Polymer(Korea), Vol. 33, No. 6, pp 96-61, 9 아세클로페낙고체분산체의특성및용출률개선 김윤태ㆍ박현진ㆍ이영현ㆍ홍희경ㆍ엄신ㆍ김용기이은용ㆍ최명규 ㆍ이재준 ㆍ조용백 ㆍ강길선 전북대학교 BIN 융합공학과, 고분자나노공학과, ( 주 ) 환인제약중앙연구소 (9년 7월 일접수, 9년 9월 9일수정, 9년 9월 1일채택 ) Characterization and Improved Dissolution Rate of Aceclofenac Solid Dispersion Yun Tae Kim, Hyun Jin Park, Young Hyun Lee, Hee Kyung Hong, Shin Eom, Yong Ki Kim, Eun Yong Lee, Myoung Gyu Choi*, Jae Jun Lee*, Yong Baik Cho*, and Gilson Khang Department of BIN Fusion Technology, Department of PolymerㆍNano Science Technology, Chonbuk National University, 664-14 Dukjin, Jeonju 61-76, Korea *Research Center, Whanin Pharm Co., Small and Medium Business Center, Iui-dong, Yeongtong-gu, Suwon 443-766, Korea (Received July, 9; Revised September 9, 9; Accepted September 1, 9) 초록 : 아세클로페낙은높은결정성을갖는난용성약물이다. 이러한난용성약물의용해도를증진시키기위해서고체분산법을바탕으로한분무건조기를이용하여미립구를제조하였다. PVP-K3 을수용성담체로사용하였고폴록사머는계면활성화제로사용하였다. 제조된아세클로페낙고체분산체의특성을 SEM, DSC, XRD 그리고 FT-IR 을이용하여확인하였다. SEM, DSC, XRD 을통하여아세클로페낙고체분산체가무정형임을알수있었고 FT-IR 을통하여아세클로페낙과 PVP-K3 간에수소결합을통해염을형성하고있다는것을확인할수있었다. 제조된미립구는 ph 6.8 에서방출을실시하였으며시판제인 Airtal 과용출률을비교하였으며분무건조를통해제조한미립구가시판제인 Airtal 보다용출률이크다는것을확인하였다. Abstract: We prepared nanoparticles containing insoluble aceclofenac by the method of solid dispersions using spray dryer to improve solubility of aceclofenac. We used PVP-K3 as a water soluble carrier for the solid dispersion and poloxamer as a surfactant. Characterization of aceclofenac solid dispersion was performed by SEM, DSC, XRD and FT-IR. The results of SEM, DSC and XRD demonstrated that aceclofenac is amorphous in solid dispersion. The formation of salt by hydrogen bond between aceclofenac and PVP K-3 was confirmed by FT-IR. The dissolution rate measured in intestinal juice showed the method of solid dispersion improved aceclofenac solubility as compared with a conventional drug(airtal ). In conclusion, the method of solid dispersion using spray dryer would improve solubility of aceclofenac in oral administration. Keywords: aceclofenac, solid dispersion, PVP K-3, spray-drying. 