HPLC Waters는크로마토그래피로명성을얻었지만직접크로마토그래피를만들지는않습니다. 그주인공은바로고객입니다. 고객의실험실에서혁신적인사고를통해비즈니스성장동력이될크로마토그래피분석이탄생합니다. 고객의성공지표는고객이만드는메서드와결과에의해모니터링되며, 고객이지금선택하는 HPLC

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HPLC Waters는크로마토그래피로명성을얻었지만직접크로마토그래피를만들지는않습니다. 그주인공은바로고객입니다. 고객의실험실에서혁신적인사고를통해비즈니스성장동력이될크로마토그래피분석이탄생합니다. 고객의성공지표는고객이만드는메서드와결과에의해모니터링되며, 고객이지금선택하는 HPLC 컬럼은미래의성공을뒷받침해야합니다. Waters의모든최첨단역상및 HILIC HPLC 컬럼은성능과혁신이서로연관되며궁극적으로성패를결정짓는다는사실을잘아는과학자들로부터각광받고있습니다. 2

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전하표면기술로 formic acid와같은낮은이온세기의이동상을사용할경우우수한피크모양과우수한화합물로딩을실현합니다. C 18 + 본딩프로세스에서영구적인 low level 표면전하기술을사용하므로 LC-MS 애플리케이션에불리하게작용하는이온쌍시약과첨가제가필요없이 S/N 성능이향상됩니다. 저농도의불순물분석에서더우수한피크모양 100 Solid-Core C 18, 2.6μm : 250psi 1: 1 ES+ SIR TIC(0.1% ).68e7 CRTECS C 18 +, 2.7μm : 2750psi 1: 1 ES+ SIR TIC(0.1% ).68e7 % S/N : 11 S/N 60 % S/N : 11 0 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 4.0e-2.5e-2 (1) PDA Ch1 254nm@4.8nm : 8e-1 (1) PDA Ch1 254nm@4.8nm : 1.0e-2 2.5e-2 Imipramine 5% Imipramine AU 2.0e-2 1.5e-2 1.0e-2 0.1% PW 1.4% : 0.12 0.1% PW 1.4% : 0.089 5.0e- 0.0 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 모든애플리케이션에서이러한상대적분리가가능한것은아닙니다. 낮은이온성의염기성항울제 imipramine 에대한 HPLC-UV/MS 분석에서낮은레벨의불순물이확인됩니다. 낮은이온세기의산성이동상을위해제작된 CRTECS C 18 +, 2.7µm 컬럼을사용하면더뾰족한피크와우수한 S/N 을얻을수있습니다. LC 조건 컬럼 :.0 x 50mm 이동상 A: 0.1% formic acid in water 이동상 B: 0.1% formic acid in acetonitrile Gradient: 25 ~ 5%B, 4.6분 유속 : 0.8mL/min 컬럼온도 : 0 검출 : UV@254nm, ESI+ MS 주입부피 : 10μL 화합물 Imipramine (0.5mg/mL) Impurity at 0.1% spike (0.5μg/mL) 5

가지상을선택함으로써다양한화합물유형을분리할수있습니다. CRTECS C 18 및 C 18 + 역상흡착제가크로마토그래피사용자에게산성, 염기성, 중성화합물의균형잡힌머무름프로파일을제공한다면, 본딩되지않은또다른선택성의 CRTECS HILIC 상은극성분석물질에서더우수한머무름을제공합니다. HPLC, UPLC, UHPLC 플랫폼 에서사용가능한입자크기이므로, 어떤분석법을개발하든입자크기, 컬럼구성 또는기기제조업체의제한없이간편하고완벽하게분석법을전송할수있습니다. 시간과용매가포함된 Abacavir USP 분석법전환 AU AU 0.02 0.01 0.00 0.02 0.01 C 18, 5μm, 4.6 x 150mm : 1.00mL/min : 8μL : Alliance HPLC 1 12.0 14.0 16.0 18.0 20.0 22.0 24.0 26.0 28.0 0.0 CRTECS C 18, 2.7μm, 4.6 x 75mm : 1.85mL/min : 4μL : Alliance HPLC 2 4 Method 5 4, 1/2 2.7μm LC 조건 이동상 A: 0.1% trifluoroacetic acid in water 이동상 B: 85% methanol in water 컬럼 A: 전체다공성 C 18, 5μm, 4.6 x 150mm 컬럼 B: CRTECS C 18, 2.7μm, 4.6 x 75mm 컬럼 C: CRTECS C 18, 1.6μm, 2.1 x 50mm 기하학적스케일의기울기 ( 기울기단계당컬럼부피 가동일함 ) 컬럼 A: 5 ~ 0%B (2.6분), 0 ~ 90%B (14.8분) 컬럼 B: 5 ~ 0%B (6.4분), 0 ~ 90%B (4.0분) 컬럼 C: 5 ~ 0%B (2.5분), 0 ~ 90%B (1.6분) 이동상 A: 0.1% trifluoroacetic acid in water 이동상 B: 85% methanol in water AU 0.00 0.02 0.01.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 CRTECS C 18, 2.7μm, 4.6 x 75mm : 1.85mL/min : 4μL : ACQUITY UPLC H-Class HPLC, UHPLC UPLC 화합물 1. Descycleopropylabacavir 2. Abacavir. 1R,4R trans-abacavir 4. o-(4-chloro-2,5-diaminopyimidnyl)-abacavir 5. o-t-butyl-abacavir 0.00.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 AU 0.02 0.01 CRTECS UPLC C 18,1.6μm, 2.1 x 50mm : 0.65mL/min : 0.6μL : ACQUITY UPLC H-Class 9, 1/12 1.6μm 0.00 1.8 2.0 2.2 2.4 2.6 2.8.0.2.4.6 모든애플리케이션에서이러한상대적분리가가능한것은아닙니다. 5µm 전체다공성컬럼으로개발된분석법은스케일하여더짧은 2.7µm 컬럼으로전환할수있습니다. 2µm 미만의 UPLC 컬럼을사용하여효율성과생산성을더욱높일수있습니다. 그러면조직내또는계약파트너의실험실로이동할때분석법의일관성측면에서더유연성을발휘할수있게됩니다. www.waters.com/cortecs 6

