도 1 색인어 감귤, 미숙성온주밀감, 온주밀감, 진지향, 팔삭, 미백, 화장료조성물 명세서 도면의간단한설명 도 1 은실시예 1 3 에의한조성물의미백효과를육안으로조사한결과를보여주는그래프이다. 도 2 는실시예 1 3 에의한조성물의미백효과를크로마미터로조사한결과를보여주는그래프

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준서 부
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1 (51) Int. Cl. A61K 8/97 ( ) A61Q 19/02 ( ) (19) 대한민국특허청 (KR) (12) 공개특허공보 (A) (11) 공개번호 (43) 공개일자 년 10 월 09 일 (21) 출원번호 (22) 출원일자 2005년03월29일 (71) 출원인 ( 주 ) 아모레퍼시픽서울용산구한강로 2 가 181 번지태평양빌딩 (72) 발명자김한성경기성남시분당구서현동시범삼성아파트 132 동 901 호김덕희서울서초구잠원동잠원훼미리아파트 2 동 902 호장이섭경기도용인시수지읍풍덕천 1 동 703 번지동보아파트 102 동 1104 호김한곤경기수원시영통구매탄 3 동주공그린빌아파트 201 동 903 호한상훈경기도수원시장안구율전동 천록아파트 2 동 203 호주희경서울도봉구쌍문 4 동한양아파트 604 동 210 호김세재제주제주시아라 1 동아라원신아파트 105 동 807 호김기옥제주제주시아라동천일아파트 102 동 409 호박수영제주제주시오등동 오등동영도그린빌라 C 동 308 호최수연제주제주시아라 1 동제주대학교교수아파트 A 동 210 호김봉석제주제주시아라 2 동 번지 심사청구 : 없음 (54) 미숙성감귤추출물을함유하는미백용화장료조성물 요약 본발명은미숙성감귤추출물을유효성분으로함유하는미백용피부화장료조성물에관한것으로서, 더욱상세하게는미숙성온주밀감추출물을단독으로사용하거나여기에진지향추출물, 팔삭추출물등온주밀감이외의감귤추출물을혼합하여함유함으로써피부에대한부작용없이안전하게사용할수있을뿐만아니라멜라닌생성을억제하여색소침착을저해하는효과가뛰어나기미또는주근깨개선및피부미백효과가우수한미백용피부화장료조성물에관한것이다. 대표도 - 1 -

2 도 1 색인어 감귤, 미숙성온주밀감, 온주밀감, 진지향, 팔삭, 미백, 화장료조성물 명세서 도면의간단한설명 도 1 은실시예 1 3 에의한조성물의미백효과를육안으로조사한결과를보여주는그래프이다. 도 2 는실시예 1 3 에의한조성물의미백효과를크로마미터로조사한결과를보여주는그래프이다. 도 3 은조성물처리전자외선조사에의한색소침착결과를보여주는인공색소반의사진이다. 도 4 는실시예 1 3 에의한조성물처리 4 주후자외선조사에의한색소침착결과를보여주는인공색소반의사진이다. 발명의상세한설명 발명의목적 발명이속하는기술및그분야의종래기술 본발명은미숙성감귤추출물을유효성분으로함유하는미백용피부화장료조성물에관한것으로서, 더욱상세하게는미숙성온주밀감추출물을단독으로사용하거나여기에진지향추출물또는팔삭추출물을혼합하여함유함으로써피부에대한부작용없이안전하게사용할수있을뿐만아니라멜라닌생성을억제하여색소침착을저해하는효과가뛰어나기미또는주근깨개선및피부미백효과가우수한미백용피부화장료조성물에관한것이다. 사람의피부색은멜라닌색소를만드는멜라노사이트 (melanocyte) 의활동성, 혈관의분포, 피부의두께및, 카로티노이드및빌리루빈등인체내외의색소함유유무와같은여러요인들에의해결정되며그중멜라노사이트에서타이로시나제등의여러효소가작용하여생성되는멜라닌이라는흑색색소가가장중요하다. 