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다은 도
6 years ago
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7 쌀 - 6 -

8 Grains are important agricultural products providing 60% of total calories worldwide. Specially, grains are major sources of proteins in Asia. While rice, wheat and corn among grains consists over 75% of a total grain production, the consumption of rice is limited due to protein deficiency, specially for infants, young children and women

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22 Amino Acid Contents (g/100g) Amino Acid Contents (g/100g) Asp 7.99 He 2.93 Thr 2.58 Leu 5.80 Ser 3.88 Tyr 3.58 Glu + Gln Phe 4.14 Gly 3.79 Lys 2.51 Ala 4.61 His 1.84 Cys 0.64 Arg 7.09 Val 4.36 Pro 4.10 Met 1.88 Total 참고 ) 농업통계보고서

23 곡물 Allergen Soybean Trypsin inhibitor Wheat Barley Gly m Bd 68K (α-subunit of β-conglycinin) Gly m Bd 30K (34-kDa oil-body-associated protein) Gly m Bd 28K Gly m 1A Gly m 1B Gly m 2 Gly m 3 Tetrameric α-amylase inhibitor CM16 Tetrameric α-amylase inhibitor CM17 47-kDa protein 36-kDA protein (Peroxidase) 31-kDa protein 27-kDa protein 20-kDa protein 17-kDa protein Tetrameric α-amylase inhibitor CMb 38-kDa protein (found in beer, from barley) 16-kDa protein (found in beer, from barley) 10-kDa protein (found in beer, from barley) Rice 33-kDa protein (plant glyoxalase I) 16-kDa protein 14-kDa protein

24 기체 (0.6~2)x10-3 (1~3) x ~0.4 초임계유체 0.2~0.5 (1~3) x x10-3 액체 0.6~1.6 (0.2~3) x10-2 (0.2~2)x

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27 쌀단백질 HVP Reduced MSG, Sodium 천연조미료 Formulation

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42 이를위하여인체에무해한초임계이산화탄소를추출용매로사용하여지방제거를시도하였다. 쌀겨가가공된정도 (4분도, 8분도및 12분도 ) 가초임계이산화탄소를이용한조지방추출효율에미치는영향은거의관찰되지않았다 ( 그림 5). 그러나추출압력에는영향을받는것으로관찰되었다. 즉, 기압에서추출하였을시는약30% 의추출효율을나타내었으나동일온도 300기압에서추출하였을시는약40% 의추출효율을나타내었다. 이것으로부터동일온도의경우추출효율은추출조에투입되는이산화탄소의

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44 분도 8 분도 12 분도

45 양에비례하는것으로밝혀졌다. 향후온도를높여추출할때에는추 출효율이향상될것으로사료된다

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52 Drum Milling Supercritical CO 2 (SC-CO 2 ) Extraction Viscozyme + Celluclast Treatment

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64 Enzyme opt. ph opt. Temp. 50 relative activity Type Activity 1g 의 enz. 이 1 분당 a.a 몇 mmol 을 분해하는가 Novozyme Flavourzyme % endo/exo 500LAPU/g =0.5mmol/min*g 0.08g Neutrase % endo 0.8AU/g =0.8mmol/min*g 0.05g Protamex 5.5~7.5 35~60 endo 1.5AU/g =1.5mmol/min*g 0.03g Amano Protease A % endo/exo 20000units/g =1.4mmol/min*g 0.03g Protease M % endo/exo 5500units/g =0.6mmol/min*g 0.07g Protease N % endo units/g =0.2mmol/min*g 0.2g Protease P % endo/exo 60000units/g =0.1mmol/min*g 0.4g Protease S % endo 10000units/g =0.05mmol/min*g 0.8g

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68 Enzyme opt. ph opt. Temp. 50 relative activity Type Activity Novozyme Flavourzyme % endo/exo 500LAPU/g Amano Protease A % endo/exo 20000units/g Peptidase R % endo/exo 420u/g Prote AX * 45 * * * Glutaminase % Gln Glu 100GTU/g

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74 amino acid #368 ehvp(f,a,g) 0h UV_VIS_1 1,000 mau WVL:254 nm amino acid #369 [modified by Administrator] UV_VIS_1 1,000 mau WVL:254 nm Ser min Gln+His Thr min Gln+His amino acid #370 [modified by Administrator] UV_VIS_1 1,000 mau WVL:254 nm min Gln+His Thr amino acid #372 [modified by Administrator] UV_VIS_1 1,000 mau WVL:254 nm min NH Thr aaba

