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1 RESEARCH ARTICLE Kor. J. Aesthet. Cosmetol., 밀싹에탄올추출물의 C57BL/6 mouse 에대한발모효과 류은미 1, 서관우 1, 기근홍 2, 신현재 1 * 1 조선대학교생명화학공학과, 2 조선대학교의학전문대학원병리학교실 Effect of Ethanolic Extract from Wheat Sprout on Hair Growth of C57BL/6 mouse Eun-Mi Ryu 1, Gwan-Woo Seo 1, Keun-Hong Kee 2, Hyun-Jae Shin 1 * 1 Department of Chemical & Biochemical Engineering, Chosun University 2 Department of Pathology, School of Medicine, Chosun University Abstract Exogeneous oxidative stress can cause rapid change of the hair follicles and melanocyte aging process, so it is an indicator of a programmed cell death (apoptosis) resulting in hair loss. In this study, effects of natural antioxidants from wheat sprout extract on hair growth of C57BL/6 mouse (female) were evaluated. Wheat sprout and/or wheatgrass provides chlorophyll, amino acids, minerals, vitamins and enzymes. Thus it could be used for hair-promoting ingredients. Hydrophobic layers (80% ethanol, open column) of wheat sprout (fr. 5 and fr. 8) were used, with minoxidil (3%) on five patients as a positive control. With one week adaption, hair growth of 6-week old C57BL/6 mouse (female) was observed after 4 weeks of back hair removal. Transdermal extraction and hematoxylin and eosin (H&E) staining and toluidin blue staining of skin tissue were used before observation with an optical microscope, which showed similar hair growth in the positive control minoxidil (3%) as wheat sprout (fr. 5), while slower in wheat sprout (fr. 8). The slaughtering cervical tissue at 4 weeks after the C57BL/6 mouse with wheat sprout (fr. 5) started the transition to growth. Hematoxylin & eosin stained histological analysis of wheat sprout (fr. 5) showed more follicles on the skin surface and smaller mast cells (shown with toluidin blue dye). In summary, wheat sprout extract (fr. 5) on C57BL/6 mouse in dermal application and histologic analysis promotes the hair growth, predicting an application of wheat sprout extract in a wide range of hair remedy products. Keywords: C57BL/6 mouse, Hair loss, Wheat sprout, Ethanolic extract, Staining Ⅰ 서 론 일반적으로모발의기능은외부의충격으로부터완충작용 과자외선차단, 한냉및마찰등외부자극으로부터인체를보호하며수은, 비소, 아연등의중금속을흡수하여체외로배출한다 ( 이상희와이종렬, 2010). 