은평균 26개, 2 mm의길이로존재한다. 15 마이봄샘의용적측면에서보면, 윗눈꺼풀의용적이아랫눈꺼풀의용적보다약 2배로큰것으로알려져있다. 15 마이봄샘기능부전및안구건조증의병태생리, 치료효과등을알아보기위하여생쥐, 쥐, 토끼, 원숭이등의다양한동물모델들을통해그동안여러연구들이진행되었다. 본연구에서는동물들을살아있는상태에서마이봄샘촬영을시행하여그결과를비교하였고, 동물별마이봄샘구조와면역조직화학적구조의차이를분석하였으며, 동물실험연구모델로어떠한동물이가장이상적인지찾아보았다. 사람의마이봄샘은윗눈꺼풀에위치한것이아랫눈꺼풀에위치한것보다샘의수도많으며, 길이도긴것이특징이라고볼수있는데, 15 본연구에서진행한세동물에서측정한마이봄샘길이의비율을측정한결과상윗눈꺼풀의마이봄샘이아랫눈꺼풀의마이봄샘보다길고관찰하기용이하였다. 그러나동물간에윗눈꺼풀의마이봄샘과아랫눈꺼풀의마이봄샘비율은유의한차이를보이지않았다. 또한본연구에서는동물간의결과차이뿐만아니라, 같은동물내에서검은색과흰색동물간의결과차이도분석을하였다. 그결과, 흰색동물에비해검은색동물의마이봄샘이더뚜렷하게관찰할수있는차이점이있었다. 이를통해마이봄샘촬영을시행하는동물실험을 시행하는경우검은색동물로실험을진행하는것이결과차이를볼때좀더용이할것으로생각된다. 마이봄샘의조직학적인면을비교하였을때, 중심관의직경, 중심관및세엽세포의면적모두토끼가가장크게측정되었으며, 생쥐가가장작게측정되었다. 이것은조직학적구조를관찰하여연구할때마이봄샘용적이큰토끼로연구하는것이변화를관찰하기에용이하다는것을의미한다. 마이봄샘의조직학적구조를확인할때시상면으로잘라관찰하는경우와가로면으로잘라관찰하는경우에나타나는구조가다르게되는것이일반적이다. 본연구에서는병리학적결과를확인할때어떠한단면으로자르는것이구조를확인하기에알맞은방법인지알아보기위해토끼를이용하여눈꺼풀의정중앙부위에단면을달리하여조직학적결과를보았을때나타나는차이에대하여알아보았다. 마이봄샘을시상면으로자르는경우, 마이봄샘의전체를볼수있는장점이있으나, 자르는위치에따라나타나는구조에차이가있어관의구조를확인하지못할때가있는단점이있다. 반면가로면으로잘라마이봄샘을확인하면자르는일부위치에해당하는부분만관찰가능하나, 중심관과주변의세엽세포의관계를조금더분명하게알수있었다 (Fig. 5). CK 5, 6에대한면역염색으로마이봄샘의조직학적구 Figure 5. Structures of meibomian glands in different section. In sagittal section (), although there is an advantage of observing the entire meibomian gland, there is a disadvantage in that it cannot confirm the structure of the gland structure because there is difference in the structure depending on the cutting position. On the other hand, in Transverse section (), only the portion corresponding to the cutting position can be observed, but the relationship between the central tube and the surrounding lobules could be seen more clearly (: Sagittal section, : Transverse section, Hematoxylin and Eosin [H&E] stain, 40). 14

7 - 이현규외 : 실험동물간의마이봄샘비교 - 조를확인할수있었다. CK 5의경우세엽세포와중심관의상피세포를함께염색하고, CK 6의경우중심관의상피세포만을염색하는것이특징인데, 본연구에서도이와비슷하게 CK 5의경우마이봄샘의세엽세포와관의구조를함께염색하고, CK 6는관의구조만을염색하여마이봄샘기능부전등의원인이되는과각질화를확인하는데도움이된다고생각한다. 다만, 생쥐에서는관의상피세포의염색이뚜렷하게되지않아쥐와토끼에서비교적더쉽게파악할수있을것이라고생각한다. 면역조직화학적염색을추가로시행하는것이중심관, 주변세엽세포를염색하여이상소견을확인하기에도움을줄수있을것이라생각한다. 