<B0F5C6CEC0CCB5B6BCD25FC0DAB9AE312E687770>

Transcription

1

2

3

4

5 1.1 곰팡이독소의개요 곰팡이독소 (Mycotoxins) 는곰팡이가생산하는 2차대사산물로서사람과가축에질병이나이상생리작용을유발하는물질이다. 곡류, 견과류와곰팡이가번식하기쉬운식품에서주로발생하며, 이는온도, 습도, 수확전, 수확기, 수확후의강우량의정도와같은환경적요인에의해영향을받는다. 자연계에는수만종의곰팡이가존재하지만지금까지알려진곰팡이독소는 300여종이다. 식품에서곰팡이독소오염은완전히피할수가없으므로, 농산물과그들생산품에대한검사가필수적이다. FAO에의하면, 세계농작물의 25% 이상이곰팡이독소에감염되었다고한다. 이로인해대부분의나라들은곰팡이독소오염을최소화하기위해허용기준을정하고있다. 곰팡이독소는크게생성균에따라 Aspergillus속, Penicillium속, Fusarium속곰팡이독소등으로구분할수있다. Aspergillus속곰팡이독소는 aflatoxin, ochratoxin, 그리고 sterigmatocystin 등을들수있다. Penicillium속은 patulin, citrinin으로대표되며 patulin의경우 Gram 양성과음성균에대한항생물질로사용되어왔으나연구결과포유류나어류등에급성독성을나타내는것으로확인되었다. 그외 Penicillium속곰팡이독소로는 islanditoxin, luteoskyrin, 그리고 rubratoxin 등이있다. Fusarium속은 fumonisins, T-2 toxin, Deoxynivalenol(DON) 및 zearalenone 등이중요한독소이다. 3

6 국내 외의연구동향을살펴보면, 전세계적으로모든곰팡이독소를대상으로활발히연구가진행되고있는실정이며 Fusarium 속곰팡이독소에대한연구비중이가장높으며곰팡이독소별로는 aflatoxin에대한연구가가장활발히이루어지고있다. 그뒤로 ochratoxin A, zearalenone, fumonisin 등의비중이높고, Penicillium속곰팡이독소인 patulin과 citrinin의경우 1990년이후연구가활기를띄고있다. Aspergillus속의곰팡이독소인 ochratoxin의경우 EU 등은기준및규격이설정되어있으나우리나라의경우기준이설정되어있지않아수입식품의증가에따른안전성확보차원에서도식품및한약재등전반에걸쳐오염실태조사연구가이루어져야할것이다. 따라서여기서는외국의대부분나라에서관심을가지고연구가진행되고있는 Aspergillus 속의대표적인독소인 aflatoxin, ochratoxin A, Penicillium 속곰팡이독소인 patulin에대해서살펴보았다. 4

7

8 2.1 Aflatoxin 개요 Aflatoxin 은 1960 년에영국에서처음밝혀졌으며, Asp. flavus 와 그독소에오염된땅콩사료를먹은칠면조 100,000 마리이상이죽 어 Turkey 'X' Disease" 로알려졌다. 온도가 24-35, 수분이 7% 이상일때 Asp. flavus와 Asp. parasiticus에의해생성되는 2차대사산물이다. 주요오염식품은쌀, 옥수수, 견과류, 땅콩, 칠리고추, 무화과, 건조과실류와향신료등이다. 밝혀진 18종의아플라톡신중 B1, B2, G1, G2가주요독소이고아플라톡신 B1이가장흔히발견되고또한가장강력한독성을가졌다. 아플라톡신 B1은간장에서 cytochrome p450(cyp) 에의해활성화되고, 신장에서는 peroxidase에의해아플라톡신 B1 8,9-oxide로변화하여 DNA에결합하여강력한발암작용을나타낸다. 아플라톡신 B1의대사물인 M1은아플라톡신에오염된사료를섭취한동물의유즙과유제품에서발견된다. 아플라톡신 M 은아플라톡신 B1 보다독성은낮으나간독성및발암성을보인다. 아플라톡신은사람과동물모두에영향을미치므로가장중요하다. 미국의경우사람에대한아플라톡신감염빈도는알려져있지 7

9 않고동물에서는산발적인예가보고되어있다. Aflatoxin B1은실험동물에서는돌연변이, 발암및기형등을일으키며사람에게는간암을일으키는물질중의하나로알려져있으며, IARC(International Agency for Research on Cancer) 에서는아플라톡신을인체발암을일으키는 Group 1 발암물질로정의하고있다. 대부분의나라에서는아플라톡신 B1, 또는 B1, B2, G1, G2를포함한총아플라톡신으로허용기준치를정해놓고있고아플라톡신 M1에대해서도규제를하고있다. 8

10 2.2 Aflatoxin 특성 물리 화학적특성순수한 Aflatoxin B1은흰색에서노란색을띈결정체로냄새가없다. Aflatoxin B1, B2, G1, G2, M1, M2의분자량은 310~330 이며, chloroform, acetone, acetonitrile, methanol 등에녹는다. B1, B2는푸른색형광을띄며, G1, G2는 Blue-Green 형광을 M1, M2 는 Blue-Violet 형광을띈다. 오리새끼로실험한결과에의하면, AFB1 AFG1 AFB2 AFG2 순으로독성 (LD50), 발암성, 돌연변이유발성이강했다. 구조 9

11 2.2.2 아플라톡신의화학적반응열 : 아플라톡신은건조상태에서는매우안정하여 로가열하여야만분해된다. 그러나수분존재시높은온도에서는일정기간이지난후파괴된다. 알카리 : 알카리용액에서락톤고리부분이가수분해된다. 산화제 : 차아염소산나트륨, 과망간산칼륨, 과산화수소와같은산화제는아플라톡신과반응하여아플라톡신의형광성을잃게한다. 환원 : 아플라톡신 B1, G1에수소를첨가하면, 아플라톡신 B2, G2로변화된다. 10

12 2.3 Aflatoxin 분석법 다양한식품에서아플라톡신을확인하고함량을측정하기위해많은화학적분석법들이개발되었다. 기본적인과정은추출, 지방제거, 정제, 분리와정량단계를거친다. 식품의성질에따라분석법은불필요한단계를빼고단순화시킬수있다. 화학적분석법은땅콩, 옥수수, 목화씨, 견과류와동물용사료에대해서개발되어있다. 우유와유제품에함유되어있는아플라톡신 M은매우낮은농도 (ppb와 ppt) 로함유되어있어화학적분석법이훨씬더민감하다. 아플라톡신분석법은 AOAC의 49장에나와있으며, 식품공전별책 412~414쪽에식품중곰팡이독소시험법이실려있다. 식품중총아플라톡신의분석은형광검출기를장착한 HPLC를이용하여정량하는것이일반적이다. 아플라톡신의정제를위해 multifunctional column을사용하거나 Sep-pak silica cartridge를사용하는등의방법이사용되어왔으나, 최근들어 immunoaffinity column을이용한신속하고간편한정제법이제시되고있다. 11

