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1 1 씨감자 생산 체계와 바이러스병 검사 (화란체계를 중심으로) 함 영 일 대관령원예농협 기술자문위원 To whom correspondence should be addressed. 목 차 1. 서언 2. 화란 씨감자 생산단계와 검사 2.1. 보증된 씨감자의 중요성 최소한의 질적 요구조건 주요 이점 화란 씨감자의 품질 검사와 모니터링 2.2. 병해 바이러스병/ 세균병 2.3. 영양계 선발과 단계분류 영양계 선발 / 단계 분류 2.4. 검사기관(NAK)의 엄격한 검사 요구 법적 근거/ 검사 과정 2.5. 포장검사 품종의 순도/ 병해/ 기타요인 / 적기의 경엽파괴(제거) 2.6. 수확 후(후대) 검사 2.7. 소단위 검사(Lot inspection) 엄격한 표준/ 식물검역 문제 2.8. 여러 소비자와 여러 요구사항의 비교 2.9. 보증서/식물사증 3. 씨감자의 품질관리(검사) 3.1. 서언 /3.2. 씨감자 품질 관리와 씨감자 검사 4. 맺음말 5. 참고문헌

2 2 1. 서언 1) 감자는 주요 식량작물 2) 감자는 특수한 작물 - 최고의 영양 번식적으로 지하에서 생산되는 괴경 작물 - 부피가 크고, 무게가 많다(수분, 부패 용이) 3) 감자는 다양한 증식 방법의 작물 - 재래적 방법 ; 건전하고 양질의 씨감자로 파종 수확 후 식용, 가공용, 종자용 - 다용도의 다목적으로 번식 ; individual cells, tissues, meristems, sprouts, nodal cuttings, stem parts, tubers and tuber parts, true seeds, other plant parts 4) 고품질 감자생산에는 양질의 씨감자가 필요 - 다음은 파종 재료 생산과 관련하여 다른 주요 식량 작물과 구별되는 이유 1 낮은 증식율 2 영양 번식 작물로 종자 퇴화 약함 3 괴경은 수확 후 휴면 상태 4 같은 줄기에 달린 괴경도 크기, 건물량, 건물 구성분, 생리 조건에서 엄청난 차이 - 생산지, 시기 등에 따라 씨감자 괴경 생리(행동) 차이- 사용자 인식 해야 5 여러 곳에서 한 해에 여러 작기의 감자 재배 6 씨감자 가격이 높다 (일부 국가는 총 생산비의 50-70%) 7 양질의 씨감자 생산에 관련된 다양한 기술을 이용 가능 그림 1. 퇴화율의 고저 조건이 씨감자 증식 후 바이러스 이병율에 미치는 영향

3 3 2. 화란 씨감자 생산 단계와 검사 2.1. 보증된 씨감자의 중요성 최소한의 질적 요구 조건 유럽 연합은 가능한 효과적으로 수요와 공급을 조정하기 위해 종자와 씨감자에 대한 최소한의 질적 조건을 요구하고 있다. 이런 요구는 유럽 연합 내에 유통되는 모든 종자와 파종 재료에 해당된다. 유럽 연합 회원국 내에서 거래되는 모든 씨감자들은 최소한 이들 유럽 연합의 최소 요구 조건에 합당하여야 한다. 개개 회원국은 원하면 엄격한 국가 요구 조건을 사용할 수도 있다. 그 부분에 대한 화란의 씨감자 분야는 NAK 와 화란 정부와 협력하여 엄격한 국가 요구 사항을 정하였다 주요 이점 화란의 농업 분야는 이들 엄격한 요구 사항에 따를 수 있는 이유로는 좋은 기후, 거의 완벽한 토양 조건과 재배자의 높은 질적 수준과 같은 장점에 더하여, 관련 농업 기구와 우수한 하부 조직과의 좋은 관계를 포함한다. 더욱이 화란 농업은 기록 유지, 검사, 등록 등의 오랜 역사를 가지고 있다 화란 씨감자의 품질 검사와 모니터링 NAK(화란 종자 및 씨감자 검사소)가 검사와 보증에 대한 장기간의 경험이 있다. 다음과 같은 몇 가지 항으로 나누어 병해, 계통 선발, 분류, 포장 검사, 후대 검사, 종자 검사, 유럽 연합 표준과 관련되어 화란에서 시행되는 표준과 NAK 보증/식물 허가증 등에 대해 살펴본다 병해 바이러스와 세균병이 화란에서 씨감자 재배 시 고려하여야 할 가장 중요한 병들이다 바이러스병 세균병 2.3. 영양계 선발과 단계분류 영양계 선발 단계 분류 씨감자의 단계 분류를 정리하면 다음과 같은 보다 깊은 주의가 필요하다.

