J. ENVIRON. TOXICOL. Vol. 20, No. 2, 143~151 (2005) UV-B 조사로유도된접촉과민반응에대한홍삼과홍삼 ±EGb 761 혼합물의억제효과비교 최욱희, 김덕성, 안형수 1, 이영미 1, 안령미 동덕여자대학교보건관리학과, 1 동덕여자대학교약학대학 Combined Effect of Korean Red Ginseng and EGb 761 on Ultraviolet B-induced Contact Hypersensitivity Wookhee Choi, Duksung Kim, Hyoungsoo Ann 1, Youngmi Lee 1 and Ryoungme Ahn Department of Health Science, Dongduk Women s University, Seoul 136-714 Korea 1 College of Pharmacy, Dongduk Women s University, Seoul 136-714 Korea ABSTRACT Exposure of skin to UV-B radiation can cause inflammatory response and immunosuppression. It has been reported that Korean Red Ginseng (KRG) has several pharmacological and physiological effects such as antioxidant, anticancer and improving immune function. In this study, we investigated that topical KRG and KRG±EGb 761 (Ginkgo biloba extract) combination prevented UV-B induced inflammation and inhibition of contact hypersensitivity response. Topical application of KRG, 5 days prior to or 5 days after exposure to 1MED and 2MED of UV-B, reduced skin thickness compared to non-treated group and resulted in protection against immunosuppression. However, KRG±EGb 761 combination has a little protection against the only 1MED UV-B. In conclusion. Topical application of KRG was more effective than combination in protection against UV-B induced inflammation and immune suppression. Also, we suggest that KRG can provide protection from inflammation and immunosuppression by UV-B radiation. Key words : Korean Red Ginseng (KRG), EGb 761, UV-B, inflammation, immunosuppression 서 론 자외선은피부에손상을주는것으로알려져있는태양광선의일부분으로, 적당한양에노출시피부에서비타민 D 형성을유도하며 ( 윤재일, 1995), To whom correspondence should be addressed. Tel: +82-2-940-4481, Fax: +82-2-940-4193 E-mail: lucia@dongduk.ac.kr 건선이나백반증의광선치료에이용되기도하는등우리에게매우유익한역할을한다. 그러나과잉노출시광과민증질환, 광노화, 피부암발생등해로운점도있다 (Ichihashi et al., 2003). 특히, 자외선 B 는피부의화상을유발하며, 면역학적기능을저하시켜세균감염및암을유발한다 (Kripke, 1990). 최근오존층의파괴와더불어피부암발생문제가심각하게대두되면서이러한태양자외선의유해한영향으로부터피부를방어하는방법에 143