모발의주기는모발을성장시키는성장기단계 (anagen stage), 성장을일시적으로멈추는퇴 *Corresponding authors: Hyun-Jae Shin, Department of Chemical & Biochemical Engineering, Chosun University, Gwangju , Republic of Korea Tel.: , Fax: shinhj@chosun.ac.kr Received August 19, 2013; Revised November 1, 2013; Accepted November 16, 2013; Published December 30, 2013 행기단계 (catagen stage), 오래된모발을탈락시키는휴지기단계 (telogen stage) 와새로운모발이생성되는발생기단계 (new anagen stage) 로나눌수있다 ( 류은미등, 2010). 이러한모발은일정한주기에의해성장하고탈락하는과정을반복하는데이를헤어사이클 (hair cycle) 이라한다 ( 류은주와오강수, 2012). 그러나탈모가진행되면새로운모발이나와정상적으로자라지못한채빠지는경우가많고모발이가늘어지고성장기가짧아지며휴지기가길어지는현상도발생한다 ( 하병조, 2006). 탈모증이란정상적인피부에서비정상적으로모발이빠지는질병이다 ( 배현순등, 2010). 과거에탈모는노화현상으로인식되어왔으나최근에는유전적요인과함께스트레스, 서구화된식습관, 영양불균형, 사회활동의변화등의다양한원인으로탈모가진행됨이밝혀지고있다 ( 도은주등, 2011). 현재우리나라의탈모연령대는점점낮아지고있으며 20~30대 1051
2 Kor. J. Aesthet. Cosmetol., 의젊은층 ( 오현지등, 2012) 뿐만아니라적게는 10대청소년들도탈모로고민하는경우가많다 ( 최원준, 2007). 탈모가유발되면외모중심의현대사회에서는심리적불안감과위축감 ( 이은정등, 2009), 대인기피증, 무기력증등으로삶의질이저하될뿐아니라점차사회적으로고립되어간다 ( 김다희와김성남, 2010). 이러한탈모증상의치료방법중현재까지알려진치료로는약물복용또는도포요법, 광선치료, 면역치료, 모발이식술등이있다 ( 오현지등, 2012). 박화영등 (2009) 에의하면세계적으로남성형탈모증치료에 minoxidil 도포제의사용을승인한이후, 동 서양을막론하고경구 finasteride 제제와함께남성형탈모증의주된치료제로써사용되고있다. 발모기전은명확히밝혀지지않았지만혈관확장을통한영양공급증가및칼륨통로를여는효과등이모발성장을유도하는것으로생각되고있다 ( 이혜숙과황석연, 2009). 그러나약물요법은장기간사용해야하고심혈관계장애, 피부자극, 성기능감소, 기형유발 ( 안규성과황인철, 2009), 가려움증, 홍반, 표피박리, 건성화피부염과같은여러가지부작용을동반하기때문에최근에는천연물에대한관심이고조되고있다 ( 최혜민등, 2011). 밀 (Wheat, Triticum spp.) 은전세계적으로재배되는작물이며, 벼과의한해살이풀로높이는 1 m 내외이며소맥이라고도한다. 이러한밀은세계인구의약 40% 가주식으로이용하고있으며대표적인 3대작물에속한다 ( 김다은, 2012). 밀은품종이나재배지에따라차이가있으며국산밀의경우일반적으로전분 70%, 단백질 12% 내외, 수분 12%, 지질 2% 를함유하고있다 ( 최봉순, 2008). 밀배아에들어있는비타민 E는혈액의응고를방지하고혈전등이나암의원인이되는체내의산화자용을억제함으로써성인병을예방하고노화를방지한다고알려져있다 ( 신현태, 2006). 본연구에서사용된밀싹 (wheat sprout or wheat grass) 은밀이발아하는과정에서밀의마디부위가생성되기전의어린새싹을말한다 (Figure 1, 류경오, 2006). 밀싹에는아미노산, 미네랄, 비타민, 클로로필등의영양소가풍부하며뛰어난항산화능을가지고있다 ( 이선희등, 2009; Nagaoka, 2005; Calzuola et al., 2004). 또한, Singh et al. (2010) 의연구에서밀싹은헤모글로빈수치를높여줘빈혈환자에도움이되는것을밝혔으며, Marawaha et al. (2004) 역시 β-thalassemia라는지중해성빈혈환자에게매우좋은효능이있다고하였다. 