4 4 1) 사용된 씨감자의 단계 2) 포장 검사의 결과 3) 지정 날짜에 경엽이 고사되었는지 4) 표본의 검사 즉 소위 수확 후(후대) 검정의 결과 in vitro Nuclear stock(급속증식, 무병) 선발모주 in vivo 급속증식(minituber, 아삽법 생산) 기내재료 이용 1st yr clones NS 증식 또는 2nd yr clones 매우 낮은 퇴화조건에서 Pre-basic seed 증식(영양계 선발, 전문가검사) 3rd yr clones 4th yr clones S = 3, 4, 5th yr clone 낮은 퇴화에서 SE 전문재배자 증식 Basic seed E 퇴화억제 조건 A 등록 씨감자 재배자 B Certified seed C 씨감자 사용자 농가 그림 2. 영양계 선발법이 포함된 씨감자 생산 계획(Seed production program)

5 5 세계의 씨감자 증식 체계 Generation (G1) (G2) (G3) (G4) (G5) (G2-G3) (G5-G7) Nuclear stock Pre-basic seed Basic seed Foundation Registered Certified(화란) Pre-elite seed Elite Registered Prenuclear seed nuclear seed E1 E2 F1 F2 F3 F4 cert. 표 2. 주요국가 씨감자 증식 계획 Canada Min., US Idaho Brazil Japan China S. Korea N. Korea G0 G1 G2 G3 G4 G5 G6 pre-elite nuclear N NS NS PE NS NS elite 1 PF 1 G1 PBS minituber minituber minituber minituber E 2 PF 2 G2 BS net house E1(1 급원 기본식물 원원종 2.4. 검사기관(NAK)의 엄격한 검사 요구 E 3 F 1 G3 RS 기본포 E2(2 급원 원원종 1 급종자 E 4 F 2 G4 CS 원원종포 1 급양종 원종 2 급종자 foundation C G5 원종포 2 급양종 보급종 3 급종자 certified G6 채종포 (4 급종자) 검사의 목적은 질 좋은 씨감자의 생산과 사용을 촉진하기 위함이다. 결과적으로 씨감자는 NAK 의 검사 규정에 있는 고도의 요구에 부응해야 한다 법적 근거 NAK 는 1932 년에 설립되었으며 화란 농업, 자연 관리, 어업성이 NAK 를 화란에서 농업 종자와 씨감자를 검사하고 보증하는 권한을 부여한 유일한 기관이다. NAK 는 화란 종자와 식물 재료 법령과 화란 농업, 자연 관리, 어업성의 법규를 근거로 문제되는 사항에 대해 검사를 수행한다. 농업 종자와 씨감자를 재배하거나 관리하거나 보증을 신청한 누구도 NAK 의 회원이 되어야 한다. 더욱이 화란에서는 보증된 씨감자만을 사용되고 거래될 수 있다. NAk 검사 -- 씨감자 39,000ha 보증 -- 씨감자 1, TM 목초 종자 24,000ha 종자 60,000TM 곡류와 기타 ha 검사 과정

