<3039B3E2B5B55FBDC3C7E8BFACB1B85FB0E1B0FA2E687770>

Transcription

1 2009 년도시험연구결과

2 과제구분기관과제소요기간계속연구기간 99 계속사업명경북한우보증종모우개발연구과제명한우당 후대검정에관한연구색인용어한우유전능력검증, 한우개량, 육종가 연구원별 임무 구분소속성명전화번호담당임무 과제책임자한우연구실김병기 시험설계및연구총괄 공동연구자한우연구실정대진 시험연구 공동연구자축산과학원박병호 한우유전능력평가분석 공동연구자 농협가축개량사업소 김덕임 기술협력 1. 연구목적및배경가. 전국한우최다사육지로써한우차별화를위한우량보증종모우개발의필요성인식으로유전적경제형질이우수한경북형종모우를선발하여브랜드화함으로써차별화및대외경쟁력제고나. 국가검정체계의변경으로우리연구소가육종개량기관으로지정되어당대검정은본연구소에서하고후대검정은농협가축개량사업소에서추진다. 도단위보증종모우개발사업의활성화를위하여농가현장을중심으로농장후대검정사양기술을개발하여한우사양기술향상과농가소득증대에기여라. 전국한우최다사육지로써한우차별화를위한우량정액필요성인식으로유전적경제형질이우수한경북한우보증종모우개발 2. 가. 수행방법 시험 1 공시축 경북한우의당대검정을통한우량후보종모우선발 대상축 : 본연구소의혈통등록된 6개월령수송아지 선발방법 : 외모에결격사유가없고, 친자확인된수송아지 검정두수 나. 검정기간 : 16두 (170 일간)

3 다. 검정방법 시험장소 사양관리 : - 농후사료 : - 조사료 : - 급여량 : 혈액형친자확인 본연구소한우검정우사 검정용주문배합사료 건초 자유채식 : 적혈구항원형및혈액단백다형 질병검사 : 결핵, 브루셀라, 요네병, 구제역 체중 : 개시시(180 일령), 270 일령, 종료시(350 일령) 체위 : 생후 180 일령, 350일령에조사 ( 체고, 십자부고, 흉위, 흉심, 흉폭, 고장, 곤폭, 요각폭, 좌골폭등) 외모심사 : 가축외모심사기준에의거실시 - 분석방법 : 가감법적용( 농림부고시종축및후보종축심사기준에 의거외모 심사결과 75 점이상이어야함) 정액검사 : 정액량, 정자농도, 생존율, 기형율, 활력등 라. 검정성적분석 일반능력 유전능력평가 : 12개월령종료체중및일당증체량 - 혈통확인 : 분석대상우의혈통등록번호를이용하여혈연정보입수 - 유전평가 : 국가당대검정자료에경북자료를통합분석 - 분석모형 : 가축개체모델에의해 Boldman 등의 MTDFR ML package 를이용하여분석 선발기준 : 가축개량협의회( 한우분과위원회) 에서정한선발지수식에 의한표준육종가, 외모심사, 정액성상등을종합고려하 여최종선발 가. 시험 2. 공시축 한우계통조성및우량송아지생산에관한연구 대상축 : 우량한우( 성우 100 두, 생산송아지 82 두) 1 차년도계통분류 ( 육질형계통: 24 ; 육량형계통: 16 ; 겸용형계통: 66 두)

4 상기의불량우 6 두는도태처리하고, 생산된송아지는총 82두 선발방법 : 혈통등록우이상의우량번식한우( 번식농가) 분류계통및두수 : 해당축의부( 父 ) 의표준화육종가를중심으로분리 계획교배 : 선대모축을추적하여후대자손축의예상육종가를산출한후 정액선정및교배실시 나. 시험기간 : (24 개월간) 다. 시험방법 시험장소 사양관리 : 본연구소한우비육우사 - 농후사료 : 번식우사료( 개체별 1일 2.0~3.5kg 정도) - 조사료 : 건초( 자유채식) - 급여량 : 자유채식 체중및체위 : 12 개월, 24 개월령의체중및체위 : 생후 180 일령, 360 일령에조사, 체고 십자부고 흉위 흉심 흉폭 고장 곤폭 요각폭등 10개부위측정 기타사양관리: 농가관행에준함( 치료, 예방접종등) 3. 시험성적 시험 1 경북한우의당대검정을통한우량후보종모우선발가. 연도별검정실적 검정차수연도검정두수 계 검정기간 후보종모우선발내역보증종모우선발내역소계의뢰자도태현보유현보유대기선도체의발태뢰자체의뢰자대체기보증 237 두 비 고 1차 두 `99.11 ~` KPN 582, 경북 1호선발 (' ) 2차 두 `01.07 ~` KPN 584, 경북 2호선발 (' ) 3차 두 `02.04 ~` KPN 586, 경북 3호선발 (' ) 4차 두 `03.04 ~` * KPN 582 도태처리 ('08.3) 5차 두 `04.04 ~` * 대기우 3두 KPN747, 839, 868 도태 (' ) 6차 두 `04.11 ~` 한우분과실무위원회 ( 농협의뢰 3, 자체 1) 7차 두 `05.05 ~` 한우분과실무위원회 ( 농협의뢰 2) 8차 두 `05.11 ~` 한우분과실무위원회 ( 농협의뢰 1, 자체 1)

5 9차 두 `06.06 ~` 한우분과실무위원회 ( 농협의뢰 1, 자체 1) 10차 두 `07.03 ~` 한우분과실무위원회 ( 농협의뢰 1, 자체 1) 11차 두 `07.09 ~` 한우분과실무위원회 ( 농협의뢰 2, 자체 1) 12차 두 `08.03 ~` 한우분과실무위원회 ( 농협의뢰 3) 13차 두 `08.09 ~` 한우분과실무위원회 ( 농협의뢰 3, 자체 1) (56 차) 14차 두 `09.03 ~` 한우분과실무위원회 ( 농협의뢰 3) (57 차) 15차 두 `09.09 ~`10.03 (58 차) (56 차) 전국한우당대검정차수를말함 검정중 나. 표 당대검정성적 년도상반기당대검정우내역 번호 선발 선발 검정대상우종빈우부바코드번호 (KPN) ( 개체명호) 생년월일바코드번호고등등록번호종축개량협회 ( ) ( 고등) ( ) ( 고등) ( ) ( 고등) ( ) ( 고등) ( ) ( 고등) ( ) ( 고등) ( ) ( 고등) ( ) ( 고등) ( ) ( 고등) ( ) ( 고등) ( ) ( 고등) ( ) ( 고등) ( ) ( 고등) ( ) ( 고등) ( ) ( 고등) ( 고등) 16 선발 ( ) 개시체중 종료체중 순위 위 위 위 위 위 위 위 /264두 위 위 위/ 264두 위 위 위 위 위 위/ 264두

6 표 2. 체중및증체량 번 호 검정대상우 바코드번호 ( 개체명호) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) 생년월일 개시시 체중 (kg) 1개월 2개월 3개월 4개월 5개월 6개월 09/3/20 4/19 5/19 6/18 7/18 8/17 9/4 전기간일당증체량

7 표 3. 개체별외모심사점수현황 - 한국종축개량협회분석 번호 검정우바코드번호 ( 개체명호) 체적자질머리전구중구엉덩넓적유기지제점수순위 장 비 고 단 ( ) 입주위흑이모 ( ) 제관부백이모 ( ) 모색진함 ( ) 모색진함 ( ) 체적균형 ( ) ( ) 체폭 ( ) 좌미간백이모 ( ) 자질 ( ) 체폭, 자질 ( ) 고창증 ( ) 자질, 품위 ( ) 비경흑반점 ( ) 지제 ( ) 성질난폭 ( ) 체폭

8 표 4. 개체별체측치현황 ( 검정개시시) 번호 검정우바코드번호 ( 개체명호) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) 체고 십자 체장 흉폭 흉심 고장 요각 곤폭 좌골 흉위 ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( )

9 표 5. 개체별체측치현황 ( 검정 3 개월령시) 번호 검정우바코드번호 ( 개체명호) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) 체고 십자 체장 흉폭 흉심 고장 요각 곤폭 좌골 흉위 ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( )

10 표 6. 개체별체측치현황 ( 검정 6 개월령시) 번호 검정우바코드번호 ( 개체명호) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) 체고 십자 체장 흉폭 흉심 고장 요각 곤폭 좌골 흉위 ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( )

11 4. 결과요약 검정대상우를 170 일간검정을실시한결과, 유전능력평가, 정액검사, 외모 심사등종합하여전국당대검정우(264 두) 중상위 10% 내외의 3두를최 종후보종모우로선발함( 개체명호 , , 호) 5. 향후계획및기대효과 가. 경북지역에적합한한우보증종모우개발을위한지속적인당대검정실시나. 후보종모우선발후농협의뢰후대검정실시다. 보증종모우개발로지역한우사육및브랜드육농가에게우량정액공급라. 한우육품질고급화로경북한우에대한인지도제고및신뢰구축 시험2. 한우계통조성및우량송아지생산에관한연구 Ⅰ. 서론 한우개량의주요형질은육량과육질이며, 이형질들을개량하기위해유전능력을향상시키고, 거 세, 사양관리, 우사조건등의환경또한개선하여한우의생산성( 발육및육질) 을개선하고보유 암송아지의혈연관계를고려한우수한씨수소와의계획교배와집단중에서유전능력이우수한개 체를뽑아후대축을생산하기위한종축으로이용하기위한선발등검정, 자료의분석, 평가방법 개발, 자료의수집체계구축등이목적이다. 한우개량농가육성사업은혈통관리수준에만머물러있는상태로개량이진행되어왔으므로개 량의효과가반감(51%) 되어왔다. 또한생산자단체들이개량의중요성을인식하는비율이낮고자 발적인개량사업에대한참여의지가부족하다는문제점을가지고있다. 따라서한우개량의효과를 극대화가필요하고암소개량을위해서는농가자율의검정및평가선발을유도하여개량속도및효 율가속화를추진하여야한다. 암소의개량형질은번식능력 ( 번식형질, 발육형질 ), 도체품질로나눌수있다. 번식눙력에서먼저 번식형질은초산일령, 분만간격, 난산율, 육성율등으로나누고, 둘째로, 생시체중, 이유시체중, 6, 12, 18 개월령체중, 사료효율, 체형등은발육형질이다. 그러면도체품질에는근내지방도등육질과

12 관련된형질과도체중, 배최장근단면적, 등지방두께등육량은도체품질을말한다. 따라서본연구는혈통을중심으로번식한우의도체품질중에서육질형질과, 육량형질그리고양 쪽형질을혼합한겸용형으로구분하고, 이들의번식형질과발육형질을조사하고자실시하였다. Ⅱ. 재료및방법 1. 공시축및시험기간 한국종축개령협회에혈통등록되고생년월일이차이가유사한(10 개월±3 개월령) 초임암소 106 두를선발하여 2008년 6월부터 2009년 11 월말까지민속한우( 주) 봉화농장에서실시하였다. 공시축구분은한우혈통계통을조사하여모축은제외하고, 시험암소의친가부( 父 ) 쪽의아비와 조부가근내지방도의육종가예측치가 1.0 이상이면육질형(A 그룹) 으로, 친가부( 父 ) 쪽의아비와 조부가도체중의예측육종가가 1.0 이상이면육령형(B 그룹) 으로, 그리고나머지공시축들로서친 가부( 父 ) 쪽의아비와조부가근내지방도및도체중의예측육종가가 0.4~0.7 이면겸용형(C 그룹) 으로표기하고, 시험축은그룹간에섞이지않도록그룹사육을실시하였다. 표 1. 공시축배치도 항목 A 그룹 ( 육질형 ) B 그룹( 육량형) C 그룹( 겸용형) 군별두수 24두 16두 66두 2. 사양관리 축사형태는 1칸당 m 크기로서앞뒤양쪽의스탄죤과사료급이통이설치된개방형축사 2동을이용하여각각 53 두씩나누어투입하였다. 양면에는윈치커텐을설치하여겨울철에는바람 을막아주었고여름철에는바람이잘통하도록하였으며, 천장에는대형선풍기를설치하였다. 시험 암소의사료급여는암소사육프로그램에준하여 1일당농후사료는 3~4kg, 조사료에서티머시 는 2kg, 볏짚은자유채식시켰다. 사료급여의경우, 농후사료는 S사의번식우사료를급여하였 고, 조사료인티모시는미국산, 볏짚은국내산을급여하였다. 3. 조사항목및분석방법 계획교배에따른초임일령, 수태율을측정하였고, 임신에따른분만율및송아지생시체중, 이 유시체중, 6 개월령체중, 송아지육성율및사료섭취량을측정하였다.

13 (1) 수태율, 초임일령, 분만율 수태율은인공수정하여수태가되었을때이며, 초임일령은처녀우가최초수태된일령을마하 며이때의체중량을말한다. 또한수태율은총수태두수를인공수정두수로나누어백분율(%) 나타내었고, 분만율은총분만두수를총임신두수로나누어백분율(%) 로계산하였다. (2) 생시, 이유시, 189일령체중및육성율 송아지생시체중은최초분만시에측정된체중, 이유시체중은 90~100일령내외의체중량이 며, 6개월령체중은 180 일령때의체중량이다. (3) 송아지사료섭취량, 요구율및증체량 시험기간동안체중측정은매월말경에정기적으로측정하였으며, 사료는매일오전 8:00와오 후 17:00에 2 회로나누어급여하였고, 잔량은익일오전사료급여전에잔량을칭량하여 1일총 사료급여량에서잔량을제하여 1 일사료섭취량을계산하였고, 사료요구율은사료섭취량에총 증체량을사료섭취량으로나누어환산하였다. Ⅲ. 결과및고찰 1. 계획교배 표 2-1. 혈통계통별에따른암소 A 그룹( 육질형 ) 와 B 그룹( 육량형 ) 계획교배 관리개체번호 아비 KPN 계획교배 KPN 근친도 비고 관리개체번호 아비 KPN 계획교배 KPN 근친도 A 도태 B 도태 A B A B A B A B A B A B A B 도태 A B A B A B A B A B A B A 도태 B A B A A A A 비고

14 A A A A 표 2-1과 2-2 는시험암소에대한교배계획서이다. A,B,C그룹별로근친도와구입된정액종류 외량에따라교배계획서를작성한것이다. 표 3은 A,B,C그룹별에따른수태율과초임일령을조사한것으로서수태율에서 C그룹이 93.94% 로서가장높았던반면에 B그룹은 87.5% 로서가장낮았다. 따라서평균수태율은 91.04% 로서 총 98 두를생산할것으로나타났다. 또한초임우의체중은 C그룹이 309.3kg 으로가장높았고, A그룹은 301.2kg 으로가장적었고, 평균체중은 305.8kg 이었다. 또한초임일령에서 C그룹과 A그 룹에서 434.8일과 일이며, 평균초임일령은 428 일이었다. 표 2-2. 혈통계통별에따른암소 C 그룹( 겸용형) 계획교배 관리개체번호 아비 KPN 계획교재 KPN 근친도 비고 관리개체번호 아비 KPN 계획교배 KPN 근친도 C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C 도태 C C C C C C C C 도태 C 비고

15 C C C C 표 3. 혈통계통별에따른수태율, 초임일령, 분만율 구분\ 혈통계통 A그룹 B그룹 C그룹 평균치 수태율, (%) 91.67% (22 두/24 두) 87.50% (14 두/16 두) 93.94% (62 두/66 두) 91.04% (98 두/106 두) 초임체중 (kg) 301.2± ± ± ±36.82 초임일령( 일) 430.4± ± ± ±37.2일 도태( 두) 자궁이상, 불임 2. 임신및분만 표 4. 시험모축의분만현상 구분조사두수( 두) 비고 총분만두수( 분만율,%) 98(92.45%) 불임우( 불임율,%) 6(5.67%) 임신감정오기, 공태등 유사산두수( 유사산율,%) 6(6.12%) 아까바네감염등 폐사두수( 폐사율,%) 8(8.16%) 감기, 설사등으로 8두폐사 육성두수( 육성율,%) 82(83.67%) 분만율, 불임율은총두수(106 두) 중의비율 유사산율, 폐사율, 육성율은분만두수(98 두) 중의비율 표 4는시험축의총분만현상을나타낸것으로서총분만두수는총 106두중에서 98두로서 92.45% 의분만율을보였다. 그러나생산된송아지중에서육성된송아지두수는 82두로서 83.67% 로나타났다. 표 5 는생산된송아지의체중변화를나타낸것으로서, 생시평균체중은 26.17kg 이었고, 계통 별로 A그룹이 24.8kg, B그룹은 27.9kg, C그룹은 25.8kg으로서육량형인 B그룹이더크게나타 났다. 또한이유시(90 일령) 의평균체중은 96.17kg 이었고, 계통별로 A그룹은 94.0kg, B그룹은 98.0kg, C그룹은 96.5kg 으로서생시체중의경향을그대로유지하면서성장하였다. 또한 6개월 령평균체중은 kg 이었고, 계통별로 A그룹은 150.8kg, B그룹은 160.5kg, C그룹은 155.8kg 이었다.

16 3. 송아지의체중및사료섭취량 표 5. 생산된송아지의체중변화 생시체중 (kg) 이유시체중 (kg) 6 개월령 (kg) 구분체중량조사두수( 두) A그룹 24.8± B그룹 27.9± C그룹 25.8± 평균 26.17±2.22 A그룹 94.0± B그룹 98.0± C그룹 96.5± 평균 96.17±13.67 A그룹 150.8± B그룹 160.5± C그룹 155.8± 평균 ±24.89 표 6. 생산된송아지의사료섭취량 생시-이유시 (90 일령) 3-4 개월령 5-6 개월령 구분 1 일당총사료섭취량(kg) 조사두수( 두) A그룹 0.54± B그룹 0.56± C그룹 0.55± 평균 0.55±0.11 A그룹 1.62± B그룹 1.89± C그룹 1.71± 평균 1.74±0.31 A그룹 3.67± B그룹 3.84± C그룹 3.76± 평균 3.75±0.65 표 6은생산된송아지의 1 일당두당사료섭취량을나타낸것으로서생시부터이유시(90 일령) 까지의평균사료섭취량은 0.55kg 이었고, 계통별로는 A그룹이 0.54kg, B그룹은 0.56kg, C그룹 은 0.55kg 으로계통에따라거의차이가없었다. 그러나 3-4개월간의평균섭취량은 1.74kg으로 서계통별로는 A그룹이 1.62kg, B그룹은 1.89kg, C그룹은 1.71kg으로서 B그룹이좀더높은 경향을보였다. 그리고 5-6개월간의평균사료섭취량은 3.75kg 이었고, 계통별로는 B그룹이 3.84kg 으로더높은섭취량을보여결과적으로증체량에도영향을미친것으로판단된다.

17 Ⅳ. 결과요약 본연구는한우번식우의계통조성및이에따른송아지생산성을조사하고자초임번식우의혈통 을중심으로 3 그룹(A 그룹= 육질형 24 두, B 그룹= 육량형 16 두, C 그룹= 양쪽형질의겸용형) 계통으로 구분하여총 다. 106두를배치하여모축의번식형질과송아지의발육형질을조사한결과는다음과같 1. 평균수태율은 91.04% 였으며, 그중에서 C그룹이 93.94% 로서가장높았고. 초임우의평균체 중은 305.8kg 이었고, 초임일령은평균 428 일로나타났다. 2. 총분만율은 92.45%(98 두/106 두) 이었고, 생산후육성된송아지는 82두로서 83.67% 로나타났다. 3. 생산된송아지의생시평균체중은 26.17kg으로 A그룹이 24.8kg, B그룹은 27.9kg, C그룹은 25.8kg 이었고, 이유시(90 일령) 의평균체중은체중은 96.17kg 이었다. 또한 6개월령평균체중 은 kg 이었다. 4. 생시부터이유시(90 일령) 까지의평균사료섭취량은 0.55kg 이었고, 생후 3-4개월간의평균섭 취량은 1.74kg 이었으며, 생후 5-6개월간의평균사료섭취량은 3.75kg 이었다. 계통별로는 B 그룹이 3-6 개월령까지가장높은섭취량을보였다.

18 과제구분 공동연구과제 소요기간 3년 연구기간 09 11년 사업명 경북한우보증종모우개발 연구과제명 초음파기기를이용한한우보증종모우선발에관한연구 색인용어 초음파, 한우보증종모우, 유전능력평가, 육종가 연구원별 임무 구 분 소 속 성 명 전화번호 담당임무 과제책임자 한우연구실 김병기 시험설계및연구총괄 공동연구자축산과학원 한우시험장 김형철 한우초음파측정및평가 공동연구자 한우연구실 정대진 유전능력평가 1. 가. 연구목적및배경 유전적으로우수한한우보증종모우개발의새로운선발체계구축 나. 현재약 5년간의검정기간을단축하기위한방법모색 다. 초음파생체정보를이용하여육질능력이우수한한우( 씨수소, 암소) 의선발로우량밑소생산체계구축 2. 수행방법 가. 공시축 : 총 20두 후보종모우에서탈락된비거세능력검정우 ( 본연구소는암소시험제외) 나. 시험기간 : 2009~2011 년(3 년간) 다. 시험장소 : 본연구소비육우사 라. 사양관리 : 농후사료체중대비 1.5% 마. 초음파측정및화상판독 건초자유채식( 육성기;4kg), 볏짚 2kg( 비육전기) 측정부위 : 제13흉추 - 제1요추 바. 측정시기 : 수소, 미경산우 : 생후 12개월령부터 2개월간격 경산우 : 비육개시 2개월간격 사. 화상판독 : 등지방두께, 등심단면적, P8 지방두께(image analyzer 분석 프로그램이용), 근내지방도 ( 육안판정, 도체등급기준적용 )

19 3. 가. 시험성적 표 체중측정및초음파측정 1. 비거세수소체중비고 월령별체중 (kg) 일당증체량,kg 구분 12( 개시) 월령 18월령 24월령 (12~18) 한우시험장(8 두) 334.6± ± 경북축산연(8 두) 369.7± ± ± 표 2. 비거세수소초음파측정결과( 경북축산연) 구분 18개월령 21개월령 24개월령 등지방두께 (mm) 3.6± ± ±1.6 등심단면적 ( cm2) 68.3± ± ±7.6 근내지방도 (1-27) 1.6± ± ±1.5 표 3. 비거세수소사료섭취량( 경북축산연) 월령별체중 (kg) 구분 12( 개시) 월령 18월령 24월령월별두당농후사료 ± ± ±8.94 조사료 36.33± ± ±54.9 1일두당섭취량 결과요약 가. 시험진행경과됨에따라체중및증체량이점차증가하는경향 나. 초음파를통한근내지방도측정에서도시간경과에따라마블링수치가 높아짐 5. 가. 나. 다. 기대효과및향후계획 초음파육질형질에근거한한우당대검정으로씨수소선발 초음파기술을이용하여한우암소의근내지방발현양상구명 한우보증종모우선발체계변경을통한보증종모우선발 라. 당, 후대검정기간단축으로종모우조기선발및조기우량정액공급가능 마. 육종체계의새로운모델제시

20 과제구분 경상 소요기간 계속 연구기간 07 ~ 계속 사업명 경북한우보증종모우개발 연구과제명 한우우량검정축생산에관한연구 ( 육종농가사업) 색인용어 한우유전능력검증, 한우개량, 육종가 연구원별 임무 구분소속성명전화번호담당임무 과제책임자한우연구실박용수 시험설계및연구총괄 공동연구자 김우현 인공수정 최수호 임신감정 정대진 교배계획작성 1. 연구목적및배경 가. 한우종모우개발체계의변화즉, 현재수소위주로개량이진행되어온 것을우량암소의선발과계획적인당대검정우생산체계로전환( 농림부 ). 나. 이에정부에서는한우육종센터를선정하였고, 이를중심으로당대검정용 송아지를계획생산하여종모우선발에활용하고있음. 다. 본시험을통하여연구소자체의우수한당대검정축을생산하고, 연 라. 구소암소의유전적개량을도모하고자함. 한우번식우사육규모가다두화됨에따라번식관리에문제점이발생하 고있고, 특히번식효율이낮은농가에대한번식관리체계에문제가 많이발생하고있다. 요하다. 이에대한적극적인대처법의연구및교육이필 2. 수행방법 가. 시험기간 : 2007년~계속 나. 시험장소 : 본연구소및영주(2), 경산(2) 농가 다. 시험방법 교배계획작성 - 연구소( 정대진) 암소의초음파검사(12개월령미경산우- 한우개량부) 교배계획에의한계절번식( 연구소)

21 - 두수 : 120 두(60 두씩, 2 회, 년) - 발정유도 : CIDR 또는 Ovsynch 법 - 정액 : 계획선정 - 생산된송아지 : 당대검정우로제공 비타민및미네랄첨가가번식성적에미치는효과 ( 농진청 FTA 대응기술개발과제) - 두수 : 160 두(40 두씩, 4 개군) - 비타민복합제, 베타케로틴, 비타민복합제+ 베타케로틴및대조군 - 급여방법 : 분만전 2개월부터첫인공수정완료시까지급여 라. 조사항목 : 교배계획, 육질초음파, 발정유도율, 수태율등 발정, 임신, 임신기간및송아지체중 3. 시험성적 < 한우당대검정용우량송아지생산> 1 차계획교배완료 - 기간 : ~ 인공수정두수 : 101두 2 차계획교배완료 - 기간 : ~ 인공수정두수 : 134두 - 처리방법 Cidr 법 : 20 두, PG 법 : 20 두, 자연발정 - 임신진단 : 초음파를이용한 30일미만임신감정

22 정액선정결과 개체식별번호 교배씨 수소 생시 체중 90일령 6개월 12개월 도체중등심단면적 등지방 두 께 KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN KOR KPN