13 2.4 Aflatoxin 독성 흡수, 분포, 배설아플라톡신 B1, B2, G1, G2가랫드소장의구경막을통과하는속도를측정한결과, 소장에서아플라톡신흡수가 1차적으로매우빠르게일어났으며흡수율상수 (Ka) 는각각 5.84±0.05/hr(B1), 4.06±0.09/hr(B2), 2.09±0.03/hr(G1), 1.58±0.04/hr(G2) 였다. 무독한 3 H-아플라톡신 B1(0.70μg / kg ) 을 Wistar 숫랫드의복강내에투여하였더니혈액, 혈장, 간으로의흡수가초기 (0-2시간) 에는급격히증가하였고 2단계 (2-12시간) 에서는점진적으로증가하였다. 아플라톡신의대부분은알부민과비공유적으로결합된형태였으며간의아세포부위에서마이크로좀이가장높게분포하고있으며세포질에서는 2시간째에최고로도달한후새로운평형상태까지감소하였다. 핵내부에존재하는아플라톡신 B1은주로 deoxyribonucleoprotein에서검출되었고 84% 가비공유적결합형태로존재하였다. 이결과로아플라톡신 B1이투여부위에서혈액을통하여간과아세포그리고핵내부로주로비공유적인결합형태로수송됨을알수있다. Feeder 돼지에게아플라톡신 B1 LD50 용량 (0.1 mg/kg) 을 Aspergillus flavus의쌀배양물로공급하고 market wt 돼지는 14 일간 400ng/g의아플라톡신 B1을자연적으로오염시킨옥수수를공급하여신장조직, 간그리고근육에서아플라톡신 B1과 M1 함 12

14 량을측정하였다. 아플라톡신 B1과 M1은모든조직내에서같은농도로나타났으나다만신장내에서는아플라톡신 M1이다소높게나타났다. 아플라톡신 B1이강력한간독성및간암을일으키는물질로독성을나타내기위해서는 aflatoxin B1-8,9-oxide로활성화되어야한다. Epoxidation microsomal monooxygenase는아플라톡신 B1 을덜유독한대사체인 M1과 Q1으로전환시킨다. 폐는아플라톡신 B1의흡입및순환시위험이크다. 토끼의폐와간에서 microsomal AFB1-DNA결합 (AFB1-8,9-oxide 형태 ), 아플라톡신 M1 생성, 아플라톡신 Q1 생성을분석한결과, AFB1-DNA 결합의 microsomal protein 1 mg 당 Vmax는폐와간사이에차이가없었지만 ( 폐와간이각각 1.06±0.13과 2.12±1.30 nmol/mg microsomal protein/hr), cytochrome p450 1mg 당 Vmax는간에서보다폐에서농도가더높게나타났다 ( 폐와간이각각 3.64± ±0.70 nmol/nmol p450/hr). 이러한결과는폐가아플라톡신 B1을활성화시킬수있으며토끼의폐마이크로좀은이반응에대해매우큰활성을가짐을알수있다. 랫드, 마우스, 원숭이, 사람의간마이크로좀에서아플라톡신 B1이산화되어아플라톡신 M1, Q1 그리고 P1으로대사되는생체내변화의초기속도측정과반응중간체인아플라톡신 B1-8,9-epoxide를측정하기위해숫 Sprague Dawley 랫드와숫 Swiss Webster 마우스가사용되었다. 마우스와원숭이의마이크로좀은 124 um의아플라톡신 B1농도에서가장높은 AFB1-8,9-epoxide 형성속도를나타내었다. 15~475 um의농도범위 13

15 에서아플라톡신 B1 이 AFB1-8,9-epoxide 로전환되는비율이랫드 와사람의마이크로좀은낮은기질농도에서증가하였으나마우스 와원숭이마이크로좀에서는증가하지않았다 독성연구급성독성과사망심각한아플라톡신감염증상은간의출혈괴사, 담관증식, 부종과졸음을동반한다. 동물연구에서토끼와오리와같은민감종 ( 種 ) 의치사량은낮은중간값 (0.3 mg/kg) 이며닭은 18mg/kg이며쥐는더큰내성을가진다. 성인은아플라톡신에대해높은내성을가진다고보고되어있으며보통어린이들은사망에이르기도한다. 면역억제작용면역억제작용은사육동물과실험동물에서밝혀져있으나사람에대한연구는아직많지않아결론을내기가어렵다. 발암아플라톡신은 messenger-rna 합성을억제하며, DNA합성에도영향을미친다. RNA에대한작용부위는주로핵으로서전구물질이 RNA와결합하는것을방해하는것으로나타났다. 또한 DNA- 의존 RNA polymerase의활성을억제한결과세포질의 RNA도변화되는것으로생각된다. Messenger-RNA 합성의억제는단백질합성이억제되며이와관련된지방의이동능력감소는이독소에감염된동물의간장에서주로볼수있는초기의병변이다. 아플라톡신은사람에대해서는간암을일으키는물질로서널리 14

16 알려져있다. 간암은 P53 종양-억제유전자에서결손형돌연변이의발생과종양유전자의왕성한활동에의해발생된다. 아플라톡신 B1의반복투여는간및신장 DNA의합성을억제하였으나, DNA 합성속도는칼로리를제한하였던실험동물보다자유식을공급한동물에서더빨랐다. 아플라톡신 B1 투여 3일후 DNA 합성속도는대조군수치로회복되었다. 아플라톡신 B1은세포증식을 33% 까지억제하였으나투여 3일후에신장세포의증식이회복되었다. 세포증식의재생율은칼로리제한군보다자유식랫드에서다소높았으며간과신장의아플라톡신 B1-유도 DNA 합성은칼로리제한에의해지연되었다. Fisher 랫드에저지방고탄수화물식이 (HC), 같은칼로리에지방을함유하는식이 (IC), 고칼로리지방식이 (HF) 와상업사료를투여하였다. 그리고이식이가외인성 DNA에대한아플라톡신 B1 의결합과간장의 glutathione transferase(gsts), cytochrome 2B1 과 1A1의활성에대해연구하였다. 외인성 DNA에대한 3 H-aflatoxin B1의마이크로좀-매개결합은상업시료군과 IC군에비하여 HC군에서유의적으로저하되었다. 고탄수화물 / 저지방식이가고지방식이에비하여아플라톡신 B1의마이크로좀-매개의 epoxidation을좀더감소시키는것으로나타났다. 일반적으로고지방식이가상업사료군과고탄수화물군에비하여 cytochrome 2B1과 1A1의활성을증가시켰다. 따라서아플라톡신 B1의해독작용이증가하여간장의거대세포에결합할수있는아플라톡신 B1 의양을감소시킨다. 15

17 2.5 Aflatoxin 허용기준 유럽연합 (EU) 은땅콩, 견과류, 건과일, 곡류, 가공식품등에 AFB1로서 5μg / kg, 총아플라톡신으로서 10μg / kg을정하고있다. 미국식품의약품 (FDA) 은브라질넛, 식품, 땅콩과가공품, 피스타치오넛등에총아플라톡신으로서 20μg / kg으로규제하고있다. 국제규격위원회 (CODEX) 는 AFB1로서 15μg / kg, 우리나라는 AFB1 로서 10μg / kg이하 ( 곡류, 두류, 견과류및그단순가공품 ) 로정하고있다. 아플라톡신 M1의허용량은 CODEX 미국에서는 0.5μg / kg, 유럽은 0.05μg / kg, 스위스는 0.01μg / kg, 우리나라는 0.5μg / kg으로정하고있다. 16

