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12 <110> Super-Bio Co., Ltd. KWON, Suk-Tae <120> Thermostable DNA Polymerase-encoding Gene from Thermus sp. X-1 an d Amino Acid Sequence Deduced Therefrom <130> <160> 5 <170> KOPATIN 1.5 <210> 1 <211> 2694 <212> DNA <213> Thermus sp. X-1 <220> <221> CDS <222> (97)..(2589) <400> 1 aagcttcccg cagaggaaag ggaggctttt tggcaggagc tcagggacct cacccgggga 60 caggtgcgct gggaaggcta gggtagcata agggcg atg ctg ccc ctc ttt 111 Met Leu Pro Leu Phe 1 5 gag ccc aag ggc cgg gtg ctt ctg gtg gac ggc cac cac ctg gcc tac 159 Glu Pro Lys Gly Arg Val Leu Leu Val Asp Gly His His Leu Ala Tyr cgt acc ttt ttt gcc ctg aag ggc ctc acc acc agc cgc ggg gag ccg 207 Arg Thr Phe Phe Ala Leu Lys Gly Leu Thr Thr Ser Arg Gly Glu Pro gtc cag gcg gtg tac ggg ttt gcc aag agc ctt ttg aag gcg cta agg 255 Val Gln Ala Val Tyr Gly Phe Ala Lys Ser Leu Leu Lys Ala Leu Arg gaa gac ggg gat gtg gtg atc gtg gtg ttt gac gcc aag gcc ccc tcc 303 Glu Asp Gly Asp Val Val Ile Val Val Phe Asp Ala Lys Ala Pro Ser ttc cgc cac cag acc tac gag gcc tac aag gcg ggg cgg gct ccc acc 351 Phe Arg His Gln Thr Tyr Glu Ala Tyr Lys Ala Gly Arg Ala Pro Thr

13 ccc gag gac ttt ccc cgg cag ctt gcc ctt atc aag gag atg gtg gac 399 Pro Glu Asp Phe Pro Arg Gln Leu Ala Leu Ile Lys Glu Met Val Asp ctt ttg ggc ctg gag cgc ctc gag gtg ccg ggc ttt gag gcg gat gac 447 Leu Leu Gly Leu Glu Arg Leu Glu Val Pro Gly Phe Glu Ala Asp Asp gtc ctg gct acc ctg gcc aag aag gcg gaa aag gaa ggc tac gag gtg 495 Val Leu Ala Thr Leu Ala Lys Lys Ala Glu Lys Glu Gly Tyr Glu Val cgc atc ctc acc gcg gac cgg gac ctt tac cag ctt ctt tcg gag cga 543 Arg Ile Leu Thr Ala Asp Arg Asp Leu Tyr Gln Leu Leu Ser Glu Arg atc tcc atc ctt cac ccg gag ggt tac ctg atc acc ccg gag tgg ctt 591 Ile Ser Ile Leu His Pro Glu Gly Tyr Leu Ile Thr Pro Glu Trp Leu tgg gag aag tat ggg ctt aag cct tcc cag tgg gtg gac tac cgg gcc 639 Trp Glu Lys Tyr Gly Leu Lys Pro Ser Gln Trp Val Asp Tyr Arg Ala ttg gcc ggg gac cct tcc gac aac atc ccc ggc gtg aag ggc atc ggg 687 Leu Ala Gly Asp Pro Ser Asp Asn Ile Pro Gly Val Lys Gly Ile Gly gag aag acg gcg gcc aag ctg atc cgg gag tgg gga agc ctg gaa aac 735 Glu Lys Thr Ala Ala Lys Leu Ile Arg Glu Trp Gly Ser Leu Glu Asn ctt ctt aag cac ctg gaa cag gtg aaa cct gcc tcc gtg cgg gag aag 783 Leu Leu Lys His Leu Glu Gln Val Lys Pro Ala Ser Val Arg Glu Lys atc ctt agc cac atg gag gac ctc aag cta tcc ctg gag cta tcc cgg 831 Ile Leu Ser