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1 KOREAN J. FOOD SCI. TECHNOL. Vol. 47, No. 2, pp. 261~266 (2015) The Korean Society of Food Science and Technology 삼채의잎, 인경, 뿌리의총페놀함량, 총플라보노이드함량및항산화능 황정승 1,2 이봉한 1,2 안향설 2,3 정하람 1,2 김영은 1,2 이인일 1,2 이형재 4 김대옥 1,2,3, * 1 경희대학교생명공학원, 2 경희대학교피부생명공학센터, 3 경희대학교식품생명공학과, 4 단국대학교식품공학과 Total Phenolics, Total Flavonoids, and Antioxidant Capacity in the Leaves, Bulbs, and Roots of Allium hookeri Jeong-Seung Hwang 1,2, Bong Han Lee 1,2, Xiangxue An 2,3, Ha Ram Jeong 1,2, Young-Eun Kim 1,2, Inil Lee 1,2, Hyungjae Lee 4, and Dae-Ok Kim 1,2,3, * 1 Graduate School of Biotechnology, Kyung Hee University 2 Skin Biotechnology Center, Kyung Hee University 3 Department of Food Science and Biotechnology, Kyung Hee University 4 Department of Food Engineering, Dankook University Abstract To quantitatively evaluate the total phenolics, total flavonoids, and antioxidant capacity in the leaves, bulbs, and roots of fresh Allium hookeri, they were extracted using various solvents including water, aqueous methanol (20, 40, 60, and 80%; v/v), and absolute methanol. The leaves had the highest levels of total phenolics ( mg gallic acid equivalents/100 g) and total flavonoids ( mg catechin equivalents/100 g). The highest antioxidant capacities of mg vitamin C equivalents (VCE)/100 g, mg VCE/100 g, and 1, ,169.7 mg VCE/100 g in the leaves were also observed using 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS), 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), and oxygen radical absorbance capacity (ORAC) assays, respectively. The total phenolics had a higher linear correlation with antioxidant capacity than the total flavonoids. In general, 60% (v/v) aqueous methanol extract had higher levels of total phenolics and flavonoids, and higher antioxidant capacity than any other solvents used. This study suggested that A. hookeri might be a good source of phenolics and antioxidants. Keywords: ABTS, DPPH, ORAC, solvent polarity, vitamin C equivalent antioxidant capacity 서 활성산소 (reactive oxygen species) 인하이드록실라디칼 ( OH), 슈퍼옥사이드 (O 2 ), 일중항산소 ( 1 O 2 ), 과산화수소 (H 2 O 2 ) 는인체내에서산화적스트레스 (oxidative stress) 로작용한다. 