서론화학명 2-[(2,6-dichlorophenyl)amino] benzeneacetic acid carboxymethyl ester 로표시되는아세클로페낙 (aceclofenac, AFC) 은비스테로이드계소염진통제 (NSAID) 의일종으로서, 특히 COX-2 에선택성이높기때문에치료효과가우수하고, 위장장애등의부작용이적어서치통, 외상후생기는염증, 요통, 좌골통, 회음외측절개수술후, 분만후, 비관절성류마티즘으로인한통증, 류마티양관절염, 강직성척추염, 골관절염및견갑상완골의관절주위염등에널 To whom correspondence should be addressed. E-mail: gskhang@jbnu.ac.kr 리사용되고있다. 1,2 그러나, 아세클로페낙은물에거의용해되지않는난용성약물로서체내에서약물의흡수가낮기때문에이를제제화하는데많은어려움을겪고있다. 이러한난용성약물의문제점을해결하기위해서는약물의용해도를증가시켜야하는데이를위한방법으로는약물의결정성감소, 고체분산체, 프로드럭, 미세분말화, 자가미세유화등의 3,4 방법들이있으며이중고체분산체는제조및취급이용이하여최근각광받고있다. 고체분산체는일반적으로수용성고분자내에약물이균일하게분산되는것을의미하는데, 약물의생체외및생체내용출특성을개선함으로써경구흡수율을증가시키는것으로알려져있다. 특히, 분무건조기술의원리는현탁액이나활성물질을포함하는고분자용액 96
아세클로페낙고체분산체의특성및용출률개선 97 을건조실에분무하고용매는가열된기체의흐름에의하여빠르게증발되어액체에서마이크로크기의입자로고체화된다. 이러한분무건조기술은많은장점을갖고있는데한단계공정으로번거로움을피하고입자의크기를조절할수있으며재현성있는좁은입자크기분포를갖게한다. 또한, 분무건조기술을이용하여제조된미립구는유기용매가쉽게제거될수있는환경으로제조하기때문에보통잔존유기용매가거의없는반면에다른방법으로제조된미립구는상대적으로느린용매증발속도로인하여독성을갖는유기용매가존재할수있다. -11 폴리비닐피롤리돈 (PVP) 은 Fikentscher 식에의해서계산된 K 값으로분류되며분자량이대략 2 3 g/mole의범위를갖으며물에대한양호한용해도로인해일반적으로고체분산체의적심성및용출률을증가시키고경구용으로는독성이없어제제분야에많이사용되고있다. 12 그중 PVP-3 은분자량이 g/mole 로서여타다른 K 값을갖는 PVP 보다증진된용출률을나타낸다고알려져있으며본실험에서난용성약물의용출률을증진시키기위하여사용하였다. 13 또한, 폴록사머 (poloxamer, 이하 Pol) 는폴리옥시에틸렌 -폴리옥시프로필렌공중합체로상업적으로유용한계면활성화제이며사용비율에따라다양한종류가있고낮은독성을가지고있어제제설계에널리사용되고있으며고분자매트릭스로부터의약물방출을제어하기위하여사용하였다. 14 본실험에서는분무건조를통하여고분자담체내에약물크기를나노사이즈로감소시켜나노고체분산체를제조하였다. 일반적으로물질이나노사이즈로변화되면본연의물리화학적인특성이변하게된다. 나노물질은분자수준에가까운크기로서질량에비해넓은표면적을가지고있으며높은반응성이있는독특한물리화학적특성을갖는데이는같은조성을갖는벌크물질들의특성과는명백히다르다. 본실험에서는결정성약물인아세클로페낙을 PVP 및 Pol 와분무건조시켜고분자담체내에약물의입도를나노사이즈로감소시킴으로써용출률의증진을도모하였다. 아세클로페낙의나노고체분산체의특성을살피기위하여입도분석과시차주사열량계를이용하였으며생체외비교용출실험에서시판제형인에어탈정 (Airtal, 대웅제약 ) 과의비교용출실험을통하여생체이용률의간접적인지표를확인하고자하였다. 실 시약. 모델약물인아세클로페낙은마성상사를통해구입하였으며, PVP K-3 과폴록사머 47(Lutrol F127) 은 BASF( 독일 ) 에서구입하였다. 