약학회지제 9 권제 호 ~ () Yakhak Heji Vl. 9,N. 稱學舍확 염산과트립신으로처리한노니 (A/rfnda citriflia) 추출물의항산화효과 최혜영 최병철 심상수 # 중앙대학교약학대학 (Received August,; Revised Octber,) A n t i x id a n t E f f e c t s f N n i (M r in d a c itr if lia ) E x t r a c t s r e a te d w it h H a n d r y p s in H ye Yung hi, Byung hul hi and ang im # llege f Pharmacy, hung-ang University, Huksuk-dng, ngjak-gu, eul 6-76,Krea Abstract investigate bilgical activity f nni extracts treated with H and trypsin, we measured the antixidant activity thrugh vitr assay and cellular system. Bth water and lipid sluble fractin f nni extracts dse-dependently scavenged PPH radical. uperxide scavenging activity f lipid sluble fractin after treating H and trypsin was significantly mre ptent than thse f ther fractins in NB/xanthine xidase assay, which suggests that antixidant activity f nni extracts was increased by the treatment with H and trypsin. n antixidant assay using RBL H cells, water sluble fractin f nni extracts had little effect n silica-induced reactive xygen species generatin, whereas lipid sluble fractin inhibited in a dse dependent manner. n nn-treated nni extracts, effect f water sluble fractin n silica/u-induced lipid perxidatin was mre ptent than that f lipid sluble fractin. Hwever, the effects f nni extracts were reversed in nni extracts treated with H and trypsin. hese data suggest that water sluble substances may be cnverted int lipid sluble substances by the treatment with H and trypsin. Frm the abve results, it is suggested that lipid sluble fractin f nni extracts cntain antixidant used in vitr assay and RBL H cellular system. uch an effect f nni extracts may be increased by the treatment with H and trypsin. Keywrds nni, antixidant, RO, lipid perxidatin M rinda ayn//k(rubiaceae) 는열대성식물로서하와이나타 이티섬에서노니 (nni) 로불리고있으며, 지역에따라 indian mulberry, Ba i ian, nn, nnu, cheese fruit, nhau 로불리기 도한다. 노니는 년넘게폴리네시아인들의식량과민간요 법제로서시용되어왔는데지금까지노니는항균성, 항바이러 스성, 항균, 항암, 감기, 알레르기, 저혈압, 항염증, 면역성을높 이는데효력을가지고있는것으로알려져있다. ) 노니가함유하고있는주요구성성분을살펴보면 scpletin, ctanic acid, vitamin, terpenids, alkalids, anthraquinnes (nrdamnacanthal, mrindne, rubiadin, rubiadin- -methylether, anthraquinne glycside), (-sitsterl, cartene, vitamin A, flavne glycsides, linleic acid, alizarin, amin acids, acubin, # 본논문에관한문의는저자에게로 ( 전화 ) -8-6 ( 팩스 ) -86-78 (E-mail) simss@cau.ac.kr L-asperulside, capric acid, caprylic acid, urslic acid, rutin, 외에가칭 prxernine 들이있다.,) 한편노니잎으로부터새로운 flavnl 배당체로서 iridid glycside 를발견하였으며이물질은 muse epidermal B6 cell에서 AP- 활성과세포의변형을억제한다고보고하였다. 6) 노니의항암효과도근본적으로유리산소라디칼을제거하여지방과산화물의생성을억제하는것과연관성이있다.7 노니추출물이 in vitr assay 인 tetrazlium nitrblue assay 나 BAR (thibarbituric acid reagent substances) assay 에서 superxide anin의소거와 lipid perxidatin 을억제한다는결과가보고되었다.8 9) 한편노니추출물의항산화작용은 vitamin 보다.8 배,pycngenl 보다는.배, 포도씨분말보다는. 배강한항산화작용이있다는것이밝혀졌다. 사염화탄소에의한간세포의 lipid hyperxidatin 은노니주출물을 일간투여시사염화탄소투여 시간후지질과산화를 % 감소시켰다.9 ) 노니에함유된성분중가칭 prxernine 은 Heinicke가처음으
