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대한임상검사학회지 : 36 권제 2 호, 269-273, 2004 타액이편평상피세포암 (SCC) 과갑상선기능검사에미치는영향 분당서울대학교병원핵의학과 조만익 문기춘 김혜숙 The Effect of Saliva in Squamous Cell Carcinoma(SCC) and Thyroid Function Test with Radioimmunoassay Cho, Man Ick., Moon, Ki Choon., Kim, Hea Sook Department of Nuclear Medicine, Seoul National University Bundang Hospital, Sungnam, Korea Squamous cell carcinoma(scc) associated antigen is a subfraction of TA-4, a tumor-associated antigen first described by Kato and Torigoe in 1977. TA-4, obtained from squamous cell carcinoma cancer tissue of the uterine cervix, has been characterized as a glycoprotein with a molecular weight of approximately 45,000 daltons. SCC antigen has been studied in other squamous cell malignancies including lung, esophagus, head and neck, anal canal, and skin. SCC antigen is shed naturally through sweat, saliva and other body fluids. Contamination of specimens, tray, bead dispenser or other accessories with sweat, saliva or aerosols can cause falsely elevated values. To reduce the possibility of contamination, gloves should be worn in all phases of assay preparation, and when handling specimens, accessories or reagents that will be used in SCC and Thyroid function test(tft). Key Words : SCC antigen, TA-4, Saliva, Contamination, TFT. 0...I. 서론 1) 타액은귀밑샘, 턱밑샘, 혀밑샘을포함하는침샘에서구강안으로분비된액의혼합물로서단순한물이아니며건강한사람에게도다수의미생물이나표피세포, 음식찌꺼기등의유기물을많이포함하고있다. 타액에는그것을분비한타액선의종류에의해, 점액성 ( 끈적끈적한타액 ) 과장액성 ( 까칠까칠한타액 ) 으로성질의차이가있고, 그때의조건에의해분비된타액의성질은변할수있다. 타액은분비액그자체는무색, 무미, 무취이나, 당단백질 ( 뮤신 ) 을함유하기때문에점성이있다. 또한표피 교신저자 : 조만익, ( 우 ) 463-707 경기도성남시분당구구미동 300 번지, 분당서울대학교병원핵의학과 Tel : 031-787-2950 Fax : 031-787-4018 E-mail : irmacho@snubh.org, irmacho@korea.com 세포나타액소체 ( 백혈구가변화한원형소체 ) 를함유하므로약간혼탁하다. 타액은하루에 1l 정도분비되며 ph 는 6.8 전후, 비중은 1.005로대부분수분이고고형성분은 0.5% 정도이다. 뮤신, 요소, 아미노산, 나트륨, 칼륨, 칼슘등의무기염아밀라아제 ( 특히프티알린 ), 옥시다아제등의효소가함유되어있다. 침샘에서분비되는염화나트륨은아밀라아제활성을촉진하는작용이있고, 타액의아밀라아제를활성화한다. 또타액에함유된탄산칼슘은치석 ( 齒石 ) 의원인이되는데뮤신이이것을방지하는작용도한다. 편평상피세포암항원은 1977년 Kato에의하여자궁경부편평상피암환자의조직에서추출한분자량약 45,000 의단백질이며편평상피세포암 (squamous cell carcinoma, SCC), TA-4 (tumor associated antigen) 의아분획으로편상피세포암항원이라명명하였다 (Kato와 Torigoe T, 269

