대한진단검사의학회지 : 제25권 제2호 2005 Korean J Lab Med 2005; 25: 116-22 수혈의학 헌혈혈액에서 Transfusion-transmitted Virus 유전자그룹의 분포 정주영 성희경 1 한태희 1 인제대학교 의과대학 상계백병원 소아과, 진단검사의학과 1 Distribution of Transfusion-transmitted Virus Genomic Groups in Blood Products Ju Young Chung, M.D., Hee Kyung Seong, Ph.D. 1, and Tae Hee Han, M.D. 1 Departments of Pediatrics and Laboratory Medicine 1, Inje University Sanggye Paik Hospital, Seoul, Korea Background : Transfusion-transmitted virus (TTV) is a small DNA virus with single-stranded, closed circular, antisense genome infecting humans. The TTV has been classified into five major genomic groups 1-5. There have been a few studies on TTV prevalence in blood donors and blood products in Korea. However there have been no reports on the TTV genomic groups in Korea. The aim of this study was to gain information on TTV genomic groups in blood products in Korea. Methods : A total of 50 plasma samples from blood products (25 units each of red blood cell and whole blood) were tested. The samples are obtained from the segments of the blood products. TTV DNA was detected using polymerase chain reaction (PCR) with two sets of universal primers (A set and B set), and TTV genomic groups were determined using PCR with group specific primer sets. Results : TTV DNA was detected in 96% (48/50) of the blood products: the TTV genomic group 3 was found the most frequently (52%, 26/50), followed by group 4 (46%, 23/50), group 1 (20%, 10/50), group 5 (10%, 5/20), and group 2 (2%, 1/50). There were seven blood products (14%) infected with TTVs but their genomic groups were not identified with group specific primer sets. Among the blood products, 44% (22/50) were infected with a unique TTV genomic group; 38% (19/50) were coinfected with TTV from 2 (28%, 14/50) or 3 (10%, 5/50) genomic groups. Conclusions : Blood products are frequently infected with TTV and all five known genomic groups are detected in Korea. (Korean J Lab Med 2005; 25: 116-22) Key Words : Transfusion-transmitted virus (TTV), Genomic group, Polymerase chain reaction (PCR), Blood product 서 1997년 Nishizawa 등이 수혈 후 간염이 발생한 환자에서 처음으 로 transfusion transmitted virus (TTV)를 발견하였다[1]. TTV 는 무외피 단일가닥 DNA 바이러스로 Circroviridae에 속하는 것 으로 여겨지고 있으나 아직 명확하게 분류되지 않았다[2-4]. 