농약과학회지제17권제4호 (2013) Vol. 17, No. 4, pp. 307-313 (2013) Open Access http://dx.doi.org/10.7585/kjps.2013.17.4.307 Online ISSN 2287-2051 Print ISSN 1226-6183 ORIGINAL ARTICLES / RESIDUE 매실중살균제 azoxystrobin 과 difenoconazole 의생산단계잔류허용기준설정 이동열 1 김영진 2 박민호 3 이승화 3 김상곤 4 강남준 5,6 강규영 1,6 * 1 경상대학교응용생명과학부 (BK21플러스농생명산업차세대인재육성사업단 ), 2 동의과학대학교동의분석센터, 3 국립농산물품질관리원경남지원, 4 경상대학교식물생명공학연구소, 5 경상대학교원예학과, 6 경상대학교농업생명과학연구원 Establishment of Pre-Harvest Residue Limit (PHRL) of Fungicides Azoxystrobin and Difenoconazole on Prunus mume fruits Dong Yeol Lee 1, Yeong Jin Kim 2, Min Ho Park 3, Seung Hwa Lee 3, Sang Gon Kim 4, Nam Jun Kang 5,6 and Kyu Young Kang 1,6 * 1 Divison of Applied Life Science (BK21+ Program), Gyeongsang National University, Jinju 660-701, Korea 2 Dong-Eui Institute of Technology Dong-Eui Analysis Center, Dong-Eui Institute of Technology, Busan 614-715, Korea 3 Gyeongnam Provincial Office, National Agricultural Products Quality Management Service, Busan 611-084, Korea 4 Plant Molecular Biology and Biotechnology Research Center, Gyeongsang National University, Jinju 660-701, Korea 5 Department of Horticulture, Gyeongsang National University, Jinju 660-701, Korea 6 Institute of Agriculture and Life Science, Gyeongsang National University, Jinju 660-701, Korea (Received on October 23, 2013. Revised on November 11, 2013. Accepted on November 20, 2013) Abstract This study was carried out to investigate the residual characteristics of fungicide azoxystrobin and difenoconazole in Prunus mume fruits, and establish pre-harvest residue limits (PHRL) based on dissipation and biological half-lives of fungicide residues. The fungicides were sprayed onto the crop at recommended dosage once and 3 times in 7 days interval, respectively. The samples were harvested at 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 and 14 days after treatment. These residual pesticides were extracted with QuEChERS method, clean-up with NH 2 SPE cartridge, and residues were analyzed by HPLC/DAD and GLC/ECD, respectively. Method quantitative limits (MQL) of azoxystrobin were 0.03 mg kg 1 and of difenoconazole were 0.006 mg kg 1. Average recovery were 93.2 ± 2.49%, 85.5 ± 1.97% for azoxystrobin at fortification levels at 0.3 and 1.5 mg kg 1, and 100.8 ± 6.74%, 87.6 ± 9.92% for difenoconazole at fortification levels at 0.06 and 0.3 mg kg 1, respectively. The biological half-lives of azoxystrobin were 5.9 and 5.2 days at recommended dosage once and 3 times in 7 days interval, respectively. The biological half-lives of difenoconazole