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원주 염
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1 Biomaterials Research (2012) 16(1) : Biomaterials Research C The Korean Society for Biomaterials 록소프로펜이함유된경피패치의제조및평가 Preparation and Evaluation of Transdermal Patch Containing Loxopropen sodium 하승우 1,2 김수지 1 윤지영 1,3 박영택 5 서중기 5 박은석 3 육순홍 4 신병철 1 조선행 1 * Seung Woo Ha 1,2, Suji Kim 1, Ji Young Yoon 1,3, Yeong Taek Park 5, Jung Ki Seo 5, Eun Suk Park 3, Soon Hong Yuk 4, Byung Cheol Shin 1, and Sun Hang Cho 1 * 1 한국화학연구원대사증후군치료제연구그룹, 2 과학기술연합대학교대학원, 3 성균관대학교약학대학 4 고려대학교약학대학, 5 대화제약 1 Metabolic Syndrome Therapeutics Research Group, Korea research institute of chemical technology, 141, Gajeong-ro, Yuseong-gu, Daejeon , Korea 2 Medical and Phamaceutical Chemistry, University of science and technology, 217 Gajeong-ro, Yuseong-gu, Daejeon , Korea 3 School of Parmacy, University of SungKyunKwan, Suwon , Korea 4 College of Pharmacy, Korea University, Jochiwon, Yeongi, Chungnam , Korea 5 DAE HWA Pharmaceutical Co.,Ltd. 907, Sangsin-ri, Hyangnam-eup, Hwaseong-si, Kyunggi-do, Korea (Received December 20, 2011/Acccepted February 8, 2012) Loxoprofen sodium[sodium (±)-2-[4-(2-oxocyclopentylmethyl)phenyl]propionate] is non-steroidal anti-inflammatory drug in the propionic acid derivatives group. To develop a novel transdermal drug delivery system of loxoprofen sodium, the effects of various vehicles and penetration enhancers on the skin permeation of loxoprofen sodium from solution formulations were investigated. The permeation rate of loxoprefen sodium through excised Sprague-Dawley rat skin was measured using a franz diffusion cell and keshary-chien diffusion cell at 32 ± 0.5 o C. The solubilities of loxoprofen sodium in various vehicle for enhancer were determined by the equilibrium solubility method. The solubility of loxoprofen increased in the rank order of tween80 > labrasol > tween20 > cremophor > lauroglycol90 > capryol90. In addition, transdermal patch containing loxoprofen sodium provides continuous drug delivery over 24 hours and similar efficacy to the highest recommended dose of oral route drug with improved tolerability. Key words: Loxoprofen sodium, Transdermal drug delivery, Patch, Permeation 록 서 소프로펜나트륨 [sodium (±)-2-[4-(2-oxocyclopentylmethyl) phenyl]propionate] 은 2-phenyl-propionate계비스테로이드성항염증제 (Nonsteroidal antiinflammatory drugs, NSAIDs) 이다. 1) 록소프로펜나트륨은주로만성관절류마티스, 변형성관절증, 요통, 견관절주위염, 경견완증후군, 발치후, 외상후및수술후의소염진통에주로사용되며비교적다른 NSAIDs약물보다위장장애와위궤양발생이다소낮으며소염진통제로알려진케토프로펜보다진통작용이 10-20배정도높은것으로보고되는강력한항염증진통효과를나타내는약물이다. 