다만 utovich et al 16 에따르면, 토끼의경우사람과마이봄샘의성분, 조성이달라토끼를통해서눈물조성이나눈물의화학적조성에대한연구를하기에는부적합하다고한바있다. 그러나본연구에서는성분조성에대한연구보다는구조적인측면에서다룬것이기때문에이부분에대해서는추가연구가필요하다고본다. 실험동물의마이봄샘구조를관찰할수있는마이봄샘촬영장비를통해마이봄샘기능부전이나안구건조증동물실험에서마이봄샘구조를순차적으로평가하는것이가능하게되었다. 정확한촬영을위한다면사람과검은색토끼를선택하는것이적합하다고보여지며, 추가적으로해부학적구조를파악할때가로면으로잘라서관찰하는것이마이봄샘의구조나주변구조물의이상유무를파악하기에적합하다고생각한다. 또한면역조직화학염색을통해관의상피세포와세엽세포를염색, 확인하여이상소견을확인하는데도움이될것이라고생각된다. REFERENCES 1) Jester JV, Rife L, Nii D, et al. In vivo biomicroscopy and photography of meibomian glands in a rabbit model of meibomian gland dysfunction. Invest Ophthalmol Vis Sci 1982;22: ) aum JL. iomicroscopic study of the glands of meibomius: by R. Tapie. nn Ocul 210: , Surv Ophthalmol 1979;23: ) Killey FP, Minckler DS, Smith RE, Spencer J. The effect of long term epinephrine in the rabbit eye. In RVO bstracts. Invest Ophthalmol Vis Sci 1980;19:253. 4) Luna LG. Manual of Histologic Staining Methods of the rmed Forces Institute of Pathology, 3rd ed. New York: McGraw-Hill ook Co. Inc., 1968; 82. 5) Jester JV, Nicolaides N, Smith RE. Meibomian gland studies: histologic and ultrastructural investigations. Invest Ophthalmol Vis Sci 1981;20: ) McCulley JP, Sciallis GF. Meibomian keratoconjunctivitis. m J Ophthalmol 1977;84: ) Nicolaides N, Kaitaranta JK, Rawdah TN, et al. Meibomian gland studies: comparison of steer and human lipids. Invest Ophthalmol Vis Sci 1981;20: ) Ehlers N. The precorneal film. iomicroscopical, histologic, and chemical investigations. cta Ophthol Suppl 1965;SUPPL 81: ) Jester JV, Nicolaides N, Kiss-Palvolgyi I, Smith RE. Meibomian gland dysfunction. II. The Role of Kerarinizarion in a rabbit model of MGD. Invest Ophthalmol Vis Sci 1989;30: ) Jester JV, Rajagopalan S, Rodrigues M. Meibomian gland changes in the rhino (hrrhhrrh) mouse. Invest Ophthalmol Vis Sci 1988; 29: ) Mann SJ. Hair loss and cyst formation in hairless and rhino mutant mice. nat Rec 1971;170: ) Davies RE, ustin W, Logani MK. The rhino mutant mouse as an experimental tool. Trans N Y cad Sci 1971;33: ) Ohnishi Y, Kohno T. Polycholorinated biphenyl poisoning in monkey