뿐만아니라, 밀싹쥬스복용시노인성백내장을감소시키고 (Marsili et al., 2004), 암세포성장을억제시켜암치료제의보조제역할을제시하였고 (Calzuola et al., 2005; Bonfili et al., 2009), 항산화효과가뛰어나 (Kulkarni et al., 2006), 노화방지효과에효과가있다고발표했다. 이에따라본연구는천연자원으로써강력한항산화효과가있는밀싹추출물을이용해발모효과를알아보고자밀싹에탄 Figure 1. Wheat sprout used in this study. 올추출물을친수성층과소수성층으로분리를하였다. 소수성층을기본화장품제형과접목하여도포제형을생후 6주령의 C57BL/6 마우스를이용해 4주 (28) 동안경피도포후육안적관찰과조직학적분석을통해발모효과를알아보았다. Ⅱ 연구방법 1. 연구대상본연구는생후 6주된 C57BL/6 mouse (female) 를 ( 주 ) 다물사이언스로부터분양받아조선대학교의과대학동물실험실에서 1주간적응시킨후실험에사용하였다. 실험기간중실험동물은격리용 mouse cage에사육하였고사육실환경조건은실내온도 23±3, 상대습도 50±10%, 조명주기는 12시간씩밤과낮을유지하였으며, 실험기간동안물과사료 ( 삼양사료 ) 는자유로이공급하였다. 실험은마우스 6마리씩 5개군으로나누어비교하였으며, 총 30마리를실험에사용하였다. 2. 실험재료본연구에사용된밀은국산밀 ( 금강밀, Keumkang) 과토양은경기도성남시판교밀싹농원에서구입하였다. Minoxidil 3% ( 현대약품 ), 모판, 분무기, 믹서기, 에탄올, 붓등은재료상에서구입하여사용하였다. 3. 연구방법 1) 밀싹재배및추출금강밀은각각 200 g씩정량하여수돗물에 4-5회세척한후 1052
3 밀싹에탄올추출물의발모효과 등을 animal clipper와남성용전기면도기를이용해제모하였다. 시료도포는제모당일로부터 28일간제모부위에대해 1일 1회씩월요일부터토요일까지오후 3시에경피도포하였으며, 도포양은약 0.2 ml로붓을이용하여도포하였다. 본실험에사용된밀싹추출물의제형은 Table 1과같이제조하였다. Figure 2. Isolation diagram of the fraction 5 and fraction 8 from ethanolic extracts of wheat sprout. 1차증류수에서 6시간동안불려놓았다. 불린밀은물을제거한후용기에담아 2시간에한번씩분무기로수분을준후마르지않게 48시간동안거즈로덮어싹을틔운후모판에심고 12일동안동일조건에서재배하여채취한후건조하였다. 건조된밀싹은믹서기를이용하여분쇄한후밀싹을 80% 에탄올을이용하여 3일간상온에서추출하였다. 밀싹추출물은 Ethyl acetate 5:5 (D.W.) 로분리한다음 normal-butanol 5:5 (D.W.) 를이용해다시분리하여소수성층을실리카겔을이용해 open column으로분리하였다. 분리된분획물은 TLC (thin layer chromatography) 를이용해이동률이유사한분획물총 8 개로나눌수있었다. 8개의분획물들은모두 evaporator lotery 를이용해 30 에서진공농축한결과 5번째분획물 (fr. 5) 과 8 번째분획물 (fr. 8) 을제외한나머지분획물은극히소량에시료를얻을수있었다. 이로인해본실험에서는 5번째분획물 (fr. 5) 과 8번째분획물 (fr. 8) 을본실험에사용하였다 (Figure 2). 2) 실험동물처치 Mouse를 1주간적응시킨후 ether로마취시킨후 mouse의 3) Mouse의육안적관찰실험시작후털이자란상태의외형적분석은육안적관찰에의하여수행하였다. 육안적관찰방법은실험시작일로부터 7, 14, 21, 28일후 ether에의해흡입마취를시킨후사진촬영을하였다. 실험군과대조군의발모효과는사진상으로시료도포부위에털이어느정도자랐는지육안으로평가하였다. 털의성장효과에따라 0 19% (1점), 20 39% (2점), 40 59% (3점), 60 79% (4점), % (5점) 으로나누어평가하였다 ( 류은미와신현재, 2011). 평가원은조선대학교생명화학공학과연구원 10명에의해평가하였으며, 각평가원들의점수를합산하여 scoring 하였다. 4) Mouse 조직학적분석 (hematoxyline & eosin, toluidin blue) 실험 4주째경피적출한피부조직들은 10% 중성포르말린에 3시간동안고정한다음흐르는물에수세하였다. 피부조직은 4 mm 간격으로자르고 tissue capsule에넣어 50% 알코올, 70% 알코올, 80% 알코올, 95% 알코올, 100% 알코올로각각 1시간처리하여탈수하였다. 그리고 xylene을 4회에각각 1시간씩담가둔후파라핀으로치환하였다. 