were 9.3 and 8.0 days at recommended dosage once and 3 times in 7 days interval, respectively. The PHRL of azoxystrobin and difenoconazole were recommended as 5.32 and 1.64 mg kg 1 for 10 days before harvest, respectively. Key words Biological half-life, Pre-harvest residue limit, Azoxystrobin, Difenoconazole, Prunus mume 서 론 농약은농산물의재배에있어병, 해충, 잡초의방제와생산량의증대, 고품질농산물생산및농작업의생력화등을 *Corresponding author Tel: +82-55-772-1961, Fax: +82-55-772-1969 E-mail: kykang@gnu.ac.kr 위한다양한용도로사용되고있는현대농업의필수적인농업자재이다 (Jeong 등, 2009; Lee 등, 2011). 그러나이러한농약은여러형태의유기화학구조를가지고있어이로운목적으로작물에살포된후에환경조건등에의하여각기다른분해과정을거치면서소실되거나수계, 토양및작물에잔류되는경우가발생한다 (Kim 등, 1997; Kim 등, 2009). 농약이잔류된농산물이유통되어안전성검사시식품의 307
308 이동열 김영진 박민호 이승화 김상곤 강남준 강규영 약품안전처에서고시한잔류허용기준 (Maximum Residue Limit, MRL) 이상으로농약이검출되면부적합농산물의폐기처분조치로인해생산자에큰경제적손실이발생될수있고, 부적합농산물을소비자가섭취하였을시에는인체위해성문제를일으킬수있는가능성을내포하고있다 (Lee 등, 2012). 이러한문제점들을해결하기위해서는농산물에대한잔류농약안전성검사가출하전생산단계에서수행되는것이효율적이고, 따라서각각의농약에대한작물별 MRL과농산물재배시사용하는농약의생물학적반감기에근거한생산단계잔류허용기준 (Pre-Harvest Residue Limit, PHRL) 설정이필요할것이다. 이러한이유로 1999 년부터생산단계농산물의잔류허용기준설정연구가수행되고있고, 식품의약품안전처에서는 생산단계농산물등의유해물질잔류기준 을고시하고있다 (Ko 등, 2004, Lee 등, 2013). 2013년 4월현재매실재배중사용되는농약은살균제 13개, 살충제 18개, 제초제 1개상품이등록되어있고 ( 한국작물보호협회, 2013), 매실에는 38성분의농약에대하여농약잔류허용기준 (MRL) 이설정되어있으며, 11성분의농약에대하여생산단계잔류허용기준 (PHRL) 이고시되어있다 ( 식품의약품안전처, 2013). 본연구는매실에등록되어재배중탄저병방제를위해사용되는살균제인 azoxystrobin과 difenoconazole의수확전잔류량을예측하기위하여시험농약을야외포장에살포한후일정기간동안의잔류특성을조사하고생물학적반 감기를산출한후 (Park 등, 2005; Yang 등, 1995) 생산단계잔류허용기준 (PHRL) 설정을위한기초자료로활용하고자수행하였다. 재료및방법 시험농약및시약시험농약의표준품은 Dr. Ehrenstorfer사 ( 독일 ) 로부터스트로빌루린계살균제 azoxystrobin (99.0%) 과트리아졸계살균제 difenoconazole (98.7%) 을구입하여사용하였으며, 두살균제의화학구조식과이화학적특성은 Table 1과같고안전사용기준은 Table 2와같다. 추출및정제를위해사용한 acetonitrile과 acetone은 Merck사 ( 미국 ) 로부터, dichloromethane, methanol, toluene 은 Burdick & Jackson사 ( 미국 ) 에서 HPLC급을구입하여사용하였고, 정제를위해사용된 NH 2 SPE cartridge (1 g, 6mL) 는 Agilent사 ( 미국 ) 에서구입하여사용하였다. 시험작물및재배조건시험작물인매실 (Prunus mume, 품종 : 천매 ) 은경상남도진주시진성면소재과수원에서무대재배하고있는 6~8년생수령의작물을사용하였다. 시험포장의시험구를약제처리별 3반복배치하고, 각각의처리구사이에교차오염방지를위해 1그루의매실나무를완충구로두었다. 야외포장의환경적인특성을고려하여시험기간동안강수량을조사 Table 1. Chemical structure and physico-chemical properties of fungicide azoxystrobin and difenoconazole (Tomlin, 2009) Solubility Fungicide Chemical structure Mol. wt. V.p. (mpa) Kow logp in water azoxystrobin 403.4 1.1 10 7 (20 o C) 2.5 (20 o C) 6 mg/l difenoconazole 406.3 3.3 10 5 (25 o C) 4.4 (25 o C) 15 mg/l Table 2. Formulation and safe use guideline of fungicide azoxystrobin and difenoconazole on Prunus mume Fungicide Formulation Target disease a.i. a) (%) Dilution Safe use guidelines PHI b) (day) azoxystrobin SC d) Anthracnose, Scab 17.4 5 ml/20 L 7 4 difenoconazole SC d) Anthracnose 4.0 20 ml/20 L 21 3 a) a.i.: Active Ingredient b) PHI: Pre-Harvest Interval c) MAF: Maximum Application Frequency d) SC: Suspension Concentrate MAF c) (time)