His Met Glu Asp Leu Lys Leu Ser Leu Glu Leu Ser Arg gtg cgc acg gac ttg ccc ctt cag gtg gac ttc gcc cgg cgc cgg gag 879 Val Arg Thr Asp Leu Pro Leu Gln Val Asp Phe Ala Arg Arg Arg Glu ccg gac cgg gag ggg ctt aag gcc ttt ttg gag agg ctg gag ttc gga 927 Pro Asp Arg Glu Gly Leu Lys Ala Phe Leu Glu Arg Leu Glu Phe Gly agc ctc ctc cac gag ttc ggc ctg ttg gaa agc ccg gtg gcg gcg gag 975 Ser Leu Leu His Glu Phe Gly Leu Leu Glu Ser Pro Val Ala Ala Glu gaa gct ccc tgg ccg ccc ccc gag gga gcc ttc gtg ggg tac gtt ctt 1023 Glu Ala Pro Trp Pro Pro Pro Glu Gly Ala Phe Val Gly Tyr Val Leu tcc cgc ccc gag ccc atg tgg gcg gag ctt aac gcc ttg gcc gcc gcc 1071 Ser Arg Pro Glu Pro Met Trp Ala Glu Leu Asn Ala Leu Ala Ala Ala tgg gag gga agg gtt tac cgg gcg gag gat ccc ttg gag gcc ttg cgg 1119 Trp Glu Gly Arg Val Tyr Arg Ala Glu Asp Pro Leu Glu Ala Leu Arg ggg ctt ggg gag gtg agg ggg ctt ttg gcc aag gac ctg gcg gtg ctg

14 Gly Leu Gly Glu Val Arg Gly Leu Leu Ala Lys Asp Leu Ala Val Leu gcc ctg agg gaa ggg att gcc ctg gca ccg ggc gac gac ccc atg ctc 1215 Ala Leu Arg Glu Gly Ile Ala Leu Ala Pro Gly Asp Asp Pro Met Leu ctc gcc tac ctc ctg gat cct tcc aac acc gcc ccc gaa ggg gta gcc 1263 Leu Ala Tyr Leu Leu Asp Pro Ser Asn Thr Ala Pro Glu Gly Val Ala cgg cgc tac ggg ggg gag tgg acc gag gag gcg ggg gaa agg gcg ttg 1311 Arg Arg Tyr Gly Gly Glu Trp Thr Glu Glu Ala Gly Glu Arg Ala Leu ctt tcc gaa agg ctt tac gcc gcc ctc ctg gag cgg ctt aag ggg gag 1359 Leu Ser Glu Arg Leu Tyr Ala Ala Leu Leu Glu Arg Leu Lys Gly Glu gag agg ctt ctt tgg ctt tac gag gag gtg gaa aag ccc ctt tcg cgg 1407 Glu Arg Leu Leu Trp Leu Tyr Glu Glu Val Glu Lys Pro Leu Ser Arg gtc ctg gcc cac atg gag gcc acg ggg gta cgg ttg gat gtg gcc tac 1455 Val Leu Ala His Met Glu Ala Thr Gly Val Arg Leu Asp Val Ala Tyr tta aag gcc ctt tcc ctg gag gtg gag gcg gag ctc agg cgc ctc gag 1503 Leu Lys Ala Leu Ser Leu Glu Val Glu Ala Glu Leu Arg Arg Leu Glu gag gag gtc cac cgc ctg gcc ggg cat cct ttc aac ctg aac tcc cgg 1551 Glu Glu Val His Arg Leu Ala Gly His Pro Phe Asn Leu Asn Ser Arg gac cag ctg gaa agg gtc ctc ttt gac gag ctt ggg ctt ccc gcc atc 1599 Asp Gln Leu Glu Arg Val Leu Phe Asp Glu Leu Gly Leu Pro Ala Ile ggc aag acg gag aag acg ggc aag cgc tcc acc agc gcc gcc gtt ttg 1647 Gly Lys Thr Glu Lys Thr Gly Lys Arg Ser Thr Ser Ala Ala Val Leu gag gcc ttg cgg gag gct cat ccc atc gtg gac cgc atc ctt cag tac 1695 Glu Ala Leu Arg Glu Ala His Pro Ile Val Asp Arg