본초학표지

大韓本草學會誌제 29 권제 6 호 (2014 년 11 월 ) Kor. J. Herbology 2014;29(6):7-13 ISSN 1229-1765(Print), ISSN 2288-7199(Online) http://dx.doi.org/10.6116/kjh.2014.29.6.7. 竹葉과黃芩복합물의항비만효과 강영민 1#, 김승형 2, 이영철 3, 김호경 1, 김동선 1* 1 : 한국한의학연구원한약자원그룹, 2 : 대전대학교동서생명과학연구원, 3 : 상지대학교한의과대학본초학교실 Synergistic combination effect of anti-obesity in the extracts of Phyllostachys pubescence Mael and Scutellaria baicalensis Georgi Young Min Kang 1#, Seung-Hyung Kim 2, Young-Cheol Lee 3, Ho Kyoung Kim 1, Dong-Seon Kim 1* 1 : Herbal Medicine Resources Group, Korea Institute of Oriental Medicine, Daejeon, 305-811, Republic of Korea 2 : Institute of Traditional Medicine and Bioscience, Daejeon University, Daejeon 300-716, Republic of Korea 3 : Department of Herbology, College of Korean Medicine, Sangji University, Wonju 220-702, Republic of Korea ABSTRACT Objectives : Anti-obesity drugs that have been developed so far have limited efficacies and considerable adverse effects affecting tolerability and safety. Therefore, most anti-obesity durgs have been withdrawn. We tried to develop anti-obesity agent by combinations from herbs that are used in food ingredients as well as in traditional medicines. Methods : The 80% (v/v) ethanol extracts from Bamboo (Phyllostachys pubescence) leaf (BL) and Scutellaria baicalensis (SB) and their 1:1 combination (BLSB) was evaluated on high fat diet induced obese mice compared to Omega-3 as a positive control. The mice were divided into six groups (n=5), one group fed a normal diet (ND), and the others fed a high fat diets for eight weeks. Two weeks after starting feeding the diets, the high fat diet groups were orally administered vehicle and Omega-3, BL, SB, and BLSB at dosage of 200 mg/kg/day for six weeks. All groups were assayed for body weights, food efficiency ratio, blood biochemistry parameters, and organic tissue weights. Results : BLSB group showed significant reductions in body weight gain and fat weights of liver and epididymal adipose tissue compared to BL or SB alone as well as control. Total-cholesterol and LDL-cholesterol levels significantly decreased, and HDL-cholesterol level increased. In liver tissue, macrovesicular steaotisis was remarkably improved and its fat cell size was also significantly decreased. Conclusions : These results suggested that a combination preparation of bamboo leaf and S. baicalensis has anti-obesity effect and have synergistic effect compared to bamboo leaf or S. baicalesis. Key words : Anti-obesity, Herbal combination, Phyllostachys pubescence, Scutellaria baicalensis, Synergistic effect 서론 1) 신농본초경, 본초강목, 동의보감등에따르면죽엽 ( 竹葉 ) 은대나무의잎으로써, 열을내리고번조 ( 煩躁 ) 를제거하며진액 을생성하고이뇨하는효능을가지고있어, 중풍과고혈압을치료하는한약재로널리사용되어왔다 1,2). 