^니 추출물의 항산화 효과 로 xernine system을 도입하면서 나온 용어이다. prxernine 로 간주하며 실험하였다. 은 xernine의 전구물질로서 생체내에 존재하는 prxernidase 라는 효소에 의해 생리활성이 강한 alkalid로 전환되는 물질을 세포 배양 지칭한다.u) Heinicke의 가설에 따르면 xernine은 효소나 수용 RBL H(rat basphilic leukemia) 세포는 % fetal bvine 체 신호전달계에 관여하는 단백질의 분자 구조를 변형시켜 다 serum 과 양한 생리활성을 일으키는 물질로 설명하였다. 이러한 가설은 호 ulbecc's mdified Eagle's medium(mem) 용액으로 7 L penicilliivsfreptmysinloo U/ 나 g/m/) 을 함유한 밀을 주식으로 하는 북유럽 사 람들이 대장암미나 직장임" 발병율 유지되는 % 배양기에서 배양하였다. Histamine을 유리하 이 다른 유럽 사람에 비해 적게 발병되는 원인이 바로 호밀에 있 는 비만 세포인 RBL H 세포틀 이용하여 superxide 생성 세 는 물질이 인체내 소화과정에서 항암활성이 강한 물질로 전환되 포내 H 생성, 세포내 hydrperxide 생성 및 지질과산화를 면서 암 발생율을 감소시킨다는 설음 뒷받침하고 있다. 위와 같 측정하였다. 이 노니 추출액이 다양한 생리활성을 나타내고 있지만 작용기전 은 아직 잘 알려져 있지 않은 상태이다. 지금까지 노니 추출물이 나타내는 생리활성 기전을 살펴보면 대표적인 작용으로 항산화 P P H 라디칼 소거 정량 96 well plate에 에탄올에 녹인. mm PPH 용액 8 나와 작용을 볼 수 있다. 본 연구는 사람미 노니를 복용시 소화기계에 각 농도별로 조제한 노니 추출액 서 소화되는 과정과 유사한 처리를 하였을 때 in vitr assay와 간 배양한 우 FL6 spectrflurmeter(bi-ek, Winski, cell system에서 항산화 작용의 변화를 관찰하였다. UA )를 이용하여 7nm 에서 흡광도를 측정하였다. 실험 를 가하고 7 에서 분 NB/XO(superxide 소거) 정량 방법.6 mm hypxanthine, mm EA,. mm NB 를 함유하 재료 는 mm ptassium phsphate buffer(ph 7.)!a/에 노니 노니 열매를 건조시킨 분말은 Hung hanh.(viet Nam) 주출액 i/ir 가하여 잘 혼합하였다. 반응은 xanthine xidase 로부터 구입하였다. PPH(l-diphenyl--picrylhydrazyl), xanthine ( U/m/) OOmZ를 가하면서 시작하였다. 반응 혼합액을 7 에 xidase(x), NB(nitrblue tetrazlium chlride), hypxan- 서 분간 배양한 후 96 well plate에 yd 씩 소분하고 FL6 thine, -thibarbituric acid, malnyldialdehyde, hexadecyltri- spectrflurmeter를 이용하여 6nm 에서 롭광도를 즉정하 methyl 였다.) ammnium brmide(hab),,',,'-tetramethyl benzidine(mb), N,N-dimethylfrmamide (MF)들' igma사 로부터 구입하였으며, dihydrrhdamine, dihydrethidium, \- 세포내 superxide 와 H 및 hydrperxide 생성 측정 dichlrflurescin diacetate(f-a) 는 Mlecular Prbe. 세포내에서 생성되는 superxide와 H 및 hydrperxide를 에서 구입하였다. RBL H 세포는 서울대학교 세포주 은행으 측정하기 위하여 각각 dihydrethidium )과 F-A) 및 로부터 구입하였다. H R )를 이용하였다. RBL H 세포를 m/의 Krebs buffer 용액 (mm: Nal 7 K.7, NaH P., M gl., 노니 추출액 HEPE [ph 7.] al.8 glucse )에 분산시킨 후 노니 열매를 건조시켜 얻은 분말( g)을 증류수 m/에 분 dihydrethidium 과 jim F-A 및 \xm H R 를 각 산시킨 후 N Hl m / 가하여 상온에서 시간 배잉하고 N 각 가하고 시간 빛을 차단한 곳에서 배양하였다. Krebs 용액으 NaOH lm /를 가하여 중화시켰다. rypsin(l: ; mg/ 로 한번 세척한 후 cells/m/로 분주하고 노니추출액을 전처 m/>을 가하여 7 ( 에서 시간 방치하였다. methanl m/를 치 한 후 silica m g/m /i 가히여 간 superxide와 H 생 첨가하여 최종 8% methanl 용액에서 하루 밤 진탕하고, 상층 성을 유도하였다. 원심분리 후 cell pellet을 p/의 Krebs 용 액을 분리한 후 다시 8% methanl m/를 가하여 시간 진 액에 분산시켰다. uperxide는 Ex: 8 nm/em; 86nm 에서 탕한 투 상증액을 분리하였다. 분리한 상증액을 rtary vaccum H 는 Ex: 8 nm/em; nm 에서 hydrperxide는 Ex: evapratr에서 감압 농축한 후 freeze-dryer로 동결 건조하여 분 88 nm/em; nm 에서 형광을 측정하였다.) 말을 얻었다. 산처리와 trypsin 처치를 하지 않은 군을 대조군으 로 삼아 상기와 같은 절차를 거쳐 분말을 얻었다. 동결 건조한 지질과산화 측정 분말을 증류수에 녹여 수용성 분획을 얻었으며, 증류수에 녹지 세포막의 지질과산화를 즉정하기 위하여 thibarbituric acid 않은 침전물은 다시 건조시킨 후 MO 에 녹여 지용성 분획으 reactive substances(bar)의 형광을 이용하였다. 노니 주줄물 Vl. 9 N.