18 2.6 국내연구동향 식품조사연구사업 년식품의약품안전청연구사업식품중곰팡이독소모니터링연구 (Ⅱ) 의일환으로 5개광역시, 3개시의슈퍼마겟, 백화점, 재래시장등에서견과류및그단순가공품, 곡류, 두류및그단순가공품에대해아플라톡신 B1, B2, G1, G2의오염도를조사하였다. 조사한시료중피넛버터에서 46.7%, 콩가루에서 4.0%, 메주가루 10.0%, 된장에서 7.7% 의아플라톡신이검출되었고, aflatoxin B1은 2.5ppb, aflatoxin G1은 1.1ppb가최대검출농도였다 년식품의약품안전청연구사업식품중곰팡이독소모니터링연구 (Ⅲ) 에서유 ( 乳 ) 중아플라톡신 M 오염도를조사하였는데, 시유는서울시내할인마트, 백화점에서구입하였고, 원유는유가공회사 3곳에서수집하였다. 아플라톡신 M1은 5.4 ~ 72.7 ng/kg, 아플라톡신 M2는 5.1 ~ 29.0ng/kg 검출되었다. 아플라톡신을중심으로곰팡이독소의국가안전관리체계구축을위한용역연구에서는아플라톡신의기기분석법과면역분석법확립, 식품중아플라톡신오염도조사, 우유중의아플라톡신 M1 모니터링을위한 HPLC system 구축과혈청및뇨중아플라톡 17

19 신 B1 모니터링, 아플라톡신의상대독성계수및생체내 Biomarker 에대한연구, 아플라톡신균의생성방지및독성저감에 대한연구과제가수행되었다 년식품의약품안전청연구사업 5개광역시의할인마트, 백화점, 재래시장에서견과류, 곡류, 두류, 가공식품, 건조과일, 이유식, 커피등의시료를구입하여총아플라톡신을조사하였으며아울러 immunoaffinity column을이용한아플라톡신분석법확립, 총아플라톡신의노출량을평가하였다. 이연구에서 immunoaffinity column과 HPLC-FLD를이용한식품중총아플라톡신분석법을확립하였고, 곡류 ( 기장 1점 0.99 ng/g), 견과류 ( 잣 2점평균 1.23 ng/g), 가공품 ( 땅콩버터 9건평균 0,97ng/g), 기타식품 ( 메주가루 1점, 고춧가루 3점평균 0.11 ng/g) 에서총아플라톡신이오염된것으로나타났다. 총아플라톡신 1일섭취량은 0.22ng/kg bw/day로산출되었다 곰팡이독소위해성평가 년식품의약품안전청연구사업국내곡류중아플라톡신 B1 오염도자료와식품섭취패턴을고려하여위해성평가를수행하였다. 나라별 1일인체노출량은 3.5~77ng/kg/day 로보고되어있으며일반성인 (B형간염비보균자 ) 은인체노출수준을 1.1x10-6 kg/day 이하로조절하여야하며, 일반성인 ( 체중 60kg 고려 ) 기준으로곡류, 두류, 견과류등을포함 18

20 한식품의아플라톡신 B1 최대오염수준을 0.2ppb 이하로조정하여야한다고보고했다. 일반성인의 1일곡류, 두류, 견과류섭취량을 g/day라고한다면, 곡류, 두류, 견과류등을포함한식품중의아플라톡신 B1의최대오염수준은 0.2ppb 이하로조정하여야한다 년식품의약품안전청용역연구사업수컷랫드 (SD계랫드, 샘타코, 경기도 ) 를이용하여아플라톡신 B1, B2, G1에대한안전성과상대독성에대한조기지표들을찾고자 28일간의반복투여독성실험과 12, 24, 48시간에걸친 one shot short-term 실험 (AFB1, B2, G1) 을병행하였다. 4주간의반복독성실험에서혈액학적, 혈청생화학적, 간, 신장등의각주요장기에대해병리학적조사를하였다 년식품의약품안전청용역연구사업국내산쌀, 보리, 옥수수등의곡류와발효식품, 중국산한약재, 혈청, 뇨등의인체시료, 땅콩등의견과류, 우유및사료등에대해아플라톡신 B1과 M1을조사하였다. 연구결과, 옥수수 2점 (53ppb), 중국산한약재 2점이, 견과류에서는정량한계이하 ~ ppb 까지아플라톡신B1이검출되었고, 인체시료인뇨에서는 ppb가검출되었다. 우유에서아플라톡신M1이 0.020~0.034, ppb 검출되었다. 19

21 2.7 Aflatoxin 질의응답 1. Aflatoxin 이란무엇인가? Asp. flavus와 Asp. parasiticus의 2차대사산물이며 aflatoxin B1이가장독성이강한발암물질이다. 아플라톡신으로는 B1, B2, G1, G2, M1, M2 등이있다. 2. 어떤식품에 aflatoxin이오염되는가? 견과류, 곡류, 두류등의광범위한식품에오염될수있으며이들농산물은개화기에서수확기까지의이상기후또는수확및저장과정중에곰팡이의오염에의해아플라톡신이생성된다. 3. Aflatoxin 중독은일반적인가? 1960년영국에서 10만마리이상의칠면조가브라질에서수입한땅콩사료를먹고폐사한사건이후, 인도를비롯한많은국가에서발생하고있다. 우리나라의경우 1997년식품의약품안전청에서는 1,632건의수입곡류등에대한검사결과국산가공식품인된장 1건에서아플라톡신이검출되어폐기처분된바있다. 20

22 4. Aflatoxin 독성은? 실험동물에는돌연변이, 발암및기형등을일으키며사람에 게는간암을일으킨다. 5. Aflatoxin은어떻게피할수있나? 곰팡이가피었거나의심나는식품은섭취하지말아야한다. 생성된곰팡이독소는가열에의해파괴되지않는다. 식품중에오염된아플라톡신을제거하는방법은현재없기때문에오염되지않은식품을구입하는것이최선이며, 만일그런식품을구입한경우에는그식품을폐기하는것이현명하다. 6. 식품중에 aflatoxin 의우리나라의잔류허용기준은? AFB1 으로서 10 μg / kg ( 곡류, 두류, 견과류및그단순가공품 ) 이다. 7. Aflatoxin의제외국관리기준은? 유럽연합 (EU) : AFB1 으로서 5μg / kg, 총아플라톡신으로서 10μg / kg ( 땅콩, 견과류, 건과일, 곡류, 가공식품등 ) 이다. 미국식품의약품 (FDA) : 총아플라톡신으로서 20μg / kg ( 브라질넛, 식품, 땅콩과가공품, 피스타치오넛등 ) 이다. 국제규격위원회 (CODEX) : AFB1으로서 15μg / kg이다. 21

23 8. 식품의약품안전청은어떤식품에대해 aflatoxin 을조사하 였는가? 식약의약품안전청은 2001년부터 2005년까지아플라톡신오염가능성이높은농산물, 땅콩가공식품, 대두가공품, 원유및시유, 건조과실류, 이유식등다양한식품에대해조사하였다. 이들중피넛버터, 콩가루, 메주가루, 고춧가루, 된장, 옥수수, 우유에서극미량의아플라톡신이검출되었다. 22