6 6 전체의 검사 과정을 통해 NAK 는 규칙적으로 종자의 동일성을 조사한다. 6 월 초순부터 경험 많은 100 명의 검사관들이 씨감자 약 39,000ha 를 검사하기 시작한다. 이러한 육안 검사에 추가하여 실험실에서 모든 필요 조건에 합당한지를 조사하기 위해 보충적 검사를 수행한다. 씨감자의 경우 NAK 는 건강 문제에 가장 주의를 귀울인다. 검사 행위에는 다음과 같은 중요한 요소를 포함한다. * 포장검사 * 후대검정 * 소단위 종자 검사 2.5. 포장검사 포장 검사는 6 월 초순에 시작되는데 이때가 전체 감자 작물이 출현되었을 때이다. NAK 검사관은 각 지역당 최소한 3 번을 검사해야 하는데 이렇게 하면 각 지역은 완전히 포함된다. 품종의 진실성에 대한 검사뿐만 아니라 다음 사항에 대해서도 씨감자는 검사된다. * 품종의 순도 * 병의 존재 * 기타 요인 품종의 순도 감자 작물의 S, SE, E 단계는 다른 품종의 어떤 식물 또는 품종적으로 순수하지 않은 식물(변종)도 포함될 수 없으며 A 단계에 대한 표준은 10,000 주중 1 주 이상 이면 안되고 B 단계는 2,000 주중 1 주 이상이면 안되고, C 단계는 1,000 주중 1 주 이상이면 안 된다 병해 작물의 건강 상태는 다음의 병해의 존재의 정도로 평가한다. * 바이러스 병(잎말림, 모지이크, 줄기 변색, AMV) * 버티실리움 마름병(V. alboatrum, V, dahliae) * 흑각병과 줄기 무름병(Erwinia spp.) 표 1 에 나타난 허용 범위는 이들 병에 적용된다. 여러 가지 병의 %는 최소한 4x100 주를 검사하여 결정된다. 바이러스와 세균병은 검역에서 세밀한 주의가 필요하다. NAK 는 이들 병에 대한 엄격한 표준을 적용하며 가장 중요한 것이 표 3 에 열거되어 있다.

7 7 표 3) 화란의 씨감자 단계별 포장 검사 시 적용되는 바이러스 병 허용범위(%) S / SE E A B 심한 모자이크/잎말림 약한 모자이크 총계 흑각병(Erwinia spp.) 기타 요인 * 작물의 조숙선과 균일성 정도 * 지역 주변에서의 이병의 위험성 * 지역 자체 내의 이병의 위험성 * 돌감자의 존재 * 일차 바이러스의 발생 * 생리적 작은 감자, 라이족토니아 궤양병, 그리고 건조, 상해, 우박, 삼림 지역의 딱정벌레등의 피해, 기타 등등 적기의 경엽 파괴(제거) 경엽 제거되는 시기는 다음 사항에 달려 있다. * 진딧물 숫자 즉 매일 조사하는 황색 수반이나 흡인 채집기로 잡은 숫자 * PVY-n 에 대한 품종의 이병성 * 포장에서의 이병 압력과 작물의 성숙도 2.6. 수확 후(후대) 검사 후대 검정은 수확된 괴경을 바이러스 존재에 대해 검사하고 바이러스 이병, 특히 후기 감염은 포장에서 항상 눈에 띄는 것은 아니므로 NAK 가 바이러스 존재를 찾거나 씨감자의 건강 상태에 대한 높은 확실성을 얻기 위해 포장 검사에 추가해서 실험실 검사를 수행하는 이유이다. 끝까지 NAK 는 포장당 평균 200 개의 괴경을 표본하고 각 괴경의 정아를 온실에 파종한다. 이들 눈에서 자란 식물체를 ELISA 검정한다. 후대 검정에서의 허용 범위는 다음 표 4)에서와 같다. 단 계 허용범위(%) ; (포장) S/SE 0.5 (0.03) E 1.0 (0.1) A 6.0 (2.0) B 10.0 (4.0) 표 4) 화란의 후대 검사에서 적용되는 바이러스 허용 범위