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ph XBridge HPLC 컬럼은오로지사용자의생산성극대화를염두에두고설계되었습니다. 품질관리방법을마련하거나첨단 LC-MS 분석법을개발하려는어떤경우에도 XBridge 컬럼은다음과같은이점을제공합니다. ph 안정성향상 : 컬럼수명증가 컬럼의신뢰성향상 : 분석법의완건성 XBridge 컬럼은화학적안정성이가장우수한크로마토그래피흡착제를사용하여넓은범위의 ph(1 12) 이동상의모든이점을누릴수있도록특별히설계되었습니다. 합성프로세스에서특히극한의 ph를위한화학적안정성이입자에구현되었으며, 이는일반실리카기반본딩프로세스에서재현불가한수준입니다. XBridge 컬럼의화학적안정성은타의추종을불허합니다. 경쟁사컬럼대비높은 ph 에서의안정성테스트 110 입자효율성극대화 : 탁월한피크모양과피크용량 90 XBridge C 18 10가지의범용흡착제와애플리케이션전용흡착제중에서선택가능하고가장다양한입자크기가지원됩니다. 다른어떤 HPLC 컬럼제품군도이와같이가장까다로운크로마토그래피과제까지능히해결할만한도구를제공하지못합니다. 견고한 HPLC 분석법, 원활한 UPLC 전환능력또는제품정제를위한분취용스케일링이필요한어떤경우에도다재다능한 XBridge 컬럼이진가를발휘합니다. % N 5s XTerra MS C 18 Gemini C 70 18 Luna C18(2) YMC Pro C 18 50 Zorbax Extend C 18 : 0 0 50 100 150 200 50mM TEA, ph 10, 50 C 높은 ph에서의수명연구에서일정한간격으로크로마토그램을실행하면, XBridge 컬럼은 ph 10 및고온에서 00시간을경과한후에도원래효율성의 86% 가유지되고피크모양또는머무름시간도거의변동이없습니다. CH Polar Group CH Polar Group XBridge C 18 C 8 Shield RP18 Phenyl HILIC 리간드유형 Trifunctional C 18 Trifunctional C 8 Nomofunctional Embedded Polar Trifunctional Phenyl-Hexyl Unbonded BEH 입자 리간드밀도 *.1µmol/m 2.2µmol/m 2.µmol/m 2.0µmol/m 2 해당없음 Carbon Load* 18% 1% 17% 15% Unbonded Endcap Style 전용 전용 TMS 전용 해당없음 USP Classification L1 L7 L1 L11 L ph 범위 1 12 1 12 2 11 1 12 1 9 낮은 ph에서온도제한 80 C 60 C 50 C 80 C 45 C 높은 ph에서온도제한 60 C 60 C 45 C 60 C 45 C Pore Diameter* 10Å 10Å 10Å 10Å 10Å 표면적 * 185m 2 /g 185m 2 /g 185m 2 /g 185m 2 /g 185m 2 /g 입자크기 2.5,.5, 5, 10µm 2.5,.5, 5, 10µm 2.5,.5, 5, 10µm 2.5,.5, 5µm 2.5,.5, 5µm * 예상치또는근사치입니다. 8

XBridge 제품군의 USP Tailing Factors 크로마토그래피분석법개발비용의상당부분은최종메서 드의엄격한테스트및밸리데이션때문에발생합니다. Waters 는메서드의재밸리데이션이어렵다는사실을잘알고있으 므로흡착제및최종컬럼제품의각각의배치를철저히테스 트하여컬럼의재현성을극대화하는데주력합니다. XBridge 컬럼을선택한고객은지금개발하는분석법이어세이의전 체기간동안반복실현가능함을확신할수있습니다. (T f ) 2 ph ph 7 Despramine Nortriptyline Amitriptyline Amitriptyline BEH(Ethylene-Bridged Hybrid) 입자는매우정밀하게실라놀활성도를제어할수있는등여러면에서일반적인실리카기반입자보다뛰어납니다. 실라놀활성도를제어함으로써불필요한실라놀상호작용을제어하고줄여피크테일링현상을개선시킬수있습니다. 1 C 8 RP18 C 18 Zorbax SB-C18 모든애플리케이션에서이러한상대적분리가가능한것은아닙니다. 뛰어난입자및리간드안정성과우수한크로마토그래피효율성을겸비한 XBridge 컬럼은낮은 ph 및중간 ph 조건에서더없이좋은선택입니다. C 4 H 9 Linker NH 2 C 4 H 9 Amide Peptide BEH C 18, 10Å Peptide BEH BEH C 18, 00Å Protein BEH C 4, 00Å ligo BEH C 18 Amide Trifunctional C 18 Trifunctional C 18 Monofunctional C 4 Trifunctional C 18 7.5µmol/m 2.1µmol/m 2.1µmol/m 2 2.4µmol/m 2.1µmol/m 2 12% 18% 12% 8% 18% 없음 전용 전용 없음 전용 - L1 L1 L26 L1 2 1 1 12 1 12 1 10 1 12 90 C 80 C 80 C 80 C 80 C 90 C 60 C 60 C 50 C 60 C 10Å 10Å 00Å 00Å 10Å 185m 2 /g 185m 2 /g 90m 2 /g 90m 2 /g 185m 2 /g 2.5,.5µm.5, 5, 10µm.5, 5, 10µm.5µm 2.5µm CH Polar Group 9

2.5µm 모든 XBridge 및 XSelect HPLC 컬럼은확장된성능 [XP] 의 2.5µm 컬럼포맷으로도제공되므로 HPLC 기기에서 UPLC 기기로의분석법전환이용이합니다. XP 2.5µm 컬럼은기존 HPLC 기기의성능을향상시켜, 2µm 미만의 ACQUITY UPLC 기술을사용하는최고의분리효율로한발짝더다가갈수있습니다. 확장가능한분리 0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 5µm 150mm 주입 : 5.0µL 유속 : 0.2mL/min 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5.0.5 4.0.5µm 100mm 주입 :.µl 유속 : 0.mL/min 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.5µm 75mm 주입 : 2.5µL 유속 : 0.5mL/min 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.1 1.7µm 50mm 주입 : 1.7µL 유속 : 0.6mL/min 효과적으로분석시간을단축하고분리능을유지하기위해다양한길이와입자크기의컬럼을사용했습니다. LC 조건 시스템 : ACQUITY UPLC와 TUV 검출기 컬럼 : XBridge C 18, 5μm, 2.1 x 150mm XBridge C 18,.5μm, 2.1 x 100mm XBridge C 18, 2.5μm, 2.1 x 75mm ACQUITY UPLC BEH C 18, 1.7μm, 2.1 x 50mm 이동상 A: 0.1% formic acid in water 이동상 B: 0.1% formic acid in acetonitrile 유속 : 위크로마토그램참조 주입부피 : 위크로마토그램참조 Isocratic: 95% A:5% B 샘플희석제 : % acetonitrile in water (formic acid 0.1%) 샘플농도 : 25µg/mL 컬럼온도 : 8 C 검출 : UV @ 280nm Sampling rate: 40 pts/sec Time constant: 0.05 www.waters.com/xbridge 10