일부 연구에서 TTV가 건강인에서도 비교적 높은 비율로 검출되어 접 수 : 2004년 10월 21일 접수번호 : KJLM1805 수정본접수 : 2005년 1월 20일 교신저자: 한태희 우 139-707 서울시 노원구 상계7동 761-1 상계백병원 진단검사의학과 전화: 02-950-1228, Fax: 02-950-1244 E-mail: kscosby@sanggyepaik.ac.kr 론 TTV와 간질환이 관련이 없다는 의견을 제기하고 있다[5-10]. 국 내의 건강인(혹은 헌혈자)을 대상으로 한 연구에서도 TTV는 높은 감염률을 보였다[11, 12]. 현재 TTV에 대한 많은 연구들이 이루 어져 역학(주로 분자역학), 전파경로 등에 대해 많은 사실들이 밝 혀졌다. 하지만 TTV 배양이 잘되는 적절한 세포가 없어 TTV의 분리가 어렵고 TTV의 생물학적 측면과 병인론 연구에도 제한점 이 있다[13]. TTV는 DNA 바이러스이나 유전적으로 매우 다양 하여 현재 30개 이상의 유전자형이 발견되었으며 크게 다섯 개의 유전자그룹(genomic group 1-5)으로 나뉘어 진다[13-15]. 그룹 1은 6개의 유전자형이 있고 TA278이 대표적인 유전자형이며 그룹 2는 5개의 유전자형이 있고 PMV가 대표적 유전자형이다[16]. 그 룹 3에는 11개의 유전자형이 있고 SANBAN, TUS01, TYM9 등 116
헌혈혈액에서 Transfusion-transmitted virus 유전자그룹의 분포 117 이 알려져 있다[17]. 그룹 4에는 9개, 그룹 5에는 4개의 유전자형 이 알려져 있다[14]. 현재에도 TTV의 새로운 유전자형이 계속 발견되고 있다[14, 18]. 국내에서도 헌혈자와 간염환자를 대상으로 TTV의 유전자형에 대한 연구가 이루어지긴 하였으나 TTV 그 룹 1의 일부 유전자형만이 분석되었다[7]. TTV는 유전자 변이가 심하여 유전자의 일부분만을 분석하여 유전자형을 결정하는 방법이 신뢰성이 없다는 연구 보고들이 있다[13, 19, 20]. 하지만 정확한 유전자형 분석을 위해 TTV의 전체 혹은 여러 유전자를 분석하는 것은 많은 시간과 노력이 필요하다. 이런 문제점을 극복하기 위해 최근 Devalle과 Maggi 등이 유전자그룹 특이 시발체를 이용하여 TTV를 우선 유전자그룹으로 나눈 후 유전자형을 확인하는 방법 을 개발하였다[15, 21]. 이에 본 연구에서는 이들이 개발한 TTV 유전자그룹 특이 시발체를 이용하여 혈액제제를 대상으로 TTV 유 전자그룹의 분포를 분석하여 국내에서 TTV 유전자형 연구의 토 대를 마련하고자 하였다. 대상 및 방법 1. 대상 2002년 3월부터 2003년 2월까지 적십자혈액원에서 본원에 공 급된 제조 3일 이내의 전혈, 농축적혈구 각각 25 단위를 무작위로 선발하여 혈액백 분절에서 혈장을 채취하였다. 혈장은 DNA 추출 전까지 -70 에서 냉동 보관하였다. 2. 방법 1) 검체에서 DNA의 추출 혈장 200 L로부터 QIAamp DNA Blood Mini Kit (QIA- GEN GmbH, Hilden, Germany)를 이용하여 DNA를 추출하였 다. 추출된 DNA는 중합효소연쇄반응 검사 전까지 -70 냉동 보 관하였다. 2) TTV 검출을 위한 중합효소연쇄반응 Takahashi 등[22]이 고안한 TTV 검출용 시발체 A (T801, T935)와 시발체 B (T801, T836, T855, T888)를 이용하여 중합 효소연쇄반응을 실시하였다(Table 1). PCR 반응액 구성은 Accu- Power PCR PreMix (Bioneer, Daejeon, Korea)에 DNA와 시 발체 각각 20 pmol씩을 넣어 총량 20 L로 맞추었다. 시발체 A 를 이용한 경우 94 40초 변성반응, 60 40초 결합반응, 72 50초 연장반응을 55회 실시하여 199 bp의 DNA를 증폭하였다. 시발체 B를 이용한 경우 1차로 T801과 T836을 시발체로 1.2 kb 의 DNA를 증폭한 후 증폭산물 2 L를 이용하여 시발체 T855 Table 1. Universal and group-specific primers for TTV amplification Primer name Sequence (5-3 ) Localization Orientation Universal primers A primers T801 ( GCTACGTCACTAACCACGTG 6-25 (TA2785) sense T935 ( CTBCGGTGTGTAAACTCACC 185-204 (TA2785) antisense B primers T801 (1st) GCTACGTCACTAACCACGTG 6-25 (TA2785) sense T836 (1st) AKGCCTGGGTGTATGCTAGG 1144-1263 (TA2785) antisense