매실중살균제 azoxystrobin 과 difenoconazole 의생산단계잔류허용기준설정 309 하고평균온도와습도를측정하였다. 약제살포및시료채취안전사용기준에따라표준희석살포액 ( 기준량 ) 1회처리구간과, 7일간격 3회처리로나누어 1회처리구간은 2012 년 5월 26일, 7일간격 3회처리구간은 2012년 5월 12일, 19일, 26일에약액이충분히흐를정도로살포하였다. 약제살포후 0(2시간후 ), 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 그리고 14일째시료를생육정도가균일한작물을각처리구간별로 1kg 이상채취하여무게를측정하고꼭지와씨를분리한후과육을 20 o C에보관하여시험에사용하였다. 표준검량선작성및분석정량한계시험농약의표준물질인 azoxystrobin은 acetonitrile에용해하여 1,000 mg L 1 농도의 stock solution을제조후 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0, 5.0, 10.0 mg L 1 농도로희석하여각각의 working solution을 HPLC/DAD (Diode Array Detector) 에, difenoconazole 은 acetone에용해하여 1,000 mg L 1 농도의 stock solution을제조한후 0.01, 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0, 5.0 mg L 1 으로희석하고각각의 working solution을 GLC/ ECD (Electron Capture Detector) 에주입하여크로마토그램상에서나타난피크면적을기준으로표준검량선을작성하였다. 정량분석한계 (Method Quantitative Limit, MQL) 는시료를대상으로분석법상의전체조작을수행한경우에분석대상물질의유무가정확히판단될수있는최저정량한계농도를말하는것으로, 정량한계또는시료량및분석조작중의추출용매량, 추출용매분취량등으로산출하며아래의식과같이산출하였다. MQL (mg kg 1 )= 정량한계 (ng) 최종희석용매량 (ml) 추출용매량 (ml) 기기주입량 (µl) 추출용매분취량 (ml) 시료량 (g) 매실중잔류농약분석매실중잔류농약의추출은 QuEChERS법을응용하여수행하였다 (Anastassiades et al., 2003; Lehotey, 2007). 마쇄한시료 15 g에 0.1% acetic acid가함유된 acetonitrile 15 ml을가하고 MgSO 4 6g, CH 3 COONa 1.5 g을처리한후 60분간진탕추출하여원심분리 (4000 rpm, 10 min, 4 o C) 한후상등액 10 ml을새로운 tube로옮겨질소미세농축하였다. Azoxystrobin은농축시료를 dichloromethane 5 ml에용해한후, dichloromethane 5 ml로활성화한 NH 2 SPE cartridge에시료용액을주입하고 dichloromethane/methanol (95/5, v/v) 20 ml로용출하여질소미세농축기로농축하였으며, difenoconazole은농축시료를 acetonitrile/toluene (75/ 25, v/v) 5 ml에용해하여 acetonitrile/toluene (75/25, v/v) Table 3. HPLC conditions for the analysis of azoxystrobin in Prunus mume fruits Instrument Agilent 1200 series HPLC with auto sampler Column Agilent XDB-C18, 4.6 250 mm, I.d., 5 µm Detector Diode Array Detector (DAD) Wavelength 230 nm Condition Injection volume Time (min) H 2 O (%) Acetonitrile (%) Flow (ml/min) 0 75 25 1.0 10 25 75 1.0 20 5 95 1.0 10 µl Table 4. GLC conditions for the analysis of difenoconazole in Prunus mume fruits Instrument Varian CP-3800 GLC with auto sampler Column VF-5ms, 30 m 0.25 mm i.d., 0.25 µm Detector Electron Capture Detector (ECD) Column flow Carrier N 2 1.0 ml/min Temperature ( o C) Rate ( o C/min) Hold (min) Total (min) Column oven 150 0 0 300 10.00 5.00 20.00 Injection oven : 250 o C, Detector oven : 310 o C Split 10 : 1 Injection volume 1 µl 5mL로활성화시킨 NH 2 SPE cartridge에시료용액을주입하고동일한용매로 20 ml 용출시킨후질소미세농축하였다. Azoxystrobin과 difenoconazole의농축된시료를 2mL의 acetonitrile과 acetone 재용해하여 0.2 µm filter로여과한후각각 HPLC/DAD 와 GLC/ECD를이용하여분석하였으며, 기기분석조건은 Table 3, Table 4와같다. 