제조된고체분산체와의방출거동을비교하기위하여사용된대조군으로는시판제형인에어탈정을구입하여사용하였다. 이외의사용된용매와기타시약은 HPLC 등급을사용하였다. 증류수는 3차정제한것을사용하였다. 고체분산체의제조. 본실험에서고체분산체를제조하기위해사용한분무건조기는 Spray Dryer SD-1(Eyelar, 일본 ) 을이용하였다. 아세클로페낙, PVP-K3 과 Pol 를메탄올에용해시키고 Table 1에제시한분무건조기조건을설정하여고체분산체를얻을수있었다. 아세클로페낙, PVP-K3 과 Pol 은각각 Table 2에서나타낸것처럼 1:1:1, 1:3:1, 1::1 및 1:7:1(w/w%) 의비율로혼합 험 Table 1. Conditions for Spray Drying of Aceclofenac Solutions Parameter Setting Inlet temperature 1 Outlet temperature 6± Flow rate.2 m 3 /min Pump 1. ml/min Autoizing 1 1 kpa Table 2. Preparation Condition and Profile of Solid Dispersions Batch Drug Poloxamer PVP K3 Encapsulation efficiency(%) 1 1 1 1 43.8 2 1 1 3 67.9 3 1 1 77.6 4 1 1 7 88.4 하여제조하였다. 모든시료는제조한후사용하기전까지데시케이터에보관하였다. 약물의함량측정. 분무건조된고체분산체의약물함량을분석하기위하여먼저 ml 의메탄올에넣어용해시킨후약물을추출하여.4 μm의 PTFE(Tokyo Roshi Kaishm, LTd, 일본 ) 필터를이용하여여과한후 μl를취하여 289 nm에서 HPLC를이용하여측정하였다. 이후사용된고분자의양과사용된약물의비를검출된약물의양과비교하여다음과같은공식을이용하여포접률을계산하였다. 16,17 고체분산체내의약물함유량포접률 (%) = 1 사용한전체약물의양 고체분산체의형태학적특성. 고체분산체의입자상태및표면을관찰하기위해서주사전자현미경 (LV-SEM, S-3N, Hitachi Co, Tokyo, 일본 ) 을이용하여분석하였다. SEM 관찰을위해시료를탄소테이프위에고정시키고아르곤가스하에서백금-팔라듐코팅을 3 분동안실시하였다. 코팅된시료는. kv에서관찰하였다. 결정화도분석. 아세클로페낙과고분자그리고제조된고체분산체의결정학적구조를 DSC(TA Instrument DSC 1, Dupont, 미국 ) 와 XRD(MAX 2 X-ray diffractometer, Rigaku, 일본 ) 를이용하여분석하였다. DSC 는 1 /min 의승온속도로 3~21 의범위에서온도를증가시키면서결정성을확인하였다. X선회절은.3 mm 투명한유리기판에일정량의시료를충분히적층하여배향이발생하지않도록 6 /min 의속도로 8 범위내에서 3 ma, 4 k 조건으로측정하였다. 입자크기분석. 고체분산체내에아세클로페낙의입자크기를분석하기위하여입도분석기 (ELS-6) 를이용하였다. 아세클로페낙과제조된고체분산체를정제수에.1 w/v% 로현탁시킨후 36 시간교반하였다. 이것을상온에서냉각시킨후.4 μm PTFE 필터를이용하여여과하여입자크기를분석하였다. 고체분산체의구조적분석. 아세클로페낙과 Pol 및제조된고체분산체의화학적변화를분석하기위하여 FT-IR(GX, Perkin Elmer, 미국 ) 을이용하였다. 과량의 KBr 에시료를 1:1로혼합하여투명한디스크형태로준비하였으며 4 4 cm -1 의파장범위에서 Polymer(Korea), Vol. 33, No. 6, 9