2-5) 하지만이약물은경구투여후미변화체는 30분후에, 대사체는 1~1.5시간후에최고혈중농도에도달하며혈중소실반감기는미변화체 1.2시간, 대사체 2.1시간으로반감기가매우짧고장기복용시위장장애등부작용을일으키며 * 책임연락저자 : shcho@krict.re.kr 론 1일 3회의경구투여로환자의복용순응도가매우낮은단점이있다. 6,7) 경피약물전달시스템 (Transdermal drug delivery system, TDDS) 을사용하여경구투여시의단점을개선하고국소마취제, 국소진통제및국소소염진통제로써직접환부에적용하기위하여패치제를개발하였다. 소염진통약물의경피흡수제제는케토프로펜, 인도메타신, 플루르비프로펜, 피록시캄등이개발되어왔다. 경피흡수제제는피부를통해근육, 관절부위등에소염, 진통효과를발휘하는데충분한농도로침투시킴으로써적용부위약물농도에비해전신순환혈중의약물농도상승을낮춰주어위장장애뿐만아니라전신부작용을경감시킬수있다. 7) 또한피부를통한지속적인약물침투로국소염증부위의약물농도를연속적으로일정하게유지함으로써국소부위의유효혈중농도의변동을줄일수있고지속적인소염진통효과를기대할수있다. 8-11) 본연구에서는비스테로이드성소염진통제인록소프로펜나트륨의경피흡수제제개발을목적으로하였다. 인체에서가장 19

2 20 하승우 김수지 윤지영 박영택 서중기 박은석 육순홍 신병철 조선행 큰기관으로외부물질에매우낮은투과성을나타내는피부에화학적투과촉진제 (Chemical penetration enhancers, CPEs) 를이용하여적은양의약물로약물전달을촉진시키며위장관에서는불활성체로흡수되고환부에서는활성대사체로작용할수있으며혈중약물농도를장시간유지할수있도록설계하였다. 12,13) 이를 diffusion cell 과 Sprague-Dawley rat skin 을이용하여피부투과및족부종실험을하여평가하였다. 재료및실험방법 시약및기기록소프로펜나트륨은 Daiichi Sankyo(Japan) 에서구입하였다. 피부투과촉진제로사용된 Oleic acid, Lauroglycol 90, Labrafil CS 1994, Labrafil M2125, Capryol 90, Labrafac lipophile, Labrasol, Peceol은 Masung Co.(South Korea) 에서구입하였고 Isopropyl mirystate (IPM) 는 Sigma Chemical Co.(USA) 에서제공받아사용하였다. Tween80, Tween20, Span83은 Junsei Chem. Co.(Japan), Plurol isostearique, Cremophor는 BASF (Germany), PG, DPG, Transcutol, Urea, Poloxamer, Diisopropylamine, Polyacrylic acid sodium은 Nihon Junyaku Co., Ltd(Japan) 에서구입하였다. 아크릴계접착제 (Gelva) 는 Solutia(USA) 에서구입하였다. 또한대조약인록소닌카타플라스마는 Daiichi Sankyo(Japan) 에서구입하였다. 이외의모든시약은특급또는일급을사용하였고, 실험에사용한모든완충액은 Milli Q (Millipore Co., U.S.A) 에 18.2 MΩ-cm로통과시켜제조한증류수를사용하여제조하였다. 본실험에사용한 HPLC는용매펌프 (NS-3000i, Futecs Co., Ltd, Korea) 와자동샘플인젝터 (NS-5000A, Futecs Co., Ltd, Korea) 로구성되어있고, 데이터를처리하기위한시스템은멀티크로2000(V. 4.2) 을사용하였고, UV검출기는 UV-3000i(Futecs Co., Ltd, Korea) 를사용하였다. 록소프로펜의정량록소프로펜의농도는펌프, UV/VIS 검출기, 자동샘플인젝터, 프로그램으로이루어진 HPLC를이용하여분석하였다. 이때분석조건은컬럼 Fluofix (4.6 mm 250 mm, C 18 (Neos, Japan)) 을사용하였으며, 이동상은 Methanol/Aqueous buffer (citric acid g, disodium hydrogen phosphate 21.4 g, methanol 2000 ml) 의비가 45/55(v/v) 인혼합용액을사용하여 0.45 µm 크기의필터로여과한후초음파분쇄기로사용하여탈기를시켜사용하였다. UV파장은 254 nm로검출하였고이동상의유속은 0.8 ml/min, 시료주입량은 20 µl로설정하여측정하였다. 