최혜영 최병철 심ᄉ수 을 처리한 R B L H 세포를. m M 를 함유한 PB buffer 실험결고ᅡ 및 고찰 로 세척한 후 snicatin하고 % trichlracetic acid를 가하여 최종 % 농도로 조절하였다. 동량의.% -thibarbituric 노니 추출물의 항산화 작용 acid(in % acetic acid)를 첨가하여 9에서 min 배양하였 노니 추출물의 항산화 작용을 확인하기 위하여 PPH 라디칼 다. 원심분리 후 p/를 96 well plate에 옮기고 Ex: 8 nm, 소거반응과 xanthine xidase에 의한 superxide의 소거 반응을 Em: nm 에서 형광 측정하였다. 표준물질로서는 malnyldial- 관찰하였다. P P H 라디칼 소거반응에 있어서 노니의 수용성 분 dehyde(l,,,-tetraethxyprpane, igma)를 사용하였다.6) 조 획과 지용성 분획 모두 농도 의존적으로 라디칼을 소거하였다. 직내 lipid perxidatin은 균질액을 이용하여 상기와 같은 방법 양성 대조군으로 사용한 ascrbic acid im은 78%의 라디칼 소거 반응을 보였지만 노니의 수용성 분획과 지용성 분획 으로 측정하였다. m /은 각각 %, %의 소거 반응을 나타냈다(Fig. ) 한편 산 자료분석 및 통계적 검정 과 trypsin을 처치한 노니 추출물은 산과 trypsin 을 처치하지 않 실험 결과는 평균土표준편차로 표기하였으며, 실험 성적은 un 은 추출물과 유사한 라디칼 소거반응을 보였다. 그러나 통계적 paired tudent's t-test로 검정하였고 P 값이 % 미만일 때 통 으로 유의하지는 않지만 수용성 분획에서는 산과 trypsin 을 처리 계적으로 유의하다고 간주하였다. 한 노니 추출물이 라디칼 소거 반응이 약하게 나타났으며, 지용 NONE B H + rypsin NONE [ '^ X j H + rypsin W a t e r l u b l e F r a c t i n 8 / 9 ) U U9 -s u z Water lubl ) 6? 8 O) 6 느 H da L - Lipid luble Fractin L i p i d l u b l e F r a c t i n 6 工 n p<aclns - ) 8 - : _x ᄀ 6 a Q a. 8 lejpeh a: {%)ualaue u! Q 9 u {%) a ) ) A A N n i E x tr a c ts ( a g /m l) Nni Extracts (jag/ml) F. ig -Antixidant effect f nni extracts in the PPH assay. A slutin f 8 \ \ f (im PPH slutin in ethanl was gently mixed with j/ f nni extracts fr min and the absrbance was measured at 7 nm. Results are means ± frm 6 separate experiments (: cntrl; A: ascrbic acid um). Fig. - Antixidant effects f nni extracts in NB/xanthine xidase assay. he scavenging ptential fr superxide radicals was analyzed via a hypxanthine/xanthine xidase generating system cupled with nitrblue tetrazlium. Results are means ± frm 6 separate experiments (: cntrl; A: allpurinl im). * ignificantly different frm nn-treated nni extracts (p<.).. Pharm. c. Krea