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F F XSelect HPLC 컬럼은가장까다로운분석물질의 co-elution 되는피크를쉽게분리할수있도록가장다양한흡착제선택범위를요구하는분석법개발자를염두에두고설계되었습니다. XSelect 컬럼의특징은다음과같습니다. 다양한선택성 : 분리가어려운피크를더효과적으로분리 분리및정제를위한제품 : 최고수준의분석물질 mass 로딩 빠른분석법개발에이상적 : 분석법개발에드는시간과비용절약 기본입자또는기질이분석물질의선택성을크게 좌우합니다. 본딩된리간드는부차적인영향을미칩니다. 각각을따로사용할경우선택성의변화가두드러지지 않습니다. 그러나기질과리간드를연계하면분석물질의 선택성을높이는최고의도구가됩니다. 이런이유로 XSelect 컬럼제품군은 HSS(High Strength lica) 기술과 CSH (Charged Surface Hybrid) 기술을모두갖추고본딩된리간드의특별한최적화를지원합니다. 이를통해 재현성과우수한선택성이보장됩니다. F F F F F F F F CN XSelect CSH C 18 CSH Phenyl-Hexyl CSH Fluoro-Phenyl HSS T HSS C 18 HSS C 18 SB HSS PFP HSS CN 리간드유형 Trifunctional C 18 Trifunctional C 6 phenyl Trifunctional Propylfluorophenyl Trifunctional C 18 Trifunctional C 18 Trifunctional C 18 Trifunctional Pentafluorophenyl Monofunctional Cyano-propyl 리간드밀도 * 2.µmol/m 2 2.µmol/m 2 2.µmol/m 2 1.6µmol/m 2.2µmol/m 2 1.6µmol/m 2.2µmol/m 2 2.0µmol/m 2 Carbon Load* 15% 14% 10% 11% 15% 8% 7% 5% Endcap Style 전용 전용 없음 전용 전용 없음 없음 없음 USP Classification L1 L11 L4 L1 L1 L1 L4 L10 ph 범위 1 11 1 11 1 8 2 8 1 8 2 8 2 8 2 8 낮은 ph에서온도제한 80 C 80 C 60 C 45 C 45 C 45 C 45 C 45 C 높은 ph에서온도제한 45 C 45 C 45 C 45 C 45 C 45 C 45 C 45 C Pore Diameter* 10Å 10Å 10Å 100Å 100Å 100Å 100Å 100Å 표면적 * 185m 2 /g 185m 2 /g 185m 2 /g 20m 2 /g 20m 2 /g 20m 2 /g 20m 2 /g 20m 2 /g 입자크기 2.5,.5, 5, 10µm 2.5,.5, 5µm 2.5,.5, 5µm 2.5,.5, 5µm 2.5,.5, 5µm 2.5,.5, 5µm 2.5,.5, 5µm 2.5,.5, 5µm * 예상치또는근사치입니다. 12

선택성과머무름특성은분석법개발자가크로마토그래피적현상을조정하는데가장효과적으로사용할수있는수단입니다. XSelect 제품군은범용분리를위한다양한역상 C 18 컬럼 ( 예 : CSH C 18, HSS C 18, HSS C 18 SB) 과분석법개발을위한극성화합물의우수한머무름 (T) 과선택성옵션 (phenyl-hexyl, fluoro-phenyl, cyano) 을제공하는컬럼으로구성되었습니다. 다양한분석물질선택성을제공하는 XSelect 컬럼 CSH C 18 CSH Phenyl-Hexyl CSH Fluoro-Phenyl HSS CN HSS PFP HSS T HSS C 18 HSS C 18 SB 1 1 2 2 1 2 1 4 4 6 7 4 4 5 4 5 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5.0.5 6 2 5,6 7 5,6 5,6 7 7 6 7 4 5 염기분석물질의혼합물에서선택성의차이를확인했습니다. 화합물 : [1] aminopyrazine, [2] pindolol, [] quinine, [4] labetalol, [5] verapamil, [6] dilitazem, [7] amitriptyline. LC 조건 시스템 : ACQUITY UPLC와 ACQUITY UPLC PDA 검출기 컬럼 : 2.1 x 50mm 이동상 A: 10mM ammonium formate, ph.0 이동상 B: Methanol 유속 : 0.4mL/min 주입부피 : 1μL 샘플희석제 : Water 컬럼온도 : 0 C Gradient: 시간 ( 분 ) %A %B 0.00 70 0.00 15 85.50 15 85.51 70 0 4.50 70 0 검출 : UV @ 260nm Sampling rate: 20pts/sec Filter response: Normal 화합물의정제, 불순물프로파일링, 용출테스트와같이높은질량로딩을요구하는애플리케이션은우수한컬럼성능을필요로합니다. 이러한유형의애플리케이션에서는대칭성피크모양을유지하지못하면컬럼로딩이제약을받습니다. 그러면주화합물의피크가심각하게넓어져정제과정에서미량의불순물을제거하는데어려움을겪곤합니다. XSelect CSH 컬럼은높은로딩조건에서일관성있게뾰족한피크를제공하므로크로마토그래피사용자가미량의불순물또는대사산물을분리할수있습니다. 즉더적은시간과흡착제로더우수한로딩용량을얻습니다. 높은질량로딩에서피크모양유지 AU AU 0.08 0.06 0.04 0.02 0.00 0.08 0.06 0.04 0.02 0.00 ACQUITY UPLC CSH C 18 (Imipramine) (Imipramine) 모든애플리케이션에서이러한상대적분리가가능한것은아닙니다. 2.0% 1.0% 0.5% 0.1% 2.0% 1.0% 0.5% 0.1% 0.5mg/mL 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 Kinetex C 18 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 XSelect 컬럼은더향상된질량로딩으로가까운피크의불순물또는분해산물의분리, 식별, 정량을지원합니다. LC 조건시스템 : 컬럼 : 이동상 A: 이동상 B: 이동상 C: Gradient: ACQUITY UPLC H-Class와 ACQUITY UPLC PDA 검출기 2.1 x 50mm Water Acetonitrile 2% formic acid in water 시간 유속 ( 분 ) (ml/ 분 ) %A %B %C Curve Initial 0.6 70 25 5 초기 2.0 0.6 60 5 5 6.0 0.6 0 95 5 6.1 0.6 70 25 5 6 5.0 0.6 70 25 5 6 5μL 물 주입부피 : 샘플희석제 : 샘플조건 : Imipramine: 0.5mg/mL, amitryptyline: 표시된대로 (% of imipriamine) 컬럼온도 : 40 C 검출 : UV @ 254nm 세척용매 : 퍼지용매 : 50/50 acetonitrile / water 50/50 acetonitrile / water 1