23 < 한우번식효율개선체계확립연구> Ⅰ. 서론 소에서번식효율을높이기위해서는 1년 1 산을할수있는비율이높아야하며, 12개월의번 식간격을유지하기위해서는분만후 50일경에발정주기가회복되어야하고 80-85일에임신이 되어야한다(Asimwe와 Kifaro, 2007; 이등, 2001). 한우의분만간격은 378.8일 일로농가 별로차이가심하고( 김과김, 1980; 백등, 1998; 이등, 2001; 한등, 1989), 정기적으로수의진료를 받고있는젖소농장은 344일로낮은경향이었으며수태당종부회수도 회로낮았다(Kim 등, 2009). 한편한우에서무발정의원인은발정관찰실패가 41.9% 로가장많았으며, 난소의비활성화가 32.6%, 난포낭종 9.3%, 황체존재 7%, 자궁내막염 4.7% 및황체낭종과자궁축농증이각각 2.3% 이 었다( 장등, 2001). 따라서한우번식에서가장큰문제는발정관찰실패및난소의비활성에따른 분만간격의증가라고할수있다. 육우에서의분만후무발정기의연장에는자궁퇴축의지연(Short 등, 1990), 분만전영양상 태(Wettmann 등, 2003; Morrison 등, 1999; Spitzer 등, 1995), 포유(Wettemann 등, 2003), 계절 (Asimwe와 Kifaro, 2007; Gebeyehu 등, 2007), 부주의한발정관찰(Melendez 등, 2008; Son 등, 2001) 및번식장애(Deutscher 등, 1991; Short 등, 1990) 가원인이었다. 특히분만후암소가영 양소섭취또는체에너지가부족하거나불균형하게되면난포성장장애및황체활동의이상 으로인한첫발정과배란간격을증가시키며, 비타민및미네랄이부족하여도번식에악영향 을미친다(Wettemann 등, 2003). Vitamin A와전구물질인 β-carotene은뇌하수체및난소기 능과관련이있어부족시수태율저하, 유산및후산정체증가, 사산, 허약또는맹안송아지 생산이증가하였다(Byers 등, 1956; Ronning 등, 1959). Vitamin E와 Se은암소에서는후산정 체감소, 수소에서는정자수증가에효과적이다(Daniels 등, 1987; Gwazdauskas 등, 1979; Julien 등, 1976; Segerson과 Johnson, 1979). Zn 은수태율및송아지분만율(Miller와 Miller, 1962; Piper와 Spears, 1982), Ca는자궁퇴축, 난산및후산정체(Morrow, 1980; Root 등, 1979), P은 수태율저하, 불규칙발정, 무발정, 난소활동감소및난포낭종의증가와관련이있다(Morrow, 1980; Pugh 등, 1985). 한우농가의사육규모가다두화되고있으며, 사육형태면에서개체관리에서군사식집단관리 형태로전환되고, 자가인공수정이증가하면서수정실패에따른장기공태및비육겸용에따 른문제도지속적으로발생하고있다( 이등, 2001). 따라서본연구에서는한우암소의번식효율향상을위하여비타민및미네랄복합제의급 여가경산우에서는분만후, 미경산우에서는생후 14 개월이후의첫발정율, 임신율및임신기

24 간과송아지생시체중을각각조사하였다. Ⅱ. 재료및방법 1. 공시축 실험농장은경상북도지역의 20개농장의번식기록을분석하여평균분만간격이 15개월이상이 면서수태당종부회수가 2 회이상인농장을선발하였다. 이중경상북도영주지역 4개농장에서 사육되고있는 1 회이상분만경험이있는암소( 경산우) 를대조군, 실험1 군, 및실험2군각각 40 두씩총 120 두를공시하였다. 미경산우는생후 12개월이상인분만경험이없는암소를처리군 당각각 40두씩총 120 두를공시하였다. 사료급여는농가의관행에따라실시하였다. 2. 비타민복합제급여 대조군은농가관행에따라농후사료와조사료를급여하였다. 경산우및미경산우실험군의처 리는실험1군이 Vitamin A 35,000IU, Vitamin E 100IU, ß-carotene 200mg, Zn methionine 200mg 및 Se 1.5mg ( 케로풀, 우성양행), 그리고실험2군은 Vitamin E 100 IU 및 ß-carotene 200mg ( 유니베타케로틴, 유니화학) 를매일 100g 씩급여하였다. 3. 급여기간 경산우는분만전 2개월부터분만후 2 개월까지급여하였다. 미경산우는생후 12개월부터생후 16 개월까지급여하였다. 4. 발정및인공수정 발정발견은오전(6 시) 및오후(6 시) 에 20 분씩실시하였다. 인공수정은발정발견후 시간에동일한인공수정사가실시하였다. 미발정우의처리 5. 임신기간및송아지체중 임신기간은인공수정일을 0 일로하여분만까지로하였다. 송아지체중의측정은분만직후또는 12 시간이내에실시하였다. 6. 통계처리 발정발현율및임신율은 χ 2 -test 를이용하였다. 임신기간및송아지체중은 mean±se로나타

25 냈으며실험군간의차이는 Duincan's multiple range test 를이용하였다. 유의성은 p<0,05 수 준에서검정하였다. Ⅲ. 결과 한우경산우에서비타민및미네랄복합제의급여가분만후첫발정과임신율에미치는효 과를조사한결과는 Table 1 과같다. 분만후 60일이내에발정발현율은 75.0% % 로서 실험2 군이높았으나유의차는인정되지않았다. 한편 1회수정후임신율은실험1군및실험2 군이각각 70.3% 및 76.7% 로서대조군의 41.2% 에비하여유의하게높았다(p<0.05). Table 1. Effect of vitamin and mineral complexes supplementation on estrus detection and pregnancy rates of the first estrus after parturition in Korean Native Multiparous Cow n Estrus (%) Pregnancy (%) Control (90.0) 15 a (41.2) Group (75.0) 23 b (76.7) Group (95.0) 27 b (71.0) Group 1 : Vitamin A 35,000IU, Vitamin E 100IU, ß-carotene 200mg, Zn 200mg and Se 1.5mg Group 2 : Vitamin E 100 IU and ß-carotene 200mg a,b Different superscripts indicate significant difference (p<0.05) 한우경산우에서비타민및미네랄복합제의급여가임신기간에미치는효과를조사한결 과는 Table 2 와같다. 임신기간이대조군은수컷과암컷에서각각평균 286.7일및 286.1일이 었고, 실험1군은각각평균 286.3일및 287.7일및실험2군은각각평균 286.5일및 286.3일로서 비슷한경향이었다. Table 2. Effect of vitamin and mineral complexes supplementation on the duration of pregnancy in Korean Native Multiparous Cow n Male Female Control ± ±1.3 Group ± ±2.4 Group ± ±2.7 Group 1 : Vitamin A 35,000IU, Vitamin E 100IU, ß-carotene 200mg, Zn 200mg and Se 1.5mg Group 2 : Vitamin E 100 IU and ß-carotene 200mg

26 한우경산우에서비타민및미네랄복합제의급여가송아지생시체중에미치는효과를조사 한결과는 Table 3 과같다. 송아지체중이대조군은수컷과암컷에서각각평균 26.0kg 및 25.2kg, 실험2군은각각평균 26.3kg 및 25.3kg 이었으나, 실험1군은 27.0kg 및 26.3kg으로대 조군및실험2군에비하여약 1kg 정도무거운경향이었으나, 유의차는인정되지않았다. Table 3. Effect of vitamin and mineral complexes supplementation on the birth weight of calves in Korean Native Multiparous Cow n Male Female Control ± ±0.6 Group ± ±1.0 Group ± ±0.8 Group 1 : Vitamin A 35,000IU, Vitamin E 100IU, ß-carotene 200mg, Zn 200mg and Se 1.5mg Group 2 : Vitamin E 100 IU and ß-carotene 200mg 한우미경산우에서비타민및미네랄복합제의급여가생후 14개월이후첫발정과임신율 에미치는효과를조사한결과는 Table 4 와같다. 생후 14개월-16개월까지의발정발현율은 87.5% % 로서대조구가낮았으나유의차는없었다. 임신율도 65.7% % 로서유사한 경향이었다. Table 4. Effect of vitamin and mineral complexes supplementation on estrus detection and pregnancy rates in Korean Native Primiparous Cow n Estrus (%) Pregnancy (%) Control (85.0) 24 (70.6) Group (90.0) 28 (77.8) Group (87.5) 23 (65.7) Group 1 : Vitamin A 35,000IU, Vitamin E 100IU, ß-carotene 200mg, Zn 200mg and Se 1.5mg Group 2 : Vitamin E 100 IU and ß-carotene 200mg 한우미경산우에서비타민및미네랄복합제의급여가임신기간에미치는효과를조사한결 과는 Table 5 와같다. 임신기간이대조군의수컷이평균 일, 실험1군의암컷이평균 일로서다른대조군및실험군에비하여길었으나유의차는없었다. 한우미경산우에서비타민및미네랄복합제의급여가송아지생시체중에미치는효과를조 사한결과는 Table 6 과같다. 송아지체중이수컷은평균 26.0kg kg 및암컷은 23.1kg kg 으로비슷한경향이었다.

27 Table 5. Effect of vitamin and mineral complexes supplementation on the duration of pregnancy in Korean Native Primiparous Cow n Male Female Control ± ±1.8 Group ± ±1.4 Group ± ±2.2 Group 1 : Vitamin A 35,000IU, Vitamin E 100IU, ß-carotene 200mg, Zn 200mg and Se 1.5mg Group 2 : Vitamin E 100 IU and ß-carotene 200mg Table 6. Effect of vitamin and mineral complexes supplementation on the birth weight of calves in Korean Native Primiparous Cow n Male Female Control ± ±1.2 Group ± ±1.1 Group ± ±0.7 Group 1 : Vitamin A 35,000IU, Vitamin E 100IU, ß-carotene 200mg, Zn 200mg and Se 1.5mg Group 2 : Vitamin E 100 IU and ß-carotene 200mg Ⅳ. 고찰 한우농가의사육규모가다두화되고있으며시설이자동화되고, 사육형태면에서개체관리에 서군사식집단관리형태로전환되면서암소의번식관리가어려워지고있으며, 장기공태및 비육겸용에따른문제가지속적으로발생하고있다. 특히암소에대한분만후체계적인발정 유도프로그램이없는실정이다( 이등, 2001). 암소에서분만후무발정기의연장은자궁퇴축의지연(Short 등, 1990), 분만전영양상태 (Wettmann 등, 2003; Morrison 등, 1999; Spitzer 등, 1995), 포유 (Wettemann 등, 2003), 분만 계절(Asimwe와 Kifaro, 2007; Gebeyehu 등, 2007; Kim 등, 2009), 부주의한발정관찰 (Melendez 등, 2008; Son 등, 2001), 그리고번식장애(Deutscher 등, 1991; Short 등, 1990) 등 이원인이다. 유전적으로는순종보다교잡종에서분만후무발정기가짧은경향이었고(Yavas 등, 2000), 산차에따라서는미경산우의분만간격이경산우보다길었다(Bellows 등, 1978). 분만후 암소의영양소섭취및에너지수준이불균형할경우난포성장장애및황체활동의이상으로 인한첫발정과배란간격을증가시켰고영양소측면에서비타민및미네랄결핍시에도번식효 율이낮아졌다(Wettemann 등, 2003). 번식에영향을미치는비타민으로는 Vitamin A와전구물질 인 β-carotene, vitamin E, Vitamin B 및 C 등이있고, 미네랄로는 Se, Zn, Ca 및 P 등이있다

28 (Hurley와 Doane, 1989). Vitamin A는소에서가장많이결핍되는것으로번식에대한기능 은전구물질인 β-carotene 을급여해도효과적이며(Hurley와 Doane, 1989). 부족하게되면번식 효율이낮아지고, 뇌하수체, 고환및난소기능에유해하게작용하여(Byers 등, 1956), 발정강 도저하, 난소낭종의증가, 수태율저하, 유산및후산정체증가, 사산, 허약또는맹안송아지 생산의위험이높아진다(Ascarelli 등, 1985; Lotthammer, 1979; Ronning 등, 1959). Vitamin E 또는 Se 은후산정체율이높은우군에서후산정체율의감소에효과적이었고(Julien 등, 1976; Trinder 등, 1973), 자궁내막염, 난소낭종및자궁퇴축소요시간이단축되었다(Harrison 등, 1984; Harrison 등, 1986). Zn은미경산우에서수태율과송아지분만율을상승시켰다(Piper와 Spears, 1982). 본연구에서는한우암소의번식효율향상을목적으로제품화되어있는비타민및 미네랄복합제를급여한결과발정발현율및임신기간과송아지체중에는차이가없었으나, 경산우 의임신율이유의하게상승하는경향이었다 (Table 1). 한우에서분만간격이한등(1989) 은 일, 백등(1998) 은 378.8일, 김과김(1980) 은 446.4일및 이등(2001) 은 일이라고하였다. 한우에서무발정의원인은발정관찰실패가 41.9% 로가장많았 으며, 난소의비활성화가 32.6%, 난포낭종 9.3%, 황체존재 7%, 자궁내막염 4.7% 및황체낭종과자 궁축농증이각각 2.3% 이었다( 장등, 2001). 따라서한우번식에서가장큰문제는발정관찰실패에 따른분만간격의증가라고할수있고, 암소가매년송아지를생산하기위해서는분만후 80-85일 까지임신이되어야하므로분만후 50 일경에는발정주기가회복되어야한다( 이등 2001). 분만간격 을단축시키기위해서는발정관찰을용이하게하거나, 발정강도를높일수있는체계가필요할것 이다. 본연구에서는분만전 2개월째부터비타민과미네랄복합제를급여하므로경산우에서발정 발현율은 75-95% 로서비슷하였고, 미경산우에서도 85-90% 로서유사한경향이었다(Table 1, 4). 이러한결과는박등(2003) 이보고한 PGF 2 α를이용한발정동기화의발정발현율 48.9% 보다는높은 수준이었고, GnRH-PGF 2 α-gnrh법의발정발현율인 91.3% 와비슷한수준이었다. 따라서분만후호 르몬에의한발정유도와비교하여비타민과미네랄의지속적인급여도발정발현에효과적일것으로 판단된다. 한우의인공수정임신율이김(1978) 은 88.2%, 이(2003) 는 %, 김등(2002) 는신체충실지수 에따라 %, 번식장애우에 CIDR 처리시 75.1%( 김등, 2002), 발정유도프로그램적용시 54% % 였고년중임신율은 75.0% %, 발정유도임신율이 36.0% %( 박등, 2003) 으 로연구자및번식프로그램에따라다양하였다. 본연구에서는경산우에서분만후첫발정시임신 율이대조군은 41.2% 인데비하여실험군은 % 로유의하게증가하였다(Table 1). 이러한 결과는실험군이번식효율이낮은농가를대상으로하였기때문이지만, 임신율은이전의보고에서 년중및자연발정을활용하였을경우보다는다소낮은경향이었으나, 발정유도를이용하였을경우 보다는높은수준이었다. 한편미경산우에대한임신율은보고가없었으나본연구에서대조군과

29 실험군에서 65.7% % 의임신율을나타냈다(Table 4). 따라서한우암소에서번식효율을향상시 키기위해서는분만전 2개월부터꾸준히비타민과미네랄복합제를급여한다면효과적일것으로 생각된다. 소의임신기간은품종에따라차이가있으나, 한우의임신기간은연구자에따라서평균 280.8일 ( 이등, 2001) 일( 신등, 1999) 로차이가있었으나평균적으로 282.7일 일정도였다( 한 등, 2005). 임신기간이계절및지역별차이는없었다( 신과백, 1984; 최등, 1996). 인공수정송아지 에서암수에따른임신기간은보고가없었으나, 수정란이식송아지의결과를보면수송아지가 일, 암송아지가 일로비슷하였다( 석등, 2009). 유전적인차이에따른임신기간이체내수정란은 평균 일, 체외수정란은평균 일, 및복제수정란은평균 일이었다( 박, 2004). 본연구에 서경산우및미경산우내에서암컷과수컷의차이는없었으나, 경산우는평균 일이었 고미경산우는평균 일로서경산우가 2-4 일긴경향이었다. 한우송아지의생시체중은평균 22.5kg kg 으로연구자에따라차이가있었다( 신등, 1999; 양등, 1999; 최등, 1996; 한등, 2005). 송아지의생시체중이성별에따라수송아지는평균 25.0kg, 암송아지는평균 21.0kg 이었고( 성등, 2002), 한우수정란이식에서태어난경우는수송아지가평균 19.5kg, 암송아지가평균 18.7kg 으로보고되었다( 김등, 1999). 한편젖소수란우에서태어난한우수 정란유래송아지는수송아지가 24.1kg kg 및암송아지가 24.8kg kg 이었다( 박등, 1994; 석등, 2009). 박 (2004) 은수정란의기원에따라송아지의체중이체내수정란유래는평균 25.5kg, 체외수정란유래는평균 31.0kg, 체세포복제수정란유래는평균 39.9kg 으로보고하였다. 본연구에 서는경산우에서는송아지의체중이암컷과수컷이각각평균 25.5kg kg 및 26.0kg kg 으로차이가없었다. 한편미경산우에서는수컷송아지가평균 26.0kg kg으로암컷송아지의 23.1kg kg 에비하여무거운경향이었으나유의차는없었다. 따라서송아지의생시체중에는비 타민및미네랄급여에따른차이는없었으나성별에서는수컷이, 암소의산차에서는경산우에서 태어난송아지의체중이무거운경향이었다. Ⅴ. 결론 한우번식우의단위호당사육두수가증가함에따라분만간격및수태당종부회수가증가하 는농가가증가하고있다. 본연구에서는한우번식우에비타민및미네랄복합제의첨가가발 정발현, 분만간격및임신기간과송아지생식체중에미치는효과를조사하였다. 경산우와미경 산우에서각각대조군은미급여군, 실험1군이 Vitamin A 35,000IU, Vitamin E 100IU, ß-carotene 200mg, Zn methionine 200mg 및 Se 1.5mg, 그리고실험2군은 Vitamin E 100 IU

30 및 ß-carotene 200mg 급여하였다. 실험축은각군당 40 두씩을공시하였다. 복합제를경산우 는임신8개월부터분만후 2 개월까지, 미경산우는생후 12개월부터 16개월까지 4개월간급여하 였다. 경산우에서는발정발현율이 75.0% % 로서비슷하였으나, 1회수정후임신율은 실험1군및실험2군이각각 70.3% 및 76.7% 로서대조군의 41.2% 에비하여유의하게높았다 (p<0.05). 임신기간은 286.1일 일유사한경향이었다. 송아지체중은실험1군이수컷및 암컷에서각각 27.0kg 및 26.3kg으로대조군및실험2군에비하여약 1kg 정도무거운경향이 었으나, 유의차는인정되지않았다. 미경산우에서는발정뱔현율은 85% - 100%, 임신율은 65.7% % 로서유사한경향이었다. 임신기간은 282.3일 일로유사한경향이었고, 송아지체중도 23.1kg kg 으로차이가없었다. 비타민및미네랄복합제는미경산우에는 효과가없었으나, 경산우에서임신율에는효과적이었다. Ⅵ. 참고문헌 1. Ascarelli I, Edelman Z, Rosenberg M and Folman Y Effect of dietary carotene on fertility of high-yielding dairy cows. Anim. Prod. 40: Asimwe L and Kifaro GC Effect of breed, season, year and parity on reproductive performance of dairy cattle under smallholder production system in Bukoba district, Tanzania. Livestock Research for Rural Development 19(10): Bellows RA and Short RE Effects of precalving feed level on birth weight, calving difficulty and subsequent fertility. J. Anim. Sci. 46: Byers JH, Jones IR and Bone JF Carotene in the ration of dairy cattle, li. The influence of suboptimal levels of carotene intake upon the microscopic aspect of selected organs. J. Dairy Sci. 39: Daniels LB, Kellogg DW and Harrison KF Effect of supplementing dairy cows and heifers with selenium and vitamin E. J. Dairy Sci. Abst. 70: 김상진 안성지구의한우인공수정실태조사. 한국가축번식학회지 2: 김중계, 김 승찬. 제주도한우의번식장해발생원인과대책에관한연구. 한국축산학회지 1980:22: 김학영, 송상현, 조헌조 한우번식우농가의번식실태및번식장애치료에관한연 구. 한국가축번식학회지 26: 김흥률, 김덕임, 원유석, 김경주, 권항기, 김창근, 정영채 한우에서수정란이식의효 율증진에관한연구 Ⅳ. 수정란이식송아지의임신기간및체중변화에미치는영향. 한국 수정란이식학회지 14: 박무균, 상병돈, 전병순, 전기준, 한학석, 손동수 수정란이식에의하여생산된한우의 능력에대한수란우의모성효과. 농촌진흥청축산기술연구소축산시험연구보고서국립종축 원편 pp

31 10. 박용수 한우체내, 체외및복제수정란이이식된수란우의임신과분만및산자의 생존. 한국수정란이식학회지 19:

32 구분기관과제소요기간계속연구기간 05 ~ 계속 사업명우량한우암소핵군조성 연구과제명 한우암소선발체계구축 색인용어암소핵군, 경제형질, 초음파, 육종가 연구원별임무 구 분 소 속 성 명 전화번호 담당임무 연구책임자 한우연구실 이지홍 암소핵군총괄 공동연구자 한우연구실 손호진 초음파진단 공동연구자 한우연구실 정대진 육종가분석 공동연구자 영남대학교 김종주 육종가분석 공동연구자 영남대학교 여정수 유전자분석 1. 연구목적및배경 가. 경제형질에연관된실용화가능한유전자군개발나. 우량한우조기선발로검정기간단축및개량기반구축다. 번식우의유전능력평가에생체초음파를활용함으로써개량효과가속화라. 초음파를활용한성장형질및도체형질조기진단 2. 수행방법 시험 1 한우암소조기선발체계구축에관한연구 가. 시험기간 : 2005 ~ 계속 나. 시험장소 : 경북한우암소핵군농가 86호 다. 공시축 : 한우암소 3,000 두, 후대검정우 476두 라. 마. 시험방법 한우고급육결정( 육량및육질) 유전자검증분석및선정 한우경제형질연관고급육결정유전자를이용한통계분석 한우암소핵군농가사업대상축개체분석 바. 조사항목 경제형질연관 2, 6, 17, 27 번염색체후보유전자(SNP) 분석 분석방법 분석형질 : 생시체중, 도체중, 일당증체량, 등지방두께, 등심단면적, 근내지방도 분석모델 : 각 SNP를모델에고정효과로 SAS GLM 분석

33 시험 2 한우암소경제형질육종가분석 가. 시험기간 : 2006~계속 나. 시험장소 : 경북한우암소핵군농가 86호 다. 공시축 : 한우암소 3,000 두, 후대검정우 476두 라. 마. 시험방법 한우핵군농가암소의경제형질초음파( 배장근단면적, 등지방두께및 근내지방도) 자료를활용한유전변이및개체별혈연관계분석 한우핵군농가경제형질육종가분석 조사항목 다형질혼합모형에서유전력및유전상관과환경상관추정 다형질혼합개체모형에서육종가추정 * Yijkl : 종속변수, 각분석형질( 배최장근단면적, 등지방두께, 및근내지방도) * μ : 전체평균 * hi : i 번째축군( 농가) 효과 * yspj : j번째 year-season- 분석자 * bcsk : k번째 BCS 점수 * β1ageijkl : 초음파측정시개월령에대한 linear 효과 * β2age2ijkl : 초음파측정시개월령에대한 quadratic 효과 * β3chijkl : 초음파측정개체의흉위에대한 linear 효과 * β4ch2ijkl : 초음파측정개체의흉위에대한 quadratic 효과 * aijkl : 해당개체의임의상가적유전효과 * eijkl : 임의잔차효과 3. 시험성적 시험 1 한우암소조기선발체계구축에관한연구 가. 한우육질연관후보유전자의 SNP 표 1. 경제형질유전자의후대검정우근내지방육종가와의상관성검증 SNP Type 도체형질육종가 MEBV (BV+SNP) AA BTS_ AC CC TOTAL

34 표 2. 경제형질유전자와후대검정우근내지방도와의유의성검증 SNP BTS_ BTS_ BTS_ BTS_ Type National progeny test 24 month No MEAN±SE AA ±0.62 AC ±0.45 CC ±0.45 Total ±0.18 AA ±1.38 AG ±0.34 GG ±0.20 Total ±0.26 AA ±0.57 AG ±0.27 GG ±0.27 Total ±0.14 CC ±0.41 CG ±0.21 GG ±0.46 Total ±0.32 P-value * * ** 그림 1. 경제형질유전자와후대검정우근내지방육종가와의상관성검증 시험 2 가. 한우암소경제형질육종가분석 경제형질유전변이추정 유전변이및육종가추정을위한통계분석모형은초음파측정 3개형질 즉, 배장근단면적, 등지방두께및근내지방도를동시에고려한다형질평가 모형이며, 혈연관계가있는모든개체들의유전효과를고려한 Animal model 을설정하여분석을실시하였다.