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77 amino acid #374 [modified by Administrator] UV_VIS_1 1,000 mau WVL:254 nm amino acid #375 [modified by Administrator] UV_VIS_1 1,000 mau WVL:254 nm Gln+His min Cys His min Pro amino acid #376 [modified by Administrator] UV_VIS_1 1,000 mau WVL:254 nm ,000 amino acid #377 [modified by Administrator] UV_VIS_1 mau WVL:254 nm aaba AMQ His min Pro AMQ Asp Asn+Ser min Thr Pro

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79 시료를적정 적정 시료무게 역가 희석배수 α

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86 Sample Glutamic acid 함량 (pg/ul) 비율 (%) SJ A-A SJ A-M SJ A-P SJ A-S SJ N-F SJ N-N SJ A-N/A-A SJ A-N/A-P SJ A-N/N-F SJ N-N/A-A SJ N-N/A-P SJ N-N/N-F SJ N-P/A-A SJ N-P/A-P SJ N-P/N-F CJ A-A CJ A-M CJ A-N CJ A-P CJ A-S CJ N-F CJ N-N CJ A-N/A-A CJ A-N/A-P CJ A-N/N-F CJ N-N/A-A CJ N-N/A-P CJ N-N/N-F CJ N-P/A-A CJ N-P/A-P CJ N-P/N-F CJ F/A/G CJ R/AX/G

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91 순위제조원제품명유통기한생산년월

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96 -Bacterial protease (from Bacillus subtilis) Protease (milli-units/ml) = 250 x Abs.(440nm) -8 R= 0.99 (Linear absorbance range = 0.1 to 1.0) -Fungal protease (from Apergillus niger)

97 Protease (milli-units/ml) = 146 x Abs.(440nm) -4 R = 0.99 (Linear absorbance range = 0.1 to 1.0)

98 6시간 10시간 O.D ph Glucose(g/L) O.D ph Glucose (590nm) S S F F 시간 30시간 O.D ph Glucose O.D ph Glucose S S F F 시간 48시간 O.D ph Glucose O.D ph Glucose S S F F 시간 72시간 O.D ph Glucose O.D ph Glucose S S F F O.D:590nm,1/10 희석하여측정, 접종하기전배지를 blank 로잡음 glucose : 1/10 희석하여측정

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100 0시간 24시간 Abs. Activity Abs. Activity M/O (440nm) (milli-units/ml) (440nm) (milli-units/ml) Basic S S F F 시간 72시간 Abs. Activity Abs. Activity M/O (440nm) (milli-units/ml) (440nm) (milli-units/ml) Basic S S F F 시간 24시간 Abs. Activity Abs. Activity M/O (440nm) (milli-units/ml) (440nm) (milli-units/ml) Basic + S S Rice protein F F 시간 72시간 Abs. Activity Abs. Activity M/O (440nm) (milli-units/ml) (440nm) (milli-units/ml) Basic + S S Rice protein F F * 쌀단백질과같이배양한 F3205 는 24 시간배양하면색이붉게변함

101 0시간 24시간 M/O Glucose G l u t a m i c ph Glucose Glutamic acid ph (g/l) acid (g/l) (g/l) (g/l) Basic S S F F 시간 72시간 M/O Glucose G l u t a m i c ph Glucose Glutamic acid ph (g/l) acid (g/l) (g/l) (g/l) Basic S S F F * Basic은 1/10 희석하여측정 0시간 24시간 M/O Glucose G l u t a m i c ph Glucose Glutamic acid ph (g/l) acid (g/l) (g/l) (g/l) Basic+ S S Rice Protein F F M/O 48시간 72시간 Glucose G l u t a m i c ph Glucose Glutamic acid ph (g/l) acid (g/l) (g/l) (g/l) Basic+ S S Rice Protein F F * Basic+Protein의 S09-04, F3205는 24h에 2g/100ml의 glucose를더넣어줌 * Basic+Protein의 S01-03, F3204는 30h에 1g/100ml의 glucose를더넣어줌 * Basic+Protein의 S01-03, S09-04, F3204, F3205는 46h에 1g/100ml의 glucose를더넣어줌 * Basic+Protein의 S01-03, S09-04, F3204, F3205는 54h에 2g/100ml의 glucose를더넣어줌 * 72h 배양한 Basic+Protein 의 S09-04 는약간의점성이생김

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103 균주 A1 흡광도 A2 흡광도 A Glutamic acid 농도 (mg/l) F F F F F F F F F F F