회수율시험회수율시험은무처리매실시료에정량분석한계의 10배, 50배농도가처리되도록 azoxystrobin은 0.3과 1.5 mg kg 1, difenoconazole은 0.06과 0.3 mg kg 1 이되도록처리후균일하게혼화하여상기잔류농약분석과정을수행하여회수율을산출하였다. 매실중 azoxystrobin과 difenoconazole의희석효과분석수확일자별매실시료의중량변화에의한희석효과를고려한 azoxystrobin과 difenoconazole의잔류량은아래의식에의해산출하고, 잔류회귀곡선을작성하였다.
310 이동열 김영진 박민호 이승화 김상곤 강남준 강규영 중량변화에의한희석효과를고려한잔류량 (mg kg 1 ) 시험농약의생물학적반감기및생산단계농약잔류허용기준의산출매실중 azoxystrobin과 difenoconazole의생물학적반감기는 Microsoft사의 Microsoft Office Excel 2010을이용하여지수곡선식으로산출하였고, 시험농약의생산단계잔류허용기준은국립농산물품질관리원의 SafeQ IN SPSS Statistics에서적용하여설정하였다. 결과및고찰 = 수확일자별매실중량 (g) 0 일차매실중량 (g) 표준검량선작성시험농약인 azoxystrobin과 difenoconazole의표준검량선의직선식과상관계수 (r 2 ) 는 Table 5와같이양호한결과를확인할수있었다. 정량분석한계및회수율시험분석법의정량분석한계는 azoxystrobin은 0.03 mg kg 1, difenoconazole은 0.006 mg kg 1 이었고 HPLC 분석조건에서 azoxystrobin의머무름시간은 10.3 min, GLC 분석조건에서 difenoconazole의머무름시간은 14.5 min이었으며, 크로마토그램상에서농약피크를방해하는물질은존재하지않는것을확인할수있었다 (Fig. 1). 시험농약의회수율시험결과 Table 6과같은회수율을나타내었으며두시험농약에서모두식품의약품안전처에서권고하는단성분분석회수율범위인 70~120%, 변이계수 10% 이내의기준에부합하여 (Lee, 2009) 시험농약의잔류량을산출함에있어효율적인방법이라고판단된다. 수확일자별잔류량 (mg kg 1 ) Table 5. Linear equations of calibration curve for the quantification of the fungicide residues in Prunus mume fruits Fungicide Linear equations r 2 azoxystrobin y = 45.062x + 1.066 0.9997 difenoconazole y = 37.674x 0.725 0.9998 Table 6. Recovery rates and MQLs for azoxystrobin and difenoconazole in Prunus mume fruits a) b) Fungicide azoxystrobin difenoconazole Fortification level (mg kg 1 ) 시험기간중기상조건과매실열매증체율 2012년 5월 12일부터 2012년 6월 9일까지의시험기간중시험포장의평균온도범위는 14.5~22.4 o C, 평균습도범위는 29.1~78.8% 이었으며, 최소강우는 0.1 mm, 최대강우는 6.5 mm이었으며총 6일에걸쳐강우를기록하였다. 또한약제살포후수확일별채취시료의평균무게를산출한결과는 Fig. 2와같다. 0일차시료의무게는 14.9 g에서 14일차에는 21.8 g까지증가하였으며살포일대비최종수확일까지의증체율은 146.30% 이었다. 매실재배중잔류량변화 Recovery ± CV a) (%) 0.3 093.2 ± 2.49 1.5 085.5 ± 1.97 0.06 100.8 ± 6.74 0.3 087.6 ± 9.92 MQL b) (mg kg 1 ) 0.03 0.006 Coefficient of Variation = (standard deviation / average) 100 Method Quantitative Limit 매실재배중 azoxystrobin 과 difenoconazole 을기준량 1 회처리와동일농도로 7일간격 3회처리한후일정기간동안시험농약의잔류량을측정하고잔류량변화를조사하 Fig. 1. HPLC/DAD chromatograms of azoxystrobin (A: control, B : standard 5 mg kg 1, C: recovery 1.5 mg kg 1 spiked) and GLC/ ECD chromatograms of difenoconazole (A: control, B: standard 2 mg kg 1, C: recovery 0.3 mg kg 1 spiked).