1977). 정상인의혈중에도미세하게존재하지만자궁경부편평상피암, 폐편평세포암환자에게서 SCC(TA-4) 가높은농도로검출되었기때문에종양의진행정도및예후의판정과병증의관리에유용하다고보고하였다 (Kato 등, 1979; Lkeda 등, 1987). 그러나특이도가좋은종양표지자검사라도다른종양표지자검사와조합하여검사하는것이조기암의선별, 치료효과의판정, 치료경과, 재발등의검사에유용성이높고진단율을높일수있다. 본연구는 SCC검사에서정상인임에도불구하고가끔이상성적을보이는경우가있어재검을실시하다가혹시타액으로인하여검사에영향을미칠수있을것이라는의구심에서연구를시작하게되었다. 또한핵의학검사로써가장많이검사를하고있는갑상선기능검사에영향을미칠수있을지도모른다는가정아래 SCC검사와병행하여실시하였다. 0.92이며, 변이계수는 2.0-3.7% 이다. T3와 TSH는각각 3개의풀혈청을 20회씩측정한결과평균 ± 표준편차 (Mean±SD) 는 T3가 100±6.7, 200±11.8, 300±22.5이었으며 TSH는 0.10±0.03, 2.00±0.17, 10.0± 0.83이었다. III. 결과 1. 갑상선기능검사의풀혈청농도 Table 1은타액이갑상선기능검사에영향을미치는지에대하여알아보기위해자체적으로풀혈청 3개를만들고 20회씩반복측정하여구한갑상선기능검사인 T3, TSH의결과값이다. II. 재료및방법 1. 재료서울대학교병원에근무하는임상병리사와병원실습학생의타액을남, 녀로구분하여각각 20명씩채취하여방사면역측정법 (RIA) 으로편평상피세포암검사 (SCC), T3, 갑상선기능검사 (tyroid stimulating hormone, TSH), TSH 검사를시행하였다. 2. 방법타액만을분주하여 SCC, T3, TSH농도를측정하였으며점액성때문에원심분리기의회전수를달리하여원심분리 (1200, 3000rpm) 한후에생리식염수로 1배에서 10,000배까지희석하여측정하였다. 또한정상인의혈청으로풀혈청을만들어 SCC검사의농도는 1.0ng/ ml이하의것을사용하였고갑상선기능검사인 T3 농도를 100, 200, 300ng/ dl, TSH 농도를 0.10, 2.00, 10.0 uiu/ ml풀혈청을만들어서사용하였다 3. 통계처리 SCC의측정내정밀도는표준편차가 0.09-0.65이며변이계수는 1.4-3.1%, 측정간정밀도는표준편차가 0.09- Table 1. Thyroid function test(tft) of pool serum density sample number T3(ng/ dl ) TSH(uIU/ ml ) Pool serum 1 100 0.10 Pool serum 2 200 2.00 Pool serum 3 300 10.0 (each 20th iteration measurement) It: treated each roth iteration measurement 2. 남녀로구분한타액의 SCC 평균측정농도 Table 2는남녀각각 20명의타액으로 SCC를측정한평균값농도로서점액성때문에피펫팅에애로점이있었다. 1배부터 1,000배까지는 SCC 측정범위인 0에서 150ng / ml까지측정이가능하나남녀모두표준액최고농도인 150ng/ ml이상으로측정되었으며 10,000배에서측정이되었다. Table 2. The average concentration of squamous cell carcinoma (SCC) SCC (ng/ ml ) Male(Mean) Female(Mean) 1 >150 >150 10 >1,500 >1,500 100 >15,000 >15,000 1,000 >150,000 >150,000 10,000 380,000 376,000 Average which we distinguish and measure the saliva with the woman and man. SCC : Squamous cell carcinoma 270

Table 3. A 1,200 rpm measurement after centrifuge 1 >150 >150 110 203 320 0.14 2.07 10.1 10 >1,500 >1,500 112 207 314 0.08 2.11 10.1 100 >15,000 >15,000 105 212 307 0.12 1.89 9.87 1,000 79,700 78,400 103 206 322 0.11 2.04 9.79 10,000 207,000 212,000 106 211 297 0.09 2.13 10.1 Table 4. A 3,000 rpm measurement after centrifuge 1 >150 >150 95 197 325 0.05 1.83 9.65 10 >1,500 >1,500 101 205 279 0.12 2.21 10.46 100 4,770 4,650 110 187 303 0.16 2.24 10.87 1,000 19,600 19,900 92 210 282 0.07 1.89 9.69 10,000 47,000 49,000 111 214 312 0.17 2.33 10.51 남녀의측정결과에서표준편차가 ±2SD를벗어나지않는결과로서유의한차이는보이지않았으며예상대로높은농도의측정값을보였다. 