구강미생물 12 주차 김희은교수 가천대학교보건과학대학치위생학과
Key point
An image from 1300s (A.D.) England depicting a dentist extracting a tooth with forceps
2000 년도개정판 영, 유아및미취학아동을위한식생활지침 1. 우유를매일마시자. 2. 육류, 어패류, 가금류등단백질과철분이풍부한식품을많이섭취하자. 3. 식기사용, 식사태도, 식사예절에관한교육을통해올바른식생활을할수있도록하자. 4. 정상체중을유지하도록하자. 5. 치아건강을유지하자. 6. 다양한식품을골고루먹도록하자. 7. 식사는즐겁게하도록하자. 8. 영, 유아뿐만아니라부모와교사를대상으로영양교육을실시하자.
설탕섭취와치아우식증발생 설탕섭취와치아우식증발생에대한역학적연구 1. 세계적으로각국의설탕소비량과치아우식증발생에대한연구를보 면설탕소비량과우식증발생은비례한다. 2. 2차세계대전중설탕소비가제한되었을때우식증발생이낮았다. 3. Hopewood house study: 아동의식사에서설탕및정제된탄수화물 은제외시켰을때우식발생이적었다는보고 4. 선천적으로설탕섭취를못하는질환인 Hereditary Fructose Intolerance인환자에서우식발생이낮다. 5. 설탕소비가제한되는당뇨병환자에서우식발생률이낮다.
대조군 ( 호주일반학교 )
치아우식증의종류 ; 이환부위
치아우식증의발생기전
( 치아 ) ( 음식 - 자당 )
치아내불소농도분포 11
설탕섭취와치아우식증발생의실험적연구들 1 스웨덴의 Vipeholm 연구 (1946-1951) 436명의정신질환자를대상으로 9개그룹으로나눈후다양한양과점조도의간식을각그룹에제공한후 5년간우식발생양상을관찰 -> 설탕의섭취량보다는섭취빈도와섭취성상이더중요
Toffee
Vipeholm 연구의결론 1. 구강정체성이높은끈끈한발효성당질식품을간식으로섭취할수록치아우식증발병률이높다. 2. 3끼식사에포함된설탕만으로는치아우식증이발생하지않는다. 3. 식사중수용액상태로설탕을섭취하면치아우식증이발생되지않는다. 4. 가능한간식을피하고그횟수를제한해라.
치태의화학조성물 수분 70 ~ 80%, 고형성분 20 ~ 30% 고형성분의주성분은단백질로치태건조중량의 30 ~ 50% 탄수화물은건조중량의 13 ~ 17% 지질 10 ~ 14% 탄수화물 (1) Glucose 가주성분 (2) NO sialic acid and fucose (3) polysaccharide extracellular polysaccharide vs intracellular polysaccharide
세포외다당류 (ECP, extra-cellular polysaccharide) 세균이음식물과타액내당분을분해하고결합하는과정에서만든다당류 A. 글루칸 (glucan) : 점착성 세균이획득피막에고정되도록함난용성, 끈적끈적한밀집체를형성하여세균막을치밀하게하고세균이치면에서잘떨어져나가지않도록하는역할 1 덱스트란 (dextran), 2 뮤탄 (mutan) B. 프럭탄 (fructan, 레반 levan) ; 수용성으로서세균의에너지원 # 세포내다당류 (ICP, intra-cellular polysaccharide) ; 세균의세포벽속에들어있는다당류, 세균의에너지원
Chair-side culture methods for SM 원리 제품» 타액표본을이용하여 modified mitis salivarius agar 에서자란 mutans streptococci 집락을추정하는것» Cariescreen (John O. Butler Co., Chicago, IL, USA)» Mucount (Showa Yakuhin Kako Co., Tokyo, Japan)» Dentocult-SM (Orion Diagnostica, Helsinki, Finland) 19
세균인자 _ Streptococci Mutans 검사 Dentocult -SM 사용 Jensen & Bratthall(1989) 에의해서타액채취용개발됨 치태채취용 MS 균이 20% Sucrose 를배합한 MSB 액상배지가담긴시험 관벽에달라붙어자라는능력을이용함 시료채취 15 분전에 Bacitracin 정제넣기 20
세균인자 _ Streptococci Mutans 검사 1 분간파라핀왁스를씹은뒤플라스틱띠 (screening strip) 를혀위에서 2-3 번회전시켜타액을묻힘 21
세균인자 _ Streptococci Mutans 검사 그후입술을가볍게다물고플라스틱띠를입밖으로뽑아내서적정한양의 타액만으로띠가덮이게함 치내샘플을채취하여플라스틱띠위에묻힘» 치태채취부위 #16 협측, #22협측, #36 설측, #44 설측 22