144 J. ENVIRON. TOXICOL. Vol. 20, No. 2 대한연구가많이진행되고있다 ( 이은희등, 2001; Fazekas et al., 2003; Tanaka et al., 2004; Katiyar, 2005). 그대표적인예가항산화제로, 자외선으로인해파괴되어진 SOD (superoxide dismutase), CAT (catalase), α-tocopherol (Vitamin E), ascorbic acid (Vitamin C) 와같은체내항산화효소를외부항산화제를사용하여자유기 (free radical) 에의한손상을감소시키고자하는연구가진행중이다. 자유기란짝을이루고있지않은전자를가진불안정한산소로, 전반적인노화과정에관여하며, 피부에있어서는광노화, 암발생과염증반응을일으키는것으로알려져왔으나, 이러한유해활성에대한정확한기전은밝혀지지않았다. 이러한자유기는일반적인대사과정에서도만들어지며, 공해, 흡연, 음주, 운동및중금속이나약물에의해서도발생된다. 또한자외선, 스트레스, 음식물에의해서도이러한반응성산소종이발생하며, 특히자외선의노출은자유기의발생을증가시키는원인이된다. 따라서, 외부적으로항산화제를사용하는것이이러한과정에영향을미치며, 체내로흡수되어피부에서항산화제수치를올라가게할수있는지에대한사항이항산화제의효능을입증할때반드시고려되어야할항목이다 (Baumann, 2004). 최근이러한연구의하나로, 홍삼의항산화제로서의효능이보고되고있다. 홍삼의주요성분인사포닌은생체내 SOD 및 catalase 와같은항산화효소의합성능력을강화시키고, 방사선장해로손상된생쥐간의 SOD, peroxidase 및 catalase 의활성을회복시킨다 ( 전철등, 1993; 성금수등, 2000). 또한, 홍삼추출물은제초제인 paraquat 투여생쥐간에서지질과산화를억제시키며, 노화촉진생쥐간조직에서 SOD 활성을증가시켜지질과산화를억제한다 ( 장재철등, 1994; 이화재등, 1999). 이러한홍삼의항산화효과는체내의항산화효소를활성화시켜항산화능을증가시키고, 손상받은조직내에서만효과를보인것이아니라는점에서다른항산화제와구별된다. 또한, 홍삼은독성물질에대한간손상방어, 당뇨병및고지혈증예방, 면역기능증진등과같은다양한약리효능이알려져있다. 특히면역기능에있어서홍삼은면역증강작용이있는것으로보고되고있으며, 여러스트레스 모델에서저항성을높이는효과가있음이오래전부터알려져왔다 ( 곽이성등, 2003). 홍삼추출물은종양세포를이식한마우스의비장세포면역력을증대시키는효과가있으며, T 림프구에의한세포매개성면역반응과지연살해세포의활성도를증가시켜항암효과를나타낸다 (Jang et al., 1994; 장성강등, 1994). 이에본연구자는항산화와면역증강효과를모두가지고있는홍삼이 UV-B 에의해유도되는염증반응및면역억제를효과적으로감소시킬수있을것으로생각되어, 이미본연구실에서 UV-B 로인한면역억제에대한방어효과가입증된바있는 EGb 761 (Ginkgo biloba extract) 을이용하여그효과를비교하고자하였다 ( 최욱희등, 2005). UV-B 로인한염증반응은자외선조사후피부두께의변화를측정하여살펴보았으며, 면역억제는 contact hypersensitivity response 를측정하였다. 자외선으로인한염증반응및면역억제에대한홍삼의효능이밝혀지지않은점을고려하여홍삼단독처리군과, 본연구실에서증명된바있는 EGb 761 과의혼합처리군, 2 군으로나누어그효능을비교하였다. 연구방법 1. 실험동물의사육및자외선조사 실험동물은 ( 주 ) 샘타코 Bio Korea 에서분양받아사육한약 8~10 주령된 ICR mouse (female) 를사용하였으며, 사육조건은온도 23±1 C, 상대습도 55±5% 의항온항습실에서사료와식수를자유로이공급하였다. 정상쥐군은 Normal 군 으로표기하여 1 주일간정상사육하였으며, 자외선조사군은대조군으로하였다. Normal 군과대조군은자외선조사 24 시간전에등부위를 clipper 로 shaving 하였으며, 10 마리를한군으로하였다. Normal 군을제외한나머지군은등부위만노출되도록자체고안한 cage 에넣은후, 자체제작한조사기에 cage 를넣고 UV- B (312 nm) 를조사시켰다. 자외선조사기에는총 4 개의 UV-B lamp (phillips) 를설치하였으며, mouse 는자외선 lamp 로부터