멜라닌색소의형성에는유전적요인, 호르몬분비, 스트레스등과관련된생리적요인및자외선조사등과같은환경적요인이영향을미친다. 멜라닌은피부에존재하면서자외선등으로부터신체를보호하는중요한기능을가지고있지만멜라닌이과잉생산되는경우에는기미, 주근깨등을형성할뿐아니라피부노화를촉진하고피부암유발에도중요한작용을하는것으로알려져있다. 기미, 주근깨및색소침착등과같은피부색소이상침착증상과자외선노출등에의해발생된과도한멜라닌색소침착을치료또는경감시켜주기위해서이전부터아스코르브산, 코지산, 알부틴, 하이드로퀴논, 글루타치온또는이들의유도체와같은타이로시나제저해활성을가진물질들을화장료나의약품에배합하여사용하여왔으나, 이들은불충분한미백효과, 피부에대한안전성문제, 화장료에배합시제형화및제형내안정성문제등으로인해그사용이제한되고있는실정이다. 식물성천연물들은안전성이뛰어날뿐만아니라여러가지유익한성분들을가지고있어미백물질의좋은검색대상이되며따라서종래부터우수한미백효과는물론인체피부에대한안전성을모두갖춘식물성천연물을찾기위한노력이계속진행되고있다. 예를들면, 일본공개특허공보평 호 ( ) 에는코지산과함께향귤등의식물추출물을함유하는미백용피부외용제조성물을개시되어있으며, 일본공개특허공보평 호 ( ) 호에는감귤추출물을함유함으로써우수한보습력및피부미백효과를가지는로션의제조방법이개시되어있다. 또한일본공개특허공보제 호 ( ) 호에는 Smallanthus sonchifolia 추출물및 / 또는유자나무추출물을유효성분으로함유함으로써멜라닌생성억제, 활성산소스캐빈저 (scavenger) 및리포퍼옥사이드 (lipoperoxide) 생성억제기능을가지도록제조한화장료조성물에관하여기재되어있다. 이외에도일본공개특허공보평 호 ( ), 평 호 ( ) 및제 호 ( ) 및국제특허공개공보제 WO04/ 호 ( ) 에여러가지감귤추출물을유효성분으로함유하는미백용조성물등이개시되어있으나, 미숙성감귤추출물을미백용으로활용한사례는없었다

3 발명이이루고자하는기술적과제 이에본발명자들은감귤추출물이우수한미백효과를나타내면서동시에인체피부에대한안전성을가지는사실을바탕으로새로운미백제를찾고자연구한결과, 제품화되지않고폐기처분되는미숙성온주밀감추출물이뛰어난색소침착저해효과는물론인체피부에대해우수한안전성을지니고있음을발견하였고, 또한상기미숙성온주밀감추출물과함께진지향추출물, 팔삭추출물등다른감귤추출물을혼합하여사용하는경우에도피부에안전하면서도피부미백효과가우수함을발견하고본발명을완성하였다. 따라서, 본발명의목적은미숙성온주밀감추출물을유효성분으로함유함으로써부작용이없고우수한미백효과를가지는미백용피부화장료조성물을제공하는것이다. 또한본발명의목적은상기미숙성온주밀감추출물과함께진지향추출물, 팔삭추출물등다른감귤추출물을혼합하여함유함으로써우수한미백효과를가지는미백용피부화장료조성물을제공하는것이다. 발명의구성및작용 상기한목적을달성하기위하여, 본발명에따른미백용피부화장료조성물은유효성분으로서미숙성감귤추출물을함유하는것을특징으로한다. 또한본발명에서는미숙성온주밀감추출물을조성물총중량에대하여 중량 %, 보다바람직하게는 중량 % 로함유하는미백용피부화장료조성물을제공하고자한다. 또한본발명에의한피부화장료조성물은상기미숙성온주밀감추출물과함께진지향추출물또는팔삭추출물을각각조성물총중량에대하여 중량 % 로더혼합하여제조할수있다. 그외다른감귤추출물도함께혼합하여사용할수있다. 이하, 본발명에따른미백용피부화장료조성물을보다상세히설명한다. 감귤나무의열매인감귤은관상용, 식용, 약용및향신료등에널리이용되는데, 열매껍질을귤피, 진피, 청귤피, 청피및등자피라고하고씨앗을귤핵이라고하여예로부터약용으로널리사용되어왔다. 주로순환계질환과각종체증을다스리는효능이있는것으로알려져있다. 