98 김윤태ᆞ박현진ᆞ이영현ᆞ홍희경ᆞ엄 신ᆞ김용기ᆞ이은용ᆞ최명규ᆞ이재준ᆞ조용백ᆞ강길선 (d) (e) (c) (f) (g) Figure 1. SEM images of aceclofenac; PVP; (c) Pol; (d) Batch 1; (e) Batch 2; (f) Batch 3; (g) Batch 4. 분석하였다. HPLC 분석. 아세클로페낙의 약물방출거동과 포접률을 측정하기 위한 HPLC 분석기는 NS-4 HPLC 시스템 및 NS-6 오토 샘플러(휴텍스, 한국)으로 구성되었다. UV 검출 파장은 282 nm이 고, 시료 주입량은 한번 주입에 μl를 주입하였다. 이동상과 샘플 의 유속은 1. ml/min으로 분석하였다. 크로마토그래피 컬럼은 μm C18 컬럼( 4.6 mm, Luna, 미국)을 사용하였으며, 표준용 액은 메탄올에 아세클로페낙을 희석하여 사용하였다. 분석에 사용되 는 이동상은 메탄올/.2 M KH2PO4을 각각 6:3(V/V%) 비율로 혼합하여 제조한 후 사용하였다. 생체 외 방출거동. 제조된 고체분산체와 대조군으로 시판 제제인 Airtal 의 방출 실험은 대한약전 9개정에 명시된 용출실험 제 2 패 들법으로 실시하였다. 제조된 고체분산체는 각각 mg씩 경질의 호 젤라틴 캡슐에 넣어 제조하였다. 용출액은 대한약전 9개정에 따 라 제 2액(인공장액 ph 6.8)을 제조하였다. 용출기는 DST- 6 (Fine Sci Instr, 한국)을 사용하였으며 패들 속도는 rpm, 용출 온도는 37±. 로 설정하였다. 용출액은 각각 9 ml로 설정 하였으며, 시료는, 1,, 3, 4, 6, 9, 1, 24 및 36분 에 걸쳐 1 ml씩 취하고 다시 제 2액을 1 ml씩 용출기에 보충하였 다. 취한 시료는.4 μm PTFE 필터로 여과 후 HPLC를 이용하여 측정하였다. 결과 및 토론 고체분산체의 제조 및 약물 함량 측정. 분무건조된 고체분산체는 AFC/PVP/Pol의 비율이 1:1:1이 43.8%, 1:3:1이 67.9%, 1::1이 77.6% 그리고 1:7:1이 88.4%로 고분자의 비율이 증가함에 따라 포 접률이 증가함을 확인할 수 있었다(Table 2). 이와 같은 현상은 약 물에 비해 고분자 지질의 함량이 높을수록 약물을 포접할 수 있는 고 분자의 양이 증가하게 되며, 약물의 양이 많을수록 고분자에 완전히 포접되지 못하거나 고온ᆞ고속 분무건조되는 동안 포접되지 못한 약 폴리머, 제33권 제6호, 9년 물이 손실된 것으로 사료된다. 고체분산체의 표면관찰. Figure 1와 같이 아세클로페낙은 특 유의 결정성을 갖는 약물로 물에 대한 용해도가.3 μg/ml인 난용 성 약물로 알려져 있다. 이러한 난용성 약물의 용출률을 증진시키기 위하여 사용한 고분자 매트릭스인 PVP는 와 같이 비교적 입자의 크기가 큰 미립자의 형태로 나타났으며 (c)에서 볼 수 있듯이 Pol의 외형 또한 크기가 큰 입자의 형태를 띠었다. (d), (e), (f) 및 (g)는 이 러한 고분자, 계면활성화제 및 약물을 분무건조시켜 고체분산체로 형 성시킨 물질로서 약물 본연의 성질인 결정성을 잃고 무정형을 띠고 있다. 이러한 미립자의 형상이 무정형인 이유는 용매의 증발속도, 분무 조건 및 약물과 고분자의 상호작용과 관련이 있을 것으로 사료된다.18 결정성 약물인 아세클로페낙은 분무건조 과정동안 고온건조와 빠른 분무속도로 인해 고분자 내부에 나노사이즈의 미세한 크기로 포접되 어 냉각되면서 벌크상태에서 가지고 있는 특유의 결정성을 잃고 무정 형을 띄는 것으로 판단된다.16 입자크기 분석. Figure 2는 아세클로페낙 및 제조된 고체분산체의 입자크기를 입자크기분석기로 분석한 결과 값을 나타낸 것이다. 는 정제수에.1 w/v%로 현탁시킨 아세클로페낙의 입도를 분석한 결과로 입도는 2264.2 nm으로 아세클로페낙 분말 본래의 크기와 유 사한 크기로 수상에 남아 거의 녹지 않는 상태로 판단된다. 는 AFC/ PVP/Pol 1:1:1의 고체분산체의 입도는 21.4 nm, (c)는 1:3:1로 24.1 nm, (d)는 1::1로 22.6 nm, (e)는 1:7:1로 18.2 nm으로 확인되었 다. 