T855 (2nd) GTCAAGGGGCAATTCGGGCTC 204-224 (TA2785) sense T888 (2nd) CGTCTGAGTGTGTGGCATAG 894-913 (TA2785) antisense Group specific primers Group 1 TTV3 (1st) CACACAGAIATTACAGCCCC 1126-1145 (AB017610) sense TTV2 (1st) CAGTTAGTGGTGAGCCGAA 1348-1366 (AB017610) antisense TTV5 (2nd) ACAGCCCCCAGCATACATCC 1138-1157 (AB017610) sense TTV6 (2nd) GTGGTGGCATAGACCGTTAG 1309-1328 (AB017610) antisense Group 2 PMV1 (1st) ACAIAGATGTCCCTGGAGTAGA 1018-1039 (AF261761) sense PMV2 (1st) AGAGGCACTGATGTTTACTGGC 1327-1348 (AF261761) antisense PMV3 (2nd) TGGAGTAGATCGAACGAAGA 1031-1050 (AF261761) sense PMV4 (2nd) CTGTAAATAGAGTGGGGG 1271-1289 (AF261761) antisense Group 3 SS1 (1st, 2nd) GACCARCTAGACCTGGCCAGATA 1061-1083 (AB028669) sense SS2 (1st) GTTTGTGGTGAGCMGAAYGG 1382-1401 (AB028669) antisense SS4 (2nd) GTACCASTKGTCTWCAAA 1298-1289 (AB028669) antisense Group 4 PY1 (1st) CCATTTTGTRCAGCCCGCCA 103-122 (AB038624) sense PY2 (1st) ACGGCATGACTTTGTGTYCTG 389-409 (AB038624) antisense PY3 (2nd) AGCCCGCCAATTTCTGTTC 114-132 (AB038624) sense PY4 (2nd) GGAGAACAGAGCRRGGGAAT 367-386 (AB038624) antisense Group 5 T1S (1st) CCGDAGGTGAGUTTACACACCG 180-201 (TA278) sense T1A (1st) AGGCCYTATGGCGAAGTCTGG 3372-3352 (TA278) antisense T2S (2nd) AGTCAAGGGGCAATTCGGGC 203-222 (CT39F) sense T2G5A (2nd) TCYGCGAACTCKGCCACGGGT 678-658 (CT39F) antisense Abbreviations: I, inosine; B, G or T or C; K, G or T; M, A or C; S, G or C; W, A or T; Y, C or T.
118 정주영 성희경 한태희 와 T888로 710 bp의 DNA를 증폭하였다. 증폭기는 Gene Amp PCR System 9600 (Perkin-Elmer, Branchburg, NJ, USA)을 사용하였고 증폭된 DNA 산물은 2% agarose gel에서 100 V, 30분 동안 전기영동 후 ethidium bromide (0.5 g/ml)로 염색 하여 판독 후 사진 촬영하였다(Fig. 1). 초 연장반응을 35회 실시하였고 2차에서 94 40초 변성반응, 60 40초 결합반응, 72 1분 연장반응을 35회 실시하여 485 bp 의 산물을 증폭하였다(Fig. 2). PCR 반응액의 구성, 사용한 핵 산증폭기, 증폭된 DNA산물의 전기영동 등은 TTV 검출을 위한 중합효소 연쇄반응과 동일하였다. 3) TTV 유전자그룹 1-5 특이 중합효소연쇄반응(TTV genomic group 1-5 specific PCR) 그룹 1-4에 특이적인 중합효소연쇄반응은 Maggi 등[21]이 고 안한 시발체를 그룹 5는 Devalle 등[15]이 고안한 시발체를 사용 하였다(Table 1). 그룹 1-4는 1차로 94 40초 변성반응, 60 40초 결합반응, 72 50초 연장반응을 35회 실시하였고 2차로 동 일한 온도 조건으로 35회 실시하여 그룹 1-4 각각 191 bp, 259 bp, 255 bp, 그리고 273 bp의 산물을 증폭하였다(Fig. 2). 그룹 5는 1차에서 94 40초 변성반응, 60 40초 결합반응, 72 3분 30 4) 통계 통계프로그램은 SPSS for Window 10.0 (SPSS Inc, Chicago, IL, USA)를 사용하였다. Fisher's exact test, chi-square test를 이용하여 TTV 감염과 연령의 상관관계, TTV 유전자그 룹 간의 상관관계, 그리고 성별과 TTV 유전자그룹 간의 상관관 계를 검증하였다. 