매실중살균제 azoxystrobin 과 difenoconazole 의생산단계잔류허용기준설정 311 Fig. 2. Growth curve of Prunus mume fruits during cultivation period. 였다. Azoxystrobin의경우기준량 1회처리시 0.12~ 0.63 mg kg 1, 7일간격 3회처리시 0.15~1.23 mg kg 1 수준이었으며, difenoconazole의경우기준량 1회처리시 0.27~0.85 mg kg 1, 7일간격 3회처리시 0.46~1.78 mg kg 1 수준으로나타났다. Azoxystrobin은두처리구간에서 MRL 인 2.0 mg kg 1 보다낮은농도를나타내었고, difenoconazole 은기준량 1회처리구간에서는 MRL인 1.0 mg kg 1 을초과하는구간을나타내지않았지만, 7일간격 3회처리구간에서는살포후 8일이후부터 MRL이하의잔류량을나타내었다 (Fig. 3). 잔류소실곡선에서두시험농약의생물학적반감기는 azoxystrobin은기준량 1회처리에서 5.9일, 7일간격 3회처리에서 5.2일이었고, 이는기준량 1회처리시, Kang 등 (2011) 이보고한풋마늘에서의 1.2일보다는길게나타났으며, Lee 등 (2011) 의연구에서비가림재배시포도에서의 15.5일보다짧은생물학적반감기를가지는것을확인하였다. Difenoconazole은기준량 1회처리에서 9.3일, 7일간격 3회처리에서 8.0일이었으며, 이는 Kang 등 (2011) 이연구한풋마늘에서의 3.8일보다는길게나타났고, Chang 등 (2012) 이보고한단감에서의 13.6일에비해짧은생물학적반감기를나타내었다. Fig. 3. Dissipation curves of azoxystrobin (A) and difenoconazole (B) in Prunus mume fruits during cultivation periods. 매실증체율에의한 azoxystrobin과 difenoconazole의희석효과농약의작물잔류에영향을미치는인자중하나로작물의비대생장에의한희석효과를들수있다. 비대생장에의한희석효과를고려한시험농약의잔류소실곡선은 Fig. 4과같으며, 이잔류소실곡선에서 azoxystrobin과 difenoconazole 기준량 1회처리구간에서의생물학적반감기는각각 7.8일, 15.0일로희석효과를배제하였을때의생물학적반감기과비교하였을때각각 1.9일과 5.7일이길어진것을확인할수있었다. 시험농약의생산단계잔류허용기준산출생산단계잔류허용기준은작물수확시잔류량이 MRL을초과하지않도록수확전일자별잔류량을설정한기준수 Fig. 4. Dissipation curves of azoxystrobin (A) and difenoconazole (B) after subtraction of dilution effect in Prunus mume fruits during cultivation periods. 치로서이를이용하여매실재배중살균제 azoxystrobin 과 difenoconazole의생산단계잔류허용기준을 Table 7과같이추천할수있다. 매실에서 MRL이 2.0 mg kg 1 인 azoxystrobin의경우 10일전잔류량이 5.32 mg kg 1, MRL
312 이동열 김영진 박민호 이승화 김상곤 강남준 강규영 Table 7. Pre-Harvest Residue Limit (PHRL) of azoxystrobin and difeonconazole in Prunus mume fruits Fungicide Pre-Harvest Residue Limit (mg kg 1 ) 10 day 9 day 8 day 7 day 6 day 5 day 4 day 3 day 2 day 1 day Harvesting day azoxystrobin 5.32 4.83 4.38 3.97 3.60 3.26 2.96 2.68 2.43 2.21 2.0 difenoconazole 1.64 1.56 1.49 1.41 1.35 1.28 1.22 1.16 1.10 1.05 1.0 이 1.0 mg kg 1 인 difenoconazole 은 10 일전잔류량이 1.64 mg kg 1 이하로검출된다면수확시잔류량이 MRL 수준이하로잔류되어안전한농산물의유통이가능할것으로기대된다. 감사의글 본연구는 2012년생산단계농산물의농약잔류허용기준설정연구결과의일부이며, 국립농산물품질관리원의연구비지원에감사드립니다. Literature Cited Anatassiades, M., S. J. Lehotay, D. Stajnbaher and F. J. Scheck (2003) Fast and easy multiresidue method employing acetonitrile extraction/partitioning and dispersive solidphase extraction for the determination of pesticide residues in produce. Journal of AOAC International. 