본초강목에는감귤껍질이음식을소화시키고속을좋게한다고기재되어있으며, 향약대사전에는소화를시키고식중독인경우에는이를해독하는효능이있다고기재되어있다. 감귤은비타민 (vitamin) B1, B2, C 및각종유기산 (organic acid) 이풍부할뿐만아니라, 항암효과가뛰어나다고알려진리모노이드 (limonoid) 및혈관강화및간의해독작용, 항암, 항염, 항균등의효능이있는것으로알려진헤스페리딘 (hesperidine) 이풍부한것으로알려져있다 (Journal of Cardiovascular Pharmacology 1993 Aug;22(2):225-30). 대한민국제주도는아열대기후대로기후가온난하여한반도에비하여채소및과일류가사시사철생산되는지역이다. 감귤은우리나라에서제주도만이생산할수있는작물이기때문에오래전부터재래귤로시작하여오늘날까지많은종류가생산되고있다. 이런제주산감귤의재배면적및수확량은많은증가를보였으며이런감귤의생산량의증가와함께소비자의기호에맞게다양한감귤제품이개발되고있다. 그러나현재까지대부분의감귤가공제품은완숙된감귤상태로소비자에게공급되었다. 한편고품질생식용의완숙된감귤을얻기위해매년적과를실시한다. 적과는감귤의안정적착과와해거리방지및최상품의감귤완숙과를얻기위해감귤나뭇가지로부터일부의미숙성감귤을제거하는것으로서이렇게제거된감귤미숙과는제품으로사용하기에적합하지않아폐기처분해왔다. 또한감귤재배면적이점차확장되면서수확량또한점차많아져이에따른많은미숙성감귤이발생되고폐기된다. 9 월상순에서 10 월상순사이에수확되는미숙성감귤은감귤완숙과와비교하여성분에서도큰차이가있다. 즉, 미숙성감귤은감귤완숙과에비해당도가상대적으로떨어지나감귤의주요성분인나린진 (naringin) 과헤스페리딘 (hesperidin) 이다량함유되어있는것이특징이다. 본발명에서는상기와같이폐기처분되고있는미숙성감귤의추출물을사용하는것이특징이다. 감귤속 (Citrus) 에는온주밀감 (C. unshiu) 을비롯하여홍귤나무 (C. deliciosa), 왕귤나무 (C. grandis), 유자나무 (C. junos), 여름귤나무 (C. natsudaidai), 시트론 (C. medica), 라임 (C. aurantifolia), 레몬 (C. limon), 천지향 (C. sinensis), 그레이프프루트 (C. paradisi), 향귤 (C. aurantium), 러프멜론 (C. jambhiri), 밤호박 (C. maxima), 지각 (C. aurantium), 편귤 (C. tangerina), 빈귤 (C. leiocarpa), 사두감 (C. pseudogalgul TANAKA), 편귤 (C. tangerrina TANAKA), 빈귤 (C. leocarpa), - 3 -

4 홍귤 (C. tachibana TANAKA), 감자 (C. benokoji TANAKA), 병귤 (C. nippokoreana TANAKA), 동정귤 (C. erythrosa TANAKA), 호랑이깡 (C. sulcata HORT. Ex. Tan), 나스 (C. natsudaidai HAY), 당유자 (C. grandis OSBECK) 및팔삭 (C. hassaku HORT. Ex Y.Tan) 등이있으며, 본발명에서는상기감귤속식물중에서도특히미숙성온주밀감, 진지향및팔삭을사용한다. 한편밀감 ( 蜜柑 ) 이란온주밀감 ( 溫州蜜柑 ) 을칭하는것이며, 감귤 ( 柑橘 ) 은금감이나탱자를제외한모든것을총칭하는것이다. 그리고오렌지는미국을비롯한아열대권에서재배되는감귤류의일종이다. 또한잡감류 ( 雜柑類 ) 는온주밀감 ( 溫州蜜柑 ) 이외의감귤류 ( 柑橘類 ) 를총칭하는것이기도하고일본에서는만감류 ( 晩柑類 ) 혹은기타감귤로호칭되기도한다. 