록소프로펜용해도시험약물의피부투과에있어서기제에대한약물의용해도가중요한인자로작용하므로사용가능한기제에대한록소프로펜나트륨의용해도를측정하였다. 록소프로펜나트륨 0.05 g 을유리시험관에넣고용해보조제를각각 1.0 g 넣은후 37 o C Figure 1. (A) Chemical structure of loxoprofen, (B) Preparation method of single-layer patch. shaking incubator 에서 48 시간동안포화시킨다. 그후원심분리 (10000rpm, 5min) 를하고필터 (0.45 µm, Whatman, USA) 로여과한후그여액을 HPLC 분석에사용한이동상을희석하여각기제중용해된록소프로펜나트륨의양을 HPLC 를사용하여정량하였다. 록소프로펜패치제조록소프로펜나트륨의구조와약물이함유된패치의제조과정은 Figure 1 에나타내었다. 록소프로펜나트륨의무게를달아피부투과촉진제 (Oleic acid(oa), Isopropyl mirystate(ipm), Lauroglycol 90(LG 90), Labrafil 1994 CS, Tween 80) 에녹이고접착제용액과고르게섞은후실리콘처리된박리지 (ScorchPak 1022, 3M, U.S.A) 위에 8cm 넓이로도포될수있게특수제작된 Laboratory-coating unit(mathis labcoater LTE-S(M), Switzerland) 을이용하여도포하였다. Casting 시두께의조절은 thickness knife 를이용하여조절하였고, 도포물은 100 o C 로맞춰진건조기에서 2 분간건조시킨후, 지지체 (ScotchPak 9732, 3M, U.S.A) 를부착하여제조하였다. In vitro 약물방출실험약물방출시험을위한동물모델은 5 마리를 1 군으로체중 250~280 g 의 SD-rat(6 주령, female) 을샘타코 (Samtako, Korea) Biomaterials Research 2012

3 록소프로펜이함유된경피패치의제조및평가 21 에서구입하여 3 일간순화시켜사용하였다. 실험모델을경추탈구방법으로희생시키고각질층이손상되지않도록피하지방, 조직및혈관등불필요한부분을제거하였다. 이피부를사용하기전까지 70 o C 에서보관하였으며실험전에해동하여사용하였다. 적출한피부를실험전에 0.5 w% NaCl 등장액에등장시킨후제조한패치를붙이고 cell 내에완충용액을 12.5 ml 채운후 37 o C 의 incubator 에넣는다. sampling 은주사기로 cell 내의완충용액전부를채취하였다. sampling 채취는 1, 2, 4, 6, 8, 10 및 12 시간으로하였고채취할때마다완충용액으로채워주었다. Franz diffusion cell 및 Keshary-Chien diffusion cell (Crown Glass Co., Ltd., USA) 에 ph 7.4 인산염완충액 (phosphate buffered saline) 을넣고온도를 37 ± 0.5 o C 로유지하면서 600 rpm 으로교반하였다. Receptor compartment 와접촉하는피부의면적은 7.67 cm 2, cm 2 이었고용량은 12.5 ml 이었다. 12 시간동안분석시료를채취후냉장보관하였다가 12 시간내에 HPLC 로분석하였다. 록소프로펜의혈중약물농도시험 Plasma standard sample 제조 Stock solution (10~10000 ng/ml) 을 1 ml 에혈장 100 ng/ml 을첨가하고 vortexing 후내부표준물질용액 ( 케토프로펜용액, 50 ug/ml) 120 ug 과 10% ZnSO 4 20 ul 을가하여잘섞어준후 rpm 에서 5 분간원심분리하여상층액을얻어 HPLC 로분석하였다. 경구및경피투여각 5 마리의 SD-rat 을실험전 15 시간절식후, 록소프로펜나트륨 30 mg/kg 농도로경구투여하였고, 패치제의경우 30 mg/70 cm 2 을제모한등부위에부착하여혈중프로파일을보았다. 채혈은경구투여후 5, 15, 30, 45, 60, 120, 240, 360 분의 8 시점으로하였고, 패치제의경우 30, 60, 180, 240, 360, 480, 600, 720 분에수행하였다. 채혈량은 0.3 ml 이었으며, 채혈후 heparin-na 용액 (50 unit/ml) 을 0.2 ml 보충하였다. 채취한혈액은즉시 rpm 에서 5 분간원심분리하여혈장을분리하고분석할때까지 20 o C 에서냉동보관하였다. 