죽엽의생약명은 Folium Phyllostachydis 이며, 대과 (Bambusaceae) 참대속 *Corresponding author : Dong-Seon Kim. Herbal Medicine Resources Group, Korea Institute of Oriental Medicine, 1672 Yuseong-daero, Yuseong-gu, Daejeon 305-811, Republic of Korea. Tel : +82-42-868-9639 FAX : +82-42-868-9541 E-mail : dskim@kiom.re.kr #First author : Young Min Kang. Herbal Medicine Resources Group, Korea Institute of Oriental Medicine, 1672 Yuseong-daero, Yuseong-gu, Daejeon 305-811, Republic of Korea. Tel : +82-42-868-9684 FAX : +82-42-868-9541 E-mail : ymkang@kiom.re.kr Received:15 October 2014 Revised:7 November 2014 Accepted:11 November 2014

8 大韓本草學會誌 Vol. 29 No. 6, 2014 Phyllostachys에속하는왕대 (Phyllostachys bambusoides S. st), 솜대 (Phyllostachys bambusoides nigra var. benonis Stapf), 맹종죽 (Phyllostachys pubescence Mael) 이우리나라에서자생하고특히맹중죽은죽재와죽순을모두이용가능하기때문에약용및식용에이용가치가높다 2). 황금 ( 黃芩 ) 은꿀풀과 (Labiatae) 속썩은풀 (Scutellaria baicalensis Georgi) 의뿌리로서주피를제거하거나뿌리그자체를한약으로사용하고있으며, 한국뿐아니라중국, 일본, 몽고, 등동북아시아지역에서오랫동안한의학및동양의학에서사용되어왔다 3,4). 식물명황금 (S. baicalensis) 의생약명은 Scutellariae Radix 영명은 Scutellaria Root이다. 황금은청열조습약으로써, 폐의열을내리고습을없애는효과가있으며, 이뇨제, 지사제, 이담제, 소염제등으로사용되어왔다 3). 최근이런한의학에서사용되는본초들을바탕으로풍부하고다양한식생활및생활양식의변화에대응한의약적치료제로많이사용되고있다. 특히현대인들은영양섭취가불균형한상태로되기쉬우며, 기계화된현대생활은운동부족을초래하게되었다. 그결과, 고혈압과같은만성질환의이환율이증가하고, 질병의형태도선진국형으로변화하고있다. 이러한질병의원인으로서다양한요인과관련된연구가활발히진행되고있으며, 특히비만에대한연구가활발히진행되고있다 5,6). 비만은고혈압, 당뇨병, 심장순환계질환및각종암등을유발시키는원인이되며비만관련질병치료에소요되는의료비는날로증가하고있어체지방감소효과를가지는물질의규명및이의효과를입증하는노력은전세계적으로큰관심사가되고있다 7). 또한, 비만을치료하고예방하는방법은여러나라에서활발하게다각적인측면에서연구되고있는데현재실행되고있는방법으로음식물의섭취량을억제하여에너지소비를줄이는식이요법, 운동을통해에너지를발산시키는운동요법, 장기의일부를절제하거나지방흡입술과같은수술요법그리고에너지대사촉진제, 식욕억제제, 소화흡수억제제등을사용하는약물요법이있다. 그러나현재까지는비만을치료하는방법중완전한방법은없으며이러한방법을중단하였을때다시체중이증가되는요요현상이나타나거나식이제한에의한영양불균형, 면역력저하에의한감염등여러가지부작용이나타나고있다. 특히약물요법의경우, 우울증, 불면증, 소화장애등그부작용이다양하게보고되고있다. 이러한배경하에서, 본연구자들은식품의원료로도사용되어안전성이확보된본초들을대상으로한예비연구에서죽엽, 황금등몇개의우수한비만효능소재들을도출하였고, 이들을다양하게복합하여항비만효능을탐색한결과죽엽과황금이시너지를통하여효능이탁월하게증가됨을확인하여보고하고자한다. 1. 재료수집 재료및방법 2012년 7월 27일에전남담양군일대에서맹종죽을채취하였으며, 황금은 ( 주 ) 광명당제약 ( 울산, 한국 ) 에서구입하여사용하였다. 수집한시료는본초학, 생약학, 식물분류학등의전문가로구성된분류 동정자문회의의동정을거쳐그종을 최종확증하였다 8). 2. 죽엽 ( 맹종죽 ) 과황금의복합추출물제조맹종죽잎 1 kg과황금뿌리 1 kg을각각 15l의 80% 에탄올에상온에서 1주일간침지시키고, 80 에서 5시간동안추출및여과하였다. 각각의추출용액을감압농축하여죽엽추출물 (Bamboo leaf: BL) 89.1 g 및황금추출물 (Scutellaria baicalensis: SB) 193 g을수득하였고, 이들죽엽추출물과황금추출물을 1:1(w/w) 로혼합하여죽엽과황금의복합추출물 (BLSB) 을제조하였다. 3. 비만 / 고지혈증동물모델에서의효능평가 1) C57bl/6를이용한비만증유발동물모델숫컷 C57bl/6 마우스를대한바이오링크 (Korea) 로부터수입하여사용하였다. 분양받은실험동물은 2주간기본사료 (AIN-76A diet) 와물을자유롭게공급하면서실험실환경에적응시킨후, 건강상태가양호한 10 주령의마우스를동물사육실의환경은항온 (25± 2 ), 항습 (50± 5%) 및 12시간간격의광주기 (light on 07:00 ~ 19:00) 로명암으로조절되는 SPF 환경에서유지실험에사용하였다. 