피부조직은파라핀에포매한후포매된조직은 4 μm두께로절편을만들어 H & E 염색을실시하여관찰하였다. 또한, 피부조직내에비만세포수의변화를관찰하기위하여 toluidin blue 염색을한후각군별로모발주기를확인하였다. Table 1. Base formulation for the preparation of wheat sprout sample solution 원료명 INCI name A; 분량 (g) B; 분량 (g) C; 분량 (g) D; 분량 (g) E; 분량 (g) F; 분량 (g) Butylene glycol Butylene glycol Methylparaben Methylparaben Alpicare NS PEG-40 Hydrogenated Castor Oil, Trideceth-9, Water Salicylic acid Salicylic acid Panthenol Panthenol Menthol Menthol Phenoxyethanol Phenoxyethanol Ethanol Alcohol Wheat sprout extract Water Water
4 Kor. J. Aesthet. Cosmetol., Figure 4. Effect of hair regrowth score. Hair regrowth was evaluated by the gray- or black-colored area (%) on the reverse side of the skin. 이가없었음을확인하였다. 이로써, 외형적인관찰에서는실험군인 wheat sprout (fr. 5) 군이양성대조군인미녹시딜 3% 에는못미치지만, wheat sprout (fr. 5) 군에피부색이전체적으로검정색에가까우므로성장기로전이가시작됨을예상할수가있었다. Figure 3. Time course of hair-promoting effect of (a) wheat sprout extract fr. 5, (b) wheat sprout extract fr. 8, (c) no treatment, (d) base formular, and (e) minoxidil 3% solution. Ⅲ 연구결과 및 고찰 밀싹추출물이모발성장에어떠한영향을미치는지알아보 기위해밀싹에탄올추출물의소수성층을분리하여 4주 (28일) 동안발모효과를알아보았다. 실험에서 mouse의육안적관찰및조직학적으로분석한결과는다음과같다. 2. Mouse 육안적관찰 ( 등안쪽조직 ) 동물실험 4 (28일) 주째 mouse를경추도살한후등조직을적출하였으며, 적출된피부의안쪽을육안으로관찰하였다 (Figure 5). Kawano et al. (2009) 에의하면, 모발이성장기로접어들때등 ( 안쪽 ) 피부는회색또는검정색으로바뀐다는것을검증하였다. 이와같은연구보고를근거로본실험에서실험군인 wheat sprout (fr. 5) 군의등안쪽피부색이완전한검정색임을확인할수있었고이로인해육안적인관찰 ( 외형 ) 에서모발이적게자랐지만결과적으로 wheat sprout (fr. 5) 군이발모촉진효과가있음을확인할수가있다. 반면, 미녹시딜 3% 군에는이미육안적인관찰 ( 외형 ) 에서모가거의다자랐기때문에퇴행기로접어듬을확인할수있었다. 1. Mouse 육안적관찰 ( 외형효과 ) 밀싹추출물이모발성장에어떤영향을미치는 4주 (28일) 동안수행한실험에서 mouse의육안적관찰에의한외형효과를 Figure 3과 Figure 4에나타내었다. 실험시작 6 10일이경과한후실험군인 wheat sprout (fr. 5) 군과양성대조군인미녹시딜군 3% 군에서경피색깔이회색에서검푸른색으로변하기시작하여모가자라는것이관찰되었고대조군의경피색깔은회색을띄고있었다. 3주째접어들면서실험군인 wheat sprout (fr. 8) 군을제외한모든군에서모성장을확인할수가있었고, 4주째에실험군인 wheat sprout (fr. 5) 군에서전체 mice 등이아주진한검푸른색을확인할수있었다. 그리고양성대조군인미녹시딜군은모성장이거의진행됨을알수있었으며, 대조군인무처리군, 제형군에서는거의비슷한양상에모성장을확인하였다. 반면 wheat sprout (fr. 8) 군에서는 3주차와거의차 3. Mouse 조직학적분석 (hematoxylin & eosin) 모낭의형태학적인변화를살펴보기위해실험시작 4주 (28 일 ) 째 mouse를경추도살하여얻은피부조직을 hematoxyline & eosin 염색하여광학현미경으로모낭의형태를관찰하였다. Figure 6에서보는바와같이양성대조군인미녹시딜 3% 군과실험군인 wheat sprout (fr.5) 군에서정산군인무처리군에비해모낭의수가많아졌고, 모낭길이가증가하였으며피부표면으로자라는모낭형태를하고있었다. 조직절편상에서모낭의길이와위치등은모발성장주기에서모낭의상태를정하는중요한척도로서, 이러한결과는실험군의 wheat sprout (fr.5) 군에서대조군에비해성장기로의전이가빠르게진행되었음을의미한다. 이경미등 (2010) 은발모효과에대한연구에서 C57BL/6 mouse의육안적관찰후 hematoxyline & eosin 염색법으로조직학적분석을통해모낭의수가많고모낭의크기 1054