이와같이온주밀감 ( 溫州蜜柑 ), 오렌지 (Orange), 하귤 ( 夏橘 ), 팔삭 ( 八朔 ) 등으로분류하는것이종 ( 種 ) 명이고, 궁천조생 ( 宮川早生 ), 흥진조생 ( 興津早生 ) 및청도 ( 淸島 ), 감하귤 ( 甘夏橘 ) 등으로구분하는것은품종 ( 品種 ) 및계통 ( 系統 ) 인것이다. 제주도에서재배되는온주밀감은대부분가지변이에의해서선발된것이다. 본발명에서사용하는온주밀감 (Citrus unshiu) 은운향과 (Rutaceae) 감귤속 (Citrus) 에속하는다년성상록관목이다. 밀감속식물을대별하여초생감귤아속과후생감귤아속으로나누어지며종 ( 種 ) 수준에서는학자에따라분류기준을달리하고있다. 한편원예적분류로는조생종, 중생종및만생종혹은온주밀감과잡감류로나누기도한다. 감귤류의명칭에있어서귤 ( 橘 ), 감귤 ( 柑橘 ), 밀감 ( 蜜柑 ), 오렌지 (Orange) 등으로호칭되고있는데귤이라함은재래감귤을상징하는것으로우리것이라는의미를지니고있다. 본발명에서사용하는진지향 (Citrus sinensis) 은일본농림수산성과수시험장구지진시험지에서 1972 년청견에흥진조생을교배하여육성시킨교잡종이다 년 9 월에접수를채취해서온주밀감에교접, 첫결실하였고 1983 년에 1 차선발하였다 년부터지역적응성시험을실시하여 1990 년 6 월 22 일 " 진지향 " 으로명명하여등록하였다 년대부터대한민국제주도에도입되어재배되고있다. 본발명에서사용하는팔삭 (Citrus hassaku) 은일본의廣島현에있는惠日山淨土寺의경내에서 1860 년에우연히실생수에서발견되었고, 음력 8 월초순경부터먹을수있다는데서 ' 팔삭 ' 이라고이름이붙여졌다. 과형은편구형, 과피는등황색이고두껍다. 과육은담황색이고, 육질은약간단단하다. 과즙이적으며겨울철저온에두면나린진에의해쓴맛이증가한다. 본발명에서사용하는감귤추출물은감귤로부터침출, 전출하여얻은침출액뿐만아니라침출액을다시일부또는전부농축하여얻은농축물또는상기의농축물을다시건조시켜제조한침체, 전제, 정기, 유동엑기스및감귤중에함유되어주효과를발휘하는화학물질은물론식물그자체를모두포함한다. 본발명에따른감귤추출물은대표적으로미숙성온주밀감, 진지향, 팔삭추출물을제조하기위해서추출유기용매로는극성용매, 예를들면메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 부탄올등의저급알코올, 아세톤또는에틸메틸케톤을이용할수있으나이에한정되는것은아니다. 또한, 이러한유기용매를단독으로또는물과혼합하여사용할수있다. 추출방법은본발명기술분야에통상적으로알려져있는방법을적의선정및응용하여사용할수있다. 한편, 본발명에따른미숙성온주밀감추출물을피부미백용화장료에사용할경우조성물총중량에대하여 중량 % 인것이바람직하다. 이는 중량 % 미만에서는그효과를기대할수없고, 20 중량 % 초과에서는안전성또는제형상의제조에어려움이있기때문이다. 그러나, 상기의미숙성온주밀감추출물의양은특별히한정되는것은아니다. 또한본발명에의한감귤추출물은미숙성온주밀감추출물과함께진지향추출물또는팔삭추출물을더혼합하여사용할수있으며, 이때혼합되는함량은조성물총중량에대하여각각 중량 % 가바람직하다. 본발명의미백용피부화장료조성물은감귤추출물외에본발명이목적으로하는미백효과를손상시키지않는범위내에서바람직하게는상기미백효과에상승효과를줄수있는다른미백성분등을함유하는것도무방하다. 이와같은미백성분으로는알부틴, 아스코르브산유도체등을들수있다. 본발명의미백용피부화장료조성물은그제형에있어서특별히한정되는바가없으며, 예를들면, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일, 바디에센스등의화장료로제형화될수있다