실험동물은 6 마리씩분리하여사육하였으며, 식이와식수는자유롭게섭취하도록하였다. 2) 죽엽과황금, 복합추출물시험물질제조및검액투여실험군은정상대조군 (ND), 비만대조군 ( 고지방식이군, HFD), 양성대조군 (Omega-3) 군, 죽엽추출물 (Bamboo leaf: BL), 황금추출물 (Scutellaria baicalensis: SB), 및죽엽추출물과황금추출물 1:1 복합물 (BLSB) 를각각 200 mg/kg/day 용량으로생리식염수에현탁시켜마우스존데를이용하여경구투여하였다. 3) C57bl/6 비만증유발생쥐의체중및식이섭취량 C57bl/6 비만증유발생쥐를 2주간기본사료 (AIN-76A diet) 로적응시킨후 10주령부터 Diet Induced Obesity Diet Formulas (D12492) 60 kcal% fat 식이섭취하여평균체중이 28g ~ 29g사이에도달하면, 항비만증죽엽과황금, 복합추출물을 6주간투여하였다. 식이섭취량및체중은매주일정한시간에측정하여기록하였다. 체중변화측정및기록은매주수요일 9시에실시하였으며, 총체중증가량 (Final body wt - initial body wt) 과 1 일평균체중증가량 (Total body weight gain / days) 을조사하였다. 식이섭취량 (food intake) 은 1일평균식이섭취량 (Total food intake / days) 으로조사하였고식이효율 (food efficiency ratio, FER) 은 [Total weight gain/total food intake] 100으로환산하여계산하였다. 4) 비만생쥐모델제작, 죽엽과황금, 복합추출물투여및혈액생화학검사 C57bl/6 마우스를 2주간기본사료 (AIN-76A diet) 로적응

竹葉과黃芩복합물의항비만효과 9 시킨후 10주령부터 Diet Induced Obesity Diet Formulas (D12451 & D12492) 60 kcal% HFD식이섭취와항비만죽엽과황금, 복합추출물투여를 6주간병행하였다. 식이섭취량및체중은매주일정한시간에측정하여기록하였으며, 최종실험종료후심장천자법으로채혈하여혈액생화학적검사를실시하기위하여채혈후 30분이내에 3,000 rpm, 4 에서 15분간원심분리하여혈장 (plasma) 을분리하여 -70 에보관하였다가분석하였다. 각실험동물로부터분리한혈장 (plasma) 에서간기능의지표인 ALT 및 AST를, 신장기능지표인 BUN, creatinine 을, 혈장및간의지질함량의지표인총콜레스테롤, HDL (High-density lipoprotein), LDL (Low-density lipoprotein), 중성지방 (triglyceride), 혈당의함량을생화학자동분석기 (Hitachi-720, Hitachi Medical, Japan) 를이용하여측정하였다. 5) 부검사육이끝난실험동물은희생전 3시간동안절식시킨후혈액을채취하여동일한방법으로처리하였고, 각실험동물의간무게및부고환주변복부지방량 (epididymal adipose tissue) 은혈액채취후즉시적출하여칭량하였다. 출물과비교 (p<0.05) 하여서도유의성있는체중감소효과를나타내었다 (Fig. 1). Omega-3, BL, SB, BLSB 섭취군에서 HFD군에비해식이효율이유의적으로낮게나타났으며, BLSB는이들중가장낮게나타났다 (Fig. 2). Fig. 1. Effect of bamboo leaf, Scutellaria baicalensis and their combination extracts on body weight gain in HFD-induced obese mice. HFD, high fat diet control group; HFD+omega-3, high fat diet contains 200 mg/kg omega3-fed group; HFD+BL, high fat diet contains 200 mg/kg BL-fed group; HFD+SB, high fat diet contains 200 mg/kg SB-fed group; HFD+BLSB, high fat diet contains 200 mg/kg BLSB-fed group. Values are expressed as means±sd (n=5). * p <0.05; ** p<0.01; *** p<0.001. 6) 병리조직분석항비만죽엽과황금, 복합추출물을 6주간투여후주요장기들에대한조직병리학적관찰을수행하기위해간과지방조직등을절취하여 10% neutral buffered formalin 에 24시간동안고정시킨다음 graded alcohol 로탈수시키고파라핀으로포매하여 block을제작한다음 microtome 으로 4 μm두께의조직절편을제작하여 hematoxylin & eosin (H&E) 염색및오일-레드 O를시행한뒤 xylene clearing 을거쳐 permount 로처리한후광학현미경위에서조직또는장기별특이병변의유무를관찰하였다. 4. 통계처리각실험군결과값은 unpaired student's T-test 통계프로그램을사용하여통계처리하였으며, p<0.05 이하의수준에서유의성검정을실시하였다. 결과 1. 고지방식이유도비만마우스의체중및식이효율변화비만유도된마우스에서죽엽과황금복합물의항비만효과에미치는영향을조사하기위해 6주동안실험동물의체중증가량및식이섭취효율을확인하였다. 