록소프로펜용출시험제조된록소프로펜패치 6 매를 41.2 mm 의원으로정확하게잘라, 미국약전 <724> Drug release 의경피약물전달시스템의 paddle over disk 시험법을이용하여 disk assembly 에부착하였다. 용출액으로는 ph 7.4 인산염완충용액을사용하였으며, 시험온도는 32(± 0.5) o C, 패들의회전속도는 50 rpm 으로하였다. 샘플채취시시험액을 1ml 취해서시험용액으로하고시험용액채취후 ph 7.4 인산염완충액을 1ml 씩넣어주었다. 족부종시험족부종측정은 plethysmommeter 를이용하여 2 회반복측정하여평균치를기록하였으며수치단위는 cc 를사용하였다. 동 물은체중 250~280 g 내외의 SD-rat 을각 5 마리를사용하였고 12 시간동안절식시켰다. 털을제거한발목에 2 4cm 의넓이의패치를 3 시간동안부착한후제거한다. 발목부위에기준선을그어준후기준선까지의초기부피를측정하고즉시 1% Carrageenan 용액을 0.1 ml 피하주사하고각각의제제부착후부종유발 3 시간후에제제를제거한뒤부피를측정하였다. 다음식으로족부종률 (%, swelling) 을구하였다. 족부종율 (%) = [(V V 1 )/V 1 ]*100 (V: 3 시간후의발부피, V 1 : 주사직후발부피 ) 족부종억제율 (%, inhibition) 은다음의식을이용하여산출하였다. 부종억제율 (%) = [1 ( 시험군의족부종률 / 대조군의족부종률 )] *100 결과및고찰 록소프로펜용해도시험록소프로펜에대한용해도를측정하여그결과를 Table 1 에나타내었다. 록소프로펜의용해도는 Tween 80 과 Labrasol 에서높은반면, Labrafac cc, Plurol isostearique, Labrafac lipophile, Span 83 에서낮은용해도를보였다. 또한, 점착제중에서는 Gelva 3083 이가장좋은용해도를나타내었다. 이에대한록소프로펜의피부투과에대한영향을확인하였다. In vitro 피부투과촉진제및용량별경피투과경향 Oleic acid(oa) 의함량이 5%, 10% 및 20% 인패치의경피투과결과를 Figure 2(A) 에나타내었다. 그림에서보는바와같이 OA 의양에비례하여 enhancing effect 가있음을알수있었다. 피부투과촉진제를첨가하지않은 PSA 패치는 OA 의함량이 5% 일때와큰차이가없었으나 10% 및 20% 일때는그누적양이각 210 µg/cm 2 및 400 µg/cm 2 로각각약 2 배및 4 배로증가되었음을알수있었다. Isopropyl mirystate(ipm) 의함량이 5%, 10% 및 20% 인패 Table 1. Solubitlity of loxoprofen sodium Enhancer Solubility(mg/g) Purol oleique 5.75 Lauroglycol Labrafil M1944cs 5.87 Labrafac cc 2.58 Cremophor Lavrafil M Plurol isostearique 1.96 Tween Labrasol Tween Peceol 7.21 Span Labrafac lipophile 2.71 Capryol Vol. 16, No. 1

4 22 하승우 김수지 윤지영 박영택 서중기 박은석 육순홍 신병철 조선행 Figure 2. Transdermal penetration trend by chemical penetration enhancers concentrations (A) Oleic acid, (B) IPM, (C) LG90, (D) Labrafil 1994 CS, (E) Tween 80. Each point represents the mean ± S.D. of five determinations. 치의경피투과결과를 Figure 2(B) 에나타내었다. Figure 2(B) 에서, 피부투과촉진제를넣지않을때보다는 enhancing effect가있었으나, IPM 10% 일때 500 µg/cm 2, 20% 일때 550 µg/ cm 2 로서 10% 이상함유할때는 enhancing effect가크지않음을알수있었다. 그러나, 피부투과촉진제를 5% 함유하고있는제제는피부투과촉진제를함유하고있지않은제제보다 3.5배증가되었고, 20% 함유하고있는제제는 7.5배증가함을알수있었다. Lauroglycol 90(LG 90) 의함량을 5%, 10% 및 20% 로한경피시험결과인 Figure 2(C) 에서볼수있듯이, LG 90의 enhancing effect는있으나, 피부투과촉진제가어느정도이상의양이함유되어야효과가있음을알수있었다. 초기 2시간방출때부터 LG 90을 20% 함유하고있는제제가더높은투과도를나타내었다. 