24

25 3.1 Patulin 개요 파툴린은독소생성곰팡이 Penicillium patulum에서이름이명명되었고 1986년이후부터파툴린을생성하는다른속의균들이추가적으로등록되었다. 파툴린은 polykeptide lactone으로 P. expansum, P. patulum 등을포함한 Penicillium 속곰팡이와 Aspergillus clavatus 등의 Aspergillus 속및 Byssochlamys 속균들에의해생성된다. 파툴린이가장흔히발견되는식품은사과이며배, 포도와다른과일을포함한상한과실류와상한과실류로제조된쥬스와과실가공품에서발견되고있다. 또한채소류, 곡류와사일로에저장된사료에서때때로파툴린오염이보고되고있다. 사과쥬스에서의파툴린생성균은주로 P. expansum이다. 파툴린은초기연구에서일부세균에대해항생제로작용하는것으로밝혀졌으나, 이후에는동물과사람에대해서독성이매우강한것으로연구되었다. 랫드에서피하주사에의한파툴린의 LD50은 mg/kg 이며, 피하육종 ( 肉腫 ) 을유발하기도하는것으로알려져있다. 그러나아직까지사람에게발암성을나타낸뚜렷한결과는없어, 현재 IARC(The International Agency for Research on Cancer) 는파툴린을인체발암물질로분류할수없는 Group 3으로분류하고있다. 파툴린은발효에의해파괴된다는보고가있으며이를뒷받침하는결과로알코올성과일음료또는과일쥬스로제조된식초에서는파툴린이발견되지않았다. 그러나열처리과정은파툴린수 25

26 준만감소시키므로저온살균처리한사과쥬스에는파툴린이존재 할수있다. 26

27 3.2 Patulin 특성 물리 화학적특성파툴린은광학활성이없는에테르추출물에서분리된흰결정체이다. 약 110 에서녹으며, 감압하에서는 에서승화된다. 물, 메탄올, 에탄올, 아세톤그리고에틸과아밀아세테이트에녹고, 디에틸에테르와벤젠에잘녹지않는다. 산용액에서안정하지만, 2N 황산에서 6시간끓일때파괴될수있다. 알카리에가수분해될수있고 SO2와발효에의해감소될수있다. 구조 27

28 3.2.2 안정성 SO2가과일쥬스또는다른식품에식품보존제로사용될때, 파툴린이파괴된다고한다. 비발효사과쥬스를사이다와혼합한 sweet" 사이다에서는파툴린이발견된다. 연구에의하면, 발효가일어나는동안파툴린이파괴된다고한다. 그러나 ascadiol과같은부산물의독성에대해서는완전히연구되지않고있다. 파툴린은 ph 6 이하의약산성에서, 100 까지온도를올리는열처리공정에서도비교적안정하다. 그러나 sulfite류, sulfhydryl 기, ascorbic acid와공존하면서서히분해되는것으로알려져있으며, 10% ozone 수용액에서는 1분이내에완전히분해된다. 28

29 3.3 Patulin 분석법 사과쥬스, 사과쥬스농축물등현재사용되고있는분석법의대부분은 ethyl acetate로파툴린을추출하고, Na 2 HCO 3 용액으로분획한후, HPLC - UV detector (280nm) 로검출과정량하는 AOAC( AOAC ) 분석법이가장흔히사용되고있다. 최근에는파툴린추출및정제에 ethyl acetate 추출법대신에고상추출칼럼 (solid-phase extraction columns) 을사용하는방법도적용되고있다. 식품에서검출된파툴린의확인은 gas chromatograpy / mass spectrometry (GC/MS) 를사용한다. 파툴린은알칼리조건에서불안정하므로분석시사용하는알칼리용매와접촉하는시간을최소화하여야하며, 공기에노출되는시간등파툴린의안정성에영향을미치는중요한요소를충분히고려하여야한다. 29

30 3.4 Patulin 독성 흡수, 분포, 배설태어난후 41-66주된 Sprague-Dawley 숫실험쥐 17마리와암실험쥐 12마리에게 1 mol/litre의구연산완충용액에파툴린 0 또는 1.5mg/kg bw 수준으로노출시킨후구연산완충용액에 14 C- 파툴린을넣어 3mg/kg bw 를 1회성으로투여하였다. 그리고변, 소변, CO 2 를수집하였고혈액을채취하여파툴린함량을측정한결과, 파툴린은투여후 24 시간이내에대부분이변과뇨로배설되었으며, 7일간배설된파툴린은투여량의 49% 가변에서 36% 가뇨에서나타났다. 또파툴린의 1-2% 는 CO 2 에서발견되었다. 투여 7일이후, 투여한파툴린의 2-3% 정도만연조직과혈액에서발견되었으며, 대부분의파툴린은적혈구와혈액이풍부한조직 ( 비장, 신장, 폐, 간 ) 에분포되어있었다 효소와다른생화학적효소에대한영향 in vivo 연구파툴린중독증일때간, 신장과장조직의 aldolase의농도가감소하였다. 뒤이은연구에서 aldolase를분리, 정제하여동태특성 (kinetic properties) 을연구한결과정상쥐와파툴린처리쥐의간 aldolase 역학부분에서뚜렷한변화가나타나지않았다. 따라서 30

31 연구자는파툴린중독증은간 aldolase의생합성을저해한다고결론지었다. 10마리의실험쥐에게 3개월동안균형식, Penicillium patulum을감염시킨식이또는정제파툴린 ( 이틀에한번씩 1mg/kg bw) 를복막내주사로투여하였다. 절식시글루코스함량이올라갔으며당부하검사 ( glucose tolerance test) 에서글루코스곡선이올라갔고인슐린생산이감소하였다. 이결과로연구자는파툴린은당뇨병유발물질이라고보고하였다. 다른연구에서는간, 신장과내장의글라이코겐 (glycogen) 의농도가파툴린중독증동안감소되었다고한다. 이는인슐린의존효소들의농도가감소한다는것을추정할수있다. Glycogen phosphorylase가현저히증가하고 hexokinase와 aldolase와같은해당효소가상당히감소하였다. 파툴린은마우스 FM3A 세포에서단백질 prenylation을저해하였으며단백질합성또한파툴린에의해저해되었다. in vitro 연구 0.033mM 농도의파툴린으로간균질물에서산소섭취저해가관찰되었으며심장과근육균질물에서의산소섭취저해가간에서보다컸다. 마우스의간균질물에서파툴린의저해작용은 succinate dehydrogenase와경쟁적이었다. 파툴린은마우스의뇌에서추출한마이크로솜들의 NaKATPase 의활성을저해하였다. Dithiothreitol과 glutathione으로파툴린을미리배양하면파툴린의저해가방지되었다. 31