8 8 후대 검정은 항상 S 와 SE 단계의 경우에 수행 되어야 하고 다른 단계의 경우 후대 검정을 면제 받기도 하는데 특히 휠씬 덜 이병성인 품종의 경우에 그렇지만 조건과 경엽이 추천 날짜에 제거 되었느냐와 일차 바이러스 병에 이병되었느냐에 따라 다르다 소단위 검사(Lot inspection) 씨감자는 재배자와 상인이 공급을 위해 준비하지만 씨감자의 어떤 씨감자의 일부도 NAK 의 검사관이 검사 할 때 까지는 목적지까지 운반될 수 없다. 검사관이 각 부분의 씨감자의 다음을 검사한다. * 괴경 병의 존재(건부 또는 습부병, 더뎅이병 또는 라이족토니아 궤양병) * 비정상의 존재(예. 싹, 흑반, 압상, 기형, 저온 피해) * 무게 * 오염의 존재(토양 부착) * 괴경의 생리적 조건(연화된 괴경) 엄격한 표준 또한 NAK 는 감자씨스트선충의 씨스트의 존재를 위해 선별 동안 흘러나온 토양의 표본을 검사한다. 씨감자는 시스트가 없어야 한다. 재배자가 공급을 위해 씨감자를 준비 할 때 NAK 검사관은 최소한 하루에 한번씩 농장을 방문해야 한다. 허가된 씨감자나 씨감자의 일부만 목적지로 공급되어진다. NAK 가 적용하는 표준은 유럽 연합이 그 지역 내 씨감자 유통을 위해 만든 최소한의 표준보다 더 엄격하다 식물 검역 문제 NAK 는 화란 식물 검역소의 감독 하에 유럽 연합 내 여러 국가의 씨감자 식물 검역 문제를 검사한다. 만일 씨감자 일부에서 검역병에 안전하면 허가의 증거로 NAK 의 보증서와 합친 유럽 연합의 식물 사증을 발급한다. 유럽 연합 밖으로의 행선지에 대한 씨감자의 식물 검역 문제는 화란 식물 보호소(PD)에 의해 검사된다 여러 소비자와 여러 요구 사항의 비교 표 5. 화란과 EU 의 포장 검사, 후대 검사, 괴경(소단위)검사에서의 바이러스 병 허용 범위(%) 검사항목 화 란 유럽 연합(EU) 단계 허용 범위 단계 허용범위 포장검사

9 9 S,SE,E 품종의 순도 A B S,SE,S Erwinia spp. A B 바이러스 S, SE E A B O severe mosaic/ mild total leafroll mosaic mosaic 기본종 0.25* 보증종 0.5* 기본종 2.0 보증종 4.0 total 기본종 4.0* 보증종 10.0* 2.9. 보증서/식물사증 씨감자의 종자를 확실하게 인증한 후 보증한다. ㅇ NAK 보증서/EU 의 식물사증의 기록 사항 1) 단계(S, SE, E 단계: 백색보증서, A, B 단계: 청색 보증서) 2) 보증 씨감자(청색 보증서) 또는 기본 종 씨감자(백색보증서) 3) 종: 감자 4) 품종명 5) 재배자가 NAK 에 등록한 번호 6) 보증 날짜 7) 감자 유래된 국가 8) 선별 크기(mm) 9) 생산 년도 10) 지역 11) 보증 번호 12) 포장 단위 13) 코드 3. 씨감자의 품질 관리(검사) 3.1. 서언 - 씨감자의 품질 결정은 ; 1) 유전적 기준

10 10 2) 물리적 기준(크기,싹의 개수,이상형, 표피 벗어짐) 3) 생리적 기준(휴면,진정 또는 잠재 맹아수,생육 활성) 4) 건강 표준(괴경 전염 병해) 1 품질 관리와 보증의 필요성 - 좋은 종자는 높은 수량을 얻는데 가장 중요 (Y= X r2=0.85. by Striuk) - 씨감자 생산 계획의 기본은 1)바른 유전자를 가진 무병 시작 재료의 사용 2)off-type 와 괴경 전염병에 대한 낮은 허용 범위를 가진 건전한 prebasic 과 basic seed 의 사용 3) 포장 조건 하에서의 basic seed 의 증식 4) 포장 증식에 사용되는 씨감자의 정기적인 갱신 2 질 관리, 검사와 보증은 법적 테두리와 국제적 회의와 동의 필요 - 전형적 씨감자 체계가 적절한 기능을 하기 위해 요구되는 복잡한 법적 테두리 * 국제 유전 자원의 안전 이용을 위한 기술 안내 기준(FAO, IPGRI) * 국제 식물 유전 자원 보호 협약(FAO) * 식물 육종가 권리 국제 협약(UPOV) * 종자 보증 표준화 국제 협약(ISTA) 3.2. 씨감자 품질 관리와 씨감자 검사 검사 기구, 검사의 주요 원리, 주요 과정과 주요 검역 병과 검역병 전파 억제 방법 1 종자 질 관리와 씨감자 보증의 원리 - 종자 질 관리의 주목적은 외국 병해충 유입 방제, 국내 병해충 전파 억제 또는 감소 - 씨감자의 질 관리와 종자 검사는 다른 작물 보다 훨씬 복잡. 이유는 영양 번식 되어 많은 병해충이 축적되는 경향 - 검사의 주목적은 소단위 종자를 각 단계마다 최소의 요구(허용 범위) 사항을 기본으로 여러 질적 단계 분류하는 것이다. 이들 요구는 다음 사항으로 절충된다. * 건전 종자 생산 가격 * 어떤 씨감자 질을 생산하는 가능성 * 조자 사용자의 필요