세균인자 _ Streptococci Mutans 검사 2 개의띠를겹쳐서즉시유리용기에넣고뚜껑을닫아액상배지에띠가잠기도록 하고 37 배양기에서 48 시간동안배양» labeling : 번호, 이름, 날짜, 시간 23
세균인자 _ Streptococci Mutans 검사 판정» MS 집락은띠위에작고푸른점모양으로나타나는데제조사에서제공하는사진과비교하여집락의밀도를 0-3 점으로표시 24
세균인자 _ Lactobacilli 검사 Dentocult-LB 사용» 선택적한천배지를바른플라스틱슬라이드막대사용 방법» 5 분간파라핀왁스를씹게한뒤타액을모음 25
세균인자 _ Lactobacilli 검사 아가 (agar) 가닿지않게조심해서뚜껑을연뒤모은침을아가양쪽에골고루 부어넣음 슬라이드에서과량의타액은제거한뒤튜브에넣고뚜껑을느슨하게잠금 26
세균인자 _ Lactobacilli 검사 4일간배양후슬라이드를뺀후에제공된모델차트와 colony의밀도를비교 판정» LB 집락은슬라이드위에점모양으로나타나는데제조사에서제공하는사진과비교하여집락의밀도를 10 3 ~ 10 6 으로표시» 10 4 CFU/ml 이상이면고도위험, 10 3 CFU/ml 이하면경도위험 10 3 10 4 10 5 10 6 27
Acidogenicity assessment Cariview The Cariview contains 20% sucrose and the ph indicators bromcresol - green & purple & Naphthyl red. The ph of the solution is ~7.0, which possible the growth of most organisms. Plaque samples are inoculated into the tubes and allowed to incubate. http://drcariview.com/
Cariview result < Cariview Color Reference > 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 낮음 우식활성 높음
Extended Caries Ecological Hypothesis J Dent Res 90(3):294-303, 2011
동적안정상태 (dynamic stability stage) 발효성탄수화물을섭취하면구강내미생물은발효성대사과정을거쳐구강내 ph를떨어뜨린다. 그러나탄수화물의섭취횟수가빈번하지않고보통의수준이라면치면세균막내의항상성은파괴되지않는다. 따라서구강내치면에서무기질의동적평형상태는안정적으로유지될수있다. 이때, 치면세균막내의미생물은주로 non-ms나 Actinomyces가우세하다
산생성상태 (acidogenic stage) 구강내에당이더자주공급되거나타액분비가원활하지않으면, non-ms 나 Actinomyces 들의산생성능이증가하면서치면세균막내의 ph 는점점낮아진다. 이러한환경적변화는 non-ms 균의산생성능이나내산성을좀더강화시킨다. 특히, S. sanguinis, S. oralis, S. gordonii, S. mitis 가산성환경에노출되면그들의산생성능이더욱증가된다고보고되었다. 따라서이러한환경적변화에적응하기위해이들세균은자신들의표현형을변화시키게된다. 그런데, 이러한환경적변화에자주노출되면 non-ms 균주들중에서특히산성환경에잘견딜수있는소수의균종만이선택적으로살아남게된다. 새로이우위를점한균종들은그들이생존하기에유리하도록바이오필름내환경을변화시키게되고, 이때 MS 와 LB 가출현하게된다. 치면세균막의 ph 가 5.0 이하가되면 non-ms 나 Actinomyces 는감소하면서 MS 와 LB 는증가하기시작하고, ph 가 4.5 이하로떨어지면치면세균막내에서 MS 와 LB 가훨씬더우위를점하게된다.
내산성상태 (Aciduric stage) 구강내환경이점점산성화되면낮은 ph 상태에서도견딜수있는극소수의 non-ms 나 Actinomyces 가산생성능이나내산성을증가시키지만, 결국은이들의성장은지연되기시작하고이러한산성환경에적응하여생존할수있는세균들로서서히구강미생물들의구성이교체되기시작한다. 이때, 이러한환경변화에가장경쟁력있는 MS 와 LB 가선택되는것이다. 성숙된치면세균막의평균 ph 는보통 4.0 이하이다. 이상태가되면 non- MS 균이나 Actinomyces 는생존능력을상실하고최종적으로 MS 와 LB 만이살아남게된다. 결국치면세균막내의미생물성장능력을좌우하는것은 ph 이다. 이러한일련의미생물구성의변화에의해치면에서는탈회와재광화간의균형이깨지면서무기질이소실되기시작하고우식병소가출현하게된다.