이처럼 분무건조를 통하여 고체분산체를 제조하였을 경우 PVP의 내부에 포접되는 아세클로페낙의 크기가 미세해져 나노사이즈에 가까 워지는 것을 확인할 수 있었다. 고체분산체의 결정학적 분석. Figure 3은 아세클로페낙, PVP, Pol 및 제조된 고체분산체의 결정학적 특성을 나타내는 DSC 분석 결과 이다. 의 아세클로페낙은 부근에서 강한 흡열피크가 나타 남을 확인할 수 있었다. 이것은 SEM 분석을 통한 결과와 일치하는 것을 확인할 수 있었다. Pol은 흡열피크를 확인할 수 없었으며, PVP K-3은 약 12 부근의 넓은 범위에서 완만한 흡열피크가 나타
아세클로페낙고체분산체의특성및용출률개선 99 (Is) 4 (Is) 3 1 3 2 1 4 238.6 1423.4 849.8 6 1 4.3 18.4 79.2 34 4 3 3 2 (Is) (Is) (Is) 3 1 1 4.4 19. 86.1 38 (c) 1 1 4.4 19. 86.1 38 (d) Figure 2. Particle size analysis of original aceclofenac; Batch 1; (c) Batch 2; (d) Batch 3; (e) Batch 4. 2 1 1 4.2 17.6 73.9 31 (e) Heat flow(w/g) Heat flow(w/g) 1 Temperature( ) Figure 3. DSC thermograms of PVP, Pol, and AFC; Batch 1, 2, 3, and 4. 1 Temperature( ) 남을확인할수있었다. 제조된고체분산체인 의 DSC 분석결과에서알수있듯이아세클로페낙, 고분자및계면활성화제가분무건조과정을통해특유의결정성을잃고무정형으로변한것을확인할수있었다. Figure 4는 XRD 분석결과이다. 는아세클로페낙으로서원약물에서나타나는고유한회절피크가 4 에서관찰되었다. 는 PVP 와 Pol 로서 PVP 는회절피크가나타나지않음으로써무정 형임을알수있었고 PVP는 23 부근에서회절피크가형성함을확인할수있었다. (c) 는제조된고체분산체로서회절피크가나타나지않음으로써무정형임을확인할수있었다. DSC 와 XRD 의분석결과로고온 ᆞ고압하에분무건조되어제조된고체분산체에서는약물의고유한결정성이사라져무정형상태로변화된것으로사료된다. 고체분산체의구조적인분석. 아세클로페낙과수용성고분자인 PVP 간의구조적상호작용을확인하기위해서 FT-IR 분석을하였다. Polymer(Korea), Vol. 33, No. 6, 9
6 김윤태 ᆞ 박현진 ᆞ 이영현 ᆞ 홍희경 ᆞ 엄신 ᆞ 김용기 ᆞ 이은용 ᆞ 최명규 ᆞ 이재준 ᆞ 조용백 ᆞ 강길선 Intensity(CPS) Transmittance(%) 3 4 6 7 8 2θ(degrees) 4 3 3 2 1 Wavenumber(cm -1 ) Figure. FT-IR spectrum of aceclofenac; PVP-K3; (c) Batch 1; (d) Batch 2; (e) Batch 3; (f) Batch 4. 1 Intensity(CPS) PVP-K3 poloxamer 3 4 6 7 8 2θ(degrees) Cumulative release(%) 1 8 6 4 Intensity(CPS) Batch 4 Batch 3 Batch 2 Batch 1 3 4 6 7 8 2θ(degrees) (c) Figure 4. XRD spectra of aceclofenac; PVP-K3, Pol; (c) Batch 1, 2, 3, and 4. Figure 는아세클로페낙으로서 33 cm -1 에서 NH 스트레칭, 17 cm -1 에서 C=O 스트레칭, cm -1 에서벤젠결합이나타남을확인할수있었다. 는고분자인 PVP-K 3 로특징피크인카르복실기의 C=O 스트레칭피크가 17 cm -1 사이에서나타난것을확인할수있었으며, C-H 스트레칭피크가 29 cm -1 에서나타난것을확인할수가있었다. 