June 2005 Choi et al. : UV-B 조사로유도된접촉과민반응에대한홍삼과홍삼 ±EGb 761 혼합물의억제효과비교 145 20 cm 떨어진곳에서조사되었다. UV-B 실험농도는 ICR mouse 의등부위에 UV-B 를조사하여조사영역대부분에홍반을나타내는최소한의자외선량을최소홍반량 (Minimal Erythema Dose, MED) 으로하였으며, 본실험에서는 1.4 KJ/m 2 를 1MED 로하였다. 자외선조사는 radiometer (6501-54 VLX-3W, France) 를사용하여약 3 분간 UV-B 를조사하였다. 2. Korean Red Ginseng (KRG) 과 KRG±EGb 761 combination 처치 Base 로션은 Polyethylene (PEG) 8000 과 PEG 400 의 1:2 혼합액을 water bath 에서 60 C 로천천히녹여 3 차증류수와섞어사용하였다. (Shen and Zhou, 1995) Korean red ginseng (Cheong-Kwan-Jang, Korea Ginseng Corp.) 을 Base 로션에섞어 0.1, 1, 4% lotion 을조제하여사용하였으며, combination 은같은농도의 EGb 761 과 KRG 를혼합하여제조하였다. 실험동물은자외선조사 5 일전부터홍삼로션과혼합로션을등부위에 200 µl 씩도포하였으며, 매자외선조사시에도조사직후같은양의로션을도포하였다. 3. Contact hypersensitivity reaction 측정 Contact hypersensitivity 를유도하기위해 shaving 된 mouse 의등부위를 5 일간 1MED (1.4 KJ/m 2 ), 1.5MED (2.1 KJ/m 2 ), 2MED (2.8 KJ/m 2 ) 의 UV-B 를조사시켰다. Sensitizer 를접촉시키기 24 시간전 mouse 배부위를 shaving 한후, 8 일과 9 일째되는날에 2% oxazolone 을 sensitizer 로 100 µl 씩 shaving 된 mouse 의배에발랐다. 15 일째되는날 mouse 귀의두께를 micrometer 로측정하고, 2% oxazolone 을양쪽귀에각각 5 µl 씩바른후 18 시간후에귀부종의두께를 micrometer 로측정하였다 (Nakamura et al., 1997). 이때홍삼단독처리와 EGb 761 과의혼합처리가자외선에의해유도되는 immunosuppression 을감소시킬수있는지알아보기위해자외선조사 5 일전부터실험동물의등부위에홍삼과 EGb 761 과의혼합액이농도별 (0.1, 1, 4%) 로함유되어있는 lotion 을 200 µl 씩도포 (1 일 1 회, 총 5 회 ) 하였다. 한군당 10 마리의실험동물을사용하였으며, 각군의 5 마리는 UV-B 를 5 일간조사시켰으며, 나머지 5 마리는 UV-B 에대한대조군으로남겨두었다. 자외선조사군과대조군은 UV-B 조사가끝난직후, 전처치와동일한방법으로로션을 200 µl 를처치하였다. Contact hypersensitivity 에대한 recovery 백분율은다음과같이계산하였다. (%) Suppression = Net ear swelling of UVB mice 100-100 mmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmm Net ear swelling of control mice 4. 실험데이터검정 실험데이터의통계처리는 SPSS 를사용하여실시하였으며, 유의수준은 0.05 이하로하였다. 결과및고찰 1. 홍삼피부도포시피부두께의변화 홍삼의피부도포가자외선조사전, 후의피부두께에미치는영향을알아보고자홍삼을 0.1, 1, 4% 의농도별로처리하여, skin thickness 를측정하였다 (Fig. 1). 본실험은홍삼의도포가자외선으로인한피부두께증가를감소시킬수있는지두가지측면에서살펴보았다. 자외선조사전홍삼의피부도포가자외선으로인한피부두께의증가를예방할수있는지알아보기위하여 UV-B 조사전 5 일간홍삼을피부도포하여자외선을 1 회조사시킨후, 피부두께를측정하였다. 또한계속적인 UV-B 조사에대한홍삼의방어효과를알아보기위하여 5 일간자외선을조사시켰으며, 매자외선조사시마다조사직후, 홍삼을도포하였다. 홍삼의 5 일간피부도포후, 1MED 와 2MED 의 UV-B 를 1 회등부위에조사한후 24 시간후에피부두께를측정한결과는다음과같다. 저농도인 1MED 에서 UV-B 단독조사군과비교했을때, 홍삼을 0.1% 처리한군에서는피부두께의변화가없었으나, 1, 4% 처리한군에서각각 50.6, 51.1% 의통계적으로유의한감소를보였다 (p 0.01). 고농도인 2MED 에서는 UV 단독군에비해피부두께가 1% 처리군은 45.7, 4% 처리군은 63.7% 의유의한