Ile Leu Gln Tyr cgg gag ctt tcc aag ctc aag gga acc tac atc gat ccc ttg cct gcc 1743 Arg Glu Leu Ser Lys Leu Lys Gly Thr Tyr Ile Asp Pro Leu Pro Ala ctg gtc cac ccc aag acg aac cgc ctc cac acc cgt ttc aac cag acg 1791 Leu Val His Pro Lys Thr Asn Arg Leu His Thr Arg Phe Asn Gln Thr gcc acc gcc acg ggg agg ctt agc agc tcg gat ccc aac ctg caa aat 1839 Ala Thr Ala Thr Gly Arg Leu Ser Ser Ser Asp Pro Asn Leu Gln Asn atc ccc gtg cgc acc cct ttg ggc cag cgg atc cgc cgg gcc ttc gtg 1887 Ile Pro Val Arg Thr Pro Leu Gly Gln Arg Ile Arg Arg Ala Phe Val gcc gag gag ggg tgg agg ctg gtg gtt ttg gac tac agc cag att gag 1935 Ala Glu Glu Gly Trp Arg Leu Val Val Leu Asp Tyr Ser Gln Ile Glu

15 ctc agg gtc ctg gcg cac ctt tcc ggg gac gag aac cta atc cgg gtc 1983 Leu Arg Val Leu Ala His Leu Ser Gly Asp Glu Asn Leu Ile Arg Val ttc cag gag ggc cag gac atc cac acc cag acg gcc agc tgg atg ttc 2031 Phe Gln Glu Gly Gln Asp Ile His Thr Gln Thr Ala Ser Trp Met Phe ggc gtg ccc cca gag gcc gtg gat tcc ctg atg cgt cgg gcg gcc aag 2079 Gly Val Pro Pro Glu Ala Val Asp Ser Leu Met Arg Arg Ala Ala Lys acc atc aac ttc ggc gtc ctc tac ggc atg tcc gcc cac cgg ctt tcg 2127 Thr Ile Asn Phe Gly Val Leu Tyr Gly Met Ser Ala His Arg Leu Ser gga gag ctg gcc atc ccc tac gag gag gcg gtg gcc ttc atc gag cgg 2175 Gly Glu Leu Ala Ile Pro Tyr Glu Glu Ala Val Ala Phe Ile Glu Arg tat ttc cag agc tac ccc aag gtg cgg gcc tgg att gag aaa acc ctg 2223 Tyr Phe Gln Ser Tyr Pro Lys Val Arg Ala Trp Ile Glu Lys Thr Leu gcg gaa gga cgg gaa cgg ggc tat gtg gaa acc ctc ttt ggc cgc cgg 2271 Ala Glu Gly Arg Glu Arg Gly Tyr Val Glu Thr Leu Phe Gly Arg Arg cgc tac gtg ccc gac ttg gct tcc cgg gtg aag agc atc cgg gag gca 2319 Arg Tyr Val Pro Asp Leu Ala Ser Arg Val Lys Ser Ile Arg Glu Ala gcg gag cgc atg gcc ttc aac atg ccg gtc cag ggg acc gcc gcg gat 2367 Ala Glu Arg Met Ala Phe Asn Met Pro Val Gln Gly Thr Ala Ala Asp ttg atg aaa ctg gcc atg gtg aag ctc ttt ccc agg ctt cag gag ctg 2415 Leu Met Lys Leu Ala Met Val Lys Leu Phe Pro Arg Leu Gln Glu Leu ggg gcc agg atg ctt ttg cag gtg cac gac gaa ctg gtc ctc gag gct 2463 Gly Ala Arg Met Leu Leu Gln Val His Asp Glu Leu Val Leu Glu Ala ccc aag gag caa gcg gag gaa gtc gcc cag gag gcc aag cgg acc atg 2511 Pro Lys Glu Gln Ala Glu Glu Val Ala Gln Glu Ala Lys Arg Thr Met gag gag gtg tgg ccc ctg aag gtg ccc ttg gag gtg gaa gtg ggc atc 2559 Glu Glu Val Trp Pro Leu Lys Val Pro Leu Glu Val Glu Val Gly Ile ggg gag gac tgg ctt tcc gcc aag gcc tag g ggtcgtgggg tatagtcgtt 2610 Gly Glu Asp Trp Leu Ser Ala Lys Ala *** cccatgaggc gttacttcgg caccgacggg gtgcgggggg aggcgggcaa gcaccccctt 2670 acccccgggt ttgtccttaa gctt 2694 <210> 2 <211> 830 <212> PRT <213> Thermus sp. X-1 <400> 2 Met Leu Pro Leu Phe Glu Pro Lys Gly Arg Val Leu Leu Val Asp Gly