35 표 1. 유전변이추정을위한통계분석모형에고려된요인및수준 구분요인수준 초음파성적 등심단면적등지방두께근내지방도 농가 FC 1,338 O O O 측정년-월-측정자 FC 120 O O O 흉위 FV 1 O O O 흉위 2 FV 1 O O O 개체유전효과 RC 39,405 O O O FC: fixed cross-classified, FV: fixed covariate, RC: random cross-classified 표 2. 유전력, 유전상관추정치 등심단면적등지방두께근내지방도 등심단면적 등지방두께 근내지방도 대각선상 : 유전력, 대각선위 : 유전상관 나. 경제형질육종가분석 그림 2. 경제형질육종가분석결과예시

36 표 3. 한우암소경제형질육종가와도축성적과의상관 육종가 도체성적 A(25%) B(25%) C(25%) D(25%) 두수비율두수비율두수비율두수비율 % 6 6% 5 3% 1 2% % 75.3% % 65.0% % 55.6% % 40.0% % 36 36% 54 35% 17 26% % 25 25% 45 29% 26 40% 3 7 8% 10 10% 23 15% 13 20% 합계 % % % % 등급별출현비율 (%) A(25%) B(25%) C(25%) D(25%) 2008년한우암소근내지방도육종가 1,1+, 그림 3. 한우암소경제형질육종가와도축성적과의상관 표 4. 한우암소초음파표현형선발지수식 경제가중치 회귀계수 등심단면적 등지방두께 근내지방도 I P = EMA BF MS

37 표 5. 사전보정된초음파값과육종가와의상관성분석 월령및 BCS 보정값 표현형지 육종가추정치 육종가지수값 표현형순위 육종가순위 등록번호월령수값 CG EMA BF MS EMA BF MS 시험 1 결과요약 한우암소조기선발체계구축에관한연구 한우후대검정우근내지방도와경제형질유전자와의유의성검증결과 BTS 은 0.043, BTS 는 0.019, BTS 는 로유의성 있게나타났다. BTS003888의경우 AA type의경우평균육종가가 , SNP의효과를보정한육종가가 로높게나타났으며, CC type의경우평균육종가가 , SNP의효과를보정한육종가가 로낮게나타났다. 이러한마커들은근내지방육종가와동시에 한우선발에활용될수있을것으로판단된다. 시험 2 한우암소경제형질육종가분석 한우암소의초음파육종가와도체성적과의상관성분석결과근내지방 육종가 A그룹의경우 1등급이상출현율이 75.3% 로나타났으며, D그 룹의경우 40% 로낮게나타났다. 도체성적 2,3등급의경우육종가 A 그룹은 24% 가나타난반면, D그룹은 60% 로나타났다. 우량암소조기 선발을위하여초음파가보조수단으로활용될수있을것으로판단되며, 초음파표현형선발지수식을활용하여육종가평가없이초음파성적 만을활용하여우량암소를선발할수있는방법도제시하였다. 5. 기대효과가. 종빈우의혈연관계추정나. 경북암소집단암소들에대한유전평가실시

38 다. 육종가추정및추정육종가를활용한선발지침제공라. 종축의선발을통한경북보증씨숫소선발에이용마. 육성기단백질공급을통한증체량향상바. 농후사료급여량의감소로사료비절감및경제수명연장사. 성장을평가하여능력이떨어지는암소를구분하여개체관리함으로써개체의자질향상 시험 3. 번식우생체초음파측정및성장특성평가 Ⅰ. 서론 육우에있어서체중은산육능력을평가하는데가장중요한경제형질이다. 한우의발육능력은 체계적이고현대화된유종을통한개량과배합사료의보급및사양방법개선등환경효과의 개선으로지난 30 년동안커다란증가추세를나타내었다. 가축개량추세조사에따르면 2007년 한우수소의 18개월령평균체중및흉위는각각 567kg, 197cm로조사되었으며암소의경우 18 개월령평균체중과흉위는 357kg 및 167cm 로보고되었다. 소의체중에대한성작곡선함수식은 von Bertalanffy, Gompertz, logistic 등의함수식을이 용하여분석하고있으나 von bertalanffy, Gompertz 함수식은초기월령체중이과대평가되었으 며, 반면에 logistic 함수식의경우성숙체중이과소평가되는경향이있다고보고하였다. 대체적 으로성숙율이빠른개체는성숙체중이적으며이러한개체는암소의경우번식효율이저하될 수있다. 반면번식우로활용되는한우암소의육질관련형질들에대한월령별발육변화에대한 성장곡선함수식을응용한연구는미진한실정이다. 따라서본연구는암소의초음파측정치를이용하여월령별배최장근단면적, 등지방두께및 근내지방도에대한발육곡선을추정하여암소의표준발육곡선을추정하여농가컨설팅의기초 자료로활용하고자본시험을실시하였다. Ⅱ. 재료및방법 1. 분석자료 본연구에이용된초음파측정자료및흉위측정자료는 2006년부터 2008년까지경북암소 핵군조성사업에참여한 90호에서사육되고있는 20개월령이상한우암소 4,348두로부터조사

39 된것이다. 초음파화상은 Real-time B mode 방식의 3.5Mhz 주파수 Leaner probe를장착한 Medison사의 Pico 기종으로현재등급판정부위인제13흉추와제1요추사이의등심면적을측정 하여등지방두께와등심단면적은초음파화상분석전용프로그램에서계산하여수치화하였으 며근내지방도는 27 단계로구분하여분석하였다. 2. 성장곡선모수및성장특성치 비선형회귀식인 Gompertz, von bertalanffy 및 Logistic 모형의성장곡선함수추정은 SAS(1990) 의비선형회귀분석절차인 PROC NLIN 을이용하였다. 추정된성장곡선식은성숙 시항목(A), 성장비(b) 및성숙율(k) 의 3 개의모수로구성된다. 각각의성장곡선모수와성장 특성치들은다음과같이정의된다. 성숙시항목 (A) : 일령이무한대인시점(t= ) 에서의항목 성장비 (b) : 생시항목에대한성숙항목의비율의 log함수 성숙율 (k) : 생시항목도달일령의비율함수로 k가크면조숙성으로그리고 k가 작으면만숙성으로판단 3. 비선형모형 1) Gompertz 모형 성장곡선추정에이용된 Gompertz 모형(Winsor, 1932) 은다음과같다. 여기서 W t : t 일령에서의개체의항목 A : t= 일때개체의성숙항목, 모형의점근상한계 b k e : : : 성장비율의모수 성숙율 자연대수값 t : 일령이다. 2) von Bertalanffy 모형 성장곡선추정에이용된 von Bertalanffy 모형(von Bertalanffy, 1957) 은다음과같다.

40 여기서 W t : t 일령에서의개체의항목 A : t= 일때개체의성숙항목, 모형의점근상한계 b k e : : : 성장비율의모수 성숙율 자연대수값 t : 일령이다. 3) Logistic 모형 성장곡선추정에이용된 Logistic 모형(Nelder, 1961) 은다음과같다. 여기서 W t : t 일령에서의개체의항목 A : t= 일때개체의성숙항목, 모형의점근상한계 b k e : : : 성장비율의모수 성숙율 자연대수값 t : 일령이다. Ⅲ. 결과및고찰 2006년부터 2008년까지경북암소핵군농가 90호에서사육중인암소 4,385두에대한연도별각 측정형질의변화는표 1 에나타나있다. 표 1에서보는바와같이암소의 BCS( 신체충실지수) 는 06년에 3.14 인데비하여 08년도에는 2.95로암소의 BCS가떨어졌는데이는측정시컨설팅 으로암소의사료급여량을조절한결과이며농가에서도살이찐개체의번식성적이떨어지는 것을인식하기때문으로생각된다. 전반적으로측정항목별측정치는매년증가하는경향을나 타내었는데이는암소개체마다알맞은정액을선정해줌으로서암소의체형이나초음파성적 이증가하는것으로사료된다. 등지방두께의경우 BCS가감소됨으로서등지방두께역시얇아 지는경향을나타내었다. 좌골폭의경우 06, 07년 27.1과 29.3cm 보다 08년도에 28.3cm로약간 줄어든경향을나타내었는데이는초임우들이많이조사되면서나타난결과로사료된다.

41 표1. 연도별각측정형질의변화 구분 06년 07년 08년 BCS 흉위 (cm) 체고 (cm) 십자부고 (cm) 좌골폭 (cm) 등심면적 (cm 2 ) 등지방두께 (mm) 근내지방도 초음파성적에의한배최장근단면적의성장곡선추정식과그래프는표 2와그림 1에나타 나있다. 표2. 등심단면적의성장곡선추정식과그래프 Model Parameters( 등심면적) a b k a SE b SE k SE Gompertz von Bertalanffy Logistic 성숙시등심단면적은각각의함수식에서비슷한크기를나타내었는데 Bertalanffy 모형에서 59.04cm 2 로가장높게나타났다. 성숙시등심면적은이등(2008) 이전국 1,718호의 22,451두를 대상으로 von Bertalanffy 모형으로분석한 62.31cm 2 보다낮았는데이는초음파측정에이용된 기종과분석프로그램의차이와표준편차가본시험에서는높게나타난결과로생각된다. 그림 1에나타난각각의모형의그래프의경우 von Bertalanffy 와 Gompertz 는유사한성장곡선을 나타낸반면 Logistic 모형은개월령이증가함에따라등심면적이거의크지않는결과를나타냄 으로서등심면적의성장곡선을추정할경우 연구결과등심면적은 Logistic 모형은이용할수없을것으로생각된다. 본 8 세까지계속적으로성장하는것으로나타났다.

42 등심면적의성장곡선 cm 개월령 von Bertalanffy Gompertz Logistic 그림 1. 등심면적의성장곡선추정 표3. 등지방두께의성장곡선추정식과그래프 Model Parameters( 등지방두께) a b k a SE b SE k SE Gompertz von Bertalanffy Logistic 등지방두께의성장곡선추정식은이등(2008) 의 7.31mm의결과와유사한 7.34mm를나타내었 다. 표준편차가크게나타났는데이것은비육중인개체들이일부자료에포함되어나타난결과 로생각된다. 일반적으로번식우는사료를제한함으로서등지방두께는 7mm 이하로유지하는 것이번식성적에도좋은영향을미칠것으로생각된다. 등지방의성장곡선 cm von Bertalanffy Gompertz Logistic 개월령 그림 2. 등지방두께의성장곡선추정

43 등지방두께의생시등지방두께는 3개의모형모두높게평가되었는데이는 20개월령이하의자료 들이없어높게평가된결과로생각된다. 표4. 근내지방도의성장곡선추정식과그래프 Model Parameters( 근내지방도) a b k a SE b SE k SE Gompertz von Bertalanffy Logistic 근내지방도의성장곡선추정식은표 4 에나타나있다. 근내지방도는 3.1정도를나타내는데이는 3 등급의가장높은등급을나타내고있다. 근내지방도의성장곡선 개월령 von Bertalanffy Gompertz Logistic 그림 3. 근내지방도의성장곡선추정 표5. 체고의성장곡선추정식과그래프 Model Parameters( 체고) a b k a SE b SE k SE Gompertz von Bertalanffy Logistic 그러나이등(2008) 의결과에서는 5.67로 2 등급의중간등급의결과를나타내었다. 이는근내지방

44 도의판정차이, 측정기종의차이이거나비육중인개체들이많이포함됨으로나타난결과로사료 된다. 근내지방도의성장곡선의추정식중 von Bertalanffy 의식이성장곡선과유사한경향을나 타내었다. 생후 10개월령이후근내지방도가점차축적이되면서 15개월령에유의적으로근내지 방도가상승하기시작하여 35 개월령전후로성숙시근내지방도에도달하는것으로나타났다. 체고의성장곡선의추정식은 von Bertalanffy 모형에서 126.9cm로다른모형과같은수치를나타 내었다. 체고의성장곡선 cm von Bertalanffy Gompertz Logistic 개월령 그림 4. 체고의성장곡선추정 체고의경우 Logistic 모형이 von Bertalanffy 나 Gompertz 모형보다생시체고가높게나타났으 며 15 개월령이후비슷한성장을나타내었다. 표6. 십자부고의성장곡선추정식과그래프 Model Parameters( 십자부고) a b k a SE b SE k SE Gompertz von Bertalanffy Logistic 십자부고역시체고와유사한성숙시체고를나타내었으나생시부터약 40개월령까지의성장 곡선은다른경향을나타내었다.

45 십자부고의성장곡선 cm 개월령 von Bertalanffy Gompertz Logistic 그림 5. 십자부고의성장곡선추정 von Bertalanffy 모형은생시가장낮게나타났으며전체적으로 Gomperz 모형이 25개월령까지 육성기간동안높게평가되었다. 표7. 흉위의성장곡선추정식과그래프 Model Parameters( 흉위) a b k a SE b SE k SE Gompertz von Bertalanffy Logistic 흉위의성장곡선 cm 개월령 von Bertalanffy Gompertz Logistic 그림 6. 흉위의성장곡선추정 흉위의성장곡선추정식은이등이추정한 cm 보다큰 185cm 를나타내었다. 생시의흉위는

46 logistic 모형에서높게나타났으나 15 개월령이후에는거의유사한성장곡선을나타내었다. 생시 부터육성기간의차이를나타낸것은본시험에이용된공시축들이 으로측정하여육성기의성장곡선을추정이차이가나는것으로생각된다. 20개월령이상의암소를대상 표8. 좌골폭의성장곡선추정식과그래프 Model Parameters( 좌골폭) a b k a SE b SE k SE Gompertz von Bertalanffy Logistic 흉위의성장곡선 cm 개월령 von Bertalanffy Gompertz Logistic 그림 6. 좌골폭의성장곡선추정 개월 20개월 24개월 28개월 32개월 36개월 40개월 44개월 48개월 52개월 56개월 60개월 64개월 68개월 72개월 76개월 80개월 84개월 88개월 92개월 그림7. 개월령별빈도수 좌골폭은성숙시 30cm 에달하는것으로추정되었다. 다른체형성적과달리좌골폭의경우초

47 산이후거의완료되는경향을나타내었다. 그림 7 은본시험에이용된개체들의월령을나타낸그래프이다. 그래프에서보는바와같이공 시축으로이용된암소의월령은초산에해당하는 으며 2산에해당하는 40~44 개월령의소들도많이분포되어있었다. 28~32개월령의소들이가장많이분포되어있 BCS 나초음파성적은그래프의선이파동을치는경향을나타내었는데이는분만과임신을반복함으로 서나타난결과이다. BCS의분만전후의차이가많이나타난것은간접적으로산차를거듭함으로서젖 생산량이증가하면서나타난결과로사료된다. 초음파성적중등지방두께는 BCS와연관이있으며등 심면적은태아의성장에따라등심이눌려작아졌다가분만후다시늘어나는결과를나타내었다. 연도별체형성적의변화는그림 9에나타난바와같이매년성적이증가하는경향을나타내었 다. 이는개량을통한후보축들의체형성적이높아진것을간접적으로나타내는결과로사료된 다. 연도별 BCS와초음파성적의비교한그래프가그림 8 에나타나있다 BCS BF 년 07년 08년 년 07년 08년 LMA 7 6 MS 년 07년 08년 년 07년 08년 그림 8. BCS 와초음파성적의변화

48 130 WH 130 RH 년 07 년 08 년 년 07 년 08 년 HW CG 년 07년 08년 년 07년 08년 그림 9. 연도별체형성적의변화 개월령은 15.5개월령부터 71.4개월령까지 4개월령간격으로측정 Ⅳ 결론 한우암소의월령별발육성적및도축형질에대한성적의경향을알아보고자경북도내암소 핵군농가 90호 4,005 두에대한성장곡선을분석하였다. 경북도내지역별농가의가임암소의초음파 및체형을측정한자료로부터각각의성장곡선을추정할수있는방정식을산출한결과 Gompertz나 von Bertalanffy 방정식을활용하는것이실측치와유사한결과를나타내었다. 초음파측정결과 BCS, 등심단면적, 등지방두께등각각의항목별로지역적인차이를나타내었 으며 07년도측정치보다성숙시체형이커지는결과를나타내었다. 체형측정결과체고, 십자부고, 흉위, 좌골폭은 50~60개월령에최고에달하였다가그이상에서는 점차적으로줄어드는결과를나타내었으며이는일본의결과와일치하였다. 월령별발육특성중흉위의경우성성숙이완전하게이루어지고번식우로서공용되는 3세 이전에 99% 이상발육이완료되는것으로판단되며등심단면적은 8세까지발육하는것으로나

49 타났다. 이에비하여근내지방도의경우흉위와유사한 3세이전에근내지방도가완료되는것 으로평가되었다. Ⅴ. 인용문헌 1. Brown, J. E., Fizhugh, H. A. Jr. and Cartwright. T. C A comparison of nonlinear models for describing weight-age relationhips in cattle. J. Anim. Sci. 42: Fitzhugh, H. A., Jr Analysis of growth curves and strategies for altering their shape. J. Anim. Sci. 42: Nelder. J. A The fitting of a generalization of the logistic curve. Biometrics. 17: 김내수, 주종철, 이득환 한우의체계분석을위한성장곡선모수의추정. 한축지. 38(2): 김내수, 주종철, 송만강, 정정수, 최양일, 박철진 한우거세및비거세우의성장곡선 특성. 동물자원지. 44(5): 한우암소의흉위, 초음파측정배장근단면적, 등지방두께, 근내지방도에대한발육곡선추 정및신체충실지수효과 한국동물자원과학회지. 50(5):

50 구분기관과제소요기간계속연구기간 07 ~ 계속 사업명우량한우암소핵군조성 연구과제명 한우암소맞춤형교배체계확립 색인용어교배체계, EPD, EBV, 체형성적, 유전력 연구원별임무 구분소속성명전화번호담당임무 과제책임자한우연구실정대진 시험설계및연구총괄 공동연구자한우연구실이지홍 시험자료수집 공동연구자한우연구실손호진 시험자료수집 공동연구자한경대학교이득환 육종가분석 1. 연구목적및배경가. 한우의개량은수소의개량과암소의개량이병행되어야개량의효과를극대화시킬수있으나국가단위개량체계에서는비용및효율성의문제로인하여수소의개량에만주력하고있음. 나. 한우번식농가에서는암소의정확한능력을모른체보증종모우의능력만고려하여정액을선정하거나암소의외모를기초로하여암소의교배계획을수립. 다. 한우번식우의선발및도태기준에있어번식형질과육질형질뿐만아니라체형형질도중요한기준이나농가에서는정확한체형정보를수집하고분석하기어려움. 라. 경북지역내한우번식우의체형개량에대한기초자료가부족함. 마. 따라서암소의정확한능력을파악하고개량의효과를극대화할수있는교배체계확립이필요함. 2. 수행방법 가. 시험기간 : 2007년~계속 나. 시험장소 : 도내한우암소핵군농가 다. 공시축 : 20 개월령이상의혈통 고등등록된한우암소

51 라. 조사항목 공시축기초자료( 생년월일, 초음파측정시월령, 혈통등록여부등) 초음파측정자료(EMA, BF, MS27) 및신체충실지수 (BCS) 5단계 체형측정자료( 체고, 십자부고, 흉위, 좌골폭) 통계분석방법 < 시험 1> 한우암소최적교배계획확립 공시축에초음파를측정하고, 초음파측정치를이용하여각형질( 배 최장근단면적, 등지방두께, 근내지방도) 별유전능력평가 각형질별육종가표준화실시 개체별전체사용종모우사이에태어날자손의능력예상치추정 (EPD) 추정된자손의 EPD 와어미의추정육종가 (EBV) 의차가가장큰종모 우선발 송아지능력예상치추정원리 - 암소의초음파성적을이용한추정육종가 (EBV) 와수소의추정육종가 (EBV) 를이용하여후대의능력예상치(EPD) 를추정하기위한계산 식은아래와같다. SEPD ijk = 1 2 (SEBV ik+sebv jk )[1-wr ij ] 여기서, SEPD ijk : i 개체( 암소) 와 j 개체( 수소) 사이에태어날송아지의 k형질의표준화 능력예상치 EBV ik : i 개체( 암소) k 형질의표준화육종가추정치, EBV jk : j 개체( 수소) k 형질의표준화육종가추정치, w : 가중치(2), r ij : 두개체간의혈연관계( 자손의근교계수 2)

52 교배조합작성원리 - 암소에가장적합한교배대상종모우를선정하기위한계산식은아래 와같다. S - Sire p =MAX j = 1 n [MAX k = 1 n' (SEPD ijk -SEBV ik )] 여기서, S_Sire p : 교배대상종모우 p(n), SEPD ijk : i 개체( 암소) 와 j 개체( 수소) 사이에태어날소아지 의 k 형질의표준화능력예상치, SEBV ik : i종빈우의 k형질에대한표준화육종가추정치 < 시험 2> 농가한우체형성적을이용한유전모수추정 한우암소핵군농가암소의체형측정자료( 체고, 십자부고, 흉위, 좌 골폭등) 를이용한육종가및유전모수추정 환경요인의효과 본연구에서조사한체고, 십자부고, 흉위, 좌골폭등의형질에영향을 미치는지역, 출생년도, 출생월, 등록구분및개월령의효과를추정하기 위해다음과같은선형모형에의해최소제곱법(Harvey, 1979) 으로 분석하였다. Y ijklm n = μ + L i + BY j + BM k + age l + SG m + BCS ihklm n + e ijklm n 여기서, Y ijklmn : i번째지역, j 번째출생년도, k 번째출생월, l번째월령, μ L i BY j BM k age l : m 번째계대에대한개체의측정치 전체평균 : i 번째지역의효과(i=1,2,,n) : j 번째출생년도의효과(j=1,2,,n) : k 번째출생월의효과(k=1,2,,n) : m 번째월령의효과(m=1,2,,n)

53 SG m BCS ijklmn e ijklmn : m 번째계대의효과(m=1,2,,n) : : BCS에대한공변이 유전모수및육종가의추정 각개체의고유한임의오차 본연구에서조사된각형질의유전모수와육종가를추정하기위하여 다음과같은다형질혼합모형을사용하였다. Y ijkl = μ i +F ij +YS ik +BCS ijkl +age ijkl +a ijkl +e ijkl 여기서, Y ijkl : i번째형질의 j 번째농장, k 번째출생년도_ 계절, l번째 μ i 개체에대한측정치 : i 번째형질의전체평균(i=1,2,,n) F ij : i번째형질의 j 번째농장의효과(i=1,2,,n) YS ik : i번째형질의 k 번째체형측정년도 _ 계절의효과(k=1,2,,n) BCS ijkl : 개체의 BCS에대한공변이 age ijkl : 개체의개월령에대한공변이 2 a ijkl : 개체에대한임의효과 ~(0, Aσ a ) 여기서 A는혈연계 e ijkl 수행렬 : 관측치의임의오차 ~(0, Iσ 2 e ) 이상의다형질혼합모형을행렬에의한방정식으로표기하면다음과같다. (Henderson, 1976) Y = X b + Z u + e 여기서, Y : 각형질의관측치에대한벡터 X : 고정효과( 사육지역, 출생년도- 계절) 에대한계수행렬 Z : 개체에대한임의효과에관한계수행렬~ b : u : 알려지지않은고정효과에대한추정치벡터 개체에대한육종가벡터

54 e : 각형질에대한임의오차벡터~ 본연구에서는 EM-REML Algorism을바탕으로하여전산프로그램한 REMLF90과 BLUPF90(Misztal, 2001) 을이용하여유전모수를추정하였는 데, 이 Package에서잔차분산이 이하로수렴될때까지반복추정 하였다. 3. 시험성적 시험 1. 한우암소최적교배계획확립 암소의도축성적조사 년부터 2009년까지유전능력평가두수중 525두도축 구분전체이상치제거 두수 평균도체중 kg kg 표준편차 ±42.38kg ±38.2kg 최대값 158kg 248kg 최대값 460kg 460kg 이상치제거 : 도체중평균 - 2 표준편차 = 247kg이하제거 암소의초음파배최장근단면적 Code 육종가별도축성적비교 구 분 초음파배최장근단면적 CODE 육종가( cm2) A B C D 전체 두 수 평 균 표준편차 ±9.10 ±9.58 ±10.63 ±9.61 ±9.72 최소값 최대값

55 암소의초음파등지방두께 Code 육종가별도축성적비교 초음파등지방두께 CODE 육종가( mm) 구분전체 A B C D 두수 평균 표준편차 ±4.62 ±4.62 ±6.06 ±6.46 ±5.95 최소값 최대값 암소의초음파배최장근단면적, 등지방두께조합에따른육량등급출현율 육량등급 전체 BB이상조합 CC이하조합 그외조합 두수출현율두수출현율두수출현율두수출현율 A % % 2 3.6% % B % % % % C % 6 6.1% % % 전체두수 암소의초음파근내지방도 Code 육종가별등급출현율 근내지방도 ( 점) 초음파근내지방도 CODE 육종가전체 A B C D 두수출현율두수출현율두수출현율두수출현율두수출현율 % 2 1.4% 1 0.8% % 6 5.8% 2~ % % % % % 4~ % % % % % 6~ % % % % % 8~ % % 4 3.2% 3 2.2% 4 3.8% 전체두수 이상 70.1% 87.4% 72.2% 64.0% 51.9% 6이상 31.4% 49.7% 29.4% 23.7% 19.2%

56 시험 2. 농가한우체형성적을이용한유전모수추정 사육지역 사육지역, 출생년도, 출생월, 측정시월령및계대에따른빈도 두수출생년도 두수출생월두수측정시월령 두수계대두수 경산시 1, ,531 경주시 ~30 1, ,523 고령군 ~ 구미시 ~ 군위군 , ~ 김천시 , ~ 문경시 ~ 봉화군 상주시 성주군 영주시 영천시 예천군 49 의성군 281 청도군 268 청송군 79 포항시 26 Total 5,368 5,368 5,368 5,368 5,368 각형질별일반통계량 구 분 측정시월령 BCS 체고 ( cm) 십자부고 ( cm) 좌골폭 ( cm) 흉위 ( cm) 두수 5,368 5,368 5,368 5,368 5,368 5,368 평균 표준편차 ±18.25 ±0.49 ±4.48 ±4.21 ±2.62 ±10.02 최소값 최대값

57 각형질별사육지역의효과 사육지역 체고 ( cm) 십자부고 ( cm) 좌골폭 ( cm) 흉위 ( cm) 경산시 f ± f ± g ± gh ±0.569 경주시 a ± ab ± b ± ab ±1.013 고령군 bcdef ± bcdef ± fgh ± abcd ±1.491 구미시 def ± cdef ± fg ± cde ±0.846 군위군 cd ± cdef ± cde ± efg ±0.864 김천시 a ± a ± a ± a ±0.627 문경시 de ± f ± d ± f ±0.612 봉화군 a ± b ± fg ± bc ±0.847 상주시 a ± ab ± ab ± a ±1.060 성주군 cd ± bc ± bc ± cd ±0.589 영주시 cd ± def ± fg ± i ±0.615 영천시 c ± cde ± g ± de ±0.576 예천군 cdef ± bcdef ± defg ± fghi ±1.183 의성군 ef ± ef ± def ± fgh ±0.692 청도군 c ± bcd ± de ± de ±0.707 청송군 g ± g ± defg ± hi ±0.976 포항시 abcd ± abcd ± h ± efghi ±1.549 각형질별출생년도의효과 출생년도 체고 ( cm) 십자부고 ( cm) 좌골폭 ( cm) 흉위 ( cm) d ± f ± e ± f ± e ± f ± e ± f ± d ± e ± d ± e ± c ± d ± c ± d ± c ± c ± b ± c ± b ± b ± a ± b ± a ± a ± a ± a ± a ± a ± a ± a ±0.773