숙련된크로마토그래피사용자는분석법을개발할때특별하게선택적인 컬럼으로개발한분석법은사용된 LC 시스템플랫폼과상관없이다른 실험실로의전환이용이해야한다는사실을잘알고있습니다. XSelect 컬럼은분석법개발을염두에두고만들어진제품으로모든최신검출 모드를완벽하게지원합니다. 재현및확장가능한분리 XSelect CSH Fluoro-Phenyl, 5μm 2 1 4 5 6 7 8 9 10 LC 조건 시스템 : ACQUITY UPLC와 ACQUITY UPLC PDA 검출기 컬럼 : 2.1 x 50mm 유속 : 0.5mL/min 이동상 : 15.4mM ammonium formate, ph.0 이동상 B: acetonitrile Gradient: 5 ~ 90% B linear, 5분 주입부피 : 5μL 샘플희석제 : 물 컬럼온도 : 0 C 검출 : UV @ 254nm Sampling rate: 20 pts/sec Filter response: Noraml XSelect CSH Fluoro-Phenyl,.5μm 화합물 1. Thiourea 2. Resorcinol. Metoprolol 4. -nitrophenol 5. 2-chlorobenzoic acid 6. Amitriptyline 7. Diethylphthalate 8. Fenoprofen 9. Diproplyphthalate 10. Pyrenesulfocin acid ACQUITY UPLC CSH Fluoro-Phenyl, 1.7μm 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5.0.5 4.0 가지 (1.7,.5, 5µm) 입자크기의 9 가지서로다른 CSH fluoro-phenyl 2.1 x 50mm 컬럼에서기울기분리의재현성과확장성 www.waters.com/xselect 14

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ph Atlantis HPLC 컬럼은탁월한성능, 다기능성, 극성화합물에서머무름을제공할뿐아니라다양한분석 물질혼합물에서균형잡힌머무름을실현합니다. 100% Atlantis 컬럼은강한산성이동상을사용할경우리간드의가수분해를방지함으로써분석법의효율성, 화합물의 머무름, 주요분석물질의선택성을보장합니다. 0.5% TFA(60 C) 에 20 시간노출 90 역상분석법에서극성화합물의머무름을극대화하기위해정지상의 pore dewetting 및 hydrophobic collapse 에대한걱정없이높은비율의고수용성이동상과버퍼에서 Atlantis 역상 HPLC 컬럼을사용할수있습니다. 메틸파라벤 % 머무름손실 80 70 60 50 40 0 20 10 Atlantis T dc 18 HILIC 실리카 0 Atlantis T SunFire C 18 Phenomenex Synergi Hydro-RP Shiseido Capcell PAK AQ Phenomenex Synergi Polar-RP Agilent Zorbax Eclipse Plus Atlantis dc 18 Phenomenex Aqua YMC Hydrosphere C18 GL Sciences Inertsil DS-SP YMC-Pack DS AQ 리간드밀도 * 1.6µmol/g 1.6µmol/g 해당없음 Carbon Load* 14% 12% 해당없음 Endcap Style 전용전용해당없음 USP Classification L1 L1 L ph 범위 2 8 7 1-5 낮은 ph 에서온도제한 높은 ph 에서온도제한 45 C 45 C 45 C 45 C 45 C 45 C Pore Diameter* 100Å 100Å 100Å 표면적 * 0m 2 /g 0m 2 /g 0m 2 /g 입자크기, 5, 10µm, 5, 10µm, 5, 10µm 모든애플리케이션에서이러한상대적분리가가능한것은아닙니다. 이테스트에서는낮은 ph 및높은 ph 온도조건에컬럼을노출시켜가수분해로인한리간드손실영향을확인했습니다. Atantis T 본딩은극한의이동상조건에서리간드가수분해를막아분석물질의머무름을유지합니다. * 예상치또는근사치입니다. 16

이온쌍시약을사용하지않으므로검출한도, 분석법의 재현성및견고성이향상되는반면극한의이동상 환경으로인한기기유지보수의부담이줄어듭니다. 극성화합물머무름 5 Atlantis T 1 2 4,5 Agilent Zorbax SB-AQ 1 2 4 5 Thermo Hypersil Gold AQ 1,4 2 5 Phenomenex Synergi Hydro-RP 1 2 4 5 Shiseido Capcell PAK C 18 AQ 0 1 2 4 5 6 7 8 모든애플리케이션에서이러한상대적분리가가능한것은아닙니다. Atlantis T 컬럼과경쟁사브랜드제품의고극성분석물질분리비교. 과학자에게는오로지 Atlantis 컬럼에서만제공하는일관성있는피크모양과머무름이필수적입니다. LC 조건컬럼 : 4.6 x 150mm 이동상 : 10mM ammonium formate, ph.0 유속 : µm 에서 1.mL/min 주입부피 : 2.0µL 컬럼온도 : 0 C 검출 : 254nm Sampling rate: 10 pts/sec 시스템 : Alliance 2695와 2487 듀얼파장흡광검출기화합물 1. Thiourea 2. 5-fluorocystine. Adenine 4. Guanosine-5 -monophosphate 5. Thymine www.waters.com/atlantis 17