죽엽추출물 (BL) 과황금추출물 (SB) 을단독으로투여한경우에는양성대조군으로사용된 Omega-3 투여군과유사한수준으로체중증가가억제되었다. 죽엽과황금복합추출물 (BLSB) 을처리한경우에는약물을투여하지않고고지방식이만을투여한그룹 (HFD) 과비교 (p<0.01) 하여서뿐만아니라죽엽또는황금단독추 Fig. 2. Effect of bamboo leaf, Scutellaria baicalensis and their combination extracts on food efficiency ratio (FER) in mice fed high fat diet and herb extracts. HFD, high fat diet control group; HFD+omega-3, high fat diet contains 200 mg/kg omega3-fed group; HFD+BL, high fat diet contains 200 mg/kg BL-fed group; HFD+SB, high fat diet contains 200 mg/kg SB-fed group; HFD+BLSB, high fat diet contains 200 mg/kg BLSB-fed group. Values are expressed as means±sd (n=5). * p<0.05; ** p<0.01; *** p<0.001. 2. 고지방식이유도비만마우스의혈중지질지 표변화 5주간 (35일) 죽엽추출물과황금, 복합추출물을투여한후 12시간절식후공복상태의실험동물의혈액에서총콜레스테롤 (TC), 중성지방 (TG), 저밀도콜레스테롤 (LDL-C), 고밀도콜레스테롤 (HDL-C), 신장기능을나타내는 BUN, creatinine, 간기능을나타내는효소 (AST, ALT), 그리고혈중혈당 (glucose) 을측정하였다. 혈중지질지표를나타내는총콜레스테롤 (TC), 중성지방 (TG), 그리고 LDL-C 의경우 HFD은 ND군에비해증가하였고, Omega-3은 HFD에비하여통계학적으로유의성있게감소하였다 (p<0.001). 그리고각각 BL과 SB투여했을때보다도 BLSB을투여했을때가좀더크게 HFD에비하여통계학적으로유의성있게감소하였다 (p<0.001). 이런결과는비만생쥐에서혈중지질지표가 BL과 SB 각각투여보다 BLSB의혈중지질지표상승효과가있음을알수있었

10 大韓本草學會誌 Vol. 29 No. 6, 2014 다. HDL-C 의경우 HFD에비하여 Omega-3, BL, SB, 그리고 BLSB 투여군에모두증가를나타내었다. AST와 ALT의경우 HFD은 ND군에비해증가하였고, HFD에비하여 Omega-3, HFD-BL, HFD, 그리고 BLSB에서 ALT와 AST 수준이모두감소를나타내었고, 또한각각 BL과 SB 투여했을때보다도 BLSB을투여했을때가좀더크게유의성있게 ALT (p<0.001) 와 AST (p<0.05) 수준이감소하였다. 이런결과로부터비만생쥐에서간기능에서 SB 각각투여보다 BLSB이간보호상승효과가있음을알수있었다 (Table 1). 3. 고지방식이유도비만마우스의지방조직무게변화비만유도된마우스에서 BLSB의항비만효과에미치는영향을조사하기위해 5주동안투여후간조직 (Liver) 과복부부고환주변지방조직 (viceral adipose) 중량을비교한결과로, ND은지방조직의무게가은 0.787 g으로극히낮은수준을나타내었고, HFD은지방조직의무게가 3.014g으로높은수준을나타내었으나, Omega-3 은 2.420g (p<0.05), BL은 2.640 g, SB은 2.696g, BLSB은 2.391g (p<0.05) 으로유의성있게지방조직의수준이감소함을확인하였다. 특히, BLSB의경우에는죽엽추출물또는황금단독추출물보다유의성있는지방조직수준의감소를나타내었다. 그리고 ND은간조직의무게가은 1.086g으로나타내었고, HFD은간조직의무게가 1.861g으로나타내었으나, Omega-3은 1.148g (p<0.001), BL은 1.189g (p<0.01), SB은 1.070g (p<0.001), BLSB은 1.028g (p<0.001) 으로유의성있게간조직의무게가감소함을확인하였다. 특히, 죽엽과황금복합추출물투여군의경우에는죽엽또는황금단독추출물보다유의성있는간조직무게의감소를나타내었다 (Table 1). 4. 고지방식이유도비만마우스의간조직변화고지방식이투여로인해지방간이유발된간조직에서는마이크로지방구가간세포질에축적되어마이크로지방구들이거대소포성 (macrovesicular) 지방증으로진행되어조직상에큰지방구들이나타나며, 또한헤마톡실린-에오신 (H-E) 으로염색시지방의축척으로회색지방축적세포들이넓게분포하는지방간이나타난다. 정상식이정상군 (Normal group) 과비교하여, 고지방식이섭취에의해비만이유발된고지방식이 HFD에서강하게회식지방축적세포들이전체에존재하고, 거대소포성 (macrovesicular) 지방증도많이존재함을관찰하였다. Omega-3 과유사한수준또는그이상으로 BL, SB, BLSB은 HFD에비하여현저하게개선된것으로나타났다. 죽엽또는황금단독추출물투여군이회식지방축적세포들과거대소포성지방증이다소관찰되는수준과비교하여, BLSB 은회식지방축적세포들과거대소포성지방증이정상군에가깝게지방간조직이개선되었음을관찰할수있었다. 