16 His His Leu Ala Tyr Arg Thr Phe Phe Ala Leu Lys Gly Leu Thr Thr Ser Arg Gly Glu Pro Val Gln Ala Val Tyr Gly Phe Ala Lys Ser Leu Leu Lys Ala Leu Arg Glu Asp Gly Asp Val Val Ile Val Val Phe Asp Ala Lys Ala Pro Ser Phe Arg His Gln Thr Tyr Glu Ala Tyr Lys Ala Gly Arg Ala Pro Thr Pro Glu Asp Phe Pro Arg Gln Leu Ala Leu Ile Lys Glu Met Val Asp Leu Leu Gly Leu Glu Arg Leu Glu Val Pro Gly Phe Glu Ala Asp Asp Val Leu Ala Thr Leu Ala Lys Lys Ala Glu Lys Glu Gly Tyr Glu Val Arg Ile Leu Thr Ala Asp Arg Asp Leu Tyr Gln Leu Leu Ser Glu Arg Ile Ser Ile Leu His Pro Glu Gly Tyr Leu Ile Thr Pro Glu Trp Leu Trp Glu Lys Tyr Gly Leu Lys Pro Ser Gln Trp Val Asp Tyr Arg Ala Leu Ala Gly Asp Pro Ser Asp Asn Ile Pro Gly Val Lys Gly Ile Gly Glu Lys Thr Ala Ala Lys Leu Ile Arg Glu Trp Gly Ser Leu Glu Asn Leu Leu Lys His Leu Glu Gln Val Lys Pro Ala Ser Val Arg Glu Lys Ile Leu Ser His Met Glu Asp Leu Lys Leu Ser Leu Glu Leu Ser Arg Val Arg Thr Asp Leu Pro Leu Gln Val Asp Phe Ala Arg Arg Arg Glu Pro Asp Arg Glu Gly Leu Lys Ala Phe Leu Glu Arg Leu Glu Phe Gly Ser Leu Leu His Glu Phe Gly Leu Leu Glu Ser Pro Val Ala Ala Glu Glu Ala Pro Trp Pro Pro Pro Glu Gly Ala Phe Val Gly Tyr Val Leu Ser Arg Pro Glu Pro Met Trp Ala Glu Leu Asn Ala Leu Ala Ala Ala Trp Glu Gly Arg Val Tyr Arg Ala Glu Asp Pro Leu Glu Ala Leu Arg Gly Leu Gly Glu Val Arg Gly Leu Leu Ala Lys Asp Leu Ala Val Leu Ala Leu Arg Glu Gly Ile Ala Leu Ala Pro Gly Asp Asp Pro Met Leu Leu Ala Tyr Leu Leu Asp Pro Ser Asn Thr Ala Pro Glu Gly Val Ala Arg Arg Tyr Gly Gly Glu Trp Thr Glu Glu Ala Gly Glu Arg Ala Leu Leu Ser Glu Arg Leu Tyr Ala Ala Leu Leu Glu

17 Arg Leu Lys Gly Glu Glu Arg Leu Leu Trp Leu Tyr Glu Glu Val Glu Lys Pro Leu Ser Arg Val Leu Ala His Met Glu Ala Thr Gly Val Arg Leu Asp Val Ala Tyr Leu Lys Ala Leu Ser Leu Glu Val Glu Ala Glu Leu Arg Arg Leu Glu Glu Glu Val His Arg Leu Ala Gly His Pro Phe Asn Leu Asn Ser Arg Asp Gln Leu Glu Arg Val Leu Phe Asp Glu Leu Gly Leu Pro Ala Ile Gly Lys Thr Glu Lys Thr Gly Lys Arg Ser Thr Ser Ala Ala Val Leu Glu Ala Leu Arg Glu Ala His Pro Ile Val Asp Arg Ile Leu Gln Tyr Arg Glu Leu Ser Lys Leu