얼마나 많은 TTV 유전자그룹에 감염되었는지 와 연령 혹은 성별의 상관관계를 검증하기 위해 score test for trend를 사용하였다. P 값이 0.05 미만이면 통계적으로 유의한 것으로 판단하였다. 200 bp 199 bp 700 bp 710 bp 1 2 3 4 5 A 1 2 3 4 5 B Fig. 1. TTV polymerase chain reaction with A and B primers. Lane 1, DNA ladder marker; lane 2, positive control; lane 3, negative control; lane 4-5, test samples. Group 1 Group 2 Group 3 191 bp 259 bp 255 bp Group 4 Group 5 273 bp 485 bp Fig. 2. TTV genomic group 1-5 specific polymerase chain reactions. Lane 1, DNA ladder marker; lane 2, positive control; lane 3, negative control; lane 4-6, test samples.
헌혈혈액에서 Transfusion-transmitted virus 유전자그룹의 분포 119 결 과 1. 혈액제제 헌혈자의 특성 혈액제제의 헌혈자는 남성 35명, 여성 15명이었다. 전체 연령 (median±sd)은 25.0±6.9 (18-52세)이었다 여성의 연령은 24.3±3.9 (20-32세), 남성의 연령은 25.3±7.9 (18-52세)였다. 2. TTV DNA 검출 (5/50)였고 4개 이상의 유전자그룹에 검출된 경우는 없었다(Table 2). 동시에 감염된 경우 그룹 3과 4에 동시에 감염된 혈액제제가 20% (10/50)로 제일 많았다. 감염된 TTV의 유전자그룹과 성별 혹은 나이와 상관관계가 없 었으며 감염된 유전자그룹들 간에 서로 유의한 상관관계가 없었 다. 다만 그룹 1, 3, 4는 여러 개의 유전자그룹에 동시에 감염된 검체에서 보다 통계적으로 유의하게 많이 검출되는 경향을 보였 다(Table 3). 동시에 감염된 그룹의 수와 연령, 성별은 통계적으 로 유의한 관계가 없었다(Table 4). 시발체 A를 사용한 경우 76% (38/50)에서 TTV를 검출하였 고 시발체 B를 이용한 경우 58% (29/50)에서 TTV DNA를 검 출하였다. A혹은 B 시발체에서 하나라도 TTV DNA가 검출된 경우는 88% (44/50)였다. TTV의 5 -UTR을 표적으로 한 universal primer (시발체 A, 시발체 B)를 이용하여 TTV DNA가 검출되지 않았던 경우에서 유전자그룹 특이 시발체를 사용하여 TTV가 검출된 경우가 8% (4/50)로 TTV는 96% (48/50)에 서 검출되었다(Table 2), 3. TTV 유전자그룹(genomic groups) 그룹 1은 20% (10/50), 그룹 2는 2% (1/50), 그룹 3은 52% (26/50), 그룹 4는 46% (23/50), 그룹 5는 10% (5/50) 검출되 었다. Universal primer를 이용하여 DNA가 검출되었으나 5종류 의 유전자그룹 특이 시발체를 모두 사용하여도 증폭산물이 나오 지 않는 경우는 14% (7/50)였다(Table 2). 한 개의 유전자그룹 에 감염된 경우는 44% (22/50), 두 개의 유전자그룹에 감염된 경우는 28% (14/50), 세 개의 유전자그룹에 감염된 경우는 10% Table 2. Single and mixed infections with transfusion transmitted viruses from different genomic groups in blood products Genomic groups Blood products numbers (%) Negative with PCR systems using universal primers (A or B primers) 6 (12.0) Group 2 1 (2.0) Group 4 1 (2.0) Group 3, 4 1 (2.0) Group 3, 5 1 (2.0) None 2 (4.0) Positive with PCR systems using universal primers (A or B primers) 44 (88.0) Group 1 2 (4.0) Group 3 9 (18.0) Group 4 6 (12.0) Group 5 3 (6.0) Group 1, 3 1 (2.0) Group 1, 4 1 (2.0) Group 1, 5 1 (2.0) Group 3. 