따라서특히죽엽과황금복합추출물은간조직에회식지방축적세포들과거대소포성지방구가침착되는것을억제하여지방간개선에효능이있는것으로분석되었다 (Fig. 3). Table 1. Effect of bamboo leaf, Scutellaria baicalensis root and their combination extracts on blood biochemistry parameters and organic tissue weights in HFD-fed obese mice. ND HFD HFD+Omega-3 HFD+BL HFD+SB HFD+BLSB Total cholesterol, mg/dl 137.8±3.8 217.4±3.0 177.0±8.7 *** 190.0±7.7 ** 194.4±6.3 ** 186.0±3.3 *** Triacylglycerol, mg/dl 43.2±6.7 483.4±20.7 438.4±21.2 435.3±16.1 476.5±15.9 438.3±18.5 LDL-cholesterol, mg/dl 10.8±1.0 29.8±1.0 15.2±1.0 *** 18.0±1.5 *** 15.3±1.0 *** 15.5±0.6 *** HDL-cholesterol, mg/dl 81.0±2.1 71.0±2.8 82.0±2.3 ** 78.0±2.9 76.8±1.7 79.4±2.6 * BUN, mg/dl 28.0±1.7 26.5±0.9 21.6±2.3 28.2±1.2 21.8±0.5 *** 27.0±1.3 Glucose, mg/dl 124.2±1.4 208.0±9.6 169.5±9.7 ** 168.4±22.6 169.6±8.0 ** 156.6±13.8 ** ALT, U/L 23.6±0.5 121.0±8.5 44.0±7.9 *** 41.2±6.1 *** 39.0±3.7 *** 36.5±2.4 *** AST, U/L 95.6±18.3 131.2±5.1 104.8±7.9 * 108.8±9.6 * 118.0±13.6 108.0±15.6 Creatinine, mg/dl 0.23±0.01 0.27±0.001 0.25±0.01 * 0.25±0.02 0.21±0.01 ** 0.23±0.01 ** Liver weight, (g) 1.086±0.026 1.861±0.133 1.148±0.081 *** 1.189±0.110 ** 1.070±0.031 *** 1.028±0.060 *** Viceral adipose, (g) 0.787±0.097 3.014±0.197 2.420±0.161 * 2.640±0.076 2.696±0.154 2.391±0.245 * HFD, high fat diet control group; HFD+omega-3, high fat diet contains 200 mg/kg omega3-fed group; HFD+BL, high fat diet contains 200 mg/kg BL-fed group; HFD+SB, high fat diet contains 200 mg/kg SB-fed group; HFD+BLSB, high fat diet contains 200 mg/kg BLSB-fed group. ND, C57bl/6 normal mice; HFD-CT, high fat diet-control; HDL, high-density lipoprotein; LDL, low-density lipoprotein; AST, aspartate aminotransferase; ALT, alanine aminotransferase. BUN, blood urea nitrogen; Values are expressed as means±sem (n=6). * p<0.05; ** p<0.01. *** p<0.001. Fig. 3. Effect of bamboo leaf (BL), Scutellaria baicalensis (SB) and their combination (BLSB) extracts on liver histological profiles in HFD-induced obese mice. Representative photographs of liver tissue of hematoxylin and eosin stained sections (magnification, 200x). Normal, normal diet group; HFD, high fat diet control group; HFD+omega-3, high fat diet contains 200 mg/kg omega3-fed group; HFD+BL, high fat diet contains 200 mg/kg BL-fed group; HFD+SB, high fat diet contains 200 mg/kg SB-fed group; HFD+BLSB, high fat diet contains 200 mg/kg BLSB-fed group. 4. 고지방식이유도비만마우스의지방세포변화 고지방식이섭취로인해비만이유발되면지방세포의크기가현저히증가하게된다. Fig. 4에서보듯이, 고지방식이 HFD는정상식이 ND에비하여지방세포크기가 4배이상증가한반면, 양Omega-3 과 BL은약 3배수준으로, BLSB는거의정상군수준으로지방세포크기가감소하였다. 한편, BL과 SB는거의고지방식이 HFD와유사한수준으로효과가없었다. 따라서죽엽과황금복합추출물은각각의단독추출물과비교하여시너지효과를가지고지방세포크기증가를억제하는것으로관찰되어고지방식이로인해유발된비만치료에유용하게사용될수있음을확인할수있었다.