146 J. ENVIRON. TOXICOL. Vol. 20, No. 2 감소효과를보여 (p 0.01), 자외선의일회조사시에는 1% 농도이상의홍삼처리가피부두께의감소를보임을알수있었다 (Fig. 1, Panel A). 반복된자외선조사시에도홍삼이방호효과를나타내는지알아보기위하여 1MED 와 2MED 의자외선을 5 일간조사한후매조사시마다 0.1, 1, 4% 의홍삼을피부도포한후피부두께를측정한결과는다음과같다. 저농도인 1MED 에서 UV-B 단독조사군과비교했을때, 홍삼을 0.1% 처리한군에서는 17.9% 의감소를보였으나, 통계적으로유의한수준은아니었다. 그러나, 1, 4% 처리한군에서는각각 45.6% (p 0.01), 37.4% (p 0.05) 의통계적으로유의한감소를보였다. 고농도인 2MED 에서는 UV 단독군에비해피부두께가 0.1% 처리군은 15.2, 1% 처리군은 44.8% (p 0.01), 4% 처리군은 6.9% 의감소를보여, 1% 처리군에서만통계적으로유의한변화를볼수있었다 (Fig. 1, Panel B). 그러나, 자외선의반복조사시 0.1% 홍삼처리군은 1MED 와 2MED 모두 15% 이상의감소효과를보여피부두께의변화를전혀볼수없었던일회적인조사와다른결과를나타내었다. 또한, 일회적인조사에있어서는홍삼의농도가높을수록감소효과도증가한반면, 반복적인조사에서는 1% 홍삼처리군이 4% 처리군보다감소효과가컸다. 따라서, 생체내에서활성화될수있는적절한농도에대한연구가이루어진다면, 자외선으로인한피부손상에대한홍삼의치료효능또한기대할만한연구가될것으로여겨진다. 실제로국소용항산화제들이자외선으로인한피부손상을예방하고치료하는목적으로사용되고있으나그러한항산화제의사용이손상을예방하고치료함을증명할만한결과는없다. 항산화능을가지고있는것으로알려진대부분의항산화제는체내에도달하기전불활성화되어버린다. 항산화제로잘알려진 Vitamin E 는 prostaglandin E2 생성을줄여주고 IL-2 생성을증가시켜항염증과면역자극효과를유발시킨다 (Diplock et al., 1989). 이러한효과가생체내실험에서도변화가있는지그연관성을측정하려는시도가있었지만결정적이지않은것으로판명되었다. 동물실험에서도역시쥐에자외선 B 를조사시키기전 5% tocopherol 을바른경우주름이 75% 감소하고피부종양이줄어드는것을관찰했으며, D-α-tocopherol acetate 를바 % Increase skin swelling % Increase skin swelling 50 40 30 20 10 0 150 100 50 0 A B 0 0.1 1 4 KRG concentration (%) 른경우일광화상, 부종과피부민감에의한홍반을감소시킨다는보고가있다 (Bissett et al., 1990; Trevithick et al., 1992). 그러나이러한효과가사람에서도같은효과가있는지는알려진바가없다. 이에반해, 홍삼은동물실험과임상실험모두에서과산화지질을감소시키고, 항산화효소를활성화시키는것으로보고되고있다 ( 김태영등, 1999; 이청무, 2000). 따라서, 본실험결과홍삼의피부도포가자외선으로인한피부두께를감소시킴은홍삼의생체 1MED 2MED 1MED 2MED 0 0.1 1 4 KRG concentration (%) Fig. 1. Panel A. Protective effect KRG on UV-B induced edema.; Groups of mice were exposed 1MED (= 1.4 KJ/m 2 ), 2MED (= 2.8 KJ/m 2 ) UV-B. Mice were treated topical application of KRG (0.1, 1, 4%) 5days prior to UV-B exposure. The average dorsal skin swelling was measured at 24h after UV-B irradiation. p 0.01: significantly different from nontreatment KRG. Panel B. The average dorsal skin swelling was measured after 5th UV-B irradiation. After irradiation, each groups of the mice were treated with 200 µl lotions on 5 consecutive days. The data was determined by the same methods described in Panel A. *p 0.05, p 0.01: significantly different from non-treatment KRG. *