32 4.35 u mol / ml농도의파툴린이쥐간핵 (nuclei) 에서만들어진 DNA-dependent RNA polymerase Ⅰ 과 Ⅱ 의활성을 29% 와 84% 저해하였다고보고하였다 독성연구 일반적으로보고된파툴린의독성은중간정도의세포독성, DNA 손상, 면역억제작용과최기형성등이알려져있다. 동물시험에서꾸준히보고되고있는급성독성증세는초조, 일부의경우경련, 호흡곤란, 폐울혈, 부종, 궤양형성, 충혈과내장의팽창등이다. 쥐를이용하여생식독성연구, 쥐와마우스에대해기형발생연구를수행한결과로는 1.5mg/kg bw/day까지투여량을높혔을때쥐와마우스에서생식독성과기형발생이일어나지않았다. 그러나높은농도의파툴린은모체독성을일으키는데, 이는빈번히변에서재흡수되어관찰되어배아독성을일으키는것으로추정된다. In vitro in vivo 실험에서, NOEL보다높은투여량으로단기독성연구, 기형발생연구, 장기독성 / 발암성연구에서파툴린이면역억제능을가지는것으로나타났다. 또유전독성에대한자료에의하면, 포유동물세포로수행한연구에서는반응이나타났지만세균에대한연구에서는반응이나타나지않았다. 유전독성효과는 sulfhydryl기와반응하여유전물질의복제에관여하는효소를저해하기때문으로추정되고있다. 32

33 그러나파툴린을복막내로투여했을때의급성독성은다른곰팡이독소 rubratoxin B와동시에투여할때감소되었다. 파툴린 / 시스테인혼합물을마우스복강내로주사하였을때, 마우스당파툴린 150 mg까지수준을올려도급성독성이관찰되지않았는데, 이는파툴린이 cystein의 sulfhydryl기와반응하여그독성이감소한것으로보여진다. 33

34 3.5 Patulin 허용기준 우리나라는사과, 사과쥬스농축액 ( 원료용포함, 농축배수로환산하여 ) 에대해파툴린을 50μg / kg이하로정하고있다. WHO(World Health Organization) 는사과쥬스의파툴린허용기준을 50μg /L(50ppb) 로정하고있으며, 스위스, 스웨덴, 벨기에, 러시아, 노르웨이등몇몇나라는사과와사과제조품에서 50μg /L(50ppb) 로정하고있다. Codex 위원회에서는사과쥬스와다른음료의쥬스성분에대해 50μg /kg으로정하고있다. FAO/WHO 식품첨가물전문위원회 (Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives) 는현재파툴린의잠정1일최대섭취허용량 (provisional maximum tolerable daily intake; PMTDI) 을 0.4 µg/ kg bw/day로설정하고있다. 34

35 3.6 국내연구동향 식품조사연구사업 년식품의약품안전청연구사업과일및과일쥬스에대해저농도의파튤린분석법확립과곰팡이독소파튤린오염도에대해조사하였다. 과일및과일 채소음료에서평균검출농도는 1.9ppb였으며검출율은 13.5% 였다. 사과쥬스의평균검출농도는 1.2ppb였고검출율은 7.5%, 포도쥬스의검출율은11.2%, 평균검출농도는 5.2ppb, 배쥬스의검출율은 8.3%, 평균검출농도는 1.9ppb였다. 35

36 3.7 Patulin 질의응답 1. Patulin 이란무엇인가? Penicillium과 Aspergillus와같은곰팡이속에서생성되는독성화학물질이다. 사과가주요오염원이지만곰팡이가피고썩은과일에는이독소가함유될수있다. 2. 왜 patulin에관심을가지는가? 실험동물에서 patulin는건강에악영향을미치며, 태아, 면역체계, 신경조직과소화기관에영향을미치며 DNA손상을가져왔다. 실제적으로낮은농도로지속적으로 patulin에노출될수있으므로사람에게도같은현상을일으킬가능성이있다. 3. 어떤식품에서 patulin 오염이생길수있나? 사과쥬스가주요오염식품이다. 파툴린이가장흔히발견되는과일은사과이며배, 포도와다른과일을포함한상한과실류와상한과실류로제조된쥬스와다른과실류생산품에서도발견되고있다. 36

37 4. 위험수준은얼마인가? 미국 FDA는제조과정에서파툴린을 50ppb 또는그이하로조절한다면쥬스에서파툴린의위험을낮출수있다고한다. 국제기구인 Codex는사과쥬스를많이섭취하는어린이들이일일허용섭취량을초과할수있으므로최대허용수준을 50ppb에서 25ppb로낮출것을고려하고있다. 5. 쥬스에서파툴린농도를낮출수있는방법은? 사과쥬스에서파툴린이고농도로함유될가능성은몇몇인자에달려있다. - 쥬스생산공정에서땅에떨어진사과사용여부 ; 땅에떨어진사과는나무에서딴사과보다파툴린에더많이오염될가능성이있다. - 수확시기사과의상태여부 ; 눈에띄는손상 ( 썩음, 상처, 새나곤충에의한손상 ) 이있는사과가외견상문제가없는사과보다고농도의파툴린이함유될가능성이높다. - 사과를저장하기전에어떻게손질했는지의여부 ; 취급도중상처가난사과는파툴린이생길가능성이크다. - 사과의저장조건여부 ; 곰팡이발생은일반적으로따뜻한조건에서생긴다. 적절치않은온도와대기상태에서저장한사과가조절된상태에서저장된사과보다파툴린수준이더높을수있다. 37

38 - 저장기간중에사과관찰여부 ; 저장된사과는일정기간마다조사하여대규모손실이발생하기전에썩거나곰팡이가핀사과는제거하여야한다. - 쥬스생산공정전에사과를가려내거나다듬는지의여부 ; 물리적인압착과정전에균사체가보이거나또는썩은사과를제거하면파툴린수준을감소시킬수있다. 모든사과종류가똑같이이들요인들에영향을받는것은아니다. 이러한상황으로견주어보면, 과일의손상을가려내는것이쉽지않고압착과정전에제거하는것또한어려운일이다. 이러한이유로이독소의예방보다는감소가보다더실행가능한일이다. 6. 제조공정에서독소수준을낮출수있는다른방법은있나? 제조공정시, 식품첨가물로서이산화황을 25-50ppm 수준으로첨가함으로써사과쥬스에서파툴린을파괴할수있다. 파툴린은발효에의해파괴될수있으므로, 과일쥬스로제조되는과일음료또는과일식초에는파툴린이발견되지않는다. 쥬스에파툴린이오염되어있다면, 저온살균과정에서없어지지않는다. 38

39

40 4.1 Ochratoxin A 개요 Ochratoxin A는 Aspergillus ochraceus, Aspergillus carbonarius, Penicillium verrucosum 등의곰팡이가생산하는독소이다. Ochratoxin A는 ochratoxin A, B, C, 4-hydroxyochratoxin A 등 17종의유사체가있으며, 이중에서오클라톡신 A가가장중요하고가장흔히발견되며 OTA 또는 OA 약어로표현하기도한다. Ochratoxin A는 phenylalanine에 12-carboxy기가연결되어있고, 여기에 polykeptide 유래 dihydroiso-coumarin이연결되어구성되어있다. 생육환경과농산물에따라 ochratoxin A를생산하는곰팡이의종류가다르다. IARC(The International Agency for Research on Cancer) 는 ochratoxin A를인체발암가능물질 (group 2B) 로분류하고있으며동물실험에서는풍부한발암자료를확보하였지만인체에대해서는확실한자료가없다. 이독소는 1965년남아프리카에서발견되었으며미국, 캐나다, 덴마크, 유고슬라비아, 불가리아, 프랑스등전세계적에널리오염되어있다. Penicillium verrucosum의성장은느리지만, 낮은수분활성도 (Aw 0.80) 와낮은온도 ( 0-31, 적온 20 ) 에서도생육할수있다. 주요오염식품지역는북유럽과중앙유럽, 캐나다등으로낮은온도에서생산되는몇몇곡류에서발견되고있다. 이독소는많은 39