반응성이높은활성산소는체내물질의대사에유해한영향을끼쳐노화, 퇴행성신경질환, 대사증후군의원인으로작용하며 (1), 단백질분해, 세포막파괴, 지방산화, DNA 합성억제등인체에기능적, 생리적장애를유발할수있다 (2). 과다한활성산소의체내생성은유해하기때문에활성산소의제거에대한관심이높아지고있다. 항산화제 (antioxidant) 는활성산소에의한산화적스트레스를완화시키거나제거하는물질로서, 여러산화기작단계에서물질의산화를막거나, 늦추는역할을한다 (3). 복잡한생활속에서과도한스트레스에노출되어있는현대인들에게더욱효과적인식이성항산화제가필요하다. 인간의수명연장, 건강에대한관심이증 *Corresponding author: Dae-Ok Kim, Department of Food Science and Biotechnology, Kyung Hee University, Yongin, Gyeonggi , Korea Tel: Fax: DOKIM05@khu.ac.kr Received November 12, 2014; revised February 2, 2015; accepted February 2, 2015 론 가하고있는현대사회에서노화억제및건강유지를위한천연물로부터항산화능보유기능성생리활성물질을탐색하는연구가활발히진행되고있다 (4,5). 양파, 마늘, 부추, 삼채 (Allium hookeri) 가속하는 Allium 속식물은세계적으로대략 700 여종으로이루어져있다 (6). Allium 속식물의주성분인함황화합물은항암과항혈액응고작용 (7), 항산화능 (8), 항균작용 (9), 혈당강하 (10) 같은다양한생리활성을갖는것으로알려져있다. Allium 속식물인삼채는히말라야같은고랭지에서자생하고있으며, 미얀마, 중국, 인도, 부탄, 스리랑카에분포한다 (11). 단맛, 쓴맛, 매운맛이난다고하여삼채 ( 三菜 ), 또는인삼맛이난다고하여삼채 ( 蔘菜 ) 라고불리고있다. 최근에한국에들여온삼채는한국산삼채로국내재배에성공하여, 그성분및효능에대한관심이높이지고있다. 국내산삼채에대한연구는삼채뿌리의 RAW 세포에대한항염증효능 (12,13) 이보고되었으며, 생리활성에관한연구는아직까지활발히이루어지지않은실정이다. 파와비슷한형태를갖고있는삼채는잎 (leaf), 인경 (bulb), 뿌리 (root) 로구성되어있다. Allium 속식물인부추 (leek; A. porrum L.) 를뿌리와인경으로구분하여분석한총페놀함량, 총플라보노이드함량및항산화능이부위별차이를보였다 (14). 최근국내에도입된삼채도파또는부추와비슷하게잎, 인경, 뿌리로구분이가능하나, 각부위별총페놀함량, 총플라보노이드함량, 항산화능에대한기능성성분의함량에대한연구는 261

2 262 한국식품과학회지제 47 권제 2 호 (2015) 매우미미하다. 이에본연구는국내에서재배되고있는삼채를뿌리, 인경, 잎으로구분하여, 다양한농도의메탄올을이용하여추출하고, 각추출물의총페놀함량, 총플라보노이드함량및항산화능을정량적으로분석하였다. 재료및방법 시약 Folin & Ciocalteu s phenol 시약, 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS), 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), 2,2'-azinobis(2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH), ascorbic acid, fluorescein sodium salt, gallic acid, catechin, phosphate buffered saline (PBS) 는 Sigma-Aldrich Co., LLC (St. Louis, MO, USA) 에서구입하였다. Sodium carbonate anhydrous, NaOH는 Daejung Chemicals & Metals Co., Ltd. (Siheung, Korea) 에서구입하였고, NaNO 2 는 Samchun Pure Chemical Co., Ltd. (Pyeongtaek, Korea) 제품이었다. 메탄올 (methanol) 은 Duksan Pure Chemicals Co., Ltd. (Ansan, Korea) 것을사용하였다. 삼채추출 2014 년 6 월에채취한유기농삼채 (A. hookeri) 를뿌리, 인경, 잎세부분으로구분하여추출에사용하였다. 추출용매는무수메탄올 (absolute methanol), 메탄올 - 물혼합용매 (20, 40, 60, 80%; v/v), 증류수를사용하였다. 부위별삼채 20 g 을각추출용매 100 ml 와혼합후 2 분간 homogenizer (Polytron RT 2100, Kinematica AG, Littau/Luzern, Switzerland) 로 15,000 rpm 에서균질화 (homogenization) 하였다. 