58 각형질별출생계절의효과 출생계절 체고 ( cm) 십자부고 ( cm) 좌골폭 ( cm) 흉위 ( cm) 봄 ab ± ab ± c ± c ±0.293 여름 a ± a ± ab ± ab ±0.326 가을 a ± a ± a ± a ±0.350 겨울 b ± b ± bc ± bc ±0.309 각형질별측정시월령의효과 측정시월령 체고 ( cm) 십자부고 ( cm) 좌골폭 ( cm) 흉위 ( cm) g ± g ± h ± g ± ~ f ± f ± g ± f ± ~ e ± e ± f ± e ± ~ d ± d ± e ± d ± ~ c ± c ± d ± c ± ~ c ± c ± c ± c ± ~ b ± b ± b ± b ± a ± a ± a ± a ±0.484 각형질별계대의효과 계 대 체고 ( cm) 십자부고 ( cm) 좌골폭 ( cm) 흉위 ( cm) ± b ± ab ± a ± ± b ± ab ± b ± ± b ± b ± ab ± ± ab ± ab ± ab ± ± a ± a ± a ±0.569

59 나. 결과요약 시험 1. 한우암소최적교배계획확립 년부터 2009년까지농장에서도축된암소중 2008년유전능력평가 된암소는총 525 두로나타났으며, 이중이상치를제거한두수는 512 두로나타났다. 2. 초음파배최장근단면적과초음파등지방두께의 Code 육종가모두 Code 육종가간의유의성은보이지않았으나두육종가의조합은 조합이상일때 C등급출현율이 6.1%, CC조합이하일때 50.9% 로큰 차이를보였다. 3. 초음파근내지방도의경우육질등급 1등급이상에해당하는근내지방도 4이상이 Code 육종가 A일때 87.4%, C일때 51.9% 로 35.5% 의출현율 차이를보였으며, 1+ 등급이상에해당하는근내지방도 6이상도 Code 육 종가 A일때 49.7%, C일때 19.2% 로 30.5% 의출현율차이를보였다. BB 시험 2. 농가한우체형성적을이용한유전모수추정 1. 조사된한우암소의평균월령은 개월령, 신체충실지수(BCS9) 는 5.13 점으로나타났고, 체형형질인체고, 십자부고, 좌골폭및흉위의평 균은각각 로나타났다 ±4.48 cm, ±4.21 cm, 28.25±2.62 cm및 ±10.02 cm 2. 사육지역의효과에서는경주시와김천시, 여모든형질에서유의적으로다소높게조사되었고, 상주시가다른지역에비하 경산시와청송군 은다른지역에비하여모든형질에서다소낮게조사되었다. 도의효과에서는 높게나타났고, 다. 출생년 2007년에태어난개체들이모든형질에서유의적으로 년도가증가할수록모든형질이증가하는경향을보였 출생계절의효과에서는여름과가을에태어난개체들이봄과겨울 에태어난개체들에비해모든형질에서우수하게나타났으며, 측정시 월령의효과에서는모든형질에서월령이증가할수록성적도높아지는 경향을보였다. 계대의효과에서는체고를제외한모든형질에서성적

60 간유의적인차이를보이긴하였으나, 정한경향은나타내지는않았다. 계대의증가나감소에따른일 4. 향후계획 번식우육질과육량을고려한교배계획작성 최적교배계획농가제공, 인공수정시참고자료로활용 대상축및후대축의도축성적수집, 유전능력평가결과및교배계획결과와도축성적비교분석

61 과제구분경상수행시기 4년연구기간 07 ~ 10 사업명 연구과제명 우량한우암소핵군조성 우량한우생산을위한수정란이식기술개발 색인용어체내수정란, Folltropin-V, Antorin, PEG, 채란, 첨가제 연구원별 임무 구분소속성명전화번호담당업무 연구책임자한우연구실최수호 054) 시험연구설계및시험연구책임 공동연구자농진청축산연손동수 과배란처리기술자문 1. 경기도축산시험장주석천 과배란처리및채란 강원도축산연구센터황환섭 충북종축시험장최재원 충남축산시험소김홍기 전북종축시험소김용수 전남축산시험장김기수 제주축산진흥원김영훈 연구목적및배경 가. 국내소이식가능수정란회수저조 : 국내 5.0개 세계 6.0개 나. 한우공란우의과배란처리기법이표준화되어있지않아연구자간의 회수성적차이가큼. 다. 다배란수정란이식기법 (MOET) 을이용하면종모우위주의능력개량에 비해 2~3배의개량효과를얻을수있음 라. 우량수정란을효율적으로생산할수있는방법과수정란이식수태율 마. 바. 향상을위한방법모색. 연구소내우량송아지생산으로암소의핵군조성과경북종모우개발 사업에활용 농가의우량송아지생산및생산비절감을위한소자가인공수정및 이식기술에대한농가수요증가 사. 인공수정및수정란이식기술의습득을위한소의생식기와실습축대체 효과높음. 아. 수입되고있는소모형기는고가이며부피와무게로인하여편리하게 사용하는데어려움이많음.

62 2. 수행방법 시험 1 : 한우수정란이식표준화연구( 공란우과배란처리기술표준화 ) 가. 공시축 : 공란우, 수란우 나. 시험기간 : 2007년 ~ 2010 년(4 년) 다. 시험장소 : 본연구소및도내축산농가, 각도연구소 라. (1) (2) 연구내용 각도연구소의과배란처리방법조사 과배란처리기술표준화 호르몬의종류및투여량 호르몬의투여기간및투여방법 (3) 공란우선정기준연구 공란우산차, BCS, 공란우의유전능력 채란간격및회수 (4) 수란우, 수정란상태, 이식조건에따른수태율 수란우, 수정란상태, 이식기술 마. 시험방법(3 차년도) (1) 한우수정란채란기관조사 8개도축산연구기관의과배란처리방법및수정란회수성적 (2) FSH 호르몬투여방법에따른과배란처리반응조사 점감법과단일투여법비교 호르몬종류 : folltropin, antorin 투여량및투여기간 : Folltropin(240, 280mg), 3일및 4일 구분과배란방법처리두수 처리 처리 1구 Folltropin 240mg(3 일) 10 2구 Folltropin 280mg(4 일) 14 (3) 수란우, 수정란상태, 이식조건에따른수태율

63 3. 시험성적 표 1. 각도별과배란처리방법 도별 호르몬종류 투여량 (mg) 투여기간 투여방법 발정동기화 경기 Folltropin 320 4일 점감법 CIDR+EB+P4 강원 Antorin 20 3일점감법자연발정 /CIDR 충북 Antorin 21 3일점감법자연발정 /CIDR 충남 Folltropin 400/320 4일동량법 CIDR 전북 Folltropin 320/200 1회 Single CIDR 전남 Folltropin /Antorin 200/30 1회 Single CIDR 경북 Folltropin 240/280 3,4일점감법 CIDR 제주 Antorin 28 4회점감법 CIDR 각도별과배란처리방법은표 1 에서와같다. 사용한호르몬은 Folltropin과 Antorin 였고투여량은 200~400mg과 20~30mg을사용하였 으며, 투여기간은 1~8 회이며투여방법은점감법, 동량법, 1회투여로구분 하여처리하였다. 표 2. 각도별과배란처리결과 도별처리두수반응두수반응율 (%) 회수란( 개) 이식가능수정란( 개) 이식가능수정란비율 (%) A B C D E F G H 계 각도별과배란처리방법에따른결과는표 2 에서와같다. 과배란반응 두수의평균은 92.3%, 총회수수정란수는평균 7.4 개, 이식가능수정란수는 4.7 개로나타났다.

64 표 3. 수란우조건에따른수정란이식수태율 발정 황체 상태 1 BCS 2 구분이식두수수태두수수태율 (%) 확인 a 미확인 b 1등급 등급 등급 ~ ~ ~ ~ 황체상태 : 1 등급( 황체 2cm 이상이고크라운명확), 2 등급( 황체 1.5cm 이고크라운명확), 3 등급( 황체 1cm 이고크라운명확) 2 BCS( 신체충실지수) : 1~5 기준 수란우의상태에따른수정란이식수태율은표 3 과같다. 수란우의발 정을확인한수란우가미확인된개체에비해서유의적으로높은수태율을 보였으며, 수란우의신체충실지수(BCS) 3.0~3.25에서 70.2% 로가장높게 나왔으나유의적차이는보이지않았다(P<0.05). 또한황체등급에따른수 태율의차이는없었다 (P<0.05). 표 4. 수정란발달단계에따른수정란이식수태율 구분이식두수수태두수수태율 (%) ExpB 수정란 상태 BL E-BL ML 수정란상태 : ExpB( 확장배반포), BL( 배반포), E-BL( 초기배반포), ML( 쌍실배) 수정란의발달단계에따른수정란이식수태율은표 4 와같다. 수정란의 발달단계가 E-BL과 BL에비해서 ExpB와 ML에서더높게나왔으나유 의적차이는보이지않았다 (P<0.05).

65 표 6. 이식시술자의이식조건에따른수정란이식수태율 구분이식두수수태두수수태율 (%) 난이도 이식부위 난이도 : 1( 이식소요시간 5 분이내), 2(5~10 분), 3(10 분이상) 2 이식부위 : 1( 자궁각선단부굴곡지점이상), 2( 굴곡지점), 3( 굴곡지점아래) 이식시술자의이식조건에따른수정란이식수태율은표 5 와같다. 난이 도를나타내는이식소요시간은 5분이내로시술한것이 5분이상보다더 높게나왔으며, 또한이식부위가자궁각선단부보다더깊이이식된수란 우에서더높은수태율이나왔으나유의적차이는보이지않았다 (P<0.05). 4. 결과요약 각도별과배란처리는두종류의호르몬으로투여기간, 투여방법을 다양하게사용하였으며, 과배란반응두수는 92.3%, 총회수수정란수는 평균 7.4 개, 이식가능수정란수는 4.7 개였음. 또한농가수란우는이식시수란우의발정확인과신체충실지수를 3. 0~3.25 로관리하는것이수태율을높일수있는방법이라사료되고, 이식시술에서있어서도시술시간을줄이고이식부위도자궁각선단 부보다더깊이이식하는것이보다높은수태율을얻을수있는방 법이라사료됨. 시험 2 : 소인공수정및수정란이식모형기개발 가. 연구내용 (1) 모형기의개념과디자인(1 차년) 자료의수집과사용환경및마켓팅분석

66 양상된모델의비교분석, 평가및문제점검토 구체적인디자인개발방향과범위수립 (2) 모형기실물사양제작및기능검사(2 차년) 모형기의실물사양제작 모형기의기능검사 - - 암소자궁실물과의동질성 모형자궁의수정기술적용 (3) 모형기실증실험(3 차년) 기존의암소이용한수정기술과모형기이용습득율비교 수정및이식기술습득경제성비교 나. 결과표 1. 인공수정교육의성별및연령구분인원비율 성 연 별 령 남 여 대 대 대 대 대이상 인공수정교육의성별과연령은표 1 과같다. 교육자의남자가 98.2% 로여 자보다높았으며, 교육연령대는 50대비율이 51.9% 로가장높게나타났다. 인공수정교육의자궁경관촉지, 통과여부, 경과시간은표 2 와같다. 자 궁경관을 60% 이상촉지할수있는교육생은 59.3% 였으며, 촉지하는데걸 린시간은 3분이내는 81.5% 였다. 또한자궁경관의 60% 이상통과할수있 는교육생이 57.4% 로자궁경관의주입기통과시간이 5분이내는 74.1% 로 나타났다.

67 표 2. 인공수정교육의자궁경관촉지, 통과여부와시간 자궁경관촉지 여부 자궁경관촉지 시간 자궁경관통과 여부 자궁경관통과 시간 구분인원비율 80% 이상 ~80% ~60% ~40% ~20% 초이내 분이내 분이내 분이내 분이상 % 이상 ~80% ~60% ~40% ~20% 분이내 분이내 분이내 분이상 분이상 표 3. 인공수정교육후인공수정에대한자신감및교육희망시간 인공수정자신감 교육희망시간 구분인원비율 80% 이상 ~80% ~60% ~40% ~20% 일 0 0 3일 일 일 일 인공수정교육후인공수정에대한자신감및교육희망시간은표 3과 같다. 인공수정에대한수행에대한자신감이 60% 이상은 63% 였으며, 교육

68 희망시간은 3~5일이 74.1% 로나타났다. 모형자궁제작 - 실온경화용실리콘재질 : 4 종류( HRS' 실리콘회사) - - 경도에따른자궁경관제조 인조점토로제작한생식기모형 그림 1. 기존수입되고있는소모형기 그림 2. 실온경화용실리콘및경도에따른자궁경관제조

69 다. 결과요약 그림 3. 인공수정교육후자궁경관촉지를 인조점토로제작한생식기모형 60% 이상할수있는사람은 59.3% 로소요되는시간은 3분이내가 81.5% 였다. 또한주입기의자궁경관 통과를 60% 이상시킬수있는사람은 57.4% 로소요되는시간은 5분이 내가 74.1% 로나타남. 교육수료후인공수정에대한자신감 60% 이상이 63% 였으며, 교육을희 망하는시간은 3~5일이 74.1% 였다. 3. 기대효과 가. 인공수정과수정란이식에관련된농가맞춤형기술교육의활성화 나. 인공수정및이식에대한효율적인기술교육으로농가개량에촉매역할 다. 축산을공부하는수의및축산학과실습교제로사용가능 라. 독창적인모형기개발로인한산업재산권획득및수입품대체효과

70 과제구분 경상 소요기간 계속 연구기간 04 ~ 11 사업명 축산신기술개발및보급 연구과제명 가축번식효율개선연구 색인용어 한우, 임신진단, OPU, 정자, 성분리 연구원별 임무 구 분 소 속 성 명 전화번호 담당임무 과제책임자 한우연구실 박용수 시험설계및연구총괄 경북대 박영식 정자동결및결과검증 한우연구실 정대진 통계및육종가분석 Ⅰ. 서론 인공수정후비임신/ 임신진단을빨리진단하면할수록임신과다음임신까지의기간을축소 할수가있고이는농가의소득과직결되어있다. 1990년대이전까지는한우의임신진단은수 정또는교배후, 일에직장검사로판단하였다. 이방법으로는공태기간단축이지난한 상황이다. 만약 20 일경에비임신/ 임신진단을할수있다면 30일이상의공태기간을줄일수 가있어생산성을증가시킬수가있다. 이와관련하여 1990 년대이후부터는한우의수정적기, 조기임신및번식장애를감정할수있는방법들이속속들이개발되고있다. 하지만비용, 활용 방법등에제한이있어보다간편한방법의개발필요성이요구되고있다. 최근혈액과우유에서발색반응을이용한 ELISA법이개발되고있으나한우의경우우유채 취가어렵고혈액채취도번거로움이있어키트자체개발의어려움보다는어떤시료를사용하 며어떤물질을표적으로하느냐가더중요한연구대상이되었다. 대안으로제시된것이오줌 속에존재하는 steroids 호르몬의대사산물즉프로제스테론(PG) 과에스테르원설페이트(E1S) 를 측정하는방법이었다. 돼지의경우 E1S를측정함으로서조기에임신을진단할수있다는근거 가제시되었지만(Stefanakis 등, 2000) 아직키트가개발된경우는없었고더욱이소의경우오 줌내에있는 PG 에대한연구는거의없다. 돼지의임신또는비임신을조기에진단하는것은생산성증진에중요한요인이된다. 돼지 에있어서임신진단을위한가장보편적인기본은교배또는수정후 18-24일째발정의징후 가없는경우를바탕으로하고있다. 수퇘지로서검사할시정확도는 98% 까지도달한다고하 지만검사자에따른개별차가많아주관적판단과경험에의존할수밖에없는단점이있다. 도 플러(Doppler) 방법또는 A-mode 의초음파를사용한방법은점차그이용도가증가되고있다. 그러나그정확도가임신돈일경우 97% 까지비임신일경우 80-85% 까지정확도를보이고있 지만이들의이용은교배후최소한 35일후가되어야한다는단점이있어사용의제한이있

71 다.(Meredith 1989, Pig News Inf ). Real-time B-mode 초음파방법은정확도도더 높고교배후 16-20일경에진단을할수있어모든단점을극복할수있지만고가의장비를 사용해야한다는문제점이있어널리사용하기에는문제점이있다. 이런문제점들을극복하기 위하여많은연구자들은혈액내프로제스테론(progesterone) 이나에스트르원설페이트(oestrone sulphate = E1S) 를측정하는방법을적용하였다. 그러나혈액내프로제스테론을측정하는방법 의단점은발정주기가짧아지거나길어질때위양성(false positive) 의빈도가많아지는문제점 이있다. 이에반하여교배후 23과 30일경에혈액내 E1S측정하는방법은임신진단에있어서 더좋은정확도를나타내었다. 이에기초하여혈액내 E1S측정은돼지의조기임신진단이나 수태조절을위한한방법법의하나로사용되어왔다. 그러나이방법을농가에서상용적인방 법으로사용하는데는많은제한점이있음이지적되어왔는데가장큰요인은혈액채취가용 이하지않다는점이다. 따라서본연구에서는오줌내의 E1S를측정함으로써 E1S를측정할수있는면역분석법즉 TR-FIA 법을개발하고돼지의임신진단을위한기준을설정하여임신진단의정확도를판정하 고자한다. 또한한우에서뇨중 PG의함량을측정하여임신진단기초자료로활용하고자한 다. 1. 돼지뇨채취 Ⅱ. 재료및방법 경북축산기술연구소및인근돼지사육농가 3곳에있는돼지를인공수정시킨뒤인공수정후 1일부터 오후사료급이 (pm 4:00) 시에배뇨를하면 50ml의 tube에받아 -20 도씨에분석시까지보관하였다. 인터 널스텐다드커브를위하여경북축산기술연구소에서사육중인종돈에서뇨를채취하여이용하였다. 2. 한우뇨채취 경북축산연구소에서관리하고있는한우에서수정후 1일부터외음부를자극하여배뇨를유도하여뇨 를채취하였다. 임신확인은 40 일째초음파검사로판정하였고, 검사결과에따라뇨를임신뇨와미임신뇨 로분리하여분석하였다. 채취한뇨는 -20 에서분석때까지보관하였다. 3. 돼지뇨에서 E1S 함량조사 96 plate에코팅완충용액에 1차항체를코팅한후 37 의인큐베이터에서 2 시간동안반응시켰다. plate 를직접 3 번워싱하고, non-specific binding 을최소화하기위해 2% 의 BSA로 37 에서 2시간동안 blocking 하였다. plate 를재차워싱하고, 표준적정곡선을그리기위해다양한농도로일정비율로희석된 E1S 와정량하고자하는시료들, 그리고경쟁반응을위해 conjugate 인 Eu-E1G 를적정농도로희석하여

72 plate에로딩한후 1시간동안상온에서약하게 shaking 시킨다. 반응이다일어난후, 다시 plate를워싱 하고 Enhancement Solution 을 well당 200ul 씩넣고상온에서 15분동안다시 shaking 후, DELFIA 기계 인 VICTOR 2D (DELFIA 1420) 로티렉션하였다. 4. 2D 를이용한한우뇨의단백질분석 1) Sample 의준비 임신한우뇨와미임신한우뇨의 Sample을 70% 의황산암모늄으로단백질부분을침전시킨 뒤, 원심분리하여상등액을걷어내고, 침전물을얻는다. 이침전물을다시 PBS에용해시킨 뒤, 투석을거쳐염을제거하고 0.45um membrane filter를거쳐최종적인 Sample 을준비한다. 임신한우뇨와미임신한우뇨의단백질패턴의차이를분석하기위해 PI값과분자량으로 2회 분리하는 2 Dimensional Electrophoresis 를실시한후, 동일농도로맞추기위해 BCA 정량을 실시하였다. 2) 2D과정 rate 실시 굳어있는 strip의 gel을불리는과정으로서두개의 strip 을준비한다. 하나의 strip은임신한 우뇨 sample을로딩하고다른하나의 strip은미임신한우뇨 sample 을로딩한다. 흰판에 Sample + Sample buffer solution을 350ul 로딩해준뒤, Strip을집게로고정시키고한쪽의막 을벗겨낸뒤, Gel 방향을 buffer 에닿게하여한쪽방향으로슬며시놓는다. 1h 안정화시킨 후, mineral oil을 strip위에 2~3ml 깔아준다. mineral oil은물과섞이지않아수분의증발을방 지해준다. 이후 R.T 50V 12h동안 Focusing 을해주고 ( 단백질 PI 별로분리) 12시간후에 strip의 oil을닦아낸후 equilibration buffer 1과 2를약 3ml 로딩하여( 각 20min) 단백질을고 정시켜준다. 최종적으로단백질 1차분리및고정이완료되면 2차분자량별분리를위해 Gel 을준비하였다. 3) 전기영동 전기영동을위해 acrlyamide gel 10%, 최종 38ml 로용액을만든뒤, Gel 카셋트에로딩하여 Gel 을만들어준다. 준비해둔 Strip을 Gel 이바깥쪽방향으로오게유리판에설치한뒤, 양 끝을잘라내고조심스럼게 Gel 위에끼운다. 그위에 Low melting agarose 0.5g과 Bromophenol blue가 0.001% 섞인용액으로조심스럽게로딩해준다. 그다음, tank buffer를 채워주고 60V overnight으로 Gel 을내린후, Coomasi brilliant blue 염색약으로 Gel을 4h 염색 한뒤, Destaining solution(10% methanol, 10% Acetic acid) 으로염색약을제거한뒤 Spot으 로나타난 Sample 별단백질발현의차이를관찰하였다.

73 Ⅲ. 결과및고찰 돼지뇨임신/ 비임신이확실한시료를제공받아 DELFIA 법으로카운트값을구하고, 상기의표준적정 곡선과비교하여시료속의 E1S 농도를구하였다 (Table 1). 돼지의경우임신평균농도가 77 ng/ml 이 었고, 미임신은 5.15 ng/ml 로서유의차가인정되었다. Table 1. Concentration of E1S in pregnant or non-pregnant swine No of sample (Head) Concentration (ng/ml) Others Pregnancy 21 77±2.7 day after AI Non-pregnancy ±0.01 돼지뇨에서임신진단의정확도를비교한결과는 Table 1 과같다. 그결과, 돼지의경우비임신뇨에서 는 E1S의함량이약 5ng/ml 정도를나타내었고, 임신뇨에서는평균약 70ng/ml의 E1G 함량을나타내었 다. 기잔별임신의정확도는미수정인경우 100% 정확도였으나, 수정후기간별정확도는 20일이전에 는 38.5%, 31-40일은 16.6%, 41일이후는 66.7% % 였고 21-30일이 90.9% 로가장높았으나 Table 1. Pregnancy diagnosis different day after artificial insemination in swine 기간미수정 -20일 정확도 (%) 한우에서임신진단을위한기준치설정을위하여프로제스테론을측정한결과는 Tabl 2와 같다. 희석배수는각각 50 및 100 배로하였다. 임신 4-19일에는 50배희석에서 pg/ml 로서임신기간의증가에따라농도가증가하는경향이었다. 그러나임신 20-40일 사이에는 3-278pg/ml 로서개체및임신기간에따른변화가심하였다. 한편미임신에서도 pg/ml 로서개체에따른차이가심하였다. 돼지에서의 E1S와는다르게한우뇨에서 PG 의경우임신과비임신뇨의 PG 의농도차이가거의없는것으로판별되었다. 이결과는매우의외의결 과로서, 사람의경우배란후황체가형성된후에급격히상승하는것을볼수있으며또한소의경우혈 액내또는우유속의 progesterone 농도가급격히면하여일반적으로소의조기임신진단을위하여 progesterone 을측정한다. 따라서 progesterone 의뇨중대새사물인 pregnanediol-glucuronide(pg) 의농도

74 가혈액중의 progesterone 농도 pattern 에따라변할것으로추정하였으나전혀다른결과를얻어새로운 사실을확인할수있었다. 내분비생리학적인측면에서볼때소는돼지나사람과는다른 steroid homones 의대사과정을갖는다는사실을의미한다. Table 2. Concentration of progesterone in bovine First (pg/ml) Second (pg/ml) Day 50x 100x 50x 100x non non 한우의임신뇨에서임신관련단백질을검출하기위하여이차원전기영동을실시한결과는 Fig 1 과같다. 좌측의사진이임신한우뇨의 2D 결과사진이며우측의사진이비임신한우뇨 의 2D 결과사진이다. 데이터에서보여지는바와같이임신한우뇨, 비임신한우뇨의두 sample 간에단백질발현의차이가없음을알수있다. 기존의 2D 법개선책으로침전을위한 황산암모늄비율을조정하고, 염을제거하기위한 PD-10 column 을도입했으며, 동결건조과정 을통해단백질을 powder로제작하여정확히농도를맞추는작업을거쳤으나두 sample간의 단백질발현의차이가없었다.