41 종류의유럽곡류제품에서발견되고있으며특히, 빵과밀가루를주재료로한식품, 곡물사료를먹는동물에서발견된다. Aspergillus ochraceus은 8-37 에서생육가능하며최적성장조건은 와 Aw 이다. A. ochraceus은다양한종류의식품생산품에서발견되고있으며, 저장된건조식품에서더흔히발견된다. 훈연과식염식품, 건조생선, 건조콩, 육포, 대두, 평지씨, 고추, 건조과실과참깨에서이독소가분리되었다. 피칸, 피스타치오, 땅콩, 해즐넛과호두와같은견과류도주요오염식품이다. 몇몇연구에서는생커피콩에서 A. ochraceus을분리하였다. 최근에 Aspergillus carbonarius는 ochratoxin A를생산하는주요균으로알려졌다. 이균은 A. niger와많은면에서상당히닮았다. 그러나성장온도에서 A. niger보다낮은온도즉, 가생육적온이다. 보존료첨가없이햇볕에건조시키는포도에서주로발견되며주요오염식품은포도와포도생산품 ( 포도주, 건포도 ) 이다. 이곰팡이독소는원료농산물의생육, 저장그리고유통에이르기까지전과정에서생성될수있으므로원료농산물이곰팡이에오염되지않도록세심한주의가필요하다. 40

42 4.2 Ochratoxin A 특성 물리 화학적특성 Ochratoxin A는무색의결정체로서 UV하에서푸른형광을띈다. Chloroform, methanol, acetonitrile과같은극성유기용매에녹고, 산가수분해에의해페닐알라닌과광학활성을가진락톤산 ( 오크라톡신 α) 을생성한다. UV 흡수파장은 ph와용매극성에따라다른데에탄올에서는 213nm와 332nm가최대흡수파장이며, 형광방출파장은 428nm 에서최대였다. 구조 41

43 4.2.2 안정성 Ochratoxin A는대부분의식품가공공정에서분해되지않은안정성을가지므로최종생산품에잔류할수있다. 끓이기, 굽기, 불에직접굽기와발효를포함한가공과정중이독소의파괴정도는 ph, 온도와함유되어있는다른성분에따라달라질수있다. 현재발아, 양조, 제빵과아침곡류식제조공정중이독소의파괴에대해연구하고있다. 현재에는오염방지에더중점을두어, HACCP과같은상업적공정에의적용에더많은관심을두고있다. 42

44 4.3 Ochratoxin A 분석법 추출추출은기질 (matrix) 에따라다르지만대부분물과유기용매의혼합물을사용한다. 밀시료들은메탄올 / 물과아세토니트릴 / 물혼합물로추출한다. 보리추출은아세토니트릴 / 물로추출하고, 추출물은면역친화칼럼 (immunoaffinity columns) 으로정제하기전에 phosphate buffered saline solution(pbs) 으로희석한다. 커피시료의오크라톡신검출을위한추출에는주로 3% 중탄산나트륨용액과메탄올을섞은혼합액을사용한다. 적포도주의추출용매로는클로로포름을사용한다. 정제정제시면역친화칼럼 (immunoaffinity columns) 사용은오크라톡신에특이성을가지므로시료정제에알맞은방법으로인정되고있다. 면역친화칼럼을사용한분석방법은클로로포름과같은안전하지못한용매의사용을줄일수있으며, 시료로부터독소의추출및추출물의정제과정을단순화시키며, 형광검출기등에의한오크라톡신의기기적검출수준도증가시킨다. 분리와검출 밀에서오크라톡신 A 를검출하기위해 C18 칼럼으로역상 HPLC 로분석하며이동상으로아세토니트릴 / 물혼합용액을사용 43

45 했을때회수율은 % 였다. 보리, 밀기울과호밀에서오크라톡신 A를검출하는방법은 AOAC/ IUPAC / NMKL 합동연구에의해시료에서 <10μg / kg함유되어있는오크라톡신 A를검출하는데적합한방법을확립하였다. 또한유아용식품은암모니아로처리하는 post-column 반응법과발전된형광검출법으로 0.008μg / kg까지검출할수있다. LC-MS는새로운기법으로오크라톡신 A의분리정제에사용되고있다. TLC와 ELISA 기법모두분리와검출에사용되고있다. 이두방법모두사용하기에편리하지만, TLC 방법은검량한계 (limit of quantification) 가높은단점이있으며, ELISA 방법은현재사용되는항체가오크라톡신과유사한물질과교차반응 (cross-reactivity) 이종종일어나 ELISA 후에다시확인 (confirmation) 과정을필요로한다. 따라서 ELISA 방법은아직까지정확성이떨어지므로시료의수가많은경우에 screening에적용할수있으며, 국제공인분석법 (AOAC 또는 CEN method) 으로는사용하지않고있다. 44

46 4.4 Ochratoxin A 독성 흡수, 분포, 대사및배설오크라톡신 A는위장관, 주로소장에서천천히흡수된다. 혈액에서오크라톡신 A는혈청 albumin과결합한후장간순환 (enterohepatic circulation) 에의하여여러기관으로이동되며, 소변과변으로배설된다. 종 ( 種 ) 에따라오크라톡신 A의장간순환과혈청고분자와의결합정도가다르므로기관들에서의분포가달라진다. 이요소들은오크라톡신 A의혈청내반감기에도중요한영향을미치며종 ( 種 ) 들간에도변화가크다. 오크라톡신 A의비반추포유동물들의혈액내반감기는대체로길다. 즉, 마우스 24-39시간, 랫트 시간, 돼지 시간, 짧은꼬리원숭이 510시간그리고사람은 840시간이나된다. 따라서인체내에서오크라톡신의반감기를 35일로보고있다. 돼지, 랫드, 닭, 염소등의동물시험에서오크라톡신 A는주로신장에분포되어있고다음으로간및근육, 지방조직순으로분포되어있는것으로나타났다. 오크라톡신 A는쥐, 토끼와사람의유즙에도분포되어있고반추동물은반추위에서식하는미생물에의해오크라톡신 A가대사되어반추동물의유즙에는거의분포하지않는다. 모든종 ( 種 ) 에서오크라톡신 A의주요대사물은오크라톡신알파 (α) 이며이들은오크라톡신 A보다독성이약하다. 45