추출물은여과지 (Whatman No. 1, Whatman International Ltd., Maidstone, UK) 를이용하여획득하였다. 여과후 1 차추출물에서남은여과박 (filter cake) 에다시추출용매 100 ml 를혼합하여동일추출조건에서 2 차추출하였다. 1 차와 2 차추출물을합쳐서감압회전농축기 (vacuum rotary evaporator, N- 1000, Eyela, Tokyo, Japan) 로농축시킨후최종부피를 100 ml 로만들었다. 최종추출물은 18 o C 에보관하며사용하였다. 모든실험은부위별, 추출용매별각각독립적으로 3 회반복측정하였다. 총페놀함량측정부위별삼채의총페놀함량은 Folin-Ciocalteu s phenol 시약을이용한발색법으로측정하였다 (15). 시료 200 µl 에증류수 2.6 ml 와 Folin-Ciocalteu s phenol 시약 200 µl 를첨가, 혼합하여 6 분간상온에서반응시킨후 7% (w/v) Na 2 CO 3 용액을 2mL 를첨가했다. 총 90 분동안반응시킨후 750 nm 에서흡광도를측정하였고, 표준물질로 gallic acid 를사용하여표준곡선 (standard curve) 을작성하였다. 함량은 mg gallic acid equivalents (GAE)/100 g fresh weight (FW) 로나타내었다. 총플라보노이드함량측정총플라보노이드함량은시료 0.5 ml, 증류수 3.2 ml, 5% (w/v) NaNO µl 를혼합하여 5 분간반응시켰다. 10% (w/v) AlCl 3 용액을첨가하여 1 분간더반응시키고, 1 M NaOH 를넣고혼합하여 510 nm 에서흡광도를측정하였다. 총플라보노이드함량은 mg catechin equivalents (CE)/100 g FW 로나타내었다. 항산화능측정항산화능측정은 ABTS, DPPH, oxygen radical absorbance capacity (ORAC) 법을이용하였다. ABTS 법을이용한항산화능 은청록색 ABTS 라디칼을이용하여다음과같이측정하였다 (16). 1.0 mm AAPH 에 2.5 mm ABTS 와 PBS 100 ml 를섞어서 ABTS 용액을만들었다. PBS 용액을이용하여 734 nm 에서 0.650±0.020 의흡광도로희석하였다. ABTS 용액 980 µl 와시료 20 µl 를혼합하여 37 o C 에서 10 분간반응후, 734 nm 에서흡광도감소를측정하였다. 항산화능은 mg vitamin C equivalents (VCE)/100 g FW 로나타내었다. DPPH 라디칼을이용한항산화능은 Brand-Williams 등 (17) 의방법을변형하여측정하였다. 80% (v/v) 메탄올 - 물혼합용액을사용하여 100 µm 의 DPPH 용액을제조한후, 517 nm 에서 0.650± 의흡광도로희석하였다. 각시료 50 µl 에 DPPH 라디칼용액 2.95 ml 을첨가하여 23 o C 에서 30 분간반응시키고흡광도를측정했다. 항산화능은 mg VCE/100 g FW 로나타내었다. ORAC 법을이용한항산화능은 Huang 등 (18) 의방법을이용하였다. 시료 25 µl 에 81.6 mm 을 1,000 배희석시킨 fluorescein sodium salt 150 µl 를넣어준후 37 o C 에서 10 분간교반하였다. AAPH (153 mm) 25 µl 를추가로넣은후 Infinite M200 (Tecan Austria GmbH, Grödig, Austria) 을이용하여여기 (excitation) 는 485 nm 에서방출 (emission) 은 520 nm 에서형광도를 90 분동안매 1 분간격으로측정하였다. 삼채각부위별추출물의시간에따른형광의감소를이용하여곡선하면적 (area under curve) 을계산하고, 항산화능은 mg VCE/100 g FW 로나타내었다. 통계분석모든추출및정량분석은 3 회반복실험하였다. 통계분석은 SAS 통계프로그램 (SAS version 9.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, USA) 을이용하였다. 평균값의차이를검증하기위하여 ANOVA 분석을실시하였고, p<0.05 유의수준에서 Duncan s multiple range test 로유의차를검증하였다. 결과및고찰 총페놀함량 Phenolic hydroxyl 기를갖는페놀성화합물 (phenolic compounds) 은식물계에널리분포되어있는 2 차대사산물 (secondary metabolites) 로서다양한구조와분자량을가진다 (19). 