竹葉과黃芩복합물의항비만효과 11 Fig. 4. Effect of bamboo leaf, Scutellaria baicalensis and their combination extracts on histological profiles of epididymal adipose tissue in HFD-induced obese mice. Representative photographs of epididymal adipose tissue of hematoxylin and eosin stained sections (magnification, 400x). Normal normal diet group; HFD, high fat diet control group; HFD+omega-3, high fat diet contains 200 mg/kg omega3-fed group; HFD+BL, high fat diet contains 200 mg/kg BL-fed group; HFD+SB, high fat diet contains 200 mg/kg SB-fed group; HFD+BLSB, high fat diet contains 200 mg/kg BLSB-fed group. Arrows indicate adipocytes. 고찰 본연구를통하여, 죽엽과황금의복합추출물은체중증가량을감소시킬뿐만아니라, 전체적인체중을감소시키고, 지방조직의수준및지방세포크기를감소시킴을확인하였으므로, 비만의효과적인예방또는치료에이용될수있으며, 또한간조직에지방구가침착되는것을억제하여지방간개선에도효과가있음을확인할수있었다. 죽엽은본논문에서사용된맹종죽과는그종이다른조릿대이지만이미그물추출물과에탄올추출물에대한항비만효과가보고되어있다 9). 황금은물추출물에대하여항비만효과가있다는보고 10) 가있는반면없다는보고 11) 가있다. 본연구에서비교군으로사용한 Omega-3 지방산은혈중중성지질및혈행개선건강기능식품이며최근에항비만효능이보고되었고 12), 체지방개선을위한건강식품으로도많이사용되고있다. 본연구에서실험 6주동안사육한실험동물의체중증가량에있어서, 비만대조군 (HFD-CT) 49.3±1.18 (g) 과비교하여 Omega-3 투여군은 42.0±1.76 (g) 으로약 14.8% 의체중이감소함을확인할수있었으며, BL과 SB도이와유사한수준으로체중증가량이감소하는경향을확인할수있었다. 특히 BLSB의경우각각 BL과황금 SB 단독투여군에비하여약 10% 이상의체중감소상승효과를보였다. 식이섭취량및식이효율에있어서, 죽엽과황금복합물 BLSB의 1일평균식이섭취량및식이효율은비만대조군에비해현저히감소하였다. 실험그룹별간장및복부지방무게변화는 ND군에비해 HFD-CT의간장무게가약 50% 증가하였고, 이것은고지방섭취시지방의대사가일어나지만간에서합성된중성지방이정상적으로제거되지않아간에지방이쌓여지방간이초래되어간무게가증가한것으로생각되어진다. 또한부고환주변복부지방의무게에있어서도, 비만대조군 3.014±0.197g 에비해 HFD-BLSB는 2.391±0.245g으로약 20.5% 이상유의적으로무게감소를나타내었다. 비만생쥐에서간기능에서 BL과 SB 각각의단독보다복합 물인 BLSB가시너지에의하여간보호효과가상승됨을알수있었다. 이러한결과를바탕으로보아 HFD-BLSB군의투여는체내장기지방축적을감소함으로써성인병을예방할수있을것으로기대된다. 고지혈증 (hyperlipedemia) 은콜레스테롤 (total cholesterol; TC) 이나중성지방 (triglyceride; TG) 의증가를의미하며, lipoprotein 의대사이상에의해발생하는이상지질혈증 (dyslipedemia) 이다 13). 이상지질혈증은 TC 와 TG를운반하는 lipoprotein 의생합성증가또는분해감소에의해고콜레스테롤혈증, 고중성지방혈증, 낮은 HDL 콜레스테롤혈증등이다양하게나타나고있다. TC 및 TG의혈청내증가가고지혈증의가장일반적인원인으로취급되고있는데, 과다한지방질의축적으로혈액순환장애및미세순환부전을일으키고 14), 이로인하여죽상동맥경화증, 허혈성심질환, 뇌경색, 고혈압, 비만, 당뇨병등을초래할수있다 15,16). 6주간각식이별로사육된실험동물들의혈청내지질대사를살펴보면 ND에비해 HFD-CT의총콜레스테롤, LDL-콜레스테롤및중성지질 (TG) 의함량이증가하였으며, HFD-CT에비해 HFD-BLSB의지질함량은유의적으로감소하였다. 총콜레스테롤의함량을살펴본결과, HFD-CT의 217.4±3.0 mg/dl에비하여 HFD-BLSB 투여군의총콜레스테롤은 186.0±3.3 mg/dl으로약 14.2% 통계학적으로유의적으로감소하였다 (p<0.001). Wright와 Salter 17) 의연구에서는이소플라본이담즙산의배설을증가시켜콜레스테롤의제거를촉진시킨다고보고했는데, 본연구에서도 BLSB 의총콜레스테롤수치가감소하였는데이와유사한작용기전인것으로사료된다. TG의함량을살펴본결과, 정상식이 (Nr) 군이 43.2±6.7 mg/dl인데비해 HFD-CT이 483.4±20.7 mg/dl로 10배이상유의한증가를나타내었으며, 이에대하여 BL, SB 및복합물인 BLSB 투여군의중성지방함량은각각 435.3±16.1 mg/dl, 476.5±15.9 mg/dl 및 438.3±18.5 mg/dl로감소효과가나타났지만통계학적유의성은없었다. HDL-콜레스테롤함량은 ND에비하여 HFD-CT이약 12.3% 로감소를나타내었으며, BL, SB 및 BLSB 투여군 (p<0.05) 이 HFD-CT 에비하여유의한증가를보였다. 최근고지방식이와함께레스베라트롤을투여하여고혈당과비알코올성지방간질환관련대사인자들을개선시키고, 간에서의자가포식조절과관련이있다고보고하였다 18). 우리의연구에서도 ND에비하여 HFD-CT이혈당 (glucose) 의함량이증가하였으며, 고지방식이대조군 (HFD-CT) 에비해 BLSB 투여군의혈당 (glucose) 의함량은유의적으로감소하였다. 특히, BL과 SB 각각투여보다 BLSB에서혈당 (glucose) 함량수치가상승감소하였으므로유사한결과로판단된다. 이와같이따른체내지질대사관련기능성을평가한결과 BLSB의투여에의해총콜레스테롤, LDL-콜레스테롤, 중성지질은감소하고, HDL-콜레스테롤은증가시킴으로써성인병을매우효과적으로예방할수있을것으로기대된다. 생체내아미노산을형성하는데중요한역할을하는 ALT와 AST 효소는여러장기세포에존재하지만그중간에가장많은양이존재하며, 약물이나외부적스트레스에의해간조직이손상을받거나고지방식이나알코올섭취로인해간실질세포의장해가발생하면혈액중이들효소들의활성이증가하게된다 19). Kang 등 20) 의연구에서도급성신부전증, 고지혈증, 폐경색증이있을때간세포장해가고도로진행되면서 AST와 ALT 활성이동시에높아지며간