노니 추출물의 항^화 ^과 ilica 에 성 분획에서는 반대 현상이 나타났다. Xanthine xidase에 의한 superxide의 소거 반응세 있어서 수 용성과 지용성 노니 추출물은 ng/m / 농도에 서 각각 %와 % 라디칼 소거 활성을 보였다. 양성 대조군으로 사용한 allpurinh- lo p M 에서 % trypsin을 의한 세포내 superxide anin 생성에 미치는 영향 위 실험에서는 시험관에서 노니 추출물의 직접적인 항산화 활 성을 즉정하였다. 세포내에서 생성되는 superxide anin 생성을 H E tt 이용하여 측정하였다. ilica mg/m /은 R B L H 세 소거 활성을 보였다. 한편 산과 포에서 superxide 생성을.7배 증가시켰다. 수용성 노니 주출 처리한 노니 추출물은 수용성 분획은 별 다픈 차이가 물은 silica에 의한 세포내 superxide 생성에 별 디른 영향을 주 없었지만 지용성 분획은 통계적으로 유의하게 % 소거 활성을 지 않았다. 그러나 지용성 분획은 silica에 의한 세포내 superxide 나타냈다(Fig. ). 이러한 결과는 산과 효소를 처리한 노니 추출 의 생성 증가f t 6% 감소시켰다(Fig. ). 한편 산과 tiy p s in l 처 추 에서 항산화 직용기 강화되는 것을 시사히여 준다. P P H assay 리한 추출물과 처리하지 않은 추출물 사이에 있어서 유의한 차 와 NB/XO assay에서 각각 양성 대조물질으로 사용한 ascrbic 이는 없었다. 항산화 작용에 비하여 노니 추출물의 항산화 작용은 미 나보의 억 제 제로 알려 진 allpurinl acid (im 와 xanthine xidase 약한 짓으로 나타났다.> ilica 에 의한 세포내 H 생성에 미치는 영향 F-A 를 이용한 세포내 H 생성음 측정한 실험에 있어 서) silica mg/m /은 R B L H 세포에서 H 생성을.배 NONE H + rypsin W a t e r lu b le F r a c t i n w, H _ c u 工 lnll cl L i p i d lu b le F r a c t i n > - g c ) ) \ M L_ "g 아이u l au e xal d ns > / ) < Lipid luble Fractin i ^ O _ a a) N lubl / )u 9u ( _ Q. c ^ (c H + rypsin 6 ; l / u ) a c a xo 9 n n) X NONE O Nni Extracts (fig/ml) Fig. - Effects f nni extracts n silica-induced intracellular superxide anin generatin in RBL H mast cells. Results are means ± frm 6 separate experiments (: cntrl; : silica mg/m/). Vl. 9, N. Nni Extracts (jig/ml) Fig. - Effects f nni extracts n silica-induced intracellular H generatin in RBL H mast cells. Results are means ± frm 6 separate experiments (: cntrl; : silica mg/m/). * ignificantly different frm nn-treated nni extracts (p<.).