5 밀싹에탄올추출물의발모효과 (a) wheat sprout (fr.5) (b) wheat sprout (fr.8) (c) no treatment (d) base formular (e) minoxidil 3% Figure 5. Hair growth at the reverse side of the skin. After gray color skin was detected, their skin was isolated and the reverse side was photographed to evaluate anagen induction. (a) wheat sprout (fr.5) (b) wheat sprout (fr.8) (c) no treatment (d) base formular (e) minoxidil 3% Figure 6. Tissue observation (with hematoxylin & eosin) by H&E optical microscope (100X). (a) wheat sprout (fr.5) (b) wheat sprout (fr.8) (c) no treatment (d) base formular (e) minoxidil 3% Figure 7. Tissue observation (with toluidine blue dye) by optical microscope (100X). 가크며, 모근의길이가길어지면발모효과가있다고하였다. 또한, 김미향과김영철 (2010) 에의하면성장기 (anagen) 에서는모낭의길이가증가하고퇴행기단계 (catagen) 에서는모낭길이가줄어든다고보고하였다. 4. Mouse 조직학적분석 (toluidine blue 염색 ) 실험군과대조군에서의비만세포의변화를살펴보기위해실험시작 4주 (28일) 째 mouse를경추도살하여적출한피부조직을 toluidine blub 염색하여광학현미경으로비만세포의수를관찰하였다. Figure 7에서보는바와같이양성대조군인미녹시딜 3% 군과실험군인 wheat sprout (fr. 5) 군에서정상군인무처리군에비해비만세포의수가감소했음을확인하였다. toluidine blub 염색의조직절편상에서비만세포의감소는성장기을알수있는또하나의척도이다. 이러한결과는실험군의 wheat sprout (fr. 5) 군에서대조군에비해성장기로진행되 고있음을의미한다. 김미향과김영철 (2010) 은성장주기에따른비만세포수의차이를보고하였다. 그결과비만세포의수는성장기초기에가장적게관찰되었고성장기후기에가장많이증가하여, 퇴행기에최대로늘어나다시모낭이성장기로들어가면서비만세포의수가감소하는주기를가지고있음을보고하였다. 이와같이실험군인 wheat sprout (fr.5) 군에서선행연구와일치함에따라실험군인 wheat sprout (fr.5) 군이모발성장촉진을시켜줌을알수가있다. 현대인들의탈모인구증가요인인식습관의변화는알코올, 지나친육류위주의식단, 가공및인스턴트식품의섭취로탈모에직 간접적인영향을주고있다 ( 임은진과조찬휘, 2011). 탈모에종류는원형탈모증, 휴지기탈모증, 생장기탈모증, 남성형탈모증, 여성형탈모증, 지루성탈모증등이있다 ( 김혜숙과도주연, 2010). 최근두피관리에대한인식이확산되고있는추세이며탈모에대한다양한치료법이시행되고있으며 ( 이성 1055
6 Kor. J. Aesthet. Cosmetol., 옥과장정대, 2009), 탈모관련산업은성장기로들어섰음을알수있다 ( 이정란과임은진, 2009). 본연구에사용된 C57BL/6 mouse는모발생리연구에많이사용되는 melanin 합성이모발성장주기와잘일치하여피부색으로성장주기를판정할수있는장점을가지고있다 ( 홍정애, 2008). 남상윤등 (2004) 에의하면 H & E 염색을이용한조직학적분석에서모낭의길이가길어져피부표면으로표출되어있는현상을발모효과와연관되어진다고하였다. 또한, toluidine blub 염색은비만세포수의변화를통해생장기초기에는비만세포수는최소로감소하고생장기중기에서는다시증가하기시작하여휴지기보다훨씬많이증가한다고하였으며, 생장기말에는휴지기와비슷하게감소한다고하였다 ( 이문원등, 2005). 