Lys Gly Thr Tyr Ile Asp Pro Leu Pro Ala Leu Val His Pro Lys Thr Asn Arg Leu His Thr Arg Phe Asn Gln Thr Ala Thr Ala Thr Gly Arg Leu Ser Ser Ser Asp Pro Asn Leu Gln Asn Ile Pro Val Arg Thr Pro Leu Gly Gln Arg Ile Arg Arg Ala Phe Val Ala Glu Glu Gly Trp Arg Leu Val Val Leu Asp Tyr Ser Gln Ile Glu Leu Arg Val Leu Ala His Leu Ser Gly Asp Glu Asn Leu Ile Arg Val Phe Gln Glu Gly Gln Asp Ile His Thr Gln Thr Ala Ser Trp Met Phe Gly Val Pro Pro Glu Ala Val Asp Ser Leu Met Arg Arg Ala Ala Lys Thr Ile Asn Phe Gly Val Leu Tyr Gly Met Ser Ala His Arg Leu Ser Gly Glu Leu Ala Ile Pro Tyr Glu Glu Ala Val Ala Phe Ile Glu Arg Tyr Phe Gln Ser Tyr Pro Lys Val Arg Ala Trp Ile Glu Lys Thr Leu Ala Glu Gly Arg Glu Arg Gly Tyr Val Glu Thr Leu Phe Gly Arg Arg Arg Tyr Val Pro Asp Leu Ala Ser Arg Val Lys Ser Ile Arg Glu Ala Ala Glu Arg Met Ala Phe Asn Met Pro Val Gln Gly Thr Ala Ala Asp Leu Met Lys Leu Ala Met Val Lys Leu Phe Pro Arg Leu Gln Glu Leu Gly Ala Arg Met Leu Leu Gln Val His Asp Glu Leu Val Leu Glu Ala Pro Lys Glu Gln Ala Glu Glu Val Ala Gln Glu Ala Lys Arg Thr Met Glu Glu Val Trp Pro Leu Lys Val Pro Leu Glu

18 Val Glu Val Gly Ile Gly Glu Asp Trp Leu Ser Ala Lys Ala *** <210> 3 <211> 830 <212> PRT <213> Thermus sp. X-1 <400> 3 Met Leu Pro Leu Phe Glu Pro Lys Gly Arg Val Leu Leu Val Asp Gly His His Leu Ala Tyr Arg Thr Phe Phe Ala Leu Lys Gly Leu Thr Thr Ser Arg Gly Glu Pro Val Gln Ala Val Tyr Gly Phe Ala Lys Ser Leu Leu Lys Ala Leu Arg Glu Asp Gly Asp Val Val Ile Val Val Phe Asp Ala Lys Ala Pro Ser Phe Arg His Gln Thr Tyr Glu Ala Tyr Lys Ala Gly Arg Ala Pro Thr Pro Glu Asp Phe Pro Arg Gln Leu Ala Leu Ile Lys Glu Met Val Asp Leu Leu Gly Leu Glu Arg Leu Glu Val Pro Gly Phe Glu Ala Asp Asp Val Leu Ala Thr Leu Ala Lys Lys Ala Glu Lys Glu Gly Tyr Glu Val Arg Ile Leu Thr Ala Asp Arg Asp Leu Tyr Gln Leu Leu Ser Glu Arg Ile Ser Ile Leu His Pro Glu Gly Tyr Leu Ile Thr Pro Glu Trp Leu Trp Glu Lys Tyr Gly Leu Lys Pro Ser Gln Trp Val Asp Tyr Arg Ala Leu Ala Gly Asp Pro Ser Asp Asn Ile Pro Gly Val Lys Gly Ile Gly Glu Lys Thr Ala A Lys Leu Ile Arg Glu Trp Gly Ser Leu Glu Asn Leu Leu Lys His Leu Glu Gln Val Lys Pro Ala Ser Val Arg Glu Lys Ile Leu Ser His Met Glu Asp Leu Lys Leu Ser Leu Glu Leu Ser Arg Val Arg Thr Asp Leu Pro Leu Gln Val Asp Phe Ala Arg Arg Arg Glu Pro Asp Arg Glu Gly Leu Lys Ala Phe Leu Glu Arg Leu Glu Phe Gly Ser Leu Leu His Glu Phe Gly Leu Leu Glu Ser Pro Val Ala Ala Glu Glu Ala Pro Trp Pro Pro Pro Glu Gly Ala Phe Val Gly Tyr Val Leu Ser Arg Pro Glu Pro Met Trp Ala Glu Leu Asn Ala Leu Ala Ala Ala Trp Glu Gly Arg Val Tyr Arg Ala Glu Asp Pro