4 9 (18.0) Group 1, 3, 4 5 (10.0) None 7 (14.0) 고 TTV 감염은 전 세계적이며 사용한 시발체와 지역에 따라 TTV 감염률에 차이가 있다[7, 8, 13, 23]. TTV 감염은 영아기부터 발생하여 나이에 따라 감염이 증가하여 청소년기에 성인 수준의 감염률에 도달한다[13, 20]. TTV 감염률은 성별차이가 없으며 다회수혈자, 혈우병 환자, 혈액투석환자, 마약중독자 및 HIV감염 환자에서 감염률이 높다[13]. 5 -UTR이 표적인 universal primer 를 이용한 경우 우리나라 0-9세 소아의 27%[24], 헌혈혈액의 84%[12]에서 TTV가 검출되었다. 이번 연구에서 5 -UTR을 표 적으로 두 종류의 시발체를 이용하여 혈액제제의 88%에서 TTV 가 검출되었고 유전자그룹에 특이적인 시발체를 더불어 이용한 경우 혈액제제의 96%에서 TTV가 검출되었다(Table 2). 이번 연구에서 유전자그룹 특이 시발체로 TTV가 검출되나 universal primer (시발체 A, 시발체 B)로 증폭되지 않은 4예(8%)가 있 었다. 이는 Takashi 등[22]이 개발한 시발체 A (T801/935)와 시발체 B (T801, T836, T855, T888)가 모든 TTV를 검출하지 Table 3. Correlation of the numbers of coinfected TTV groups and genomic groups Numbers of coinfected TTV genomic groups Group 1* Group 2 찰 Group 3* Group 4* Group 5 0 9 0 9 0 9 0 9 0 9 0 1 20 2 21 1 13 9 15 7 19 3 2 11 3 14 0 2 12 3 11 12 2 3 0 5 5 0 0 5 0 5 5 0 *significant in score test for trend (P<0.05). Table 4. Correlation of the numbers of coinfected TTV groups and sex (or age) Numbers of coinfected TTV genomic groups Female Sex Male 18-20 Age 21-30 31-40 0 2 7 1 7 0 0 1 6 18 0 20 1 1 2 6 8 1 11 1 2 3 1 4 0 3 1 1 41-
120 정주영 성희경 한태희 못하기 때문으로 판단된다. Devalle 등은 분리된 TTV 59주(strain) 의 염기서열을 분석하여 T935의 경우 모든 TTV 주와 동일한 염기서열을 보였으나 T801의 경우 염기서열이 일치하지 않은 TTV 주가 있는 것을 발견하여 universal primer로 모든 TTV 가 증폭되지 않을 수 있다고 보고하였다[15]. TTV는 DNA 바이러스지만 유전적 다양성이 높아 유전자형 분류에 어려움을 겪어 왔으나 1999년 Okamoto 등[25]이 그 동안 밝혀진 TTV 염기서열을 계통발생학적으로 분석하여 TTV를 4 개의 그룹으로 분류하였고 2002년 Peng 등[14]이 그룹 5를 추가 하여 TTV 유전자형 분류의 기준으로 제시하였다. TTV 유전자 그룹 각각에는 4-11개의 유전자형이 포함되어 있다. 기존의 TTV 유전자형 확인에 가장 많이 이용되는 N22 혹은 UTR에서 계통 발생학적 분류를 시행할 경우 동일한 유전자그룹 내에서는 다른 유전자형을 잘 구별할 수 있으나 다른 유전자그룹에 속한 유전자 형은 잘 구별되지 않는다는 보고들이 있어[19, 26] TTV 유전자 형을 연구할 때 TTV를 유전자그룹으로 분류하여 분석할 필요가 있다는 의견이 제시되었다[15]. 이 분류체계(5개의 유전자그룹) 를 이용한 연구는 많이 이루어지지 않아 전 세계적으로 TTV 유 전자그룹의 분포 양상에 대한 정보는 아직은 충분하지 못하다[15, 21]. 이번 연구에 사용된 혈액제제에서 TTV 유전자그룹이 그룹 3 (52%), 그룹 4 (46%), 그룹 1 (20%), 그룹 5 (10%), 그룹 2 (2%)의 빈도로 검출되었다. 그룹 2의 감염률은 2%로 다른 지 역의 연구[15, 21]와 마찬가지로 매우 낮은 비율로 검출되었다. 하지만 나머지 그룹의 분포는 타 지역의 연구와 명백한 차이를 보였다. 브라질 헌혈자에서 그룹별 감염 빈도는 그룹 5, 3, 4, 1, 2 (25%, 25%, 8%, 0%)의 순서였고[15], 호흡기질환이 있는 소아를 대상으로 이탈리아에서 이루어진 연구에서는 감염빈도는 그룹 1, 3, 4, 2 (58%, 25%, 13%, 0%)의 순서였다[21]. 일본 과 중국에서는 유전자그룹에 대한 연구가 별로 없으나 소아에서 분리된 TTV를 대상으로 그룹 4와 5에 대해서 연구하여 감염률 이 각각 53%, 15%라고 보고한 연구가 있었다[14]. 