본연구에서실험군인 wheat sprout (fr. 5) 군에서 toluidine blub 염색을분석한결과가다양한선행연구와일치함에따라발모및모발성장을촉진시킴을알수가있다. Ⅳ 결 론 본연구는천연자원으로써강력한항산화효과가있는밀싹추출물을이용해발모효과를알아보고자밀싹에탄올추출물을친수성층과소수성층으로분리한후소수성층을제형으로만들어생후 6주령의 C57BL/6 mouse를이용해 4주 (28일) 동안경피도포후육안적관찰과조직학적분석을통해발모효과를알아보았다. 육안적관찰에서 4주째실험군인 wheat sprout (fr.5) 군에서피부색이검정색에가까움을확인할수있었고, 모발이성장기로접어들때등 ( 안쪽 ) 피부는회색또는검정색으로바뀐다는것을확인하였다. Hematoxylin & eosin의조직학적분석에서실험군인 wheat sprout (fr.5) 군에서모낭의길이가길어져피부표면으로표출되어있는현상이발모효과와연관됨을확인하였다. 또한, toluidine blub 염색법을통해비만세포를비교함으로써, 모발주기를알수있는데실험군인 wheat sprout (fr.5) 군에서성장기로접어들었음을확인하였다. 결론적으로, 밀싹추출물을이용해 C57BL/6 mouse(female) 의등부위에경피도포한후육안적분석및조직학적분석에서실험군인 wheat sprout (fr.5) 군에서대조군보다모발성장을촉진시키는것으로나타났다. 이것은밀에있는다량의단백질과밀싹이가지고있는아미노산, 미네랄, 비타민, 클로로필등이영양성분과항산화제역할을함으로써모발이성장하는데도움을주는것으로판단된다. 본연구는밀싹에탄올추출물을이용해발모제품및탈모관련제품을응용하여다양한관련산업분야에적용하는데기초적자료가될것으로사료된다. 감사의글본연구는 2013년중소기업청기술혁신개발사업의연구비지원으로수행되었습니다 ( 과제번호 : S ). 참고문헌 김다연. 밀의미토콘드리아프로테오믹스 : 염분스레스조건하에서의밀뿌리대사체학분석. 충북대학교석사학위논문, 김다희, 김성남. 탈모가인상형성및대인불안에미치는영향. 대한피부미용학회지, 8: , 김미향, 김영철. C57BL/6 마우스에서로즈마리오일의육안적, 조직학적모발성장촉진효과, 대한미용과학회지, 6: , 김혜숙, 도주연. 자연요법을이용한탈모개선에관한연구. 한국인체미용예술학회지, 11: 5-19, 권유리. 해조류추출물의항산화특성및발모효능평가와제형개발에관한연구. 대구카톨릭대학교석사학위논문, 남상윤, 문준환, 윤영원, 백인정, 연정민, 김영철, 류광철, 이범준. C57BL/6 마우스모델에서 NDM 발모제의모발성장촉진효과. 한국실험동물학회지, 20: 55-62, 도은주, 황미열, 김승연, 이진상, 양대석, 양재하, 김미려. 경옥고가미방추출물이생쥐의양모및발모관련단백발현에미치는영향. 대한본초학회지, 26: 9-14, 류경오. 밀싹. 허브월드, 류은미, 신현재, 나명순. 꽃송이버섯추출물이제모된 C57BL/6 마우스의모발성장및억제에미치는영향. 대한피부미용학회지, 8: , 류은미, 신현재. C57BL/6 마우스에서꽃송이버섯추출물의에틸아세테이트층과물층의분리에따른발모효과. 대한피부미용학회지, 9: , 류은주, 오강수. 스트레스에의한탈모환자모발의형태학적비교. 한국디자인문화학회, 18: , 배현순, 채성희, 송기쁨, 김민지, 최원준, 문영숙. 탈모인과비탈모인의모발중금속비교. 코리아뷰티디자인학회지. 6: , 박화영, 이원수, 박장규, 김도원, 안석용, 정예진, 노병인, 심우영, 박성욱, 최광성, 김형옥, 허창훈, 윤태영, 김문범등. 남성형탈모증환자에대한 5% Minoxidil 외용액의공개다기관임상연구. 대한피부과학회지, 47: , 신현태. 우리밀유통구조개선에관한연구. 조선대학교석사학 1056
7 밀싹에탄올추출물의발모효과 위논문, 이경미, 이재순, 김영철. 마우스에서하수오열수추출물이발모관련효소활성과유전자발현에미치는영향. 대한미용과학회지, 6: 이은정, 조영롱, 조경혜. 형개추출물과황금추출물의유효성분분리정제, 기능성검정및발모촉진활성연구. 자연과학논문집, 21: 61-78, 이혜숙, 황석연. C57BL/6 마우스모델에서 DCS-HT R 발모제의모발성장촉진효과. 대한피부미용학회지, 7: , 이문원, 오찬호, 권진, 송창호, 이창현. 탈모생쥐모델에서성장주기별털의성장과탈모와관련된인자들의연구. 대한체질인로학회지, 18: 13-27, 이선희, 이영미, 이회선, 김대기. 밀순물추출물의항산화효과및 Streptozotocin으로유발한당뇨흰쥐에서혈당강하에미치는영향. 