47 4.4.2 독성연구오크라톡신 A의독성기전은 phenylalanine을포함하고있는구조적특징때문에단백질합성과관련된 phenylalanine trna 합성효소가오크라톡신 A를 L-phenylalanine으로오인하여기질-효소복합체를형성하게되어결국단백질, DNA, RNA 대사에전반적으로영향을미치는것으로알려져있다. 오크라톡신 A는포유동물에신장세포독성을일으키며주요표적기관은신장근위세뇨관으로이기관에세포독성과발암을일으킨다. 신장독성에대한민감도는성별과종 ( 種 ) 에따라달랐으며돼지 > 실험쥐 > 마우스순이었다. 설취류에서발암을나타내는양은신장독성을일으키는양보다많은양이요구되었다. 몇몇의유전독성연구에서세균과포유동물세포에서오크라톡신 A가유전자돌연변이를일으켰으나, 대부분에서나타난것은아니다. In vitro에서오크라톡신 A는포유동물세포에서 DNA 손상, DNA 복구와염색체이상을일으켰고 in vivo에서는오크라톡신 A로처리한마우스에서 DNA 손상, 염색체이상이나타났다. 그러나오크라톡신 A가 DNA와직접적으로반응을하는지또는반응산소를방출하는종 ( 種 ) 에의해반응이되는지의여부에대해서는아직까지명확치않다. 오크라톡신 A는 in vivo와 in vitro 에서유전독성을나타내지만독성의기작이명확하지않고 DNA 와직접반응으로이루어진다는증거가현재까지는없다. 오크라톡신 A는몇몇의종 ( 種 ) 에서면역억제효과가나타났다. 실험쥐의태아기에오크라톡신 A를투여하면면역억제가나타났 46

48 으나출산전후의투여는면역반응을자극하는결과를보이기도했다. In vitro에서오크라톡신 A는림프구 B와 T의증식을억제하였고 T 림프구의최종단계에영향을미쳤다. 그러나오크라톡신 A를신장독성을일으키는양보다많이투여했을때면역억제와기형발생효과가나타났다 인체에서의반응북반구의선선한날씨를보이는몇몇나라의인체혈액시료에서오크라톡신 A가발견되어왔으나급성중독사례는보고되어있지않다. 치명적인인체신장질병 ( 발칸토착성신장병증 ) 이발생하는지역에거주하고있는사람들의혈액에서오크라톡신 A가더흔히, 더높은농도로혈액에서발견되는것은상부뇨관의종양발생증가와연관성이있다고보고되었다. 그러나이질병이관찰되지않은몇몇유럽지역주민들의혈액에서도비슷한농도로오크라톡신 A가발견되었다. 이러한연구결과로발칸토착성신장병증의병인론은다른신장독성제도포함될수있으므로인체의발암가능성을측정하기위해제공되는자료는이용하기어렵다고보고했다 기타오크라톡신 A는동물에서신장염, 신장암을유발하는것으로알려져있으며가금류는다른가축에비해오크라톡신 A에민감한것으로알려져있다. 동물실험결과수컷보다암컷에더강한 47

49 독성을보였고, 신장독성외에도간장독성, 유전독성, 면역독성을 일으키며그밖에도최기형성과발암성이보고되어있다. 4.5 Ochratoxin A 허용기준 유럽국가들을시작으로 40여국가에서식품은주로쌀 보리등곡류에대해오크라톡신 A을 5~50ppb의범위로규제하고있으며사료는 5~300ppb의기준을설정하여규제하고있고, EC는아직허용기준을제시하지않았으나식품은 5ppb로논의되고있다. 우리나라는아직오크라톡신 A에대한허용기준이설정되어있지않다. 2001년 FAO/WHO 식품첨가물전문위원회 (Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives) 는오크라톡신 A의잠정주간섭취허용량 (PTWI) 를 100 ng/kg bw로설정하였으며, 이에대한계속된연구를요구하고있어현재오크라톡신 A에대한 JECFA 의 PTWI는더낮아질전망이다. 48

50 4.6 국내연구동향 식품조사연구사업 년식품의약품안전청연구사업 10개시 ( 서울, 부산, 인천, 수원, 동해, 원주, 춘천, 광주, 전주, 충주 ) 에서곡류 ( 보리, 찹쌀, 백미, 조, 수수 ), 두류 ( 서리태, 녹두, 백태, 동부, 팥, 강낭콩, 땅콩, 호두 ) 와기타 ( 혼합장, 청국장 ) 시료에대해 ochratoxin A 오염현황을조사하였다. 실험방법으로 1차 screening은 ochratoxin test kit로, 최종확인은 immunoaffinity column을이용하여 HPLC 분석을한결과, 모든시료에서 ochratoxin A가검출되지않았다 년식품의약품안전청연구사업 식품오염물질실태조사및안전관리 ( 한국소비자보호원 ) 연구사업의제2 세부과제로식품중오크라톡신실태조사및국내식품에서의 ochratoxin A 분석방법을확립하였다. 지역은 8개시 ( 서울, 경기, 부산, 인천, 대구, 대전, 광주, 울산 ) 였으며시료의종류는곡류및곡류가공품 ( 쌀및쌀가공품, 보리및보리가공품, 밀및밀가공품, 옥수수및옥수수가공품, 잡곡, 혼합곡류가공품및영유아용곡류가공품 ), 두류및두류가공품, 포도주, 포도쥬스, 건포도, 견과류, 건조과일, 종실류, 커피, 양념류, 돼지고기및햄류중의 ochratoxin A 오염현황을조사하였다. 수집한 73점의쌀과쌀가공품의 ochratoxin A 오염수준은 49

51 LOD와 LOQ사이에존재하는시료 3점, LOQ 값을웃도는시료는 1점이었다. 보리차에서는 0.93ppb 검출된시료가 1점있었고, 맥주에서는 0.025~0.19ppb 수준으로검출되었다. 밀에서는검출되지않았고국수에서 0.072ppb 검출되었고라면에는 0.14, 과자류 0.12, 0.13ppb였다. 옥수수 2점에서 ochratoxin A가검출되었는데 1점이 LOQ 값이상인 0.13ppb 검출되었다. 포도주는 ppb, 건포도는 0.063~1.70ppb 수준으로검출되었다. 종실류중들깨 1점에서 4.90ppb가검출되어오염량이높은수준이었다. 커피는 0.18~0.72ppb까지나타났고주로인스턴트커피에서높게나타났다. 고춧가루에는 0.11~0.90ppb 검출되었다. 그외시료에서는 ochratoxin A가불검출또는 LOD와 LOQ사이에존재했다. 식품별 ochratoxin A 분석방법을선정하여분석한결과대부분의식품에서회수율이 80% 이상으로나타났으며, 우리나라전통식품인약주와탁주, 여러가지콩발효식품및고춧가루와들깨등에서 ochratoxin A 분석법을확립하였다 년식품의약품안전청연구사업 식품중곰팡이독소류실태조사 ( 고려대학교 ) 연구사업으로국내유통식품중오크라톡신실태조사및위해평가를실시하였다. 국내 6대광역시와그인근지역및강원, 제주등에서시료를수집하였다. 총 419점의곡류및곡류가공품 ( 쌀, 보리, 밀가루, 옥수수, 혼합곡류및가공품 ) 의 23.9% 에서오크라톡신이검출되었는 50