3. 타액을 1,200rpm으로원심분리한후갑상선기능검사와 SCC를측정한평균값 Table 3의 SCC에서보여지는결과는 1,200rpm으로 5 분간원심분리후측정한평균값농도로서타액만을측정한값보다는많이낮았으며, 그이유로는편평상피세포가원심분리로인하여많이제거된상태라서이런낮은측정값을보이는것같았고측정결과에서표준편차가 ±2SD를벗어나지않는결과로서남녀간의유의한차이는보이지않았다. 갑상선기능검사는입에서튀는타액의양을가정하여 20μl씩타액을첨가하여 10회씩반복측정한평균값의결과로서 T3와 TSH농도에서표준편차가 ±2SD를벗어나지않으므로영향을미치지않음을알수있었다. 4. 타액을 3,000 rpm으로원심분리한후갑상선기능검사와 SCC를측정한평균값 Table 4는 3,000 rpm으로 15분간원심분리후측정한평균값농도로서 1,200 rpm으로 5분간원심분리후측정한평균값결과보다는많이낮았으며그이유는 5분간원심분리한측정값처럼편평상피세포가원심분리로인하여더욱많이제거된상태라서낮은측정값을보이며남, 녀간의유의한차이는보이지않았다. 갑상선기능검사는입에서튀는타액의양을가정하여 20μl씩타액을첨가하여 10회씩평균값의결과로서 T3와 TSH농도에서낮은값에서의변화가좀있었으나우연오차의일부라고판단되며나머지는표준편차가 ±2SD를벗어나지않으므로영향을미치지않음을알수있었다. 5. 풀혈청에타액을계단희석하여갑상선기능검사와 SCC를측정한평균값 Table 5는정상인의혈청으로제조한풀혈청 (SCC <1.0ng/ ml ) 에타액을계단희석하여측정한평균값농도로서 8배까지는높은농도를보이나 16배와 32배는원심분리후상층액의타액만을측정한것보다는많이낮은값을보이고있으며이결과를통하여실험하는본인이나주변인의타액으로인하여실험성적에영향을미칠수있다는사실을증명할수있는의미있는결과라할수 271

Table 5. Diluting serial by saliva in pool serum measurement 2 >150 >150 55 117 141 0.05 1.03 5.31 4 >150 >150 79 163 229 0.07 1.57 7.44 8 >150 >150 109 197 313 0.13 2.11 10.49 16 1,486 1,499 92 202 298 0.11 2.07 9.86 32 2,587 2,531 105 214 332 0.14 2.22 10.37 SCC: Squamous cell carcinoma, 있을것이다. 갑상선기능검사는 T3와 TSH농도에서 2배희석한값에서의수치가반으로줄어드는변화가있었으며 4배희석에서도배수에맞게줄어드는검사수치를볼수있었다. 또한 8배희석에서는거의풀혈청을측정한결과와같음을볼수있었고이러한결과를통하여갑상선기능검사에서는타액이희석배수에맞게검사성적이변하였고원래의갑상선검사측정농도에서표준편차가 ±2SD를벗어나는값이없으므로영향을미치지않는다라고할수있겠다. IV. 고찰 며갑상선기능검사에있어서도실험성적에나타난것과같이우연오차이외의의미있는결과값은없었다. 따라서타액이갑상선에미치는영향은없다고할수있겠다. 이와같은실험성적을토대로가장중요한의미를보이는것은편평상피세포가 SCC검사에막대한영향을미치고있으며아직까지실험을통해증명되지않은진단검사의학과의많은검사들이타액으로인하여검사성적에영향을받고있다는것을또다른연구를통하여밝혀내고검사자스스로오차의범위를줄이는작업을위해검체를다룰때좀더주의를기울여야하며마스크를착용하는습관을갖는등의일반적인검사실내부정도관리에노력을기울여야할것으로사료된다. 인체내에서존재하는편평상피세포의종류는단층편평상피세포와중층편평상피세포로구분되며단층편평상피세포가있는곳은장액막체강의중피세포, 맥관내피, 활액낭, 건초, 폐포, 신사구체등이며중층편평상피세포가있는곳은입, 식도, 후두일부, 성대, 자궁질부, 여성요도, 피부 ( 표피 ) 등에편평상피세포가많이존재하며타액에도많은양의편평상피세포가포함되어있어서편평상피세포암 (SCC) 검사에많은영향을미칠수있다는것을실험을통하여밝힐수있었다. 그러나남, 녀에따른측정값의유의한차이는없었으며개개인의농도차는분명하게존재하였으며그것은타액을채취할때방법의차이로서타액을모으기위한과정에서강제로타액을모으기위해입안에서혀를통해타액분비를유도한사람과시간을두고천천히채취한사람과의차이가나지않았나생각된다. 원심분리의회전수와시간에따라측정값의차이가많았는데원심분리의회전수와시간에따라편평상피세포가침전되어그수의많고적음에따라차이가많이날수밖에없으며, 정상인의혈청으로제조한풀혈청으로계단희석한측정값에서남녀간의차이는없었으 V. 