페놀성화합물은항산화능, 항암같은다양한생리활성을가질뿐만아니라, 탄닌 (tannins) 처럼고분자페놀성화합물은단백질과결합하기도한다 (19,20). 삼채각부위의총페놀함량은 Table 1 에나타내었다. 삼채의부위별총페놀함량의범위는잎에서 mg GAE/ 100 g FW, 인경에서 mg GAE/100 g FW, 뿌리에서 mg GAE/100 g FW 로각각나타났다. 각부위별총페놀함량은유의적차이를보였으며, 잎 > 인경 > 뿌리순이었다. 잎과인경의경우 60% (v/v) 메탄올 - 물혼합용매추출물에서가장높은총페놀함량을나타냈고, 뿌리는 20% (v/v) 메탄올 - 물혼합용매추출물에서가장높은총페놀함량을나타냈다. 노지및시설재배삼채의뿌리와잎의총페놀함량의연구에서도노지및시설재배삼채의잎이뿌리보다유의적으로더높은총페놀함량을보였다 (21). 다른 Allium 속채소인야생마늘 (A. ursinum L.) 의총페놀함량도잎에서인경보다더높은총페놀함량을보여본연구와유사한결과를가졌다 (22). 총플라보노이드함량플라보노이드는식물체에다양하게존재하는색소로서, 병원균억제, 자외선차단, 항돌연변이, 항바이러스, 항염증의효능을보

3 Table 1. Contents of total phenolics in leaf, bulb, and root of fresh Allium hookeri 삼채부위별총페놀함량및항산화능 263 Leaf ±15.5 1)b2)A3) 240.4±9.4 ca ±10.1 aa 276.6±14.5 aa 275.9±8.7 aa ±11.1 aa Bulb 65.5±9.6 cb 080.0±5.3 abb 82.2±3.5 ab 82.8±6.6 ab 76.2±5.6 bb 76.6±4.2 bb Root 050.0±10.1 bc 59.4±4.8 ac 58.5±3.0 ac 58.2±3.2 ac 57.3±4.9 ac 53.2±3.5 bc 1) Data are expressed as mean±standard deviation (n=3) and mg gallic acid equivalents/100 g fresh weight. Table 2. Contents of total flavonoids in leaf, bulb, and root of fresh Allium hookeri Leaf ±2.2 1)bc2)A3) 22.3±7.7 ba0 22.1±11.9 ba 034.1±20.8 aa 11.8±5.0 cda 9.7±4.0 da Bulb 5.0±0.6 cb 7.0±1.9 cb 10.7±3.8 bb ±5.2 ab 0 5.7±1.2 cb 5.2±1.5 cb Root 4.4±1.0 db 5.8±1.3 db 9.3±1.8 cb 15.3±3.5 ab 12.7±5.1 ba 9.6±1.3 ca 1) Data are expressed as mean±standard deviation (n=3) and mg catechin equivalents/100 g fresh weight. Table 3. Antioxidant capacity in leaf, bulb, and root of fresh Allium hookeri using ABTS assay Leaf ±18.7 1)bc2)A3) 78.7±8.2 ca 090.8±11.1 ba 103.4±7.3 aa ±4.9 aa ±9.6 aa 0 Bulb 35.8±9.3 db 40.9±2.4 cc 45.5±4.5 bc 50.8±5.4 ab 51.1±3.3 ab 51.1±5.3 ab Root 042.0±10.8 bb 55.4±6.2 ab 55.9±2.6 ab 50.7±4.1 ab 50.5±4.2 ab 47.6±5.8 bb 1) Data are expressed as mean±standard deviation (n=3) and mg vitamin C equivalents/100 g fresh weight. 이는것으로알려져있다 (23). 삼채각부위의총플라보노이드의함량은 Table 2 에나타내었다. 삼채의부위별총플라보노이드함량의범위는잎, 인경, 뿌리에서 mg CE/100 g FW, mg CE/100 g FW, mg CE/100 g FW 으로각각나타났다. 삼채의잎, 인경, 뿌리모두 60% (v/v) 메탄올 - 물혼합용매추출물에서가장높은총플라보노이드함량을나타냈다. 삼채의부위별총플라보노이드함량은잎이대체적으로가장높았으나, 80% (v/v) 메탄올 - 물혼합용매과무수메탄올 (absolute methanol) 추출물에서는뿌리추출물의총플라보노이드함량과비슷하게나타났다. 