피부투과촉진제를함유하지않은제제의피부투과율은 80 µg/cm 2 이었지만, 5% 함유하고있을때는 150 µg/cm 2 로약 2배정도증가했음을알수있었고, 20% 을함유하고있을때는 260 µg/cm 2 로피부투과촉진제를함유하지 않은제제보다 3배정도증가함을알수있었다. Labrafil 1994 CS의함량을 5%, 10% 및 20% 로한경피제제의경피투과결과인 Figure 2(D) 에서, 5% 일때와피부투과촉진제를넣지않았을때와의큰차이가없음을알수있었다. 10% 이상인경우투과속도가 150 µg/cm 2 로피부투과촉진제를넣지않았을때보다 2배의차이로 enhancing effect가있음을알수있었다. 그러나, 20% 함유하고있는제제는 170 µg/ cm 2 로 10% 함유할때와큰차이가없었다. 록소프로펜에대한용해도가가장좋았던 Tween 80의함량을 5%, 10% 및 20% 로한경우 enhancing effect는없었다 (Figure 2(E)). DMSO의함량을각각 1g, 4g 및 6g을첨가한결과를 Figure 3에나타내었다. Figure 3에서볼수있듯이, DMSO의양이 6g, 4g, 1g 순으로좋은투과율을보였다. 24시간까지는 4g과 6g이 60 µg/cm 2 로비슷한방출을보였으나, 48시간에서는 6g 함유한제제가 1.5배높은 250 µg/cm 2 방출을보였다. Biomaterials Research 2012

5 록소프로펜이함유된경피패치의제조및평가 23 Figure 3. Transdermal penetration trend of DMSO. Each point represents the mean ± S.D. of five determinations. Figure 5. Comparative Dissolution test of M.P and loxonin cataplasma in ph 7.4 buffer solution. Each point represents the mean ± S.D. of six determinations. Table 2. Comparative dissolution test in ph 7.4 buffer solution Time(hr) Control(%) M.P(%) ± ± ± ± ± ± 3.20 *Control - loxonin cataplasma, M.P - manufactured patch. Mean ± S.D (n=6) 서로다른결과가나왔다고사료된다. 결과적으로약물의투과도가제일높은 20% IPM 과점착제 Gelva 3083 을사용하여패치를제조하여동물실험에사용하였다. Figure 4. (A) Blood profile of oral administration (30 mg/kg). Each point represents the mean ± S.D. of five determinations, (B) Blood drug concentration of Gelva 3083 and IPM patch (30 mg/70 cm 2 ). Each point represents the mean ± S.D. of five determinations. 피부투과촉진제들이효과를나타내기위해서는일정수준이상의농도가필요하며좀더정확히표현하면충분한열역학적활성도가있어야그효력을나타내는데위의피부투과촉진제들이서로다른피부투과 enhancing effect 를보이는이유로는용해제의 HLB (Hydrophilic Lipophilic Balance) 및옥탄올 / 물분배계수등의요인에의한열역학적활성도가달라져 록소프로펜의혈중약물농도시험경구및경피로투여한약물혈중농도결과를 Figure 4 에나타내었다. 록소프로펜나트륨은경구투여할때급속히흡수되어, 투여후 15 분에최대혈중농도를나타내고말초조직으로빨리분포되는것으로예상할수있었다 (Figure 4(A)). 반면, 패치인경우, 최고혈중농도는약 0.5 µg/ml 이지만, 최고혈중농도가최대 10 시간까지지속됨을알수있었고또한, 경피제지만부착후비교적빠르게흡수됨을알수있었다 (Figure 4(B)). 위의결과에서알수있듯이경구투여보다패치제로만들어투여하는것이더욱효율적으로약물을전달할수있는방법이라고사료된다. 록소프로펜용출시험제조한패치와록소닌카타플라스마모두 1hr, 2hr 및 24 hr 에서 ± 10% 이내의유사한용출율을보였다 (Figure 5, Table 2). 용출율비교를통해알수있듯제조한패치또한대조군과동등한효과를가져온다고볼수있다. 족부종시험제조한패치를록소닌카타플라스마및케토톱첩부제와족부종억제비교시험한결과제조한패치의부종억제율이 30% 이상으로소염진통효과가우수하였고, 또한다른대조약인록소 Vol. 16, No. 1

24 하승우 김수지 윤지영 박영택 서중기 박은석 육순홍 신병철 조선행 펜의과량으로사용할경우에발생하는부작용에대한문제점을해결할수있고환자순응도또한높아질것으로사료된다. 감사의글 본연구는지식경제부바이오의료기기산업원천기술개발사업의연구비지원에의해연구되었으며이에감사를드립니다. 참고문헌 Figure 6.