이번 연구에서 universal primer로 TTV가 검출되었으나 유전 자그룹 특이시발체로 TTV가 증폭되지 않은 경우가 14% (7/50) 였는데 새로운 유전자그룹이거나 알려진 유전자그룹에 속하는 새 로운 유전자형의 TTV가 존재할 가능성이 있어 추후 연구가 필요 할 것으로 판단하였다. 이탈리아 10% (2/18), 브라질 24% (17/ 72)에서 이런 경우가 있었고[15, 21] 브라질에서는 이들 중 기존 그룹으로 분류되지 않는 TTV가 4예 확인되었다[21]. 연령, 성별, 감염경로에 따라 어떤 TTV 유전자형(혹은 유전 자그룹)의 감염률이 높다는 연구는 아직 충분히 이루어지지는 않 았다[13, 15]. 브라질에서 학동기전 아동, 청소년, 성인의 TTV 다발감염(multiple infection) 비율이 67%, 94%, 92%로 학동기 전 아동과 청소년기에 유의한 차이가 있었으나[20] 헌혈자에서 성별, 연령에 따라 감염된 TTV 유전자그룹의 종류 그리고 수 (number)는 차이가 없었다[15]. 이번 연구에서도 성별 혹은 연 령(20-30대와 40대 이후)에 따라 감염된 TTV 유전자그룹의 종 류 혹은 수의 차이는 발견할 수 없었다. 한 사람이 몇 가지 유전자형(혹은 유전자그룹)의 TTV 바이 러스에 동시에 감염된 사례는 많이 보고 되었다[13, 20, 25, 26]. 동시에 여러 유전자형에 감염되는 경우 어떤 임상적 의의가 있는 지에 대한 연구는 앞으로 이루어져야 하나 건강한 인구집단에서 여러 유전자형에 동시에 감염된 비율이 매우 높아(60-90%) 여 러 유전자형에 감염된 것이 감염자의 건강 혹은 질환과 관련이 없을 것이라는 의견이 제시되었다[13, 20, 26]. 국내에서는 여러 TTV 유전자형에 동시에 감염된 사례에 대한 보고가 없었는데 이번 연구에서 두 개 이상의 TTV 유전자그룹에 감염된 혈액제 제는 38% (19/50)로 밝혀졌다. 여러 유전자그룹에 동시감염된 혈액제제가 많아 TTV의 동시감염이 헌혈자의 건강상태와 관련 이 없을 가능성이 높다고 판단된다. 두 개 이상의 유전자그룹에 감염된 혈액제제에서 감염된 TTV 유전자그룹 간 유의한 상관관 계가 없었는데 이는 한 유전자형에 감염되어도 다른 유전자형에 쉽게 감염이 되는 TTV의 특성[13] 때문에 감염이 무작위로 일 어나는 것으로 판단된다. 두 개 이상의 유전자그룹에 감염된 혈 액제제에서 그룹 1, 3, 4가 많이 검출되었는데 이들 3개 그룹의 빈도가 높기 때문에 발생한 현상으로 여겨진다. 브라질의 경우 헌혈자의 21%가 두 개 이상의 TTV 유전자그룹에 감염되었고 발생빈도가 높은 그룹 5와 그룹 3이 동시에 감염된 사례가 제일 많았다[15]. 이번 연구를 통해 국내 혈액제제의 TTV 감염률이 매우 높은 것을 다시 확인할 수 있었고 다양한 TTV 유전자그룹에 혈액제제 가 감염되어있음을 확인하였다. 혈액제제에 감염된 TTV의 유전 자그룹 분포도 알 수 있었는데 한국에서 혈액제제에 감염된 TTV 유전자그룹의 분포는 타 지역[15, 21]과 차이를 보여 TTV 감염 의 지역별 차이를 확인할 수 있었다. 요 약 배경 : Transfusion-transmitted virus (TTV)는 무외피 단일 가닥 DNA 바이러스로 수혈을 통해 전파될 수 있다. 국내에서 헌 혈자와 혈액제제에서 TTV 감염률이 조사된 적이 있으나 혈액제 제에 감염된 TTV의 유전자 그룹(1-5)에 대한 연구가 이루어지 지 않아 저자들은 그 분포를 조사하고자 하였다. 방법 : 전혈, 농축적혈구 각각 25단위의 혈액백 분절에서 혈장 을 채취하여 DNA를 추출한 후 TTV에 대한 두 종류의 시발체 (A, B)와 유전자그룹 1-5 특이 시발체를 이용하여 중합효소연쇄 반응을 시행하여 유전자그룹을 분석하였다. 결과 : 모든 시발체를 이용하여 혈액제제의 96% (48/50)에서 TTV가 검출되었다. 혈액제제에 감염된 TTV의 유전자그룹은 그룹 3 (52%), 그룹 4 (46%), 그룹 1 (20%), 그룹 5 (10%), 그룹 2 (2%)였다. 혈액제제의 14% (7/50)에서 TTV가 시발체 A 혹은 B 검출되었으나 유전자그룹 특이 시발체로는 증폭되지