19 Leu Glu Ala Leu Arg Gly Leu Gly Glu Val Arg Gly Leu Leu Ala Lys Asp Leu Ala Val Leu Ala Leu Arg Glu Gly Ile Ala Leu Ala Pro Gly Asp Asp Pro Met Leu Leu Ala Tyr Leu Leu Asp Pro Ser Asn Thr Ala Pro Glu Gly Val Ala Arg Arg Tyr Gly Gly Glu Trp Thr Glu Glu Ala Gly Glu Arg Ala Leu Leu Ser Glu Arg Leu Tyr Ala Ala Leu Leu Glu Arg Leu Lys Gly Glu Glu Arg Leu Leu Trp Leu Tyr Glu Glu Val Glu Lys Pro Leu Ser Arg Val Leu Ala His Met Glu Ala Thr Gly Val Arg Leu Asp Val Ala Tyr Leu Lys Ala Leu Ser Leu Glu Val Glu Ala Glu Leu Arg Arg Leu Glu Glu Glu Val His Arg Leu Ala Gly His Pro Phe Asn Leu Asn Ser Arg Asp Gln Leu Glu Arg Val Leu Phe Asp Glu Leu Gly Leu Pro Ala Ile Gly Lys Thr Glu Lys Thr Gly Lys Arg Ser Thr Ser Ala Ala Val Leu Glu Ala Leu Arg Glu Ala His Pro Ile Val Asp Arg Ile Leu Gln Tyr Arg Glu Leu Ser Lys Leu Lys Gly Thr Tyr Ile Asp Pro Leu Pro Ala Leu Val His Pro Lys Thr Asn Arg Leu His Thr Arg Phe Asn Gln Thr Ala Thr Ala Thr Gly Arg Leu Ser Ser Ser Asp Pro Asn Leu Gln Asn Ile Pro Val Arg Thr Pro Leu Gly Gln Arg Ile Arg Arg Ala Phe Val Ala Glu Glu Gly Trp Arg Leu Val Val Leu Asp Tyr Ser Gln Ile Glu Leu Arg Val Leu Ala His Leu Ser Gly Asp Glu Asn Leu Ile Arg Val Phe Gln Glu Gly Gln Asp Ile His Thr Gln Thr Ala Ser Trp Met Phe Gly Val Pro Pro Glu Ala Val Asp Ser Leu Met Arg Arg Ala Ala Lys Thr Ile Asn Phe Gly Val Leu Tyr Gly Met Ser Ala His Arg Leu Ser Gly Glu Leu Ala Ile Pro Tyr Glu Glu Ala Val Ala Phe Ile Glu Arg Tyr Phe Gln Ser Tyr Pro Lys Val Arg Ala Trp Ile Glu Lys Thr Leu Ala Glu Gly Arg Glu Arg Gly Tyr Val Glu Thr Leu Phe Gly Arg Arg Arg Tyr Val Pro Asp Leu Ala Ser Arg Val Lys

20 Ser Ile Arg Glu Ala Ala Glu Arg Met Ala Phe Asn Met Pro Val Gln Gly Thr Ala Ala Asp Leu Met Lys Leu Ala Met Val Lys Leu Phe Pro Arg Leu Gln Glu Leu Gly Ala Arg Met Leu Leu Gln Val His Asp Glu Leu Val Leu Glu Ala Pro Lys Glu Gln Ala Glu Glu Val Ala Gln Glu Ala Lys Arg Thr Met Glu Glu Val Trp Pro Leu Lys Val Pro Leu Glu Val Glu Val Gly Ile Gly Glu Asp Trp Leu Ser Ala Lys Ala <210> 4 <211> 30 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> X-1NE <400> 4 nnngaattca tgctgcccct ctttgagccc 30 <210> 5 <211> 29 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> X-1CS <400> 5 nnngtcgacc taggccttgg cggaaagcc

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