6 24 하승우 김수지 윤지영 박영택 서중기 박은석 육순홍 신병철 조선행 펜의과량으로사용할경우에발생하는부작용에대한문제점을해결할수있고환자순응도또한높아질것으로사료된다. 감사의글 본연구는지식경제부바이오의료기기산업원천기술개발사업의연구비지원에의해연구되었으며이에감사를드립니다. 참고문헌 Figure 6. The results of SD-rat leg edema inhibition test using manufactured patch of M.P, loxonin cataplasma and ketotop. Each point represents the mean ± S.D. of five determinations. Table 3. The results of SD-rat leg edema inhibition test using manufactured patch Sample ID Edema rate(%) Edema inhibition rate(%) Control 79.7 ± M.P 46.6 ± L.C / Ketotop 48.0 ± *M.P - manufactured patch, L.C - loxonin cataplasma. Mean ± S.D(n = 5) 닌카타플라스마및케토톱보다부종억제효과가우수하였다 (Figure 6, Table 3). 위의결과들로인해제조된패치는탁월한소염진통및부종억제효과를가졌다고여겨진다. 결 본연구에서는실험약물로써통증을완화하는데있어서최근가장빈번히사용되는약물인비스테로이드성록소프로펜패치제제의약물효율이가장우수함을알수있었다. 록소프로펜나트륨은경구투여시급속히흡수되어투여후 15 분에최대혈중농도를나타내고말초조직으로빨리분포되는것으로예상할수있었다. 반면패치로적용하였을때는최고혈중농도는 0.5 ug/ml 내외이지만최대 10 시간까지최고혈중농도가지속됨을보이고있다. 한편패치로적용시경피로흡수시킴에도불구하고투여후비교적빠른흡수속도를보인다. 이러한결과로록소프로펜을경피로투여한다면경구투여보다약효가오래지속될수있고, 경구투여시빠른흡수와높은혈중농도로인해나타날수있는위장관계부작용을방지할수있을것으로예상된다. 이를패치제제형태로제조한다면소염진통뿐아니라관절염치료에탁월한효과를나타내며록소프로 론 1. A. Terada, S. Naruto, K. Wachi, S. Tanaka, Y. Iizuka and E. Misaka, Synthesis and anti-inflammatory activity of [(cysloalkylmethyl) phenyl]acetic acid and related compounds, Journal of Medicinal Chemistry, 27, (1984). 2. T. Amako, N. Takagish, T. Hiruzaki, Y. Sugioka, K. Takagish and K. Suzuki, Evaluation of clinical effect of loxoprofen on cervicobrachial syndrome and perathritis of the shoulder, Rinsho To Kenkuy, 62, (1985). 3. T. Aoki, S. Sugawara, T. Hoshino and M. Yamamoto, Evaluation of elinical effect of loxoprofen on osteoarthritis of the knee, Igaku No Yyumi, 136, (1986). 4. M. Igarashi, N. Ogawa and T. Nobunaga, Double blind evaluation comparing CD-600 (loxoprofen sodium) and indomethacin in the treatment of rheumatoid arthritis, Ryumachi, 25, (1985). 5. E. Misaka, T. Yamaguchi, T. Iizuka, K. Kamoshida, T. Kojima, K. Kobayashi, Y. Endo, Y. Misawa, S. Kobayashi and K. Tanaka, Antiinflammatory antipyretic and analgesic activities of a new antiinflammatory agent: sodium-2[4-(2-oxocyclopentan-1-1-methly) phenyl]propionate dehydrate (CS-600) Pharmacometrics, 21, (1981). 6. R. Denis, S. Myriam, S. Angela, O. Marc, A. M. Joseph and S. L. Chun, Evaluation of loxoprofen and its alcohol metabolites for potency and selectivity of inhibition of cyclooxygenase-2, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 14, (2004). 7. T. S. Kim and I. K. Chun, Formulation and evaluation of loxoprofen plasters, The journal of applied pharmacology, 9, (2001). 8. A. F. Kydonieus, Fundametal of transdermal drug delivery: in transdermal delivery of drugs, CRS Press, 1, 3-28 (1987). 9. R. H. Guy, Current status and future prospects of transdermal drug delivery, Pharmaceutical research, 13, (1996). 10. T. K. Ghosh and W. R. Pfister, Transdermal and topical delivery systems: An overview and future trends: in transdermal and topical drug delivery system, Interpharm press, Inc., 1-32 (1997). 11. Y. M. Chien, Advances in transdermal systemic medication: in transdermal controlled systemic medication, Marcel Dekker. Inc., 1-21 (1987). 12. H. M. Wolff, Optimal process design for the manufacture of transdermal drug delivery systems, Pharmaceutical Science & Technology today, 3, (2000). 13. H. Seo, S. Y. Jeung, J. S. Park, B. C. Shin, S. J. Hwang and S. H. Cho, The effect of enhancer on the penetration of indapamide through hairless mouse skin, Journal of Korean Pharmaceutical Sciences, 37, (2007). Biomaterials Research 2012

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