75 Fig 1. Picture of 2D image in pregnancy(left) and non-pgranant(right) urine in bovine Ⅳ 결론 돼지및한우에서임신진단의효율성을높이고간편하게사용할수있는방법의개발을위 하여뇨에서에스테르원설페이트의검출을시도하였다. 그결과돼지뇨에서임신기간별정확 도는임신이 41.8%, 미임신이 90.9% 로서기대치에미치지못하였다. 소의뇨에서 E1S를분석 한결과에서도임신과미임신의차이및임신기간중에서유의한차이를분석할수없었다. 임 신및미임신소의뇨에서단백질차이를분석하기위하여전기영동을실시한결과단백질의 차이를확인할수없었다. Ⅴ. 인용문헌 1. A. Stefanakis, C. Boscos, C. Alexopoulos, E. Krambovitis. Development and evaluation of a direst enzyme immunoassay for oestrone sulphate in urine as a tool for diagnosis of early pregnancy in swine. Animal Reproduction Science 58(2000) Hatzidakis,G., Katrakili,K., Krambovitis, E. Development of a direct and specific enzyme-immunoassay for the measurement of oestrone sulphate in bovine milk. J. Reprod. Fertil. 98(1993) Saba, N., Hattersley,J.P. Direct estimation of oestrone sulphate in ssow serum for a

76 rapid pregnancy diagnosis test. J. Reprod. Fertil. 62(1981) Sren, E., Mattioli, M., Gaiani,R., Tamanini, C. Direct estimation of urine oestrone conjugate for a rapid pregnancy diagnosis in sows. Theriogenology 19(1983) Sweeney, H. J., Sutherland, H. R. Oestrone sulphate for pregnancy diagnosis in sows. Vet. Rec 121(1987) C. Depierreux.,I. Graff., V. Lancelot., M. Denis., A. Vanderplasschen., C. S. Wysen. Optimization of murine CD8+ Cytotoxic T - lymphocyte Responses to Pseudorabies virus. J. Immunological Methods 203(1997) 김종배. 호르몬분석. 제1회 Postgraduate Course of Cliniacal Endocrinology, 내분비학회, 2002, Jong Bae Kim. Ph.D Thesis,1983. Development of Chemiluminescence Immunoassay For The Measurement Of Plasma Steroids and Urinary Steroid Metabolites, 9. E. Soini, H. Kojoia. Time-Resolved Fluorometer for Lanthanide Chelates-A New Generation of Non-isotopic Immunoassay. Cli. Chem. 29(1983) Kohen F, Kim J B, Barnard G, Lindner H R. An assay for urinary estriol-16aglucuronide based on antibody-enhanced chemiluminescence. Steroids 36(1980) Barbard G J, Collins W P, Kohen F, Lindner H R. The measurement of urinary estriol-16a-glucuronide by a solid-phase chemiluninescence immunoassay. Journal of Steroid Biochemistry 14(1981)

77 과제구분 경상 소요기간 계속 연구기간 04 ~ 계속 사업명 축산신기술개발및보급 연구과제명 가축정액동결기술개발 색인용어 말, 정자, 동결, 인공수정 연구원별 임무 구 분 소 속 성 명 전화번호 담당임무 과제책임자 한우연구실 박용수 시험설계및연구총괄 공동연구자 경북대 조길재 말인공수정 마사회 조영재 종마선정 경북대 박영식 정자동결및결과검증 1. 연구목적및배경 가. 다양한가축의정자동결기술을확보하므로한우및고유유전자원 보존과증식에활용 나. 경북형종모우개발에대비한정액동결기술의확보( 연구완료) 다. 향후다양한가축( 말, 칡소) 의정액동결기술및인공수정체계확립 농림기술개발과제 생산기술개발 인공수정및수정란이식을이용한한국형승용마 연구로추진 2. 수행방법 가. 시험기간 : 2009년 나. 시험장소 : 경상북도축산기술연구소, 마사회장수목장 다. 공시축 : 수말(2 두), 암말(10 두) 라. 시험방법 : 칡소정자의동결보존 울릉한우( 칡소) 유전자원보존및증식연구와연계추진 동결정액생산 (1,000 straw) 인공수정및수정란이식을이용한국형승용마생산기술개발 말정액채취및동결체계확립 동결정액을이용한인공수정 10두 농림기술개발과제로추진 마. 조사항목 : 정자생존율, 활력, 기형율, 동결후생존율, 임신율

78 3. 시험성적 정액량및 Total motile (TM) 과 Progressive motile (PM) 측정 * 표1. 승용말종류에따른총정액량, 정자수, 활력및전진운동성 품종정액량 (ml) 정자수 ( 10 6 /ml) 생존율 *,% 전진운동 **,% 교잡종 138.3±9 175±9 75.9±3.7 a 58.4±4.6 a 아랍 56.5±4 86±3 48.8±7.8 b 23.2±4.2 b 생존율 ; Live spermatozoa / Number of spermatozoa ** 전진운동 ; Progressive spermotozoa / Number of spermatozoa 품종에따른정자의 TM 및 PM 운동성 Total motility Progressive motility % 10 % min 30 min 1 hr 2 hr Incubation Time min 30 min 1 hr 2 hr Incubation Time Arab LE Mixed LE Arab LE Mixed LE 희석액(egg yolk 또는 skim milk) 의효과 Total motility Progressive motility % % min 30 min 60 min 120 min Incubation Time 0 0 min 30 min 60 min 120 min Incubation Time LE no MFR no LE no MFR no 그림2. 아랍종씨수말동결융해정자의 TM 및 PM

79 Total motility Progressive motility 16 9 % min 30 min 1 hr 2 hr 4 hr 8 hr % min 30 min 1 hr 2 hr 4 hr 8 hr Incubation Time Incubation Time LE no MFR no LE no MFR no 그림3. 교잡종씨수말동결융해정자의 TM 및 PM 희석액(egg yolk 또는 skim milk) 에보존용 buffer 첨가효과 Total motility Progressive motility % % min 30 min 60 min 120 min 0 0 min 30 min 60 min 120 min Incubation Time Incubation Time LE buffer MFR buffer LE buffer MFR buffer 그림4. 아랍종씨수말동결융해정자의 TM 및 PM Total motility Progressive motility % 15 % min 30 min 1 hr 2 hr 4 hr 8 hr min 30 min 1 hr 2 hr 4 hr 8 hr Incubation Time Incubation Time LE buffer MFR buffer LE buffer MFR buffer 그림5. 교잡종씨수말동결융해정자의 TM 및 PM

80 Skim milk extender에보존용 buffer Total motility 첨가의효과 Progressive motility Percentag e(% ) Percentag e(% ) min 30 min 60 min 120 min Incubation Time 0 0 min 30 min 60 min 120 min Incubation Time LE no LE buffer LE no LE buffer 그림 6. 아랍종씨수말동결융해정자의 TM 및 PM Total motility Progressive motility % 15 % min 30 min 1 hr 2 hr 4 hr 8 hr Incubation Time 0 0 min 30 min 1 hr 2 hr 4 hr 8 hr Incubation Time LE no LE buffer LE no LE buffer 그림 7. 교잡종씨수말동결융해정자의 TM 및 PM Egg yolk extender에보존용 buffer Total motility 첨가의효과 Progressive motility Percentag e(% ) Percentag e(% ) min 30 min 60 min 120 min Incubation Time 0 0 min 30 min 60 min 120 min Incubation Time MFR no MFR buffer MFR no MFR buffer 그림 8. 아랍종씨수말동결융해정자의 TM 및 PM

81 Total motility Progressive motility 14 8 % min 30 min 1 hr 2 hr 4 hr 8 hr Incubation Time % min 30 min 1 hr 2 hr 4 hr 8 hr Incubation Time MFR no MFR buffer MFR no MFR buffer 그림9. 교잡종씨수말동결융해정자의 TM 및 PM 인공수정 표2. 냉장정액( 운반시간) 을이용한인공수정 냉장시간 수정( 두) 수태 (%) 임신 (%) 30분이내 10 6 (60.0) 6 (60.0) 4 시간 2 1 (50.0) 1 (50.0) 계 12 7 (58.5) 7 (58.5) * 수태 : 인공수정후 15 일째, 임신 : 인공수정후 60일령 표3. 동결정액을이용한인공수정 구분 수정( 두) 수태 (%) 임신 (%) 고양마굿간승마장 4 2 (50.0) 1 (33.3) 연구소 3 2 (66.7) 2 (66.7) 합천농장 1 0 (0) 0 (0) 계 8 4 (50.0) 3 (37.5)

82 임신검사( 초음파사진) 그림10. 수정후 16 일( 좌), 수정후 20 일( 우) 그림11. 수정후 32 일( 좌), 40 일( 태아및자궁, 우) 그림12. 수정후 60 일( 자궁)

83 4. 결과요약 가. 교잡종말의정액량은평균 138.3ml 이었고, 아랍종은평균 56.5ml이었 다. 정자수는교잡종말이평균 /ml로서아랍종의평균 /ml 에비하여많았다. 한편 TM과 PM은교잡종말이평균 75.9% 및 58.4%, 아랍종은평균 48.8% 및 23.2% 로서교잡종말이유 의하게높은경향이었다 (p<0.05) 나. TM 비율은교잡종씨수말의것이동결융해직후 20.1% 로서아랍종 의 1.42% 에비하여유의하게높았고, 배양시간 30 분, 1시간및 2시간 째에도높은경향이었다. 한편 PM 비율도교잡종씨수말의것이높 은경향이었다. 다. 아랍및교잡종씨수말의동결융해정자의체외배양시간에따른 TM 및 PM 을조사한결과, 아랍종은동결융해직후에는 egg yolk extender(mfr) 가 skim milk extender(le) 에비하여높은경향이었 으나배양시간의경과에따라유사한경향이었다. 한편교잡종씨수 말은동결완충액및배양시간에따른 TM과 PM 의차이가없었다. 라. 아랍및교잡종씨수말의동결융해정자에보존용 buffer의첨가가 체외배양시간에따른 TM 및 PM 을조사한결과, 아랍종씨수말은 skim milk extender(le) 의 TM 및 PM이 egg yolk extender(mfr) 에비하여높은경향이었으나유의차는없었다. 한편교잡종씨수말 은 skim milk extender(le) 의 TM 및 PM이 egg yolk extender (MFR) 에비하여 30분및 1 시간까지는유의하게높은경향이었으나, 2 시간이후는유사한경향이었다. 마. 아랍및교잡종씨수말의 skim milk extender에동결한정자의융해 후보존용 buffer의첨가유무가체외배양시간에따른 TM 및 PM을 조사한결과, 아랍종씨수말은 buffer 첨가직후에는 TM 및 PM이 유의하게높았으나배양시간의경과(30 분이후) 에는유사한경향이었 다. 한편교잡종씨수말도 buffer 첨가직후에는 TM 및 PM이높은 경향이었으나배양 1 시간이후에는차이가없었다.

84 바. 아랍및교잡종씨수말의 egg yolk extender에동결한정자의융해 후보존용 buffer의첨가유무가체외배양시간에따른 TM 및 PM을 조사한결과, 아랍종씨수말의 TM 비율은 buffer 첨가및배양시간 에따른차이가없었으나, PM 비율은첨가직후에는높았으나배양 30 분이후에는비슷하였다. 한편교잡종씨수말은 buffer 첨가및배 양시간에따른 TM 및 PM 이차이가없었다. 사. 채취한정액을이용하여인공수정을실시한결과희석직후(30 분이내) 수정에서는 60%, 냉장운반(4 시간) 후인공수정하여 50% 의임신율을 나타내었다. 한편동결정액을이용하여인공수정한결과 8두에서 4두 가수태되었으나, 최종임신확인은 3두의 37.5% 였다.

85 과제구분경상소요기간계속연구기간 04 ~ 계속사업명축산신기술개발및보급연구과제명초음파이용 BCS 측정및번식효율증진사료급여프로그램개발색인용어말, 정자, 동결, 인공수정 연구원별 임무 구 분 소 속 성 명 전화번호 담당임무 과제책임자 한우연구실 손호진 시험설계및연구총괄 공동연구자 한우연구실 정대진 통계분석 1. 연구목적및배경 신체충실지수(BCS) 를촉진과시각에의존하여측정함에따라측정자 의주관적인판단 초음파측정시등지방두께만으로신체충실지수를측정하기어려움 살찐정도를측정할수있는견갑부와좌골부위의지방두께를측정함 으로서보다정확한 BCS를측정함으로서개체관리를통하여번식장 애예방 2. 수행방법 공시축 : 도내암소핵군농가가임암소및연구소경산우 암소핵군농가 연구소경산우 : 417두 : 309두 시험장소 : 도내암소핵군농가및연구소 조사항목 초음파측정( 등지방두께, 견갑부, 좌골, 늑골부위) BCS 별사료급여량변경후번식성적조사 3. 시험성적

86 BCS 에따른체중및체형의변화 BCS 평균 n 체중 327± ± ± ± ± ±3.71 흉위 168.0± ± ± ± ± ±0.58 체고 123.0± ± ± ± ± ±0.30 십자부고 124.2± ± ± ± ± ±0.26 체장 133.0± ± ± ± ± ±0.49 고장 44.6± ± ± ± ± ±0.20 좌골 25.0± ± ± ± ± ±0.17 BCS 에따른등지방두께의변화 BCS 평균 n 등심면적 42.58±2.04 e 47.09±0.45 de 52.72±0.36 cd 58.40±0.50 bc 63.57±0.94 b 72.46±2.07 a 53.23±0.31 등지방두께 2.14±0.08 e 2.52±0.05 e 3.71±0.07 d 5.34±0.10 c 6.68±0.30 b 8.18±0.38 a 3.99±0.07 견갑 2.16±0.14 d 3.06±0.09 d 4.95±0.09 c 7.01±0.14 b 8.06±0.35 b 9.83±1.36 a 5.13±0.09 좌골 1.95±0.08 e 2.91±0.07 e 5.04±0.11 d 7.80±0.16 c 10.33±0.33 b 12.39±0.97 a 5.49±0.11 실측치와초음파에의한 BCS의상관 등심면적, 등지방, 견갑, 좌골을이용한 BCS y = x R 2 = BCS = ( EMA)+( BF)

87 +( S)+( W) 여기에서, EMA 는등심면적( 배최장근단면적) BF는등지방두께 S는견갑부지방두께 W는좌골부지방두께 등지방, 견갑, 좌골을이용한 BCS y = x R 2 = BCS = ( BF) +( S)+( W) 여기에서, BF는등지방두께 S는견갑부지방두께 W는좌골부지방두께 등지방두께별발육형질(BCS, 둔부의지방두께) 등지방두께 발육형질 (mm) n 등심면적 BCS 견갑 둔부 0 X ± ± ± ± X ± ± ± ± X ± ± ± ± X ± ± ± ±0.40 둔부의지방두께별발육형질(BCS, 등지방두께)

88 둔부지방 발육형질 (mm) n 등심면적 BCS 등지방 견갑 0 X ± ± ± ± X ± ± ± ± X ± ± ± ± X ± ± ± ± 결과요약 경북도내암소핵군농가의가임암소를대상으로초음파를이용한 정결과는같다. BCS 1. BCS에따른초음파성적은 BCS에따라유의적인차이를나타내었으 며등심면적은 3.25와 3.5, 3과 3.25, 2.5와 2.75간의유의적인차이를 보이지않았으며 2.75와 3 간은유의적인차이를나타내었음. 측 2. 등지방두께는 BCS에따라유의적인차이를나타내었으며견갑의지 방두께는 2.5와 2.75, 3.25와 3.5간에는유의적인차이가나타나지않았 음. 3. 좌골부의지방두께는 2.5와 2.75간에유의적인차이를나타내지않았는 데이는 BCS가낮을경우각부위의지방두께를측정하기어려워나 타나는결과로사료됨. 4. 등심면적와등지방두께, 견갑부, 좌골부의지방두께를이용하여도출한 식에의한 BCS와실측치간의정확도는 81% 를나타내었으며등지방두 께, 견갑부와좌골부의지방두께를이용하여도출한식은 79% 의정확 도를나타내었음. 5. 등지방두께를 3mm, 5, 8, 8mm 으로분류하여조사한결과 5mm 정도유지할경우 BCS 3을나타냈으며 8mm 은 BCS 3.5를나타내

89 었음. 6. 좌골부의지방두께를 3mm, 5, 8, 8mm 으로분류하여조사한결과 8mm 정도유지할경우 BCS 3을나타내며 8mm 은 BCS 3.25를나 타냄. 4. 금후계획 시험종료시까지지속적으로시험추진 시험성적을기초로각부위의지방에따라사료급여량설정 BCS에따른번식성적조사

90 과제구분 경상 소요기간 계속 연구기간 04 ~ 11 사업명 축산신기술개발및보급 연구과제명 E1S를이용한돼지조기임신진단체계구축 색인용어 한우, 임신진단, OPU, 정자, 성분리 연구원별 임무 구분소속성명전화번호담당임무 사업총괄 한우연구실 박용수 관련업무총괄 과제책임자 한우연구실 박용수 시험설계및연구총괄 경북대 박영식 정자동결및결과검증 한동대 김종배 통계및육종가분석 Development and evaluation of time-resolved fluorescence immunoassay for Estrone-1-Sulphate in urine as a tool for diagnosis of early pregnancy in swine Abstract Early identification of pregnancy or non-pregnancy in sows is considered very important, as the management of sows during the post service period is crucial if the breeding efficiency of a herd is to be maximized. The present study describes the development of a simple and reliable time-resolved fluorescence immunoassay(tr-fia) method for the estimation of estrone-1-sulphate in swine urine, which was assessed as a means for early diagnosis of pregnancy and monitoring fertility in sows. We demonstrated cross activity between Anti- estrone-1-glucuronide antibody (Clone 155) and estrone-1-sulpate. The method is based on a direct competitive heterogeneous immunoassay by the typical procedure of competitive immunocomplex formation. For detection of estrone-1-sulpate, Anti- estrone-1-glucuronide antibody (Clone 155) was first coated on polystyrene microplates, and estrone-1-sulpate was captured by the primary antibody with estrone-1- glucuronide labeled with europium. The immunocomplex was subsequently dissociated by the enhancement solution with Triton X-100, acetic acid and chelators. The free europium was detection by DELFIA 1420 detector. The mean estrone-1-sulphate concentration was significantly higher in pregnant sows than in non-pregnant sows and in sows in estrus. Taking the concentration of 20pg/ml as a cut-off, all cases of non-pregnant sows and sows in estrus were negative. Urine estrone-1-sulphate concentrations in pregnant sows at 23-day intervals post service are 14~16ng/ml. It is concluded that the satisfactory sensitivity of the present assay in combination with

91 the good correlation for pregnancy from the present field trial makes this method a very useful technique for early pregnancy diagnosis in swine; the simplicity of urine sampling makes also it suitable for practical use. Introduction The early pregnancydiagnosis is considered very important for productivity on the management of sows. There are several methods for pregnancy diagnosis, which are absence of estrus, using boar, Doppler, A-mode ultrasound and Real-time B-mode ultrasound. However, these methods have many problems. The most common method of diagnosis is based on the absence of estrus at 18 to 24 days after mating. When it is inspected using boar, the accuracy is up to 98% but this method is depended on experience or ability of manager. It is increased the availability of Doppler and A-mode ultrasound, but the accuracy of this method was only % for non-pregnant sows. It is also hard to confirm the pregnancy before 35 days post mating. Real - time B - mode ultrasound has higher reliability and early stage of gestation (16 20 days post mating), but it is very expensive. Specific hormonal assay, such as progesterone and oestrone sulphate (E1S) concentration in serum, have been used to get over these problems in swine. The measurement of serum progesterone has false positive diagnosis. However, the measurement of E1S presented accuracy results at 23 to 30 days of gestation. Plasma E1S concentration are high between days 23 and 30 days of pregnancy, its determination has been used as a means for early pregnancy diagnosis. However, the application of this method in farm on a routine basis restricted because blood collection is sometimes disturbs the animals. Several researchers had proposed that the method of estimating urine E1S. Stefanakis etal. (2000) and Seren et al., (1983) had estimated and reported that E1S test could potentially use for the pregnancy diagnosis at 23 to 30 days of gestation in swine. Measurement of hormone concentration in urine samples provides a convenient, non-invasive means of monitoring pregnancy (Adlercreutz et al., 1982; Kesner et al., 1992). This can provide women with a means of defining their pregnancy (Adlercreutz et al., 1982; Royston et al., 1991; Blackwell et al., 1992). The present study describes the development of a simple and reliable time-resolved fluorescence immunoassay (TR-FIA) method for the estimation of estrone-1-sulphate in swine urine, which was assessed as a means for early diagnosis of pregnancy and monitoring fertility in sows. Material and Methods

92 Animals and sampling This experiment was conducted in Gyeongsangbukdo Livstock Research Institute with a capacity of 500 sows. A total of 100 health crossbred sows (Landrace Yorkshir) were used. All sows were housed in the same building from weaning to 5 days prior to parturition, under the same feeding and management conditions. Single urine samples were taken during urination form sows for E1S analysis. In order to obtain urine easily, sows were kept quiet and rested for 3 h, and then they were prompted to stand up for feeding. In such a way urination was performed within 10 min. The urine samples were taken in the afternoon (1600 h) and kept at -20?to analysis. These sows pregnancy was examined using A-mode dofler on 50 days after AI. Reagents Antiserum raised in mouse against estrone-3-glucuronide (clone 155), and Eu-labeled estrone-3-glucuronide were described previously. TR-FIA procedure The method is based on a direct competitive heterogeneous immunoassay by the typical procedure of competitive immunocomplex formation. Flat-bottomed microtitration plates (maxisorb, Nunc, Kamstrup, Denmark) were coated with 200 ul per well (dilution factor 1:1000). anti-estrone glucuronide immunoglobulin from mouse (clone 155) in carbonatebicarbonate buffer (Krambovitis et al., 1986.) Excess antibody was washed off with distilled water containing 0.05% Tween-20 (Merck, Darmstadt) and the coated wells were blocked with 200 ul per well of 1% w/s BSA in saline for 2 h at RT. A hundred microliters of urinesample or corresponding standard required for the calibration curve (estrone sulphate) were added to each well in duplicate, plus 100 ul of Eu-labeled estrone glucuronide conjugate at working strength (dilution factor 1:2000). The mixture was incubated atrt for 1 h. After three washings with 0.05% Tween-20 in distilled water, the immunocomplex was subsequently dissociated by the enhancement solution with Triton X-100, acetic acid and chelators. The free europium was detection by DELFIA 1420 detector. Statistical analysis Data were subjected to one-way analysis of variance and means were compared by Duncan-test. Additionally, correlation analysis was carried out to study interrelations between the parameters examined.

93 Results Count Eu-E1G (dilution rate) Fig 1. Concentration determinant of Europium-E1G conjugate (Eu-conjugate 1:1000 ~ 1: , 5n serial dilution) 1) Concentration determinant of Europium-E1G conjugate In order to determine the optimal concentration of conjugate, we were diluted conjugate in an immunoplate, increasing the dilution factor from 1:100 by 5 times, and then added enhancement solution and measured with DELFIA The results are as in Fig. 1. We obtained the optimal concentration curve of conjugate, and took 30%~50% of total binding based on 1:100 dilution factor as the optimal concentration and set Eu-E1G to 1: ) Determinant of coating concentration of first antibodies There are three kinds of antibody to E1G, which are clone 8A3, clone 3F11 and clone 155, and they are subclasses of rat IgG2a, rat IgG1 and mouse IgG2b, respectively. In order to determine the coating concentration of primary antibody, we diluted each antibody in coating buffer solution, increasing the dilution factor from 1:100 by 2 times, and coated it on an immunoplateand incubated it for two hours. Then, in order to remove specific binding, we blocked it with physiological saline containing 2% BSA. After that, Eu-E1G was added so that it reacted with the coated primary antibody. In addition, enhancement solution was added and measurement was done with DELFIA As in Figure 2, we obtained the coating graph of each primary antibody, and from the graph, the present research team determined the coating dilution factor to be 1:500 for clone 3F11 and clone 155 and 1:1000 for clone 8A3 so that the binding affinity of the antibodies was maintained.