12 大韓本草學會誌 Vol. 29 No. 6, 2014 에서담즙산배설장애로혈청콜레스테롤농도가상승되는것으로보고하였다. 따라서혈중 ALT와 AST의활성측정은간기능을살펴보는데있어하나의지표로서중요하게이용된다. 우리의연구결과에서 BLSB의투여군의 AST와 ALT 효소활성도 HFD-CT에비해통계학적으로유의성있는현저한효소활성감소효과를보였다. 이와같은사실로보아 BLSB의투여는고지혈증에따른간조직의손상을어느정도지연시켜비정상적인혈청콜레스테롤의증가를방지할수있을것으로판단되며, 특히 BL과 SB 각각투여보다 BLSB 투여군에서상승효과가있는것으로사료된다. 이상의결과를살펴볼때죽엽과황금에탄올추출물들은고지방식이비만유도생쥐모델에서항비만및지질저하효과를나타내었으며, 이들을복합처방하였을경우시너지를통하여항비만효과가현저히증가되었다. 이러한결과는, 본연구자들이보고한죽엽과오매복합물이시너지를통하여항혈전효과가증가된예와유사한것으로사료된다 8). 향후다양한복합비에따른효능을평가하여최적의처방을결정하고, 어떠한상호작용과작용기전을통하여항비만효과가증가되는지에대한추가연구가필요하다. 결론 인체에안전하면서도비만개선효과를갖는소재를발굴하기위하여전통적으로사용된한약재이면서식품의원료로사용되며비만개선효과가알려진소재인죽엽과황금의에탄올추출물을복합하여고지방식이로유도된비만생쥐에경구투여한후, 항비만효과를연구한결과는다음과같다. 1. 체중의변화에서는죽엽과황금복합물은고지방식이비만유도생쥐모델에서체중이대조군에비해유의적 (p<0.001) 으로감소시켰고, 죽엽또는황금단독과비교하여서도유의적 (p<0.001) 으로감소시킴으로서복합처방에의한시너지효과가관찰되었다. 2. 혈중지질지표를나타내는총콜레스테롤 (Total cholesterol) 과저밀도 (LDL) 콜레스테롤의경우, 대조군에비하여죽엽과황금복합물은유의적 (p<0.001) 으로감소하였다. 특히고밀도 (HDL) 콜레스테롤의경우유의적 (p<0.05) 으로증가하였다. 중성지방의경우도감소하였으나유의성은나타나지않았다. 죽엽과황금단독과비교하였을때그이상으로감소효과를나타내었으나유의성은없었다. 3. 간손상지표를나타내는혈중 AST와 ALT의경우, 죽엽과황금복합물은 AST를유의성 (p<0.001) 있게감소시켰고, ALT 또한감소시켰으나유의성은나타나지않았다. 죽엽과황금단독과비교하였을때그이상으로감소효과를나타내었으나유의성은없었다. 4. 간과복부부고환주변지방조직의경우, 죽엽과황금복합물은유의성 ( 각각 p<0.001과 p<0.05) 있게지방조직의수준을감소시켰다. 죽엽과황금단독과비교하였을때 동등또는그이상으로감소효과를나타내었으나유의성은없었다. 5. 간조직을분석한결과, 죽엽또는황금단독추출물투여군에서회식지방축적세포들과거대소포성지방증이다소관찰되는수준과비교하여, 죽엽과황금복합물은정상군과거의유사한수준으로지방간조직이개선되었음을관찰할수있었다. 지방세포크기에있어서도, 죽엽또는황금단독추출물투여군에서는대조군과비교하여큰차이가없는데비하여, 죽엽과황금복합물은거의정상군수준으로감소하였다. 이상으로죽엽과황금복합추출물은체중감소, 저밀도콜레스테롤감소, 고밀도콜레스테롤증가, 지방조직중량감소, 간조직의지방구침착억제를통하여우수한항비만효과를갖는다. 감사의글 본논문은한국한의학연구원고유본초자원의기원확립 (K14415) 과비만개선식품의약한약소재의실용화 (C14060) 의지원으로이루어졌으며, 이에감사드립니다. References 1. Cho E, Kim S, Na I, Kim DC, In MJ, Chae HJ. Antioxidant and anticoagulant activities of water and enthanol extracts of Phyllostachys pubescence leaf produced in Geoje. J Appl Biol Chem. 2010 ; 53(3) : 170-3. 2. In MJ, Park MK, Kim SY, Chae HJ, Chae MW, Sone J, Ji HS, Han KS, Kim DC. Composition analysis and antioxidative activity of maengjong-juk (Phyllostachys pubescence) leaves tea. J Appl Biol Chem. 2010 ; 53(2) : 116-9. 3. Yoon HJ, Park YS. Effects of Scutellaria baicalensis water extract on lipid metabolism and antioxidant defense system in rats fed gigh fat diet. J Korean Soc Food Sci Nutr. 2010 ; 39(2) : 219-26. 4. Kim SC, Ahn KS, Park CK, Jeon BS, Lee JT, Park WJ. Isolation of antioxidative compound from Scutellaria baicalensis G. Korean J Med Crop Sci. 2006 ; 14(4): 212-6. 5. Chun JM, Choi G, Kim DS, Sung YY, Nho KJ, Kim SH, Kim HK. The anti-obesity effect of 5 herbal formulas in high fat diet induced obese mice. Herbal Formula Sci. 2013 ; 21(2) : 44-52. 6. Chun JM, Kim DS, Choi G, Sung YY, Park SH, Kim SH, Kim HK. Ainti-obesity effect of five formulas which can be used to treat hypertension in high fat diet induced obese mice. Kor J Pathol. 2013 ;