그리고, 3 37 cm -1 사이의피크는 PVP 가가지고있는락탐고리의 N-H 스트레칭에의한것으로사료된다. (c) (f) 는 PVP 의함량에따른분무건조된고 1 2 3 3 4 Time(min) Figure 6. Dissolution behavior in simulated intestinal juice at ph 6.8(n=3). 체분산체의결과를나타낸것이다. 와 의분석결과를바탕으로 (c) (f) 에서는약물의특징피크인 N-H 스트레칭피크가사라진것을확인할수있었고이를통해서분무건조되는동안에아세클로페낙과 PVP 간의수소결합을통해염을형성하고있다는것을확인할수있었다. 생체외방출거동. 난용성약물의고체분산체를제조하여약물의용출성을개선함으로써흡수율을높이기위해서는약물의흡수부위, 즉장관에서의용출률을높게유지할수있는담체의종류와조성비를결정하는것이중요하다. 19 따라서, 본연구는아세클로페낙의주된흡수부위인소장, 공장, 회장부위에서 탁월한용출을나타낼수있도록제형을설계하였으며, 분무건조된나노고체분산체는대한약전제 9 개정에명시된용출시험제 2법패들법으로실시하였다. 시험액은인공장액으로제 2액 (ph 6.8) 을사용하여생체이용률의간접지표로사용하였다. 분무건조된고체분산체, 고분자와약물의물리적혼합물및대조군으로서시판제인에어탈정 을 Figure 6에나타내었다. Figure 6에서볼수있듯 AFC/PVP/Pol 나노고체분산체는 6시간동안 1:1:1 이 8%, 1:3:1 이 88%, 1::1 가 92%, 1:7:1 이 99% 의용출률을나타내었다. 제조된나노고체분산체는 PVP 의함량증가에따라용출률이 폴리머, 제 33 권제 6 호, 9 년
아세클로페낙고체분산체의특성및용출률개선 61 증가하였다. 이는고분자의함량이증가함에따라서약물과고분자가분무건조되는동안고분자내부에약물이나노사이즈로미세하게분산되어고형화가형성됨에따라수용성고분자와함께 AFC 가큰표면적을갖게되며나노사이즈로크기가작아짐에따라약물특유의결정형을잃고무정형으로변화되어용해도가증가되기때문인것으로사료된다. 따라서, 본연구를통하여분무건조를통한고분자와약물의비율조성으로인해시판제형보다우수한약물의용출률및고분자와약물의비율이융출률에미치는상관관계를얻을수있었다. 결론본연구는난용성약물인아세클로페낙의용출률개선을위해수용성고분자담체인 PVP-K3 이용하여실험을수행하였으며그결론은다음과같다. 난용성약물의용해도를증가시키기위해나노고체분산체를제조하여아세클로페낙의표면적을증가시켰다. 고체분산체의형태학적특성은 SEM, DSC 및 XRD 를통해결정형상태의아세클로페낙이무정형에가까운상태로변화하였음을확인할수있었고, 고체분산체내부에포접된나노사이즈의아세클로페낙의입도는입도분석기를통해서확인할수있었다. 그리고, FT-IR 을통해아세클로페낙과 PVP-K3 과의수소결합을통한염이형성하는것을관찰하였다. 제조된고체분산체는생체외방출거동을통하여기존의시판제인에어탈정 보다더높은용출률을보임을관찰하였다. 이러한결과를토대로분무건조공정을통해높은용출률을갖는약제학적경구제형의가능성을확인할수있었다. 감사의글 : 본연구는 WCU(R31-9) 및교육과학기술부 (8-36) 의연구지원에의하여이루어졌으므로이에감사드립니다. 참고문헌 1. A. Alvarez-Laurena, J. F. Piniella, and E. Carrasco, J. Crystallogr. Spectrosc., 22, 323 (1992). 2. B. J. Lee and H. Hung, AAPS Annual Meeting, New Orleans, LA, USA, p14 (1999). 3. J. H. Lee, W. Kim, D. S. Kim, J. H. Park, S. I. Ahn, Y. T. Kim, T. W. Lee, H. M. Rhee, H. S. Shin, H. K. Lee, and G. Khang, Tissue. Eng. Regen. Med.,, 44 (8). 