5 이하실시예를들어본발명을보다구체적으로설명한다. 그러나, 이들실시예는본발명을설명하기위한것으로, 본발명의범위가이들실시예에국한되지않는다는것은당업계에서통상의지식을가진자에게있어서자명한것이다. [ 실시예 1] 미숙성온주밀감추출물의제조 미숙성온주밀감을세절하고정제수로세척하여건조한건조물 100g 을 70% 에탄올 1L 에넣고 48 시간상온에서냉침하여추출하였다. 이추출액을 0.45 μm여과지로여과한후 50 에서회전감압증발기로건조하여건조중량 15g 을얻었다. [ 실시예 2] 진지향추출물의제조 진지향과피를세절하고정제수로세척하여건조한건조물 100g 을 70% 에탄올 1L 에넣고 48 시간상온에서냉침하여추출하였다. 이추출액을 0.45 μm여과지로여과한후 50 에서회전감압증발기로건조하여건조중량 30g 을얻었다. [ 실시예 3] 팔삭추출물의제조 팔삭과피를세절하고정제수로세척하여건조한건조물 100g 을 70% 에탄올 1L 에넣고 48 시간상온에서냉침하여추출하였다. 이추출액을 0.45 μm여과지로여과한후 50 에서회전감압증발기로건조하여건조중량 45g 을얻었다. [ 실시예 4] 상기실시예 1 및 2 에서제조한미숙성온주밀감추출물및진지향추출물을 50:50 의중량비로혼합하였다. [ 실시예 5] 상기실시예 1 및 3 에서제조한미숙성온주밀감추출물및팔삭추출물을 50:50 의중량비로혼합하였다. [ 실시예 6] 상기실시예 1 3 에서제조한미숙성온주밀감추출물, 진지향추출물및팔삭추출물을 40:30:30 의중량비로혼합하였다. [ 비교예 1] 온주밀감추출물의제조 숙성한온주밀감의과피를세절하고정제수로세척하여건조한건조물 100g 을 70% 에탄올 1L 에넣고 48 시간상온에서냉침하여추출하였다. 이추출액을 0.45 μm여과지로여과한후 50 에서회전감압증발기로건조하여건조중량 30g 을얻었다. [ 시험예 1] B16/F10 멜라노마세포 (melanoma cell) 를이용한멜라닌생성억제능평가 상기실시예 1 6 및비교예 1 에서제조한추출물을시험물질로하여 10% FBS 가함유된 DMEM 으로 6- 웰플레이트 ( 멜 라닌정량 ) 에 2x10 4 cell/well( 최종용량 : 3ml), 96- 웰플레이트 (MTTassay) 에 2x10 3 cell/well ( 최종용량 : 200 ul) 로넣고 37, 5% CO 2 배양기 (MCO-20AIC, Sanyo) 에서 24 시간배양하였다. 배양후배지를제거하고 10% FBS, 2uM α- MSH(Melanocyte stimulating hormone), 2mM 테오필린 (theophylline) 이함유된 DMEM 배지를새로운배지로사용하고배지에시험물질을첨가하여 3 일간매일처리하였다. 5 일째에 6- 웰플레이트에서배양된배지를제거하고 0.25% 트립신 -EDTA(Sigma Chemical Co.) 용액을처리하여세포펠렛 (pellet) 을회수한다음 1.5ml 튜브로옮겨 10,000rpm 으로 10 분간원심분리하여상등액을제거하였다. 얻어진펠렛을 60 에서건조시킨후 1N NaOH 100ul 를넣어세포내멜라닌을녹였다. 이용액을 PBS 로희석시킨다음 ELISA 리더 475nm 에서흡광도를측정하여시료의멜라닌생성저해율을구하였다. 상기추출물을첨가하지않은세포를대조군으로하여대조군에서의멜라닌함량과비교하여실험물질의멜라닌생성저해정도를측정하여미백효과를측정하였다. 하기수학식 1 에따라멜라닌생성억제율을계산하여그결과를표 1 에나타내었다