86(1):412-431. Chang, H. R., H. R. Kang., J. A. Do., J. H. Oh., I. K. Whang., K. S. Kwon., M. H. Lim and K. Kim (2012) Residue studies of difenoconazole and thiamethoxam during cultivation of sweet persimmon for export. Korean Journal of Environmental Agriculture. 31(3):248-254. Hong, J. H., J. S. Lim, C. R. Lee, K. T. Han, Y. R. Lee and K. S. Lee (2011) Study of pesticide residue allowed standard of methoxyfenozide and novaluron on Aster scaber during cultivation stage. Korean Journal of Pesticide Science. 15(1):8-14. Jeong, Y. H., J. U. Kim, J. H. Kim, Y. D. Lee, C. H. Lim and J. H. Hur (2004) Modern pesticide. pp.5, first edition, Sigmapress, Korea. Kang, H. R., Y. J. Lee., Y. R. Lee., K. T. Han., H. R. Chang and K. Kim (2011) Dissipation pattern of azoxystrobin, difenoconazole and iprodione treated on field-grown green garlic. Korean Journal of Environmental Agriculture. 30(4):446-452. Kim, J. B., B. H. Song, J. C. Chun, G. J. Im and Y. B. Im (1997) Effect of spryable formulations on pesticide adhesion and persistence in several crops. Korean Journal of Pesticide Science. 1(1):35-40. Kim, S. W., E. M. Lee, Y. Lin, H. W. Park, H. R. Lee, M. J. Riu, Y. R. Na, J. E., Noh, Y. S. Keum and J. H. Kim (2007) Establishment of pre-harvest residue limit (PHRL) of insecticide bifenthrin during cultivation of grape. Korean Journal of Pesticide Science. 13(4):241-248. Ko, G. Y., K. H. Kim and K. S. Lee (2004) Residual pattern of procymidone and chlorothalonil in grape during the period of cultivation and storage. Korean Journal of Environmental Agriculture. 23(1):47-51. Lee, C. R., J. H. Hong., J. S. Lim and K. S. Lee (2011) Residue pattern of azoxystrobin and cyenopyrafen in grape between rainshield and plastic house conditions. Korean Journal of Pesticide Science. 15(2):97-103. Lee, D. Y., Y. J. Kim, S. J. Lee, K. S. Cho, S. G. Kim, M. H. Park and K. Y. Kang (2012) Establishment of pre-harvest residue limit of fungicide pyrimethanil and trifloxystrobin during cultivation of persimmon. Korean Journal of Environmental Agriculture. 