ph SunFire 컬럼은낮은 ph 이동상조건에서많은실리카기반 HPLC 컬럼브랜드를뛰어넘는컬럼수명을자랑합니다. SunFire 컬럼은최첨단본딩 C 18 및 C 8 실리카 HPLC 컬럼의기준을제시합니다. 오랜연구및제품개발경험의산물인 SunFire 컬럼은최상의입자및본딩전문성이구현된제품으로업계최고수준의크로마토그래피성능을제공합니다. 우수한효율성을얻기위해서는입자합성, 패킹기술, 하드웨어엔지니어링의삼박자가갖춰져야합니다. SunFire Intelligent Speed (IS ) 및 ptimum Bed Density(BD ) 컬럼은이사실을염두에두고개발되었습니다. SunFire 컬럼은오래전부터낮은 ph 및중간 ph 범위 (2-8) 에서산성, 중성, 염기성화합물에대한우수한분리능을실현하기위해대칭피크를제공해왔습니다. SunFire C 8 C 18 lica 리간드밀도 *.5µmol/g.5µmol/g 해당없음 Carbon Load* 12% 16% 해당없음 Endcap Style 전용전용해당없음 USP Classification L7 L1 L ph 범위 2 8 2 8 2 8 낮은 ph 에서온도제한 높은 ph 에서온도제한 * 예상치또는근사치입니다. 40 C 50 C 55 C 40 C 40 C 45 C Pore Diameter* 100Å 100Å 100Å 표면적 * 40 m 2 /g 40 m 2 /g 40 m 2 /g 입자크기 2.5,.5, 5, 10µm 2.5,.5, 10µm 2.5,.5, 10µm SunFire 컬럼의피크모양비교 0 1 2 4 T USP 1.26 5 6 T USP 1.79 T USP 1.5 5 10 15 20 25 0 5 40 Isocratic 분리이동상 A: 5% 20mM dipotassium phosphate/ 20mM monopotassium phosphate ph 7.0 이동상 B: 65% methanol 파장 : 254nm 유속 : 1.0mL/min 주입부피 : 14µL 컬럼온도 : 2 C 시스템 : Alliance 2695와 2487 듀얼파장흡광검출기화합물 1. Uracil 2. Propranolol. Butylparaben 4. Naphthalene SunFire C 18 4.6 x 150mm, 5µm Phenomenex Luna C 18 (2) 4.6 x 150mm, 5µm ACT Ace C 18 4.6 x 150mm, 5µm 모든애플리케이션에서이러한상대적분리가가능한것은아닙니다. 18

Waters 는 HPLC 업계에서가장엄격한사양을고수합니다. 통제된제조공정과컬럼패킹절차를통해가장 뛰어나고재현성우수한 HPLC 컬럼을공급합니다. SunFire 컬럼의배치간재현성 112(2005) 118(2007) 10(2007) 14(2008) 5 10 15 20 25 0 5 40 이뛰어난재현성은 HPLC 컬럼업계에서가장까다로운사양을유지하기위해최선을다한결과입니다. SunFire 컬럼은고순도원자재를사용하여통제된제조공정및컬럼패킹절차에따라생산하므로, 현재과학자들은가장뛰어나고재현성우수한 HPLC 컬럼을사용할수있습니다. www.waters.com/sunfire 19

Symmetry 컬럼은고순도실리카를사용하고고도로통제된제조공정을거 쳐 HPLC 컬럼성능의표준을능가하는 컬럼으로탄생합니다. 다른어떤실리 카기반 LC 컬럼도 Symmetry 제품군과 같은컬럼간및배치간재현성을제공 할수없습니다. Symmetry 컬럼은컬럼, 카트리지, 가드포맷으로공급됩니다. Symmetry C 18 및 C 8 컬럼 : 재현성극대화 SymmetryShield RP18 및 RP8 컬럼 : 우수한피크모양제공 Symmetry00 C 18 및 C 4 컬럼 : 우수한펩타이드및 단백질회수율 Polar Group Polar Group Symmetry Symmetry C 18 Symmetry C 8 SymmetryPrep C 18 SymmetryPrep C 8 SymmetryShield RP18 SymmetryShield Symmetry00 RP18 C 18 Symmetry00 C 4 입자크기.5, 5µm.5, 5µm 7µm 7µm.5µm 5µm.5µm 5µm 입자모양 구형 구형 구형 구형 구형 구형 구형 구형 Pore ze 100Å 100Å 100Å 100Å 100Å 100Å 00Å 00Å Carbon Load 12% 12% 19% 12% 15% 17% 8.5% 2.8% End-capped Yes Yes Yes Yes Yes Yes Yes Yes Symmetry Symmetry 컬럼의배치간재현성 Symmetry HPLC 컬럼은안정적이고재현가능한성능을보장합니다. 극히한정된컬럼사양범위덕분에편차가최소화되 1 2 4 므로지금사용하는분석법이향후에도계속사용될것임을확신할수있습니다. 배치 16(1998) 배치 142(1998) 배치 149(1999) 배치 151(2000) 배치 156(2001) 0.0 1.50.0 4.5 6.00 7.5 9.0 10.5 12.0 1.5 15.0 분 최고의전년대비재현성 20 LC 조건컬럼 : 이동상 A: 이동상 B: 이동상 C: 유속 : Isocratic: Symmetry C 18, 5µm, 4.6 x 150mm Water Acetonitrile ph.75, 100mM ammonium formate in water 1.4mL/min 0% A, 60% B, 10% C 주입부피 : 5.0µL 온도 : 0 C 검출 : UV @ 2nm 머무름시간 RSD 1. Terbinafile HCI 0.7% 2. Ibuprofen 0.8%. Lovastatin 0.6% 4. mvastatin 0.7%