결론 1. 타액의혼입을막기위해검체를분리하거나검사를실시할경우에는감기나재채기의위험이있을수있으므로검체취급자나주변검사와관계된임상병리사와보조자들은마스크를쓰고실험을하는것이실험에서오류를방지할수있고, 특히 SCC 검사담당자는실험도중에주변동료와검사시에대화하는것을삼가해야한다. 2. SCC항체구슬을손으로만져서는안되며핀셋을사용하거나직접인체에닿지않도록주의해야한다. 3. 마우스단클론성항체를사용한제제에의한진단, 또는치료를받은환자의검체는 HAMA(Human Anti- Mouse Antibodies) 가포함되어있을가능성이있으므로가급적이며시일이지나항체가사라진후에측정해야한다. 4. 타액으로인하여가장많은영향을받는 SCC검사의결과는남녀측정값의차이는없으며정상인에게나타나 272

지않는검사성적에이상수치가나올경우반드시재검을통한확인을거친후보고되어야하며갑상선기능검사의경우특이한사항이발견되지않았으므로영향을받지않는다고할수있다. 5. 진단검사의학과의많은검사에서도분명하게타액의영향을받는검사가있을것이며핵의학과와의공동연구를통하여더많은검사종목에대하여실험을통한입증을할수있었으면한다. 6. 임상검사실에서는실험의기본수칙을항상지키도록노력하고숙지하여야하며실험설명서를완전하게이해하고실험을실시하도록해야한다. 참고문헌 1. Ikeda I. Two-site radioimmunometric(sandwich) assay of SCC antigen using monoclonal antibodies. In: Kato H, Ebert W, Herberman R.B, and Johnson J. (Eds.) SCC antigen in the management of squamous cell carcinoma. p215-226, Excerpta Medica, Princeton, NJ 1987 2. Kato H, Torigoe T. Raioimmunoassay for tumor antigen of human cervical squamous cell carcinoma. Cancer 40:1621-1628, 1977 3. Kato H, Morioka H, Aramaki S, Torigoe T. Radioimmunoassay for tumor antigen of human cervicl squamous cell carcinoma. Cellular and Molecular Biology 25:51-56, 1979 4. Kato H, Myauchi F, Morioka H, Fujino T, Torigoe T. Tumor antigen of human cervical squamous cell carcinoma. Cancer 43:585-590, 1979 5. Kato H, Morioka H, Tsutsui H, Aramaki S, Torigoe T. Value of tumor antigen(ta-4) of squamous cell carcinoma in predicting the extent of cervical cancer. Cancer 50:1294-1296, 1982 6. Kato H, Morioka H, Aramaki S, Tamai K, Torigoe T. prognostic significance of the tumor antigen TA-4 in squamous cell carcinoma of the uterine cervix. Am J Obstet Gyneco 145:350-354, 1983 7. Kato H, Tamai K, Morioka H, Nagai M, Nagaya T, Torigoe T. Tumor antigen TA-4 in the detection of recurrence in cervical squamous cell carcinoma. Cancer 54:1544-1646, 1984 8. 高坂唯子, 金尾啓右, 久住佳三. 監修 : 核医學檢査技術. 제5판 p65-85, 일본핵의학기술학회편. 1995 9. 고창순. 핵의학제1판. p789-823, 고려의학, 서울, 1992 10. 고창순. 핵의학. 제2판. p803-839, 고려의학, 서울, 1997 11. 서일택. 핵의학검사기술학 ( 개정판 ) 제1판. p153-188, 고려의학, 서울, 1993 12. 경광현. 핵의학검사기술학. 제5판. p297-318, 대학서림, 서울, 1989 13. 서일택. 방사면역측정법제1판. p68-128, 고려의학, 서울, 1992 14. 서일택. RIA에의한타액의코티솔정량법. 대한핵의학학회지. 19:198, 1987 273