104 A1 흡광도 A2 흡광도 A Glutamic acid 농도 (mg/l) 산분해물 효소반응물

105 γ γ γ γ γ γ

106 NH 3 O N O O large small NHR COO- O NH 3 O-Enzyme COO- γ γ O O NH 3 OH NH 3 NHR' COO- COO- γ γ

107 γ

108 γ γ γ γ γ γ γ γ γ γ γ γ γ

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110 라. Glutamyltransferase 활성균주의 Transglutaminase Activity 총 14종의 균주 (12종 Bacteria, 2종의 Fungi)에서 약 GFU/mL의 역가를 가지고 있음을 확인하였다 (표 31). 곰팡이의 경우는 상등액을 분리하여 역가를 측정 시 수치가 매 우 낮아서 결과에 포함시키지 않았으며, 실험결과 F3201과 F3205에서 가장 큰 역가를 보였 다. Transglutaminase activity가 우수한 F3205와 Glutaminase activity가 우수한 F3204의 proteinase activity를 조사하여 쌀 단백질 가수분해에 사용하였으며, 그 결과는 그림 정리하 였다. F3205와 F3204의 proteinase activity는 24시간에는 F3205가 약 4배정도 높게 나타나 큰 차이를 보였으나 72시간 후 유사한 activity를 보였다. 두 종의 균주를 이용하여 쌀 단백 질을 가수분해한 시료 각각의 glutamic acid 함량을 분석하였을 때, 초기 24시간에는 F3205 의 glutamic acid 함량이 F3204를 이용하여 쌀 단백질을 가수분해한 시료보다 높게 나타났 으나, 가수분해가 완료된 72시간 후에는 F3205를 이용하여 가수분해한 시료의 glutamic acid 함량이 F3204를 이용하여 가수분해 한 시료에 비해 낮게 나타남을 알 수 있었다. 이는 glutamic acid만을 분석한 것으로 초기 24시간까지는 F3205의 proteinase activity가 F3204 보다 높기 때문에 쌀 단백질이 가수분해되어 생성된 glutamic acid함량의 증가와 인과관계 가 성립한다. 그러나 24시간이후 glutamic acid 함량은 F3205의 경우 크게 증가하지 않았으 나 F3204를 이용한 경우 급격한 증가를 보였다. 최종 생성되는 proteinase activity는 두 균 주 모두 유사하였으나, F3204는 glutamine을 glutamic acid로 전환시키는 glutaminase activity가 F3205에 비해 상대적으로 우수하므로 최종 쌀 단백 가수분해 시료에서의 glutamic acid 함량이 증가한 것으로 보인다. 그러나 F3205의 경우 glutamlytransferase activity가 F3204에 비해 상대적으로 우수한 균주로 새로운 glutamyl compound가 생겼기 때문에 분석이 되지 않은 것으로 사료된다

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113 대두단백 / 탈지대두 / 밀 gluten ehvp 천연조미료 formulation Soy off-flavor Wheat Gluten Enzyme Digestion 관능적특성 Limited Umami Character : Lower Glutamic acid index Required Masking "Bitter" Flavor Residual " Beany Flavor" Fatty acid Oxidation : off-flavor development Microbial Contamination due to limited microbial control of wheat gluten(high agglomeration) Lower Digestibility by Commercial Proteases Lower Glutamic acid liberation Bitter polypeptide formation

114 Sample Color Umami Bitterness J사의 ehvp 3 abc 1 d 5 g C사의 ehvp 1 a 3 def 3 h M사의 ehvp 2 ab 2 de 4 g A사의 ehvp 4 bc 4 ef 2 h N사의 ehvp 5 c 5 f 1 h

115 GA conc. (g/l) Glucose conc. (g/l) J사의 ehvp 13 0 C사의 ehvp A사의 ehvp N사의 ehvp

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119 전체적인맛 단맛 신맛 J 사의 ehvp 상업용 ehvp 감칠맛 쓴맛 N 사의 ehvp

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121 쌀단백질 HVP Reduced MSG, Sodium 천연조미료 Formulation

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123 l l l l l l l l l l l l l

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127 쌀

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Æ¯ÇãÃ» '' - 1 - - 2 - - 3 - - 4 - - 5 - ' - 6 - - 7 - - 8 - - 9 - - 10 - - 11 - Super-Bio Co., Ltd. KWON, Suk-Tae Thermostable DNA Polymerase-encoding Gene from Thermus sp. X-1 an d Amino Acid Sequence