94 Fig 2. Determinant of coating concentration of first antibodies (Antibody dilution factor Clone 8A3(Rat anti-e1g IgG2a class) : 1:1000, Clone 155(Mouse anti-e1g IgG2b class) : 1:500, Clone 3F11(Rat anti-e1g IgG1 class) : 1:500) Fig 3. Cross-reactivity of clone 155 and E1S. (E1S concentration : Top Conc. (50ng/ml) 2n serial dilution, E1G concentration : Top Conc. (10ng/ml) 2n serial dilution)? : E1G,? : E1S 3) Cross-reactivity E1S In case of the pig, among metabolites in urine, E1S should be measured. Thus, it is very

95 important whether thecoated primary antibodiesabove cross-react with E1S. To examine this, the research team made standard curves for E1G and E1S and investigated cross reactivity between them. According to the result, clone 8A3 ad clone 3F11 showed little cross reactivity with E1S, and only clone 155 showed high cross reactivity of over 90% with E1S (Figure 4). Therefore, the research team used clone 155 as the primary coating antibody for measuring E1S, and made the standard curve of E1S (Figure 5). Standard curve of 25X dilution sample in swine assay Standard curve of 50X dilution sample in swine assay Counts y = Ln(x) R 2 = Counts y = Ln(x) R 2 = conc. of E1S(pg/ml) conc. of E1S(pg/ml) Fig 4. Standard curves of E1S immunoassay by TR-FIA counts E1S Standard curve PBS x 100 x 200 x Conc. of E1S(pg/ml) Fig. 5. Standard titration curve of E1S in non-pregnant sows

96 Fig 6. Measurement of E1S in swine urine (25 dilution) 4) Identification of pregnancy/nonpregnancy with standard curve Using thestandard curve made by the method described above, we distinguished between pregnancy and non-pregnancy. Urine samples were collected from artificially inseminated pigs on each day during the period between Day 20~90 from the artificial insemination and from a control group of non-pregnant pigs. In the results, non-pregnant urine showed E1S content of around 150pg/ml and pregnant urine around 40ng/ml on the average. Discussion In this study, we have developed an TR-FIA method for measuring E1S directly in swine urine. This method was based on the synthesis of an E1S as immunogen for the production of specific antibodies. The observed sensitivity of 70 ng/ml in urine samples was satisfactory. The swine conceptus is capable of synthesizing large amounts of estrogen, which are probably converted into the sulphoconjugated form in the uterine wall (Perry et al., 1973). Studies ofsteroid hormones in pregnant sows showed that there was a significant increase in plasma E1S concentration by the 16 th day of gestation, which reaches peak values between 23 and 30 days of gestation (Hattersley et al., 1980; Stoner et al., 1980; Saba and Hattersley, 1981). The concentrationof E1S and its conjugate in the post-breeding female's plasma, serum, urine, faeces abd saliva has been assessed in order to diagnosis pregnancy(robertson et al., 1978, Hattersley er al., 1980, Choi et al., 1987; Vos etal., 1999; Ohtaki et al., 1997). The level of E1S in blood from days 22 to 30 was consisitently greater than 200pg/ml compared with levels from nonpregnant sow (Horne et al., 1983). In this study, E1S in urine from pregnant sow was 15,000pg/ml, it was lower than 1,000pg/ml

97 in nonpregnant sow. Thus, urine E1Sconcentrations are very low during estrus and remain low in non pregnant sows at different stages of estrous cycle, whereas, the concentration increases significantly during specific stages of pregnancy at 23-day intervals(fig 6). It is concluded that the satisfactory sensitivity of the present assay in combination with the good correlation for pregnancy from the present field trial makes this method a very useful technique for early pregnancy diagnosis in swine; the simplicity of urine sampling makes also it suitable for practical use. When experiment is conducted by the TR-FIAmethod, the concentration of conjugate is very important. If the concentration is low, all conjugate binds to the primary antibody and as a result the detection value does not reflect the change of concentration, and if it is high, the level of non-specific binding increases and as a result the detection value becomes inaccurate. Accordingly, in order to find the optimal concentration of conjugate, we adopted as the optimal concentration of conjugate the concentration when it was 30~50% based on the detection value at a dilution factor of 1:100. In the results of titration for clone 8A3, clone 3F11 and clone155, affinity for conjugate was acknowledged significant for all the three antibodies. However, in the ingredients used in our experiment, the primary antibody was related to E1G-antibody and conjugate. Accordingly, in order to detect E1S using them, their cross-reactivity is very important. For this reason, the present research team investigated cross reactivity with E1S using the three kinds of antibody and found that clone 155 has the highest cross reactivity (Figure 4). Based on this result, we used clone 155 in quantitative experiments. When the E1S content in urine was analyzed using samples collected on Day 20~90, it was highest in the samples collected on around Day 23, and when the content was compared with that in non-pregnant urine, the difference between pregnant urine andnon-pregnant urine was clear. It is concluded that the satisfactory sensitivity of the present assay with the good correlation for pregnancy from the field trial and this method is a very useful technique for early pregnancy diagnosis in swine. Reference 1. Adlercreutz H, Brown J, Collins W et al. The measurement of urinary steroid glucurohides as indices of the fertile period in women. J Steroid Biochem 1982;17: Blackwell LF, Brown JB. Application of time-series analysis for the recognition of increasesin urinary estrogens as markers for the beginning of the potentially fertile period. Steroids 1992;57: Guilan Wang, Jingli Yuan, Xiaodan Hai, Kazuko Matsumoto. Homogeneous time-resolved fluoroimmunoassay of 3,5,3'-triiodo-l-thyronine in human serum by using europium

98 fluorescence energy transfer. TAL-8219, Hattersley, J.P., Drane, H.M., Mutthews, J.G., Wrathal, A.E., Saba, N., Estimation of oestrone sulphate in the serum of pregnant sows. J. Reprod. Fertil. 58, James S. Kesner, Edwin A. Knecht, Edward F. Krieg, Jr, Geoff Barnard, Heikki J. Mikola, Fortfine Kohen, Mohamed M. Gani and John Coley. Validations of time-resolved fluoroimmunoassays for urinary estrone 3-glucuronide and pregnanediol 3-glucuronide. Steroids, 1994, vol. 59, March. 6. Kesner JS, Wright DM, Schrader SM, Chin NW, Krieg EF. Methods of monitoring menstrual function in field studies: efficacy of methods. Reprod Toxicol. 1992;6: Ohtaki T, Moriyoshi M, Nakada K, Nakao T, Kawata K Radioimmunoassay of saliva estrone sulfate in pregnant sows. J. Vet. Med. Sci. 59: Perry, J.S., Heap, R.B., Amoroso, E.C., Steroid hormone production by pig blastocysts. Nature 245, Robertson, H.A., King, G.J., Plasma concentrations of progesterone, oestrone, oestradiol 17a and oestrone sulphate in the pig at implantation, during pregnancy and at parturition. J. Reprod. Fertil. 40, Royston P. Identifying the fertile phase of the human menstrual cycle. Stat Med. 1991;10: Saba, N., Hattersley, J.P., Direct estimation of oestrone sulphate in sow serum for a rapid pregnancy diagnosis test. J. Reprod. Fertil. 62, Seren, E., Mattioli, M., Gaiani, R., Tamanini, C., Direct estimation of urine estrone conjugate for a rapid pregnancy diagnosis in sows. Theriogenology 19, Stefanakis A., C. Boscos, C. Alexopoulos, E. Krambovitis. Development and evaluation of a direct enzyme immunoassay for oestrone sulphate in urine as a tool for diagnosis of early pregnancy in swine. Animal Reproduction Science, 2000, Stoner, C.S., Bazer, F.W., Thatcher, W.W., Wilcox, C.J., Combs, G.E., Knight, J.W., Wetteman, R.P., White, C.E., Relationship between plasma estrone sulphate and reproductive performance in the sow. J. Anim. Sci. 51_Suppl. 1., 547, abstr.

99 과제구분 경상 소요기간 계속 연구기간 04 ~ 11 사업명 축산신기술개발및보급 연구과제명 암소번식능력향상을위한첨가제개발 색인용어 한우, 암소번식, 첨가제 연구원별 임무 구 분 소 속 성 명 전화번호 담당임무 과제책임자 한우연구실 손호진 시험설계및연구총괄 공동연구자 한우연구실 정대진 통계및육종가분석 1. 연구목적 반추위발효조절을통한반추가축의생산성극대화 반추위총미생물수와섬유소분해박테리아의수를증가시켜저질조 사료의소화율증진번식에필요한비타민, 공태기간단축 미량광물질추가공급으로번식효율향상으로 2. 수행방법 공시축 : 영주, 문경지역의한우번식우 37두 시험장소 : 영주, 문경한우번식우농가 사양관리 : 번식우농가관행 - 번식우사료 3kg, 조사료 : 볏짚 5kg, 첨가제 : 0.3kg 조사항목 초음파측정( 등지방두께, 견갑부, 좌골, 늑골부위) 번식성적, 사료섭취량, 생시체중 3. 시험성적

100 첨가제의영양소함량 구분함량 (%) 수분 (%) 건물 (%) TDN(%) 조단백질 (%) 9.22 조지방 (%) 6.29 조섬유 (%) 6.21 조회분 (%) 8.13 미생물 : Saccharomyces cerevisiae, Lactobacillus acidophilus 체형및초음파성적 구분개월령등심면적 등지방 두 께 근 내 지방도 체고십자부고 좌골폭흉위 BCS 시험구 43.0 ± ± ± ± ± ± ± ± ±0.0 대조구 33.8 ± ± ± ± ± ± ± ± ±0.28 산차및분만간격의변화 구분 분만전분만후산차평균분만간격산차평균분만간격 시험구 2.3± ± ± ±2.47 대조구 1.6± ± ± ±4.59 분만전 후초음파성적의변화 구 분 등심면적 등지방두께 근내지방도 BCS 시험구 분만전 48.55± ± ± ±0.07 분만후 47.42± ± ± ±0.05 대조구 분만전 47.63± ± ± ±0.07 분만후 47.49± ± ± ±0.05

101 4. 결과요약 첨가제를급여한결과는같다. 1. 시험구와대조구의초음파와체형성적은시험구가높았음. 2. 분만전후분만간격은분만전에 16.7일의차이를나타내었으나분만후 5.1 일의차이를나타내었는데이는대조구에초산우들이있어서분만간격이줄어든결과를나타냄. 3. 등심면적, 근내지방도, BCS는분만후약간줄어드는경향을나타내었으며 등지방두께는시험구에서오히려증가하는결과를나타냄. 4. 시간당조사료섭취량은시험구와대조구가각각두당 1.32, 1.31kg이였으며 생시체중은성별에관계없이시험구와대조구가각각 구에서약간높게나타남. 26.4, 25.8kg으로시험 5. 향후계획 시험종료시까지지속적으로시험추진 시험두수보충확보후시험

102 과제구분기관과제소요기간 2년연구기간완료사업명축산신기술개발및보급 연구과제명비육말기에중조급여가육질에미치는영향색인용어중탄산나트륨( 중조), 육질, 비육우초음파연구원별임무구분소속성명전화번호담당임무 과제책임자 한우연구실 손호진 시험설계및사양, 초음파 공동연구자 한우연구실 오명곤 시험자료수집 공동연구자 한우연구실 정대진 초음파측정및통계분석 Ⅰ. 서론 비육말기농후사료를과다급여함으로서반추위내 ph 는급격하게떨어진다. 반추위내 ph의 저하는사료섭취량에영향을미쳐일정 ph이하로떨어지면사료섭취가중단되고조사료나물 을섭취하게된다. 조사료를섭취함으로서분비되는침은반추위액의 ph변화를막아주는완충 능력(buffering capacity) 이있는데반추위액의산도가비교적일정한이유는침내의 Na, K가 CO 3 (bicarbonate) 및 PO 4 와결합하여염을형성하기때문이다. 이러한완충능력은사료급여전 보다급여후에증가되며산성에대한완충능력이염기성보다강하다. 귀밑샘과입천장샘및 인두샘에서분비되는침의완충능력이높다. 침을통하여중탄산염과인산염이분비되면같은 양의수소이온이정맥을통해제거됨으로산성혈액을형성하나휘발성지방산및젖산과더불 어양이온이재흡수됨으로일반적으로혈액이산성상태를유지하지않게된다. 중탄산나트륨이 나산화마그네슘은반추위내완충제로사용되고있다. 따라서본연구에서는비육말기중탄산나트륨급여량을구명하고얼마동안급여할경우증 체량이나사료섭취량에영향을미치는지를조사하고자본시험을실시하였다. Ⅱ. 재료및방법 1. 시험축및시험기간 본시험은 91.12±19.12 개월령의암소 20 두( 평균체중 ±33.68kg) 를공시하였으며 2009년 5월 14일부터 5 개월간본연구소의비육우사에서실시하였다. 2. 시험설계및사양관리 시험구는체중과월령을고려하여 5두씩가로 4m, 세로 8m의우방에배치하였으며중탄산

103 나트륨은 0, 20, 50, 100, 170g을일일 2회에나누어급여하였으며사료급여는오전 0900와오 후 1700에 2 회급여하였으며사료급여량은한우사양표준(2007) 의영양소요구량에준하여설정 하였다. 린칼블럭과물은자유채식토록하였다. 3. 조사항목 (1) 사료섭취량 사료섭취량은사료급여후다음날오전사료급여전잔량을조사하였다. (2) 체중측정및초음파측정 체중측정은매월사료급여전우형기를이용하여측정하였으며초음파촬영은 Real-time B mode 방식의 3.5Mhz 주파수 Leaner probe를장착한 Medison사의 Pico 기종으로현재등급 판정부위인제13흉추와제1요추사이의등심면적을측정하여등지방두께와등심단면적은초음 파화상분석전용프로그램에서계산하여수치화하였으며근내지방도는 석하였다. 27단계로구분하여분 4. 통계처리 처리구간평균성적에대한유의성은 SAS(1997) 의 GLM(General Linear Model) 방법을통해 이루워졌으며, 처리평균간의비교를위해 Duncan's multiple range test(duncan, 1955) 가이용 되었다. 1. 사양시험 Ⅲ. 결과및고찰 중탄산나트륨을처리구별 0, 20, 50, 100, 170g을 1일 2회나누어급여한결과는표 1에나타 나있다. 시험개시후 1개월간중탄산나트륨을급여한결과급여량이증가할수록증체량과일 당증체량이증가하는경향을나타내었으나 1일 100g을급여한구는다른급여구에비하여증 체량과일당증체량이적게나타났으나대조구에비하여높은증체량을보였다. 급여 2개월의 증체량은대조구에서높은경향을나타내었는데이는암소를대상으로비육시험을수행하였으 므로발정에의해증체량이떨어진것으로생각된다. 전기간의증체량과일당증체량은중탄산 나트륨을 1일 20g을급여한구에서각각 136.4kg, 0.82kg으로가장높았으며 50g 급여구는대 조구에비하여증체량은약간높게나타났으나일당증체량은대조구와차이를나타내지않았 으며 다. 100g을급여한구는대조구에비하여증체량과일당증체량이떨어지는경향을나타내었

104 표 1. 체중, 증체량, 일당증체량변화 Item Control 20g/day 50g/day 100g/day 150g/day Initial body weight(kg) 506.2± ± ± ± ±49.89 Final body weight(kg) 625.8± ± ± ± ±39.84 Average daily gain(kg) Feed intake (DMkg/head/day) Concentrate Rice straw Feed conversion(kg/kg) Concentrate Rice straw 사료효율역시 20g 급여구에서높게나타났는데이는반추위의 ph가안정화되으로서반추미 생물의활력이높았기때문으로사료된다. 사료요구율또한 20g 급여구에서낮게나타났다. 비육기간별체중변화의그래프는그림 1 에나타나있다. 비육초기인 1~2개월간의체중이 20g 과 100g 급여구에서높은경향을나타내었으며 3~5개월간은다른구에비하여 20g 급여구에서 높게나타났다. 50g의중탄산나트륨을급여한구는비육 1개월간은대조구와비슷한경향을 나타내었으나이후증체량이떨어졌으며비육 5개월째에는증체량이둔화하는것으로나타났 다 체중 (k g) 대조구중조 20 중조 50 중조 100 중조 170 그림 1. 비육기간별체중변화

105 비육기간별증체량과일당증체량은그림 2에나타난것과같이비육초기에중탄산나트륨을 급여한구에서증체량에높게나타났으나그이후첨가효과는점점떨어지는경향을나타내 었다 증체량 (kg) DG(kg) 대조구중조 20 중조 50 중조 100 중조 그림 2. 비육기간별일당증체량의비교 표 2. 도축성적의비교 Item 0 20g 50g 100g 170g Quantity traits 1) Longissmus muscle area(cm 2 ) 80.6± ± ± ± ±4.63 Back fat thickness(mm) 14.0± ± ± ± ±4.71 Yield grade(a:b:c) 2:0:3 1:4:0 0:2:3 2:0:1 1:2:1 Quality traits2 ) Marbling score 3.80± ± ± ± ±0.96 Meat color 5.0± ± ± ± ±0.41 Fat color 3.0± ± ± ± ±0.29 Texture 1.8± ± ± ± ±0.25 Maturity 8.0± ± ± ± ±1.44 Quality grade(1+:1:2:3) 1:2:2:0 0:3:2:0 2:1:0:2 0:2:0:1 1:1:2:0 1) Area was measured from longissimus muscle taken as 13th rib and back fat thickness were also measured at 13th rib. 2) Grading ranges are 1 to 9 for marbling score with higher numbers for better quality(1=devoid, 9=abundant); meat color(1=brightly cherry red, 7=extremely dark red); fat color(1=white, 7=dark yellow); texture(1=soft, 3=firm); maturity(1=youthful, 9=mature).

106 표 2에나타난도축성적의결과육량등급에서등심면적은 50g 급여구를제외하고대조구보 다크게나타났으며등지방두께는 50g 급여구에서가장두껍게나타났고다른처리구간에는 유의적인차이를나타내지않았다. 육량등급에서 20g 첨가구에서는 C등급이출현되지않았고 대조구와 50g 급여구에서는 C등급이출현율이 60% 가되었다. 육질등급에있어서근내지방도는 20g 급여구에서가장낮은 3.2를나타내었으며육색은 100g 급여구에서 5.3 으로약간짙은육색을나타내었다. 지방색은 50g 급여구와 170g 급여구에 서각각 3.2와 3.5를나타내었으며조직감은대조구와 170g 급여구에서높게나타났다. 성숙도 는 170g 급여구가 6.5 로가장낮았다. 육질등급출현율에있어서대조구, 20g 급여구와 170g 급여구에서는 3등급이출현되지않았으나 50g 급여구에서는 2 두, 100g 급여구에서는 1두씩나 타났다. Ⅳ 결론 암소비육말기중탄산나트륨을 1일 20, 50, 100, 170g을 2회나누어급여한결과시험개시후 1 구간의증체량과일당증체량에있어서 20g 급여구에서다른처리구에비하여유의적으로높게 나타났으며 50, 10, 170g 급여구는유의적인차이를나타내지않았음. 반면대조구에서는다른 첨가구에비하여유의적으로낮게나타났다. 2구간에서는증체량이나일당증체량에있어서처 리구간별로유의적인차이를나타내지않았으나대조구에서증체량과일당증체량이높게나타 났으며처리구에서는 50g 급여구에서증체량이높게나타났으며 3 구간에서는대조구, 4구간에 서는 100g 급여구, 5구간에서는대조구에서일당증체량이높게나타났으며전기간에는 20g 급여구의일당증체량이 0.82 로가장높았다. 사료효율은 20g 급여구에서가장높았으며대조구 와 50g 급여구가유사한결과를나타냈으며 100g 급여구에서가장낮게나타났다. 사료요구율 역시 20g 급여구에서가장낮았으며 50g 급여구에서가장높게나타났다.

107 과제구분기관과제소요기간 1년연구기간완료사업명축산신기술개발및보급 연구과제명야생목초의조사료화에관한연구색인용어야생목초, 족제비싸리, 조사료연구원별임무구분소속성명전화번호담당임무 과제책임자 한우연구실 손호진 시험설계및사양, 초음파 공동연구자 한우연구실 오명곤 시험자료수집 공동연구자 한우연구실 정대진 초음파측정및통계분석 Ⅰ. 서론 농림수산식품부에서조사료생산기반확충사업의일환으로국내산조사료생산과이용을활 성화하여생산비를절감함으로서축산업의경쟁력을강화하고조사료용기계 장비및사일리 지제조비등의지원을통해부존자원의활용및양질의조사료를생산하는계획을수립하였 다. 07년조사료자급율은 78% 였으며사료작물재배면적은 12만 3천 ha로그중청보리등사 일리지용재배면적이 1만 2천 ha 를차지하고있다. 대부분은화본과목초의이용을목적으로 하고있다. 그러나육성기에는육량을증가시키기위해필요한단백질공급원이적은편이다. 사료비의증가로육성기에적정사료급여를하지못함으로단백질공급이적어육량적인증가 가미흡하다. 따라서본연구는육성기단백질을공급할수있는두과식물중야생목초의한종인족제비 사리의생육과사료적가치를판단하여불충분한단백질공급원으로공급하고자본시험을실 시하였다. Ⅱ. 재료및방법 1. 족제비사리의생육시험 두과목초인족제비사리는본연구소의가로 4m, 세로 15m의초지에 3월중순에족제비사 리종자를 2~3일물에불린다음 0.8cm의깊이에 80~100개의종자를단일줄파여성장을측 정하였다.

108 2. 시료의채취및분석 시료채취는발아후 3, 4, 6개월령에채취하였으며일반성분분석은 AOAC(1991) 방법에따 라분석하였으며, NDF 및 ADF 함량은 Van Soest 등(1991) 이제시한방법에따라분석하였다. Ⅲ. 결과및고찰 1. 족제비사리의생육시험 족제비사리는파종전상온에서물에 2~3 일간침지한후파종하였다. 파종전상온에물에 침지한결과 1주일경과후발아하였으나시험포에파종후약 1개월경과후에일부발아를 하였다. 표 1은발아후 3, 4 및 6 개월후시료를채취하여일반성분을분석한결과이다. 표 1. 야생목초인족제비사리의일반성분분석 구분수분 조단백질조지방조섬유 NDF ADF 조회분 DM(%) 개월 개월 개월 표 1에서보는바와같이족제비사리의생육기간이길어짐에따라조단백질함량은 16% 에 서 12.6% 로감소하였으며조지방역시낮아지는경향을나타내었다. 이에비하여조섬유, NDF, ADF 함량은목초의목질화를형성함으로서각각의함량이높아지는것을볼수있다. 표 2. 조사료의영양적비교 구 분 조단백질 (%) NDF(%) ADF(%) 볏짚 톨페스큐 알팔파 족제비싸리 18~20 30~35 25~27 일반적으로농가에서주로이용하는볏짚이나화본과의톨페스큐에비하여두과식물인알팔파와 조단백질함량은비슷하게평가되며소화율에관여하는 NDF나 ADF는고간류에비하여낮게평가 되었다.

109 그림 1. 조사료원별건물(DM) 생산량 False indigo의경우첫예취에는건물생산량이떨어지나 2차예취에는생산량이많이증가 하는경향을나타냈으며 Blue wild indigo의경우 1차예취에생산량이많고 2차예취시에는 건물생산량이떨어지는경향을나타내었다. 이는알팔파도 Blue wild indigo와같은경향을 나타내었으며건물생산량은 4,000~5,000kg/ha 를생산할것으로추정된다. 그림 2. 조사료원별잎의비율(%) 야생목초중잎이차지하는비율은다른콩과식물보다많은부분을차지하고있으며이러한 부분은생산량과관련이많다. False indigo의경우 ADF, NDF, 조단백질함량은알팔파와유사한경향을나타내었으나 In vitro 건물소화율은알팔파에비하여약간떨어지는경향을나타내었으며 Blue wild indigo는 ADF, NDF, 조단백질함량은알팔파에비하여떨어지는경향을나타내었으나 In vitro 소화율 은알팔파와유사하게나타났다. 이는소화율에관여하는 ADF나 NDF 함량이알팔파에비하 여낮기때문이다.

110 그림 3. ADF, NDF, 조단백질함량및 In vitro 건물소화율 NDF( 중성세제불용성섬유소) : 중성세제용액으로한시간동안끓인후여과했을때용해되지않고남는섬유질. 이는세포벽을구성하는헤미셀룰로스, 셀룰로스, 리그닌등. ADF( 산성세제불용성섬유소) : 세포벽물질중에서헤미셀룰로즈를제외한나머지에해당하는물질. Ⅳ 결론 야생목초인족제비사리의생육은일반적으로 0.8cm 깊이에파종하여 1년동안 25~35cm 정 도자라며이듬해 0.6~1.2m까지성장한다고하였으나파종후 4개월후 72.56±2.97cm 자랐으 며굵기는 0.37±0.02cm 를나타내었다. 생장초기인 3개월령에는수분이 63% 였으며조단백질 함량은 16.28% 를나타내었다. 4개월령에는수분이 72% 에달하였으며조단백질함량은약간 증가한 16.66% 를나타내었고개월령이지나면서조섬유, NDF, ADF 함량이증가하여목질화 된것으로생각된다. 생육 6개월령의수분은 56% 로떨어졌으며조단백질함량은 12.58% 로두과 식물로서단백질함량이상당히낮아졌다. 3 개월령, 4 개월령, 6개월령의식에의한 TDN은각각 66.59, 63.40, 63.37으로성장이진행될수록 ADF 함량의증가로 TDN 역시감소하는결과를나 타냈으며알팔파, 티모시, 볏짚의 TDN은각각 70, 65, 50로볏짚보다높았으며화본과인티모 시와비슷한영양가를나타내었으며소화율에관여하는 ADF, NDF의함량은알팔파에비하여 낮게나타났으나목질화가진행함에따라 것으로생각된다. ADF, NDF 함량이증가함으로서소화율이떨어질

111 과제구분 연구과제명 경북도 FTA 대책연구용역과제 소요기간 2년연구기간완료 천연한방소재를이용한어린송아지설사 예방치료제개발 색인용어한우및젖소송아지, 설사예방, 설사치료 연구원별임무 구분소속성명전화번호담당임무 협동책임자한우연구실김병기 협동기관연구책임 총괄책임자영남대학교최창본 연구총괄및주관연구책임 세부책임자경북TP( 재단) 김수정 위탁기관연구책임 공동연구자민속한우( 주) 권혁수 공시축제공및가축관리 Ⅰ. 서론 한우송아지설사는포유기의발생비율이 43.1%( 축산기술연구소, 2003) 나되는전염성이 높은급성질병으로, 폐사율이높고, 송아지의발육, 성장에도심각한장애를나타내는특징을 지니고있다. 축산기술연구소(2003) 보고에의하면송아지설사병으로인한폐사율이최고 25% 에이FMS 다고하였고, 미국에서송아지설사증에의한피해액은연간 12조 24조원이상 이라고알려져있다(Bendali 등, 1999). 이런송아지설사는초기증체저하에이어출하체중의 감소로이어지기때문에축산농가에막대한경제적손실을초래하고있다. 설사는송아지폐사의가장중요한원인중의하나이며신생송아지설사의원인은복합적이고 다양한전염성, 영양적, 면역학적그리고환경적인요인이관련되어있다( 김등, 1990). 송아지 설사증은병원성미생물, 사육환경및소자체등세요소의상호연계성및다양한원인이관 여하여나타나는임상증후군이다(Acres 등, 1977; 김등, 1990). 무엇보다어린송아지는각종 병원체에대한감수성이높다고알려져있다(Webster 등,1985; 이등, 1999). 생후 6개월이내 송아지는다양한환경및모축에서나오는병원체들에감염됨으로써이들병원체들이일으키 는다양한질병이발생되고있다(Martin과 Meek, 1986; 강등, 1998). 국내에서지금까지알려진송아지의소화기질병유발병원체들은 1 바이러스성으로 bovine viral diarrhea virus (BVD), bovine rotavirus (BRV), bovine coronavirus (BCV) 으로나누며, 세균성으로 는 E. coli., Salmonella spp., Clostridium spp., Campylobacter 이있다. 그리고기생충으로는 Eimeria spp., Isospora spp., Cryptosporidium spp. 등이있다(Britney 등, 1984; Humura 등, 1985; Holland, 1990; Barker 등,1993). 신생송아지의설사원인체로 rotavirus의검출률은 69.2% 로장독혈성 E. coli의 14.7% 보다현저히높은검출률을나타내고있다( 김등,1990). 설