헌혈혈액에서 Transfusion-transmitted virus 유전자그룹의 분포 121 않았다. 한 개의 유전자그룹에 감염된 경우는 44% (22/50), 두 개의 유전자그룹에 감염된 경우는 28% (14/50), 세 개의 유전자 그룹에 감염된 경우는 10% (5/50)이고 네 개 이상의 유전자그 룹에 감염된 경우는 없었다. 결론 : 국내에서는 대부분의 혈액제제에서 TTV가 검출되었으 며 그룹 1에서 그룹 5까지의 모든 유전자그룹이 검출되었다. 감사의 글 본 연구에 많은 도움을 준 인제대학교 상계백병원 중앙연구실 에 감사드립니다. 참고문헌 1. Nishizawa T, Okamoto H, Konishi K, Yoshizawa H, Miyakawa Y, Mayumi M. A novel DNA virus (TTV) associated with elevated transaminase levels in posttransfusion hepatitis of unknown etiology. Biochem Biophys Res Commun 1997; 241: 92-7. 2. Hino S. TTV, a new human virus with single stranded circular DNA genome. Rev Med Virol 2002; 12: 151-8. 3. Mushahwar IK, Erker JC, Muerhoff AS, Leary TP, Simons JN, Birkenmeyer LG, et al. Molecular and biophysical characterization of TT virus: evidence for a new virus family infecting humans. Proc Natl Acad Sci USA 1999; 96: 3177-82. 4. Takahashi K, Hijikata M, Samokhvalov EI, Mishiro S. Full or near full length nucleotide sequences of TT virus variants (Types SAN- BAN and YONBAN) and the TT virus-like mini virus. Intervirology 2000; 43: 119-23. 5. Abe K, Inami T, Asano K, Miyoshi C, Masaki N, Hayashi S, et al. TT virus infection is widespread in the general populations from different geographic regions. J Clin Microbiol 1999; 37: 2703-5. 6. Huang LY, Oystein Jonassen T, Hungnes O, Grinde B. High prevalence of TT virus-related DNA (90%) and diverse viral genotypes in Norwegian blood donors. J Med Virol 2001; 64: 381-6. 7. Nakano T, Park YM, Mizokami M, Choi JY, Orito E, Ohno T, et al. TT virus infection among blood donors and patients with non-b, non-c liver diseases in Korea. J Hepatol 1999; 30: 389-93. 8. Jeon MJ, Shin JH, Suh SP, Lim YC, Ryang DW. TT virus and hepatitis G virus infections in Korean blood donors and patients with chronic liver disease. World J Gastroenterol 2003; 9: 741-4. 9. Niel C, de Oliveira JM, Ross RS, Gomes SA, Roggendorf M, Viazov S. High prevalence of TT virus infection in Brazilian blood donors. J Med Virol 1999; 57: 259-63. 10. Kato T, Mizokami M, Orito E, Nakano T, Tanaka Y, Ueda R, et al. High prevalance of TT virus infection in Japanese patients with liver diseases and in blood donors. J Hepatol 1999; 31: 221-7. 11. Park SH, Byun KS, Song JW, Yeon JE, Park CK, Lee CH. Transfusion-transmitted virus infection in Korean patients with acute and chronic liver disease of unknown etiology and healthy control: Influence of PCR primers on the detection of Transfusion-transmitted virus. Korean J Gastroenterol 2003; 41: 119-25. (박상훈, 변관수, 송진원, 연종은, 박충기, 이창홍. 