6 [ 표 1] 멜라닌생성억제효과 시료 멜라닌생성저해율 (%) 대조군 ( 무첨가 ) - 비교예 1( 최종농도 중량 %) 34.7 실시예 1( 최종농도 중량 %) 44.8 실시예 2( 최종농도 중량 %) 44.5 실시예 3( 최종농도 중량 %) 44.3 실시예 4( 최종농도 중량 %) 44.8 실시예 5( 최종농도 중량 %) 44.8 실시예 6( 최종농도 중량 %) 44.9 하이드로퀴논 ( 최종농도 중량 %) 45.0 상기표 1 로부터알수있는바와같이, 본발명에의한미숙성감귤추출물은미백성분으로잘알려진하이드로퀴논과동등한미백효과를나타냄을확인할수있었으며, 따라서, 상기결과에의하여본발명에의한미숙성감귤추출물의미백효과가우수함을알수있다. [ 시험예 2] 갈색기니아피그 (guinea pig) 를이용한미백동물실험 본발명의피부미백용조성물의미백효과를확인하기위하여본발명의실시예 1 3 및비교예 1 에서제조한추출물과종래의하이드로퀴논 (hydroquinone) 을운반제 (vehicle, 에탄올 : 프로필렌글라이콜 (propylene glycol): 물 =5:3:2) 에 2% 의농도로용해시켜시료로제조하였다. 다음, 몸무게 500g 내외인갈색기니아피그의등부위털을제거하고펜토바비탈 (pentobarbital, 30mg/kg) 로마취시킨후 500mJ 의자외선으로태웠다. 태운부위는지름 1cm 정도의동그라미 ( 인공색소반 ) 가되게하였으며, 동일한방법으로같은부위에일주일에한번씩 3 번자외선을조사하였다. 마지막자외선조사가끝나고그다음날부터아침저녁으로인공색소반하나당상기에서제조한실시예 1 3 및비교예 1 의추출물과하이드로퀴논시료를 5 μl씩 6 주간도포하였다. 마지막시료를도포하고 4 주가지난후에운반제만을처리한인공색소반 ( 대조군 ), 실시예 1 3 및비교예 1 의추출물을처리한인공색소반및하이드로퀴논을처리한인공색소반의색깔을무처리군을기준으로육안으로확인하고상대적인색깔차이를수치화하였다. 네마리의동물을이용하여동시에실험하고각각의수치를평균내어도표화하였으며, 그결과를도 1 에나타내었다. 도 1 의결과를통하여, 본발명에의한실시예 1 3 의감귤추출물의미백효과는 0.78 로같은농도의하이드로퀴논 0.88 과비슷한미백효과를나타냄을알수있었다. 또한, 상기의운반제만을처리한인공색소반 ( 대조군 ), 실시예 1 에서제조한감귤추출물을처리한인공색소반및하이드로퀴논을처리한인공색소반의색깔을색차계 ( 크로마미터 : chromameter) 를이용하여인공색소반명암판정을하였으며, 인공색소반의명암을색차계로수치화 (L 값 ) 하고평균값을구하여도 2 에나타내었다. 또, 상기에서시료처리전의인공색소반과 4 주동안시료를처리한후의인공색소반의사진을각각도 3 및도 4 에나타내었다. 도 3 및도 4 의결과를통하여감귤추출물 2% 를처리하는경우자외선조사에의한색소침착을현저히억제할수있음을확인하였다. [ 제형예 1 6 및비교제형예 1] 영양화장수 ( 밀크로션 ) - 6 -

7 하기에기재된조성으로실시예 1 6 에서제조한감귤추출물을함유하는제형예 1 6 의영양화장수를통상의방법에따라제조하였다. 또한비교예 1 에서제조한추출물을상기와동일한조성및방법으로비교제형예 1 을제조하였다. 배합성분 함량 ( 중량 %) 실시예 1 6 또는비교예 1의추출물 2.0 스쿠알란 5.0 밀납 4.0 폴리솔베이트 솔비탄세스퀴올레이트 1.5 유동파라핀 0.5 카프릴릭 / 카프릭트리글리세라이드 5.0 글리세린 3.0 부틸렌글리콜 3.0 프로필렌글리콜 3.0 카르복시비닐폴리머 0.1 트리에탄올아민 0.2 방부제, 색소및향료 적량 정제수 잔량 [ 시험예 3] 안전성및인체첩포시험 본발명에따른화장료의피부자극정도를알아보기위하여, 피검자 15 명에게본발명에서제조한제형예 1 6 및비교제형예 1 의미백화장료를도포하여피부첩포시험을실시하였다. 