인경은메탄올농도가높아짐에따라높은총플라보노이드함량을나타내다가, 80% (v/v) 메탄올 - 물혼합용매와무수메탄올에서는잎과뿌리의절반정도로낮은총플라보노이드함량을나타냈다. 식물체에는수용성및지용성성분들이다양하게포함되어있다. 물과메탄올이혼합된추출용매에서수용성분과지용성분의다양한생리활성물질성분들이함께추출되었기때문에 40% (v/v) 와 60% (v/v) 메탄올 - 물혼합용매에서단일용매로만이뤄진물또는무수메탄올추출물보다더높은총플라보노이드함량을나타낸것으로생각된다. 항산화능 ABTS 법을이용한삼채각부위의항산화능은 Table 3 에나타냈다. ABTS 를이용한측정에서잎은 mg VCE/100 g FW, 인경은 mg VCE/100 g FW, 뿌리는 mg VCE/100 g FW 의항산화능을각각나타냈다. ABTS 법으로정한 항산화능은잎이가장높았다. 이결과는하우스재배삼채의항산화능이잎에서더높았다는보고와유사했다 (21). 잎, 인경, 뿌리등모든부위에서물또는무수메탄올추출물보다는 20-80% (v/v) 메탄올 -물혼합용매추출물에서항산화능이높게나타났다. DPPH법을이용한삼채각부위의항산화능은 Table 4에나타냈다. DPPH법을이용한삼채의항산화능은잎, 인경, 뿌리에서 mg VCE/100 g FW, mg VCE/100 g FW, mg VCE/100 g FW로각각나타났다. 삼채의잎, 인경, 뿌리세가지부위에서가장높은항산화능을보인것은무수메탄올추출물이였으며, 증류수추출물에서가장낮은항산화능을나타냈다. DPPH법을이용한항산화능측정에서는메탄올의농도가높아짐에따라각부위별항산화능이점차적으로증가하는경향을보였다. ORAC법을이용한삼채각부위의항산화능은 Table 5에제시하였다. ORAC법을통한항산화능은잎이 1, ,169.7 mg VCE/100 g FW, 인경이 mg VCE/100 g FW, 뿌리가 mg VCE/100 g FW를보였다. 잎, 인경, 뿌리등모든부위에서 40% (v/v) 메탄올 -물혼합용매로추출시가장높은항산화능을나타냈으며, 잎과인경은무수메탄올추출물에서, 뿌리는 80% (v/v) 메탄올-물혼합용매추출물에서각각가장낮은항산화능을나타냈다. ABTS법과 DPPH법으로측정한항산화능의결과와마찬가지로, ORAC법에서도잎이가장높은항산화능을보였으며, 뒤이어인경, 뿌리순이었다. 특히가장높은항산

4 264 한국식품과학회지제 47 권제 2 호 (2015) Table 4. Antioxidant capacity in leaf, bulb, and root of fresh Allium hookeri using DPPH assay Leaf ±7.9 1)d2)A3) ±12.0 da 40.8±6.2 ca 49.6±6.8 ba 049.6±11.4 ba 059.0±12.5 aa Bulb 09.3±2.3 eb 10.6±1.5 dec 11.2±1.6 dc 16.9±1.2 cc 24.6±2.3 bb 26.3±2.2 ab Root 12.8±6.4 bb 21.7±5.6 ab ±4.9 ab 022.7±12.0 ab 23.7±7.0 ab 24.4±5.8 ab 1) Data are expressed as mean±standard deviation (n=3) and mg vitamin C equivalents/100 g fresh weight. Table 5. Antioxidant capacity in leaf, bulb, and root of fresh Allium hookeri using ORAC assay Leaf 001,903.5± )b2)A3) 1,969.1±224.0 ba 0 2,169.7±163.1 aa 1,849.0±156.9 ba 1,829.7±86.0 ba 00 1,798.8±161.2 ba Bulb 474.4±54.2 bcb 546.3±72.5 abb 611.7±63.8 ab 506.8±64.4 bb 472.0±92.3 bcb 415.3±60.0 cb Root 374.6±45.1 bb ±46.9 abb 429.4±25.6 ac 328.9±23.0 cc 291.7±23.2 cc ±24.7 cb 1) Data are expressed as mean±standard deviation (n=3) and mg vitamin C equivalents/100 g fresh weight. 2) The different lower-case letter superscripts in the same row indicate the significant difference by Duncan s multiple range test (p<0.05). 