Symmetry SymmetryShield 컬럼은 Waters 의내장된극성기 (Embedded Polar Group) 특허기술을사용하여강염기성분석물질로부터실리카의잔류실라놀을보호하면서전반적으로우수한피크 모양을제공합니다. 또한내장된극성기를실리카표면근처 에배치함으로써표면실라놀의활성도를더욱낮춥니다. 이 를통해 Symmetry C 18 리간드와다른선택성과머무름이실현 됩니다. 특별한선택성을제공하는 SymmetryShield 컬럼 1 2 4 SymmetryShield RP18 USP Tailing Factor = 1.2 AU 5 6 7 0 5 10 15 20 25 0 1 2 Symmetry C 18 4 USP Tailing Factor = 1.9 AU 5 7 6 0 5 10 15 20 25 0 Embedded polar 기술로크로마토그래피피크모양과선택성이향상됩니다. LC 조건컬럼 : SymmetryShield RP18, 5µm,.9 x 150mm Symmetry C 18, 5µm,.9 x 150mm 이동상 : 65% methanol, 5% 20mM monopotassium phosphate / dipotassium phosphate (ph 7) 유속 : 1.0mL/min 검출 : UV @ 254nm 컬럼온도 : 2 C 화합물 1. Uracil 2. Propranolol. Butylparaben 4. Diprophylphthalate 5. Naphthalene 6. Amitriltyline 7. Acenaphthene www.waters.com/symmetry 21

XTerra MS, Shield RP, Phenyl 컬럼은실리카및폴리머본딩상의최고의특성을접목시킨하이브리드입자특허기술을 접목시킨제품입니다. 하이브리드입자기술은입자합성시 실라놀 개중 1 개를메틸기로바꿉니다. 이는초기입자합 성단계에서만가능하며, 이와같이추가된메틸기는기본입 자의근간에서필수적인역할을합니다. 그결과, 높은 ph 분 리에사용가능하고염기성화합물에서우수한로딩및피크 모양을제공하는기계적강도를지닌입자가만들어집니다. 피사용자들이이러한한계를극복하기위해시도한방법중하나는폴리머기반정지상을사용하는것입니다. 그러나폴리머는낮은효율성과기계적강도그리고폴리머기반컬럼에서실리카기반컬럼으로분석법을전송할때예측불가한피크용리순서때문에실리카만큼인기를누리지못했습니다. 하이브리드입자기술 (Hybrid Particle Technology) 은두재료의최고장점을취하고각재료의단점을극복하면서이러한제약을해결합니다. 그결과, 우수한기계적강도와효율성을실현할뿐아니라염기에서우수한피크모양을제공하고분석크로마토그래피에서정제크로마토그래피로손쉽게확장할수있는완건한재료가탄생했습니다. 역상 HPLC 분리의대부분은실리카기반정지상에서일어납 니다. 실리카는오래전부터우수한효율성, 기계적강도등 을자랑해왔습니다. 그러나실리카는염기및한정된 ph 범 위에서피크모양불량의문제가발생합니다. 크로마토그래 일반실리카대 XTerra 제조공정비교 일반적인실리카제조공정본딩및엔드캡실리카입자 H H H H H H H H H H H H H H H H H n 최저표면범위 n Poor Peak Shape n ph 범위 2 8 Polar Group Polar Group C H 2 C H C H C H XTerra MS C 18 RP18 RP8 Phenyl 비본딩실리카입자 폴리톡시실란 (PES) 테트라에톡시실란 (TES) 입자크기 2.5,.5, 5, 10µm.5, 5, 10µm.5, 5, 10µm.5, 5µm 입자모양구형구형구형구형 Pore size 125Å 125Å 125Å 125Å Carbon Load 15.5% 15.0% 1.5% 12.0% End-capped Yes Yes Yes Yes * 예상치또는근사치입니다. XTerra 제조공정표면변경이상의기술본딩및엔드캡 XTerra 입자 HC HC HC H HC H CH HC H H H CH CH HC H H CH CH HC H H H HC CH H CH CH n 가장우수하고최고의동질성을자랑하는범위 n 1/ 적은실라놀 n 더우수한피크모양 n ph 범위 1-12 비본딩 XTerra 입자 메틸폴리에톡시실란 (MPES) 테트라에톡시실란 (TES) 메틸트리에톡시실란 (MTES) 22

폴리머 ph 에서의실리카분리 XTerra RP18: 4.6 x 150mm ph 10.7 1.2 AU 0.8 1 AU 0.4 2 6 4 5 0 10 20 분 폴리머컬럼 : 4.1 x 150mm ph 10.7 0.5 0.4 1 0. AU 0.2 0.1 0 2 4 6 5 10 20 분 LC 조건 이동상 A: 20mM NH 4 H, ph 10.7 이동상 B: acetonitrile 유속 : ml/min Gradient: 시간 프로파일 ( 분 ) %A %B 0.00 70 0 25.00 40 60 28.00 40 60 주입부피 : 5µL 온도 : 실온 검출 : UV @ 220nm 기기 : Waters 2690, 996 PDA 화합물 1. Codeine 2. Yohimbine. Thebaine 4. Cocaine 5. Resperine 6. Methadone www.waters.com/xterra 2

WATERS SPHERISRB 컬럼 Waters Spherisorb 컬럼은과학문헌에서가장널리참조되는 HPLC 컬럼입니다. Waters Spherisorb 컬럼이사용된분석의초록이 2,000 편이상발표되어분석법개발프로세스에도움이될매우광범위한검증된분석법과애플리케이션을 제공합니다. Waters Spherisorb 컬럼은다양한입자크기 (, 5, 10µm) 와본딩상으로제작되어사용자의크로마토그래피요구사항을해결합니다. 뿐만아니라 Waters Spherisorb 컬럼의고품질본딩상으로여러다양하고특별한분리선택성을실현할수있 습니다. Waters Spherisorb 분석컬럼은업계표준 Parker 형컬럼엔드피팅을갖추었습니다. Waters Spherisorb 카트리지컬럼 은재사용가능한 Parker 형카트리지엔드피팅이필요합니다. Spherisorb www.waters.com/spherisorb 리간드유형 DS2(C 18 ) DS1(C 18 ) DSB(C 18 ) C 8 C 6 C 1 NH 2 (Amino) 입자크기, 5, 10μm, 5, 10μm 5μm, 5, 10μm, 5, 10μm, 5, 10μm, 5, 10μm 표면적 220m 2 /g 220m 2 /g 220m 2 /g 220m 2 /g 220m 2 /g 220m 2 /g 220m 2 /g 입자모양 구형 구형 구형 구형 구형 구형 구형 Pore ze 80Å 80Å 80Å 80Å 80Å 80Å 80Å Carbon Load 11.5% 6.2% 11.5% 7.75% 4.7% 2.15% 1.9% Ligand Coverage 2.98µmol/m 2 1.49µmol/m 2 2.98µmol/m 2.12µmol/m 2.6µmol/m 2 2.97µmol/m 2 2.64µmol/m 2 End-capped Yes No Yes Yes Yes No No 리간드유형 Phenyl CN(Nitrile) D/CN W(lica) SCX SAX 입자크기, 5, 10μm, 5, 10μm 5μm, 5, 10μm 5, 10μm 5, 10μm 표면적 220m 2 /g 220m 2 /g 220m 2 /g 220m 2 /g 220m 2 /g 220m 2 /g 입자모양 구형 구형 구형 구형 구형 구형 Pore ze 80Å 80Å 80Å 80Å 80Å 80Å Carbon Load 2.5%.1% 5% 해당없음 4% 4% Ligand Coverage 2.72µmol/m 2.29µmol/m 2 1.15µmol/m 2 해당없음 End-Capped No No Yes 해당없음 No No 24