생약학회지, 40: , 이성옥, 장정대. 두개천골요법을이용한스트레스성탈모의두피관리효용성에관한고찰. 한국미용학회지, 15: , 이정란, 임은진. 국내탈모관리시장의분석및전망. 대한피부미용학회지, 7: , 이상희, 이종렬. 성인남성탈모가스트레스, 자아존중감및우울정도에미치는영향. 한국미용학회지, 6: , 임성혁, 정주철, 정지훈. 오가피추출외용제의발모효과. 중앙의대지, 32: 81-84, 안규성, 황인철. 산삼배양근을함유한생약추출물이탈모방지및육모촉진에관한실험적연구. 한국인체예술학회지, 10: , 오현지, 박형국, 이선영. 약용식물추출물, 아미노산, 비타민복합제의탈모개선효과평가를위한인체적용시험. 한국생활과학회지, 21: , 임은진, 조찬휘. ICP-MS를활용한탈모증유무에따른모발의영양미네랄함량비교. 한국미용학회지, 17: , 주행희. 양파추출물의항산화능과발모촉진의상관관계에관한연구. 조선대학교석사학위논문, 최원준. 발모제, 육모제, 탈모방지특허동향에관한연구. 한국두피모발미용학회지, 3: 27-37, 최혜민, 황수정, 이진성, 도은주, 김무영, 김미려. 한약재함유헤어토닉및식품이 C57BL/6 마우스의탈모모델에서모발 성장에미치는영향. 대한본초학회지, 26: , 최봉순. 밀배아의생리활성및이를이용한상화병의품질특성. 경기대학교박사학위논문, 하병조. 탈모증의원인과발모제연구동향에관한연구. 한국두피모발미용학회지, 2: 5-15, 홍정애. 익기보혈탕이 C57BL/6 마우스의육모촉진및 Cytokine 변화에미치는영향. 경희대학교박사학위논문, Bonfili L, Amici M, Cecarini V, Cucciolini M, Tacconi R, Angeletti M, Fioretti E, Keller JN, Eleuteri AM. Wheat sprout extract-induces apoptosis in human cancer cells by proteasomes modulation. Biochimie, 91: , Calzuola I, Marsili V, Gianfranceschi GL. Synthesis of antioxidants in wheat sprouts. J. Agric. Food Chem., 52: , Kawano M, Han J, Kchouk ME, Isoda H. Hair growth regulation by the extract of aromatic plant Erica multiflora. J. Nat. Med., 63: , Kulkarni SD, Tilak JC, Acharya R, Rajurkar NS, Devasaqayam TP, Reddy AV. Evaluation of the antioxidant actvity of wheatgrass(triticum aestivum L.) as a function of growth under different conditions. Phytother. Res., 20: , Nagaoka H. Treatment of germinated wheat to increase levels of GABA and IP6 catalyzed by endogenous enzymes. Biotechnol. Prog., 21: , Marawaha RK, Bansal D, Kaur S, Trehan A. Wheat grass juice reduces transfusion requirement in patients with thalassemia major: a pilot study. Indian J. Pediatr., 41: , Marsili V, Calzuola I, Gianfranceschi GL. Nutritional relevance of wheat sprouts containing high levels of organic phosphates and antioxidant compounds. J. Clin. Gastroenterol., 38: , Singh K, Pannu MS, Singh P, Singh J. Effect of wheat grass tablets on the frequency of blood transfusions in Thalassemia Major. Indian J. Pediatr., 77: 90-91, 기타위키피디아
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