3) The different capital letter superscripts in the same column indicate the significant difference by Duncan s multiple range test (p<0.05). 화능을보인 40% (v/v) 메탄올 - 물혼합용매추출물에서잎은두번째로항산화능이높았던인경에비해약 3.5 배이상높은항산화능을보였다. ORAC 법에서측정한항산화능은대체적으로 ABTS 법으로측정한항산화능값의결과와비슷한경향을보였으며, 메탄올농도가 40% (v/v) 까지증가하면서항산화능이점점높아지다가, 이후농도가증가함에따라반대로항산화능이낮아지는것으로나타났다. ORAC 법을통한항산화능측정시삼채의모든부위에서 40% (v/v) 와 60% (v/v) 메탄올 - 물혼합용매추출물이가장높은항산화능을나타낸것은상대적으로높은총페놀함량및총플라보노이드함량에서기인한것으로생각된다. 총페놀함량, 총플라보노이드함량, 항산화능의상관관계물, 메탄올 - 물혼합용매 (20, 40, 60, 80%; v/v), 무수메탄올등극성을달리한 6 가지용매를이용하여추출한삼채잎, 인경, 뿌리부위의 ABTS 법, DPPH 법및 ORAC 법을통한항산화능과총페놀함량, 총플라보노이드함량과의상관관계는 Fig. 1 과같다. 삼채모든부위별추출물의총페놀함량과 ABTS 법, DPPH 법및 ORAC 법으로측정한항산화능의상관계수 (correlation coefficient, r 2 ) 는각각 0.911, 0.656, 이었으며, 반면에총플라보노이드함량과 ABTS 법, DPPH 법및 ORAC 법으로측정한항산화능의상관계수는각각 0.415, 0.239, 이었다 (Fig. 1). 총페놀함량이높은추출물에서는라디칼을효과적으로소거하여높은항산화능을가졌고, 총페놀함량이낮은추출물에서는상대적으로낮은라디칼소거능을보이는양의기울기를갖는직선의상관관계를보였다. 총플라보노이드함량도총페놀함량의경우와유사하게직선의상관관계를보이긴하였으나, 총페놀함량보다는낮은상관계수를보였다. 삼채와같은 Allium 속채소인양파의 ORAC 법을통한항산화능을연구한논문에서총페놀함량과항산화능은피어슨의상관계수 (Pearson correlation) 가 으로높은상관관계를보였다 (24). 본연구와결과가유사하게, Allium 속식물인양파, 붉은양파, 마늘의총페놀함량및총플라보노이드함량과항산화능의상관관계를비교한연구 (25) 에서도항산화능과총페놀함량의상관관계가높았다. 요 삼채의잎, 인경, 뿌리세부위를물, 메탄올 - 물혼합용매, 무수메탄올을이용하여추출물을제조한후, 총페놀함량, 총플라보노이드함량및항산화능을정량분석하였다. 삼채의부위별총페놀함량은잎이 mg GAE/100 g FW, 인경이 mg GAE/100 g FW, 뿌리가 mg GAE/100 g FW 를보였다. 삼채의부위별총플라보노이드함량은잎에서 mg CE/100 g FW, 인경에서 mg CE/100 g FW, 뿌리에서는 mg CE/100 g FW 로나타났다. ABTS 법, DPPH 법, ORAC 법을통한항산화능은잎에서각각 , , 1, ,169.7 mg VCE/100 g FW, 인경에서는 , , mg VCE/100 g FW, 뿌리에서는 , , mg VCE/100 g FW 을보였다. 삼채잎, 인경, 뿌리중에서잎이가장높은총페놀함량, 총플라보노이드함량및항산화능을가졌다. 6 가지추출용매에서 60% (v/v) 메탄올 - 물혼합용매에서주로높은활성을나타냈다. 항산화능은총플라보노이드함량보다총페놀함량과더높은상관관계를보였다. 본연구의결과는삼채가높은항산화능공급할수있는원료로서의가능성을보여주었다는데의의가있다. 약 감사의글 본연구는 2014 년도산업통상자원부지역혁신센터사업 ( 경희대학교피부생명공학센터 ) 의지원에의해얻은결과이므로이에감사드립니다. References 1. Finkel T, Holbrook NJ. Oxidants, oxidative stress and the biology of ageing. Nature 408: (2000) 2. Yuzefovych LV, Musiyenko SI, Wilson GL, Rachek LI. Mitochondrial DNA damage and dysfunction, and oxidative stress are associated with endoplasmic reticulum stress, protein degradation

5 삼채부위별총페놀함량및항산화능 265 Fig. 1. Correlations of antioxidant capacity measured using ABTS (A), DPPH (B), and ORAC (C) assays with total phenolics and total flavonoids.