NVA-PAK 컬럼 Nova-Pak 컬럼의본딩상은 4µm 및 6µm 입자크기로제공되어우수한분리능을제공할뿐아니라더빠르고효율적인크로마토그래피를지원합니다. 더작은입자크기와짧은컬럼길이덕분에복잡한혼합물에서분리능을유지하면서 용매소비를줄일수있습니다. 4µm 입자크기패킹의분석컬럼은 75, 150, 00mm 길이의스틸컬럼입니다. 재사용가 능한엔드피팅과함께사용하는스틸카트리지컬럼은 50, 100, 150, 250mm 길이로제공됩니다. 분취 (Semi-preparative) Prep Nova-Pak HR 컬럼은 6µm 입자크기로패킹되었으며탁월한분리가능범위를제공합니다. Prep Nova-Pak HR 컬럼의고효율패킹덕분에더적은양의용매로더빨리분리를수행하고더농축된분취물을얻을수있습니다. 따라서정제 크로마토그래피비용이절약됩니다. 모든 Nova-Pak 컬럼은 Waters 의 cgmp 제조시설에서가장엄격한 QC 절차에따라패 킹되므로배치간재현성이보장됩니다. Nova-Pak www.waters.com/nova-pak Chemistry C 18 C 8 Phenyl CN lica Prep HR C18 Prep HR lica 입자크기 4µm 4µm 4µm 4µm 4µm 6µm 6µm 입자모양 구형 구형 구형 구형 구형 구형 구형 Pore ze 60Å 60Å 60Å 60Å 60Å 60Å 60Å Carbon Load 7% 4% 5% 2% 해당없음 7% 해당없음 End-Capped Yes Yes Yes Yes 해당없음 Yes 해당없음 25

RESLVE 컬럼 비엔드캡 Resolve 패킹은 Waters의다른패킹재와크게다릅니다. 크로마토그래피결과는대개잔류성이더강한극성화합물에서가장확실하게드러납니다. 염기화합물은이동상 modifier 를사용하여크로마토그래피를처리할수있습니다. 이를테면과도한 peak tailing을줄이는이온쌍시약이있습니다. Resolve C 18 및실리카컬럼은고분리능이필요한애플리케이션에사용할수있습니다. Resolve www.waters.com/resolve 리간드유형 lica C 18 C 8 CN 입자크기 5, 10µm 5, 10µm 10µm 10µm 입자모양 구형 구형 구형 구형 Pore ze 90Å 90Å 90Å 90Å Carbon Load 10 % 10% 5% % End-Capped 해당없음 No No No DELTA-PAK 컬럼 Delta-Pak 컬럼은펩타이트, 단백질, 천연물의분리에안성맞춤이며, 큰분자분리에최적화된 2 가지 pore size 로제공됩니다. Delta-Pak 컬럼은일관성있고예측가능한방식으로컬럼포맷간확장을지원하는것으로유명합니다. 즉정제를 목적으로하는과학자는밀리그램 ~ 그램단위의타겟화합물을분리할수있습니다. 고도로안정된 Delta-Pak 본딩실리 카는고효율 5μm 및 15μm 입자크기로제공됩니다. Delta-Pak www.waters.com/delta-pak 리간드유형 C 18 C 18 C 4 C 4 입자크기 5, 15μm 5, 15μm 5, 15μm 5, 15μm 입자모양 구형 구형 구형 구형 Pore ze 100Å 00Å 100Å 00Å Carbon Load 17% 7% 7% % End-Capped Yes Yes Yes Yes 26

최초의 HPLC 패킹재는구형이아닌, 불규칙한형태의입자로구성되었습니다. 일반적으로이러한컬럼은구형입자로패킹된컬럼에비해기계적안정성과효율성이떨어집니다. 하지만이러한한계에도불구하고이흡착제를사용해야하는분석법이많습니다. Waters는대표적인흡착제및본딩소재제조업체로서 40년넘게일관성과신뢰성을지닌컬럼성능을선보여왔으며, 앞으로도이브랜드를지속적으로지원할것입니다. µbndapak/bndapak 컬럼 분석법에서 μbondapak 컬럼이필요할경우 μbondapak C 18 패킹재가들어있는컬럼은단하나밖에없습니다. 많은업체가 μbondapak 수준 의선택성을내세우지만, 어느하나도 Waters의가장엄격한 QC 배치테스트를통과할수없습니다. μbondapak 또는 BondaPak 패킹재는 197년부터해마다재현성을입증해왔으며, 이에힘입어 μbondapak 컬럼은가장광범위하게참조되는 HPLC 컬럼브랜드중하나가되었습니다. µbondapak/ Bondapak www.waters.com/bondapak 리간드유형 C 18 Phenyl CN NH 2 입자크기 10μm 10μm 10μm 10μm 입자모양 불규칙 불규칙 불규칙 불규칙 Pore ze 125Å 125Å 125Å 125Å Carbon Load 10% 8% 6%.5% End-Capped Yes Yes Yes No µprasil/prasil 컬럼 μporasil 및 Porasil 입자는최초로상용화된 LC 분리용전체다공성패킹재중하나였습니다. μbondapak C 18 의역상분리기능과달리 μporasil 컬럼의비본딩실리카기반재료는다양한샘플유형에서순상분리를지원하도록개발되었습니다. µporasil/porasil www.waters.com/porasil 리간드유형입자크기입자모양 Pore ze Carbon Load End-Capped 실리카 10, 15-20μm 불규칙 125Å 해당없음해당없음 27