최혜영 최병철 심상수 증가시켰다. 수용성 노니 추출물은 u M 이하 농도에서는 silica 내 hydrperxide 생성에 별 다른 영향을 주지 않았다. 그러나 에 의한 세포내 H 생성에 별 다른 영향을 주지 않았지만 지용성 분획은 농도 의존적으로 silica에 의한 세포내 hydrperxide 농도에서 silica에 의한 H 생성을 7% 억제하였다. 지용 생성을 억제하였다(Fig. ). 한편 산과 trypsin 을 처리한 추출물 성 분획은 silica에 의한 세포내 H 생성을 농도 의존적으로 과 처리하지 않은 추출물 사이에 있어서 유의한 차이는 없었지 억제하였다(Fig. ). 한편 산과 trypsin 을 처리한 추출물과 처리 만 지용성 분획 (ig/m/에 있어서 산과 trypsin 을 처리한 분획 하지 않은 추출물 사이에 있어서 유의한 차이는 없었지만 지용 이 유의성 있게 더 많이 억제하였다. 이러한 결과를 종합하여 볼 성 분획에 있어서 산과 trypsin 을 처리한 분획이 더 많은 억제 때 산과 trypsin 을 처리하면 지용성 분획에서 세포내에서 항산화 경향을 나타냈다. 작용이 더 강한 물질이 많이 생성되는 것을 제시하여 준다. HM ilica 에 의한 세포내 hydrperxide 생성에 미치는 영향 HR를 이용한 세포내 hydrperxide 생성을 즉정한 실험에 R B L H 세포에서 uovsilica 에 의한 지질고)산화에 미치는 영향 서 silica mg/m /은 R B L H 세포에서 hydrperxide 생성 세포에서 생성되는 reactive xygen species들은 세포막이나 을.7배 증가시켰다. 수용성 노니 추출물은 silica에 의한 세포 세포내 소기관의 막을 산화시키게 되는데 지질과산화를 thibarbituric acid를 NONE /:選 ilica l m g W j H + rypsin 이용하여 생성된 BAR 를 측정하였다. 과 u n M 은 R B L H 세포에서 유의한 지질과산화를 유발하지 않지만 동시에 투여시 안정상태의 지질 과산화. mm에서. (im 로.배 증가시켰다. 수용성 노니 추출물에서 산과 trypsin 을 처리한 추출물보다 처리하지 않은 추 출물이 유의하게 억제하였으나, 지용성 분획에서는 수용성 분획 과 반대로 산과 trypsin 을 처리한 분획이 유의하게 더 많이 억제 하였다(Fig. 6). 이러한 결과는 산과 trypsin 처리시 지질과산화 물의 생성을 억제하는 물질이 수용성 분획에서 지용성 분획으로 전환되었다는 것을 시사하여 준다. 산과 trypsin 을' 처리한 노니 주출물과 처리하지 않은 대조물질 의 수^ 분획과 지용성 분획에 있어 구성 성분의 차이가 있는. * Lipid luble Fractin 모 (/ O "r ' 6. )u q p F> O a. (.8 - Q.. xoa AH n tr l Nne Al B A B + L Nni Extracts ( ig/ml) Fig. - Effects f nni extracts n silica-induced intracellular hydrperxide generatin in RBL H mast cells. Results are means ± frm 6 separate experiments (: cntrl; : silica mg/m/). * ignificantly different frm nn-treated nni extracts (p<.). Fig. 6 - Effects f nni extracts n uoysilica-induced lipid perxidatin in RBL H mast cells. Results are means ± frm separate experiments (: silica mg/ml; : u (M; A l: water sluble fractin f nn-treated nni extracts; A: lipid sluble fractin f nn-treated nni extracts; B l: water sluble fractin f Hl/trypsin-treated nni extracts; B: lipid sluble fractin f Hl/trypsintreated nni extracts. * ignificantly different frm nntreated nni extracts (p<.).. Pharm. c. Krea
^니 추출물의 항a 화 효과 지를 thin layer chrmatgraphy(l)를 한ᅳ결과 두 추출물사이 ) arr, M. E. Kltz,. and Bergern, M. : umadin resistance 에 있어서 특이한 spt의 차이나 density 차아를 발견하지 못했다 and the vitamin supplement "Nni". Am... Hematl. 77, (미발표 결과). 시험관 시험과 세포를 이용한 항산화 실험에서 산 과 trypsin을 처리한 노니의 추출물이 더 강한 항산화 작용을 나 나태고 있다. 이에 대한 기전은 이 실험의 결과만으로는 설명하 기가 어려운 상태이다. 이러한 현상은 배당체 형태가 가수분해되 거나 단백질 결합형보다는 유리형으로 전환될 가능성이 있으며 앞으로 단일 물질을 분리히는 실험윽 진행하면서 산과 효소 처리 에 의한 새로운 물질의 형성음 확인하는 것이 필요할 것이다. (). ) Wang, M. Kikuzaki, H., siszar, K. Byd,.. Maunakea, A., Fng,. E, Ghai, G., Rsen, R. X Nakatani, N. and H,.. : Nvel trisaccharide fatty acid ester identified frm the fruits f M rinda citriflia (Nni)./. Agric. Fd hem. 7 88 (999). 6) ang,., heng, X. Zhu, N., Wang, M. h,. W, tark, R. E., Badmaev, V Ghai, G., Rsen, R.. and H,.. : ridid glycsides frm the leaves f Mrinda citriflia.. N at. Prd. 6 799 (). 