6 266 한국식품과학회지제 47 권제 2 호 (2015) and apoptosis in high fat diet-induced insulin resistance mice. PLoS ONE 8: e54059 (2013) 3. Birben E, Sahiner UM, Sackesen C, Erzurum S, Kalayci O. Oxidative stress and antioxidant defense. World Allergy Organ. J. 5: 9-19 (2012) 4. Hung LM, Chen JK, Huang SS, Lee RS, Su MJ. Cardioprotective effect of resveratrol, a natural antioxidant derived from grapes. Cardiovasc. Res. 47: (2000) 5. Apak R, Gorinstein S, Böhm V, Schaich KM, Özyürek M, Güçlü K. Methods of measurement and evaluation of natural antioxidant capacity/activity (IUPAC technical report). Pure Appl. Chem. 85: (2013) 6. Ernst MK, Chatterton NJ, Harrison PA, Matitschka G. Characterization of fructan oligomers from species of the genus Allium L. J. Plant Physiol. 153: (1998) 7. Ariga T, Seki T. Antithrombotic and anticancer effects of garlicderived sulfur compounds: A review. Biofactors 26: (2006) 8. Prakash D, Singh BN, Upadhyay G. Antioxidant and free radical scavenging activities of phenols from onion (Allium cepa). Food Chem. 102: (2007) 9. Tsao SM, Yin MC. In-vitro antimicrobial activity of four diallyl sulphides occurring naturally in garlic and Chinese leek oils. J. Med. Microbiol. 50: (2001) 10. El-Demerdash FM, Yousef MI, El-Naga NIA. Biochemical study on the hypoglycemic effects of onion and garlic in alloxaninduced diabetic rats. Food Chem. Toxicol. 43: (2005) 11. Ayam VS. Allium hookeri, Thw. Enum. A lesser known terrestrial perennial herb used as food and its ethnobotanical relevance in Manipur. Afr. J. Food Agr. Nutr. Dev. 11: (2011) 12. Bae GC, Bae DY. The anti-inflammatory effects of ethanol extract of Allium hookeri cultivated in South Korea. Kor. J. Herbology 27: (2012) 13. Kim CH, Lee MA, Kim TW, Jang JY, Kim HJ. Anti-inflammatory effect of Allium hookeri root methanol extract in LPSinduced RAW264.7 cells. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 41: (2012) 14. Mladenović JD, Mašković PZ, Pavlović RM, Radovanović BC, Aćamović-Đoković G, Cvijović MS. Antioxidant activity of ultrasonic extracts of leek Allium porrum L. Hem. Ind. 65: (2011) 15. Singleton VL, Rossi JA Jr. Colorimetry of total phenolics with phosphomolybdic-phosphotungstic acid reagents. Am. J. Enol. Viticult. 16: (1965) 16. Kim DO, Lee KW, Lee HJ, Lee CY. Vitamin C equivalent antioxidant capacity (VCEAC) of phenolic phytochemicals. J. Agr. Food Chem. 50: (2002) 17. Brand-Williams W, Cuvelier ME, Berset C. Use of a free radical method to evaluate antioxidant activity. LWT-Food Sci. Technol. 28: (1995) 18. Huang D, Ou B, Hampsch-Woodill M, Flanagan JA, Prior RL. High-throughput assay of oxygen radical absorbance capacity (ORAC) using a multichannel liquid handling system coupled with a microplate fluorescence reader in 96-well format. J. Agr. Food Chem. 50: (2002) 19. Balasundram N, Sundram K, Samman S. Phenolic compounds in plants and agri-industrial by-products: Antioxidant activity, occurrence, and potential uses. Food Chem. 99: (2006) 20. Bravo L. Polyphenols: Chemistry, dietary sources, metabolism, and nutritional significance. Nutr. Rev. 56: (1998) 21. Won JY, Yoo YC, Kang EJ, Yang H, Kim GH, Seong BJ, Kim SI, Han SH, Lee SS, Lee KS. Chemical components, DPPH radical scavenging activity and inhibitory effects on nitric oxide production in Allium hookeri cultivated under open field and greenhouse conditions. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 42: (2013) 22. Djurdjevic L, Dinic A, Pavlovic P, Mitrovic M, Karadzic B, Tesevic V. Allelopathic potential of Allium ursinum L. Biochem. Syst. Ecol. 32: (2004) 23. Kumar S, Pandey AK. Chemistry and biological activities of flavonoids: An overview. Sci. World J. 2013: (2013) 24. Kim MH, Jo SH, Jang HD, Lee MS, Kwon YI. Antioxidant activity and α-glucosidase inhibitory potential of onion (Allium cepa L.) extracts. Food Sci. Biotechnol. 19: (2010) 25. Fidrianny I, Permatasari L, Wirasutisna KR. Antioxidant activities from various bulbs extracts of three kinds allium using DPPH, ABTS assays and correlation with total phenolic, flavonoid, carotenoid content. Int. J. Res. Pharm. Sci. 4: (2013)

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