June 2005 Choi et al. : UV-B 조사로유도된접촉과민반응에대한홍삼과홍삼 ±EGb 761 혼합물의억제효과비교 147 % Increase skin swelling % Increase skin swelling 50 40 30 20 10 0 150 100 50 0 A B 1MED 2MED 0 0.1 1 4 Combi concentration (%) 1MED 2MED 0 0.1 1 4 Combi concentration (%) Fig. 2. Panel A. Protective effect KRG±EGb 761 combi. on UV-B induced edema.; Groups of mice were exposed 1MED (= 1.4 KJ/m 2 ), 2MED (= 2.8 KJ/m 2 ) UVB. Mice were treated topical application of KRG±EGb 761 combi. (0.1, 1, 4%) 5days prior to UV-B exposure. The average dorsal skin swelling was measured at 24 h after UV-B irradiation. Panel B. The average dorsal skin swelling was measured after 5th UV-B irradiation. After irradiation, each groups of the mice were treated with 200 µl lotions on 5 consecutive days. The data was determined by the same methods described in Panel A. 내항산화효소를활성화시킴을나타내는결과로보여지며, 이러한효과가피부를통해서도가능함을보여주는결과라사료된다. 2. KRG±EGb 761 combination 피부도포시피부두께의변화 본실험실에서항염증효과가보고된바있는 EGb 761 은홍삼과같이처리하였을때, 홍삼단일처리군에비해어떠한효과를보이는지살펴보았다 (Fig. 2). 혼합물을 5 일간도포후, 자외선을 1 회조사시켜 피부두께를측정한결과, 1MED 와 2MED 조사군모두유의할만한감소효과를보이지않았다 (Fig. 2, Panel A). 5 일간 UV-B 를조사한후, 피부두께를측정한결과, 1MED 조사군에서는 0.1, 1, 4% 농도의혼합물처리군에서각각 20.3, 25.8, 23.2% 의피부두께감소를보였으나통계적으로유의할만한수준은아니었으며, 2MED 조사군에서는피부두께의감소를볼수없었다. UV-B 1 회조사시, 홍삼단일처리군과 EGb 761 단일처리군은 1% 이상의농도에서피부두께를통계적으로유의하게감소시킨것에반해 ( 최욱희등, 2005), 혼합처리군은그효과를볼수없었는데, 이는혼합처리제의피부내흡수가잘이루어지지않았다고생각되나추후연구가필요할것으로사료된다. 또한, UV-B 반복조사시, 홍삼단일처리군과 EGb 761 단일처리군은 1MED 와 2MED 모두에서감소효과를보인것에반해, 혼합처리군은 1MED 의자외선조사시에만감소효과를보였으며, 그효과는혼합처리군의농도와관계없이거의일정한수준의감소효과였다. 따라서 1MED 의저농도자외선을장기간조사시에는홍삼단독처리군이효과적이며, 고농도의자외선을장기간조사시에는 EGb 761 단독처리군이 UV-B 차단에효과적이라할수있다. 이러한결과는자외선조사량에따른다양한약물처리법이있음을보여주는단적인결과로, 그효능에따라사용용도를달리할수있음을보여주는결과라하겠다. Zaidi 등과 Lazzarini 등의연구에의하면 Vitamin E 는 Vitamin C 와같이처리했을때, Vitamin C 가 Vitamin E 에게지지전자 1 개를공여하여원래의 Vitamin E 로회복하는데도움을주어상승적항산화작용을발휘한다 (Zaidi et al., 2005; Lazzarini et al., 2005). 그러나, 본실험결과홍삼과 EGb 761 은혼합처리시상승적인효과를보여주지못했다. 따라서, 이러한혼합제의적절한조성과피부세포내의흡수를촉진시킬수있는 vesicle 에대한추후연구가계속된다면, 홍삼과 EGb 761 혼합제의다기능적효과를활성화시킬수있으리라사료된다. 3. 홍삼의면역조절효과 홍삼의피부도포가 UV-B 조사로유도된면역