31(1):45-51. Lee, D. Y., Y. J. Kim, S. G. Kim and K. Y. Kang (2013) Residual characteristics of insecticides used for oriental tobacco budworm control of paprika. Korean Journal of Environmental Agriculture. 32(1):84-93. Lee, Y. D (2011) Handbook for the pesticide residue analytical methods of Food Code Index. pp. 80-82, third edition, National Institute of Food and Drug Safety Evaluation, Korea Lehotay, S. J (2003) Determination of pesticide residues in foods by acetonitrile extraction and partitioning with magnesium sulfate: collaborative study. Journal of AOAC International. 90(2):485-520. Park, D. S., K. Y. Seong, K. I. Choi and J. H. Hur (2005) Field tolerance of pesticide in the strawberry and comparison of biological half-lives estimated from kinetic model. Korean Journal of Pesticide Science. 9(3):231-236. Tomlin, C. D. S. (2009) The Pesticide Manual, pp. 62-64, pp 354-355, fifteenth edition. BCPC publication, UK. Yang, J. E., D. S. Park. and D. S., Han (1995) Comparative assessment of biological half-lives estimated from kinetic models. Korean Journal of Environmental Agriculture. 14(1):37-48.
매실중살균제 azoxystrobin 과 difenoconazole 의생산단계잔류허용기준설정 313 매실중살균제 azoxystrobin 과 difenoconazole 의생산단계잔류허용기준설정 이동열 1 김영진 2 박민호 3 이승화 3 김상곤 4 강남준 5,6 강규영 1,6 * 1 경상대학교응용생명과학부 (BK21 플러스농생명산업차세대인재육성사업단 ), 2 동의과학대학교동의분석센터, 3 국립농산물품질관리원경남지원, 4 경상대학교식물생명공학연구소, 5 경상대학교원예학과, 6 경상대학교농업생명과학연구원 요약본연구는매실재배중사용되는살균제인 azoxystrobin 과 difenoconazole 의잔류특성을알아보고생산단계잔류허용기준 (Pre-Harvest Residue Limit, PHRL) 설정을통하여생산단계에서합리적인잔류농약관리기준을마련하기위해수행되었다. 먼저두살균제는안전사용기준농도로희석하여 1 회살포와, 동일한농도로희석하여 7 일간격 3 회살포구간으로나누어살포후 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14 일에시료를채취하여분석에사용하였다. 매실중 azoxystrobin 과 difenoconazole 은 QuEChERS 방법으로추출하고 NH 2 SPE cartridge 를이용하여정제한후 HPLC/DAD 와 GLC/ECD 로각각분석하였다. Azoxystrobin 과 difenoconazole 의정량분석한계 (Method Quantitative Limit, MQL) 는 0.03 mg kg 1 과 0.006 mg kg 1 으로나타났다. Azoxystrobin 의회수율은 0.3 및 1.5 mg kg 1 수준에서각각 93.2 ± 2.49%, 85.5 ± 1.97% 이었으며, difenoconazole 의회수율은 0.06 및 0.3 mg kg 1 수준에서각각 100.8 ± 6.74%, 87.6 ± 9.92% 이었다. 매실에서생물학적반감기는기준량 1 회처리와기준량 7 일간격 3 회처리에서 azoxystrobin 은각각 5.9 일과 5.2 일, difenoconazole 은 9.3 일과 8.0 일로나타났다. 잔류회귀감소식을이용하여생산단계잔류허용기준을설정한다면수확 10 일전 azoxystrobin 은 5.32 mg kg 1, difenoconazole 은 1.64 mg kg 1 이하로잔류할때수확시잔류농도가잔류허용기준 (Maximum Residue Limit, MRL) 이하로잔류할것으로기대된다. 색인어 생물학적반감기, 생산단계잔류허용기준, 아족시스트로빈, 디페노코나졸, 매실