결 론 산과 trypsin을 처리한 노니 추출물의 생리활성 변화를 관찰하 기 위하여 in vitr assay와 cellular system 을 이용한 항산화 작 7) Bartsch, H. and Nair,. : New NA-based bimarkers fr xidative stress and cancer chempreventin studies. Eur.. ancer. 6, 9 (). 8) Auerbach, B.., Kiely,.. and rnicelli,. A. : A spectrphtmetric micrtiter-based assay fr the detectin f 용을 관찰하였다. PPH 라디칼 소거반응에 있어서 노니의 수용 hydrperxy derivatives f linleic acid. A nal Bichem. 성 분획과 지용성 분획 모두 농도 의존적으로 라디칼을 소거하 7 (99). 였다. xanthine xidase에 의한 superxide의 소거 반응에 있어 9) Wang, M. Y. and u,.: ancer preventive effect f Mrinda 서 대조군의 수용성과 지용성 노니 추출물은 jxg/m/ 농도에 citriflia (Nni). Ann. N. Y Acad. ci. 9, 6 (). 서 각각 %와 % 라디칼 소거 활성을 보였으나 산과 trypsin ) Burns,. M. : igarette smking amng the elderly: disease 을 처리한 지용성 분획은 대조군의 지용성 분획에 비하여 통계 적으로 유의하게 % 소거 활성을 증가시켰다. 이러한 결과는 산과 효소를 처리한 노니 추출물에서 항산화 작용이 강화되는 것 cnsequences and the benefits f cessatin. Am... Health Prmt., 7 (). ) Heinicke, R. : he pharmaclgically active ingredient f nni. Bulletin f he Natinal rpical Btanical Garden (98). 을 시사하여 준다. 수용성 노니 추출물은 silica에 의한 세포내 ) Waters,., Fae, A., Gndalia,., Hlm,., Karlstrm, L., RO 생성에 별 다른 영힘올 주지 않았으나 지용성 분획은 silica Nilssn, U. and nssn,. : Effects f pretreatment with a 에 의한 세포내 RO 생성읍 농도 의존적으로 억제하였다. 지질 xanthine xidase inhibitr n free radical levels during cartid 과산화에 있어서 수용성 분?!에서는 산과 trypsin을 처리하지 않 endarterectmy. Free Radic. Res. 8 8 (). 은 추출물이 지용성 분획에서는 수용성 분획과 반대로 산과 trypsin을 처리한 추출물이 지질과신-호 억 제 하 였 다. 이러한 견 과는 산과 trypsin 처리시 지질과산화물 생성을 억제하는 물질이 수용성 분획에서 지용성 분획으로 전환되었다는 것음 시사하며 ) iegel,. Gustafsn,. L., ehn,. L., Han,. Y. Bnchng, R, Berliner, L.. and Rss,. : NA(P)H: quinne xidreductase : rle as a superxide scavenger. M l Pharmacl 6 8 (). ) W,. H. Em, Y. W., Y, M. H. Yu, H.., Han, H.., ng, 준다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때 in vitr assay와 cellular W. K., Y, Y.., hun,.. and Kim,. H. : umr necrsis system에서 노니의 항산화 작용은 산과 trypsin 처리시 지용성 factr-alpha generates reactive xygen species via a cytslic 분획에서 항산화 작용이 더 강하게 나타는 것으로 사료된다. phsphlipase A-linked cascade.. B i l hem. 7 7 (). 문 헌 ) Nmura, K. mai, H. Kumura,., Kbayashi,. and Nakagawa, Y. : Mitchndrial phsphlipid hydrperxide ) Whistler, W. A. : raditinal and herbal medicine in the k slands.. Ethnpharmacl., 9 (98). ) ingh, Y. N., kahihif,, Panuve, M. and latter,. : Flk medicine in nga. A study f the use f herbal medicines fr bstetric and gynaeclgical cnditins and disrders.. Ethnpharmacl. (98). ) Mclatchey, W. : Frm Plynesian healers t health fd stres: changing perspectives f Mrinda citriflia (Rubiaceae). ntegr. ancer her. (). Vl. 9 N. glutathine perxidase inhibits the release f cytchrme c frm mitchndria by suppressing the perxidatin f cardilipin in hypglycaemia-induced apptsis. Bichem.. 8 (). 6) Bland, A., elapierre,. Mssay,., Hans, R and resse, A.: Prpfl prtects cultured brain cells frm irn in-induced death: cmparisn with trlx. Eur. / Pharmacl., ().