상기추출물을함유하지않은제형을대조군으로사용하였다. 핀챔버 (fin chamber) 에제형예 1 6 및비교제형예 1 의영양화장수 20 μl를가하여인체상박부에 24 시간첩포하고, 첩포한것을제거한다음 1 시간이내에피부반응을검사한후, 다음날 (48 시간후 ) 다시검사하였다. 피부반응판정은표 2 의검사기준에의해판정하였으며, 하기수학식 2 에따라평균반응율을산출하였다. [ 표 2] 인체첩포시험의검사기준 피부반응부호및점수음성 - : 0 의심스러운미미한홍반 +/- : 1 소수포를동반하지않는약한방응, 홍반, 구진 + : 2 소수포를동반하는중정도의반응, 홍반, 구진, 소수포 ++ : 3 강한반응, 대수포반응 +++ : 4 평균반응율 (%)=[Σ( 반응있는피검자수 24 시간후 x 점수 )+ Σ( 반응있는피검자수 48 시간후 x 점수 )] x 100/( 총검사횟수 x 최대 점수 x 전체피검자수 ) 따라서, 제형예 1 의평균반응율은다음과같이계산하였다. [(15 명 x0 점 +0 명 x1 점 +0 명 x2 점 +0 명 x3 점 +0 명 x4 점 )+(15 명 x0 점 +0 명 x1 점 +0 명 x2 점 +0 명 x3 점 +0 명 x4 점 )]x100/(2 회 x4 점 x15 명 )=0% 그결과, 미백화장료의인체첩포시험결과를하기표 3 에나타내었다. [ 표 3] - 7 -

8 시험물질 24 시간후반응있는피검자수 ( 명 ) 48 시간후반응있는피검자수 ( 명 ) 평균반응율 (%) - +/ / 대조군 비교제형예 제형예 제형예 제형예 제형예 제형예 제형예 * 인체첩포시험의평균반응율 (%) 에대한판정기준 1 미만 : 무자극 1 3 미만 : 경자극 3 5 미만 : 중자극 5 이상 : 강자극 상기표 3 의결과로알수있듯이, 본발명에따른피부미백용화장료는무자극범위에속하므로인체에안전한물질이라고할수있다. 한편, 본발명의감귤추출물을함유하는피부미백용화장료의제형은임의로선택할수있으며, 종래의화장료제형인영양크림, 영양로션, 마사지크림, 영양에센스, 유연화장수등여러가지형태로제조할수있다. [ 제형예 7] 유연화장수 ( 스킨로션 ) 하기에기재된조성으로실시예 1 의온주밀감추출물을함유하는유연화장수를통상의방법에따라제조하였다. 배합성분 함량 ( 중량 %) 실시예 1의추출물 2.0 글리세린 3.0 부틸렌글리콜 2.0 프로필렌글리콜 2.0 카르복시비닐폴리머 0.1 PEG 12 노닐페닐에테르 0.2 폴리솔베이트 에탄올 10.0 트리에탄올아민 0.1 방부제, 색소및향료 적량 정제수 잔량 [ 제형예 8] 영양크림 하기에기재된조성으로실시예 1 의온주밀감추출물을함유하는영양크림을통상의방법에따라제조하였다. 배합성분 함량 ( 중량 %) 실시예 1의추출물 2.0 폴리솔베이트 솔비탄세스퀴올리에이트 0.5 PEG60 경화피마자유 2.0 유동파라핀 10.0 스쿠알란 5.0 카프릴릭 / 카프락트리글리세라이드

9 글리세린 5.0 부틸렌글리콜 3.0 프로필렌글리콜 3.0 트리에탄올아민 0.2 방부제, 색소및향료 적량 정제수 잔량 [ 제형예 9] 마사지크림 하기에기재된조성으로실시예 1 의온주밀감추출물을함유하는마사지크림을통상의방법에따라제조하였다. 배합성분 함량 ( 중량 %) 실시예 1의추출물 1.0 밀납 10.0 폴리솔베이트 PEG 60 경화피마자유 2.0 솔비탄세스퀴올레이트 0.8 유동파라핀 40.0 스쿠알란 5.0 카프릴릭 / 카프릭트리글리세라이드 4.0 글리세린 5.0 부틸렌글리콜 3.0 프로필렌글리콜 3.0 트리에탄올아민 0.2 방부제, 색소및향료 적량 정제수 잔량 [ 제형예 10] 팩 하기에기재된조성으로실시예 1 의온주밀감추출물을함유하는팩을통상의방법에따라제조하였다. 