4. J. H. Lee, S. I. Ahn, J. H. Park, Y. T. Kim, G. Khang, J. M. Rhee, and H. B. Lee, Tissue Eng. Regen. Med.,, 2 (8).. H. S. Kim, B. Kang, M. S. Lee, and T. W. Kim, Tissue Eng. Regen. Med.,, 61 (8). 6. J. K. Jeong, G. Khang, J. M. Rhee, H. C. Shin, and H. B. Lee, J. Korean Pharm. Sci., 3, 23 (2). 7. Y. S. Ahn, H. Y. Lee, K. D. Hong, S. B. Jung, S. H. Cho, J. M. Rhee, H. B. Lee, and G. Khang, J. Korean Pharm. Sci., 34, 169 (4). 8. Y. S. Ahn, H. Y. Lee, K. D. Hong, S. B. Jung, S. H. Cho, J. M. Rhee, H. B. Lee, and G. Khang, J. Korean Pharm. Sci., 34, 289 (4). 9. Y. H. Kim, J. W. Lee, M. S. Kim, S. Y. Yang, G. Khang, J. S. Lee, and H. B. Lee, Tissue Eng. Regen. Med., 3, 96 (6). 1. J. S. Park, J. H. Lee, H. S. Shin, T. W. Lee, M. S. Kim, H. Khang, J. M. Rhee, H. K. Lee, and H. B. Lee, Tissue Eng. Regen. Med., 4, 347 (7). 11. J. H. Lee, J. Y. Lim, S. I. Ahn, J. H. Park, Y. T. Kim, J. M. Hhee, and G. Khang, Tissue Eng. Regen. Med.,, 41 (1999). 12. W. D. Waliking, Povidone, in Handbook of Pharmaceutical Excipitients, A. Wade and P. J. Weller, Editors, American Pharmaceutical Association/The Pharmaceutical Press, washington, DC/London, p 392-399 (1994). 13. G. Khang, J. K. Jeong, J. M. Rhee, J. S. Lee, and H. B Lee, Polym. Sci. Technol., 13, 342 (2). 14. Poloxamers(2), BASF ExAct, p.7 ().. J. H. Lee, W. Kim, D. S. Kim, S. I. Ahn, J. H. Park, Y. T. Kim, T. W. Lee, J. M. Rhee, H. S. Shin, H. K. Lee, and G. Khang, Tissue Eng. Regen. Med.,, 44 (8). 16. S. W. Park, J. H. Lee, D. S. Kim, W. Kim, J. H. Park, S. I. Ahn, Y. T. Kim, H. S. Shin, J. M. Rhee, and G. Khang, Tissue Eng. Regen. Med.,, 6 (8). 17. J. S. Park, J. S. Oh, J. M. Oh, Y. T. Kim, J. H. Lee, J. H. Mo, H. B. Lee, and G. Khang, Polymer(Korea), 32, 193 (8). 18. T. S. Chung, C. M. Tun, K. P. Pramoda, and R. Wang, J. Membr. Sci., 193, 123 (1). 19. S. D. Lee, Korea Patent 1--27237 ().. H. Nishio, Y. Hayashi, and S. Terashima, Inflammopharmacology,, 266 (7). Polymer(Korea), Vol. 33, No. 6, 9