eye. Invest Ophthalmol Vis Sci 1979;18: ) Gutgesell VJ, Stern G, Hood CI. Histopathology of meibomian gland dysfunction. m J Ophthalmol 1982;94: ) Kim JH, Ro JW, Yi K, et al. Changes of the meibomian gland according to age in the normal Korean population. J Korean Ophthalmol Soc 2015;56: ) utovich I, Lu H, McMahon, Eule JC. Toward an animal model of the human tear film: biochemical comparison of the mouse, canine, rabbit, and human meibomian lipidomes. Invest Ophthalmol Vis Sci 2012;53:

8 - 대한안과학회지 2018 년제 59 권제 1 호 - = 국문초록 = 다양한실험동물에서의마이봄샘촬영및면역조직화학적구조관찰 목적 : 동물실험에대표적으로사용되고있는생쥐, 쥐, 토끼의마이봄샘촬영소견및면역조직화학적구조를비교하여동물별결과의차이를파악하였다. 대상과방법 : 각각다섯마리의, 검은색및흰색으로구분한생쥐, 쥐, 토끼의윗눈꺼풀과아랫눈꺼풀의마이봄샘을촬영하였으며, 마이봄샘의촬영은동물실험용마이봄샘촬영장비를이용하였다. 촬영한결과를토대로윗눈꺼풀과아랫눈꺼풀의마이봄샘길이의비율을측정하였다. 이후눈꺼풀조직을적출하여눈꺼풀의정중앙부분을가로면과시상면으로잘라 Hematoxylin and Eosin (H&E) stain 및면역조직화학염색을하여조직학적구조를비교하였다. 또한마이봄샘중심관의직경과중심관과주변세엽세포를포함한면적을측정하여비교하였다. 결과 : 동물간의마이봄샘촬영결과를비교해본결과, 검은색토끼가가장뚜렷하게관찰되었다. 윗눈꺼풀과아랫눈꺼풀의마이봄샘길이의비율을비교한결과동물간통계적으로의미있는차이는보이지않았다. 마이봄샘의조직학적구조는세동물모두관찰이가능하였으나생쥐에서중심관의상피세포가분명히관찰되지않았다. 마이봄샘을시상면으로자르는경우와비교하여, 가로면으로잘랐을때중심관의크기와주변의세엽세포의관계를더분명하게알수있었다. 중심관의직경을측정한결과토끼, 쥐, 생쥐순으로크게측정되었고이는통계적으로유의하였으며, 중심관및주변세엽세포를포함하여측정한면적은토끼가가장크게측정되었고, 쥐, 생쥐순으로크게측정되었지만쥐와생쥐와의크기차이는통계적으로유의하지않았다. 면역조직화학염색을통한결과는세동물모두에서 Cytokeratin 5 (CK 5) 에서는중심관의상피세포와주변세엽세포, Cytokeratin 6 (CK 6) 에서는중심관의상피세포만을염색하는특징이있었다. 결론 : 실험동물이클수록마이봄샘의크기가크고실험동물의색이검은경우대조효과로흰색동물보다마이봄샘의관찰이용이하여마이봄샘의정확한촬영에는검은색토끼가가장적합하였다. 마이봄샘을시상면으로자르는경우와비교하여, 가로면으로잘랐을때중심관의크기와주변의세엽세포의관계를더분명하게알수있었다. < 대한안과학회지 2018;59(1):9-16> 16

<283732372D3733312920B4D9C3CAC1A120BCD2C7C1C6AEC4DCC5C3C6AEB7BBC1EEC0C720B3EBBEC8C0C720BDC3B7C2BAB8C1A4BFA120B4EBC7D120C0AFBFEBBCBA20C6F2B0A1283035292E687770>

<283732372D3733312920B4D9C3CAC1A120BCD2C7C1C6AEC4DCC5C3C6AEB7BBC1EEC0C720B3EBBEC8C0C720BDC3B7C2BAB8C1A4BFA120B4EBC7D120C0AFBFEBBCBA20C6F2B0A1283035292E687770> 대한안과학회지 제 49 권 제 5 호 2008 J Korean Ophthalmol Soc 49(5):727-731, 2008 DOI : 10.3341/jkos.2008.49.5.727 다초점 소프트콘택트렌즈의 노안의 시력보정에 대한 유용성 평가 김현경 1 김효명 2 정성근 1 가톨릭대학교 의과대학 성모병원 안과학교실 1, 고려대학교 의과대학 안암병원 안과학교실