배합성분 함량 ( 중량 %) 실시예 1의추출물 1.0 폴리비닐알콜 13.0 소듐카르복시메틸셀룰로오스 0.2 글리세린 5.0 알란토인 0.1 에탄올 6.0 PEG 12 노닐페닐에테르 0.3 폴리솔베이트 방부제, 색소및향료 적량 정제수 잔량 [ 제형예 11] 젤 하기에기재된조성으로실시예 1 의온주밀감추출물을함유하는젤을통상의방법에따라제조하였다. 배합성분 함량 ( 중량 %) 실시예 1의추출물 0.5 에틸렌디아민초산나트륨 0.05 글리세린 5.0 카르복시비닐폴리머 0.3 에탄올 5.0 PEG 60 경화피마자유 0.5 트리에탄올아민 0.3 방부제, 색소및향료 적량 - 9 -

10 정제수잔량 발명의효과 이상에서설명한바와같이, 본발명에서는감귤추출물을함유하는미백용피부화장료조성물에관한것으로서, 특히미숙성온주밀감추출물을단독으로, 또는진지향추출물또는팔삭추출물과함께혼합하여함유함으로써피부에대한부작용없이안전하게사용할수있을뿐만아니라멜라닌생성을억제하여색소침착을저해하는효과가뛰어나기미또는주근깨개선및피부미백효과가우수한미백용피부화장료조성물을제공할수있었다. (57) 청구의범위 청구항 1. 미숙성감귤추출물을함유함을특징으로하는미백용피부화장료조성물. 청구항 2. 제 1 항에있어서, 상기미숙성감귤추출물은온주밀감추출물임을특징으로하는미백용피부화장료조성물. 청구항 3. 제 2 항에있어서, 상기조성물에홍귤나무 (C. deliciosa), 왕귤나무 (C. grandis), 유자나무 (C. junos), 여름귤나무 (C. natsudaidai), 시트론 (C. medica), 라임 (C. aurantifolia), 레몬 (C. limon), 진지향 (C. sinensis), 그레이프프루트 (C. paradisi), 향귤 (C. aurantium), 러프멜론 (C. jambhiri), 밤호박 (C. maxima), 지각 (C. aurantium), 편귤 (C. tangerina), 빈귤 (C. leiocarpa), 사두감 (C. pseudogalgul TANAKA), 편귤 (C. tangerrina TANAKA), 빈귤 (C. leocarpa), 홍귤 (C. tachibana TANAKA), 감자 (C. benokoji TANAKA), 병귤 (C. nippokoreana TANAKA), 동정귤 (C. erythrosa TANAKA), 호랑이깡 (C. sulcata HORT. Ex. Tan), 나스 (C. natsudaidai HAY), 당유자 (C. grandis OSBECK) 및팔삭 (C. hassaku HORT. Ex Y.Tan) 으로이루어진군에서선택된 1 종이상을더함유함을특징으로하는조성물. 청구항 4. 제 2 항에있어서, 상기미숙성온주밀감추출물은조성물총중량에대하여 중량 % 의양으로함유됨을특징으로하는조성물. 청구항 5. 제 3 항에있어서, 상기추출물은조성물총중량에대하여 중량 % 의양으로함유됨을특징으로하는조성물. 도면

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Journal of Life Science 2011 Vol. 21. No. 8. 1120~1126 ISSN : 1225-9918 DOI : http://dx.doi.org/10.5352/jls.2011.21.8.1120 μ μ μ α β Journal of Life Science 2011, Vol. 21. No. 8 1121 μ μ 1122 생명과학회지 2011,