? QCRM(Quality Control Reference Material) 은어떤크로마토그래피시스템에서도쉽고확실하게그성능을모니터링할수있도록엄선된표준품의혼합물질로구성되었습니다. QCRM을사용하여샘플분석이가능한상태로컬럼과시스템을준비할수있습니다. 또한정기적으로 QCRM을사용함으로써크로마토그래피시스템의벤치마킹을수행하고시간의경과에따른성능추이를분석하여더수월하게문제점을미리파악하고신속하게해결할수있습니다. 크로마토그래피분석은복잡하고이동상조성, 컬럼유형, 검출방법등여러변수의영향을받으므로 Waters는이러한차이점을염두에두고시스템테스트용 QCRM 혼합물질의포뮬레이션을마련했습니다. 기기와검출기의보정, 검증, 튜닝관련표준품에대한추가정보와이용가능한표준품및시약의전체목록은 asr.waters.com 에서확인하십시오. 제품이름 용도 크로마토그래피모드 Systems 내용 Neutrals QCRM 가지중성 probe 를사용하여이동상 ph 와상관없이크로마토그래피성능정보를제공합니다. 역상 UV 검출기가있는모든 UPLC/HPLC 시스템 가지성분혼합물 : 10μL/mL acetone, 0.25mg/mL naphthalene 0.4mg/mL acenaphthene In a 2mL solution of 50/50 acetonitrile/water. 실온에서보관. Reversed-Phase QCRM Void marker 1 개, 중성 probe 개, 산성 probe 1 개, 염기성 probe 2 개를사용하여이동상 ph 를포함하는크로마토그래피성능정보를제공합니다. 역상 UV 검출기가있는모든 UPLC/HPLC 시스템 7가지성분혼합물 : 0.016mg/mL uracil, 0.02mg/mL butylparaben, 0.06mg/mL naphthalene 0.4mg/mL propranolol, 0.4mg/mL dipropylphthalate 0.2mg/mL acenaphthene, 0.1mg/mL amitriptyline In a 2mL solution of 65/5 methanol/20mm K2HP4 buffer ph 7. 실온에서보관. HILIC QCRM Void marker 1 개, 극성중성 probe 1 개, 극성염기성 probe 1 개를사용하여 HILIC 모드의이동상 ph 를포함하는크로마토그래피성능정보를제공합니다. HILIC UV 검출기가있는모든 UPLC/HPLC 시스템 4가지성분혼합물 : 0.0190mg/mL acenaphthene, 0.007mg/mL thymine 0.007mg/mL acenine, 0.0077mg/mL cytosine In a 1mL solution of 20/80 acetonitril/water. 도착즉시 2 5 C에냉장보관. QDa QCRM 최적의농도에서 ESI(+-) 의광범위한 m/z 를수용하기위해 8 가지성분혼합물을사용하여크로마토그래피및 quadrupole 질량분석기정보를제공합니다. 이용액은크로마토그래피성능측정을위해 1 개의중요한쌍을포함합니다. 역상 ACQUITY QDa 검출기가있는모든 UPLC/HPLC 시스템 9 가지성분혼합물 : 100.0μg/mL acetaminophene, 45.0μg/mL caffeine 50.0μg/mL sulfaguanidine, 10.0μg/mL sulfadimethoxine 25.0μg/mL val-tyr-val, 6.0μg/mL verapamil, 6.0μg/mL terfenadin, 25.0μg/mL leucine=enkephalin, 19.0μg/mL reserpine In a 1mLsolution of 2.5% LC-MS acetonitrile, 76.5% LC-MS water 0.007% formic acid. 2 5 C 에냉장보관. Quad LCMS QCRM 최적의농도에서 9 가지성분혼합물을사용하여크로마토그래피및고성능질량분석기정보를제공합니다. 이용액은크로마토그래피성능측정을위해 2 개의중요한쌍을포함합니다. 역상 Quadropole MS 가있는모든 UPLC/HPLC 시스템 8 가지성분혼합물 : 100µg/mL acetaminophen, 50µg/mL sulfaguanidine 10µg/mL sulfadimethoxine, 25µg/mL val,-tyr,-val 6µg/mL verapamil, 6µg/mL terfenadine 25μg/mL leucine-enkephalin, 8μg/mL reserpine 19/81 acetonitrile/water 0.008% formic acid. 도착즉시 2 5 C 에냉장보관. LCMS QCRM 최적의농도에서 9 가지성분혼합물을사용하여크로마토그래피및고성능질량분석기정보를제공합니다. 이용액은크로마토그래피성능측정을위해 2 개의중요한쌍을포함합니다. 역상 고성능 MS 가있는모든 UPLC/HPLC 시스템 9가지성분혼합물 : 10.0µg/mL acetaminophen, 1.5µg/mL caffeine 5.0µg/mL sulfaguanidine, 1.0µg/mL sulfamethoxine, 2.5µg/mL val-tyr-val, 0.2µg/mL verapamil 0.2µg/mL terfenadine, 2.5µg/mL leucine-enkephalin 0.6μg/mL reserpine In a 500μLsolution of 5.7% acetonitrile/94.% water. 도착즉시 2 5 C에냉장보관. 28

추가자료 설명 QCRM(Quality Control Reference Material) 과기기성능벤치마킹백서 Waters 중성 QCRM(Quality Control Reference Material) 을사용하여일반적인시스템문제해결애플리케이션노트 Waters 컬럼및분석표준물 / 시약선택가이드 문헌코드 72000455EN 72000465EN 720002241EN 이브로셔에소개된모든컬럼의파트넘버목록은 waters.com/findmycolumn 에서확인하십시오. Waters 역상컬럼선택차트 www.waters.com/selectivitychart Waters 컬럼어드바이저 www.waters.com/columnadvisor ipad 용 Waters 부품선택기및선택성차트 www.waters.com/apps 29

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