112 사발생일령에서바이러스성인 rotavirus 는 7일령이전에 41.7%, 8 14일령에 48.1% 가검출 되어약 90% 가생후 2 주일이내에검출되었다고하였다. 다음은세균성으로장독혈성 E. coli 는 7일령이전에 34.8%, 8 14일령에 26.1% 검출되었고, 22일령이상에서도 34.8% 가검출된 Acres 등(1977) 의보고에서는 E. coli와 rotavirus의검출률 은 5일이내에설사한송아지에서각각 62%, 10% 로나타나고있다( 김등, 1990; Acres 등, 1985). 특히세균성원인균으로는대장균과살모넬라균으로서송아지설사병을치료하기위해 서는여러가지방법이있을수있지만, 현재시중에서판매. 유통되고있는약물들은일시적인 효과를나타낼뿐치료를중단하게되면병원균이잠복하였다가재발하거나만성화될우려가 있으며, 장기간반복치료시내성문제가심각하게대두될수있다. 송아지설사는바이러스(rotavirus, coronavirus, bovin viral diarrhea virus), 세균(E.coli, Enterococcus spp, Bacillus spp. Staphylococcus spp. Flavobacterium spp. Salmonella spp, Pasturella haemolytica, Clostridium spp, Campylobacter), 기생충(Eimeria spp, lsospora spp, Cryptosporidium spp) 등의다양한원인체에의해서유발되며, 그중에서세균성으로는병원 성대장균과살모넬라균이주요원인균으로알려져있다. 송아지설사병을치료하기위해서는여러가지방법이있을수있지만, 현재시중에서판매. 유통되고있는약물들은일시적인효과를나타낼뿐치료를중단하게되면병원균이잠복하였 다가재발하거나만성화될우려가있으며, 장기간반복치료시내성문제가심각하게대두될 수있다. 한방에서는오래전부터한약재를이용해서가축질병을치료해왔으며, 한약재를이용할경 우, 질병을미연에예방하는예방약적인부분에특히강점을가지고있다. 무엇보다도천연한 방제재는독성이적거나무독하며, 가축의체내에잔류하지않으며, 약물의내약성을일으키지 않는것이그특징이라할수있다. 동의보감에나타난한방적작용원리는 1 소화기를이롭게한다( 利氣消食 )( 산사, 신곡, 맥 아, 진피) 2 혈액순환을이롭게한다( 活血散瘀 )( 당귀, 홍화, 천궁, 계혈등) 3 보양작용으로 항병력을증진시킨다( 補氣養血 )( 황기, 인삼, 하수오, 백출) 4 항균소염살균작용을일으킨다 ( 淸熱解毒 )( 시호, 황금, 황련, 황백, 창출) 5 신경을안정시키고놀램을막아준다( 鎭靜安神 )( 석 창포, 원지, 산조인, 합환피) 6 체내의기생충을구제하고대변을잘통하게한다( 驅蟲通便 )( 사 군자, 빈랑, 욱리인등) 는등의많은효능이있는것으로알려져있다. 박종희(2002) 에따르면한방제재로서 (1) 금은화( 金銀花 ) 는인동과( Caprifoliaceae) 의인동 (Lonicera japonica Thumb) 의줄기또는잎이부착한줄기를건조한것을 인동 이라고하며, 중구에서는이를 금은화 ( 金銀花 ) 하고부른다. 주요성분으로는 Tannin, Saponin, Lonicerin, Luteolin, Lnostiol 이며, 약리효과로는추출액은소화성궤양에대해서예방효과와특히적리균,

113 티프스균, 파라티프스균등의그람양성(+) 균, 포도상구균, 폐염쌍구균에대해서강한항균작용 을갖고있다. (2) 포공영( 蒲公英 ) 은국화과( Compositae) 로서 Taraxacum 속식물이며, 주요성 분은 Taraxasterol, Choline, Inulin, Pectin 등이며, 약리효과로는포도상구균, 용혈성연쇄구균, 폐염상구균, 외막염균, 디프테이라균, 녹농균, 변형간균, 티프스균에서살균및항균효과가있 다. 또한이뇨작용, 이담작용, 만성담낭경련및결석증, 소화불량, 습관성변비, 소염, 건위등에도 효과가있다. (3) 현지초 ( 玄之草 = 玄草 ) 는노학초라고도불리우며, 뒤손이풀과 (Geraniaceae ) 의이질풀 (Geranium Thunbergii Sieb) 의전초를건조한것이다. 주요성분은탄닌을함유하고, 그성분은 ellagitannin의하나인 geranin 이다. 그외에 gallic acod, duccinic acid 등이함유되어있다. 약 리작용으론적리균, 장티프스, 대장균, 프레스로우담낭균, 겔트넬담낭균에대하여살균효과가 있다. 이외에도건위, 정장약으로애용된다. (4) 곽향( 藿香 ) 은꿀풀과(Labiatae) 의파초리 Pogostenon cablin Benth 의전초또는엽을건조한것일명배초향, 광( 주) 곽향또는우리나라에 서는방아잎 ( 연명초 ) 이라고부르며, 주요성분으론 Pachoulic alclhol, Methylchvicol (=esdragol), Cycoseychellene, Pogostol 등이다. 약리작용으론메칠알콜추출액은피부선균에대하여강한항 균작용을한다. (5) 감초( 甘草 ) 는콩과(Leguminosae) 로서주요성분은 Glycyrrhiza 속의글리시리 진(glycyrrhizin) 의분해산물인글루쿠론산(glucuronic acid) 은생체의간장에서유해물질과결합 하여글루쿠로니드로서해독작용을하며, 또한항알러지작용이있어서피부과영역에응용되기 도하고, 또다른분해산물로 glycyrrhetinic acid 에는항염증작용, 부신피질호르몬작용이있다 고한다. 따라서본연구는한방작용원리를응용하여, 천연한방소재를이용하여송아지설사예방및 치료첨가제를개발하여송아지설사병으로인한농가의어려움과송아지폐사에따른경제적 손실을감소시키고, 안전한축산물생산으로축산물의소비를증가시킴으로써농가의소득증 대및국민보건향상에기여하고자실시하였다. Ⅱ. 재료및방법 1. 시험기간및장소 시험공시축은 70일령정도의한우송아지 24 두를대상으로봉화소재민속한우 ( 주) 농장에서 실시하였다. 축사형태는 1칸당 4 6 m 크기의개방형축사에서시험예 1은한우송아지 8두씩을 투입하여 3 처리( 총 8 두 3 처리=24 두) 로배치하여수행하였다 ( 표 1). 양면에는윈치커텐을설치하여 겨울철에는바람을막아주었고여름철에는바람이잘통하도록하였으며, 천장에는대형선풍기를

114 설치하였다. 표 1. 실험설계 항목대조구시험1구시험2구 군별두수 처리군 총공시두수 각처리구별로공히암(50%), 수(50%) 비율로배치함 처리구별처리내역 구 분 생후 일까지 생후 161일 -220일까지 비고 대조구 일반사료 일반사료 8두배치 T1 주문시험사료 주문시험사료 8두배치 ( 시험1 구) T2 ( 시험2 구) 조사료 ( 생약제제 0.1 중량% 첨가) 주문시험사료 ( 생약제제 0.3 중량% 첨가) 자유채식 티머시건초 ( 생약제제 1 중량% 첨가) 주문시험사료 ( 생약제제 2 중량% 첨가) 자유채식 볏짚 8 두배치 2. 공시재료및사양관리 대조구의농후사료는 G 축협에서생산하는어린송아지용사료를급여하였고, 시험군사료는 G 축협에서생산하는어린송아지사료에천연한방소재를이용한개발시제품을 0.1% 와 0.3% 를 첨가하여생산된주문사료를이용하였고이때의배합비와사료성분은표 2와 3 과같다. 사양관리는대조구는농가관행법에따라수행하였고, 조사료는수입건초인티머시( 시험개시 부터 3 개월령까지) 와볏짚( 시험4 개월령부터) 를급여하였으며, 물은자유음수토록하였고, 무기 물섭취를위하여별도로린칼블럭을매달아자유섭취토록하였다. 한편, 공시재료인송아지설사예방치료보조제의제조과정은주종인금은화( 金銀花 ), 포공영 ( 蒲公英 ), 현지초( 玄之草 = 玄草 ), 곽향( 藿香 ), 감초( 甘草 ) 인 5종류의생약제로부터뽑아낸추출 액과미세분말화된백출( 白朮 ), 진피( 陳皮 ), 차전자( 車前子 ), 저령( 猪苓 ), 백복령( 白茯苓 ) 외 7종류 와혼합하였고, 그이후시판중인약간의중조(NaHCO 3 ) 와미생물생균제제와다시잘혼합하 여제조하였다.

115 표 2. 사료배합비 배합비 (%) 대조구 ( 관행구) 시험1구 (T1) 시험주문사료 시험2구 (T2) 옥수수 소맥피 단백피 대두피 옥피 옥수수속대 8.00 대두박( 수입) 옥수수글루텐 알팔파펠렛 비트펄프 당밀 석회석분 제2인산칼슘 식염 에디믹스플러스 항콕시듐제 바이오모스 이스트켤처 낙농비타민프리믹스 비타민/ 미네랄프리믹스 Total 천연한방생약제제 티머시건초 조사료 볏짚 표 3. 시험사료의일반조성분 일반조성분 (%) 시험주문사료조사료대조구시험1구시험2구 ( 관행구) 티머시건초볏짚 (T1) (T2) 수분 조단백질 조지방 조회분 조섬유 가용무질소물 Ca P NDF ADF TDN T1~T2 : A herb resources powder 0.1~0.3% addition

116 4. 조사항목및분석방법 (1) 사료섭취량, 요구율및증체량 시험기간동안체중측정은매월말경에정기적으로측정하였으며, 사료는매일오전 8:00와오 후 17:00에 2 회로나누어급여하였고, 잔량은익일오전사료급여전에잔량을칭량하여 1일총 사료급여량에서잔량을제하여 1 일사료섭취량을계산하였고, 사료요구율은사료섭취량에총 증체량을사료섭취량으로나누어환산하였다. (2) 혈액채취및성분분석 채혈은시험개시시와육성기, 비육기때, 시험개시후 3개월령에헤파린미처리된 vacumtainerr (Becton Dicknson, Franklin Lakes, NJ, USA) 를이용하여송아지경정맥을통하여 20 ml를채취한후 헤파린처리된것과미처리된진공관에각 10ml 씩나누어넣었다. 상온에서약 2시간방치하 여혈액을응고시킨후에 4 에서 3,000rpm에서 15분간원심분리하여순수혈청만을분리해서분 석시까지 -70 의초저온냉동고에보관하였다. 한편경정맥에서채혈한 EDTA가들어있는채 혈병에넣어잘흔든다음자동혈액분석기(Hema Vet 950) 로적혈구(RBC), 백혈구(WBC), 혈색 소치(PLT), 헤모글로빈(Hb) 등을측정하였다. (3) 분시료채취및체온측정 공시축은매월시험일에개체를보정한후항문에서손을넣어분을빼내는직장채취법으로 분을채취한후, 사전에무균처리된면봉에묻혀진공튜브에넣어즉시분석실에옮겨세균등 을분리동정하였다. 동시에체온계를항문에밀어넣고체온을측정하였다. (4) 분중의세균( 대장균) 분리및분석 소의분변 5~10g 을분변채취용기 (Greiner, Germany) 에채취하고, mec broth(merck, Germany) 45ml에 37 에서 18~24 시간증균배양한다음분리배양은혈액배지( 아산제약) 및 MacConkey agar(merck, Germany) 에직접도말하여 37 에서 18~24시간선택배양한후 β-용혈을일으키는 균과의심되는적색집락(lactose 분해집락) 을 3~5개취하여 EMB (Merck, Germany) 에재도 말하여 37 에서 24 시간배양한후금속성광택집락을선택하여그람염색, 생화학적성상시 험[4-methylumbellifervl-β-d- glucuronide (MUG) 시험, indole 시험, methyl red (MR) 시험, Voges-Proskaur (VP) 시험, citrate 시험, 유당으로부터가스생성시험], API 20E킷트 (BioMerieux, France) 또는미생물분리동정기(Vitek system, BioMerieux, France) 시험등을 실시하여최종동정후대장균을분리하였다. 1 기생충( 콕시듐) 검사법( 일명, 포화식염수부유법)

117 포화식염액약 20ml를작은비이커에취하여가검재료 2g 을가하고잘교반한후, 작은깔대 기에금속제여과망이나한겹의거즈를깔고분변액을시험관에여과한다음시험관대에꽂아 놓고주둥이에표면장력에의한팽윤면이생길때까지포화식염액을천천히가한다. 그이후 30~40 분간방치한다음에커버글라스를수평으로들고조심스럽게팽윤면에접촉시켜부유물 을부착시킨다. 그리고이를슬라이드글라스위에놓고광학현미경(100 배) 으로콕시듐원충을 검경하였다 2 바이러스성(BVDV PCR 검사) 법( 일명, RNA 추출및 RT-PCR 법) RNeasy mini kit(qiagen, Germany) 를사용하여제조사의지시에따라분변에서 RNA를추출 하였다. PCR은 VeTek TM BVDV Detection Kit(iNtRON, D60060) 을사용하였다. PCR 반응은 추출한 RNA 2ul와 kit내에 DNase / RNase-free water 18ul를첨가하여총량이 20ul가되게 하였다. 45 o C에서 30분간반응시켜 cdna를합성한후 94 o C에서 5 분을반응시키고, 94 o C에서 30 초, 58 o C에서 30 초, 72 o C에서 40초씩 40회반복반응시킨다음최종 72 o C에서 5분간반응 시켰다. PCR 반응이완료된후각반응액 10 ul를취하여 ethidium bromide가함유된 1.5% agarose gel에서전기영동을실시한다음자외선하에서 297bp 밴드유무를관찰하였다. 7. 통계분석 통계분석은 SAS program(2002) 의 GLM(General Linear Model) 분석방법에따라 T-test 검정 을하였고, 처리구간의평균간비교는 Duncan(1955) 의다중검정방법으로 5% 수준에서검정 하였다. Ⅲ. 결과및고찰 1. 체중변화, 일당증체량및사료요구율 전시험기간(150 일간) 동안한우송아지에게천연한방소재를이용하여제조한사료첨가제를 급여한결과를나타낸것이다. 그림 1과표 4 에서시험개시체중은대조구, 시험1 구, 시험2구는각각 46.10kg, 43.60kg, 44.60kg으로그중에동일월령과체중량은시험구가대조구보다 2~3kg 다소적은경향은있 지만전반적으로비슷한체중으로배치하여시험에착수하였다. 그러나시험종료시기인생후 5 월령때의대조구, 시험1 구, 시험2구는각각 183.9kg, 186.5kg, 176.8kg으로시험1구가가장성장률 이높았고, 그다음으로대조구, 시험2 구순으로나타났고, 이런결과는총증체량과일당증체 량에서도비슷한양상으로나타났다. 이처럼동일일령에서대조구나시험2구에비하여시험1구

118 가다른처리구보다크게높았던것은개발시제품의첨가급여로설사예방치료효과뿐만아니 라면역력및소화증진효과가있었던것으로판단된다. 그림 1. 시험전기간동안의송아지의증체량변화 표 4. 시험전기간의체중, 증체량, 일당증체량의변화 ( 단위 : kg/ 두당) 항목 대조구 시험1구 시험2구 Pr > _ t _ 4) 시험개시일령 ( 월령) 71(2.4)± 7.8 3) 71(2.4)± (2.3)± 8.07 시험종료일령 ( 월령) 221(7.4)± (7.4)± (7.3)± 8.07 시험기간( 일령) 개시체중, kg 46.1± ± ± 1.24 시험 1개월 66.4± ± ± 체 ± ± ± 중 ± ± ± 량 (kg) ± ± ± ± ± ± 증체량 (kg) 일당증체량 (kg) 시험 1개월 20.3± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± 전기간총증체량 137.8± ± ± 시험 1개월 평균 ) 0.1% 한방사료첨가제첨가 ; 2) 0.3% 한방사료첨가제첨가 ; 3) 평균치에대한표준오차 4) 처리구별에따른평균치의통계적인 T-test 검정 2. 시험전기간동안의사료섭취량변화 표 5 는시험전기간(150 일간) 동안한우송아지에게천연한방소재를이용하여제조한사료첨가

119 제를급여한결과를나타낸것이다. 시험개시때의두당사료섭취량은대조구, 시험1 구, 시험2 구는각각 32.7kg, 39.8kg, 32.0kg 이었고, 이때의 1일두당사료섭취량은각각 1.09kg, 1.33kg, 1.07kg으로시험1구가대조구와시험2 구보다다소더높은경향이있었다. 그러나시험5 개월 령때의두당사료섭취량은대조구, 시험1 구, 시험2구는각각 176.3kg, 164.6kg, 162.6kg 이었고, 이때의 1일두당사료섭취량은각각 5.88kg, 5.49kg, 5.42kg으로시험1구가대조구와시험2구 보다다소더높은경향이있었다. 표 5. 시험전기간의사료섭취량변화 항목 대조구 시험1구 시험2구 Pr > _ t _ 4) 시험개시일령 ( 월령 ) 71(2.4)± 7.8 3) 71(2.4)± (2.3)± 8.07 시험종료일령 ( 월령 ) 221(7.4)± (7.4)± (7.3)± 8.07 시험기간( 일령) 개시체중 (kg) 46.1± ± ± 1.24 시험 1개월 32.7± ± ± 월령별 ± ± ± 두당 ± ± ± 총섭취량 ± ± ± (kg) ± ± ± 합계 535.0± ± ± 시험1 개월 월령별일두당 1 섭취량 (kg) 평균 ) 0.1% 한방사료첨가제첨가 ; 2) 0.3% 한방사료첨가제첨가 ; 3) 평균치에대한표준오차 4) 처리구별에따른평균치의통계적인 T-test 검정 표 6은시험1 개월령(30 일) 동안의증체량, 사료섭취량및사료요구율을나타낸것이다. 시험개 시체중은대조구, 시험1 구, 시험2구는각각 46.1kg, 43.7kg, 44.6kg 이였다. 이때동일월령( 생후 2.4 개월령) 인대조구가시험구보다약간더컸으나큰차이가없도록배치하여시험을개시하 였다. 그러나시험1 개월종료체중에서대조구, 시험1 구, 시험2구는각각 66.4kg, 68.3kg, 58.4kg이었 으며, 총증체량에서는시험1 구(28.4kg) 가가장높았으며, 대조구와시험2구는거의차이가없었 다. 이처럼시험1구가대조구나시험2구에비하여다른처리구보다더높았던것은송아지설 사개발시제품의첨가로설사예방치료효과뿐만아니라면역력및소화증진효과가있었던것 으로판단된다.

120 한편일당증체량은총증체량의따른영향으로대조구, 시험1 구, 시험2구는각각 0.70kg, 1.00kg, 0.70kg 이였다. 이때의농후사료총섭취량에서시험1구가 33.00kg으로가장많았던반면 에시험2 구는대조구보다도더낮은섭취량을보였다. 조사료총섭취량에서도비슷한양상으로 시험1 구(6.8kg) 으로가장높았으며, 대조구와(6.58kg) 와시험2 구(6.51kg) 으로다소낮았다. 따라서총사료섭취량에서시험1 구(39.80kg) 가가장많았으며, 대조구(32.68kg) 와시험2구 (31.91kg) 으로비슷하였다. 사료요구율의경우, 시험1 구(1.40) 가대조구(1.61) 와시험2 구(1.68) 에 비하여다소낮아사료효율측면에서가장좋게나타났다. 표 5. 시험1개월령의증체량및사료섭취량 구분대조구시험1구시험2구 공시두수 개시일령( 월) 71(2.4) 71(2.4) 71(2.4) 종료일령( 월) 101(3.4) 101(3.4) 99(3.3) 시험기간( 일) 체중량, kg/ 두당 개시체중 종료체중 총증체량 일당증체량 사료섭취량,kg/ 두당 농후사료 티머시 총계 사료요구율 농후사료 조사료 총계 표 6은시험2 개월령(30 일) 동안의증체량, 사료섭취량및사료요구율을나타낸것이다. 시험개 시체중은대조구, 시험1 구, 시험2구가각각 66.4kg, 68.3kg, 58.4kg 이였으나, 종료체중에서는 각각 98.0kg, 94.2kg, 88.9kg 으로나타났고, 총증체량에서시험2 구(32.1kg) 와대조구(31.6kg) 가 시험1 구(26.4kg) 에비하여크게높았다. 이는시험1개월령에발육이낮았던것은시험1개월령 의부진한발육에대한보상성장으로사료된다. 한편일당증체량은총증체량과비슷한양상으 로대조구, 시험1 구, 시험2구는각각 1.10kg, 0.90kg, 1.10kg 이였다.

121 그러나농후사료총섭취량에서시험1구는 59.30kg 으로가장많았던반면에대조구(58.9kg) 와 시험2 구(53.1kg) 는다소낮은섭취량을보였다. 조사료총섭취량에서도비슷한경향으로시험1 구(14.6kg) 으로가장높았고, 대조구(11.13kg) 와시험2 구(12.03kg) 으로다소낮았다. 따라서총사료섭취량의경우, 시험1 구(73.36kg) 가가장많았고, 그다음에대조구(70.03kg) 이었 고, 시험2 구(65.10kg) 순으로나타났다. 사료요구율의경우, 시험1 구(2.78) 가대조구(2.22) 와시 험2 구(2.03) 보다더높아사료효율측면에서는크게떨어졌다. 표 6. 시험2개월령의증체량및사료섭취량 구분대조구시험1구시험2구 공시두수 개시일령( 월) 101(3.4) 101(3.4) 99(3.3) 종료일령( 월) 133(4.4) 133(4.4) 131(4.3) 시험기간 체중량, kg/ 두당 개시체중 종료체중 총증체량 일당증체량 사료섭취량, kg/ 두당 농후사료 티머시 총계 사료요구율 농후사료 조사료 총계 표 7은시험3 개월령(30 일) 동안의증체량, 사료섭취량및사료요구율을나타낸것이다. 시험개 시체중은대조구, 시험1 구, 시험2구가각각 98.0kg, 94.2kg, 88.9kg 이였으나, 종료체중에서는 각각 125.5kg, 126.4kg, 119.5kg 으로나타났고, 총증체량에서시험1 구(32.1kg) 가대조구(29.5kg) 와시험2 구(30.2kg) 보다훨씬높게나타났다. 한편일당증체량은대조구, 시험1 구, 시험2구가 각각 1.00kg, 1.10kg, 1.10kg 이였다. 그러나이때의농후사료총섭취량은시험1, 2 개월령보다는크게높아진경향이었다. 시험1 구는 95.20kg 으로가장많았던반면에대조구(92.90kg) 와시험2 구(90.40kg) 는더낮은섭취량을

122 보였다. 조사료총섭취량에서는시험1 구(19.19kg) 으로가장높았고, 그다음으로시험2구 (17.36kg), 그리고대조구(15.79kg) 순으로낮아졌다. 따라서총사료섭취량의경우, 시험1 구(112.09kg) 가가장많았고, 그다음에대조구(110.99kg) 이 었고, 시험2 구(107.76kg) 순으로나타났다. 본시험의결과로볼때생후 3개월령부터는반추 위발달이급격히발달하는시기로서사료섭취량이크게증가하는것으로사료된다. 사료요구율의경우, 시험1 구(3.49) 가대조구(4.03) 와시험2 구(3.57) 보다더낮아사료효율측면 에서가장좋게나타났다. 표 7. 시험3개월령의증체량및사료섭취량 구분 대조구 시험1구 시험2구 공시두수 개시일령( 월) 133(4.4) 133(4.4) 131(4.3) 종료일령( 월) 163(5.4) 163(5.4) 161(5.3) 시험기간 체중량, kg/ 두당개시체중 종료체중 총증체량 일당증체량 사료섭취량, kg/ 두당 농후사료 티머시 총계 사료요구율 농후사료 조사료 총계 표 8은시험4 개월령(30 일) 동안의증체량, 사료섭취량및사료요구율을나타낸것이다. 시험개 시체중은대조구, 시험1 구, 시험2구가각각 125.5kg, 126.4kg, 119.5kg 이였으나, 종료체중에서 는각각 152.8kg, 162.5kg, 155.9kg 으로나타났고, 총증체량에서시험1 구(36.1kg) 와시험2구 (36.4kg) 가대조구(27.3kg) 보다훨씬높게나타났다. 한편일당증체량은대조구, 시험1 구, 시험2 구가각각 0.91kg, 1.20kg, 1.21kg 이였다. 그러나이때의농후사료총섭취량에서는모두처리구가비슷하였으나조사료총섭취량에서는 시험1 구(42.14kg) 으로가장높았고, 그다음으로시험2 구(40.06kg), 그리고대조구(31.04kg) 순 으로낮아졌다. 따라서총사료섭취량의경우, 시험1 구(156.0kg) 가가장많았고, 그다음에시험2 구(154.2kg),

123 대조구(145.0kg) 순으로나타났다. 사료요구율의경우, 대조구(5.31) 가시험1 구(4.33) 와시험2구 (4.23) 보다더높게나타났다. 표 9는시험5 개월령(30 일) 동안의증체량, 사료섭취량및사료요구율을나타낸것이다. 시험개 시체중은대조구, 시험1 구, 시험2구가각각 152.8kg, 162.5kg, 155.9kg 이였으나, 종료체중에서 는각각 183.9kg, 186.5kg, 176.8kg 으로나타났고, 총증체량에서대조구(31.1kg) 였으나, 시험1구 (24.60kg) 와시험2 구(20.9kg) 보다훨씬높게나타났다. 한편일당증체량은대조구, 시험1 구, 시 험2구가각각 1.04kg, 0.80kg, 0.70kg 이였다. 이때의농후사료총섭취량에서는모두처리구가 비슷하였으나, 조사료총섭취량에서는대조구(36.34kg) 으로가장높았고, 그다음으로시험1구 (24.60kg), 그리고대조구(23.29kg) 순으로낮아졌다. 표 8. 시험4개월령의증체량및사료섭취량 구분 대조구 시험1구 시험2구 공시두수 개시일령( 월) 163(5.4) 163(5.4) 161(5.3) 종료일령( 월) 193(6.4) 193(6.4) 191(6.3) 시험기간 체중량, kg/ 두당개시체중 종료체중 총증체량 일당증체량 사료섭취량, kg/ 두당 농후사료 티머시 총계 사료요구율 농후사료 조사료 총계 따라서총사료섭취량의경우, 대조구(176.30kg) 가가장많았고, 그다음에시험1 구(164.6kg), 시험2 구(162.60kg) 순으로나타났다. 사료요구율의경우, 시험2 구(7.78) 가시험1 구(6.86) 와대조 구(5.67) 보다더높게나타났다. Meissner 등(1995) 은소를대상으로시험한결과, 반추가축에서농후사료수준이높을수록 일당증체량이높아진다고하였고, Mazumder 등(1988) 은육성기양에게농후사료수준을달리 하여 6개월간사양시험결과농후사료수준이높을수록더높은증체량을보였다고보고한바 있다. 또한 Shaver 등(1988) 는조사료품질이우수할수록섭취량이증가하고조사료의섬유소 함량이높을수록장내체류시간이길어져사료섭취량이감소한다고보고하였다 (Lippke, 1980).