11 11 * 수출을 위한 요구, 만일 생산된 종자가 국제 시장에서 팔린다면 - 포장에서의 매년 증식으로 씨감자는 최소한 한 단계 격하된다. 낮은 단계의 보증서를 받기 위해 종자는 그 단계의 최소한의 요구에 맞추어야 하는데 이런 자동 격하가 질 정책의 주요 원리 중하나. 필수적인데 이것이 씨감자 재배자로 하여금 정기적으로 종자 증식을 위해 양질의 종자를 구매토록 한다. - 씨감자 생산에서 가장 중요한 증식 재료의 형태는 nuclear stock, pre-basic seed, basic seed, certified seed 와 농민의 종자. 이들의 생산 계획은 화란의 경우로 그림 10-2 에 나타나 있다. 그림에서 보면 원하는 형태는 1 년 차 영양계가 자라고 검사된 씨감자에서 모주(mother plant) 로 선발된다. 표 6. 씨감자 생산 단계(generation)와 바이러스 검출(indexing) 방법 (Shepard,1975 & Salzar, 1996) 증식 장소 세대 바이러스 검사 온 실 포 장 G0 (in vitro micropropa.) G1 (small tuber) G2 G3 G4 G5 G6 * G3, G4, G5 단계는 후대(수확 후)검정(ELISA, 육안) 2 검사(검정) 과정 - 식물체의 100% 검사, 육안 (composite samples by ELISA, NASH, indicator plants, etc.) - 식물체의 25% 검사, 육안 (composite samples by ELISA or NASH) 주/plot ELISA, 육안 주/4ha ELISA, 육안 - 육안(field inspection) - 육안 - 육안 - 육안 - PBS 는 엄격한 관리 하에서 BS 생산용으로 증식 - 정부, 준 정부 또는 육종가가 수행 씨감자 생산의 마지막 단계는 전문 씨감자 재배자에 의해 상업적으로 씨감자 증식 - 검사는 모든 단계에서 요구 - 검사 체계에서 특히 씨감자 건강은 복잡한 문제, 병해충 발달은 여러 가지 요인에 영향; 장소, 환경, 기후, 기상, 시작 재료의 질, 농사와 작물의 생태, 병의 존재, 병의 매개체와 해충 그리고 병해충 전파나 이병을 막기 위해 취하는 방법 등. 더욱이 이병 또는 증상 발현은 여러 생산 단계에서 나타남. 씨감자 생산 단계에서 가능한 검사 과정의 개요

12 12 씨감자 생산 초기단계 - 영양계 선발 재료나 기내 식물에서 나온 재료를 trueness-to-type 을 검정하기 위해 중앙 포장의 동일 품종의 다른 영양계와 비교 파종전 - 씨감자 파종할 포장(크기, 접근성, 풍향, 영농성등) 검사 - 토양 표본의 실험실 검사 ; 예, 토양 전염병의 존재 - 파종해야 할 씨감자의 질(종서원, 단계, 보증 등) 검정 포장 단계 - 파종일 검사, 재배 기간 중 검사(진딧물 밀도, 종서원의 수) 경엽 제거일 검사 - 육안 검사(작물의 생육 상태, 작물 상태(stand), 적용 경종 방법, 이병주 제거 과정, 이병주, 이형주 발생(수와 %), 이웃 포장의 전염원 발생(격리, 거리)) - 실험실 검사(바이러스 검사와 동정 위한 포장에서 엽 표본 채취, 씨감자 생산 계획의 초기 단계의 식물/작물 대상(예; 1st yr clone-전주, 2nd yr clone-표본) 수확 후 단계 - 세균과 바이러스 검정(수확된 소단위(seed lot)에서 취한 괴경 표본의 검정) 저장 단계 선별과 포장 - 괴경(소단위) 검사(괴경 크기와 토양 부착, 이상/상해 괴경의 발생, 병해충 발생, 포장 재료와 단위 포장 무게 포장 검사 : 검사 기관(NAK 등), 다른 독립된 관리 기관 - 1 차 포장 검사는 이병 증상이 발현이 예상될 때 시작 - 최종 포장 검사는 경엽 제거 또는 자연적 경엽 황화 전에 실시. - 포장 검사 동안 중요한 표준 사항에는 품종의 순도, 작물의 균일성, 생산지에 발생하는 종자 전염 바이러스, 세균, 곰팡이의 감염 등 - 포장 검사 시 관찰은 어느 정도는 일반적이므로 수확 후 검사로 확인해야 한다. 표 7), 바이러스와 세균 검정을 위한 최신 검출 기술의 요약(Status 1999) 병원체 바이러스 바이러스, 바이로이드 세균 검정법 ELISA, DAS-ELISA, IEM PAGE, NASH, PCR(RT-PCR) 선택배지상 균총수, ELISA, IMS-CVP, IFC,