148 J. ENVIRON. TOXICOL. Vol. 20, No. 2 억제반응에미치는영항을알아보고자, 0.1, 1, 4% 농도의홍삼이함유된로션을자외선조사 5 일전일정한시간에 200 µl 씩피부도포하였으며, 자외선조사시에도조사직후즉시로션을자외선조사부위에도포하였다. 저농도인 1MED 조사군에서는 0.1, 1, 4% 홍삼처리군이자외선조사군과비교했을때, UVB 로인한면역억제를각각 25.7, 30.3, 34% 유의하게감소시켰으며 (p 0.01), 고농도인 2MED 조사군에서는 0.1% 처리군이 17.4% 의감소를보였으나통계적으로유의할만한수준은아니었으며, 1% 처리군은 35.7% (p 0.01), 4% 처리군은 36.1% (p 0.01) 의유의한감소를보였다 (Fig. 3). 0.1% EGb 761 단독처리군이 1MED 와 2MED 에서각각 4.2, 8.3% 의감소효과를보였던이전보고 ( 최욱희등, 2005) 와비교했을때, 0.1% 홍삼처리군은 1MED 에서 25.7% (p 0.01), 2MED 에서 17.4% 의면역억제를저해시키는효과를보여홍삼이 1% 이상의농도에서만유의한감소효과를나타낸 EGb 761 에비해면역억제방어효과가뛰어난것으로사료된다. Han 등의연구에의하면인삼의수용성추출물로부터정제된 Ginsan 이 γ-radiation 으로인한억제된 Th1 면역반응을향상시킴을보고하였고 (Han et al., 2005), Larsen 등은인삼이 IL-12 의생성을유도하여 Th1 면역반응을증강시킴을보였으며 (Larsen et al., 2004), Xiaoguang 등은홍삼이 T 임파구의활성을촉진시켜세포의면역반응을향상시킨다고보고하였다 (Xiaoguang et al., 1998). 또한, 장등의연구에의하면홍삼의항암효과를나타내는기전은 T 림프구에의한세포매개성면역반응의활성도증가에의한것임을보여주었으며, 이등의연구에서는 B, T 임파구들의세포증식과세포독성 T 임파구들의암세포파괴활성을촉진시키는면역활성물질이인삼에함유되어있을가능성을강하게시사한바있다 ( 장성강등, 1994; 이혜연등, 1998). 본실험결과, 홍삼이 UV-B 로인한면역억제를유의하게감소시킨것은홍삼의이같은면역증강효과와관련이있는것으로보이며, 홍삼의이러한면역조절작용은자외선뿐만아니라각종유기화합물, 환경오염물질로인한면역저하에대한조절물질로서도작용가능할것으로기대된다. A Non-UVB Lotion base UVB 0.1% KRG±UV 1% KRG±UVB 4% KRG±UVB B Non-UVB Lotion base UVB 0.1% KRG±UV 1% KRG±UVB 4% KRG±UVB 0 5 10 15 20 25 30 Average ear swelling*0.01 mm 4. KRG±EGb 761 combination 의면역조절효과 * 홍삼을단독처리시와 EGb 761 과혼합처리시면역억제정도에미치는효과를비교하여보았다 (Fig. 4). 저농도인 1MED 자외선조사에서는 0.1, 1% 혼합처리군이 UV-B 조사군과비교했을때, 각각 20.7, 27.8% 의통계적으로유의한감소를보인반면 (p 0.01), 4% 처리군에선 10.2% 의면역억제감소효과를보였다. 고농도인 2MED 조사군에서는 0.1, 1% 혼합처리군이 UV-B 조사군과비교했을때, 8.8, 0.2% 의감소를보여혼합처리군으로인한효과를전혀볼수없었으나, 4% 혼합처리군에서는 36.3% 의유의한감소효과를보였다 (p 0.01). 홍삼단독처리군과 EGb 761 단독처리군이처 * 0 5 10 15 20 25 30 Average ear swelling*0.01 mm Fig. 3. Panel A. Prevention of 1MED UV-B induced suppression of CHS response by 0.1, 1, 4% of KRG. *p 0.001: significantly different from non-uvb. p 0.01: significantly different from UV-B. Panel B. Prevention of 2MED UV-B induced suppression of CHS response by 0.1, 1, 4% of KRG. *p 0.001: significantly different from non-uvb. p 0.01: significantly different from UV-B.