124 표 9. 시험5 개월령의증체량및사료섭취량 ( 단위 : kg) 구분 대조구 시험1구 시험2구 공시두수 개시일령( 월) 193(6.4) 193(6.4) 191(6.3) 종료일령( 월) 223(7.4) 223(7.4) 223(7.3) 시험기간 체중량, kg/ 두당개시체중 종료체중 총증체량 일당증체량 사료섭취량, kg/ 두당 농후사료 티머시 총계 사료요구율 농후사료 조사료 총계 혈액의이화학적성상과특성 표 10과표 11은한우송아지의경정맥으로부터채취한혈액의이화학적성상을조사한결과 이다. 표 12 에서총콜레스테롤(Total Cholesterol) 함량은시험이진행됨에따라낮아지는경향 을보였으며, 처리별로는대조구, 시험1구와시험2구가 ~82.29 mg/dl 범위에있었다. 그 러나전반적으로시험3개월령이시험1개월령보다총콜레스테롤함량이낮았던것은포유흡유 량이적은데기인한것으로사료된다. 반면에시험1구의경우는다른처리구보다더높은경향을보인것은타처리구보다사료섭취 량증가와높은증체량때문으로사료된다. 한편, 트리글리세라이드(Triglyceride) 는처리구간(13.14~20.14 mg/dl) 의범위에있었고, 간기 능의기준을나타내는 GOT는 82.57~69.43 mg/dl 의범위에있었고, 전반적으로시험이경과됨 에따라점차감소하는경향이었다. GPT의경우는 20.00~17.71 mg/dl 의범위로서, GOT에서와 마찬가지로시험이진행됨에따라감소하는경향을보였다. 특히시험구의 GOT와 GPT가대조 구에비하여거의차이가없이안정적인반응을보인것은개발시제품의첨가와급여량도적 당하여간기능에큰영향을미치지않은것으로판단된다. 글리코스(Glucose) 와아밀로스 (Amylose) 그리고혈중의요소태질소(BUN) 는전반적으로처리구간에는거의차이가없었다. 표 11 은혈구의이화학적상상조사결과로서, 백혈구 (Leukocytes) 인 WBC 의경우는 ~7.08 k/ μl범위에있었고, 적혈구 (Erythrocytes) 인 RBC의경우는 19.45~8.86 M/ul 의범위에있었다. 헤모 글로빈(Hb) 는 12.07~9.76 g/dl 의범위로서처리구간에거의차이가없었다.

125 표 10. 혈청내의이화학적성상조사 구분/ 월령 혈청내의이화학적성상 (mg/dl) THCO TG GOT GPT GLU BUN 시험1개월 대 조 구 평균 ± ) ± 3.85 ± 8.88 ± 3.14 ± 8.17 ± 3.25 시험1개월 시 험 구 1) 평균 ± 8.87 ± 1.82 ± 8.17 ± 2.11 ± ± 2.87 시험1개월 시 험 구 2) 평균 ± 9.10 ± 3.87 ± 9.14 ± 3.87 ± 9.17 ± ) 0.1% 한방사료첨가제첨가 ; 2) 0.3% 한방사료첨가제첨가 3) 평균치에대한표준오차 특히, 면역글로불린인 IgG 의경우를살펴보면, 전체평균적으로대조구가 mg/dl 이었 으나, 시험1구는 mg/dl 이었고, 시험2구는 mg/dl 로나타났다. 시험개시시는대조 구와시험구간에 688 ~673 mg/dl 에거의차이가없었으나, 시험3개월령에는대조구가 559 mg/dl 였으나, 시험1구는 598 mg/dl 이었고, 시험2구는 602 mg/dl으로시험구가대조구보다 약 6~7% 정도의더높게나타났다. 또한시험5개월령에는대조구가 476 mg/dl 였으나, 시험1 구는 544 mg/dl 이었고, 시험2구는 525 mg/dl으로시험구가대조구보다약 8~14% 정도의더 높게나타났다. 으로사료되며, 이같은결과는천연한방생약제재의첨가로시험구의면역력이향상되었을것 그결과로송아지설사예방및치료기간단축에상당히영향을미친것으로판 단된다.

126 표 11. 혈구의이화학적성상및면역력조사 대조구 구분 / 월령 혈액내이화학적성상 WBC, K/ μl RBC, M/ul Hb, g/dl PLT, K/ul IgG, mg/dl 시험1개월 평균 ± ) ± 1.21 ± 1.10 ± ± 시험1개월 시 험 구 1) 평균 ± 1.07 ± 1.39 ± 2.11 ± ± 시험1개월 시 험 구 2) 평균 ± 1.00 ± 1.23 ± 1.47 ± ± ) 0.1% 한방사료첨가제첨가 ; 2) 0.3% 한방사료첨가제첨가 3) 평균치에대한표준오차 4. 분변의성상및설사발생두수 표 12 는직장채취법으로채취한분중의설사발병원인균및설사치료기간을조사한결과이다. 시험 1개월령부터시험5 개월령(150 일) 까지시험송아지의분변을채취하여원인균을분리한결 과로서크게기생충( 콕시듐), 세균( 용혈성대장균) 및바이러스(BVD) 로나누었고, 실제로설사 병을일으킨개체두수와이로부터치료일수를조사한결과이다. 전반적으로시험1개월령에발 병원인균이높았고, 시험이진행됨에따라발병원인균들은낮아지는경향이었다. 특히분변으로부터분리동정한결과로서용혈성대장균은대조구( 평균1.8) 가시험구( 평균0.8~ 1.0) 보다더많이포함되어있었고, 바이러스(BVD) 도대조구( 평균3.2) 가시험구( 평균0.8~1.2) 보 다더많았으며, 기생충( 콕시듐) 도대조구( 평균0.6) 가시험구( 평균0.2~0.4) 보다더많았다. 또한발병된개체의치료기간은시험구(0.8~0.9 일) 가대조구(1.5 일) 보다더짧아서치료비절감 및생산비의절감이가능하다.

127 표 12. 전시험기간동안의한우송아지설사발병원인체및발병두수 대 조 구 구분/ 월령 송아지설사병변( 두수) 월령별설사기생충세균성바이러스발병두수 직장내 (Eimeria spp) (E.Coli) (BVDV) ( 설사발병일수 ) 체온, 시험1개월령 (5) (4) (3) (0) (0) 36.8 평균 0.6± )a 1.8± 0.31 a 3.2± 0.41 a 1.4± 0.06 a (2.2) 38.4± 0.8 시 시험1개월령 (3) 39.3 험 (3) (0) (0) 37.3 구 (0) ) 평균 0.2± 0.05 b 0.8± 0.01 bc 0.8± 0.51 c 0.6± 0.01 c (1.2) 38.1± 0.9 시 시험1개월령 (3) 39.4 험 (2) (2) (0) 37.5 구 (0) ) 평균 0.4± 0.91 c 1.0± 0.51 b 1.2± 0.06 b 1.2± 0.17 ab (1.4) 38.3± 0.5 치료기간산정은오전(0.5 일), 오후(0.5 일) 치료를합하여 1.0일로환산함 1) 0.1% 한방사료첨가제첨가 2) 0.3% 한방사료첨가제첨가 3) 평균치에대한표준오차 a-b : 처리구별에따른 평균치의통계적인유의차(p<0.05). 결론적으로, 천연생약제재를이용한시제품첨가구는면역력이증가되어치료기간이 50~60% 정 도가감소되었으며, 결과적으로어느정도의치료비를절감할수있을것으로사료된다. 그리고설 사발병송아지의직장체온은평균 38.10~ 의범위에있었다. 또한시험1구가타처리구에 비하여설사발병율이나치료기간에가장짧았던것을감안하면시제품의첨가비율은 0.1% 가 적정수준으로판단되었다. 따라서본시험의결과를종합해보면연구개발한시제품은설사예방과면역력증강을위한사 료첨가제로더욱유익하며, 발명제품의첨가수준은 0.1% 가가장적당하고, 송아지의성장단계에 따라 0.3% 까지첨가할수있는것으로판단되었다.

128 그림 2. 전시험기간동안의한우송아지설사발병두수 5. 송아지설사치료내역 시험전기간(150 일간) 동안의송아지설사병변및호흡기질병등의처리구간의발병두수를보면 대조구는 7 두, 시험1구가 3 두, 시험2구는 6두가발병하여전체적으로대조구의발병율이시험 구보다더높았다. 표 13. 전시험기간동안의한우송아지설사발병원인체및발병두수 구 분 발병두수 1) ( 두) 대조구 치료기간 ( 일) 발병두수 ( 두) 시험1구 1) 시험2구 2) 치료기간 ( 일) 발병두수 ( 두) 치료기간 ( 일) 전체발병두수 ( 두) 7± 0.8 a 12± 0.8 a 3± 0.9 b 6± 0.4 b 6± 0.6 a 7± 0.5 b 대장균원인균 ( 횟수 ) 바이러스원인균 ( 횟수 ) 기생충원인균 ( 횟수 ) 두당평균치료비 3) 38,880원 25,220원 28,650원 1) 발병두수 : 동일개체가 10일간의간격을두고반복적으로발병하여도 1두로계산함 치료약품비 1 에페드린 : 50cc-1,000 원. 바이트릴 50cc-20,000 원. 아나파주 100cc-25,000 원. 코파마이신 50cc-4,000 원. 제스롱 10cc-3,000 원. 복합부스코판 100cc-22,000 원. 코미틸 50cc-2,000 원. 항히스타민 100cc-1,500 원. 비타민제 50cc-6,000 원. 킹벨린 50cc-1,200 원. 아프라마이신 50cc-10,000 원. 제스롱 20cc-2,000 원등. 2 치료시에인건비는포함하지않음. 1) 0.1% 한방사료첨가제첨가 ; 2) 0.3% 한방사료첨가제첨가 ; 3) 평균치에대한표준오차 a-b : 처리구별에따른평균치의통계적인유의차(p<0.05). 이에따라치료비가대조구 38,880원인데비하여시험1구는 25,220 원, 시험2구는 28,650원으로 대조구가시험구보다월등히많은치료비가소요되었다. 또한치료기간에서도시험구가대조 구보다약 40~50% 정도의치료기간을단축하여빠른회복세를나타내었다. 이런결과로미 루어볼때질병에대한저항력즉면역성이증가되어이루어진것으로사료된다.

129 그림 3. 성장단계에따른송아지설사병치료일수 이상의시험1 을종합해보면, 분만송아지를대상으로생후 2개월령부터생후 7개월령까지 0.1% 에서 0.3% 까지첨가급여시험한결과, 본발명제품으로 0.1% 첨가급여한시험1구가 142.8kg가증체된반면에일반대조구는 137.8kg가증체되어 3.6% 의증체효과가나타났다. 또 한설사발병에대한면역글로블린(IgG) 는 0.1% 첨가급여한시험1구가 mg/dl였으나일 반대조구는 mg/dL로나타나약 5% 의면역성이향상되었다. 따라서시험전기간동안의 설사발병두수및치료일수는대조구가 7두발병에 12일간치료한반면에시험1구는 3두발병에 6 일치료, 시험2구는 6두발병에 7일간치료하여대조구대비약 50~58% 정도치료일수를줄였 다. 그결과치료비는대조구 (38,880 원) 가가장많았고, 시험1구는 25,220 원, 시험2구는 28,650 원으로결과적으로농가의두당치료비의절감액은시험구가대조구에비하여약 10,230 원정도가절감되었다. 13,660원에서 따라서본시험의결과를종합해보면연구개발한시제품은설사예방과면역력증강을위한사 료첨가제로더욱유익하며, 시제품첨가수준은 0.1% 가적정수준으로판단되었다. Ⅴ. 결과요약 한우어린송아지를각처리구별로 8두씩배치하여총 24 두(3 처리 8 두) 를대상으로대조구( 시판용 어린송아지사료급여 ) 와시험구( 시험1 구: 한방제재 0.1% 첨가, 시험2 구: 한방제재 0.3% 첨가구) 를 배치하여총 120 일간육성시험한결과다음과같다. 1. 시험개시체중은 68.3~58.4kg 으로비슷하였으나, 시험5 개월령종료시는대조구, 시험1 구, 시험2구는각각 183.9kg, 186.5kg, 176.8kg으로시험1 구가가장성장률이높았고, 총증체량과일당증체량에서도시험1 구가타처리구보다크게높게나타났다(142.8kg, 1.0kg). 총사료섭

130 취량에서시험1 구(545.9kg) 가가장많았고, 대조구(535.0kg) 와시험2 구(521.6kg) 으로비슷하 였으며, 사료효율은시험2 구(3.48) 가타처리구보다가장좋게나타났다. 2. 혈액의이화학적성상에서총콜레스테롤함량은평균 86.43~97.00 mg/dl 범위에있었고, 트리글리세라이드는 13.26~13.86 mg/dl, GOT는 76.97~79.60 mg/dl, GPT는 19.54~20.97 mg/dl, WBC는 8.75~9.95 k/ μl범위에있었고, RBC는 10.45~11.91 M/ul, 헤모글로빈는 10.74~12.20 g/dl의범위로서처리구간에거의차이가없었다. 3. 혈액중의면역물질인 IgG 를분석한결과, 시험개시전에는 ~678 mg/dl범위로모든 처리구에서비슷한경향이었으나, 시험3 개월령에는시험구(598.14~ mg/dl) 가대조구 ( mg/dl) 에비하여 7 ~8% 정도더높게나타났다. 시험전기간동안의평균 IGY 평 균치는 mg/dl인데비하여시험1구는 mg/dl, 시험2구는 mg/dl로시 험구가크게높게나타났다. 4. 전시험기간동안의송아지분변을조사한결과, 전반적으로시험1~2개월령에발병원인균 이가장높았으나, 시험이진행됨에따라감소하는경향이었다. 특히분변으로부터세균성 인용혈성대장균은대조구( 평균 1.80) 가시험구( 평균 0.80~1.00) 보다더많이포함되어있었 고, 바이러스(BVD) 도대조구( 평균 3.20) 가시험구( 평균0.80~1.20) 보다더많았다. 5. 시험전기간동안의설사발병두수및치료일수는대조구는 7두발병에 12일간치료하였으나 시험1구는 3두발병에 8 일간치료, 시험2구는 6두발병에 7일간치료하여치료일수를 50~ 58% 줄였다. 그결과두당치료비의절감액은시험구가대조구에비하여약 13,660원에서 10,230 원정도가절감되었다. 따라서본시험의결과를종합해보면연구개발한시제품은설사예방과치료양쪽모두에어 느정도는효능은있었고, 특히설사예방및면역력증강을위한사료첨가제로더욱유익하며, 시제품첨가수준은 0.1% 가적정수준으로판단되었다. 그러나개발된한방제재는바이러스 (BVD) 설사원인균큰영향을미치지않는것으로사료된다.

131 Ⅴ. 참고문헌 1. Association of Official Analytical Chemist Official Methods at Analysis of the Association 13th ed. Association of Official Analytical chemists. Washington. 2. Berrier, H. H Diagnostic Aids in the Practice of Veterinary Medicine. Alban, St. Louis. 3. Lippke, H Forage characteristics related to intake, digestibility and gain by ruminants. J. Anim. Sci. 50: Mazumder, M. A. R., Hossain, M. M. and Akter, S Effect of levels of concentrate supplement on live weight gain and carcass characteristics in sheep on restricted grazing, Asian-Aust. J. Anim. Sci. 11(1): Meissner, H. H., Smuts, M. and Coertze, R. J Characteristics and efficiency of fastgrowing steers fed different dietary energy concentrations. J. Anim. Sci. 73: Shaver, R. D., Satter, L. D. and Jorgensen, N. A Impact of forage fiber content on digestion and digesta passage in lactating dairy cows. J. Dairy Sci. 71: 박종희. (2002) 한약백과도감( 상, 하). 신일상사. p 향후계획및기대효과 특허출원에따른사업화추진검토 향후희망업체및농가에게기술이전

132 < 첨부 > 포장된완제품모습 1 분말화된완제품모습 2 우: 완제품, 좌: 생약혼합물 사진 1. 천연한방송아지설사예방치료보조제품모습 시험송아지의처리별구획배치, 사료급여및체중측정모습 사진2. 시험송아지의처리별구획배치, 사료급여및체중측정모습

133 구분산학협동소요기간계속연구기간 07 ~ 계속 사업명연구과제명 산학협동및현장애로과제경북가축유전자원보존및발굴 색인용어재래돼지, 재래닭, 계통보존 연 구 원 별 임 무 구 분 소 속 성 명 전화번호 담당임무 사업총괄 한우연구실 조광현 관련업무총괄 연구책임자 한우연구실 오명곤 연구책임 공동연구자한우연구실박용수 연구설계및수행 공동연구자 사업과 김기돈 재래돼지관리 공동연구자 한우연구실 정대진 닭분야담당 공동연구자 한우연구실 손호진 재래닭관리 공동연구자 농진청 진현주 돼지분야 공동연구자농진청연성흠 소분야 1. 연구목적및배경 가. 세계적으로동물유전자원의보호및권리확보를강화하고있으나, 국내에서는동물특히가축에대한체계적인조사및연구가없었고이의보존체계도확립되어있지않다. 나. 본연구에서는농진청유전자원시험장을중심으로지자체연구소와공동으로재래가축의유전자원을체계적으로관리및보존하고자한다. 2. 재료및방법 가. 시험기간 : 2008년 나. 시험장소 : 경상북도축산기술연구소 다. 공시축 : 한우및칡소정액, 재래돼지, 재래닭 라. 시험방법 : 동결유전자( 한우및칡소) 동결유전자원의확보( 각각 2,000 straw) 재래돼지및재래닭 유전자분석 - 계통확립 계통보존을위한교배및관리계획수립 도내에알려지지않은재래유전자원의발굴

134 마. 추진경과 동물유전자원협의회참석 : 동물유전자원보유현황통보 : 동물유전자원관리기관신청 : 동물유전자원관리기관지정 : 개축종 ( 재래돼지, 재래닭, 아라카나) 신규유전자원확보및유전자원신청 : 칡소 31두 농업유전자원관리기관지정 : 한우( 칡소 ), 재래돼지, 재래닭 ( 적갈색 ), 연산오계, 아라카나, 흑염소 ( 영양) 3. 시험성적( 특성조사) 08 년유전자원관리기관으로지정되어관리되고있는자원으로는재래돼지, 재래닭및아라카나종닭, 3 종이다. 추가로흑염소( 영양) 가유전자원으로 등록하였다. 향후칡소확보후유전자원으로등록예정이다(09 년). 표 1. 생축유전자원보유현황 구분생축유전자원 ( 마리) 축종명 품종수 계통수 성축 육성축 자축 계 소 칡소 돼지 재래돼지 염소 흑염소 영양 닭 재래닭 적갈색 닭 아라카나 닭 연산오계 < 한우( 칡소)> 가. 유전자원품명 한우 ( 칡소)

135 나. 보유자원의특성 조선초조준의저서 고전한국마의방전서 에세로무늬줄이있는 소를칡소라기록하고있으며칡덩굴같은흑색무늬가마치호랑이와흡사 하다하여 호반우 로불렀음 해방후한우개량에서한우의모색을황갈색으로통일함으로써칡소를 비롯한이모색전통한우의멸종위기를가속화하였음 1993년국립종축원에서수입개방에대비하여강원도산간오지등의 농가에서수집하여증식시켰으나지속되지못하였음 외모특징 - 모색 : 모색은황갈색바탕에검정또는흑갈색과검정색바탕에흑갈색 또는갈색세로줄무늬가몸전체에있음 - 체형 : 후구( 요각- 좌골) 쪽으로는사구( 斜尻 : 경사진엉덩이) 진것이 많으며엉덩이의기울기만큼뒷다리가안쪽으로배치됨 - 뿔 : 유각종이며암소는가늘고수소는굵으나길이는짧은편에속함 - 비경( 코) : 대부분흑색이나회살( 肉 ) 색도나타남, 비경주위는흰 테두리를보임 - 머리 : 수소는짧으며암소는갸름한편임 - 전구 : 성우암소의흉폭은 25~50cm사이이며수소는 30~60cm정도 보유자원사진 다. 활용분야 칡소유전자원보존및증식 칡소를활용한브랜드개발 칡소의성장, 번식등의생리적특성규명 개량및육질향상을위한시험연구에활용

136 < 재래돼지> 가. 유전자원품명 재래돼지 나. 보유자원의특성 일반특성 - 모색비율 : 흑모 46.2% 및백모출현이 53.8% - 비단색 : 흑색이 92.3% 였고백반이 7.7% - 지제색 : 전부흑색 100% - 코길이 : 단형질이 92.3%, 장형질이 7.7% - 귀모양 : 직립상향과직립전향이각각 46.2%, 하향은 7.7% - 안면주름 : 보유한개체는 92.3% - 등선 : 약간궁형이 84.6%, 궁형이 15.4% - 갈비주름 : 전부없음 - 꼬리부착정도 : 높음이 76.9%, 낮음이 23.1% - 평균유두수는 6쌍 성돈의체형 - 70kg 도달일령 : 123.1±6.0일 - 체장은평균 123.4cm, 체고는평균 65.8cm 및흉폭은 30.8cm 재래돼지의번식성적 - 재래돼지의평균산차는 3.0산 - 임신기간 : 평균 117.4일 - 산자수 : 평균 8.6복 - 첫종부일 : 생후 394일 재래돼지의성장특성 다. - 생시체중 : 1.09kg - 21 일령체중 : 5.8kg - 70kg 도달일령 : 평균 123.1일 활용분야 재래돼지의증식을통한유전자원보존 재래돼지산업화를위한개량및각종시험연구사업에활용

137 < 흑염소( 영양)> 가. 나. 유전자원품명 흑염소( 영양) 보유자원의특성 외모( 모색, 모장, 수염, 육염, 뿔유무) - 모색 : 전흑색이 71.4%, 전흑이모색이 28.6% - 모장 : 단모 85.7%, 일부장모 2.9%, 장모 11.4% - 육염 : 육염이있는개체가 5.7%, 없는개체가 94.3% 체형및체중 - 6 개월령비거세흑염소체중 : 14.6~ 17kg - 암염소 : 생시 1.212g, 30일령 5.440g, 60일령 7.280g 90일령 8.462g, 120 보유자원사진 일령 g 및 150일령 g 다. 활용분야 영양재래흑염소의순수한집단조성및보존 영양재래흑염소사육농가의소득증대를위한부존자원이용사료개발 < 재래닭( 적갈색)> 가. 유전자원품명 재래닭( 적갈색) 나. 보유자원의특성 몸길이 20~28cm, 몸무게 1.6~2.5kg 몸무게 : 수컷이 2.2~2.5kg, 암컷이 1.6~1.9kg

138 볏 부리 날개 : 붉은색이고홑볏( 단관) 이며눈은밝은밤색 : : 몸색깔 단단하고약간굽어있으며목밑에있는고기수염이긴편 다른닭들에비해조금길고힘이좋다 : 적갈색 산란 : 연간 80~120개 난중 : 50~56g 다. 활용분야 재래닭을이용한기능성계육개발 재래닭의증식및농가사육기반확대 재래닭의생리, 번식및사양특성조사및이에맞는사료개발 < 아라카나> 가. 유전자원품명 아라카나 나. 보유자원의특성 아라카나종(Arakana) 종은칠레북부가원산지로야생계였으나 남아메리카와벨기에등유럽에서육종개량한품종 성질이사나운편이며산육겸용으로활용되나훈련을통하여싸움닭 으로도이용 모색은은갈색또는황홍색, 가슴털은검은색, 머리는작은편이고, 볏은주름져있고, 귓불은노란색이고, 정강이는대부분노란색이나 옆은회갈색 체중 : 암탉 1.5~1.8kg, 수탉 2.5~2.7kg 초산일령( 初産日齡 ) : 170~180일령 산란수 : 년간 160~180개정도 난중 : 대략 45g 정도 다. 활용분야 유전자원보존및멸종방지를위한증식기반확보 아라카나종에적합한육추및번식체계확립

139 < 연산오계> 가. 나. 유전자원품명 연산오계 보유자원의특성 체형 : 둥근체형 크기 : 수컷 1.5kg 안팎, 암컷 kg 털색 생식 : : 검은색 난생 국내분포 보유자원사진 : 품종개량과보존이불완전한상태 다. 활용분야 연산오계의보존및멸종예방 연산오계의혈통고정을위한다양한증식체계확립 사양관리체계확립 기대효과 가. 연구소재래가축( 칡소정액, 재래돼지, 재래닭 ) 의체계적인관리및증식 나. 다. 도내에알려지지않은개래가축유전자원의체계적인발굴및보존 고유한계통으로확인되면경북도고유의재래가축으로등록 라. 재래가축을이용한농가소득원창출 - 브랜드축산물개발 마. 연구소의재래가축사육및유지에필요한예산지원 ( 농진청) 향후계획 가. 재래가축에대한추가증식및관리 나. 도내에알려지지않은재래가축유전자원의체계적인발굴및보존