한국인원인미상의급, 만성간질환환자와건강대 조군에서 Transfusion-transmitted Virus 감염률-PCR 시발체에따른 검출율의차이. 대한소화기학회지 2003; 41: 119-25.) 12. Chung JY, Han TH, Seong HK, Paik IK, Kim MJ. Transfusion-transmitted virus and TTV-like mini virus infection in blood products. Korean J Lab Med 2004; 24: 71-7. (정주영, 한태희, 성희경, 백인기, 김 문정. 헌혈혈액에서 Transfusion-transmitted virus (TTV)와 TTV-like mini virus (TLMV)의감염. 대한진단검사의학회지 2004; 24: 71-7.) 13. Bendinelli M, Pistello M, Maggi F, Fornai C, Freer G, Vatteroni ML. Molecular properties, biology, and clinical implications of TT virus, a recently identified widespread infectious agent of humans. Clin Microbiol Rev 2001; 14: 98-113. 14. Peng YH, Nishizawa T, Takahashi M, Ishikawa T, Yoshikawa A, Okamoto H. Analysis of the entire genomes of thirteen TT virus variants classifiable into the fourth and fifth genetic groups, isolated from viremic infants. Arch Virol 2002; 147: 21-41. 15. Devalle S and Niel C. Distribution of TT virus genomic groups 1-5 in Brazilian blood donors, HBV carriers, and HIV-1-infected patients. J Med Virol 2004; 72: 166-73. 16. Hallett RL, Clewley JP, Bobet F, McKiernan PJ, Teo CG. Characterization of a highly divergent TT virus genome. J Gen Virol 2000; 81: 2273-9. 17. Okamoto H, Nishizawa T, Ukita M, Takahashi M, Fukuda M, Iizuka H, et al. The entire nucleotide sequence of a TT virus isolate from the United States (TUS01): comparison with reported isolates and phylogenetic analysis. Virology 1999; 259: 437-48. 18. Liu Z, Luo K, Zheng R, Hu J, He H. Novel TTV variants isolated in an epidemic of hepatitis of unknown etiology. J Med Virol 2002; 67: 113-7. 19. Lemey P, Salemi M, Bassit L, Vandamme AM. Phylogenetic classification of TT virus groups based on the N22 region is unreliable. Virus Res 2002; 85: 47-59. 20. Saback FL, Gomes SA, Niel C. High frequency of mixed TT virus infections in healthy adults and children detected by a simplified heteroduplex mobility assay. J Virol Methods 2002; 101: 117-25. 21. Maggi F, Pifferi M, Fornai C, Andreoli E, Tempestini E, Vatteroni M, et al. TT virus in the nasal secretions of children with acute respiratory diseases: relations to viremia and disease severity. J Virol 2003; 77: 2418-25.
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