June 2005 Choi et al. : UV-B 조사로유도된접촉과민반응에대한홍삼과홍삼 ±EGb 761 혼합물의억제효과비교 149 A Non-UVB Lotion base UVB * 0.1% combi. 1% combi. 4% combi. 0 10 20 30 Average ear swelling*0.01mm B Non-UVB Lotion base UVB * 0.1% combi. 1% combi. 작용을고려한연구가이루어지고있다 ( 곽이성등, 2003). 실제로 Petkov 등은은행잎과인삼추출물과이들의추출물을배합한엑스가동물의기억력개선과학습기능을촉진시키는효과가있음을보고하였으며 (Petkov et al., 1994), Nishiyama 등은고려인삼을함유한생약복방제가노화와관련된지질의과산화를억제하는효과가있다고보고한바있다 (Nishiyama et al., 1994). 이러한연구는단일제재가가져올수있는부작용및한계를고려한연구로홍삼에대한새로운효능연구가계속되고있음을보여준다 ( 곽이성등, 2003). 본연구에서보여지는홍삼과은행잎의혼합제는비록높은수준의면역조절효과는보여주지못했으나그가능성을여는데충분한가치가있는연구결과라사료되며, 자외선에대한홍삼의연구기반을제공해준다는측면에서지속적인연구가필요할것으로생각된다. 4% combi. 0 10 20 30 Average ear swelling*0.01mm 결 론 Fig. 4. Panel A. Prevention of 1MED UV-B induced suppression of CHS response by 0.1, 1, 4% of KRG ±EGb 761 combi. *p 0.001: significantly different from non-uvb. p 0.01: significantly different from UV-B. Panel B. Prevention of 2MED UV-B induced suppression of CHS response by 0.1, 1, 4% of KRG±EGb 761 combi. *p 0.001: significantly different from non-uvb. p 0.01: significantly different from UV-B. 리물질에대해농도의존적으로면역억제감소효과를보인것과달리 ( 최욱희등, 2005), 혼합처리군은처리농도와상관없는결과를보였으며, 고농도의 2MED 자외선조사시 0.1% 와 1% 의처리군에서는별다른효과도보이지않았다. 또한, 면역억제감소정도도홍삼단독처리군과 EGb 761 의단독처리군이유의한면역억제방어효과를보인반면, 홍삼과 EGb 761 의혼합처리군은면역조절효과가일정하지않은것으로보였다. 홍삼에대한연구는대개단일제재혹은사포닌중심의연구에서산성다당체, 펩타이드등비사포닌성분에대한연구와다른생약재를배합했을때발생될수있는약물간의상승작용혹은상쇄 피부의자외선노출은염증을유발하고, 면역관련세포를손상시켜면역기능의저하와광노화, 피부암을촉진시킨다. 따라서본연구에서는항산화와면역증강효과에뛰어난홍삼을이용하여홍삼의단독처리시와 EGb 761 과의혼합처리시, 자외선으로유도된피부두께증가와면역억제에미치는효과를비교하고자하였다. 0.1, 1, 4% 농도의홍삼과 EGb 761 과의혼합물을 5 일간피부도포후, 자외선을 1 회조사시켜피부두께를측정한결과, 홍삼단일처리군에서는 1% 이상의농도에서자외선조사농도에상관없이모두유의한피부두께감소효과를보였으며, 혼합처리군에서는피부두께의감소를볼수없었다. 5 일간자외선을조사한후피부두께를측정한결과, 홍삼단일처리군은 1MED 와 2MED 모두에서유의한감소효과를보였으나, 혼합처리군은 1MED 의자외선조사시에만약간의감소효과를보였으며, 그효과는유의하지않았다. 면역억제반응에있어서는홍삼단일처리군이 0.1% 의낮은농도에서부터높은면역억제감소효과를보였으며, 혼합처리군은 1MED 의자외선조사시에만약간의감소효과를볼수있었다. 이상에서저자들은홍삼을함유한도포제가
150 J. ENVIRON. TOXICOL. Vol. 20, No. 2 UV-B 로유도된피부염증과면역억제반응에 EGb 761 과의혼합제보다더효과적인감소를보임을관찰할수있었다. 따라서홍삼의피부도포는피부손상을유발하는 UV-B 를차단하는데효과적이며, 장기간자외선노출로인한피부염에대한외용제로서의사용도가능할것으로생각한다. 감사의글 본연구는한국과학재단의여자대학교연구기반확충사업의연구비 (R06-2002-005-01004-0) 지원에의해수행되었으며, 연구비지원에감사드립니다. 참고문헌 김태영, 이청무. 홍삼투여가운동시항산화효소및과산화지질의변화에미치는영향. 한국운동과학회지. 1999; 8(3): 473-483. 곽이성, 박종대, 양재원. 홍삼효능연구의최근현황과그전망. 식품산업과영양. 2003; 8(2): 30-37. 성금수, 전철, 권용훈, 김경현, 장재철. 홍삼추출물투여가생쥐간에서항산화효소활성과지질과산화에미치는효과. 고려인삼학회지. 2000; 24(1): 29-34. 윤재일. Effect of ultraviolet radiation on the skin., J. Korean Asso. Radiat. Prot., 1995; 20(3): 181-186. 이은희, 이종권, 홍진태, 정경미, 김용규, 이선희, 정수연, 이용욱. 녹차추출물성분 catechin 이자외선에의해손상된피부에미치는영향. J. Fd Hyg. Safety. 2001; 16(2): 117-124. 이청무. 