52 데, 평균오크라톡신함량은 ng/g 수준이었다. 콩과콩발효식품 ( 콩, 메주, 고추장, 된장, 혼합장, 간장 ) 에서는 112점중 75.0% 에서오크라톡신이검출되었으며, 평균오크라톡신함량은 ng/g이었다. 곡류와콩및가공식품을제외한 347점의기타식품 ( 포도주및포도가공품, 과실주, 견과류, 건조과일, 종실류, 커피, 고춧가루및향신료, 돼지고기및햄등 ) 에서는 37.4% 가오크라톡신에오염되어있었으며, 평균오염량이 ng/g 수준이었다. 각식품의 1인1일평균섭취량으로부터추정한한국인의오크라톡신 1일섭취추정량 (PDI) 은 ng/kg bw/day로서이는 JECFA의 ochratoxin A의잠정주간섭취허용량 (PTWI) 으로부터환산한 1일섭취량또는유럽커뮤니티의 ochratoxin A의 1일섭취허용량 (TDI) 의 2.84% 와 7.94% 에해당하여높은수준은아니었다. 그러나농산물과식품에서의곰팡이독소의발생과오염은계절에따라변화가크고또매년발생상황이다르며, 식품에서의독소생성곰팡이오염은항상소비자에게지속적인위해요인으로작용하고있다. 따라서본연구의결과, 우리국민이오크라톡신에노출된정도는높게나타나지는않았으나앞으로도주요식품을대상으로오크라톡신에대한체계적이며지속적인모니터링이실시되어야할것으로판단되었다. 51

53

54 1. 국립독성연구원. 독성정보 DB ( Aflatoxin B1) 2. 김대중, 김형식, 박철범. 식품유래화학발암물질. 대한암예방학회지 2001;6(1): 이영순. 독성학. 청구문화사. pp Bennett JW and Klich M. Mycotoxins. Clin Microbio Rev 2003;16(3): Jonathan HW, Timothy DP, Pauline EJ, Jonathan KS, Curtis MJ and Deepak A. Human aflatoxicosis in developing countries: a review of toxicology, exposure, potential health consequences, and interventions. American Journal of Clinical Nutrition 2004;80(5): Reddy S.V. and Farid W. Aspergillus and Aflatoxin in Groundnut, Properties of Aflatoxin and It Producing Fungi. Internet: 7. Romer Labs. Mycotoxins. Internet: 8. U.S. Food and Drug Adminisration. Foodborne Pathogenic Microorganisms and Natural Toxins Handbook. Internet: 9. U.S. Food and Drug Adminisration. Mycotoxins in Feeds : CVM's 53

55 Perspective by Michael HH, PhD. Internet: U.S. Food and Drug Adminisration. Food and Cosmetics Compliance Programs. Mycotoxins in Domestic Foods Chapter07-Molecularbiology and Natural Toxins. Internet: 이효민, 윤은경, 최윤호, 이근영, 조연숙, 임철주, 김종욱, 양지선, 양기화. 곡류중아플라톡신 B1의위해성평가. 식품의약품안전청연구보고서 2001;5:213~ 이종옥, 소유섭, 김미혜, 박성국, 정소영, 이윤동, 정계훈, 엄지윤. 식품중곰팡이독소모니터링연구 (Ⅱ) -식품중아플라톡신오염도조사-. 식품의약품안전청연구보고서 2002;6:83~ 김태명, 조영민, 송연숙, 성민제, 김재현, 이숙진, 박철범, 홍진태, 김대중, 강종구, 윤영원. Aflatoxins의위해성평가를위한상대독성연구. 식품의약품안전청연구보고서 2002;6: 이종옥, 김미헤, 소유섭, 박성국, 허수정, 정소영, 윤희경, 정계훈, 김성환. 식품중곰팡이독소모니터링연구 (Ⅲ) - 유 ( 乳 ) 중아플라톡신 M 오염도조사-. 식품의약품안전청연구보고서 2003;7:93~ 강성조, 이범준, 유환수, 전향숙, 박선자, 이광근, 심원보, 강진순, 정덕화곰팡이독소의국가안전관리체계구축을위한연구 - 아플라톡신을중심으로 -. 식품의약품안전청연구보고서 2003;7:999~

56 16. 박선자, 전향숙, 박종세, 배동호, 정덕화. 아플라톡신의식품및인체모니터링연구 (Ⅱ). 식품의약품안전청연구보고서 2004 ; 8-2 : 2618~ 이종옥, 오금순, 소유섭, 박성수, 서정혁, 최우정, 이보희, 우건조. 식품오염물질실태조사및안전관리 - 식품중총아플라톡신실태조사-. 식품의약품안전청연구보고서 2005;9: European Mycotoxin Awareness Network. Fact sheet6 Patulin. Internet: Hopmans EC. Patulin: a Mycotoxin in Apples. Perishables Handling Quarterly 1997;(91): IPCS INCHEM. 847 Patulin(WHO Food Additives Series 35). Internet: Moodley RS, Govinden R, Odhav B. The effect of modified atmospheres and packaging on patulin production in apples. J Food prot 2002 May;65(5): Roach JA, Brause AR, Eisele TA, Rupp HS. Hplc detection of patulin in apple juice with GC/MS confirmation of patulin identity. Adv Exp Med Biol 2002;504: USDA Agricultural Research Service. Patulin. Internet: 55

57 24. U.S. FDA. Patulin in Apple Juice, Apple Juice Concentrates and Apple Juice Products. Internet: 김명철, 권기성, 김미혜, 정소영, 박성국, 이윤동, 장귀현, 남태희. 식품중곰팡이독소모니터링연구 (Ⅰ) -사과쥬스등가공식품중곰팡이독소패툴린오염도조사-. 식품의약품안전청연구보고서 2001;5: 농산물의주요곰팡이독소의안전성실태조사. Internet: World Health Organization. JOINT FAO/WHO FOOD STANDARDS PROGRAMME, CODEX COMMITTE ON FOOD ADDITIVES AND CONTAMINANTS. Agenda Item 14(a). CX/FAC 99/14 November European Mycotoxin Awareness Network. Fact sheeet 1 Ochratoxin A. Internet: European Mycotoxin Awareness Network. Fact sheeet 3 Ochratoxin A. Internet: Food Safety: from the Farm to the Fork. Opinion of the Scientific Committee of Food on Ochratoxin A (expressed on 17 56

58 September 1998). Internet: IPCS INCHEM. Ochratoxin A(JECFA 47, 2001). Internet: 이동호, 강민철, 이선화, 정동윤, 김재이, 김형수, 김은정, 유병옥, 김연주, 정순아, 서영선, 김인복, 홍무기. 수입및국내유통식품중의Ochratoxin A에관한조사연구. 식품의약품안전청연구보고서 2001;5:236~ 정수현, 김은경, 강혜순, 이세나. 식품오염물질실태조사및안전관리, 제2 세부과제 식품중오크라톡신실태조사. 식품의약품안전청연구결과보고서 ( 주관연구기관 : 한국소비자보호원 ) 식품의약품안전청식품오염물질팀. 곰팡이독소류의국가안전관리사업 ( 연구기획보고서 ) 정수현, 이재우, 김은경, 이진원, 이세나, 박나영, 이지원. 식품중곰팡이독소류실태조사 - 식품중오크라톡신실태조사. 식품의약품안전청연구결과보고서 ( 주관연구기관 : 고려대학교 )

59 알 림 본책자는식품의약품안전청의위해관리를위한과학적정보를제공하고자직원교육용으로개발되었으므로식품의약품안전청의법적규정으로적용할수없으며, 기타개인이나단체에의하여다른용도로활용될수없습니다. 본책자는관련문헌에언급된국내 외자료에근거하여작성되었으며, 다른자료와일부상이한결과가있을수도있습니다. 또한꾸준한연구개발에의하여최신의연구결과로일부내용이변경되거나수정될수가있습니다. 본책자의내용을인용할때에는반드시출처를밝혀야하며식품의약품안전청의동의를얻어야합니다.