13 13 (blackleg, soft rot, ring rot 등E-ELISA, PCR * PCR 기술은 아직도 급속 개발 단계(최근 RT-PCR), 혈청 기술과 결합하여 immuno-pcr * 세균의 선택 배지와 PCR 은 항상 특이적, 민감적인 것만 아님 * 이들 기수의 복합이 가능 예, immuno-pcr, IMS-nested PCR 등 - 후대 괴경의 바이러스 이병을 줄이는 결정정적 방법은 적기에 경엽 제거 따라서 검사소는 재배자에게 매개충 집단이 너무 많아지기 전에 경엽 제거를 충고 국가에 따라 경엽 제거 날자는 강제적이거나, 단지 추천되거나 날자는 기후, 작물의 일반적 발달, 생산 씨감자의 단계, 품종에 따라 다르다. - 수확 후 검사는 경엽 제거와 수확 후에 실시나 보통 pre-basic seed 나 basic seed 만 상업용 씨감자(A 와 B 단계)는 적기 경엽 제거 되고, 포장 검사가 만족스러우면 생략 - 종자 검사: 공급 직전의 검사로 물리적 비정상, 상해, 크기, 맹아, 저장 병해충의 출현과 발생, 또한 부착 토양의 양이 중요. 4. 맺음말 감자는 중요한 작물로 전 세계적으로 널리 재배되고 있는 영양학적, 다이어트적, 전략적 식량으로 중요한 작물이다. 최근에는 인구가 많은 개발도상국에서의 재배의 중요성이 더욱 커지고 있는 이때 감자의 선진국인 화란의 씨감자 생산 체계와 검사 검정 체계를 검토해 보는 것은 씨감자 생산에 어려움을 겪고 있는 우리들에게는 이상적인 교과서로 비유 될 수 있는 매우 뜻 깊은 기회라고 생각된다. 이런 좋은 기회를 살려서 무병씨 감자 생산은 물론 유지 증식으로 현재의 단위 면적당 낮은 감자 수량을 획기적으로 증가시키는 전기로 삼았으면 하는 바램으로 이 글을 끝맺고자 한다. 5. 참고문헌 1 Striuk, P.C. and S.G. Wiesema., Seed Potato Technology. Wageningen Pers. Netherlands. 383pp. 2 Salazar, L.F., Potato viruses and their control. International Potato Center, Lima, Peru. 214pp. 3 Beukema and D. E. van der Zaag., Potato improvement (some factors and facts). Wageningen, Netherlands. 224pp. Disclaimer: "BioWave" is not political. The views and opinions expressed by its writers do not necessarily reflect those of the Biological Research Information

14 14 Center(BRIC). c Copyright 2008, the Biological Research Information Center(BRIC), Pohang , Korea. 본 글의 저작권은 "생물학연구정보센터 BioWave"에 있습니다. 일부 내용 인용 시 "생물학연구정보센터 BioWave ( Vol. 10 No. 11"으로 정보 출처를 밝혀야 합니다. 전체 내용에 대한 인용 시 생물학연구정보센터의 사전 허락 (mail: biowave@bric.postech.ac.kr Tel: ~8)을 받으신 후 전재가 가능합니다. (단. 원 저작자의 경우는 정보 출처만 밝히시면 됩니다.)

006 007 007 009 012 012 012 013 013 013 018 019 033 045 051 052 060 066 067 077 083 084 099 108 117 118 122 135 140 141 141 142 143 143 145 148 154 01 006 007 007 009 " # $ % 02 012 012 012 013 013 013

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