竹葉과黃芩복합물의항비만효과 13 27(5) : 637-43. 7. Kurukulasuriya LR, Stas S, Lastra G, Manrique C, Sowers JR. Hypertension in obesity. Med Clin North Am. 2011 ; 95(5) : 903-17. 8. Jin WY, Kim SH, Kim HK, Kang YM, Jang DG, Nam JB, Hwang BY, Kim DS. Antiplatelet and antithrombotic effect of Phyllostachys pubescens leaves and Mume Fructus combination. Integr Med Res. 2013 ; 2(2) : 70-5. 9. Kim EY, Jung EY, Lim HS, Heo YR. The effects of the Sasa borealis leaves extract on plasma adiponectin, resistin, C-Reactive protein and homycysteine levels in high fat diet-induced obese C57/BL6J mice. Kor Nutri Soc. 2007 ; 40(4) : 303-11. 10. Lee DS, Ko W, Kim KS, Kim DC, Yoon CS, Cho K, Cui X, Oh H, Kim YC. The comparison between hot-water extracts and microwave extracts of Scutellaria radix for antioxidant for antioxidant and neuroprotective effects. Kor J Pharmacogn. 2014 ; 45(1) : 55-61. 11. Song KH, Lee SH, Kim BY, Park AY, Kim JY. Extracts of Scutellaria baicalensis reduced body weight and blood triglyceride in db/db mice. Phytother Res. 2013 ; 27(2) : 244-50. 12. Arai T, Kim HJ, Chiba H, Matsumoto A. Anti-obesity effect of fish oil and fish oil-fenofibrate combination in female KK mice. J Atheroscler Thromb. 2009 ; 16(5) : 674-83. 13. Dietschy JM, Wilson JD. Regulation of cholesterol metabolism. New Engl J Med. 1970 ; 282(20) : 1128-38. 14. Blackburn P, Côté M, Lamarche B, Couillard C, Pascot A, Tremblay A, Bergeron J, Lemieux I, Després JP. Impact of postprandial variation in triglyceridemia on low-density lipoprotein particle size. Metabolism. 2003 ; 52(11) : 1379-86. 15. Wout ZG, Pec EA, Maggiore JA, Willians RH, Palicharla P, Johnston TP. Poloxamer 407-mediated changes in plasma cholesterol and triglycerides following intraperitoneal injection to rats. J Parenter Sci Technol. 1992 ; 46(6) : 192-200. 16. Afifi FU, Al-Khalidi B, Khalil E. Studies on the in vivo hypoglycemic activities of two medicinal plant used in the treatment of diabetes in Jordanian traditional medicine following intranasal administration. J Ethnopharmacol. 2005 ; 100(3) : 314-8. 17. Wright SM, Salter AM. Effects of soy protein on plasma cholesterol and bile acid excretion in hamsters. Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol. 1998 : 119(2) : 247-54. 18. Lee HJ, Yang SJ. Effects of resveratrol on hepatic autophagy in high fat diet-induced obese mice. J Nutr Health. 2013 ; 46(4) : 307-14. 19. Plaa GL, Charonneau M. Detection and evaluation of chemically induced liver injury. In Principles and methods of toxicology. New York : Hayes At Raven Press. 1994 : 839-70. 20. Kang YH, Park YH, Ha TY, Moon KD. Effects of pine needle extracts on serum and liver lipid contents in rats fed high fat diet. J Korean Soc Food Nutr. 1996 : 25 : 367-73.