홍삼과비타민 E 투여가혈중항산화효소활성도및과산화지질생성에미치는영향. 체육학회지. 2000; 39(1): 476-488. 이화재, 김동윤, 장재철. Paraquat 투여생쥐간에서홍삼추출물이항산화효소활성과지질과산화에미치는항산화효과. 고려인삼학회지. 1999; 23(3): 182-189. 이혜연, 이한수. 홍삼추출물의임파구증식및활성촉진효과. 고려인삼학회지. 1998; 22(1): 60-65. 장성강, 김주헌, 정윤신, 안동춘, 강명재, 이동근, 김상호. 한국홍삼의면역활성및항암효과에관한실험적연구. 고려인삼학회지. 1994; 18(3): 151-159. 장재철, 김동조. 홍삼사포닌이노화촉진생쥐간조직에서의 Superoxide Dismutase 활성과지질과산화에미치는영향. 기초과학회지. 1994; 9: 57-64. 전철, 장재철. 홍삼투여가방사선에조사된생쥐간세포의 Superoxide Dismetase, Peroxide 및 Catalase 활성도에미치는영향. 고려인삼학회지. 1993; 17(1): 29-34. 최욱희, 안형수, 안령미. ICR mouse 에있어 UVB 조사로유도된접촉과민반응에대한 EGb 761 의억제효과. 한국환경보건학회지. 2005; 31(1): 7-14. Baumann L. Cosmetic Dermatology. 정담미디어. 2004. Bissette DL, Chatterjee R and Hannon DP. Photoprotective effect of superoxide-scavenging antioxidants against ultraviolet radiation-induced chronic skin damage in the hairless mouse. Photodermatol. Photoimmunol. Photomed. 1990; 7: 56. Diplock AT, XU G, Yeow C. et al. Relationship of tocopherol structure to biological activity, tissue uptake, and prostaglandin synthesis. In : Diplock AT, Machlin LJ, Packer L. et al., eds: Vitamin E: Biochemistry and Health Implications. New York, New York Academy of Sciences, 1989. Fazekas Z, Gao D, Saladi RN, Lu Y, Lebwohl M and Wei H. Protective effects of lycopene against ultraviolet B- induced photodamage. Nutr. Cancer. 2003; 47(2): 181-187. Han SK, Song JY, Yun YS and Yi SY. Ginsan improved Th1 immune response inhibited by gamma radiation. Arch Pharm Res. 2005; 28(3): 343-350. Ichihashi m, Ueda M, Budiyanto A, Bito T, Oka M et al. Uv-induced skin damage. Toxicology. 2003; 189: 21-39. Jang SK, Kim JH, Chung YS, Ahan OC, Kang M, Lee DK and Kim SK. An experimental study on the effect of immunopitiential and anticancer effect of red ginseng extract. Korean J. Ginseng Sci. 1994; 18: 151-159. Katiyar SK. Silymarin and skin cancer prevention: antiinflammatory, antioxidant and immunomodulatory effects. Int. J. Oncol. 2005; 26(1): 169-176. Kripke ML. Photoimmunology. Photochem. Photobiol., 1990; 52: 919-924. Larsen MW, Moser C, Hoiby N, Song Z and Kharazmi A. Ginseng modulates the immune response by induction of interleukin-12 production. APMIS. 2004; 112(6): 369-373. Lazzarini M, Salum C and Del Bel EA. Combined treatment of ascorbic acid or alpha-tocopherol with dopamine receptor antagonist or nitric oxide synthase inhibitor potentiates cataleptic effect in mice. Psychopharmacology (Berl). 2005; 2: Epub ahead of print. Nakamura T, Pinnell SR, Darr D, Kurimoto I, Itami S, Yoshikawa K and Streilein JW. Vitamin C abrogates the
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